Ãðóïïà Í09 Ì Å Æ Ã Î Ñ Ó Ä À Ð Ñ Ò Â Å Í Í Û É Ñ Ò À Í Ä À Ð Ò ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅ Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ Bacillus cereus Food products. Method for determination of Bacillus cereus ÃÎÑÒ 10444.888 ÎÊÑÒÓ 9109 Äàòà ââåäåíèÿ 01.01.90 Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ðàñïðîñòðàíÿåòñÿ íà ïèùåâûå ïðîäóêòû è óñòàíàâëèâàåò ìåòîä îïðåäåëåíèÿ Bacillus cereus, â òîì ÷èñëå áëèçêèõ ê íåìó âèäîâ Â. anthracis, B. thuringiensis, B. cereus var. mycoides. Ìåòîä îñíîâàí íà âûäåëåíèè Â. cereus èç êîëîíèé, ïîëó÷åííûõ ïðè ïîâåðõíîñòíîì ïîñåâå ïðîäóêòà, åãî ðàçâåäåíèÿ èëè êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè íà ñåëåêòèâíûå ñðåäû. Ïðèíàäëåæíîñòü âûäåëåííûõ êîëîíèé ê Â. cereus îïðåäåëÿþò ïî ìîðôîëîãè÷åñêèì è áèîõèìè÷åñêèì ñâîéñòâàì.  çàâèñèìîñòè îò òðåáîâàíèé íîðìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïîäñ÷èòûâàþò êîëè÷åñòâî èëè ó÷èòûâàþò ïðèñóòñòâèå (îòñóòñòâèå) Â. cereus â èññëåäóåìîì ïðîäóêòå. Ìåòîä ïðåäíàçíà÷åí äëÿ: óñòàíîâëåíèÿ ñîîòâåòñòâèÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ ïîêàçàòåëåé êà÷åñòâà ïèùåâîãî ïðîäóêòà òðåáîâàíèÿì íîðìàòèâíîãî äîêóìåíòà; èññëåäîâàíèÿ ïðîäóêòà ïî ñàíèòàðíî-ýïèäåìèîëîãè÷åñêèì ïîêàçàíèÿì; àíàëèçà ìèêðîôëîðû ïîñåâîâ (êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè), â êîòîðûõ îáíàðóæåíû ìåçîôèëüíûå ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûå ìèêðîîðãàíèçìû, ïðè íåîáõîäèìîñòè ïîäòâåðæäåíèÿ ïðèñóòñòâèÿ â ïîñåâàõ Â. cereus. 1. ÎÒÁÎÐ È ÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ ÏÐÎÁ 1.1. Îòáîð ïðîá ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ ïî ÃÎÑÒ 26668, ÃÎÑÒ 26809. 1.2. Ïîäãîòîâêà ïðîá ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ ê àíàëèçó ïî ÃÎÑÒ 26669. Êîíñåðâû ïðîâåðÿþò íà ãåðìåòè÷íîñòü ïî ÃÎÑÒ 8756.18. Ïîëíûå êîíñåðâû, íîðìàëüíûå ïî âíåøíåìó âèäó, ïåðåä èñïûòàíèåì òåðìîñòàòèðóþò ïðè 3037 °Ñ â òàðå âìåñòèìîñòüþ äî 1 äì! âêëþ÷èòåëüíî íå ìåíåå 5 ñóò, â òàðå âìåñòèìîñòüþ ñâûøå 1 äì! íå ìåíåå 7 ñóò. Ïèùåâûå ïðîäóêòû, â êîòîðûõ íîðìèðóåòñÿ äîïóñòèìîå êîëè÷åñòâî Â. cereus, òåðìîñòàòèðîâàíèþ íå ïîäëåæàò. Ìàññà (îáúåì) íàâåñêè, ïðåäíàçíà÷åííîé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ãîìîãåíàòà ïðîäóêòà èëè èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ, íå ìåíåå (10,0±0,1) ã (ñì!). Èñõîäíûå ðàçâåäåíèÿ ïðîäóêòîâ, ñ ìàññîâîé äîëåé NaCl áîëåå 5 %, ãîòîâÿò ñ èñïîëüçîâàíèåì ïåïòîííîé âîäû; èñõîäíûå ðàçâåäåíèÿ ìÿñíûõ, ìîëî÷íûõ ïðîäóêòîâ è ìîëîêà ãîòîâÿò ñ èñïîëüçîâàíèåì ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ïîñëåäóþùèõ äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé èñïîëüçóþò ïåïòîííî-ñîëåâîé ðàñòâîð. Ïåïòîííóþ âîäó è ïåïòîííî-ñîëåâîé ðàñòâîð ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 26669, ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð ïî ÃÎÑÒ 10444.1. Èç ïðîáû ïèùåâîãî ïðîäóêòà, â êîòîðîì íîðìèðóåòñÿ êîëè÷åñòâî Â. cereus, èëè åãî èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ ãîòîâÿò ðÿä ðàçâåäåíèé â ñîîòâåòñòâèè ñ äîïóñòèìûì êîëè÷åñòâîì Â. cereus, óêàçàííîì â íîðìàòèâíî-òåõíè÷åñêîé äîêóìåíòàöèè íà êîíêðåòíûé âèä ïèùåâîãî ïðîäóêòà. Êóëüòóðàëüíóþ æèäêîñòü ðàçâîäÿò òàê, ÷òîáû ïîëó÷èòü ïðè âûñåâå ðàçäåëüíûå êîëîíèè. 0 0 5-1719 1 ÃÎÑÒ 10444.888 2. ÀÏÏÀÐÀÒÓÐÀ, ÌÀÒÅÐÈÀËÛ È ÐÅÀÊÒÈÂÛ 2.1. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ ïðèìåíÿþò àïïàðàòóðó, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû ïî ÃÎÑÒ 10444.1, à òàêæå àïïàðàòóðó, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû, óêàçàííûå íèæå: âåñû ëàáîðàòîðíûå îáùåãî íàçíà÷åíèÿ ñ ìåòðîëîãè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè ïî ÃÎÑÒ 24104*, ñ íàèáîëüøèì ïðåäåëîì âçâåøèâàíèÿ äî 200 ã è ïîâåðî÷íîé öåíîé äåëåíèÿ íå áîëåå 2 ìã (äëÿ âçâåøèâàíèÿ ðåàêòèâîâ); âåñû ëàáîðàòîðíûå îáùåãî íàçíà÷åíèÿ ñ ìåòðîëîãè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè ïî ÃÎÑÒ 24104*, ñ íàèáîëüøèì ïðåäåëîì âçâåøèâàíèÿ äî 200 ã è ïîâåðî÷íîé öåíîé äåëåíèÿ íå áîëåå 20 ìã (äëÿ âçâåøèâàíèÿ ïðîäóêòà); ìèêðîñêîï ñâåòîâîé áèîëîãè÷åñêèé ñ ïðèñïîñîáëåíèåì äëÿ ôàçîâîêîíòðàñòíîãî ìèêðîñêîïèðîâàíèÿ; ñòåêëà ïðåäìåòíûå ïî ÃÎÑÒ 9284; ñòåêëà ïîêðîâíûå ïî ÃÎÑÒ 6672; ïåòëþ áàêòåðèîëîãè÷åñêóþ; òåðìîñòàò ñ äèàïàçîíîì ðàáî÷èõ òåìïåðàòóð îò 28 äî 55 °Ñ, ïîçâîëÿþùèé ïîääåðæèâàòü çàäàííóþ òåìïåðàòóðó ñ ïîãðåøíîñòüþ ±1 °Ñ; øïàòåëè ñòåêëÿííûå; êàëèÿ ãèäðîîêèñü ïî ÃÎÑÒ 24363; êðåàòèí; ïîëèìèêñèí  ñóëüôàò âî ôëàêîíàõ ïî 25 ìã (250000 ÅÄ) è ïî 50 ìã (500000 ÅÄ); ïîëèìèêñèí Ì ñóëüôàò âî ôëàêîíàõ ïî 500000 ÅÄ; êèñëîòó 5-àìèíî-2-íàôòàëåí ñóëüôîíîâóþ; êèñëîòó ñóëüôàíèëîâóþ; ôåíîëîâûé êðàñíûé, èíäèêàòîð; öèíê ïîðîøîê ïî ÃÎÑÒ 3640. 3. ÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ Ê ÈÑÏÛÒÀÍÈÞ 3.1. Ïðèãîòîâëåíèå ðàñòâîðîâ 3.1.1. Ðàñòâîð ìàññîâîé êîíöåíòðàöèåé ãèäðîîêèñè êàëèÿ 400 ã/äì!: 40 ã ãèäðîîêèñè êàëèÿ ïåðåíîñÿò, ñìûâàÿ äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé, â ìåðíóþ ïîñóäó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì!, äîâîäÿò îáúåì äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé äî ìåòêè. Ïðèìåíÿþò äëÿ ïîñòàíîâêè ðåàêöèè íà îáðàçîâàíèå àöåòèëìåòèëêàðáèíîëà. 3.1.2. Ðàñòâîð ìàññîâîé êîíöåíòðàöèè ãèäðîîêèñè íàòðèÿ 4 ã/äì!: 0,4 ã ãèäðîîêèñè íàòðèÿ ïåðåíîñÿò, ñìûâàÿ äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé, â ìåðíóþ ïîñóäó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì!, äîâîäÿò îáúåì äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé äî ìåòêè. Ïðèìåíÿþò äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ðàñòâîðà èíäèêàòîðà ôåíîëîâîãî êðàñíîãî. 3.1.3. Ðàñòâîð ïîëèìèêñèí  ñóëüôàòà èëè ïîëèìèêñèí Ì ñóëüôàòà: íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì âî ôëàêîí ñî ñòåðèëüíûì ïîëèìèêñèí ñóëüôàòîì 250000 ÅÄ (äëÿ èíúåêöèé) âíåñòè 2,5 ñì! ñòåðèëüíîé äèñòèëëèðîâàííîé âîäû (íà 500000 ÅÄ âíîñÿò 5 ñì! âîäû). Ïðèìåíÿþò äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ñåëåêòèâíûõ ñðåä. 3.1.4. Ðàñòâîð 5-àìèíî-2-íàôòàëåí ñóëüôîíîâîé êèñëîòû: 0,1 ã 5-àìèíî-2-íàôòàëåí ñóëüôîíîâîé êèñëîòû ïåðåíîñÿò, ñìûâàÿ ðàñòâîðîì óêñóñíîé êèñëîòû ñ îáúåìíîé äîëåé óêñóñíîé êèñëîòû 15 %, â ìåðíóþ ïîñóäó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì! è äîâîäÿò ýòîé æå êèñëîòîé îáúåì äî ìåòêè. Ðàñòâîð ôèëüòðóþò ÷åðåç áóìàæíûé ôèëüòð è õðàíÿò ïðè òåìïåðàòóðå (4±2) °Ñ â õîðîøî çàêóïîðåííûõ ñîñóäàõ èç òåìíîãî ñòåêëà íå áîëåå 3 ìåñ. Ïðèìåíÿþò äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èíäèêàòîðà ïðè îïðåäåëåíèè íèòðàòðåäóöèðóþùèõ ñâîéñòâ. 3.1.5. Ðàñòâîð ìàññîâîé êîíöåíòðàöèè ñóëüôàíèëîâîé êèñëîòû 4 ã/äì!: 0,4 ã ñóëüôàíèëîâîé êèñëîòû ïåðåíîñÿò, ñìûâàÿ ðàñòâîðîì óêñóñíîé êèñëîòû ñ îáúåìíîé äîëåé óêñóñíîé êèñëîòû 15 %, â ìåðíóþ ïîñóäó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì!. Îáúåì äîâîäÿò äî ìåòêè òåì æå ðàñòâîðîì óêñóñíîé êèñëîòû. Ðàñòâîð ôèëüòðóþò ÷åðåç áóìàæíûé ôèëüòð è õðàíÿò ïðè òåìïåðàòóðå (4±2) °Ñ â õîðîøî çàêóïîðåííûõ ñîñóäàõ èç òåìíîãî ñòåêëà íå áîëåå 2 ìåñ. Ïðèìåíÿþò äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èíäèêàòîðà ïðè îïðåäåëåíèè íèòðàòðåäóöèðóþùèõ ñâîéñòâ. * Ñ 01.07.2002 ã. ââîäèòñÿ â äåéñòâèå ÃÎÑÒ 241042001. 2 66 ÃÎÑÒ 10444.888 3.1.6. Ðàñòâîð ìàññîâîé êîíöåíòðàöèè ñóëüôàíèëîâîé êèñëîòû 8 ã/äì!: 0,8 ã ñóëüôàíèëîâîé êèñëîòû ïåðåíîñÿò, ñìûâàÿ ðàñòâîðîì óêñóñíîé êèñëîòû ñ îáúåìíîé äîëåé óêñóñíîé êèñëîòû 30 %, â ìåðíóþ ïîñóäó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì!. Îáúåì äîâîäÿò äî ìåòêè òåì æå ðàñòâîðîì óêñóñíîé êèñëîòû. Ðàñòâîð ôèëüòðóþò ÷åðåç áóìàæíûé ôèëüòð è õðàíÿò ïðè òåìïåðàòóðå (4±2) °Ñ â õîðîøî çàêóïîðåííûõ ñîñóäàõ èç òåìíîãî ñòåêëà íå áîëåå 2 ìåñ. Ïðèìåíÿþò â êà÷åñòâå èíäèêàòîðà ïðè îïðåäåëåíèè íèòðàòðåäóöèðóþùèõ ñâîéñòâ. 3.1.7. Ðàñòâîð ìàññîâîé êîíöåíòðàöèè 1-íàôòîëà 5 ã/äì!: 0,5 ã 1-íàôòîëà ïåðåíîñÿò, ñìûâàÿ ðàñòâîðîì óêñóñíîé êèñëîòû ñ îáúåìíîé äîëåé óêñóñíîé êèñëîòû 30 %, â ìåðíóþ ïîñóäó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì!. Îáúåì äîâîäÿò äî ìåòêè òåì æå ðàñòâîðîì óêñóñíîé êèñëîòû. Ïðèìåíÿþò â êà÷åñòâå èíäèêàòîðà ïðè îïðåäåëåíèè íèòðàòðåäóöèðóþùèõ ñâîéñòâ. 3.1.8. Ðàñòâîðû ñ îáúåìíîé äîëåé óêñóñíîé êèñëîòû 15 è 30 %: 15 èëè 30 ñì! ëåäÿíîé óêñóñíîé êèñëîòû âíîñÿò â ìåðíóþ ïîñóäó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì!. Îáúåì äîâîäÿò äî ìåòêè äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé. Ïðèìåíÿþò äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èíäèêàòîðà ïðè îïðåäåëåíèè íèòðàòðåäóöèðóþùèõ ñâîéñòâ. 3.1.9. Ðàñòâîð èíäèêàòîðà ôåíîëîâîãî êðàñíîãî: 1,25 ã ôåíîëîâîãî êðàñíîãî ðàñòèðàþò â ñòóïêå ñ 40 ñì! ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè íàòðèÿ, êàê óêàçàíî â ï. 3.1.2, äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ. Äîáàâëÿþò 460 ñì! ñòåðèëüíîé äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Ðàñòâîð õðàíÿò â ñîñóäå èç òåìíîãî ñòåêëà ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå íå áîëåå 3 ìåñ. Ïðèìåíÿþò äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ àãàðà æåëòî÷íîãî ñ ïîëèìèêñèí  èëè ïîëèìèêñèí Ì ñóëüôàòîì. 3.1.10. Ýìóëüñèþ ÿè÷íî-æåëòî÷íóþ ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.7. 3.2. Ïðèãîòîâëåíèå ïèòàòåëüíûõ ñðåä 3.2.1. Ñåëåêòèâíûé àãàð äëÿ âûäåëåíèÿ è èäåíòèôèêàöèè, âûïóñêàåìûé Äàãåñòàíñêèì ÍÈÈ ïèòàòåëüíûõ ñðåä. Ñîñòàâ ñðåäû íà 1 äì!, ã: ôåðìåíòàòèâíûé ãèäðîëèçàò êîðìîâûõ äðîææåé L-α-ëåöèòèí èëè ÿè÷íîå ìàñëî íàòðèé õëîðèñòûé íàòðèé ëèìîííîêèñëûé òðåõçàìåùåííûé ëèòèé ñåðíîêèñëûé ìàííèò áðîìòèìîëîâûé ñèíèé àãàð ìèêðîáèîëîãè÷åñêèé 12,0 1,0 3,0 5,0 5,0 5,0 0,04 10,0. 4,0 ã ñóõîãî ïîðîøêà ãîòîâîé ñðåäû ðàçìåøàòü â êîëáå ñî 100 ñì! äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Êîëáó çàêðûòü ðûõëîé âàòíîé ïðîáêîé, íàãðåòü íà ñëàáîì îãíå äî êèïåíèÿ è êèïÿòèòü 23 ìèí. Ðàñòâîð ïðîôèëüòðîâàòü ÷åðåç âàòíûé ôèëüòð, ôèëüòðàò ðàçëèòü ïî êîëáàì. Ñòåðèëèçîâàòü 20 ìèí ïðè òåìïåðàòóðå (121±1) °Ñ, ðÍ ñðåäû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè 7,4±0,1. Ïðèìåíÿþò â êà÷åñòâå ñåëåêòèâíîé ñðåäû. 3.2.2. Ëåöèòèí-àãàð äëÿ âûäåëåíèÿ B. cereus èç êîíñåðâèðîâàííûõ ïðîäóêòîâ, âûïóñêàåìûé Äàãåñòàíñêèì ÍÈÈ ïèòàòåëüíûõ ñðåä. Ñîñòàâ ñðåäû íà 1 äì!, ã: ôåðìåíòàòèâíûé ãèäðîëèçàò êîðìîâûõ äðîææåé L-α-ëåöèòèí èëè ÿè÷íîå ìàñëî íàòðèé õëîðèñòûé áðîìòèìîëîâûé ñèíèé àãàð ìèêðîáèîëîãè÷åñêèé 15,0 1,0 3,0 0,04 10,0. 2,8 ã ñóõîãî ïîðîøêà ãîòîâîé ñðåäû ðàçìåøàòü â êîëáå â 100 ñì! äèñòèëëèðîâàííîé âîäû; êîëáó çàêðûòü ðûõëîé âàòíîé ïðîáêîé, íàãðåòü íà ñëàáîì îãíå äî êèïåíèÿ è êèïÿòèòü 23 ìèí. Ïðîôèëüòðîâàòü ÷åðåç âàòíûé ôèëüòð. Ôèëüòðàò ðàçëèòü ïî êîëáàì è ñòåðèëèçîâàòü 20 ìèí ïðè òåìïåðàòóðå (121±1) °Ñ. Îõëàæäåííóþ äî 4550 °Ñ ñðåäó ðàçëèòü â ÷àøêè Ïåòðè. Ïîñëå çàñòûâàíèÿ àãàðà ÷àøêè ïîäñóøèòü â òåðìîñòàòå 4060 ìèí. Öâåò ãîòîâîé ñðåäû ñàëàòíûé, ðÍ ñðåäû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè 7,4±0,2. Ïðèìåíÿþò â êà÷åñòâå ñåëåêòèâíîé ñðåäû äëÿ âûäåëåíèÿ B. cereus èç êîíñåðâèðîâàííûõ ïðîäóêòîâ. 5-1* 67 3 ÃÎÑÒ 10444.888 3.2.3. Àãàð æåëòî÷íûé ñ õëîðèñòûì íàòðèåì, ïîëèìèêñèí  èëè ïîëèìèêñèí Ì ñóëüôàòîì è 2, 3, 5-òðèôåíèëòåòðàçîëèóì õëîðèäîì. Ê 1 äì! ìÿñî-ïåïòîííîãî áóëüîíà ïî ÃÎÑÒ 10444.1 äîáàâëÿþò 45,0 ã õëîðèñòîãî íàòðèÿ è 15,0 ã àãàðà. Ñìåñü êèïÿòÿò íà ñëàáîì îãíå ïðè ïîñòîÿííîì ïîìåøèâàíèè äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ àãàðà. Ñðåäó ñòåðèëèçóþò â òå÷åíèå 15 ìèí ïðè òåìïåðàòóðå (121±1) °Ñ. ðÍ ñðåäû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè 7,2±0,1. Õðàíÿò ïðè òåìïåðàòóðå (4±1) °Ñ íå áîëåå 1 ìåñ. Ïåðåä óïîòðåáëåíèåì ê 1 äì! ðàñïëàâëåííîé è îõëàæäåííîé äî 4555 °Ñ ñðåäû äîáàâëÿþò 5 ñì! ïðèãîòîâëåííîãî íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä óïîòðåáëåíèåì 1 %-íîãî âîäíîãî ðàñòâîðà 2, 3, 5-òðèôåíèëòåòðàçîëèóì õëîðèäà, 1 ñì! ðàñòâîðà ïîëèìèêñèíà ñóëüôàòà è 100 ñì! æåëòî÷íîé ýìóëüñèè, õîðîøî ïåðåìåøèâàþò è ðàçëèâàþò â ÷àøêè Ïåòðè. Ïðèìåíÿþò â êà÷åñòâå ñåëåêòèâíîé ñðåäû. 3.2.4. Àãàð æåëòî÷íûé ñ ìàííèòîì, ïîëèìèêñèí  èëè ïîëèìèêñèí Ì ñóëüôàòîì è ôåíîëîâûì êðàñíûì. Ê 1 äì! ìÿñî-ïåïòîííîãî áóëüîíà, ïðèãîòîâëåííîãî ïî ÃÎÑÒ 10444.1, äîáàâëÿþò 5,0 ã õëîðèñòîãî íàòðèÿ, 10,0 ã ìàííèòà è 15,0 ã àãàðà. Ñìåñü êèïÿòÿò íà ñëàáîì îãíå ïðè ïîñòîÿííîì ïîìåøèâàíèè äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ àãàðà. Ñðåäó ñòåðèëèçóþò â òå÷åíèå 15 ìèí ïðè òåìïåðàòóðå (121±1) °Ñ. ðÍ ñðåäû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè 7,1±0,1. Õðàíÿò ïðè òåìïåðàòóðå (4±1) °Ñ íå áîëåå 1 ìåñ. Ïåðåä óïîòðåáëåíèåì ê 1 äì! ðàñïëàâëåííîé è îõëàæäåííîé äî 4555 °Ñ ñðåäû äîáàâëÿþò 1 ñì! ðàñòâîðà ïîëèìèêñèí  èëè ïîëèìèêñèí Ì ñóëüôàòà, 10 ñì! ðàñòâîðà èíäèêàòîðà ôåíîëîâîãî êðàñíîãî è 100 ñì! æåëòî÷íîé ýìóëüñèè, õîðîøî ïåðåìåøèâàþò è ðàçëèâàþò â ÷àøêè Ïåòðè. Ïðèìåíÿþò â êà÷åñòâå ñåëåêòèâíîé ñðåäû. 3.2.5. Àãàð ìÿñî-ïåïòîííûé ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1. Ïðèìåíÿþò äëÿ ìîðôîëîãè÷åñêîé è áèîõèìè÷åñêîé èäåíòèôèêàöèè. 3.2.6. Ñðåäà ñ èíäèêàòîðîì áðîìêðåçîëîâûì ïóðïóðîâûì è ãëþêîçîé, âûïóñêàåìàÿ Äàãåñòàíñêèì ÍÈÈ ïèòàòåëüíûõ ñðåä. Ñîñòàâ ñðåäû íà 1 äì!, ã: ñóõîé ïèòàòåëüíûé àãàð ãëþêîçà íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåùåííûé íàòðèé õëîðèñòûé áðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé 7,3 3,65 0,38 3,65 0,02. 15,0 ã ñóõîãî ïîðîøêà ãîòîâîé ñðåäû ðàñòâîðÿþò â êîëáå â 1 äì! õîëîäíîé äèñòèëëèðîâàííîé âîäû, êèïÿòÿò 12 ìèí, íå äîïóñêàÿ ïðèãîðàíèÿ, ôèëüòðóþò, ðàçëèâàþò â ïðîáèðêè ñòîëáèêîì 1012 ñì. Ñòåðèëèçóþò 20 ìèí ïðè òåìïåðàòóðå 110 °Ñ. ðÍ ñðåäû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè 7,0±0,2, öâåò ôèîëåòîâûé. Ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ àíàýðîáíîé ôåðìåíòàöèè ãëþêîçû. 3.2.7. Ñðåäà ñ èíäèêàòîðîì áðîìêðåçîëîâûì ïóðïóðîâûì è ìàííèòîì, âûïóñêàåìàÿ Äàãåñòàíñêèì ÍÈÈ ïèòàòåëüíûõ ñðåä. Ñîñòàâ ñðåäû íà 1 äì!, ã: ñóõîé ïèòàòåëüíûé àãàð ìàííèò íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåùåííûé íàòðèé õëîðèñòûé áðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé 7,3 3,65 0,38 3,65 0,02. 15,0 ã ñóõîãî ïîðîøêà ãîòîâîé ñðåäû ðàñòâîðÿþò â êîëáå â 1 äì! õîëîäíîé äèñòèëëèðîâàííîé âîäû, êèïÿòÿò 12 ìèí, íå äîïóñêàÿ ïðèãîðàíèÿ, ôèëüòðóþò, ðàçëèâàþò â ïðîáèðêè ïî 56 ñì!. Ñòåðèëèçóþò 20 ìèí ïðè òåìïåðàòóðå 110 °Ñ. ðÍ ñðåäû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè 7,0±0,2, öâåò ôèîëåòîâûé. Ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ áèîõèìè÷åñêèõ ñâîéñòâ. 3.2.8. Ïåïòîííóþ ñðåäó ñ ãëþêîçîé ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1. Ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñïîñîáíîñòè B. cereus îáðàçîâûâàòü àöåòèëìåòèëêàðáèíîë. 3.2.9. Íèòðàòíàÿ ñðåäà Ê 1 äì! ìÿñî-ïåïòîííîãî áóëüîíà ïî ÃÎÑÒ 10444.1, äîáàâëÿþò 1,0 ã êàëèÿ àçîòíîêèñëîãî. Ñðåäó ðàçëèâàþò ïî 5 ñì! â ïðîáèðêè è ñòåðèëèçóþò ïðè òåìïåðàòóðå (121±1) °Ñ â òå÷åíèå 15 ìèí. Ñðåäó õðàíÿò ïðè òåìïåðàòóðå 05 °Ñ íå áîëåå 1 ìåñ. Ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ íèòðàòðåäóöèðóþùèõ ñâîéñòâ. 4 68 ÃÎÑÒ 10444.888 4. ÏÐÎÂÅÄÅÍÈÅ ÈÑÏÛÒÀÍÈß 4.1. Âûäåëåíèå õàðàêòåðíûõ êîëîíèé 4.1.1. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ îòáèðàþò îáúåì 0,10,2 ñì! ïîäãîòîâëåííîé ïðîáû ïðîäóêòà, åãî ðàçâåäåíèÿ èëè ðàçâåäåíèÿ êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè. Äîïóñêàåòñÿ äëÿ ïîëó÷åíèÿ ðàçäåëüíûõ êîëîíèé ïðîâîäèòü ïîñåâ êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè ïåòëåé íà ïîâåðõíîñòü ïèòàòåëüíîé ñðåäû. 4.1.2. Ïîäãîòîâëåííóþ ïðîáó ïðîäóêòà, åãî ðàçâåäåíèÿ èëè ðàçâåäåíèÿ êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè âûñåâàþò ïîâåðõíîñòíûì ìåòîäîì ïî ÃÎÑÒ 26670 ïàðàëëåëüíî â äâå ÷àøêè Ïåòðè ñ ïðåäâàðèòåëüíî ïîäñóøåííîé ñåëåêòèâíîé ñðåäîé, óêàçàííîé â ïï. 3.2.13.2.3 èëè 3.2.4. 4.1.3. Ïîñåâû íà ÷àøêàõ Ïåòðè òåðìîñòàòèðóþò ïðè (30±1) °Ñ â òå÷åíèå 2448 ÷. ×åðåç 24 ÷ ïîñåâû ïðîñìàòðèâàþò è âûáèðàþò ÷àøêè Ïåòðè, íà êîòîðûõ âûðîñëî îò 15 äî 150 êîëîíèé, õàðàêòåðíûõ äëÿ B. cereus. Õàðàêòåðèñòèêà êîëîíèé B. cereus íà ñåëåêòèâíûõ ïèòàòåëüíûõ ñðåäàõ ïðèâåäåíà â ïðèëîæåíèè. ×åðåç 48 ÷ óòî÷íÿþò ÷èñëî îáíàðóæåííûõ êîëîíèé. Êîððåêòèðîâêó ïîäñ÷åòà êîëè÷åñòâà B. cereus ïðîâîäÿò ïîñëå èçó÷åíèÿ ìîðôîëîãè÷åñêèõ è áèîõèìè÷åñêèõ îñîáåííîñòåé ìèêðîîðãàíèçìîâ èç êîëîíèé, õàðàêòåðíûõ äëÿ B. cereus. 4.2. Ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè õàðàêòåðíûõ êîëîíèé ê B. cereus. 4.2.1. Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ïðèíàäëåæíîñòè ïîäñ÷èòàííûõ êîëîíèé ê êîëîíèÿì, îáðàçóåìûì B. cereus, ìèêðîîðãàíèçìû èç ïÿòè êîëîíèé ïåðåñåâàþò íà ñêîøåííûé ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð è òåðìîñòàòèðóþò 1824 ÷ ïðè (30±1) °Ñ. Íà ñêîøåííîì ìÿñî-ïåïòîííîì àãàðå B. cereus îáðàçóåò ñïëîøíîé íàëåò áåëîãî öâåòà, èíîãäà ñ ìó÷íèñòîé ïîâåðõíîñòüþ. Ñî ñêîøåííîãî ìÿñî-ïåïòîííîãî àãàðà ãîòîâÿò ïðåïàðàòû, îêðàøèâàþò ïî Ãðàìó ïî ÃÎÑÒ 30425, à òàêæå îïðåäåëÿþò ïîäâèæíîñòü êëåòîê ïðè ìèêðîñêîïèðîâàíèè ìåòîäîì âèñÿ÷åé êàïëè.  ìàçêàõ, ïðèãîòîâëåííûõ ñî ñêîøåííîãî àãàðà, B. cereus èìååò âèä êðóïíûõ ãðàìïîëîæèòåëüíûõ ïàëî÷åê ðàçìåðîì 1,01,2⋅3,05,0 ìêì ñî ñëåãêà çàêðóãëåííûìè êîíöàìè, ëåæàùèõ â âèäå öåïî÷åê èëè øòàêåòîîáðàçíûõ ñêîïëåíèé, ðåæå îòäåëüíî äðóã îò äðóãà. B. cereus îáðàçóåò ñóáòåðìèíàëüíûå èëè öåíòðàëüíûå ñïîðû.  âèñÿ÷åé êàïëå êëåòêè ïîäâèæíû, îäíàêî ìîãóò âñòðå÷àòüñÿ øòàììû ñî ñëàáî âûðàæåííîé ïîäâèæíîñòüþ. 4.2.2. Äëÿ äîêàçàòåëüñòâà àíàýðîáíîé ôåðìåíòàöèè ãëþêîçû êóëüòóðû ñî ñêîøåííîãî àãàðà, óêàçàííîãî â ï. 4.2.1, âûñåâàþò óêîëîì â ïèòàòåëüíóþ ñðåäó ñ èíäèêàòîðîì áðîìêðåçîëîâûì ïóðïóðîâûì è ãëþêîçîé (ñì. ï. 3.2.6). Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (30±1) °Ñ â òå÷åíèå 24 ÷. B. cereus ðàñòåò, îêðàøèâàÿ ñðåäó â æåëòûé èëè æåëòî-êîðè÷íåâûé öâåò ïî âñåé äëèíå óêîëà. 4.2.3. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñïîñîáíîñòè B. cereus ôåðìåíòèðîâàòü ìàííèò êóëüòóðû ñî ñêîøåííîãî àãàðà (ñì. ï. 4.2.1) ïåðåñåâàþò íà ïèòàòåëüíóþ ñðåäó ñ èíäèêàòîðîì áðîìêðåçîëîâûì ïóðïóðîâûì è ìàííèòîì (ñì. ï. 3.2.7). Ïîñåâû òåðìîñòàòèðóþò ïðè (30±1) °Ñ â òå÷åíèå 24 ÷. Ïðè ðàçâèòèè B. cereus íà ñðåäå ñ ìàííèòîì, öâåò ñðåäû íå èçìåíÿåòñÿ. 4.2.4. Äëÿ ïîñòàíîâêè ðåàêöèè íà îáðàçîâàíèå àöåòèëìåòèëêàðáèíîëà êóëüòóðû ñî ñêîøåííîãî àãàðà (ñì. ï. 4.2.1) ïåðåñåâàþò íà ïåïòîííóþ ñðåäó ñ ãëþêîçîé ñ ðÍ 7,0. Ïîñåâû òåðìîñòàòèðóþò ïðè (30±1) °Ñ â òå÷åíèå 24 ÷.  ÷èñòóþ ïðîáèðêó îòáèðàþò 1 ñì! êóëüòóðû, äîáàâëÿþò 0,2 ñì! ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè êàëèÿ ìàññîâîé êîíöåíòðàöèåé 400 ã/äì! è 0,6 ñì! ñâåæåïðèãîòîâëåííîãî ïî ÃÎÑÒ 10444.1 ðàñòâîðà 1-íàôòîëà è íåñêîëüêî êðèñòàëëîâ êðåàòèíà. Äîïóñêàåòñÿ ðåàêöèþ íà îáðàçîâàíèå àöåòèëìåòèëêàðáèíîëà ïðîâîäèòü áåç ïðèìåíåíèÿ êðåàòèíà. Ïîñëå äîáàâëåíèÿ êàæäîãî ðàñòâîðà ñîäåðæèìîå ïðîáèðêè òùàòåëüíî âñòðÿõèâàþò, à çàòåì îñòàâëÿþò íà 1 ÷ ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå. B. cereus îáðàçóåò àöåòèëìåòèëêàðáèíîë, ïîýòîìó îêðàñêà ñðåäû ìåíÿåòñÿ â ðîçîâûé öâåò. Ïðè îòðèöàòåëüíîé ðåàêöèè êóëüòóðàëüíóþ æèäêîñòü òåðìîñòàòèðóþò äîïîëíèòåëüíî 24 ÷, ïîñëå ÷åãî äåëàþò îêîí÷àòåëüíîå çàêëþ÷åíèå. 4.2.5. Ïðè ïîñòàíîâêå ðåàêöèè íà ïîäòâåðæäåíèå ðåäóêöèè B. cereus íèòðàòîâ ïðåäâàðèòåëüíî óáåæäàþòñÿ â òîì, ÷òî ñàìà ñðåäà íå ñîäåðæèò íèòðèòîâ. Äëÿ ýòîãî â äâå êîíòðîëüíûå ïðîáèðêè ñî ñðåäîé äîáàâëÿþò ïî 0,20,5 ñì! ñìåñè ðàâíûõ îáúåìîâ ðàñòâîðîâ, êàê óêàçàíî â ïï. 3.1.4, 3.1.5. Åñëè â òå÷åíèå 15 ìèí íå ïðîèñõîäèò ïîêðàñíåíèÿ ñðåäû, òî ñðåäó èñïîëüçóþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ íèòðàòðåäóöèðóþùåé ñïîñîáíîñòè ìèêðîîðãàíèçìîâ. Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå éîäîêðàõìàëüíîãî ðåàêòèâà ïî ÃÎÑÒ 10444.1 äëÿ êîíòðîëÿ îòñóòñòâèÿ íèòðèòîâ â ïèòàòåëüíîé ñðåäå. 5-2719 69 5 ÃÎÑÒ 10444.888 Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ðåäóêöèè íèòðàòîâ ïðîâîäÿò ïîñåâû â ïðîáèðêè ñ íèòðàòíîé ñðåäîé. Ïîñåâû òåðìîñòàòèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (30±1) °Ñ â òå÷åíèå 24 ÷, çàòåì äîáàâëÿþò 0,20,5 ñì! ñìåñè ðàâíûõ îáúåìîâ ðàñòâîðîâ ïî ïï. 3.1.4, 3.1.5. Åñëè â òå÷åíèå 15 ìèí íå ïðîèñõîäèò ïîêðàñíåíèÿ, äîáàâëÿþò â ïîñåâ íåìíîãî ïîðîøêîîáðàçíîãî öèíêà è âûäåðæèâàþò åùå 10 ìèí. Åñëè ïîñëå äîáàâëåíèÿ öèíêà ñðåäà êðàñíååò, òî ðåäóêöèÿ íèòðàòîâ, âñëåäñòâèå îòñóòñòâèÿ B. cereus, íå ïðîèçîøëà è òåñò ñ÷èòàþò îòðèöàòåëüíûì. Åñëè ïîñëå äîáàâëåíèÿ öèíêà ñðåäà íå êðàñíååò, òî äåëàþò âûâîä î òîì, ÷òî ðåäóêöèÿ íèòðàòîâ, âñëåäñòâèå ïðèñóòñòâèÿ B. cereus ïðîèçîøëà. Äîïóñêàåòñÿ âìåñòî ñìåñè ðàâíûõ îáúåìîâ ðàñòâîðîâ, óêàçàííûõ â ïï. 3.1.4, 3.1.5, èñïîëüçîâàòü ðàñòâîðû, óêàçàííûõ â ïï. 3.1.6, 3.1.7.  ýòîì ñëó÷àå ýòè ðàñòâîðû äîáàâëÿþò èç ðàñ÷åòà ïî äâå êàïëè êàæäîãî ðàñòâîðà ê 3 ñì! êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè. 5. ÎÁÐÀÁÎÒÊÀ ÐÅÇÓËÜÒÀÒΠ5.1. Ðåçóëüòàòû èñïûòàíèÿ ïðîäóêòà îöåíèâàþò ïî êàæäîé ïðîáå îòäåëüíî. 5.2. Åñëè ïðè èçó÷åíèè êóëüòóðàëüíûõ, ìîðôîëîãè÷åñêèõ è áèîõèìè÷åñêèõ ñâîéñòâ ìèêðîîðãàíèçìîâ, âûäåëåííûõ èç êîëîíèé, îáíàðóæåíû ïîäâèæíûå, ãðàìïîëîæèòåëüíûå, íèòðàòðåäóöèðóþùèå, ñïîðîîáðàçóþùèå ïàëî÷êè, ñïîñîáíûå îáðàçîâûâàòü àöåòèëìåòèëêàðáèíîë, ôåðìåíòèðîâàòü â àíàýðîáíûõ óñëîâèÿõ ãëþêîçó è íå ñïîñîáíûå ôåðìåíòèðîâàòü ìàííèò, òî äàþò çàêëþ÷åíèå î òîì, ÷òî îáíàðóæåííûå ìèêðîîðãàíèçìû îòíîñÿòñÿ ê B. cereus. 5.3. Ïðè íåîáõîäèìîñòè ïîäñ÷åòà B. cereus åñëè â 80 % ñëó÷àåâ, ò. å. íå ìåíåå ÷åì â ÷åòûðåõ èç ïÿòè êîëîíèé, ïîäòâåðæäåí ðîñò B. cereus, òî ñ÷èòàþò, ÷òî âñå õàðàêòåðíûå êîëîíèè, âûðîñøèå â ÷àøêå, ïðèíàäëåæàò ê B. cereus.  îñòàëüíûõ ñëó÷àÿõ êîëè÷åñòâî B. cereus îïðåäåëÿþò, èñõîäÿ èç ïðîöåíòíîãî îòíîøåíèÿ ïîäòâåðæäåííûõ êîëîíèé ê îáùåìó êîëè÷åñòâó õàðàêòåðíûõ êîëîíèé, âçÿòûõ äëÿ èçó÷åíèÿ ìîðôîëîãè÷åñêèõ è áèîõèìè÷åñêèõ ñâîéñòâ. 5.4. Ðåçóëüòàòû èñïûòàíèé, ïåðåñ÷èòûâàþò íà 1 ã èëè 1 ñì! ïðîäóêòà è çàïèñûâàþò â ñîîòâåòñòâèè ñ òðåáîâàíèÿìè ÃÎÑÒ 26670. ÏÐÈËÎÆÅÍÈÅ Ñïðàâî÷íîå ÕÀÐÀÊÒÅÐÈÑÒÈÊÀ ÊÎËÎÍÈÉ B. CEREUS ÍÀ ÑÅËÅÊÒÈÂÍÛÕ ÏÈÒÀÒÅËÜÍÛÕ ÑÐÅÄÀÕ Íàçâàíèå ïèòàòåëüíîé ñðåäû 1. Ñåëåêòèâíûé àãàð äëÿ âûäåëåíèÿ è èäåíòèôèêàöèè 2. Æåëòî÷íûé àãàð ñ õëîðèñòûì íàòðèåì, ïîëèìèêñèí  èëè ïîëèìèêñèí Ì ñóëüôàòîì è 2, 3, 5òðèôåíèëòåòðàçîëèóì õëîðèäîì 3. Æåëòî÷íûé àãàð ñ ìàííèòîì, ïîëèìèêñèí  èëè ïîëèìèêñèí Ì ñóëüôàòîì è ôåíîëîâûì êðàñíûì 4. Ëåöèòèí-àãàð äëÿ âûäåëåíèÿ B. cereus èç êîíñåðâèðîâàííûõ ïðîäóêòîâ 6 Õàðàêòåðèñòèêà êîëîíèé Êîëîíèè äèàìåòðîì 1,52,0 ìì, îêðóæåííûå çîíàìè ïðåöèïèòàòà ñèíåãî öâåòà äèàìåòðîì 45 ìì.  ïåðâûå ÷àñû ðîñòà êîëîíèè îêðóãëûå, âûïóêëûå; çàòåì êðàÿ êîëîíèé ñòàíîâÿòñÿ èçðåçàííûìè. Êîëîíèè êðóãëûå, áëåñòÿùèå, êðàñíûå, äèàìåòðîì îêîëî 23 ìì ñ çîíîé áåëîãî ïðåöèïèòàòà äèàìåòðîì îêîëî 45 ìì. Êîëîíèè ðîçîâûå (âñëåäñòâèå îòñóòñòâèÿ ñïîñîáíîñòè ôåðìåíòèðîâàòü ìàííèò), êðóïíûå, øåðîõîâàòûå, ñóõèå, îêðóæåííûå çîíîé áåëî-ðîçîâîãî ïðåöèïèòàòà. Åñëè â ÷àøêàõ ñîäåðæèòñÿ ìíîãî ìèêðîîðãàíèçìîâ, ôåðìåíòèðóþùèõ ìàííèò äî êèñëîòû, òî õàðàêòåðíûé ðîçîâûé öâåò êîëîíèé B. cereus ìîæåò ïîáëåäíåòü èëè èñ÷åçíóòü, â ýòîì ñëó÷àå ýòè êîëîíèè ñëåäóåò ó÷èòûâàòü. Êîëîíèè, àíàëîãè÷íûå êîëîíèÿì, óêàçàííûì â ï. 1. 70 ÃÎÑÒ 10444.888 ÈÍÔÎÐÌÀÖÈÎÍÍÛÅ ÄÀÍÍÛÅ 1. ÐÀÇÐÀÁÎÒÀÍ È ÂÍÅÑÅÍ Ãîñóäàðñòâåííûì àãðîïðîìûøëåííûì êîìèòåòîì ÑÑÑÐ 2. ÓÒÂÅÐÆÄÅÍ È ÂÂÅÄÅÍ Â ÄÅÉÑÒÂÈÅ Ïîñòàíîâëåíèåì Ãîñóäàðñòâåííîãî êîìèòåòà ÑÑÑÐ ïî ñòàíäàðòàì îò 25 àâãóñòà 88 ¹ 3021 3.  ñòàíäàðò ââåäåí ìåæäóíàðîäíûé ñòàíäàðò ÈÑÎ 7932 (1987) 4. ÂÇÀÌÅÍ ÃÎÑÒ 10444.1075 5. ÑÑÛËÎ×ÍÛÅ ÍÎÐÌÀÒÈÂÍÎ-ÒÅÕÍÈ×ÅÑÊÈÅ ÄÎÊÓÌÅÍÒÛ Îáîçíà÷åíèå ÍÒÄ, íà êîòîðûé äàíà ññûëêà ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ 364094 667275 8756.1870 928475 10444.184 ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ ÃÎÑÒ 10444.786 2410488 2436380 2666885 2666985 2667091 2680986 3042597 Íîìåð ïóíêòà 2.1 2.1 1.2 2.1 1.2; 2.1; 3.2.3; 3.2.4; 3.2.5; 3.2.8; 3.2.9; 4.2.4; 4.2.5 3.1.10 2.1 2.1 1.1 1.2 4.1.2; 5.4 1.1 4.2.1 6. Îãðàíè÷åíèå ñðîêà äåéñòâèÿ ñíÿòî ïî ïðîòîêîëó ¹ 493 Ìåæãîñóäàðñòâåííîãî Ñîâåòà ïî ñòàíäàðòèçàöèè, ìåòðîëîãèè è ñåðòèôèêàöèè (ÈÓÑ 494) 7. ÏÅÐÅÈÇÄÀÍÈÅ 5-2* 71 7