Набор реагентов для определения креатинкиназы КОД 981372

Код: 981697
Набор
реагентов
креатинкиназы
КОД
для
определения
981372 10 х 10 мл
981775 8 х 3 мл
981697 4 х 52 мл
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор
реагентов
предназначен
для
количественного определения in vitro активности
креатинкиназы (креатин-N-фосфотрансферазы) в
сыворотке или плазме человека с помощью
анализаторов серии Konelab. Все результаты
анализов следует интерпретировать с учетом
клинических данных.
ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ (1,2)
Наибольшая
активность
креатинкиназы
наблюдается в поперечно-полосатых мышцах,
головном мозге и тканях сердца. В других тканях,
таких как почки, диафрагма и предстательная
железа, активность креатинкиназы существенно
менее выражена.
Активность
КФК
повышается
при
многих
заболеваниях, например, поражениях скелетных
мышц, сердца, ЦНС и щитовидной железы. После
существенного повреждения мышечной ткани
(например, в результате травмы) общая активность
КК в крови начинает повышаться, достигая у 50%
пациентов патологического уровня в среднем через
4 - 5 часов. Активность повышается через 8 - 24 ч.
после развития инфаркта и затем возвращается к
стандартной величине.
МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Креатинкиназа
катализирует
реакцию
между
креатинфосфатом и АДФ (аденозин-5’-дифосфатом)
с образованием креатина и АТФ (аденозин-5’трифосфата). АТФ фосфорилирует глюкозу до Г-6Ф
(глюкозо-6-фосфата)
в
присутствии
ГК
(гексокиназы). Г-6-Ф окисляется до 6-ФГ (глюконат6-фосфата) и в то же время эквимолярное
количество НАДФ восстанавливается до НАДФ-Н в
реакции, катализируемой Г-6-Ф-ДГ (глюкозо-6фосфатдегидрогеназой).
Увеличение
светопоглощения при 340 нм, проявляющееся в
результате
образования
НАДФ-Н,
прямо
пропорционально
активности
креатинкиназы,
имеющейся в образце (3).
КК
Креатинфосфат + АДФ ---- ----> креатин + АТФ
ГК
АТФ + глюкоза ---------> АДФ + Г-6-Ф
Г-6-Ф-ДГ
+
+
Г-6-Ф + НАДФ --------------> 6-ФГ + НАДФ-Н + Н
ФОРМА ВЫПУСКА
Реагент А: субстрат
Код: 981372 10 х 10 мл
Код: 981775 8 х 3 мл
Код: 981697 4 х 52 мл
Реагент В: буфер
Код: 981372 10 х 10 мл
Код: 981775 8 х 3 мл
4 х 52 мл
СОСТАВ в восстановленных реагентах
Буфер (имидазол)
104 ммоль/л
Креатинфосфат
31 ммоль/л
Аденозин-5’-дифосфат (АДФ)
2 ммоль/л
Соль магния
10 ммоль/л
D-глюкоза
21 ммоль/л
Аденозин-5’-монофосфат (АМФ)
5 ммоль/л
Никотинамид аденин
динуклеотид фосфат (НАДФ)
2 ммоль/л
Ди(аденозин-5’)пентафосфат (АФ5А) 10 мкмоль/л
N-ацетил-L-цистеин (NAC)
21 ммоль/л
ЭДТА
2 ммоль/л
Гексокиназа (ГК)
> 3500 Е/л
Глюкозо-6-фосфат
дегидрогеназа (Г-6-Ф-ДГ)
> 2000 Е/л
NaN3
< 0,1%
Меры предосторожности
Только для диагностики in vitro. При работе со
всеми лабораторными реагентами необходимо
соблюдать стандартные меры предосторожности.
Реагент в качестве стабилизатора содержит азид
натрия. Не употреблять внутрь. Избегать попадания
на кожу и слизистые оболочки.
Приготовление
Растворить содержимое флакона с реагентом А во
всем объеме реагента В. Закрыть флакон крышкой
и перемешать раствор.
Примечание: перед установкой реагента на борт
анализатора Konelab необходимо удостоверится в
отсутствии пузырьков во флаконе и на поверхности
реагента.
Хранение и стабильность
Невскрытые реагенты стабильны при температуре
2-8°C до срока годности, указанного на этикетке
флакона (коробки). Информацию по стабильности
реагентов, помещенных в анализатор, смотрите в
примечаниях по использованию анализатора
Konelab.
Если
для
свежевосстановленного
реагента
абсорбция
по
отношению
к
бланку
по
дистиллированной воде при 340 нм составляет
более 0,700, то такой реагент использовать нельзя.
ОТБОР ПРОБ
Тип образца
Негемолизированная
сыворотка
или
гепаринизированная плазма. Избегать воздействия
на образцы яркого света.
Меры предосторожности
Исследовать, хранить и утилизировать образцы
крови
человека
следует
как
потенциально
инфекционно-опасные материалы.
Хранение
Образцы можно хранить до 2 дней при температуре
20-25 °C, до 7 дней при температуре 4-8 °C или 4
недели при температуре -20 °C в темном месте.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
См. справочное руководство и примечания к
применению для автоматизированной процедуры
вашего
анализатора
Konelab.
На
любое
применение, которое не было утверждено Thermo
Fisher Scientific, гарантия работы прибора не
распространяется, поэтому оно должно быть
проверено пользователем.
1
Материалы, которые входят в набор: реагенты в
соответствии с приведенным выше описанием.
Необходимые материалы, которые не входят в
набор: контрольные материалы в соответствии с
приведенным ниже описанием.
Калибровка
Величина абсорбции (dА/мин) преобразуется в
результат с помощью фактора пересчета.
Или используйте калибратор eCal код 981830 в
соответствии с инструкциями, прилагаемыми на
вкладыше к упаковке калибратора eCal.
Контроль качества
Используйте образцы для контроля качества не
реже одного раза в день и после каждой
калибровки, а также каждый раз, когда используется
новый флакон с реагентом.
Имеющиеся контрольные материалы:
Контрольный образец СК-МБ, код 981255
Nortrol, код 981043
Abtrol, код 981044
Интервалы и диапазон для контроля необходимо
устанавливать
согласно
индивидуальным
требованиям лабораторий. Результаты анализа
образцов
для
контроля
качества
должны
укладываться
в
пределы,
установленные
лабораторией.
ВЫЧИСЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Результаты
вычисляются
автоматически
анализатором Konelab следующим образом:
активность в Е/л = dА/мин х фактор
Теор. фактор = Vобщ. х 1000 / 6,22 х Vобр. х Р
где:
Vобщ. - общий объем реакционной смеси в мл
Vобр. - объем образца в мл
6,22 - коэффициент экстинкции НАДФ-Н при 340 нм
Р - длина кюветы = 1
Коэффициент пересчета мккат/л = (Е/л)/60
Если в качестве калибратора используется eCal
(981830), результаты вычисляются анализатором
Konelab
автоматически
с
использованием
калибровочной кривой.
ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА
Интерференция
Критерий: попадание в пределы +/- 10% от
первоначального значения.
Билирубин: интерференция не наблюдается до
концентрации 1000 мкмоль/л (58,5 мг/дл).
Гемолиз: не используйте гемолизованные образцы.
Липемия: интерференция не обнаружена до
концентрации 8 г/л Intralipid® (торговая марка
Fresenius Kabi AB) Имеется плохая корреляция
между мутностью раствора и содержанием
триглицеридов.
Для информации о других интерферентах,
обращайтесь по ссылке 5.
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (3)
Для мужчин: < 171 Е/л (< 2,85 мккат/л) при 37 °C
Для женщин: < 145 Е/л (< 2,41 мккат/л) при 37 °C
Указанные значения служат только в качестве
справочных величин. Рекомендуется, чтобы каждая
лаборатория
оценила
этот
диапазон
или
определила соответствующий диапазон для группы
населения, которую она обслуживает.
ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ
15 - 1500 Е/л (0,25 - 25 мккат/л).
Расширенный
диапазон
измерений
после
вторичного разбавления:
15 - 7500 Е/л (0,25 - 125 мккат/л).
РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Предел обнаружения
7 Е/л (0,12 мккат/л)
Предел
обнаружения
представляет
собой
минимальную
концентрацию/активность
определяемого вещества, которую можно отличить
от нуля. Она как: концентрация образца с нулевым
содержанием исследуемого вещества + 3 ст. откл.
(внутри серии, n = 24).
Воспроизводимость (в Е/л)
Среднее 154 Среднее 460 Среднее 711
SD
CV%
SD
CV%
SD CV%
Внутрисер. 3,5
2,2
3,6
0,8
9,7
1,4
Межсер.
1,2
0,8
8,0
1,7
16,4
2,3
Общая
4,1
2,6
9,0
1,9
20,7
2,9
Воспроизводимость
определялась
согласно
протоколу EP5-А Комитета по клиническим
лабораторным стандартам США (NCCLS) при
использовании анализатора Конелаб 60 в течение
20 дней с количеством измерений = 80.
Сравнение метода
Сравнение метода проводилось с коммерчески
доступным методом.
Линейная регрессия (Е/л):
у = 1,01 х - 4
r = 0,999
n = 71
Исследование
проводилось
на
пробах
с
концентрацией от 18 до 2150 Е/л.
Результаты, полученные в разных лабораториях,
могут
отличаться
от
указанной
рабочей
характеристики.
БИБЛИОГРАФИЯ:
1. Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz
th
Fundamentals of Clinical Chemistry, 5
edition, W B
Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 357-358.
2. Thomas, L. (ed.), Clinical Laboratory Diagnostics;
Use and Assessment of Clinical Laboratory Results, 1st
edition,
TH-Books
Verlagsgesellschaft
mbH,
Frankfurt/Main, Germany, 1998, p. 73.
3. IFCC 2002/3: IFCC Primary Reference Procedures
for
the
Measurement
of
Catalytic
Activity
Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 2.
Reference Procedure for the Measurement of Catalytic
Concentrations
of
Creatine
Kinase,
Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(6): 635-642.
4. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of
Analytes; Preanalytical variables. Brochure in: Samples:
From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH,
Darmstadt, 1996.
5. Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory
Tests, Fifth Edition, AACC Press, Washington, D.C., 3234 – 3-239, 2000.
Произведено
Thermo Fisher Scientific Oy
Clinical Diagnostics Finland
Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa, Finland
Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300
www.thermo.com/konelab
2
Дата версии (yyyy-mm-dd)
2007-08-14
3