Возможности time-lapse технологии в повышении

Возможности time-lapse технологии в
повышении эффективности программ
ЭКО
Оценка целесообразности и оптимизация
критериев отбора перспективного эмбриона
Сенечкин И.В.
г. Москва
РАРЧ 2013
Симпозиум компании «Дельрус»
Разнообразие схем и формул оценки
Chen et al.
Fertility and Sterility, 2013
Разнообразие схем и формул оценки
(F1)
(F2)
(F3)
(F4)
(F5)
Munoz et al.
EJ of OGRB, June 2013
(t8-t2)/(t3-t2) + (t5-t4)
(t8-t5)/(t8-t4)
(t4-t3)/(t4-t2)
(t4-t2)/(t8-t4)
(t3-t2)
Cetinkaya et al.
Hum Reprod, June 2013
Оценка риска анеуплоидий
Campbell et al.
Reprod Biomed Online, 2013
да
да
да
да
да
нет
нет
нет
нет
5C 3С-2С 4С-3С tsB
52,3
10
0,5 105,6
51,2 11,5
0,5 104,1
57,2 11,7
0,5
98,4
48,1 10,2
0,2
92,9
56,2 12,2
0,5
102
55,2 13,3
0,2
100
44,9 10,2
0,5 105,7
55,6 10,6
0,8 101,8
51,3 11,7
1
106,6
Некоторые референтные значения
0.8±0.7
52.3±4.2
0.6±0.2
1.0±0.8
53.5±0.7
11.1±2.2
11.8±1.2
≤96.2
12.4±0.3
11.0±1.0
Беременность не наступила
Клиническая беременность
Неоднозначность критериев отбора
Причины вариативности
1. Культуральные среды
- производители
- используемые типы сред
2. Условия культивирования
- %О2
- совместное/раздельное
- стабильность
3. Методологические различия
4. Средняя характеристика пациентов
5. Протоколы ССО и т.п.
Реальность
В зависимости от требований к предсказательной точности
модели, каждая лаборатория должна сама провести
формулирование/корректировку морфокинетических критериев
качества
Вследствие этого станет возможной достоверная количественная
оценка применимости time-lapse технологии
Для этих целей достаточно 100-400 пациентов
Что возможно в условиях малого количества пациентов (до 20)?
Сводные данные (март-июль 2013)
Primo Vision, взято в анализ 17 пациентов
Всего эмбрионов: 117 (6.88/пациент)
Бластоцист (5 сут): 57 (3.35/пациент)
Primo Vision
Средний возраст: 30 лет
Переносы: 8 пациенток (3 цс/5 крио), 9 эмб
Клиническая беременность: 5 (1 цс/4 крио)
Потери беременности (1й триместр): 0 цс/1 крио
Контрольная группа
Средний возраст: 33.2 года
Переносы: 233 пациентки (52 цс/181 крио), 299 эмб
Клиническая беременность: 142 (25 цс/117 крио)
Потери беременности (1й триместр): 2 цс/11 крио
%
62(33/80)??
20(0/25)??
импл. 55%??
60.9(48.1/64.6)
9.2(8.0/9.4)
импл. 47%
Распределение значений времен наступления 2-,3-,4-,5клеточных стадий и ранней бластоцисты
40
Fluctuations in 2-,3-,4-,5-cell and blastocyst formation events
35
30
B+
2C-1
25
3C-1
20
4C-1
15
5C-1
10
Средние значения
tSB
5
Mean values
0
-5
30
0
20
40
60
80
100
120
2С
3С
4С
5С
25
B-
20
15
10
2С-0
3С-0
5
4С-0
0
5С-0
0
-5
20
40
60
80
100
120
B+
28,3
37,6
40,8
52,2
B30,6
38,3
44,6
53,8
p
0,006
0,611
0,024
0,423
Асинхроннность дробления неперспективных эмбрионов
Cleavage asynchronicity for non-blastulated embryos
Mean (h)
SD
Variation
25
coefficient
9,51
12,48 11,96
среднее (ч)
7,85
14,01
9,86
4,09
2,64
4,38
SD
5,64
10,31
7,37
43,00% 21,17% 36,65% Коэфф. вариации 71,83% 73,56% 74,76%
20
B+
B-
15
10
5
0
3С-2С
4С-2С
5С-4С
3С-2С 4С-2С
5С-4С
3С-2С минимальный срок до начала 2-го деления дробления
4С-2С срок завершения 2-го деления дробления
5С-4С минимальный срок до начала 3-го деления дробления
Доверительные интервалы (±2δ)
2С
80
4С
50
70
45
60
40
35
50
30
40
25
30
20
20
15
10
10
5
0
20
25
30
35
40
45
0
20
30
40
Вероятность формирования
бластоцисты
Высокая
27.4 - 29.2 ч
37.7 - 43.9 ч
Низкая
29.2 - 31.9 ч
42.7 - 46.5 ч
50
60
Роль пациента и регуляции активности эмбриона
Patient vs embryo as a factor responsible for blastulation
Dependent variable
B+
B-
Зависимая
переменная
2С
3С
4С
5С
B
2С
3С
4С
5С
Factor Patient
Factor strength
Вклад пациента Сила влияния фактора
p<0,001
p=0,005
p=0,017
p=0,711
p=0,094
(47,9±19,04)%, p<0,01
(33,1±24,49)%, p>0,05
(26,9±26,75)%, p>0,05
(9,0±33,28)%, p>>0,05
(17,0±33,20)%, p>>0,05
P<0,001
P<0,001
p=0,009
p=0,006
(38,5±20,96)%,
(39,2±20,75)%,
(15,1±28,93)%,
(30,7±23,63)%,
p>0,05
p>0,05
p>0,05
p>0,05
Выводы
В условиях малой выборки возможно создание ограниченной
модели, определяющей высокую или низкую вероятность
формирования бластоцисты у эмбриона, прошедшего первые два
деления дробления
Для достоверной оценки эффективности (клинические
беременности) требуется больше данных
Анализ имеющихся результатов указывает на высокий
потенциал применимости технологии для группы молодых
пациенток (<35 лет,>6 зигот)
Помимо практической значимости, технология представляет
интерес и для фундаментальных исследований
Появляется уникальная возможность детально исследовать
эмбрионы человека без нарушения существующих форм этики
Спасибо за внимание!
1
Сенечкин И.В. 1
Хилькевич Л.В.
2
Доронин Ю.К.
1
Высоцкий А.Ю.
1
Гаврилов В.М.
1
Гергерт Е.В.
1
2
Перинатальный Медицинский Центр, отделение ЭКО, Москва
МГУ им. М.В. Ломоносова, кафедра Эмбриологии, Москва
Thank you for attention!
Приложение
Расчет коэффициента вариации
(SD/mean)*100
Расчет силы влияния по Снедекру:
(MSvar - MSerror)/(MSvar + (n-1)*MSerror)
MSvar – межгрупповая вариация
MSerror – внутригрупповая вариация
n – число данных