Исследование иммунного статуса Иммунологическое обследование Сбор анамнеза Объективное обследование Лабораторное обследование Трактовка полученных данных Методы оценки иммунного статуса Скрининговые Уточняющие Т-клеточная система Скрининг: - общее число лимфоцитов - CD3, CD4, CD8 Уточняющие: - активационные маркеры CD25, HLA-DR - продукция цитокинов - IL-2, IL-4, TNF-α, IFN-γ - готовность к апоптозу – CD95 - РБТЛ B-клеточная система Скрининг: - определение CD19+, CD20+ - определение сывороточных иммуноглобулинов A, M, G, E - ЦИК Уточняющие: - специфические иммуноглобулины - продукция цитокинов IL-6 - РБТЛ Система фагоцитов Скрининг: - оценка абсолютного числа - активность фагоцитоза - НСТ-тест или хемилюминесценция Уточняющие: - хемотаксис - адгезия - завершенность фагоцитоза - исследование функции макрофагов Возможные ошибки при исследовании иммунного статуса Преаналитические ( > 50%) - обоснованность назначения - биологические ритмы - физическая нагрузка - лекарственная терапия - забор, транспортировка, хранение материала Аналитические Постаналитические Иммунограмма при воспалительной реакции Иммунная система может функционировать в двух принципиально различных режимах: относительно спокойная работа в стадии клинического здоровья активная работа при воспалительных инфекционных заболеваниях Инкубационный период Снижение относительного количества Тлимфоцитов Стадия продромы Снижение относительного количества эозинофилов Снижение относительного и абсолютного количества базофилов Снижение относительного количества Тлимфоцитов, повышается процент NK Начало клинической картины Лейкоцитоз Увеличение относительного и абсолютного количества нейтрофилов Сдвиг ядерной формулы нейтрофилов влево Снижение количества эозинофилов, вплоть до эозинопении Снижение количества Т-лимфоцитов, повышение уровня NK, снижение количества Т-цитотоксических лимфоцитов Возрастает фагоцитарная активность нейтрофилов Развернутая клиническая картина Лейкоцитоз максимальный Повышение количества моноцитов Содержание нейтрофилов в середине стадии нормализуется, ядерный сдвиг максимальный Повышение СОЭ Повышение фагоцитарной активности нейтрофилов Кризис заболевания, окончание клинических проявлений Нормализация уровня эозинофилов («заря выздоровления») Увеличение относительного количества Влимфоцитов Увеличение количества Т-цитотоксических лимфоцитов по отношению к Т-хелперам Восстановление количества Тлимфоцитов, нормализация NK Снижение лейкоцитоза, нормализация сдвига Реконвалесценция Сниженное количество Т-лимфоцитов, повышенный уровень NK Повышенный уровень В-лимфоцитов Повышенная СОЭ Возрастные особенности Клеточный иммунитет Тимус закладывается на втором месяце внутриутробного развития. Максимальное развитие – в 11-15 лет. После наступления половой зрелости – атрофия. На ранних стадиях онтогенеза тимус контролирует и направляет созревание иммунокомпетентных клеток, на поздних – обеспечивает сохранность и целостность иммунологических реакций. Гуморальный иммунитет Синтез специфических антител у новорожденного развит, но общий уровень иммуноглобулинов низкий, за исключением IgG (трансплацентарный перенос от матери). Исключение: внутриутробные инфекции приводят к активной выработке антител. Материнский IgG – период полужизни 30 дней. Гуморальный иммунитет IgM – уровень синтеза, характерный для взрослых, достигается к 9 месяцу жизни. IgA – отсутствует в течение первого месяца жизни, к концу года – 25% от количества у взрослых, 8-15 лет – уровень взрослых. IgE – следовые количества, 11-12 лет – уровень взрослых Неспецифический иммунитет На момент рождения – несовершенная завершающая фаза фагоцитоза. Формируется к 2-6 месяцу жизни. Комплемент – активность у новорожденных около 50% от уровня взрослых, нормализация уже после 1 месяца жизни. Критические периоды детского возраста 1. 2. 3. Период новорожденности. Слабая устойчивость к инфекционновоспалительным процессам. 4-6 месяцев. Транзиторная гипоиммуноглобулинемия. Склонность к острым респираторным инфекциям, пневмонии. 2-3 года. Низкий уровень иммуноглобулинов, незрелые механизмы регуляции иммунного ответа. Склонность к аутоиммунным, аллергическим, инфекционно-аллергическим заболеваниям. Критические периоды детского возраста 4. 5. 4-6 лет. Перекрест клеточных элементов крови – снижение количества лимфоцитов. Низкий уровень иммуноглобулинов. 12-15 лет. Повышение уровня половых гормонов приводит к подавлению клеточного иммунитета. Интерпретация иммунограммы Клинический анализ крови Количество лейкоцитов Повышение: - инфекция - воспаление - лейкозы Снижение: - иммунодефицитное состояние Клинический анализ крови Количество эритроцитов Повышение: - гемобластозы Снижение: - кровотечение - гематологическое заболевание - сепсис или хроническая инфекция - опухолевое заболевание - недостаточное питание - глистная инвазия - вторичные иммунодефицитные состояния Клинический анализ крови Количество тромбоцитов Повышение: - нарушения в системе свертывания Снижение: - хронический стресс - аутоиммунный процесс - токсическое воздействие (в т.ч. и медикаментозное) Клинический анализ крови Скорость оседания эритроцитов Повышение: - инфекция - воспаление (в т.ч. при системных заболеваниях) - опухолевый рост - анемия Снижение: - мастоцитома Клинический анализ крови Количество лимфоцитов Повышение: - хроническая инфекция бактериями или простейшими - аутоиммунные и аллергические заболевания - лимфопролиферативные заболевания Клинический анализ крови Количество лимфоцитов II Снижение: - хронические инфекции, преимущественно вирусные - химио- или радиотерапия - длительное лечение антибиотиками - аплазия костного мозга - хронический стресс - наркомания, алкоголизм Клинический анализ крови Количество нейтрофилов Повышение: - системное воспаление - остеомиелит - септическое состояние - обострение бронхиальной астмы Снижение: - иммунодефицитное состояние Клинический анализ крови Количество эозинофилов Повышение: - аллергические заболевания - глистные инвазии - лейкоз эозинофильный - чрезмерное употребление анальгетиковингибиторов простагландинов Клинический анализ крови Количество базофилов Повышение: - бронхиальная астма, обострение Т-клеточное звено CD3+ % Повышение: - резко поляризованный Th1 иммунный ответ на вирусный антиген Снижение: - иммунодефицитное состояние - увеличение доли В-лимфоцитов при Th2 иммунном ответе Т-клеточное звено CD3+ / мл Повышение: - лимфоцитоз - резко поляризованный Th1 иммунный ответ Снижение: - Т-клеточное иммунодефицитное состояние - лимфопения Т-клеточное звено CD4+ %, CD4+ /мл Повышение: - Th2 иммунный ответ - обострение аллергических заболеваний - аутоиммунный ответ, с образованием аутоантител Снижение: - Т-клеточное иммунодефицитное состояние, в т. ч. и ВИЧ-инфекция Т-клеточное звено CD8+ %, CD8+ /мл Повышение: - опухолевый рост - поствакцинальный период - аллотрансплантация Снижение: - аутоиммунные и аллергические заболевания - миграция CD8-лимфоцитов в ткани при инфекционных и опухолевых заболеваниях Т-клеточное звено CD3+ CD4- CD8- («двойные негативы») В норме не более 3-5% - незрелые Тлимфоциты Повышение: - нарушение созревания Т-клеток – при аутоиммунных заболеваниях, воздействии ионизирующего излучения Т-клеточное звено CD3+ CD4+ CD8+ («двойные позитивы») В норме не более 5% - поздний этап созревания Т-лимфоцитов Повышение: - нарушение созревания Т-клеток – при аутоиммунных заболеваниях Т-клеточное звено Соотношение CD4/CD8 Повышение: - увеличение CD4 при нормальном количестве CD8: Th2-ответ на алло- или аутоантиген - снижение CD8: миграция Т-киллеров в ткани при инфекционном, аутоиммунном, аллергическом процессе - увеличение CD4 и снижение CD8: смешанный Th1/Th2 ответ на алло- или аутоантиген Т-клеточное звено Соотношение CD4/CD8 Снижение: - увеличение CD8 при нормальном количестве CD4: Th1-ответ при вирусной или бактериальной инфекции - снижение CD4: усиленный апоптоз CD4-лимфоцитов, ВИЧ-инфекция - увеличение CD8 и снижение CD4 Т-клеточное звено Т-клетки CD25+ (рецептор для IL-2) Повышение: - активация иммунной системы во время ответа на антиген, пролиферация Т-клеток Снижение: - ВИЧ-инфекция - отсутствие CD25 – первичный иммунодефицит В-клеточное звено CD20+ %, CD20+ /мл Повышение: - Th2 иммунный ответ при инфекциях, вызванных бактериями, простейшими, грибами - аутоиммунные и аллергические заболевания, протекающие по Th2-типу Снижение: - активное антителообразование - накопление В-лимфоцитов в органемишени - первичный В-клеточный иммунодефицит Натуральные киллеры CD16+/56+ %, CD16+/56+ /мл Повышение: - вирусные и бактериальные инфекции, опухолевые процессы - аллергические и аутоиммунные процессы Т.е. процессы связанные с массивным поступлением антигена и подключением неспецифического иммунного ответа Снижение: - длительная хроническая инфекция - злокачественный рост - миграция NK-клеток в патологический очаг Клетки с HLA II В-клетки, активированные Тлимфоциты, моноциты Повышение: - активный иммунный ответ Снижение: - аутоиммунные заболевания - злокачественный опухолевый рост Клетки CD95+ Отражает активацию иммунной системы, так же является маркером готовности к апоптозу Повышение: - острая вирусная инфекция - вирусный гепатит - некоторые стадии ВИЧ-инфекции Снижение: - аутоиммунные заболевания - злокачественный опухолевый рост Иммуноглобулины IgG Повышение: - острые и хронические инфекции - аутоиммунные заболевания - миеломная болезнь - гаммапатии - хронический лимфолейкоз Снижение: - иммунодефицитное состояние Иммуноглобулины IgМ Повышение: - острые инфекции - аутоиммунные заболевания - миеломная болезнь - гаммапатии - острый и хронический лимфолейкоз Снижение: - иммунодефицитное состояние - хроническая вирусная инфекция Иммуноглобулины IgА Повышение: - острые и хронические инфекции - аутоиммунные заболевания - миеломная болезнь - гаммапатии - хронический лимфолейкоз - цирроз печени - кандидоз - болезни дыхательных путей Снижение: - иммунодефицитное состояние - острая вирусная, хроническая бактериальная инфекция Иммуноглобулины IgЕ Повышение: - аллергические заболевания - гельминтозы - гипер-IgE-синдром (с-м Джоба) - селективный IgA-дефицит - тимусная аплазия (с-м Ди-Джорджи) - IgE-миелома Снижение: - иммунодефицитное состояние Циркулирующие иммунные комплексы Повышение: - инфекции - системные заболевания, васкулиты Фагоцитарная активность нейтрофилов Повышение: - бактериальные инфекции - лейкоцитоз - аллергические заболевания - реакции отторжения трансплантата Снижение: - хронические воспалительные процессы - врожденные дефекты, иммунодефицитные состояния - новообразования - недостаток белка