ЛЕКЦИЯ № 3 ХРОМАТОГРАФИЯ Хроматография — Основной принцип хроматографии Классификация хроматографических методов а) По агрегатному состоянию подвижной фазы: б) По агрегатному состоянию неподвижной фазы: в) По доминирующему механизму взаимодействия разделяемых веществ с подвижной и неподвижной фазами: ●адсорбционная — ●молекулярно-ситовая — ●ионообменная — 1 ●биоспецифическая — ●распределительная — г) По геометрии неподвижной фазы: Общий механизм разделения веществ на примере распределительной хроматографии двухкомпонентной системы Некоторые методы хроматографии Газожидкостная хроматография (ГЖХ) 2 Применяется для анализа и разделения разнообразных смесей веществ с молярной массой до 300 г/моль, в том числе и для анализа газов. Высокоэффективная жидкостная хроматография высокого давления (ВЭЖХ) Применяется для анализа сложных смесей, в том числе биологических объектов (установления аминокислотного состава белков, анализа нуклеиновых кислот и т.д.). Колоночная препаративная хроматография Жидкостно–твердофазная Адсорбент — Применяется для разделения макроскопических количеств (граммы или килограммы) веществ, для очистки и выделения органических веществ, в том числе лекарственных препаратов Молекулярно–ситовая Адсорбенты — 3 Применяется для разделения смесей белков, нуклеиновых кислот, вирусов, отделения белков от низкомолекулярных примесей. Ионообменная Адсорбент — Применяется для разделения смесей фенолов, карбоновых кислот (на анионитах), аминосахаров, нуклеотидов, нуклеозидов, пуриновых, пиримидиновых и других оснований (на катионитах), аминокислот, белков, нуклеиновых кислот. Биоспецифическая Адсорбент — Применяется для выделения специфических нуклеиновых кислот, гормонов, вирусов, антител, антигенов, ферментов, рецепторов лекарственных препаратов, клеток. Распределительная хроматография Бумажная хроматография Адсорбент — Подвижная фаза — Тонкослойная хроматография (ТСХ) Адсорбент — Подвижная фаза — 4 Применяется для анализа смесей веществ, идентификации и проверки чистоты отдельных веществ, в том числе лекарственных препаратов. 3.5. Приме не ние х ромат ог раф и и в ф арм аци и В фармации и фармакологии основное направление использования хроматографии — это идентификация лекарственных веществ, количественное определение биологически активных компонентов в растительном сырье, в полупродуктах, в сложных лекарственных смесях. Хроматография служит для контроля производства лекарств, для изучения стабильности лекарственных форм, для выбора метода оценки стабильности их, а также для контроля качества препаратов. 5