82 Фно-ЗаВиСиМЫе ПоКаЗаТеЛи аПоПТоЗа При

82
▪ медицинские науки ▪
УДК 616.6–006.6
ФНО-ЗАВИСИМЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ АПОПТОЗА
ПРИ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
Хараева З. Ф., Кузьмицкая Е. Ф., Шевченко А. А., Акаева С. А.
Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х. М. Бербекова,
г. Нальчик, irafe@yandex.ru
Проведено исследование ФНО (фактор некроза опухоли) –зависимых путей апопто-
за у пациентов с папилломавирусной инфекцией разного онкогенного риска. Среди изученных групп пациентов наиболее снижена возможность организма элиминировать
интегративный вирус у пациентов с ВПЧ высокого онкогенного риска (16,18 типа),
что выявлено по сниженному уровню sFasL и TRAIL. Уровень sFas и TRAIL коррелирует с тяжестью течения инфекционного процесса, что позволяет использовать
их в качестве диагностического критерия при скрытых инфекциях.
Ключевые слова: апоптоз, папилломавирусная инфекция, фактор некроза опухоли.
TNF-DEPENDENT WAYS OF APOPTOSIS OF PAPILLOMAVIRUS
INFECTIONS
Kharaeva Z. F., Kuzmitskaya E. F., Shevchenko A. A., Akaeva S. A.
Kabardino-Balkarien State University of H. M. Berbekov’s name, Nalchik, irafe@yandex.ru
The investigation of TNF-dependent apoptosis process of patients with papillomavirus
infections was studied. The most decreased possibilities of organism to eliminate virusinfected cells by apoptosis in the case of 16,18 types of papillomavirus infections was
obtained. The sFas and TRAIL levels correlats with severity of infections processes.
Keywords: apoptosis, papillomavirus infections, tumor necrosis factor.
Инфекция вирусами папилломы человека
(ВПЧ), является одним из защитных меха-
достаточно широко распространена среди
низмов [4]. Существует несколько меха-
населения и у подавляющего большинства
низмов запуска апоптоза, в том числе через
женщин проходит бессимптомно. Этиоло-
рецепторы к иммуноцитокинам (ФНО-α)
гию неопластических заболеваний шейки
и через специфические «рецепторы смерти».
матки в настоящее время многие связыва-
Семейство ФНО, кроме ФНО-α и β, включа-
ют с инфицированием ее тканей вирусом
ет Fas (СD95), FasL, TRAIL, СD40L, CD27L,
папилломы [5]. Апоптоз (программируемая
OX30L, DR4 (TRAIL-R1), DR5 (TRAIL-R2)
гибель клетки) при интегративной вирус-
и др. [1,3]. ФНО-α — один из основных ци-
ной инфекции высокого онкогенного риска,
токинов, способных оказывать прямое по-
такой, как папилломавирусная инфекция
вреждающее действие на клетки-мишени,
фундаментальные исследования № 8, 2010
83
▪ медицинские науки ▪
а также является индуктором апоптоза
мощью тест-системы «Протеиновый кон-
и воспринимается рецепторами, по структу-
тур» (Санкт-Петербург, Россия). Все пробы
ре напоминающими Fas [1]. При некоторых
исследовались в динамике (в течение 30
хронических вирусных инфекциях выявле-
дней): с момента поступления в стационар
ны изменения уровня ФНО-α, коррелирую-
и спустя месяц после проводимой комплекс-
щие с тяжестью течения заболевания [2].
ной терапии (с подключением ациклических
Целью исследования было определить уро-
нуклеозидов и иммуномодуляторов — пре-
вень системных и локальных показателей
параты интерферонов, индукторы интерфе-
ФНО-α, sFas, и TRAIL у больных с папилло-
ронов). Статистическую обработку прово-
мавирусной инфекцией разного онкогенного
дили стандартными методами.
риска в динамике инфекционного процесса
Результаты
на фоне проводимой стандартной терапии.
Для оценки активности апоптоза были
Материалы и методы
исследованы
Под наблюдением находились пациен-
TRAIL, sFas, ФНО-α у пациентов с папил-
ты (94 человека в возрасте от 19 до 44 лет,
ломавирусной инфекцией разного онкоген-
16 мужчин, 78 женщин) с папилломавирус-
ного риска. При поступлении в стационар
ной инфекцией человека (ВПЧ) в сыворот-
у пациентов с ВПЧ-16, 18 типа высокого
ке крови и отделяемом половых органов,
онкогенного риска уровень ФНО-α в отде-
у которых исследовали уровень ФНО-α,
ляемом половых органов увеличен на 15,4±
sFas и TRAIL. Группа подразделялась на 2
0,5 % у женщин и на 13,3± 0,5 % у мужчин.
п / гр.: а) с ВПЧ высокого онкогенного ри-
На 30-е сутки терапии уровень ФНО-α в ло-
ска 16,18 типов — 54 человека (муж. — 5;
кальном биологическом материале норма-
жен. — 49); б) с ВПЧ низкого онкоген-
лизуется. Существенное повышение кон-
ного риска 10,13 типов — 40 человек
центрации — на 94,4± 8,5 % и отсутствие
(муж. — 11; жен. — 29). У пациентов ВПЧ-
динамики на фоне терапии наблюдалось
инфекция подтверждалась ПЦР-анализом.
в этой же п / группе пациентов (ВПЧ-16, 18
В группу контроля вошли 30 здоровых до-
типа) в сыворотке крови. У женщин и муж-
норов, не имеющих антител к ВПЧ-16,18,
чин с ВПЧ-10, 13 типа низкого онкогенного
ВПЧ-10,13 типам и другим хроническим
риска локальные показатели ФНО-α сопо-
вирусным инфекциям. Оценку содержания
ставимы с показателями донорской груп-
сывороточного и локального растворимого
пы как при поступлении в стационар, так
Fas-рецептора (sFas) проводили методом
и после 30 дней лечения. Системные по-
твердофазного иммуноферментного анализа
казатели ФНО-α у пациентов с низким он-
(ИФА) с использованием стандартной тест-
когенным риском при поступлении выше
системы human sAPO-1 / Fas ELISA BMS245
на 111,1±10,5 %, а через 30 суток на 105,6±
(Bender MedSystems, USA). Уровень TRAIL
4,5 % относительно контроля. Таким обра-
измеряли с использованием тест-системы
зом, локальный уровень ФНО-α практиче-
human TRAIL ELISA (Biosource, USA). Ис-
ски не изменен (p>0,05), что свидетельству-
следование уровня ФНО-α проводили с по-
ет, во‑первых, об отсутствии воспаления и,
ФНО-зависимые
лиганды
фундаментальные исследования № 8, 2010
84
▪ медицинские науки ▪
во‑вторых, может служить одной из причин
нировать интегративный вирус у пациентов
снижения активности апоптоза, так как в ре-
с ВПЧ высокого онкогенного риска (16,18
цепторзависимом пути запуска апоптоза
типа), что выявлено по сниженному уровню
задействована
sFasL и TRAIL. Уровень sFas и TRAIL кор-
группа
ФНО-рецепторов.
на 25,0±0,5 %
релирует с тяжестью течения инфекцион-
при поступлении, на 20,0±2,5 % после те-
ного процесса, что позволяет использовать
рапии в вагинальном отделяемом у паци-
их в качестве диагностического критерия
ентов с ВПЧ — 16,18. В уретральном от-
при скрытых инфекциях.
Уровень
sFas
понижен
деляемом sFasl в момент рецидива снижен
Работа выполнена при поддержке гран-
на 30,7±2,5 % и на 23,0±0,5 % после лече-
та НК-193П Федеральной целевой про-
ния. Системный показатель sFasl ниже кон-
граммы
троля на 21,6±1,5 % и понижается на фоне
ческие кадры инновационной России»
терапии
на 2009– 2013 годы.
на 24,0±0,5 %.
Положительная
«Научные
и научно-педагоги­
динамика локального sFasL наблюдается
Список литературы
у женщин с ВПЧ-10,13: ниже на 25,5±0,5 %
1. Барышников. А. Ю. и др. Иммуноло-
при поступлении, после терапии стал
гические проблемы апоптоза. — М.:УРСС,
выше на 10,5±1,5 % относительно донор-
2002.— 327 с.
ской группы (p<0,05). Тогда как системный
2. Хараева З. Ф., Аппаева Б. Т. Маркеры
уровень sFasl и локальный у мужчин равен
апоптической активности при герпетиче-
уровню донорской группы до и после лече-
ской инфекции // Цитокины и воспаление.–
ния. Сниженное количество sFas приводит
2008. — Т. 7. — № 3. — С. 34–35.
к уменьшению возможности клетки запу-
3. Bodmer J. TRAIL receptor-2 signals
стить апоптоз, что увеличивает жизнеспо-
apoptosis through FADD and caspase-8 // Nature
собность вируса. Локальные и системные
Cell Biology.— 2000.— V. 2.— P. 241– 243.
концентрации TRAIL у больных с ВПЧ вы-
4. Hardwick
J. M. Virus-induced
сокого онкогенного риска существенно сни-
apoptosis // Adv. Pharmacol.–1997.— V. 41.—
жены (на 58–64 %, на 55 %, соответственно)
P. 295– 336.
(р<0,001) и не нормализуются, несмотря
5. Kim C. Y. Selection of human cervical
на проведенную терапию. У больных с ВПЧ
epithelial cells that possess reduced apoptotic
низкого онкогенного риска как локальные,
potential to low-oxygen conditions / C. Y. Kim,
так и системные показатели до и после лече-
M. H. Tsai, C. Osmanian et al // Cancer Res.—
ния в пределах нормы. Отсутствие TRAIL-
1997.— V. 57, № 19.— P. 4200–4204.
рецепторного апоптоза может быть одной
из причин онкогенеза.
Вывод
Среди изученных групп пациентов наиболее снижена возможность организма элими-
фундаментальные исследования № 8, 2010