Тест-системы для ветеринарии Оперативное выявление возбудителя Африканской чумы свиней (АЧС) методом ПЦР Asfivirus – возбудитель АЧС Африканская чума свиней (АЧС) — природно-очаговое, трансмиссивное , высококонтагиозное вирусное заболевание свиней. Как правило, АЧС — остро протекающая септическая болезнь свиней, характеризующаяся лихорадкой, цианозом кожи, признаками токсикоза, гемморагическим диатезом и высокой летальностью (99%). Введение Возбудитель — ДНК-содержащий вирус, семейства Asfarviridae, рода Asfivirus. Вирион имеет размер 175-215нм, икосаэдрической формы. Вирусный геном представляет собой двухцепочечную молекулу ДНК, состоящую из 170-190 тысяч пар нуклеотидов. Установлена иммунологическая множественность типов вируса. К болезни в естественных условиях восприимчивы только дикие и домашние свиньи всех пород и любого возраста. Вирус проникает в организм свиней через органы дыхания, пищеварения, поврежденную кожу и слизистые оболочки. Основными источниками возбудителя служат больные животные и вирусоносители, от которых в естественных условиях заражаются клещи рода Ornithodorus. Клещи остаются инфицированными до 20 лет. Клещи рода Ornithodorus Эпизоотология Ситуация: РФ была благополучна по АЧС с 1977 года. По официальным данным распространение африканской чумы свиней в России началось с выявления в Чеченской Республике больных диких свиней в ноябре 2007 года. За период с 2007 по май 2009 года было выявлено 65 очагов африканской чумы свиней в Чеченской Республике, Республике Северная Осетия, Ставропольском крае, Краснодарском крае, Республике Кабардино-Балкарии, Ростовской области. К настоящему моменту в России официально зарегистрировано 36 вспышек АЧС. Наиболее сложная ситуация сложилась в Ростовской области, где очаги инфекции зарегистрированы в 21 пункте. Особую озабоченность вызывает факт выноса АЧС в Краснодарский край и Северо-Кавказский ФО. Следует отметить, что вирусоносительство при АЧС может длиться до двух лет и более с высокой летальностью и поражением до 100% животных всех пород и возрастов. Эффективных средств иммунопрофилактики и лечения африканской чумы свиней до настоящего времени не разработано. Устойчивость Возбудитель инфекции является достаточно устойчивым и может сохраняться в трупах свиней до десяти недель, в мясе больных животных, копченой колбасе, почве и навозе до пяти месяцев и более. Один из рисков распространения АЧС связан с запоздалой постановкой диагноза. Лабораторная диагностика Для обнаружения возбудителя АЧС в исследуемых образцах используют методы ПЦР, РИФ. Для серологических исследований применяют твердофазный иммуноферментный анализ, реакцию непрямой иммунофлуоресценции, встречный иммуноэлектрофорез. Преимущества ПЦР по сравнению с традиционными лабораторными методами: оперативный метод выявления возбудителя диагностика бессимптомного носительства возможность выявления возбудителя на ранних стадиях высокочувствительная и высокоспецифичная методика Россия, 119021, Москва, Олсуфьевский пер., д. 8, cтр. 1 Тел.: (495) 664 2884 Факс: (495) 664 2889 www.interlabservice.ru Оборудование Прибор для проведения полимеразной цепной реакции Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 6000, производитель (QIAGEN, Германия) Тест-система АЧС для диагностики африканской чумы свиней методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени (производитель — ФГУН «ЦНИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора) Преимущества тест-системы «АЧС» Тест-система «АЧС» адаптирована к работе с широким спектром исследуемого материала; Выверенная аналитическая чувствительность тест-системы; Формат детекции продуктов амплификации в режиме «реального времени» без открывания пробирок, что снижает риск контаминации; Внутренний контроль позволяет контролировать все этапы анализа, включая этап выделения. Формат «FRT». Флуоресцентная детекция в реальном времени Формат FRT Канал FAM/Green – амплификация ВКО генома вируса АЧС кат. № VET- 42 -FRT(RG,iQ) название компл. АЧС тестов тип 50 Рекомендуемое оборудование Rotor-Gene Q/ Rotor-Gene 6000 (QIAGEN) в состав набора входят все необходимые компоненты для проведения диагностики методом ПЦР, включая реагенты для выделения ДНК — «ДНК-сорб-B» Материал для исследований: Вид клинического материала Цельная кровь, плазма, сыворотка крови Мазки со слизистой носо- и ротоглотки Патматериал (миндалины, селезенка, лимфатические узлы Клещи, смывы с объектов внешней среды Аналитические характеристики тест-систем «АЧС» Канал Joe/Yellow – амплификация специфического участка генома вируса АЧС Чувствительность 103 геномных эквивалентов в мл. пробы Специфичность Отсутствуют перекрестные реакции на гетерогенные штаммы возбудителей инфекционных болезней свиней Взятие крови животного с подозрением на АЧС рекомендовано проводить с помощью вакуумных систем Green Vac-Tube для исследования сыворотки Кат.№ GV0139 (9мл) Мазки со слизистой рото- и носоглотки рекомендовано брать с помощью универсальных одноразовых зондов Кат. №300252 Россия, 119021, Москва, Олсуфьевский пер., д. 8, cтр. 1 Тел.: (495) 664 2884 Факс: (495) 664 2889 www.interlabservice.ru 600620 Гомогенизацию патматериала рекомендовано проводить с помощью одноразового полипропиленового гомогенизатора «Пестик». Кат. №PES-I5-B-SI