Пневмококки Семейство Streptococcaceae Род Streptococcus Вид S. pneumoniae Грамположительные диплококки ланцетовидной формы, окруженные общей капсулой, неподвижны S. pneumoniae (чистая культура). Окраска по Граму. Морфология S. pneumoniae в гное. Окраска по Граму. Вокруг диплококков видна неокрашенная капсула Электронная микрофотография S. Pneumoniae. Видны пили Культуральные свойства • Факультативные анаэробы • Биохимически малоактивны • Растут на средах с кровью и сывороткой • На кровяном агаре образуют зеленоватую зону гемолизаальфа-гемолиз • Чувствительны к оптохину и желчи, что отличает их от остальных стрептококков Классификация стрептококков по гемолитическим свойствам Антигенная классификация По капсульному полисахариду выделяют 90 серотипов. В основе серотипирования – реакция набухания капсулы ( в присутствии специфических антител капсула увеличивается в размерах) Факторы патогенности • • • • • • • • Пили и поверхностные белки обеспечивают адгезию и колонизацию (тропизм к слизистой дыхательных путей); Капсула – антифагоцитарный фактор; Тейхоевые и липотейхоевые кислоты клеточной стенки участвуют в адгезии и инвазии, взаимодействуют с С-реактивным белком Все компоненты клеточной стенки выступают как активаторы воспаления: активируют комплемент по альтернативному пути, хемотаксис лейкоцитов, индуцируют продукцию интерлейкина-1 и интерлейкина-6, фактора некроза опухолей; Нейраминидаза и IgA-протеаза – способствуют адгезии и колонизации; Ферменты инвазии – гиалуронидаза и пептидаза; Перекись водорода – разрушает клетки хозяина и может индуцировать апоптоз нервных клеток при менингите; Токсины: гемолизин=пневмолизин (Ply) – образует поры, может стать причиной цитолиза и активации комплемента Патогенез пневмококковых инфекций Патогенез пневмококковой пневмонии • Входные ворота –слизистая оболочка носоглотки, (вышеперечисленные факторы обеспечивают адгезию, колонизацию слизистой и устойчивость к фагоцитозу) • Компоненты клеточной стенки пневмококков запускают каскад воспалительных реакций, пневмолизины и др. усиливают воспаление и разрушают клетки, что способствует инвазии • Решающий фактор развития пневмонии– появление секрета (мокроты) в альвеолах в результате ОРВИ, интоксикации, хронической сердечной недостаточности, механической обструкции • На первой стадии процесса пневмококки размножаются в альвеолах, которые в результате воспалительного процесса переполняются серозной жидкостью, что приводит к забросу содержимого в соседние альвеолы, распространению процесса и нарушению газообмена • Далее ферменты гиалуронидаза, пептидазы, пневмолизин обеспечивают распространение процесса в ткани легкого Патогенез (продолжение) • На второй стадии процесса происходит инфильтрация легочной ткани нейтрофилами, а затем эритроцитами (наблюдается выпадение фибрина) • Пораженные доли легкого приобретают консистенцию печени, имеют серый или темно-красный цвет (стадия серой или красной гепатизации). Происходит выделение «ржавой» мокроты • На третьей стадии процесса легочные альвеолы наполнены нейтрофилами и остаточными пневмококками, возможно поражение соседних участков легких, что проявляется как уплотнение, или фиброз легких • На четвертой стадии - нейтрофилы замещаются макрофагами, выпот рассасывается и восстанавливается структура легочной ткани. • Если инфекция прогрессирует, пневмококки могут попасть в кровь. Бактериемия может стать причиной развития менингита, эндокардита, артрита, а также отита и конъюнктивита Иммунитет • После перенесенной инфекции устанавливается типоспецифический иммунитет • В ходе развития пневмонии появление специфических антител совпадает с кризом (резким падением температуры) и началом выздоровления. Эпидемиология • • • • • • • Streptococcus pneumoniae входит в состав транзиторной нормальной микрофлоры верхнего дыхательного тракта; Может вызывать пневмонию, синусит и отит, менингит; Источником инфекции являются бактерионосители Путь передачи – воздушно-капельный Группу риска составляют дети до 4 лет и лица старше 60 С 1995 года возросла распространенность штаммов с множественной лекарственной устойчивостью Применение пневмококковой вакцины позволило резко снизить заболеваемость Лечение Механизм действия антибиотиков Специфическая профилактика • Для профилактики разработана поливалентная вакцина, включающая капсульные полисахаридные антигены 23 сероваров (Пневмо23, Авентис Пастер, Франция) • Вакцина показана группам риска • Для вакцинации детей в России зарегистрирована семивалентная конъюгированная вакцина Prevnar(PCV-7) компании Вайет Pfizer Inc. – содержит капсульный полисахариды семи серотипов пневмококков и дифтерийный анатоксин • С 2010 года Prevnar (PCV13 -Conjugate) Лабораторная диагностика инфекций,вызванных S.pneumoniae Клинический материал: гной, мокрота, кровь, экссудат, спиномозговая жидкость, сыворотка и др. Методы: 1. Бактериоскопический 2. Бактериологический (культуральный) - основной 3. Серологический (реакция коагглютинации, ИФА, латексагглютинация, иммуноэлектрофорез) для обнаружения антител и/или полисахарида С клеточной стенки в любых жидкостях организма (кровь,сыворотка,спиномозговая жидкость,слюна) 4. Биологический метод (заражение мышей с последующим выделением чистой культуры) 5. Иммунофлуоресценция (быстрая диагностика). Бактериоскопический метод • Микроскопия мазков мокроты (окраска по Граму): обнаруживают Грам+ ланцетовидные диплококки и лейкоциты (не менее 10 стрептококков/поле зрения • Важно выявить наличие капсул (окраска простым методом или по Бурри-Гинсу) • Применяют также метод набухания капсул по Нейфельду: на предметное стекло наносят каплю мокроты и каплю антикапсульной пневмококковой сыворотки, подкрашивают метиленовым синим и накрывают покровным стеклом - положительный результат: капсулы значительно увеличиваются в размере Бактериологический метод 1 этап: посев клинического материала (мокрота, кровь и др.) на кровяной агар. Инкубирование в присутствии 5-10% CO2. 2 этап: Макроскопическое изучение колоний (альфа-гемолиз),мазок по Граму; отсев типичной колонии на свежий агар 3 этап: Идентификация по совокупности свойств: культуральных, морфологических, тинкториальных, биохимических по системе API20 Strept.; чувствительности к оптохину; вирулентных; антигенных (серологическая идентификация в реакции набухания капсулы); чувствительности к антибиотикам. Иммунофлуоресценция Streptococcus pneumoniae