Физиология системы крови Занятие №1 Тема: Понятие о системе крови и ее свойствах. Форменные элементы крови. Эритроциты. Гемоглобин. Цель занятия: усвоить значение крови как внутренней среды организма, изучить основные свойства эритроцитов, обучить студентов технике взятия крови, подсчету количества эритроцитов и определению количества гемоглобина в периферической крови у человека. Вопросы для самоподготовки 1. Кровь и лимфа как внутренняя среда организма. Понятие о системе крови. 2. Основные функции крови. Состав и количество крови. Гематокрит. Форменные элементы крови. 3. Эритроциты, их морфо-функциональная характеристика. Методы исследования. 4. Физиологическая роль эритроцитов. 5. Гемолиз, его виды. 6. Скорость оседания эритроцитов. Механизмы поддержания эритроцитов во взвешенном состоянии. 7. Механизмы регуляции эритропоэза. 8. Гемоглобин, его разновидности, количество, физиологическая роль, методы определения в клинической практике. Задания для самостоятельной работы и демонстрации. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Просмотр видеофильма «Форменные элементы крови». Изучить технику взятия крови у человека. Подсчитать количество эритроцитов в периферической крови человека. Определить количество гемоглобина по методу Сали. Вычислить цветной показатель крови. Определить скорость оседания эритроцитов. Наблюдать в пробирках явления физического и химического гемолиза. Обязательная литература. 1. Нормальная физиология. Под ред. В.М. Смирнова. М. Издательский центр «Академия». 2010, стр168-174. 2. Руководство к практическим занятиям по нормальной физиологии. Под ред. С.М. Будылиной, В.М. Смирнова. Изд.центр «Академия». 2010, с 76-79. Методические указания к заданию №2. Пипеткой отмеряют 4мл раствора 3% NaCl в чистую пробирку. Микропипеткой набирают 20мкл крови. Кончик пипетки вытирают фильтровальной бумагой или марлей, и кровь выдувают на дно пробирки. Пипетку тщательно промывают в верхнем слое раствора. Содержание пробирки перемешивают и оставляют до момента исследования. Подготавливают счетную камеру Горяева: протирают камеру с сеткой и покровное стекло. Затем покровное стекло притирают к камере, слегка надавливая на стекло таким образом. Чтобы по краям появились радужные полосы (это свидетельствует о требуемой высоте камеры – 0,1мм). Заполняют счетную камеру разведенной кровью, предварительно тщательно перемешав содержимое пробирки. Счет производится в 5 больших квадратах, каждый из которых разделен на 16 малых, т.е. в 80 малых квадратах. Для того чтобы одни и те же эритроциты, лежащие на линиях, не попадали дважды в счет, принято для каждого квадрата считать клетки расположенные на двух определенных линиях. Например: на левой и верхней линиях. Дальнейший расчет проводят по формуле: Х= а х 4000 х 200/80; Где Х – число эритроцитов, а - больших число эритроцитов в 5 квадратах, 1/4000 – объем одного малого квадрата, 200 – разведение, 80 – число малых квадратов. Методические указания к заданию №7. Для работы необходимо взять три пробирки и заполнить их различными растворами: 1пр.- 3мл дистиллированной воды; 2пр.- 3мл 3% раствора NaCl; 3пр.- 3мл 0,9% раствора NaCl и одна капля аммиака. В каждую пробирку добавить по капле крови. В выводах указать причину гемолиза. Ситуационные задачи к занятию №1. 1. При подсчете в 5 больших квадратах камеры Горяева оказалось 580 эритроцитов. Каково количество эритроцитов на литр крови? 2. Человек потерял 20% крови. Какое количество эритроцитов должно быть у него через час и через сутки? 3. Количество эритроцитов в 1л крови равно 5,5 1012/л, концентрация гемоглобина 140г/л. Определить цветной показатель. Отличается ли он от нормы? 4. Сколько содержится гемоглобина в крови, если количество эритроцитов равно 5 1012/л, ЦП = 1, а количество крови 4,5л. Занятие№2 Тема: Форменные элементы крови. Лейкоциты. Цель занятия: обучить студентов технике подсчета лейкоцитов в периферической крови человека, методике приготовления сухого мазка крови и определению лейкоцитарной формулы. Вопросы для самоподготовки. 1. Лейкоциты, их виды, количество, методы подсчета. 2. Понятие о лейкоцитозе и лейкопении. Виды физиологического лейкоцитоза. 3. Лейкоцитарная формула, ее значение в клинической диагностике. 4. Физиологические свойства отдельных видов лейкоцитов. 5. Понятие о ядерных сдвигах. Регенеративные и дегенеративные сдвиги. Их диагностическое значение. 6. Механизмы регуляции лейкопоэза. Задания для самостоятельной работы и самоподготовки. 1. Подсчитать количество лейкоцитов в периферической крови у студентов в состоянии покоя и после физической нагрузки. 2. Приготовить сухой мазок крови (окраска по Романовскому – Гимза). 3. Подсчитать лейкоцитарную формулу в сухом мазке крови. Обязательная литература. 1. Нормальная физиология. Под ред. В.М. Смирнова. М. Издательский центр «Академия». 2010, стр175-180. 2. Руководство к практическим занятиям по нормальной физиологии. Под ред. С.М. Будылиной, В.М. Смирнова. Изд.центр «Академия». 2010, с 85. Методические указания к заданию №1. Разводят исследуемую кровь в 20 раз. Для этого в сухую пробирку наливают 0,4мл 35% уксусной кислоты. Набирают в микропипетку 20мкл крови. Кончик пипетки вытирают фильтровальной бумагой или марлей. Выдувают кровь из микропипетки на дно пробирки. Тщательно перемешивают. Подготовленную камеру Горяева заполняют полученным раствором. Лейкоциты подсчитывают в 25 больших квадратах. Дальнейший расчет производится по формуле: Х=Л х 4000 х 20/400; где Х – искомое количество лейкоцитов в 1мм3 , Л-сумма лейкоцитов в 400 малых квадратах (25 больших квадратов). Методические указания к заданию №2. Предметное стекло берется большим и указательным пальцами левой руки по длине стекла. Концом стекла вблизи указательного пальца, отступая на 1см от его края, прикасаются к свежей капли крови. После этого берут в правую руку шлифованное стекло, фиксируя его большим и указательным пальцами, ставят его на предметное стекло под углом 45о впереди капли крови. Скользя по предметному стеклу, распределяют кровь по предметному стеклу. Затем мазок фиксируют. Для этого высохший мазок крови погружают в смесь Никифорова, состоящую из равных частей спирта и эфира, или в чистый спирт на 15-20 минут. Затем мазок извлекают пинцетом, ставят в вертикальное положение на фильтровальную бумагу и после испарения спирта окрашивают. Окраска мазка производится рабочим раствором Романовского-Гимза. Методические указания к заданию №3. Сухой мазок крови рассматривают под микроскопом при помощи иммерсионного объектива. На предметный столик помещают сухой мазок крови с каплей иммерсионного масла. Мазок фиксируют большим и указательным пальцами левой руки, оставляя правую руку свободной для работы на винтах микроскопа. При подсчете лейкоцитарной формулы необходимо соблюдать одну и ту же методику, Рекомендуется считать в первой, средней и последней трети мазка. Подсчитывают 100-200 клеток белой крови и результаты выражают в процентах. Ситуационные задачи к занятию №2. 1. Подсчитать лейкоцитарную формулу, если общее количество лейкоцитов 8,0 х 109/л, в том числе эозинофилов 0,1 х 109/л, базофилов 0.02 х 109/л, нейтрофилов 6,0 х 109/л, лимфоцитов 1,5 х 109/л. Моноцитов 0,3 х 109/л. Оцените результаты данного анализа. 2. Какие изменения в составе крови могут наблюдаться при воспалительных процессах, при мышечной работе, после приема пищи. Занятие№3. Тема: Плазма крови. Свертывающая, антисвертывающая и фибринолитическая системы крови. Физиологические основы переливания крови. Цель занятия: изучить систему свертывания крови, ознакомиться с физиологическими основами переливания крови. Вопросы для самоподготовки. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Плазма крови. Минеральные и органические составные части плазмы крови. Белки плазмы крови, их фракции, функциональное значение. Основные физико-химические константы крови и механизмы их регуляции. Механизмы свертывания крови. Антисвертывающая система крови. Тромбоциты, их количество, структура и функции. Возрастные изменения гемостаза. Показатели свертывания крови и лабораторные методы определения их. Группы крови. Резус-фактор. Задания для самостоятельной работы и демонстрации. 1. 2. 3. 4. Определение времени кровотечения. Определение времени свертывания крови. Определение групповой принадлежности крови. Определение резус-фактора. Обязательная литература. 1. Нормальная физиология. Под ред. В.М. Смирнова. М. Издательский центр «Академия». 2010, стр180-188. 2. Руководство к практическим занятиям по нормальной физиологии. Под ред. С.М. Будылиной, В.М. Смирнова. Изд.центр «Академия». 2010, с 86-91. Ситуационные задачи к занятию №3. 1. Можно ли больному с повышенной свёртываемостью крови ввести в кровь лимоннокислый или щавелевокислый натрий? Если нет, то почему? 2. Больному с повышенным артериальным давлением и склонностью к тромбообразованию рекомендуется применять медицинские пиявки. Почему? 3. При определении групп крови непрямым методом оказалось, что агглютинация крови реципиента произошла в каплях I и II групп стандартных сывороток. Какой группы кровь обследуемого, и почему произошла агглютинация? 4. Перед переливанием крови принято учитывать агглютинины крови реципиента и агглютиногены донорской крови. Как объяснить это «золотое правило» гемотрансфузии? В каком случае оно не состоятельно и почему? 1. 2. 3. Вопросы коллоквиума. Понятие о системе крови, ее свойствах и функциях. Состав крови. Основные константы крови и механизмы их поддержания. Характеристика форменных элементов крови и их роль в организме. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. Эритроциты, их структурно-функциональные особенности. Гемоглобин. Виды гемоглобина, его содержание. Функциональное значение. Гемолиз. Причины возникновения гемолитических реакций. Лейкоциты. Морфо-функциональная характеристика отдельных элементов белой крови. Лейкоцитоз. Нейрогуморальная регуляция лейко- и эритропоэза. Плазма крови, ее электролитный состав, осмотическое давление. Белки плазмы крови, их характеристика, функциональное значение, онкотическое давление и его роль. Понятие о гемостазе. Процесс свертывания крови и его фазы. Факторы, ускоряющие и замедляющие свертывание крови. Свертывающая и противосвертывающая системы крови. Возрастные изменения гемостаза. Группы крови. Резус-фактор. Физиологические основы переливания крови. Кровезамещающие растворы. Тканевая жидкость, лимфа, ликвор. Их состав и количество, функциональное значение. Ответы к ситуационным задачам. Занятие №1. 1. В 5 больших квадратах содержится 80 малых, объем каждого из них 1/4000мм3. Кровь для подсчета разведена в 200 раз, поэтому в 1мкл крови содержится ( 580 х 4000х200) : 80 = 5880000 эритроцитов или в ед. системы СИ – 5,88 х 1012/л. 2. Через час число эритроцитов будет почти нормальное, т.к. в это время объем крови еще не восстановился и разведение плазмой крови еще не произошло. Через сутки после кровопотери число эритроцитов примерно на 20% меньше обычного, т.к. общее количество крови восстанавливается в основном за счет жидкости (срочная регуляция объема крови). 3. Подставив цифры в формулу для определения цветного показателя, находим, что он равен 0,85. Норма 0,9 – 1,0. 4. При данных условиях содержание гемоглобина в крови равно 16,6г%. В 4,5л крови при такой концентрации его содержится 750г. Занятие№2. 1. Лейкоцитарная формула данной крови: эозинофилов – 1,25%, базофилов – 0,25%, нейтрофилов – 75%, лимфоцитов – 18,7%, моноцитов – 4,8%. Отмечается абсолютный нейтрофилез. 2. При воспалительных процессах в периферической крови увеличивается количество лейкоцитов и происходят, помимо других изменений, изменения в лейкоцитарной формуле. При мышечной работе и после приема пищи лейкоцитоз – физиологический, т.е. перераспределительный. Занятие №3. 1. Нет, так как связывание кальция, его осаждение соответственно лимоннокислым и щавелевокислым натрием приводит к серьёзным нарушениям жизнедеятельности организма. 2. Медицинские пиявки уменьшают объём циркулирующей крови и, тем самым, уменьшают систолический выброс и снижают АД. Кроме того, гирудин, образующийся в слюнных железах пиявки, является одним из биологических антикоагулянтов. 3. У обследуемого III группа крови, в эритроцитах которой содержится агглютиноген В. В сыворотке крови I и II групп крови находятся агглютинины αβ и β соответственно взаимодействие между α и β. 4. Донорскую кровь обычно переливают сравнительно небольшими порциями. Титр агглютининов донорской крови при этом низок, это исключает агглютинацию эритроцитов реципиента. При массовых переливаниях (1 л и больше) титр агглютининов донора в крови реципиента становится высоким, что может вызывать агглютинацию эритроцитов реципиента.