Лимфопролиферативные заболевания

Диагностика
лимфопролиферативных
заболеваний
Минск, 1 декабря 2015
Роль проточной цитометрии в
классификации опухолей
лимфоидной ткани
Идентификация клеточной линии и стадии
развития В-, Т, НК-лимфоцитов
Выявление клональной популяции
лимфоцитов
Детальная характеристика
иммунофенотипа интересующей нас
популяции клеток
Клиника
Цитогенетика
Молекулярные исследования
Морфология
Иммуногистохимия
Иммунология
Лимфопролиферативные
заболевания – клональные
опухоли, возникающие на
разных стадиях
дифференцировки
лимфоцитов
Роль антигенов в патогенезе лимфом
Антиген
Опухоль
H.pylori
MALT-лимфома желудка
Chlamydia psittaci
ЛМЗ орбиты
Campylobacter jejuni
MALT-лимфома кишки
Chlamydia pneumoniae
ЛМЗ легкого
Borrelia burgdorferi
Лимфомы кожи
E. coli
MALT-лимфома мочевого пузыря
Вирус гепатита С
ЛМЗ селезенки
ВИЧ
ДВКЛ, ММ
HTLV-I
Т-клеточный лейкоз/лимфома
взрослых
ВЭБ
Лимфома Беркитта, лимфома
Ходжкина
Костный мозг
Лимфоидные органы
Предшественники
В-лимфоцитов
CD34, CD10, TdT,
CD19, CD20, CD79a
В-ЛБЛ/
ОЛЛ
Ki-67 
IgVmut
Лимфома из клеток
зоны мантии
CD5, CD23-, CD43,CD19,
IgM+IgD
Наивная
В-клетка
В-клетки
памяти (CD19,CD20,
IgM, IgVmut)
ЛКМЗ
В-ХЛЛ,
MALTлимфома
CD19+CD5+
СD23+
Центр фолликула
ПК (CD138,
CD38,cytIg
IgG>IgA>IgD)
В-ХЛЛ
Миелома
Лимфома Беркитта
(Ki-67  )
ЛГМ
Фолликулярная
лимфома
CD10,BCL6,CD19,
Диффузная
крупноклеточная
В-клеточная лимфома
(CD19, CD10, Ki-67  )
Хронический лимфолейкоз
 Составляет около 40% всех случаев лейкозов у лиц
старше 65 лет
 Частота встречаемости – 4,0-4,5 на 100000 населения,
30% в странах Европы, 2-5% -Азия, реже в Японии,
чем в Китае
 Возраст – около 70% больных заболевают в возрасте
между 60 и 70 годами, м:ж - 2:1. Лица негроидной
расы -1,3% (м), 0,3% (ж)
 В США –15500 новых случаев/год, смертность -4500
случаев в год, 95000 больных ХЛЛ.
Субстрат В-ХЛЛ- АГ-стимулирующие
В-лимфоциты: доказательства
 Фенотип сходен с АГ-представляющими,
активированными В-лц (CD23,CD25,CD69;
снижение экспрессии CD22, CD79b, IgD)
 Экспрессия CD38, ZAP-70 ассоциируется с
повышением В-клеточного рецепторного
сигнального комплекса
 Продукция полиреактивных и аутореактивных
антител против общих антигенов
J.A.Burger,P.Ghia,A.
Rosenwald, F.Caligaris-Cappio, Blood,2009,114,3367-3375
Диагностические критерии ХЛЛ
Моноклональный В-клеточный лимфоцитоз - >5000 в
1 мкл крови
Моноклональная пролиферация лимфоцитов с
фенотипом СD19+CD5+CD23+bright or intermed
CD79b+dimCD20+dimCD22+dimFMC7-CD43+sIgdim
Более 30% лц в КМ
M.Hallek et al., Blood,2008,111,12,5446-5456
ХЛЛ
CD19/CD5
CD20/CD23
R1
Pa tie nt ID: IVLE V
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te % Gated
G1
48 .8 8
G2
36 .7 7
CD38/CD19
Pa tie nt ID: IVLE V
Tu be : CD38 /CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
42 .2 9
3.90 17 9.60
UR
22 .7 8
16 .8 8 19 8.92
LL
24 .3 3
3.72
2.20
LR
10 .6 0
41 .7 5
2.02
Pa tie nt ID: IVLE V
Tu be : CD45 /CD1 4
Pa tie nt ID: IVLE V
Tu be : CD3/Cd1 6+5 6
Pa tie nt ID: IVLE V
Tu be : CD19 /CD5
Pa tie nt ID: IVLE V
Tu be : CD20 /CD2 3
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.00
***
***
UR
0.37 15 9.79 18 3.88
LL
0.55
7.27
1.62
LR
99 .0 8 22 7.58
2.20
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
26 .7 5
1.40
69 .9 8
UR
11 .7 0 38 7.64
62 .6 9
LL
45 .2 2
1.75
2.74
LR
16 .3 3 29 5.73
2.97
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
24 .8 2
1.18 33 0.17
UR
61 .3 5
60 .4 8 10 1.33
LL
12 .7 0
2.39
1.86
LR
1.13
92 .0 1
2.61
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
13 .1 4
2.84
46 .1 4
UR
44 .0 9
24 .5 0
76 .7 0
LL
34 .5 5
2.46
1.93
LR
8.23
59 .7 0
2.39
CD43/CD20
CD19k
CD19λ
Pa tie nt ID: IVLE V
Tu be : CD43 /CD2 0
Pa tie nt ID: IVLE V
Tu be : k F(a b)/I F(ab )/CD 19
Pa tie nt ID: IVLE V
Tu be : k F(a b)/I F(ab )/CD 19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
1.13
1.23 54 0.76
UR
70 .0 1
54 .9 8
53 .8 0
LL
1.04
2.50
2.09
LR
27 .8 2 14 8.53
1.94
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.53
3.78
35 .0 5
UR
59 .1 6
40 .5 8
50 .6 0
LL
34 .9 8
2.83
1.98
LR
5.33
53 .7 5
1.51
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
59 .4 5
3.20
50 .5 2
UR
0.31 61 3.03
29 .2 2
LL
38 .0 5
3.35
1.93
LR
2.19 16 7.65
1.54
ХЛЛ/лимфоцитарная лимфома
• ХЛЛ- динамичная опухоль
• Состоит из двух отделов: пролиферирующего
и накопительного. Баланс между ними
отражается на течении заболевания. Скорость
обновления – 109 клеток /день.
• Фракция CD38+ характеризуется большей
пролиферативной активностью, чем CD38• Большинство опухолевых клеток в Go- фазе
клеточного цикла
• Апоптоз подавлен, высокий уровень bcl-2
Фактор риска ХЛЛ – семейный
анамнез
 8-10% первичных больных ХЛЛ имеют семейный
анамнез (наследственный характер). Описаны семьи с
4 и более случаями ХЛЛ. Всего более 200 семей
 Самая высокая генетическая предрасположенность
 Частота развития ХЛЛ в 3 раза выше у родственников
больных, а ЗЛ – в 10 раз выше
 Чаще регистрируется у родственников первого
поколения (риск выше в 7-8,5 раз)и в более молодом
возрасте.
 Полиморфизмы генов, ассоциирующихся с ХЛЛ:
CCNH, APAF1, IL16, CASP8, NOS2A и CCR7
У 50-60% больных ХЛЛ – цитогенетические
абберации (11,12,13,17 хромосомы).
del(17р13) , мутации TP53- наихудший
прогноз, del(11q22)- вариант без мутаций
IgVH – промежуточный прогноз, вариант с
мутациями – наилучший прогноз
Трисомия 12 (более агрессивное течение)
del(13q14) –благоприятный прогноз
Хронический лимфолейкоз
Два варианта В-ХЛЛ: ХЛЛ без соматических
мутаций вариабельного региона Ig (IgVmut-) и
ХЛЛ с соматическими мутациями (IgVmut+)
Группа больных IgVmut- характеризуется
неблагоприятным прогнозом по сравнению с
пациентами группы IgVmut+
Мутационный статус генов вариабельного
региона Ig может служить прогностическим
маркером.
Случай ХЛЛ с атипичным иммунофенотипом
CD19λ+CD5+CD23-CD200+CD160+
Случай лимфомы из клеток зоны мантии
CD19κ+CD5+CD23-CD200-CD160-
0%
0%
Прогностические биомаркеры
ХЛЛ (CD38, ZAP-70, CD49d)
 CD38 - экспрессия CD38 на более 6% опухолевых
клеток коррелирует с более короткой выживаемостью
больных
 ZAP-70 (70-kD zeta – chain associated protein kinase)
суррогатный маркер мутационного статуса
вариабельных участков генов ИГ. Экспрессия
выявлена при ХЛЛ без мутаций.
 Экспрессия ZAP-70 при ХЛЛ приводит к более
эффективной передачи сигнала, что коррелирует с
более агрессивным течением
 Резистентность клеток В-ХЛЛ к апоптозу связана с
экспрессией ZAP-70. В этих же клетках повышена
экспрессия Bcl2(антиапоптозный белок)
ZAP-70 –находится в норме на Т-, активированных НК-клетках, как
ключевая полифункциональная сигнальная молекула.
Опосредует дифференцировку и функционирование Т-л посредством
активации различных сигнальных путей
На нормальных циркулирующих В-лимфоцитах ZAP-70 не
экспрессируется, а в проведении сигналов участвует родственная ей
тирозинкиназа Syk. Однако ZAP-70 присутствует на опухолевых клетках в
некоторых случаях ХЛЛ, что, вероятно, связано с усилением передачи
сигналов от BCR (Chen et al. 2007).
Адгезия клеток ХЛЛ к строме
ZAP-
ХЛЛ
Строма
ZAP+
R1
Pa tie nt ID: K RAUL IZ
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te % Ga ted
G1
93 .5 7
G2
0.19
G3
93 .1 3
Patient ID: KRAULIZ
Tube: CD45/CD14
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
0.00
***
***
UR
0.06 168.37
21.00
LL
0.11
4.40
1.63
LR
99.83
90.15
2.79
Pa tie nt ID : KR AUL IZ
Tu be : CD3/Cd1 6+56
Ga te: G1
Qu ad % Ga ted X Mea n Y Mea n
UL
0.60
1.60 48 3.21
UR
0.05 20 8.71
73 .1 6
LL
98 .3 0
1.99
1.82
LR
1.05 20 7.09
3.91
Patient ID: KRAULIZ
Tube: CD19/CD5
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
1.01
1.28 497.75
UR
98.53
57.99 250.13
LL
0.45
2.33
1.78
LR
0.00
***
***
CD38/CD20
Patient ID: KRAULIZ
Tube: CD38/CD20
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
95.65
1.67
93.60
UR
1.89
10.28
93.09
LL
1.57
2.24
3.60
LR
0.89
63.38
2.52
Pa tie nt ID : KR AUL IZ
Tu be : CD20 /CD2 3
Ga te: G1
Qu ad % Ga ted X Mea n Y Mea n
UL
2.80
4.80
62 .9 8
UR
88 .5 8
57 .5 0 14 4.12
LL
2.16
3.44
2.68
LR
6.46
39 .1 4
3.87
ZAP70/CD19
Patient ID: KRAULIZ
Tube: CD43/CD19
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
0.78
5.41 163.40
UR
97.98
38.35 283.97
LL
0.19
3.17
3.12
LR
1.05
94.39
2.65
Patient ID: KRAULIZ
Tube: k F( ab)/IF(ab)/CD19
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
93.43
1.37
27.63
UR
0.06
40.41
45.02
LL
5.65
2.05
2.93
LR
0.86
37.26
1.20
Patient ID: KRAULIZ
Tube: k F( ab)/IF(ab)/CD19
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
0.06
4.19
16.16
UR
94.63 193.74
27.37
LL
2.01
2.29
1.96
LR
3.30 222.42
2.20
Patient ID: KRAULIZ
Tube: ZAP-70/CD19
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
8.74
8.07
66.98
UR
88.97
16.32
94.90
LL
0.48
4.95
3.70
LR
1.81
41.99
3.01
R1
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te % Gated
G1
83 .9 3
G2
76 .7 2
G3
0.92
G4
6.93
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : CD45 /CD1 4
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : CD3/Cd16 +5 6
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : CD3/CD4
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : CD3/CD8
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.00
***
***
UR
0.12 19 5.71
22 .5 3
LL
0.04
5.45
1.82
LR
99 .8 5 19 1.16
3.11
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
4.64
1.75 18 2.44
UR
0.58 41 3.46 25 9.36
LL
92 .8 7
2.31
3.13
LR
1.91 27 4.53
4.20
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.02
3.58
77 .4 1
UR
1.09 28 6.32 10 99 .4 1
LL
97 .8 0
2.43
2.27
LR
1.08 29 1.51
3.18
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.70
1.76 20 1.01
UR
1.12 21 5.96 24 28 .2 4
LL
96 .7 0
2.16
2.18
LR
1.48 31 7.72
3.35
CD38/CD20
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : CD19 /CD5
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : CD20 /CD2 3
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
2.07
1.48 75 6.02
UR
94 .6 7
85 .2 1 16 3.66
LL
1.51
2.85
2.23
LR
1.75
58 .0 7
4.77
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
1.13
3.79
57 .8 8
UR
54 .0 0
45 .7 2
48 .0 1
LL
10 .9 3
1.93
1.72
LR
33 .9 4
36 .5 3
2.18
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : CD38 /CD2 0
Ga te: G1
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : CD43 /CD1 9
Ga te: G1
Pa tie nt ID: KOL OSOV
Tu be : k F(a b)/IF( ab )/CD1 9
Ga te: G1
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
33 .7 9
2.42
72 .8 3
UR
62 .1 0
33 .1 1
81 .4 7
LL
2.45
3.48
3.02
LR
1.65
24 .9 8
2.99
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
22 .0 0
2.87 39 7.64
UR
74 .1 9
24 .9 6 43 0.61
LL
0.14
2.19
3.19
LR
3.67 11 0.85
3.09
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
6.93
5.90
69 .1 0
UR
90 .2 8
42 .0 6
71 .9 0
LL
1.67
2.84
2.08
LR
1.12 16 8.35
1.66
R2
Pa tie nt ID: KO LOSOV
Tu be : ZAP-70 /CD1 9
Ga te: No Gate
Ga te % Gated
G1
69 .7 2
G2
75 .1 3
G3
78 .7 6
G4
9.83
Pa tie nt ID: KO LOSOV
Tu be : ZAP-70 /CD1 9
Ga te: G2
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
69 .6 0
5.51 36 0.68
UR
26 .8 5
13 .1 3 34 6.75
LL
0.25
4.36
3.55
LR
3.30
43 .4 1
3.03
ХЛЛ- del 17p (3 цикла FCR)
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : CD45 /CD1 4
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : CD3/Cd16 +5 6
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : CD19 /CD5
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : CD20 /CD2 3
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.01
2.46
77 .0 4
UR
0.65 16 1.89 11 9.43
LL
0.26
2.33
2.08
LR
99 .0 7 18 7.26
2.28
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
9.74
1.62
63 .4 8
UR
2.12 14 8.62
39 .4 0
LL
65 .1 0
1.98
1.96
LR
23 .0 5 15 5.07
2.27
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
23 .1 4
1.29 38 6.76
UR
71 .4 4
46 .0 5 15 5.12
LL
5.18
2.41
1.86
LR
0.23
46 .2 3
5.68
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
2.28
2.21
24 .8 1
UR
0.01
59 .8 9
63 .2 1
LL
97 .6 9
2.15
2.18
LR
0.01
27 .6 3
1.61
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : CD38 /CD1 9
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : CD43 /CD2 0
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : k F(a b)/I F(ab )/CD1 9
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : k F(a b)/I F(ab )/CD1 9
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : CD19 /CD5 2
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
63 .6 7
2.02 14 2.72
UR
6.14
26 .0 7 14 6.06
LL
3.55
4.35
1.90
LR
26 .6 4 11 4.42
1.94
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.04
1.27 14 1.22
UR
0.00
***
***
LL
46 .0 1
6.10
1.70
LR
53 .9 5
41 .5 6
2.00
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
64 .9 0
2.52
35 .8 5
UR
0.78
12 .6 6
49 .6 0
LL
32 .8 9
2.68
1.55
LR
1.42
37 .8 7
1.31
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
5.00
5.67
25 .2 7
UR
60 .6 8
34 .6 9
36 .9 0
LL
31 .8 3
2.04
1.51
LR
2.49
47 .0 7
1.92
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
21 .7 3
1.84
82 .8 6
UR
4.09
35 .8 0
72 .0 7
LL
3.72
4.05
4.34
LR
70 .4 6
37 .1 9
2.23
Pa tie nt ID: NISTRATOV
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te % Gated
G1
71 .8 5
ХЛЛ с аберрантной экспрессией Т,
НК клеточных и миелоидных
маркеров
• Наиболее частые аберрации – CD2,CD13 (в
17%), CD10 (10%), CD7(3,4%),
CD33(0,9%), CD8, CD11c, CD56, CD57
Cytometry Part B 215,348-351
ХЛЛ c аберрантной экспрессией CD8
ХЛЛ с первичным поражением
цнс (1%)
На аутопсии (n=109) частота поражения
цнс возрастает до 8%.
Описано около 50 случаев
специфического поражения цнс при ВХЛЛ, когда поражение мозговых
оболочек было доказано ИФТ
лимфоцитов ликвора
Ликвор ХЛЛ с первичным поражением цнс
Ликвор
10-цветная панель для
первичной диагностики В-ХЛЛ
(12 МКА)
FITC
PE
ECD
PC-5.5
PC-7
APC
APC-Alexa
700
APCAlexa
750
KAPPA+
CD4
LAMBDA+
CD8
CD23
CD38
CD16+CD56
CD20
CD19
CD43
Pacific
blue
Krome
Orange
CD5
CD3
Трансформация ХЛЛ в
пролимфоцитарный лейкоз
CD3/CD16,56
CD19/CD5
CD23/CD20
CD19/CD43
CD19κ
CD3/CD4
CD3/CD8
CD3/CD19
CD38/CD19
CD19λ
Новые требования к качеству
ремиссии
К/м
Нод
К/м или
кровь
4-цветная
цитометрия
Годы
Клиника
Кровь
К/м
<30%
1970
+
+
—
+
—
1980
+
+
+
нод
—
1990
+
+
+
+
—
2008
+
+
+
+
+
Протоколы исследования МРБ при В-ХЛЛ
Переход от 4-х к 6-ти цветному анализу
№
1
2
3
4
1
sIgκ
sIgλ
CD19
CD5
2
CD3
CD14
CD45
CD19
3
CD38
CD20
CD5
CD19
4
CD22
CD81
CD5
CD19
5
CD43
CD79b
CD5
CD19
Стандартизованная панель
4-х цветный анализ
(A. Rawstron et al, 2007)
№
FITC
PE
ECD
PC5
PC7
1
sIgκ
sIgλ
CD45
CD19
CD5
2
CD3
CD14
CD45
CD19
CD5
3
CD38
CD20
CD45
CD19
CD5
4
CD22
CD81
CD45
CD19
CD5
5
CD43
CD79b
CD45
CD19
CD5
5-цветный анализ
(CD45 в каждой пробирке)
6-цветный анализ
№
FITC
PE
PerC
P
PC7
APC
APC-Cy7
1
sIgκ
sIgλ
CD20
CD5
CD19
CD45
2
CD22
CD81
CD5
CD19
CD45
CD3
3
CD43
CD38
CD5
CD19
CD79b
CD45
FACSCantoII (Becton Dickinson, США)
К., В-ХЛЛ (первичная диагностика 03.02.2011)
CD19k+CD5+CD20+(низкая плотность))CD23+CD38+
6 циклов FCR, периф.кровь
МРБ = <0,01%
Спустя полгода клон В-ХЛЛ - 6,35%
Алгоритм финальной оценки МРБ
Определение МРБ в
крови
Клетки ХЛЛ ≥
0,01%
Клетки ХЛЛ <
0,01%
Ответ ≥
частичной
ремиссии
Исследование
костного мозга
Клетки ХЛЛ >
0,01%
Клетки ХЛЛ <
0,01%
Полная иммунофенотипическая
ремиссия
Клинический случай
 Б-ая П., 79 лет, с 2010 г. –В-ХЛЛ, проведен курс с
бендамустином летом 2012 г. В декабре 2012 г.
гепатоспленомегалия, лимфаденопатия.
 WBC -83,2x109/л Hb-41 г/л PLT- 70,0 x109/л , бл.5%, моноцитоид.кл.-51%(описание в
направлении)
КМ – клеточность
83,2х x109/л,
бласты -40%
ОМЛ с аберрантной
экспрессией
CD4
+ В-ХЛЛ
Моноклональный В-клеточный
лимфоцитоз (до 4% населения >40
лет, 8-10% - у лиц старше 70 лет)
• Обнаружение моноклональной популяции В-л в крови
с фенотипом В-ХЛЛ в отсутствии абсолютного
лимфоцитоза
• Первые исследования в 1991 г.
• Обнаруживается в 10 раз чаще у родственников
больных В-ХЛЛ, а в общей популяции в 100 раз чаще,
чем ХЛЛ
• В семейных случаях ХЛЛ частота возрастает до 13,5%
• Прогрессия в В-ХЛЛ – 1% случаев МВКЛ в год
• Стабильное многолетнее течение
R.F.Vogt, Y.K.Shim et al.
BJH 2007,139,690-700
Моноклональный В-клеточный
лимфоцитоз
• В США исследовано 5141 образцов
крови доноров
• МВКЛ обнаружен в 0,14%
• Средний возраст доноров с МВКЛ -59
лет
J.M.Rachel, M.L.Zucker et al.
BJH 2007,139,832-836
Диагностические критерии
моноклонального В-клеточного
лимфоцитоза (ВОЗ 2008г.)
 Отсутствуют лимфаденопатия и органомегалия
или ассоциированные инфекционыые или
аутоиммунные заболевания
 Количество В-лимфоцитов менее 5х109/л
или
 При повторном иммунофенотипировании
моноклональная популяция В-лимфоцитов
стабильна более 3 месяцев
 Парапротеин может ассоциироваться с МВКЛ.
Моноклональный Вклеточный лимфоцитоз
МВЛ- 0,5-5,0х109/л ( high count MBL)
МВЛ- <0,1х109/л (low count MBL)
high count MBL – чаще в первом
поколении больных В-ХЛЛ, IGHV
мутации сходны с ХЛЛ,
В обоих подгруппах цитогенетические
аномалии сходных с ХЛЛ
Субклассификация МВКЛ
• CD5+CD23+: это основная субкатегория, которая
соотносится с фенотипом В- ХЛЛ
• CD5+CD23-; корреляция умеренной экспрессии CD20
и CD79b с атипичным ХЛЛ
• CD5- фенотип не В-ХЛЛ (подобен ФЛ или другим
ЛПЗ)
• Соотношение легких цепей κ:λ >3:1 или < 0,3:1
• МВЛ с атипичным фенотипом ХЛЛ или
фенотипом не-ХЛЛ редки (1-2,5%)
• Атипичные клоны могут быть
транзиторными, м.б. при гепатите С
(реактивная клональная В-клеточная
экспансия)
Различия между МВЛ,ХЛЛ и
лимфоцитарной лимфомой
Клональные В-лц крови
В-клетки с
<5х109/л
фенотипом
ХЛЛ
Лимфадено
патия или
гепатоспле
номегалия
МВЛ
+
+
-
Лимфома
из малых
лц
ХЛЛ
+
+
+
+
-
+/-
T.D.Shanafelt,Hematology,2009
Моноклональный В-клеточный
лимфоцитоз
Б., 56 лет
Анализ крови –
Hb 141г/л,
RBC-4,15х1012/л,
PLT-212х109/л
WBC- 5,6х109/л,
Лц-34%
CD19/CD5
CD20/CD23
Б-ая О., 68 лет
WBC-8,85х109/л, Hb-151 г/л, PLT-300х109/л лц-33,5%
МВКЛ с фенотипом В-ХЛЛ
CD19κ+CD5+CD23+CD20low+ CD43+CD200+CD38(около 3,5% , # моноклональных В-лимфоцитов- 102/мкл)
ХЛЛ
В-клеточный пролимфоцитарный
лейкоз
Анемия,тромбоцитопения в 50%
случаев
 Гиперлейкоцитоз
 Пролимфоциты - более 55%
 CD19+, CD20+, CD22+, sIg, CD5 ,
CD23-(чаще)
 Хромосомные аномалии 14q+, реже
t(11;14), трисомия 12
В-клеточный
пролимфоцитарный лейкоз
Б-ой Р., 78 лет,
гепатоспленомегал
ия
Hb-96 г/л,
PLT -241,0х109/л
WBC-58,8х109/л
пролц-69%, лц-13%
В-пролимфоцитарный лейкоз
R1
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te % Gated
G1
92 .7 1
G2
83 .7 5
CD19/CD5
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD45 /CD1 4
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD3/Cd1 6+5 6
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD3/CD4
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.03
4.98
77 .2 7
UR
0.12 10 6.04
76 .4 5
LL
0.06
2.72
2.17
LR
99 .7 8 10 3.70
1.94
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
1.89
2.09 14 4.90
UR
0.40 23 3.77
52 .3 9
LL
87 .3 9
3.26
1.87
LR
10 .3 3 15 3.86
1.99
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.08
3.93
49 .9 9
UR
5.23 17 9.84 25 3.38
LL
90 .3 7
3.28
1.82
LR
4.33 14 9.85
2.00
CD20/CD23
CD38/CD19
CD19/CD10
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD3/CD8
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.40
3.51
30 .7 6
UR
4.01 13 6.20 50 2.83
LL
89 .8 8
3.23
1.83
LR
5.71 18 9.16
2.03
CD43/CD20
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD5/CD10 /CD19
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD5/CD10 /CD19
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD20 /CD2 3
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD38 /CD1 9
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD43 /CD2 0
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
85 .5 2
6.26
36 .2 2
UR
1.05
41 .8 0
28 .0 1
LL
3.15
4.73
2.30
LR
10 .2 8 20 4.65
1.18
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
86 .6 1
2.74
36 .1 0
UR
0.02
16 .6 4
35 .6 9
LL
13 .3 5
1.92
1.41
LR
0.01 17 9.43
1.00
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.00
***
***
UR
1.37 98 3.12
23 .0 7
LL
21 .1 4
4.77
1.90
LR
77 .4 9 86 1.62
2.07
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
3.64
3.56 16 2.42
UR
80 .2 0
23 .7 2 14 5.89
LL
5.37
3.86
2.11
LR
10 .8 0
65 .3 7
2.03
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
88 .2 3
1.65 24 2.76
UR
0.51
78 .4 0 15 1.85
LL
0.07
6.17
2.68
LR
11 .1 9 12 2.13
2.21
FMC7/CD19
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : FMC7 /CD2 3/CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
4.68
4.21
39 .4 7
UR
83 .9 5
14 .5 2
40 .9 3
LL
9.93
3.15
1.59
LR
1.43
7.77
1.86
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : FMC7 /CD2 3/CD1 9
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD19 /CD5 2
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD55 /CD1 9
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : CD59 /CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
87 .3 1
4.24
40 .7 4
UR
1.30
19 .0 1
48 .8 5
LL
11 .3 3
1.89
1.64
LR
0.05 20 1.00
1.45
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
12 .6 7
2.34 10 6.62
UR
87 .0 7
33 .7 2 21 1.55
LL
0.20
2.97
2.85
LR
0.07
16 .2 6
2.26
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.42
12 .6 0 14 1.53
UR
89 .3 8
39 .8 1
87 .5 7
LL
6.13
7.37
1.95
LR
4.07
43 .8 2
1.95
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
42 .4 8
6.19
70 .1 1
UR
43 .4 5
18 .4 0
75 .7 5
LL
2.60
6.79
1.92
LR
11 .4 6
30 .7 7
1.89
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : k F(a b)/CD19
Pa tie nt ID: CHE RNIKOV
Tu be : l F(ab )/CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
1.13
7.13 12 4.94
UR
85 .3 6
71 .2 6 13 2.16
LL
12 .3 8
4.40
2.02
LR
1.13
56 .4 3
2.67
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
88 .5 8
4.68 11 9.05
UR
0.86 11 7.15 14 7.55
LL
9.55
4.48
2.23
LR
1.01
42 .1 7
2.33
CD19κ+CD20+CD22+CD5-CD23-CD43-CD10-FMC7+CD38+
В-пролимфоцитарный лейкоз
CD19/CD5
CD43/CD19
CD20/CD23
CD19κ+CD20+CD5-CD23-/+CD43+CD10CD200+CD38-
CD19/CD200
CD19+CD5+
В-ХЛЛ
Лимфома
из клеток
зоны мантии
ВКЛ
R1
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te % Gated
G1
84 .6 3
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : CD45 /CD1 4
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : CD3/Cd1 6+5 6
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : CD3/CD4
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : CD3/CD8
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.01
2.94 33 9.82
UR
0.24 18 5.38 21 8.50
LL
0.30
3.81
1.43
LR
99 .4 6 20 6.53
2.41
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
9.00
1.93
80 .1 9
UR
1.36 10 1.44
42 .4 3
LL
84 .6 2
2.14
1.82
LR
5.03
98 .7 0
2.50
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.72
3.76
45 .4 1
UR
3.29
95 .6 2 51 9.58
LL
92 .3 7
2.12
1.70
LR
3.62 12 1.17
2.10
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
2.50
2.70
82 .3 9
UR
3.08 10 4.46 75 1.98
LL
91 .4 4
2.10
1.76
LR
2.98 11 2.98
2.30
CD19/CD5
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : CD19 /CD5
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : CD20 /CD2 3
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : CD38 /CD2 0
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : CD43 /CD2 0
Pa tie nt ID: SILAEV
Tu be : k F(a b)/L F(a b)/CD19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
6.84
2.10
72 .4 4
UR
85 .3 9
33 .1 2
66 .2 0
LL
4.92
2.31
1.83
LR
2.85
35 .1 8
2.79
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.00
***
***
UR
2.02 30 1.34
28 .9 1
LL
11 .3 2
3.71
2.06
LR
86 .6 7 27 5.73
2.49
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
88 .5 5
1.20 44 2.94
UR
0.18
36 .8 8 42 7.77
LL
8.78
3.44
2.99
LR
2.49
53 .4 7
2.66
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
88 .1 8
1.23 43 2.92
UR
0.42
42 .5 2
96 .7 5
LL
0.42
4.21
2.48
LR
10 .9 8
49 .1 4
3.21
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
1.13
5.20
12 .1 7
UR
71 .1 1 11 6.62
18 .0 6
LL
23 .1 2
3.25
1.83
LR
4.64
69 .4 0
2.55
Лимфома из клеток мантийной
зоны
 Составляет 6% всех
злокачественных
лимфом
 Опухолевый аналог –
лимфоцит зоны мантии
л/у
 Цитогенетика –
t(11;14),
гиперэкспрессия
циклина D1
Лимфома из клеток зоны мантии
 Иммунофенотип
CD5+CD19+brightCD20+brightCD43+
CD23-FMC7+CD10 Иммунофенотип более
вариабелен, чем при В-ХЛЛ,
требуются дополнительные
исследования
Лимфома из клеток зоны мантии
(плевральная жидкость)
Плевральная жидкость
Иммунофенотипирование клеток
плевральной жидкости выявило наличие
моноклональной популяции В-лимфоцитов
с фенотипом CD19+CD5+CD23CD20+(высокая плотность)CD43-CD25CD10-FMC7+, что соответствует Вклеточной лимфоме из клеток мантийной
зоны
CD19+CD5+CD23-CD20+(высокая
плотность)CD43+CD38+CD22+CD200-FMC7+
Б-ая П., 54 года, генерализованная лимфаденопатия
WBC-208,0х109/л, Hb-70,7 г/л, PLT-11,2х109/л
бласты-89,0%
Спленомегалия
ВКЛ
ВКЛ
вариантн
ый
?
ЛКПС
ЛМЗС
ЛМЗС
с отр.
лц
Волосатоклеточный
лейкоз (2%)
Волосатоклеточный лейкоз
• Фиброз в костном мозге
• CD19+CD20++CD22+CD79a+CD11c+CD25+CD103++CD305+CD123+CD5-,
реже CD10
•
Иммуногистохимические признаки (экспрессия Annexin А1 и
TRAP)
• В 2008 г. выделена вариантная форма ВКЛ, (CD25-, TRAP-,
Annexin А1-)
• В 2011 г. выявлена мутация BRAFV600E при классической
форме ВКЛ и ее отсутствие — при вариантной форме
заболевания. Вемурафениб – ингибитор BRAF-киназы
CD11c CD25
CD79b
CD19
CD22
CD103
CD305
CD123
CD20
CD
5
CD
10
CD
23
(CD20)FITC/(CD23)PE/(CD19)PC-5/(CD5)PC-7/(CD10)APC /(CD45)APC-CY7
(CD103)FITC/(LAIR1)PE/(CD25)PC-5/(CD11с)PC-7/(CD20)APC/(CD45)APC-CY7
(κ)FITC/(λ)PE/(CD19)PC-7/(CD45)APC-CY7
Б-ой С.,45 лет. Иммунофенотип лимфоцитов
CD19k+CD20+ CD22+CD23-CD5-CD11c+CD25+
CD19/CD11c
53%
CD19/CD25
55%
CD19k
73%
Волосатоклеточный лейкоз
WBC-1,0x109/л Hb-91г/л PLT-39,0 x109/л
Pa tie nt ID: MARKIDANOVA
Tu be : CD5/C D10 /CD19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
9.20
1.16 10 4.20
UR
1.84 13 7.97
42 .7 4
LL
9.20
4.40
4.18
LR
79 .7 5 31 1.09
2.92
R1
R1
Pa tie nt ID: MARKIDANOVA
Tu be : CD5/C D10 /CD19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
82 .6 1
1.40
68 .6 2
UR
0.19 11 5.50
68 .1 8
LL
12 .1 7
2.15
2.49
LR
5.03 23 9.87
2.77
Волосатоклеточный лейкоз
CD19λ+CD20+CD5-CD23CD22+CD43+FMC7+CD11c+CD103+CD25+
Pa tie nt ID: MARKIDANOVA
Tu be : CD22 /CD1 03
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
3.97
9.44 11 15 .1 5
UR
82 .1 2 31 7.98 19 63 .2 0
LL
11 .9 2
3.90
6.02
LR
1.99 12 2.70
3.86
Pa tie nt ID: MARKIDANOVA
Tu be : CD19 /CD1 1c
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
1.72
9.06 23 9.07
UR
90 .5 2
54 .0 3 25 2.39
LL
0.86
2.07
2.53
LR
6.90
59 .3 5
9.87
Иммунофенотип :
CD19k+CD20+CD10- CD22+CD200+CD23CD5-CD43-CD11c+CD25CD103+CD305+CD123+
• Б-ой Л., 75 лет
• Слабость в течение 1 года, потеря веса,
нарастающая лейкопения, анемия
• Спленомегалия
Морфология клеток при
вариантной форме ВКЛ (variant
form)
 Гиперлейкоцитоз, нет моноцитопении
 Морфология пролимфоцитов – центральное
округлое ядро, точечный хроматин, нуклеола
 Отростки цитоплазмы
 TRAP –
 Возможно отсутствие экспрессии CD25, CD103,
CD23-/+
 Худший ответ на терапию
 Более молодой возраст
ВКЛ variant
CD19k+CD20+CD10- CD22+CD200+CD23CD5-CD11c+CD25-CD103+CD305+
МРБ при ВКЛ
FITC
PE
ECD
PE-Cy7
PE-Cy5.5
APC-Cy7
CD103
LAIR-1
(CD123)
CD20
(CD22)
CD11c
CD25
CD45
KAPPA
LAMBDA
CD19
CD20
CD45
ВКЛ
МРБ ВКЛ
Лимфомы маргинальной зоны (1-3%)
 Описана в 1992 г, введена в классификацию ReaL в
1994 г., затем в классификацию ВОЗ 2001, 2008 г.
 3 категории: ЛМЗ селезенки, нодальная форма и
экстранодальная, ассоциированная со слизистой
оболочкой (MALT) ЛМЗ.
 Около 30% случаев лимфомы маргинальной зоны
селезенки (ЛМЗС) ассоциируется с гепатитом С
 Характеризуется опухолевой пролиферацией Влимфоцитов, которые располагаются в зародышевых
центрах белой пульпы селезенки
 ЛМЗ характеризуются медленным (индолентным)
течением, 5-летняя выживаемость отмечается у 80%
больных.
 Аутоиммунные заболевания у 15% больных
Лимфома маргинальной зоны
селезенки
• Лимфома селезенки
с «виллезными»
лимфоцитами
(Bennett,1989)
• Выделена в
классификации
WHO (2008 г)
• > 20% ворсинчатых
лимфоцитов - ЛМЗС
с отросчатыми или
виллезными
лимфоцитами.
Иммунофенотип ЛМЗС
 CD19+CD20+CD22+CD5 CD23-CD138+CD38+(признаки
плазмоцитарной
дифференцировки, что
затрудняет диф. диагностику с
ЛПЛ)
 В 5% - CD5+
 Часто CD11c+, CD25, реже
CD103+
CD123-
κ/λ > 4 или <
0.5
• Если в крови выявляется более 20%
ворсинчатых лимфоцитов, то речь идет о
+
ЛМЗС с отросчатыми или ворсинчатыми
лимфоцитами.
• Характерно быстрое развитие процесса
лейкемизации
Лимфома красной пульпы селезенки
 ЛКПС -9-10% В-клеточных лимфом (Kanellis,2010).
Возраст – 65-77 лет
 Диагностируется в IV стадии с поражением костного
мозга, крови, селезенки, ЛУ ворот селезенки.
 Мономорфная диффузная В-клеточная инфильтрация
красной пульпы селезенки, атрофия белой пульпы
 Массивная спленомегалия, панцитопения при
гиперспленизме
 Лейкоциты варьируют от лейкопении до лейкоцитоза,
анемия умеренная, тромбоциты - от тромбоцитопении
до гипертромбоцитоза, отросчатые («виллезные»
лимфоциты – в большинстве случаев), абсолютный
лимфоцитоз ниже, чем при вариантном ВКЛ
 Иммуногистохимия – CD76 (DBA44)+, Annexin (-), MUM1(-), циклин D1(-), p53- (в 30%)
 BRAFV600E (-), TRAP (-)
Иммунофенотип
• В-клеточный
фенотип
(CD19,CD20,CD22),
FMC7 (91% случаев)
• CD11c ( 67%), CD25
(10%), CD103 (17%),
CD123 ( 50%), CD5
(36,4%), CD23 (30%)
• IgM+IgD, or
IgM+IgG, or IgG
orIgM
Л
К
П
С
Классическая
морфология
ЛМЗС
ВКЛ
George Kanellis et al,
Haematologica ,2010; 95(7)
Alexandra Traverse-Glehen
BLOOD, 2008, v. 111, №4
Экспрессия маркеров
Лимфома красной пульпы селезенки
8
7
7
6
6
6
5
4
3
3
3
2
2
1
0
CD5
CD23
CD11C
CD103
LAIR-1
CD25
Биоптат селезенки
(лимфома красной пульпы)
ВКЛ
ЛМЗС/ЛМЗС отр
лц
ЛКП сел
ВКЛv
Фолликулярная лимфома
 Составляют от 30-40% всех лимфоидных
опухолей, средний возраст – 59 лет
 Средняя продолжительность жизни -8-10 лет
 Индолентное течение, возможна
трансформация в диффузную
крупноклеточную лимфому в 30% случаев
 Анемия, тромбоцитопения
Фолликулярная лимфома
 Поражаются л/у, селезенка, кольцо Вальдейера,
костный мозг ( в 40% наблюдений), ранняя
гематогенная диссеминация опухоли
 Экстранодальные очаги опухоли могут
наблюдаться в желудочно-кишечном тракте,
мягких тканях, коже.
 Нодулярный или фолликулярный тип роста (3
подтипа)
 Субстрат опухоли - центроциты и центробласты
Фолликулярная лимфома
 Иммунофенотип -sIg+
CD19dim,CD20+CD22+CD79a+CD23- CD5- (редко
CD5+)CD38+
 Антигены герминального центра - CD10 (в 50%
экспрессия dim или отсутствует), Bcl-2
 t(14;18) (в 50-70%)
 сверхэкспрессия BCL2 (антиапоптотический эффект). Отсутствует при гистол. типе III!
Фолликулярная лимфома
R1
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te % Gated
G1
28 .6 1
G2
25 .3 5
G3
31 .5 4
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD45 /CD1 4
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD3/Cd1 6+5 6
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD3/CD4
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD3/CD8
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.00
***
***
UR
0.45 20 0.03
86 .3 8
LL
0.45
5.57
1.62
LR
99 .0 9 18 7.37
2.15
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
7.39
4.75 16 4.66
UR
3.76 44 7.04
62 .5 3
LL
74 .5 9
10 .3 7
2.25
LR
14 .2 6 21 5.63
3.07
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.54
4.81
54 .9 3
UR
8.90 18 9.97 50 7.79
LL
80 .9 0
7.33
1.60
LR
9.66 25 3.44
2.17
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
3.00
2.56 15 0.84
UR
6.34 21 0.93 86 2.37
LL
80 .9 4
8.19
1.65
LR
9.72 22 0.85
2.25
CD19/CD10
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD5/CD10 /CD19
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD5/CD10 /CD19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
62 .5 9
1.29
13 .8 9
UR
0.35
35 .6 7
49 .7 3
LL
31 .0 2
1.22
2.97
LR
6.04 16 6.59
1.23
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
4.75
2.82
25 .9 8
UR
62 .4 3
26 .5 2
12 .5 9
LL
7.77
1.94
1.38
LR
25 .0 4
39 .9 4
2.67
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD5/CD10 /CD19
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD38 /CD1 9
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD43 /CD2 0
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
5.89
2.10 16 1.08
UR
0.53
31 .9 0 13 0.70
LL
7.50
2.79
1.62
LR
86 .0 8
30 .6 0
1.24
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
66 .6 2
4.45
73 .6 7
UR
6.68
23 .5 7
95 .2 2
LL
14 .4 5
4.68
2.19
LR
12 .2 5
95 .8 3
2.13
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
78 .0 6
1.08 34 2.44
UR
2.79 11 1.88
43 .2 4
LL
0.42
4.50
3.39
LR
18 .7 3 12 5.20
3.03
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : k F(a b)/I F(ab )/CD 19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
5.37
5.29
26 .8 4
UR
45 .1 9
63 .1 7
19 .3 1
LL
42 .6 9
2.95
1.75
LR
6.75
47 .3 5
2.43
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD55 /CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
6.65
5.41
84 .6 1
UR
67 .9 9
19 .5 2
69 .9 9
LL
15 .3 8
3.89
2.06
LR
9.97
29 .6 7
2.11
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : k F(a b)/I F(ab )/CD 19
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : FMC7 /CD2 3/CD1 9
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : FMC7 /CD2 3/CD1 9
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD19 /CD5 2
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
47 .5 3
2.40
18 .3 1
UR
3.03 26 4.71
48 .3 6
LL
45 .2 4
2.57
1.87
LR
4.20 23 3.39
1.55
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
11 .8 2
2.46
12 .2 3
UR
57 .0 2
27 .5 2
12 .9 5
LL
23 .7 5
2.43
1.63
LR
7.40
26 .4 8
2.14
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
50 .1 6
1.85
11 .9 4
UR
17 .9 3
23 .8 3
15 .6 7
LL
29 .8 2
1.69
1.77
LR
2.08
41 .9 8
2.17
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
32 .0 4
1.96 11 0.80
UR
65 .7 1
13 .3 3 13 1.78
LL
2.11
2.05
4.19
LR
0.13
9.62
4.27
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD59 /CD1 9
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : CD38 /CD1 38
Pa tie nt ID: KARLILOVA
Tu be : sIg M/CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
64 .0 5
3.74
65 .0 3
UR
14 .3 9
13 .7 4
58 .7 5
LL
6.63
5.25
2.04
LR
14 .9 2
23 .7 2
1.97
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.15
6.32
27 .1 0
UR
0.04
17 .1 5
10 .0 9
LL
84 .1 8
5.48
1.62
LR
15 .6 3
82 .6 3
1.98
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
1.32
3.34
42 .7 8
UR
7.48 11 5.75
73 .8 0
LL
32 .3 7
2.16
6.36
LR
58 .8 4
67 .3 9
5.97
CD19/CD10
R1
Pa tie nt ID: P ANOV
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te % Ga ted
G1
43 .3 8
CD19/CD5
Patient ID: PANOV
Tube: CD5/CD10/CD19
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
17.12
1.19 118.97
UR
0.44
12.30
79.13
LL
13.52
1.77
1.56
LR
68.92
12.65
1.51
Patient ID: PANOV
Tube: CD3/Cd16+56
Gate: G1
Pa tie nt ID : PANOV
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te: G1
Qu ad % Ga ted X Mea n Y Mea n
UL
0.00
***
***
UR
0.18 16 7.59
62 .3 6
LL
0.53
8.31
1.80
LR
99 .2 9 20 0.21
3.13
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
1.64
1.64 385.99
UR
5.11 295.12 141.14
LL
80.83
1.91
2.45
LR
12.42 267.37
6.09
Patient ID: PANOV
Tube: CD5/CD10/CD19
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
11.98
1.72
22.82
UR
61.82
12.21
25.74
LL
18.66
1.26
1.89
LR
7.54
16.26
2.49
CD19/CD23
CD19/CD38
Pa tie nt ID : PANOV
Tu be : CD20 /CD2 3
Ga te: G1
Patient ID: PANOV
Tube: CD38/CD20
Gate: G1
Qu ad % Ga ted X Mea n Y Mea n
UL
1.08
2.79
17 .4 8
UR
50 .5 6 23 8.54
56 .7 1
LL
18 .5 6
2.61
4.00
LR
29 .8 0 17 3.01
5.08
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
77.66
4.11 220.76
UR
4.27
92.94 151.93
LL
11.17
7.32
2.24
LR
6.90
81.33
2.43
Patient ID: PANOV
Tube: FMC7/CD23/CD19
Gate: G1
Quad % Gated
UL
32.93
UR
28.41
LL
26.81
LR
11.85
X Mean Y Mean
2.59
10.52
15.10
10.43
2.30
1.85
21.12
2.40
ФЛ (лимфоузел )
Pa tie nt ID: No du s Lim ph
Tu be : CD3/Cd1 6+56
Qu ad % Gated
UL
1.41
UR
0.52
LL
76 .9 5
LR
21 .1 2
R1
Pa tie nt ID: No du s L im ph
Tu be : CD5/C D10 /CD19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
7.42
2.20
13 .5 8
UR
63 .6 4
14 .7 1
19 .4 9
LL
14 .9 6
1.59
1.87
LR
13 .9 8
12 .0 1
2.34
Pa tie nt ID: No du s L im ph
Tu be : CD5/CD10 /CD19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
53 .5 6
3.95
22 .2 7
UR
3.24 12 3.03
20 .7 9
LL
27 .0 5
3.86
3.65
LR
16 .1 5
85 .2 2
2.63
Pa tie nt ID: No du s L im ph
Tu be : FMC7 /CD2 3/CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
57 .6 7
3.43
11 .4 6
UR
23 .7 1
10 .4 7
21 .1 8
LL
18 .1 7
2.42
1.92
LR
0.45
10 .8 6
2.36
Pa tie nt ID: No du s L im ph
Tu be : CD20 /CD23
Qu ad % Gated
UL
0.86
UR
16 .4 6
LL
15 .6 0
LR
67 .0 8
Pa tie nt ID: No du s L im ph
Tu be : k F(a b)/CD19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
34 .2 2
2.85
54 .8 0
UR
53 .2 7
18 .5 4 12 5.26
LL
12 .4 7
1.92
3.83
LR
0.04
12 .0 3
6.50
Patient ID: Nodus Limph
Tube: l F(ab)/CD19
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
80.70
2.39
79.61
UR
5.83
52.77 172.23
LL
13.35
1.54
3.76
LR
0.12
33.20
4.47
Определение макроглобулинемии
Вальденстрема (ВОЗ)
• МВ- лимфоплазмоцитарная лимфома,
ассоциированная с моноклональным
IgM(независимо от концентрации),
инфильтрацией КМ малыми лц, которые
могут иметь признаки плазмоцитарной
дифференцировки
Макроглобулинемия Вальденстрема
 Редкое заболевание, составляет 1-2% от всех
гематологических опухолей. Впервые описано
Вальденстремом в 1944 г. Частота - 3 случая на 1 млн.
населения в год
 Средний возраст – 63-68 лет, преобладают мужчины,
семейная предрасположенность (11-кратный риск). Высокий
риск развития МВ при наличии IgM MGUS (моноклональной
гаммапатии неясного генеза)
 Субстрат опухоли – В-лимфоциты памяти
(постгерминальные клетки)
 Низкая пролиферативная активность
 Патогенез связан с пролиферацией опухолевых Влимфоцитов в костном мозге, печени, селезенке, ЛУ и
накоплением моноклонального IgМ
Макроглобулинемия
Вальденстрема
 Трудно дифференцировать от В-клеточных опухолей
с плазмоцитарной дифференцировкой
 Классический фенотип МВ: ( sIgM, CD23-, CD19+,
CD20+, CD22+low, CD25+, CD27+, FMC7+, CD138-)
 В 89% случаев МВ : CD5-/ CD10-/ CD11c-/CD103 Оценка плотности CD20
 Фенотип ПК при МВ и IgM-гаммапатии отличается
от ММ и приближен к нормальным ПК
IgM –MGUS дремлющая форма
МВ
симптоматическая форма МВ
Повышается % В-клеток с экспрессией
CD19low,CD22low
Усиливается экспрессия CD25,CD27,
FMC7,HLA-DR, SmIgM
Утрачивается экспрессия CD23
Paiva B. et al Leukemia (2014, 28, 166-173
IgM –MGUS дремлющая форма МВ
симптоматическая форма МВ ( ПК)
% ПК остается стабильным на всех 3
стадиях процесса
Однако внутри компартмента ПК
повышается пропорция ПК с
рестрикцией легких цепей, более
незрелым плазмобластным фенотипом
(CD19,CD20,CD45,SmIgM)
Полное отсутствие CD56 (отличие от
ММ – СD56+CD27-)
Макроглобулинемия
Вальденстрема
Pa tie nt ID: Ka mn rva 1
Tu be : FMC7 /CD2 3/CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
75 .0 4
3.43
65 .8 8
UR
6.94 16 8.38
82 .3 6
LL
17 .6 1
2.18
3.20
LR
0.42
64 .1 4
4.50
R2
Pa tie nt ID : K am nrva 1
Tu be : CD19 /CD5
Qu ad % Ga ted X Mea n Y Mea n
UL
9.01
2.72 76 5.81
UR
1.01
54 .9 7
67 .8 6
LL
3.70
7.56
2.46
LR
86 .2 8
71 .9 5
2.78
Pa tie nt ID : K am nrva 1
Tu be : CD38 /CD1 9
Qu ad % Ga ted X Mea n Y Mea n
UL
91 .6 3
2.15 39 8.67
UR
3.23
54 .3 4 35 4.34
LL
4.10
4.48
3.12
LR
1.04
58 .6 8
2.95
Pa tie nt ID: Ka mn rva 1
Tu be : FMC7 /CD2 3/CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
17 .2 3
4.66
61 .4 8
UR
66 .1 8
58 .5 9
67 .5 2
LL
14 .6 3
3.21
2.55
LR
1.97
57 .6 3
4.43
Patient ID: Kamnrva 1
Tube: IgM/CD19/CD45
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
55.12
3.61 281.07
UR
38.79
20.05 319.75
LL
5.20
3.14
2.55
LR
0.88
14.88
2.95
Pa tie nt ID: Ka mn rva 1
Tu be : k F(a b)/CD19
Pa tie nt ID: Ka mn rva 1
Tu be : l F(ab )/CD1 9
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
83 .6 7
2.08 35 2.57
UR
2.47
11 .9 1 29 2.13
LL
12 .9 2
2.56
2.87
LR
0.95
10 .2 8
3.35
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
57 .8 0
3.82 27 2.54
UR
30 .7 4
33 .6 5 35 0.42
LL
11 .2 3
2.92
3.85
LR
0.24
21 .5 9
7.16
CD19/CD5
R1
Pa tie nt ID: GUME ROV
Tu be : CD45 /CD1 4
Pa tie nt ID: GUME ROV
Tu be : CD45 /CD1 4
Pa tie nt ID: GUME ROV
Tu be : CD3/Cd1 6+5 6
Pa tie nt ID: GUME ROV
Tu be : CD5/CD10 /CD19
% To ta l
24 .5 6
Qu ad % Gated X Mea n
UL
0.00
***
UR
1.43 33 0.06
LL
4.23
6.93
LR
94 .3 4 28 9.01
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
12 .9 3
2.87 36 2.74
UR
10 .3 4 21 0.53
60 .8 0
LL
37 .4 1
3.75
5.57
LR
39 .3 2 21 2.06
5.97
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
47 .1 2
1.27 19 6.26
UR
0.51
37 .0 2
51 .7 4
LL
11 .9 4
2.14
4.61
LR
40 .4 4
42 .1 2
3.84
CD20/CD23
Pa tie nt ID: GUME ROV
Tu be : CD20 /CD2 3
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
0.61
8.36
29 .1 0
UR
37 .5 9 28 2.02
74 .6 1
LL
53 .6 6
5.51
2.50
LR
8.14 14 8.03
2.97
Pa tie nt ID: GUME ROV
Tu be : CD38 /CD2 0
Pa tie nt ID: GUME ROV
Tu be : CD43 /CD2 0
Pa tie nt ID: GUME ROV
Tu be : k F(a b)/L F(a b)/CD19
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
39 .7 3
5.37
69 .5 5
UR
6.22
54 .1 9
57 .7 6
LL
26 .7 7
7.68
3.37
LR
27 .2 8
78 .3 6
3.44
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
43 .1 5
3.43
82 .0 6
UR
4.51 14 9.71
24 .2 1
LL
2.69
3.93
5.88
LR
49 .6 5 15 7.96
4.11
Qu ad % Gated X Mea n Y Mea n
UL
4.13
10 .2 9
40 .4 1
UR
39 .3 5
35 .1 6
44 .4 5
LL
55 .4 2
4.96
1.93
LR
1.09
71 .2 8
1.48
Диффузная крупноклеточная В-клеточная
лимфома
 Составляет 30–40% от всех лимфом у взрослых,
средний возраст больных 70 лет.
 Агрессивное течение.
 Может развиваться как самостоятельное заболевание
или как результат трансформации зрелоклеточных
лимфом.
 Иммунодефицитное состояние у больных повышает
риск развития диффузной В-крупноклеточной
лимфомы.
 Часто выявляется носительство вируса Эпштейна–
Барра.
Диффузная В-крупноклеточная лимфома, не
определенная иными признаками
Морфологические варианты:
центробластный
иммунобластный
анапластический
Молекулярные варианты:
Герминальный
Активированный
Иммуногистохимические варианты:
CD5+ ДBККЛ
Герминальный (из клеток фол. центра)
Негерминальноклеточный
Диффузная крупноклеточная В-клеточная
лимфома





CD19+CD20+CD22+CD72a+CD5-CD10+ (20-40%)
CD19+CD20+CD22+CD5-CD10CD19+CD20+CD22+CD5+CD10+
Дифференцировать с ФЛ, лимфомой Беркитта
В большинстве случаев анапластической
крупноклеточной лимфомы экспрессия CD30
 В 30-50% позитивна на BCL6, BCL-2
 Пролиферирующая фракция Ki-67+- составляет 40–
90%, ниже по сравнению с лимфомой Беркитта
 Транслокация t(14;18),t(3;14), реже другие
• Характерно поражение лимфоидной ткани, но
в 40% случаев встречается экстранодальная
локализация (центральная нервная система,
кожа, желудочно-кишечный тракт, кости,
яички, мягкие ткани и др.).
• Неопухолевый аналог – В-клетки
зародышевого центра (центробласты) и
постгерминативной зоны (плазмобласт).
Б-ая Носова, 62 г.




Увеличение ЛУ средостения, брюшной полости
Выпот в плевральной полости
Лихорадка
WBC – 11,7х109/л, RBC –5,0х1012/л, Hb – 120г/л, PLT
- 232х109/л, лц – 54% ( из них 16% крупных
лимфоидных клеток с 1 нуклеолой, гиперхромным,
складчатым ядром, базофильной цитоплазмой).
R1
Pa tie nt ID: NOS OVA
Tu be : CD45 /CD1 4
Ga te % Ga ted
G1
43 .0 1
G2
31 .8 6
Patient ID: NOSOVA
Tube: CD20/CD23
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
0.70
4.65
11.11
UR
37.67 491.73
45.29
LL
50.70
3.17
2.01
LR
10.93 364.40
2.83
Patient ID: NOSOVA
Tube: CD3/Cd16+56
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
16.37
2.17
93.01
UR
3.08 160.69
66.49
LL
51.90
4.25
3.84
LR
28.65 129.61
4.51
Patient ID: NOSOVA
Tube: CD5/CD10/CD19
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
43.00
5.05
18.79
UR
0.76
50.05
20.44
LL
27.23
2.88
2.16
LR
29.01 159.92
1.23
Patient ID: NOSOVA
Tube: CD5/CD10/CD19
Gate: G1
Quad % Gated
UL
14.49
UR
32.13
LL
41.40
LR
11.97
X Mean Y Mean
2.60
20.29
12.20
16.88
2.08
1.48
9.93
1.70
Patient ID: NOSOVA
Tube: k F( ab)/IF(ab)/CD19
Gate: G1
Quad % Gated X Mean Y Mean
UL
4.55
6.68
29.17
UR
25.52 208.16
23.24
LL
52.39
2.98
1.80
LR
17.54 260.64
1.75
Заключение:
Иммунофенотипирование лимфоцитов
периферической крови
выявило моноклональную пролиферацию
В-лимфоцитов
с фенотипом CD19+CD5CD10+CD23+CD20(высокая плотность)+CD43-CD38FMC7+ BCL-2+,
что наиболее вероятно соответствует лейкемизации
диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы
из клеток герминативного центра.
Б-ой М, перикардиальная жидкость- клеточность 13,3х109/л
Заключение: Иммунофенотипирование лимфоцитов
перикардиальной жидкости выявило моноклональную
популяцию В-лимфоцитов с фенотипом CD19κ+CD5-CD23CD10-CD20+CD38+FMC7+CD43+, что соответствует
диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфоме с высокой
пролиферативной активностью (Ki67+ -40,6%)
Н., 38 лет, ВИЧ с 2003 г., с 2010 г ретровирусная
терапия, IIIB стадия. На МРТ отсутствуют
признаки очагового поражения цнс
инфекционный менингит? Ликвор
ликвор
Б-ой Н., ликвор
ВИЧ-ассоциированная лимфома
В-ДККЛ или лимфома Беркитта ?
• Обнаружен ВЭБ АТ к ядерному
антигену IgG 1:4250
• CMV IgG 1:2200
Неклассифицируемая В-клеточная
лимфома, занимающая промежуточное
положение между диффузной Вкрупноклеточной лимфомой и лимфомой
Беркитта
Агрессивное течение, быстрая
диссеминация опухоли с вовлечением
экстранодальных органов, КМ и ЦНС
Опухолевые клетки мельче, чем при
ДВККЛ, картина «звездного неба»,Ki67>90%, иногда экспрессия bcl-2 (при
ЛБ не экспрессируется или слабо)
Часто перестройки гена c-MYC, bcl-2 и bcl-6
«Double-hit» лимфомы
• На основании цитогенетических
перестроек, происхождения из клеток
герминального центра, повышения ЛДГ,
крайне агрессивного течения, частого
поражения КМ и ЦНС, плохого ответа на
лечение выделена группа лимфом
«double-hit» (описано 200 случаев).
Наиболее часто – одновременные
аберрации с вовлечением MYC и BCL2
Лимфома Беркитта
Терминология: 2001 г. –лейкоз/лимфома
Беркитта, 2008 г. перестали выделять
беркиттоподобную лимфому.
В настоящее время выделяют 3 варианта
ЛБ: эндемический, спорадический и
ассоциированный с иммунодефицитом
(при ВИЧ-инфекции и после
трансплантации органов)
Лимфома Беркитта
• В Европе, США и России этот тип лимфом
встречается редко и составляет у взрослых 12%, у детей - 30-50%.
• Лимфома Беркитта составляют до 40% всех
ВИЧ-ассоциированных лимфом.
• Редко описаны случаи лимфомы Беркитта в
виде острого лимфобластного лейкоза (L3
вариант).
Лимфома Беркитта
• экстранодальная локализация (органы
жкт – поражение илеоцекальной области
кишечника, ЛУ брыжейки,
забрюшинных ЛУ, печени, селезенки,
кости лицевой части черепа, цнс, гонады
и др.)
• Неопухолевый аналог – бластные клетки
ранних зародышевых центров
(фолликулярный В-бласт).
• Поражение КМ у детей – в 20-35%, цнс –
в 20-25%
• Лейкемический вариант ЛБ – в
классификации ВОЗ (2008 г)
упоминается отдельно (> 25% клеток с
морфологией бластов в КМ). Сочетается
с опухолевой инфильтрацией органов
брюшной полости, цнс. В крови
опухолевые клетки обнаруживают в 20%
случаев.
• Цитологическая картина классической
ЛБ – мономорфный клеточный состав,
L3, обилие макрофагов и митозов
Опухолевый субстрат – клетки
герминального центра -CD10, Bcl6.
• Иммунофенотип: опухолевые клетки
экспрессируют поверхностный IgМ и пан_Вклеточные антигены (CD19, CD20,CD22),
CD10, Bcl6. Часто экспрессируют CD21
(рецептор вируса Эпштейна-Барр). Отмечается
слабая экспрессия BCL2 (<20%)+
• Цитогенетика: почти во всех случаях
вовлечение протоонкогена c-MYC:
транслокация t (8;14) или вариантные
транслокации t (2;8), (t (8;22). В 5-10%
перестроек этого гена нет.
Цитогенетическая
характеристика
• В 1976 г. впервые обнаружена t(8;14)
• Перестройка генов c-MYC и генов
тяжелых цепей ИГ определяется в 80%
случаев.
Больная В.,79 лет.
Миелограмма: клеточность – 200,8х109/л, количество
мегакариоцитов снижено.
бласты – 98% (средних размеров с интенсивно
базофильной и вакуолизированной цитоплазмой)
Иммунофенотип бластных клеток костного мозга
CD34-HLA-DR+TdT-CD38+MPOCD19+CD79а+CD20+CD22+CD43+CD10+bcl-2-, что
соответствует лейкемизации зрелоклеточной Вклеточной лимфомы с высокой пролиферативной
активностью (Ki67+ 87%) - лейкоз/лимфоме Беркитта
АЛК-негативная анапластическая
крупноклеточная лимфома (имплант в
молочной железе)
 Связь ЛПЗ с имплантами в молочной железе ( Тклеточные лимфомы, ФЛ, лимфоплазмоцитарная
лимфома, первичная лимфома серозных полостей)
 Фенотип АЛК(-): высокий SSС и FSC,
CD45(вариабельный –low, intermed, high),
CD30bright,CD15 (вариабельный), CD71(
вариабельный). CD40, CD95 ( bright, intermed).
Отсутствуют Т- и В-маркеры.
D.Wu Cytometry B,2015,88B,58-63
???
R1
Tu be : CD3/CD16 56 /CD1 9
Re gio n % Ga ted
R1
72 .3 7
Tu be : CD3/CD16 56/CD19
Qu ad % Gated
UL
90 .4 1
UR
0.29
LL
3.15
LR
6.15
Tu be : CD3/CD16 56 /CD19
Qu ad % Gated
UL
0.55
UR
0.01
LL
92 .5 5
LR
6.88
Мелкоклеточный рак легкого
Tube: BerEP4/CD56
Gate: G1
Quad % Gated
UL
0.58
UR
93.54
LL
5.46
LR
0.42
Диагностика миеломной
болезни
• Обнаружение субстрата опухоли
плазмоклеточной природы
• Выявление продукта синтеза миеломных
клеток – моноклонального
иммуноглобулина (парапротеина)в
сыворотке крови и/или моче
• Обнаружение остеолитических
поражений
Особенности плазматических клеток
плазматические клетки
Экспрессия
Стабильная
Нормальные
Миеломные
CD45dim, CD38bright, CD138
CD38bright+, CD138+
Нестабильная
отсутствует
CD56
CD10, CD27, CD40, CD117, CD56, CD45
CD19*, CD20, СD22
CD19, CD20, CD117
CD
Экспрессия, %
Нормальные плазмациты
Информативность
Миеломные клетки
CD19
+ (>70%)
95
CD56
- (<15%)
75
CD117
-(0%)
CD20
---
30
?
CD28
-/слабо(<15%)
15-45
CD27
++ (100%)
40-50
CD81
+ (100%)
нд
CD200
Слабо +
нд
необходим
рекомендован
предложен
Rawstron et al., Haematologica, 2008
Биологические особенности
плазматических клеток костного мозга
Аберрантность экспрессии:
CD19
CD56
CD117
CD45dim
64,4%
46,6%
57,7%
68,8%
FITC
PE
ECD
PE-Cy7
PE-Cy5.5
CD38
CD138
CD45
CD117
CD56
KAPPA
LAMBDA
CD19
CD45
CD20
ММ
APC-Cy7
Б-ой П., 1970 г, множественное поражение костей скелета
Острый плазмоклеточный
лейкоз
• 2-4% от ММ
• Более 20% ПК в крови (>2000 кл/мкл)
• Смертность в течение 1 месяца -28% при первичном
ОПлЛ , при вторичном – ОВ -1-2 мес.
• Р53 делеция, гиподиплоидия (редко при ММ)
• Фенотип ПК : CD138+/CD38+/CD45- or CD45low,
CD20 часто
• Экспрессия CD56, CD117, DR в отличие от ММ чаще
негативная
 Описан случай ОПлЛ
CD138-/CD38+/CD19+/CD4+ /CD20-/CD56-/CD117-/IgD +
 Точка зрения: CD138- ПК менее дифференцированные, чем
CD138+ ПК и могут представлять стволовые клетки ММ
 Чувствительность к противоопухолевым препаратам ниже
у CD138- ПК, более низкий пролиферативный индекс
 Потеря CD138 на ПК ММ коррелирует с рецидивом или
прогрессией
Ф., 89 лет. Диагноз –ХЛЛ/лц лимфома,
ХПН, терминальная стадия, увеличение
подмышечных ЛУ, ЛДГ, бета-2-МГ
 WBC-19,29х109/л, Hb-67 г/л, PLT206х109/л
• Моноклональная популяция плазматических
клеток (около 60%) с аберрантным фенотипом
CD45-CD138+CD38+CD20+CD117+CD19CD56-CD10-CD43+cytkappa+skappa+. Острый
плазмоклеточный лейкоз.