R-6056 ИХТ

28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area
P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL
Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852
e-mail: info@novamed.co.il
Рота/Адено КомбиСтик
КАССЕТНЫЙ ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО ОДНОЭТАПНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ
АНТИГЕНОВ РОТАВИРУСА И АДЕНОВИРУСА В ФЕКАЛИЯХ ЧЕЛОВЕКА.
Кат. № R-6056 (20 определений)
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
НАЗНАЧЕНИЕ
Рота/Адено КомбиСтик - иммунохроматографическая тестсистема
для экспресс-диагностики рота- и адeновирусных
инфекций у человека.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
Ротавирус является одной из основных причин гастроэнтеритов у
детей. Ротавирусы вызывают некротические поражения эпителия
слизистой
оболочки
тонкого
отдел
кишечника,
сопровождающиеся развитием диарейного синдрома, тяжелого
обезвоживания и нарушения электролитного баланса организма
1
. Служит причиной госпитализации новорожденных и детей
дошкольного возраста почти в 50% случаев диареи2,3. Пик
заболеваемости приходится на холодные месяцы года в странах с
умеренным климатом 4. В тропических районах заболеваемость
остается на одном уровне в течение всего года 2. Помимо
новорожденных и и детей раннего возраста 4 также поражаются
пожилые люди. Диагностика ротавирусного гастроэнтерита
основана на обнаружении возбудителя с помощью электронной
микроскопии или иммунологических методов, одним из которых
является метод иммунохроматографии.
Аденовирус вызывает у людей поражения респираторного и
желудочно-кишечного трактов, а также глаз. Тест-система
Рота/Адено КомбиСтик позволяет выявлять специфические
антигены всех известных (41) серотипов аденовирусов человека.
ПРИНЦИП
Рота/Адено КомбиСтик производства компании Novamed Ltd.,
Израиль представляет собой помещенную в пластиковый футляр
(кассету)
полоску
нитроцеллюлозной
мембраны
с
фиксированными на ней в области добавления пробы
моноклональными мышинными антителами к ротавирусу и
аденовирусу человека,
конъюгированными с окрашенными
частичками латекса. В области тестового окошка также
зафиксированы моноклональные антитела к ротавирусу и
аденовирусу
человека.
Поликлональные
антимышинные
антитела зафиксированы в контрольной зоне полоски. При
попадании разведенной пробы на мембрану через окошко для
добавления пробы кассеты обозначенное буквой "S", антигены
ротавируса и аденовируса человека, содержащиеся в пробе,
реагируют со специфическими меченными моноклональными
антителами, формируя комплекс антиген-антитело, который
мигрирует по мембране образуя одну красную (ротавирус) или
синюю (аденовирус) цветную линию или две - красную и синюю
цветные линии одновременно (ротавирус и аденовирус) в
нижней, тестовой зоне тестового окошка кассеты обозначенной
буквой "Т", что оценивается как положительный результат.
Непрореагировавший конъюгат мигрирует далее по мембране к
контрольной зоне, где
захватывается поликлональными
антимышинными антителами, формируя зеленую цветную
линию в верхней, контрольной зоне тестового окошка кассеты
обозначенной буквой "С". Kонтрольная линия появляется всегда.
Наличие контрольной линии подтверждает корректность
результатов теста (правильный объем пробы, необходимый темп
миграции, требуемое качество реагентов).
КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
В состав набора входит:
20 тест-кассет Рота/Адено КомбиСтик, упакованных в
индивидуальныe алюминиевыe пакеты;
20 одноразовых пластиковых пробирок-капельниц, содержащих
буфер для разведения пробы;
1 инструкция к применению.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Не допускается использование набора и его компонентов после
истечения срока годности.
2. Все компоненты набора предназначены только для
профессионального использования "in vitro" в целях
лабораторной диагностики.
3. Исследование проб фекалий регламентируется правилами
работы с инфекционными агентами.
4. Не проводить исследование, используя компоненты наборов
разных серий.
5. Нарушение временного и температурного режимов инкубации
при проведении исследования может привести к получению
ошибочных результатов.
6. Тест должен быть проведен в течение двух часов после
вскрытия индивидуальной упаковки.
7. Необходимо избегать попадания едких реагентов для
экстракции на кожу, глаза, слизистые оболочки. В случае
контакта реагентов с кожными покровами немедленно промыть
водой место контакта.
8. Внимательно прочтите инструкцию перед использованием.
ХРАНЕНИЕ
Экспресс-анализ Рота/Адено КомбиСтик должен храниться при
температуре 4-30оС. Не замораживать!
ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ.
Фекалии собирают в чистый сухой контейнер без консервантов
или транспортных сред. Рекомендуется проводить тест сразу же
после забора пробы. Для проведения теста необходима проба в
количестве 1-2 г, в случае оформленного кала или 1-2 мл, в
случае жидкого образца. До исследования пробу хранят в
холодильнике при температуре +2+4°С в течение 1-2 дней. Для
более продолжительного хранения (до 1 года), пробу необходимо
хранить в морозильной камере при температуре -20оС. В этом
случае, пробу перед исследованием полностью размораживают и
доводят до комнатной температуры. Остатки проб утилизируют в
соответствии с правилами, принятыми в данном учреждении.
ПОДГОТОВКА ПРОБ
Для каждого образца фекалий следует использовать отдельную
пробирку-капельницу с буфером для разведения пробы.
1. Открутить крышку пробирку-капельницы и с помощью
вмонтированного в нее аппликатора забрать пробу, дважды
погружая аппликатор в фекальную массу, при этом на кончике
аппликатора должно остаться приблизительно 100-150 мг
образца.
В случае жидкого стула, собрать пипеткой
приблизительно 100 мкл жидких испражнений и перенести в
пробирку-капельницу с буфером.
2. Закрыть пробирку с образцом, помещенным в буфер.
3. Энергичным
встряхиванием
пробирки-капельницы
суспендировать пробу.
4. Подождать, пока крупные частицы не осядут на дно пробирки.
Оформленный стул
Пробирка-капельница
для забора и разведения пробы
Жидкий стул
ТЕХНИКА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА
Перед началом тестирования следует довести тестовую кассету и
образец до комнатной температуры (15-30ºC). Не вскрывать
индивидуальную упаковку теста до начала исследования.
5. Непосредственно перед проведением исследования вскрыть
индивидуальную упаковку теста.
6. Маркировать
тестовую
кассету
инициалами
или
идентификационным номером пациента.
7. Предварительно встряхнув пробирку-капельницу с пробой ,
отломить/отрезать кончик
крышки-капельницы и через
открывшееся отверстие внести 4 капли (100 мкл) тестируемой
суспензии в окошко для внесения пробы (S) кассеты, избегая
попадания в окошко крупных твердых частиц вместе с
жидкостью.В случае замедления или полной остановки
миграции пробы по мембране обысловленной попаданием
крупных частиц фекалий в окошко для внесения пробы "S",
следует тщательно перемешать пробу с помощью стирера или
добавлять по капельке буфер до возобновления миграции.
8. Результат анализа учитывают через 10 мин после загрузки
тестовой кассеты пробой.
Отломить/отрезать кончик
крышки-капельницы
Внести 4 капли (100 мкл) тестируемой суспензии в
окошко для внесения пробы (S)
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Rotavirus
Adenovirus
Rota+Adeno
NEGATIVE
возрастания не могут быть установлены с помощью данного
качественного теста.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
1. Тест предусматривает внутренний контроль за правильностью
проведения процедуры. Зеленая линия появляющаяся в
контрольной зоне (C) тестового окошка кассеты, указывает на
правильность проведения процедуры теста.
2. Результаты теста не учитывают в случае если неясный фон
мешает интерпретировать результаты.
ОГРАНИЧЕНИЯ
1. Не исследовать пробы, содержащие консерванты и детергенты.
2. Отрицательный результат Рота/Адено КомбиСтик не
исключает возможность ротавирусной или аденовирусной
инфекции в отдельных случаях по причине низкой
концентрации вирусных антигенов (стадия инфекции,
неправильные пробоподготовка и хранение материала).
3. Для
постановки
корректного
диагноза
необходимо
сопоставление результатов Рота/Адено КомбиСтик с прочей
клинической информацией.
4. Набор Рота/Адено Комби Тест предназначен только для
профессионального использования в диагностике in vitro.
5. Рота/Адено КомбиСтик не дает информации о количестве
антигена в образце, обеспечивая исключительно качественную
идентификацию.
ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА.
Чувствительность и специфичность теста при аденовирусной и
ротавирусной инфекции составляет 99% и 99%, специфичность 98% и 99%, соответственно.
Рота/Адено КомбиСтик не позволяет дифференцировать
серотипы аденовируса человека.
Рота/Адено КомбиСтик не дает неспецифических перекрестных
реакций
с
другими
возбудителями
заболеваний
пищеварительного тракта человека: полиовирус I,II,III, эховирус
3, 7, пикорнавирус, коронавирус, Salmonella B, C, Salmonella
infantis, Campylobacter jejuni, Salmonella typhi, Vibrio cholera,
Shigella sonnei, Clostridium difficile, Shigella flexneri, Shigella
dysenteriae, Escherichia coli, Vibrio parahaemolytica, Entamoeba
histolytica, Giardia lamblia, Trichuris trichiura, Ascaris
lumbricoides.
INVALID
Отрицательный результат: одна зеленая линия появляется в
контрольной зоне (С) тестовой кассеты;
Положительный результат на Ротавирус: в дополнение к
зеленой контрольной линии появляется красная линия в тестовой
зоне (Т);
Положительный результат на Аденовирус: в дополнение к
зеленой контрольной линии появляется голубая линия в тестовой
зоне (Т);
Положительный результат на Pота- и Aдeновирус: в
дополнение к зеленой контрольной линии появляются красная
(Ротавирус) и голубая (Aдeновирус) линии в тестовой зоне (Т).
Одновременное появление двух цветных линий (красной и
голубой) в тестовой зоне говорит об одновременном
инфицировании рота- и адновирусом.
Недействительный результат: отсутствие зеленой контрольной
линии (С) вне зависимости от наличия или отсутствия
окрашенных линий (красной и/или голубой) в тестовой зоне (Т).
Неправильный объем пробы, несоблюдение процедуры
тестирования или качество реагентов – наиболее частые
причины отсутствия контрольной линии. Проанализируйте
процедуру тестирования и повторите ее с использованием новой
тест-кассеты. Если проблема остается, следует прекратить
тестирование и связаться с местным дистрибьютором.
Замечания по интерпретации результатов
Интенсивность окраски линий в тестовой зоне кассеты (Т),
меняется в зависимости от концентрации антигенов в образце.
Однако ни количественное содержание антигенов, ни степень их
Рота/Адено КомбиСтик позволяет выявлять в фекалиях антигены
ротавируса человека и аденовируса человека в концентрациях 1x
106 и 3.4 х 106 в 1 мл, соответственно , что значительно выше
данного показателя в период клинического проявления
заболевания (107 - 1011 в 1 мл).
ЛИТЕРАТУРА:
1. CUKOR G., and BLACKLOW N. R., “Human Viral
Gastroenteritis”, Microbiological Reviews,Vol. 48 No 2, June 1984,
pp. 157-179
2. ESTES, M. K. and COHEN, J.; “Rotavirus Gene Structure and
Function”, Microbiological Reviews, Vol. 53 No 4, Dec. 1989, pp.
410-449
3. PAI C. H., SHAHRABADI M. S., and INCE B., “Rapid Diagnosis
of Rotavirus Gastroenteritis by a Commercial Latex Agglutination
Test”, Journal of Clinical Microbiology, Vol. 22 No 5,Nov. 1985, pp.
846-850
4. CUKOR, G.,PERRON, D.M., and BLACKLOW, N. R.:
“Detection of Rotavirus in Human Stools by Using Monoclonal
Antibody”, Journal of Clinical Microbiology, Vol. 19, 888-892.
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор ООО «ГЕМ»
________________С.А. Гольдберг
«23» июня 2010 г.
Представительство в РФ:
ООО «ГЕМ» 127083, г. Москва, ул. 8
Марта, д.1, стр.12, этаж 3, пом. XXV,
ком.11. Tел/факс: +7 (495) 612-43-12
www.hemltd.ru
IFU-CombiStick-R-6056-HEM-russ.-v.02-02.07.13