антитела к простатоспецифическому антигену в сверхмалых

104
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2002, Приложение № 4
ÀÍÒÈÒÅËÀ Ê ÏÐÎÑÒÀÒÎÑÏÅÖÈÔÈ×ÅÑÊÎÌÓ ÀÍÒÈÃÅÍÓ Â ÑÂÅÐÕÌÀËÛÕ
ÄÎÇÀÕ: ÂËÈßÍÈÅ ÍÀ ÌÎÐÔÎËÎÃÈ×ÅÑÊÎÅ È ÔÓÍÊÖÈÎÍÀËÜÍÎÅ
ÑÎÑÒÎßÍÈÅ ÏÐÅÄÑÒÀÒÅËÜÍÎÉ ÆÅËÅÇÛ ÊÐÛÑ
Ò.Ã.Áîðîâñêàÿ, Ò.È.Ôîìèíà, Î.Ï.Ëîñêóòîâà, Î.Â.Áàðàíîâà,
Ñ.À.Ñåðãååâà*, À.Â.Ìàðòþøåâ*, Î.È.Ýïøòåéí*
ÍÈÈ ôàðìàêîëîãèè ÒÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ; *Íàó÷íî-ïðîèçâîäñòâåííàÿ ôèðìà “Ìàòåðèà Ìåäèêà Õîëäèíã”, Ìîñêâà
Ïîêàçàíî, ÷òî ââåäåíèå ñâåðõìàëûõ äîç àíòèòåë ê ïðîñòàòîñïåöèôè÷åñêîìó àíòèãåíó
â òå÷åíèå 1.5 ìåñ íà ôîíå õðîíè÷åñêîãî àñåïòè÷åñêîãî âîñïàëåíèÿ ïðîñòàòû çàäåðæèâàåò ðàçâèòèå â íåé àòðîôè÷åñêèõ è ñêëåðîòè÷åñêèõ ïðîöåññîâ ïî äàííûì ìîðôîëîãè÷åñêîãî è ìîðôîìåòðè÷åñêîãî àíàëèçà.  ïðåäñòàòåëüíîé æåëåçå êðûñ, ïîëó÷àâøèõ ïðåïàðàò, îòìå÷åíî òàêæå áîëåå âûñîêîå, ÷åì â êîíòðîëå, ñîäåðæàíèå èîíîâ Zn,
èãðàþùåãî âàæíóþ ðîëü â ñâÿçûâàíèè àíäðîãåíîâ. Ïðè èçó÷åíèè ïàðíîãî ïîëîâîãî
ïîâåäåíèÿ êðûñ óñòàíîâëåíî, ÷òî êðûñû-ñàìöû ñ õðîíè÷åñêèì âîñïàëåíèåì ïðåäñòàòåëüíîé æåëåçû, êîòîðûì ââîäèëè àíòèòåëà ê ïðîñòàòîñïåöèôè÷åñêîìó àíòèãåíó, õàðàêòåðèçîâàëèñü ïîâûøåííîé ïîëîâîé àêòèâíîñòüþ ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëüíûìè è
èíòàêòíûìè æèâîòíûìè.
Êëþ÷åâûå ñëîâà: õðîíè÷åñêîå àñåïòè÷åñêîå âîñïàëåíèå, ïðåäñòàòåëüíàÿ æåëåçà, àíòèòåëà
ê ïðîñòàòîñïåöèôè÷åñêîìó àíòèãåíó, ñâåðõìàëûå äîçû, êðûñû
Íåèíôåêöèîííûå ïðîñòàòèòû — íàèáîëåå øèðîêî ðàñïðîñòðàíåííûå çàáîëåâàíèÿ ïðåäñòàòåëüíîé æåëåçû (ÏÆ) [6]. Îíè òðóäíî ïîääàþòñÿ
ëå÷åíèþ, ïðè êóïèðîâàíèè ñóáúåêòèâíûõ ðàññòðîéñòâ è óìåíüøåíèè âûðàæåííîñòè ëàáîðàòîðíûõ ïðèçíàêîâ âîñïàëåíèÿ ìîðôîëîãè÷åñêèå
èçìåíåíèÿ â æåëåçèñòîé òêàíè è ñòðîìå ÏÆ ñîõðàíÿþòñÿ [7,12]. Âûøåñêàçàííîå ïîáóæäàåò ê
ïîèñêó íîâûõ ñïîñîáîâ ëå÷åíèÿ äàííîé óðîëîãè÷åñêîé ïàòîëîãèè [4,6].
Èçâåñòíî, ÷òî â öèòîïëàçìå àöèíàðíûõ êëåòîê è â ýïèòåëèè ïðîòîêîâ íîðìàëüíîé ÏÆ ëîêàëèçîâàí ïðîñòàòîñïåöèôè÷åñêèé àíòèãåí (ÏÑÀ)
[15], ïîâûøåíèå óðîâíÿ êîòîðîãî ñëóæèò ìàðêåðîì îïóõîëåâîãî ïðîöåññà [5]. Îäíàêî â íàñòîÿùåå âðåìÿ óñòàíîâëåíî, ÷òî ïîâûøåíèå óðîâíÿ
ÏÑÀ íàáëþäàåòñÿ è ïðè äðóãèõ óðîëîãè÷åñêèõ
çàáîëåâàíèÿõ, â ÷àñòíîñòè, ïðè âîñïàëèòåëüíûõ
ïðîöåññàõ ÏÆ [4,13].
Öåëüþ íàñòîÿùåé ðàáîòû ÿâèëîñü èçó÷åíèå
âëèÿíèÿ ñâåðõìàëûõ äîç àíòèòåë ê ïðîñòàòîñïåöèôè÷åñêîìó àíòèãåíó, ïîëó÷åííûõ ïî ãîìåîïàòè÷åñêîé òåõíîëîãèè (ñìåñü ãîìåîïàòè÷åñêèõ
ðàçâåäåíèé Ñ12+Ñ30+Ñ200; ÏÀÒ-ÏÑÀ) íà ìîð-
ôîëîãè÷åñêîå è ôóíêöèîíàëüíîå ñîñòîÿíèå ÏÆ
êðûñ â óñëîâèÿõ õðîíè÷åñêîãî àñåïòè÷åñêîãî
âîñïàëåíèÿ.
ÌÅÒÎÄÈÊÀ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
 îïûòàõ èñïîëüçîâàëè 56 áåëûõ áåñïîðîäíûõ
2.5-ìåñÿ÷íûõ êðûñ-ñàìöîâ ìàññîé 250 ã. Æèâîòíûå ïîëó÷åíû èç Íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêîé ëàáîðàòîðèè ýêñïåðèìåíòàëüíî-áèîìåäèöèíñêîãî
ìîäåëèðîâàíèÿ ÍÈÈ ôàðìàêîëîãèè ÒÍÖ ÑÎ
ÐÀÌÍ (ñåðòèôèêàò èìååòñÿ). Êðûñ ñîäåðæàëè
â ñîîòâåòñòâèè ñ ïðàâèëàìè, ïðèíÿòûìè Åâðîïåéñêîé êîíâåíöèåé ïî çàùèòå ïîçâîíî÷íûõ
æèâîòíûõ, èñïîëüçóåìûõ äëÿ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ è èíûõ íàó÷íûõ öåëåé (Ñòðàñáóðã, 1986).
Äî è â ïåðèîä ýêñïåðèìåíòà êðûñû íàõîäèëèñü
â ñòàíäàðòíûõ óñëîâèÿõ âèâàðèÿ ñî ñâîáîäíûì
äîñòóïîì ê âîäå è ïèùå. Õðîíè÷åñêîå âîñïàëåíèå ÏÆ âûçûâàëè ïóòåì ïðîøèâàíèÿ åå øåëêîâîé íèòüþ [3] ïîä ýôèðíûì íàðêîçîì. Êðûñàì
îïûòíîé ãðóïïû ÏÀÒ-ÏÑÀ ââîäèëè âíóòðèæåëóäî÷íî (ïî 1.5 ìë/êðûñó) â òå÷åíèå 45 äíåé,
íà÷èíàÿ ÷åðåç 1 ìåñ ïîñëå îïåðàöèè. Êðûñû
ФАРМАКОЛОГИЯ СВЕРХМАЛЫХ ДОЗ
êîíòðîëüíîé ãðóïïû ïîëó÷àëè ðàñòâîðèòåëü —
äèñòèëëèðîâàííóþ âîäó â ýêâèîáúåìíîì êîëè÷åñòâå â òå æå ñðîêè. ×åðåç 2.5 ìåñ ïîñëå îïåðàöèè ïî 10 æèâîòíûõ êàæäîé ãðóïïû è 10 èíòàêòíûõ êðûñ çàáèâàëè ìåòîäîì äèñëîêàöèè øåéíûõ ïîçâîíêîâ. Êðûñ âñêðûâàëè è ïðåïàðèðîâàëè âåíòðàëüíóþ äîëþ ÏÆ. ×àñòü ýêñïåðèìåíòàëüíîãî ìàòåðèàëà (îò 5 æèâîòíûõ êàæäîé ãðóïïû) áðàëè äëÿ ãèñòîëîãè÷åñêîãî èññëåäîâàíèÿ;
äëÿ ýòîãî âåíòðàëüíóþ äîëþ ÏÆ ôèêñèðîâàëè
â æèäêîñòè Êàðíóà è çàëèâàëè â ïàðàôèí. Äåïàðàôèíèðîâàííûå ñðåçû òîëùèíîé 5 ìêì îêðàøèâàëè ãåìàòîêñèëèíîì è ýîçèíîì è ïî Âàí-Ãèçîíó íà ñîåäèíèòåëüíóþ òêàíü [9]. Íà ãèñòîëîãè÷åñêèõ ïðåïàðàòàõ ÏÆ, îêðàøåííûõ ïî ÂàíÃèçîíó, îöåíèâàëè ñîîòíîøåíèå ñòðóêòóðíûõ
ýëåìåíòîâ æåëåçû ïî ìåòîäèêå [10]. Äëÿ ýòîãî
æåëåçó “ñêàíèðîâàëè” ñ ïîìîùüþ îêóëÿðíîé
ìîðôîìåòðè÷åñêîé ñåòêè Ã.Ã.Àâòàíäèëîâà ïî
äâóì âçàèìíî ïåðïåíäèêóëÿðíûì íàïðàâëåíèÿì
îò êàïñóëû äî êàïñóëû. Â êàæäîì òðåòüåì ïîëå
çðåíèÿ ïîäñ÷èòûâàëè êîëè÷åñòâî òî÷åê ñåòêè,
ïðèõîäÿùèõñÿ íà ñòðóêòóðíûå ýëåìåíòû ÏÆ:
ýïèòåëèé, ïðîñâåò êîíöåâûõ îòäåëîâ è èíòåðñòèöèé.  èíòåðñòèöèè âûäåëÿëè ñîñóäû è ñîåäèíèòåëüíóþ òêàíü (êîëëàãåíîâûå âîëîêíà, îñíîâíîå âåùåñòâî è êëåòî÷íûå ýëåìåíòû). Ìûøå÷íûå âîëîêíà íå ïîäñ÷èòûâàëè, ò.ê. â èíòåðñòèöèè ÏÆ êðûñ, â îòëè÷èå îò ÏÆ ÷åëîâåêà,
ïðàêòè÷åñêè íåò ìûøå÷íûõ ýëåìåíòîâ [14]. Çàòåì âû÷èñëÿëè ïðîöåíòíîå ñîîòíîøåíèå óêàçàííûõ ñòðóêòóð. Ó÷èòûâàÿ âàæíóþ ðîëü Zn â ñâÿçûâàíèè àíäðîãåíîâ ÏÆ [11], îñòàâøóþñÿ ÷àñòü
ýêñïåðèìåíòàëüíîãî ìàòåðèàëà ïîìåùàëè â ýòèëî-
105
âûé ñïèðò ñ öåëüþ äàëüíåéøåãî îïðåäåëåíèÿ â
íåé ñîäåðæàíèÿ èîíîâ Zn, êîòîðîå ïðîâîäèëè
ìåòîäîì ýìèññèîííîãî ñïåêòðàëüíîãî àíàëèçà.
 ñâÿçè ñ òåì, ÷òî òå÷åíèå õðîíè÷åñêèõ ïðîñòàòèòîâ ñîïðîâîæäàåòñÿ ñíèæåíèåì ïîëîâîé àêòèâíîñòè [1,8,12], áûëî ïðîâåäåíî èçó÷åíèå ïàðíîãî ïîëîâîãî ïîâåäåíèÿ êðûñ èññëåäóåìûõ
ãðóïï. Äëÿ òåñòèðîâàíèÿ ïîëîâîé àêòèâíîñòè
ñàìöîâ ññàæèâàëè ñ ñàìêàìè, íàõîäèâøèìèñÿ â
ñòàäèè ýñòðóñà, êîòîðûé âûçûâàëè èñêóññòâåííî ïóòåì 4-êðàòíîãî ââåäåíèÿ 0.05% ôîëëèêóëèíà â äîçå 0.02 ìã/êã â ñóòêè. Ôàçó ïîëîâîãî
öèêëà êîíòðîëèðîâàëè ñ ïîìîùüþ öèòîëîãè÷åñêîãî èññëåäîâàíèÿ âàãèíàëüíûõ ìàçêîâ. Âëèÿíèå ÏÀÒ-ÏÑÀ íà ïàðíîå ïîëîâîå ïîâåäåíèå
èçó÷àëè â îòêðûòîì ïîëå ïî ìåòîäèêå [2].  òå÷åíèå 15 ìèí äëÿ êàæäîãî ñàìöà ðåãèñòðèðîâàëè ëàòåíòíûé ïåðèîä ñàäêè (âðåìÿ ìåæäó ïåðâûì ïðåäúÿâëåíèåì ñàìêè è ïåðâîé ñàäêîé), îáùåå êîëè÷åñòâî ñàäîê, êîëè÷åñòâî ñïàðèâàíèé.
Ïîëó÷åííûå ýêñïåðèìåíòàëüíûå äàííûå îáðàáàòûâàëè ñòàòèñòè÷åñêè ñ èñïîëüçîâàíèåì íåïàðàìåòðè÷åñêîãî êðèòåðèÿ Ìàííà—Óèòíè.
ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
Ïðîøèâàíèå ÏÆ øåëêîâîé íèòüþ ÷åðåç 2.5 ìåñ
ïîñëå îïåðàöèè âûçûâàëî ðàçâèòèå àòðîôè÷åñêèõ è ñêëåðîòè÷åñêèõ èçìåíåíèé â îðãàíå, ÷òî
ïîäòâåðæäàëîñü äîñòîâåðíûì ñíèæåíèåì (ïî
ñðàâíåíèþ ñ ôîíîì) îòíîñèòåëüíîé ïëîùàäè
ýïèòåëèÿ êîíöåâûõ îòäåëîâ ÏÆ è óâåëè÷åíèåì
îòíîñèòåëüíîé ïëîùàäè ñîåäèíèòåëüíîé òêàíè
(òàáë. 1). Êðîìå òîãî, ó îïåðèðîâàííûõ êðûñ
Òàáëèöà 1. Âëèÿíèå ÏÀÒ-ÏÑÀ íà ñîîòíîøåíèå (% îò îáùåãî êîëè÷åñòâà) ñòðóêòóðíûõ ýëåìåíòîâ ÏÆ
ïðè õðîíè÷åñêîì âîñïàëåíèè (X±m, n=5)
Ñòðóêòóðíûå ýëåìåíòû
Èíòàêòíûå
Õðîíè÷åñêîå âîñïàëåíèå
êîíòðîëü
Эпителий концевых отделов
23.12±1.55
16.64±0.96*
îïûò
19.23±0.48* +
Просвет концевых отделов
61.98±2.30
54.3±2.3*
52.60±0.95*
Соединительная ткань
13.36±0.63
29.64±0.98*
26.98±1.36* +
Сосуды
1.56±0.45
1.48±0.19
1.14±0.14
Примечание. Здесь и в табл. 2 p<0.05: *по сравнению с интактными, +по сравнению с контролем.
Òàáëèöà 2. Âëèÿíèå ÏÀÒ-ÏÑÀ íà ïîêàçàòåëè ïîëîâîãî ïîâåäåíèÿ êðûñ ñ õðîíè÷åñêèì âîñïàëåíèåì
—
ÏÆ (Õ±m)
Ïîêàçàòåëü
Латентный период садки, с
Õðîíè÷åñêîå âîñïàëåíèå
Èíòàêòíûå
(n=10)
êîíòðîëü (n=8)
îïûò (n=8)
231.88±8.88
189.00±11.90
114.88±15.99*
Количество садок
7.50±2.39
5.88±1.60
11.75±2.10+
Количество спариваний
1.70±0.72
1.25±0.41
2.35±0.31
106
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2002, Приложение № 4
äîñòîâåðíî óìåíüøàëàñü îòíîñèòåëüíàÿ ïëîùàäü
ïðîñâåòà êîíöåâûõ îòäåëîâ ÏÆ, ÷òî ìîæåò êîñâåííî ñâèäåòåëüñòâîâàòü î ñíèæåíèè åå ñåêðåòîðíîé àêòèâíîñòè.
Ó îïåðèðîâàííûõ êðûñ, ïîëó÷àâøèõ ÏÀÒ-ÏÑÀ
â òå÷åíèå 45 äíåé, ïëîùàäü ñåêðåòîðíîãî ýïèòåëèÿ êîíöåâûõ îòäåëîâ ÏÆ îêàçàëàñü äîñòîâåðíî
áîëüøå, à îòíîñèòåëüíàÿ ïëîùàäü ñîåäèíèòåëüíîé òêàíè — ìåíüøå, ÷åì â êîíòðîëå (òàáë. 1).
Êîíöåíòðàöèÿ èîíîâ Zn â âåíòðàëüíîé äîëå
ÏÆ êîíòðîëüíûõ æèâîòíûõ ñîñòàâèëà 0.96±0.06
ìã/100 ã, â òî âðåìÿ êàê â ÏÆ êðûñ, ïîëó÷àâøèõ ÏÀÒ-ÏÑÀ, — 2.09±0.023 ìã/100 ã (p<0.05)
ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì.
Ëàòåíòíûé ïåðèîä ñàäêè ó ñàìöîâ ñ õðîíè÷åñêèì ïðîñòàòèòîì, ïîëó÷àâøèõ ðàñòâîðèòåëü,
áûë ñîïîñòàâèì ñ òàêîâûì ó èíòàêòíûõ æèâîòíûõ (òàáë. 2). Ó ñàìöîâ îïûòíîé ãðóïïû ýòîò
ïîêàçàòåëü äîñòîâåðíî íå îòëè÷àëñÿ îò êîíòðîëÿ, íî áûë íèæå ôîíîâûõ çíà÷åíèé (p<0.05;
òàáë. 2). Îáùåå êîëè÷åñòâî ñàäîê ó èíòàêòíûõ
ñàìöîâ è ñàìöîâ êîíòðîëüíîé ãðóïïû íå ðàçëè÷àëîñü. Ó êðûñ îïûòíîé ãðóïïû ýòîò ïîêàçàòåëü
áûë äîñòîâåðíî óâåëè÷åí (â 2 ðàçà) ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì. Ïî êîëè÷åñòâó ñïàðèâàíèé
æèâîòíûå âñåõ ñðàâíèâàåìûõ ãðóïï ðàçëè÷àëèñü
íåçíà÷èòåëüíî.
Òàêèì îáðàçîì, ìîðôîëîãè÷åñêèé è ìîðôîìåòðè÷åñêèé àíàëèç ïîêàçàë, ÷òî ó áåñïîðîäíûõ
êðûñ ñ õðîíè÷åñêèì àñåïòè÷åñêèì âîñïàëåíèåì
æåëåçû ââåäåíèå ÏÀÒ-ÏÑÀ â òå÷åíèå 1.5 ìåñ çàäåðæèâàåò ðàçâèòèå â íåé àòðîôè÷åñêèõ è ñêëåðîòè÷åñêèõ ïðîöåññîâ.  ÏÆ êðûñ, ïîëó÷àâøèõ
ÏÀÒ-ÏÑÀ, îòìå÷åíî òàêæå áîëåå âûñîêîå, ÷åì
â êîíòðîëå, ñîäåðæàíèå èîíîâ Zn, èãðàþùåãî
âàæíóþ ðîëü â ñâÿçûâàíèè àíäðîãåíîâ. Êðûñûñàìöû ñ õðîíè÷åñêèì âîñïàëåíèåì ÏÆ, ïîëó÷àâøèå ÏÀÒ-ÏÑÀ, õàðàêòåðèçîâàëèñü ïîâûøåííîé ïîëîâîé àêòèâíîñòüþ ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëüíûìè è èíòàêòíûìè æèâîòíûìè.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1. Áîíäàðåíêî Ë.À., Áðåñëîâñêèé À.Ñ. è äð. // Ïðîáë.
ýíäîêðèíîë. 1977. Ò. 23, ¹ 4. Ñ. 111-114.
2. Áóðåø ß., Áóðåøîâà Î., Õüþñòîí Äæ.Ï. Ìåòîäèêè è
îñíîâíûå ýêñïåðèìåíòû ïî èçó÷åíèþ ìîçãà è ïîâåäåíèÿ. Ì., 1991.
3. Âåðòàïåòîâ Á.À., Íèêàëàé÷óê Ñ.Ï., Øåðñòþê Ð.Ì.
// Ïðîáë. ýíäîêðèíîë. 1970. Ò. 16, ¹ 6. Ñ. 80-85.
4. Ãîëóá÷èêîâ Â.À., Ðîäîìàí Â.Å., Ðóäåíêî Á.Ï. // Óðîëîãèÿ. 2001. ¹ 4. Ñ. 15-21.
5. Ãðèãîðüåâ Ì.Ý., Ìàçî Å.Á. // Óðîë. è íåôðîë. 1998.
¹ 1. Ñ. 27-30.
6. Çàäîåâ Ñ.À., Åâäîêèìîâ Â.Â., Ðóìÿíöåâ Â.Á. è äð. //
Óðîëîãèÿ. 2001. ¹ 1. Ñ. 27-30.
7. Èëüèí È.È., Êîâàëåâ Þ.Þ., Ãëóçèí Ì.È. // Óðîë. è
íåôðîë. 1993. ¹ 3. Ñ. 30-33.
8. Ëîïàòèí Í.À. // Ìåæä. ìåä. æóðí. 1998. ¹ 1.
Ñ. 96-102.
9. Ìåðêóëîâ Ã.À. Êóðñ ïàòîëîãè÷åñêîé òåõíèêè. Ë., 1968.
10. Ìèëîâàíîâ À.Ï., Áðóñèëîâñêèé À.È. // Àðõ. àíàò.
1986. ¹ 8. Ñ. 72-78.
11. Ïîðòíîé À.Ñ., Ãðîçäîâñêàÿ Ô.Ë. Ðàê è àäåíîìà
ïðåäñòàòåëüíîé æåëåçû. Ë., 1984.
12. Ïðîñêóðà Î.Â. // Ðóêîâîäñòâî ïî êëèíè÷åñêîé óðîëîãèè / Ïîä ðåä. À.ß.Ïûòåëÿ. Ì., 1970. Ñ. 193-207.
13. Ferguston G.R., Botwick G.G., Oesterling J.E. // Eur.
Urol. 1995. Vol. 27. P. 8-12.
14. Hebel R., Stromberg M.W. // Anatomy of laboratory rat.
Baltimore, 1976. P. 66-73.
15. Wang M.M., Valenzuela L.A., Murphy G.P. et al. //
Investig. Urol. 1979. Vol. 17. P. 159-163.