ÐÎÑÑÈÉÑÊÀß ÔÅÄÅÐÀÖÈß RU (19) (11) 2 277 773 (13) C2 (51) ÌÏÊ A01H 4/00 (2006.01) ÔÅÄÅÐÀËÜÍÀß ÑËÓÆÁÀ ÏÎ ÈÍÒÅËËÅÊÒÓÀËÜÍÎÉ ÑÎÁÑÒÂÅÍÍÎÑÒÈ, ÏÀÒÅÍÒÀÌ È ÒÎÂÀÐÍÛÌ ÇÍÀÊÀÌ (12) ÎÏÈÑÀÍÈÅ ÈÇÎÁÐÅÒÅÍÈß Ê ÏÀÒÅÍÒÓ (21), (22) Çà âêà: 2004121129/13, 13.07.2004 (72) Àâòîð(û): Äåìåíêî Âàñèëèé Èâàíîâè÷ (RU) (24) Äàòà íà÷àëà îòñ÷åòà ñðîêà äåéñòâè ïàòåíòà: 13.07.2004 (43) Äàòà ïóáëèêàöèè çà âêè: 10.01.2006 Àäðåñ äë ïåðåïèñêè: 127550, Ìîñêâà, óë. Òèìèð çåâñêà , 49, ÔÃÎÓ ÂÏÎ ÌÑÕÀ èì. Ê.À. Òèìèð çåâà, Ïàòåíòíûé îòäåë ïîìåùåíèå óêîðåíåííûõ ïîáåãîâ â åìêîñòü, çàïîëíåííóþ ïåðëèòîì, ïðîïèòàííûì æèäêîé ñòåðèëüíîé ñðåäîé, îáåñïå÷èâàåò àêêëèìàòèçàöèþ êîðíåâîé ñèñòåìû äî ïåðåñàäêè äðåâåñíûõ ïîáåãîâ in vivo è óâåëè÷åíèå èõ óêîðåí åìîñòè. 1 òàáë. R U 2 2 7 7 7 7 3 (57) Ðåôåðàò: Èçîáðåòåíèå îòíîñèòñ ê âûðàùèâàíèþ ðàñòåíèé. Áîêîâûå ïîáåãè ðàñòåíèé âûñàæèâàþò â çàïîëíåííûå àãàðèçîâàííîé ñðåäîé ñîñóäû áåç äíà äë íà÷àëüíîãî óêîðåíåíè . Ïîñëåäóþùåå Ñòðàíèöà: 1 RU C 2 C 2 (54) ÑÏÎÑÎÁ ÐÀÇÌÍÎÆÅÍÈß ÐÀÑÒÅÍÈÉ IN VITRO 2 2 7 7 7 7 3 (56) Ñïèñîê äîêóìåíòîâ, öèòèðîâàííûõ â îò÷åòå î ïîèñêå: SU 1683582 A1, 15.10.1991. RU 2102870 C1, 08.12.1994. SU 1750492 A1, 30.07.1992. SU 1761057 A1, 15.09.1992. SU 1824115 A1, 30.06.1993. R U (45) Îïóáëèêîâàíî: 20.06.2006 Áþë. ¹ 17 (73) Ïàòåíòîîáëàäàòåëü(è): ÔÅÄÅÐÀËÜÍÎÅ ÃÎÑÓÄÀÐÑÒÂÅÍÍÎÅ ÎÁÐÀÇÎÂÀÒÅËÜÍÎÅ Ó×ÐÅÆÄÅÍÈÅ ÂÛÑØÅÃÎ ÏÐÎÔÅÑÑÈÎÍÀËÜÍÎÃÎ ÎÁÐÀÇÎÂÀÍÈß "ÌÎÑÊÎÂÑÊÀß ÑÅËÜÑÊÎÕÎÇßÉÑÒÂÅÍÍÀß ÀÊÀÄÅÌÈß èì. Ê.À. ÒÈÌÈÐßÇÅÂÀ" (RU) RUSSIAN FEDERATION RU (19) (11) 2 277 773 (13) C2 (51) Int. Cl. A01H 4/00 (2006.01) FEDERAL SERVICE FOR INTELLECTUAL PROPERTY, PATENTS AND TRADEMARKS (12) ABSTRACT OF INVENTION (21), (22) Application: 2004121129/13, 13.07.2004 (72) Inventor(s): Demenko Vasilij Ivanovich (RU) (24) Effective date for property rights: 13.07.2004 (45) Date of publication: 20.06.2006 Bull. 17 (54) METHOD FOR IN VITRO MULTIPLICATION OF PLANTS with perlite which is impregnated with liquid sterile medium for providing acclimatization of root system before in vivo transplanting of woody buds. EFFECT: increased efficiency in rooting of woody buds. 1 tbl, 1 ex R U 2 2 7 7 7 7 3 C 2 C 2 (57) Abstract: FIELD: plant growing. SUBSTANCE: method involves planting lateral buds of plants in bottom-free containers filled with agarinic medium for initiating rooting; transplanting rooted buds into container filled Ñòðàíèöà: 2 EN 2 2 7 7 7 7 3 Mail address: 127550, Moskva, ul. Timirjazevskaja, 49, FGOU VPO MSKhA im. K.A. Timirjazeva, Patentnyj otdel R U (73) Proprietor(s): FEDERAL'NOE GOSUDARSTVENNOE OBRAZOVATEL'NOE UChREZhDENIE VYSShEGO PROFESSIONAL'NOGO OBRAZOVANIJa "MOSKOVSKAJa SEL'SKOKhOZJaJSTVENNAJa AKADEMIJa im. K.A. TIMIRJaZEVA" (RU) (43) Application published: 10.01.2006 RU 2 277 773 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Ïðåäëàãàåìîå èçîáðåòåíèå îòíîñèòñ ê îáëàñòè ñåëüñêîãî õîç éñòâà è ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàíî äë ðàçìíîæåíè ðàñòåíèé in vitro. Èçâåñòåí ñïîñîá ðàçìíîæåíè ðàñòåíèé in vitro, ïðåäóñìàòðèâàþùèé ïîëó÷åíèå áîêîâûõ ïîáåãîâ íà ñðåäå, ñîäåðæàùåé öèòîêèíèíû, ðàçäåëåíè ïîáåãîâ è èõ óêîðåíåíèå íà ñðåäå, ñîäåðæàùåé àóêñèíû, ïåðåñàäêó óêîðåíåííûõ ðàñòåíèé â íåñòåðèëüíûå óñëîâè ñ âûñîêîé âëàæíîñòüþ âîçäóõà äë èõ àêêëèìàòèçàöèè (Äåìåíêî Â.È. Ìèêðîêëîíàëüíîå ðàçìíîæåíèå ïëîäîâûõ è ãîäíûõ êóëüòóð. Ì.: Èçäàòåëüñòâî ÌÑÕÀ 1997 ã.). Îäíàêî ïðè òàêîì ñïîñîáå ðàçìíîæåíè îòìå÷àþò áîëüøîé ïðîöåíò ãèáåëè ðàñòåíèé, ÷òî îáú ñí åòñ ïëîõîé ðàáîòîé êîðíåâîé ñèñòåìû ðàñòåíèé, ïîëó÷åííûõ in vitro. Ïî ñóùåñòâóþùåé ìåòîäèêå óêîðåíåíè ïîáåãè òðè íåäåëè íàõîä òñ íà ïèòàòåëüíîé ñðåäå, ñîäåðæàùåé 1-2 ìã/ë ÈÌÊ. Òàêà êîíöåíòðàöè áëàãîïðè òíà äë çàëîæåíè êîðíåé, íî èíãèáèðóåò èõ ðàçâèòèå. Ïåðåñàäêà íåóêîðåíåííûõ ïîáåãîâ ïîñëå 7-10 äíåé íàõîæäåíè íà ñðåäå ÑÈÌÊ íà ñðåäó áåç ÈÌÊ íå âñåãäà äàåò ïîëîæèòåëüíûå ðåçóëüòàòû, óâåëè÷èâàåò çàòðàòû òðóäà è ðàñõîä ïèòàòåëüíîé ñðåäû, îñîáåííî àãàðà. Àãàð ïðèäàåò îïðåäåëåííóþ òâåðäîñòü ñðåäå, ÷òî íå äàåò ïîáåãàì òîíóòü. Êðîìå òîãî, îí àáñîðáèðóåò âåùåñòâà, âûäåë åìûå èç ïîáåãîâ, íî íà ñðåäå, ñîäåðæàùåé 5-8 ã/ë àãàðà, ïëîõî ðàçâèâàþòñ êîðíè âòîðîãî ïîð äêà è íèêîãäà íå ðàçâèâàþòñ êîðíåâûå âîëîñêè. Ïðè óìåíüøåííîì ñîäåðæàíèè àãàðà â ñðåäå ðàçâèâàþòñ "ñòåêëîâèäíûå" ðàñòåíè , êîòîðûå ïðè ïåðåñàäêå â íåñòåðèëüíûå óñëîâè ïîãèáàþò. Íàèáîëåå áëèçêèì òåõíè÷åñêèì ðåøåíèåì ê çà âëåííîìó èçîáðåòåíèþ îòíîñèòñ ñïîñîá âûðàùèâàíè (ÀÑ ¹1683582), êîòîðûé ïðåäóñìàòðèâàåò ââåäåíèå â àãàð ïåðëèòà. Îäíàêî òàêà ñðåäà ñïîñîáñòâóåò õîðîøåìó óêîðåíåíèþ çåìë íèêè, ìàëèíû; äðåâåñíûå óêîðåí þòñ ïëîõî. Î÷åíü âàæíî ñîáëþñòè ñîîòíîøåíèå è âåëè÷èíó ñëî ïåðëèòà. Ïðè òàêîì ñïîñîáå ïåðëèò, ïðîïèòàííûé àãàðîì, ïîñëå àâòîêëàâèðîâàíè ñîñðåäîòî÷åí â âåðõíåé ÷àñòè ñðåäû; íèæí ÷àñòü ïðåäñòàâëåíà àãàðîì ñ âêðàïëåíè ìè ÷àñòèö ïåðëèòà.  òîæå âðåì àãàð áëàãîïðè òíî âëè åò íà íà÷àëüíûé ýòàï óêîðåíåíè . Çà âë åìîå ðåøåíèå íàïðàâëåíî íà ðåøåíèå çàäà÷è óâåëè÷èòü óêîðåí åìîñòü äðåâåñíûõ ðàñòåíèé in vitro è ïðîâåñòè àêêëèìàòèçàöèþ êîðíåâîé ñèñòåìû äî ïåðåñàäêè in vivo, ò.å. ñîçäàòü óñëîâè , ïðè êîòîðûõ èíäóêöè è èíèöèàëèçàöè êîðíåîáðàçîâàíè ïðîèñõîäèò íà àãàðèçîâàííîé ñðåäå, à ðàçâèòèå êîðíåâîé ñèñòåìû â óñëîâè õ, áëèçêèõ ê íåñòåðèëüíûì, áåç äîïîëíèòåëüíûõ çàòðàò íà ïåðåñàäêó. Ïðèìåð âûïîëíåíè ñïîñîáà. 1. Ñîñóäû áåç äíà (êàïèëë ðíûå òðóáêè) äëèíîé 1-1,5 ñì è øèðèíîé 1-1,5 ñì ïëîòíî ðàçìåùàëè â ñîñóäàõ ñ äíîì îáúåìîì 250-500 ìë è çàëèâàëè ðàñïëàâëåííîé ïèòàòåëüíîé ñðåäîé äë óêîðåíåíè (1/2 ÌÑ + 1,5 ìã/ë ÈÌÊ + 20 ã/ë ñàõàðîçà + 6 ã/ë àãàð). Áîëüøèå ñîñóäû ãåðìåòè÷íî çàêðûâàëè è àâòîêëàâèðîâàëè. Ïîñëå àâòîêëàâèðîâàíè ñðåäà â ñîñóäàõ áåç äíà çàñòûâàëà. 2.  äðóãèå áîëüøèå ñîñóäû íàñûïàëè ïåðëèò ñëîåì 2-2,5 ñì è ïðîïèòûâàëè æèäêîé ñðåäîé (1/2 ÌÑ áåç ðåãóë òîðîâ ðîñòà è ñàõàðîçû), ãåðìåòè÷íî çàêðûâàëè è àâòîêëàâèðîâàëè. 3. Ïîäâîè áëîíè 62-396 ðàçìíîæàëè íà ïèòàòåëüíîé ñðåäå Ìóðàñèãà è Ñêóãà ñ äîáàâëåíèåì 2 ìã/ë 6 ÁÀÏ. Ïîñëå øåñòîãî ïàññàæà ïðîâîäèëè óêîðåíåíèå ïîáåãîâ. 4.  ëàìèíàð-áîêñå êîíãëîìåðàò ïîáåãîâ ðàçäåë ëè, ïîáåãè ñàæàëè â ñîñóäû áåç äíà è ïåðåíîñèëè â ñîñóä ñ ïåðëèòîì. Ïîñëå óêîðåíåíè ïîáåãîâ â ñðåäå ñ àãàðîì è ðàçâèòèåì êîðíåé â ïåðëèòå ðàñòåíè ïåðåñàæèâàëè â íåñòåðèëüíûå óñëîâè . Ïðåäëàãàåìîå ðåøåíèå ïîçâîë åò èìåòü äâå íåñìåøèâàþùèåñ ñðåäû â îäíîì ñîñóäå, ÷òî ïîçâîë åò ñîçäàòü íåîáõîäèìûå óñëîâè äë îòäåëüíûõ ýòàïîâ êîðíåîáðàçîâàíè è ïîâûñèòü ïðèæèâàåìîñòü ðàñòåíèé â íåñòåðèëüíûõ óñëîâè õ. Êðîìå òîãî, óñêîð åò ïðîöåññ çàïîëíåíè ñîñóäîâ äë óêîðåíåíè â 10-20 ðàç ïî ñðàâíåíèþ ñ èñïîëüçîâàíèåì äë ýòèõ öåëåé ïðîáèðîê. Ðåçóëüòàòû îïûòîâ ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå. Òàáëèöà Âëè íèå ñðåäû íà óêîðåí åìîñòü è ïðèæèâàåìîñòü ïîäâî áëîíè 62-396 Ñòðàíèöà: 3 DE RU 2 277 773 C2 Ñðåäà 5 10 15 Óêîðåíåíèå, % Ïðèæèâàåìîñòü â íåñòåðèëüíûõ óñëîâè õ, % 1/2 MC àãàð 75 1/2 MC àãàð + ïåðëèò 52 62 71 Ïðåäëàãàåìûé ñïîñîá 73 95 Òàêèì îáðàçîì, ïðåäëàãàåìîå èçîáðåòåíèå ïîçâîë åò ïîëó÷àòü äîñòàòî÷íîå óêîðåíåíèå ïîáåãîâ è ïîâûñèòü íà 33% ïðèæèâàåìîñòü ðàñòåíèé â íåñòåðèëüíûõ óñëîâè õ. Ôîðìóëà èçîáðåòåíè Ñïîñîá ðàçìíîæåíè ðàñòåíèé in vitro, âêëþ÷àþùèé ïîëó÷åíèå áîêîâûõ ïîáåãîâ íà ñðåäå ðàçìíîæåíè , èõ ðàçäåëåíèå è âûñàäêó íà óêîðåíåíèå, ïîñëåäóþùóþ àêêëèìàòèçàöèþ óêîðåíåííûõ ðàñòåíèé â íåñòåðèëüíûõ óñëîâè õ, îòëè÷àþùèéñ òåì, ÷òî ðàçäåëåííûå áîêîâûå ïîáåãè äë íà÷àëüíîãî óêîðåíåíè âûñàæèâàþò â ñîñóäû áåç äíà, çàïîëíåííûå àãàðèçîâàííîé ñðåäîé, à çàòåì ïîìåùàþò äë äàëüíåéøåãî ðàçâèòè êîðíåâîé ñèñòåìû â åìêîñòü, çàïîëíåííóþ ïåðëèòîì, ïðîïèòàííûì æèäêîé ñòåðèëüíîé ñðåäîé. 20 25 30 35 40 45 50 Ñòðàíèöà: 4 CL