Краткий отчет ИИ 2011

Краткий отчет
об основных результатах научно-исследовательской деятельности
ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России
в 2011 году
Основные результаты научной и инновационной деятельности

в рамках ФЦП «Национальная система химической и биологической безопасности
Российской Федерации (2009-2013 годы)» (заказчик ФМБА России)- 3 темы:
- «Разработка методов иммуномониторинга в районах расположения опасных химических и
биологических предприятий. Разработка комплекса методов для контроля за развитием стрессовых
ситуаций при действии различных неблагоприятных факторов антропогенной природы путём
определения сигналов тревоги (аларминов) в биологических жидкостях человека» (шифр «Стандарт11»)
Осуществлена разработка комплекса методов для контроля за развитием стрессорных ситуаций при
действии различных неблагоприятных факторов антропогенной природы путём определения
сигналов тревоги (аларминов) в биологических жидкостях человека. Адаптированы методики
определения аларминов в различных биологических жидкостях человека (в слюне, сыворотке и
плазме периферической крови человека) иммуноферментным методом. В процессе выполнения
работы для всех адаптированных методов отработаны нормативные параметры.
Подготовлен проект методического пособия «Комплекс стандартных и унифицированных тестов
для определения сигналов тревоги (аларминов) в биологических жидкостях человека».
«Разработка препарата, обладающего противовирусными свойствами по отношению к вирусу
гепатита С, действующего на основании механизма интерференции РНК» (шифр «Гепатит»)
Получены синтетические молекулы (миРНК, праймеры), культуры клеток, экспрессирующие
вирусные гены и проведены работы по изучению эффективности подавления экспрессии
созданными препаратами миРНК. Разработана методика определения эффективности сайленсинга
вирусных генов in vitro. Разработан лабораторный регламент на получение компонентов
лекарственного препарата.
«Подготовка к изданию и издание монографии «Биомедицинская безопасность, аллергия и
иммунитет» (шифр «Монография-2»)
Подготовлена и отредактирована рукопись монографии с цветными иллюстрациями. Подготовлен
оригинал-макет и его электронная версия. Монография издана тиражом 500 экземпляров,
утвержден проект расчета рассылки.

в рамках целевой программы ведомства «Медико-биологическое и медико-санитарное
обеспечение спортсменов сборных команд Российской Федерации на 2011 – 2013
годы» (заказчик ФМБА России) -1 тема:
- «Разработка системы мониторинга и коррекции иммунодефицитных состояний у спортсменов
высшей квалификации. Оценка иммунного и аллергического статуса при различных видах
спортивной деятельности и разработка методов ранней диагностики, терапии и профилактики для
высококвалифицированных спортсменов» (шифр «Модуль-11»)
Проведены клинико-экспериментальные исследования по оценке специфических и интегральных
показателей иммунного и аллергического статусов при различных видах спортивной деятельности.
Разработаны
методы
ранней
диагностики,
терапии
и
профилактики
(включая
вакцинопрофилактику и радиоизотопные методы исследования) аллергических заболеваний и
иммунных нарушений у спортсменов. Разработаны предложения по практическому использованию
ведущих показателей, отражающих иммунный и аллергический статусы человека при различных
видах спортивной деятельности. Разработаны предложения по проведению специализированных
лечебно-профилактических мероприятий у спортсменов сборных команд РФ, отнесённых в группы
риска развития иммунодефицитных состояний и аллергопатологии. Разработана концепция
мониторинга и коррекции иммунодефицитных состояний у спортсменов высшей квалификации.
Подготовлены Методические рекомендации по диагностике, мониторингу и коррекции
иммунодефицитных состояний у высококвалифицированных спортсменов.

по отраслевому заказу (заказчик ФМБА России ) - 3 темы:
- «Изучение сочетанного влияния компонентов вредных производственных факторов и природных
пыльцевых аллергенов на иммунную систему человека в условиях неблагоприятной экологической
обстановки. Изучение влияния модельных аллергенов из пыльцы березы, содержащей тяжелые
металлы, на иммунную систему человека» (шифр «Аллергодиагностика-11»)
Получены модельные аллергены из пыльцы березы, содержащие соединения свинца в различной
концентрации. Установлено влияние этих аллергенов на факторы пролиферации лимфоидных
клеток здоровых доноров и больных аллергией. Подготовлено Заключение о сочетанном
воздействии компонентов вредных производственных факторов и природных пыльцевых
аллергенов на иммунную систему человека.
- «Оценка эффективности применения методов комплексной диагностики, терапии и
профилактики иммунодефицитных состояний у персонала объекта уничтожения химического оружия
в п.г.т. Горный Саратовской области» (шифр «Горный-11»)
Разработаны и апробированы четырехэтапная
методика расчета риска развития
иммунодефицитного состояния (ИДС) и трехэтапная методика оценки зависимости показателей
иммунного статуса (ИС) с учетом условий труда у работников УХО.
Подготовлен
откорректированный проект методических рекомендаций для МСЧ ФМБА России по организации
лечебно-профилактических мероприятий при иммунозависимых заболеваниях.
- СЧ НИР «Оценка иммунного статуса человека при различных видах спортивной деятельности и
разработка методов его коррекции» (шифр «Статус-ИИ) (совместно с ФГУП «НИИ ГПЭЧ» ФМБА
России)
Разработана технология получения препарата из клеточной стенки кишечной палочки штамм М-17
и получено необходимое для последующих экспериментов количество этого препарата. Изучены
иммунобиологические свойства субстанции препарата. Предварительные данные показывают, что
препарат не обладает токсическими свойствами. Подготовлен лабораторный регламент получения
препарата ПеКСИМ-1и лабораторный регламент получения препарата ПГШ-1 из гриба Шии-Таке.

по Плану научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ,
выполняемых ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России по смете
расходов на 2011 год (заказчик ФМБА России) - 6 тем:
- «Разработка технологий получения вакцин, аллергенов и аллерготропинов, создание и
испытание иммунокорригирующих средств» (шифр «Иммунобиотехнологии»)
Получены низкопирогенные модифицированные производные R- и S-липополисахаридов.
Проанализирована противовирусная активность рекомбинантного белка rec (IL-29) на модели
Hela/RSV – 1000.
Создан комплексный аллерготропин из очищенных аллергенов клещей домашней пыли D.
pteronyssinus и D. farinae, с Полиоксидонием.
Изучены молекулярно-биологические характеристики основных белков пыльцы березы Betv1, Betv2, Bet v3, Betv4, Betv5, Betv7 и Betv8.
Рекомбинантный белок ПА-2 наработан и хроматографически очищен в количестве 110
мг.Получены конструкции на основе экспрессионного вектора рЕТ15b и фрагментов ДНК,
кодирующих консенсусные аминокислотные последовательности V3 петли белка gp120 ВИЧ1
изолятов А, С и В.
Получены экспериментальные образцы конъюгатов инсулина с образцами производных
полиоксидония, проявляющие сахаропонижающую активность.
Установлено, что добавление в культуру клеток меланомы В16, антисывороток, полученных
после иммунизации экспериментальных животных конъюгатом синтетических аналогов
углеводных цепей опухолеассоциированного ганглиозида GM3 и белка гемоцианина, приводит к
подавлению размножения опухолевых клеток в культуре.
Испытана биологическая активность Fe – и Fe + препаратов рекомбинантных лактоферринов
человека (рчЛФ) в культурах моноцитов, Т-лимфоцитов и линии дендритных клеток НTSC.IL10.
Показана протективная активность конъюгатов белка M. tuberculosis и полиоксидония на
экспериментальной модели острого туберкулеза у мышей.
Проведено исследование иммуногенности синтетического пептида, копирующего V3 петлю
ВИЧ1.
Изучены физико-химические характеристики, чистота и пирогенность низкоэндотксичных
ЛПС (НЭТ-ЛПС) из S.sonnei.
2



















Документы, разработанные на этапе:
Методика создания коньюгированных конструкций на основе цвиттерионных капсульных
полисахаридов B.fragilis.
Паспорт на очищенный рекомбинантный белковый продукт.
Отчет о доклинических испытаниях комплексного аллерготропина из клещей домашней
пыли D. pteronyssinus и D. farinae.
Методика получения очищенных генноинженерных аллергенов.
Лабораторный регламент по синтезу пептидов, имитирующих эпитопы мажорного
аллергена пыльцы березы (проект).
Акт о наработке производных порфиринов, содержащих тяжелые металлы (Cu, Cо и Fe)
и щелочноземельные металлы (Mg, Cd и Zn).
Лабораторный регламент синтеза дендримеров с порфириновой структурой (проект).
Акт о наработке очищенного белка ПА-2.
Заключение о протективной активности полученных препаратов.
Спецификация на экспериментальные образцы конъюгата инсулина с производными
полиоксидония.
Отчет по изучению сахаропонижающей активности, переносимости, и острой
токсичности конъюгатов инсулина.
Заключение об эффективности лактоферринов in vitro.
Спецификация на образцы конъюгатов.
Акт испытания антигенной и протективной активностей полученных образцов
конъюгатов.
Отчет о переносимости мышами различных доз препарата и местном действии.
Заключение об иммуногенности конъюгатов растительных пептидогликанов с
антигенами.
Заключение о формировании специфических регуляторных клеток при введении ВИЧ специфических антигенов и иммуноадъювантов различной природы.
Спецификация на низкоэндотоксичные липополисахариды.
Отчет о патентных исследованиях
- «Изучение фундаментальной и прикладной биологической роли системы HLA и других генов,
ассоциированных с иммунным ответом» (шифр «Иммуногенетика»)
Наработаны реагенты для проведения сравнительных исследований по SNP(ОНП)типированию генов PTPN22, CTLA4, IL2, IL4, IL4R, IL10, IL18, IL12B, IFNG.
Проведено сравнительное тестирование созданных типирующих реагентов с аналогичными,
зарегистрированными в Минздравсоцразвития. На основании анализа генетических баз данных
создан перечень перспективных праймеров для типирования генов HLA класса I (А и В).
Установлено, что HLA DRB1*13 ассоциирован с восприимчивостью к туберкулезу легких,
а DRB1*11 – с устойчивостью: - у больных туберкулезом легких был выявлен ряд значимых
ассоциаций DRB1-генотипов, таких как 04/15, 04/16, 11/17 и 13/15, с восприимчивостью к
туберкулезу легких.
Получены данные о частотах генов HLA DRB1, DQA1, DQB1 у русских из Костромской,
Смоленской и Архангельской областей, которые являются частью работы по созданию
иммуногенетической карты России.
Документы, разработанные на этапе:
 Протокол испытаний опытных образцов наборов для SNP типирования.
 Лабораторный регламент получения праймеров для SNP типирования.
 Перечень праймеров для типирования генов I класса HLA-A, B.
 Заключение о роли генов HLA класса II в развитии туберкулеза.
 Заключение о профиле частот генов, контролирующих иммунный ответ в 3 популяционных
группах.
- «Разработка и применение методов клинической диагностики нарушений иммунного ответа и
сопутствующих заболеваний"(шифр "Диагностика")
3
Проведена оценка результатов количественного и качественного методов ПЦРисследования в период обострения у пациентов с типичной и атипичной формами заболевания
простым герпесом.
Впервые проведены исследования динамики вирусной нагрузки на фоне терапии у
пациенток с хронической персистирующей папилломавирусной инфекцией в отсутствие
дисплазии тяжелой степени, рака in situ.
Показана возможность использования разработанных реагентов для количественной
диагностики условно-патогенных микроорганизмов Staphylococcus sp. и Streptococcus sp.
методом ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени для этиологической
диагностики обострения хронического бронхита.
Проведено обследование 36 пациентов страдающих бронхиальной астмой (БА), с жалобами
на дневную сонливость, ночные приступы удушья, остановки дыхания во сне с целью
выявления синдрома обструктивного апноэ сна (СОАС).
Разработан протеомный метод определения белков, входящих в комплексы тетраспанинов,
обладающий высокой чувствительностью и разрешающей способностью.
Получены, очищены и стандартизованы пылевые и пыльцевые аллергены, разработана
мембранная тест-система для аллергодиагностики пылевых и пыльцевых аллергенов.
Проведено исследование иммунного статуса у 12 больных с острой вирусной инфекцией и у
52 взрослых больных с хронической папилломавирусной инфекцией и с местными лучевыми
поражениями после лучевой терапии.
Обследовано свыше 4000 сывороток на антитела к ВИЧ-1,2 и антитела к гепатиту С.
Выявлено 17 положительных образцов сывороток крови на антитела к ВИЧ 1,2 и
подтвержденных в иммуноблоте, из них 9 образцов выявлены первично и 8 – вторично.
Документы, разработанные на этапе:
 Прогностический алгоритм ведения пациентов с рецидивирующей герпес-вирусной
инфекцией.
 Методические рекомендации по применению метода real-time PCR для оценки прогноза
течения заболевания и подбора терапии у пациентов с хронической рецидивирующей
герпес-вирусной инфекцией (проект).
 Методические рекомендации по применению метода real-time PCR у пациенток с
персистирующей хронической папилломавирусной инфекцией (проект).
 Протокол обследования больных с хронической бронхо-легочной патологией.
 Протокол обследования больных бронхиальной астмой с апноэ.
 Методика определения белкового состава комплексов молекулы CD9.
 Инструкция по применению лабораторного варианта мембранной тест-системы для
аллергодиагностики.
 Акты испытаний мембранной тест-системы.
 Методические рекомендации по иммунотерапии при местных лучевых поражениях прямой
кишки (проект).
 Протокол выявления гепатита С у ВИЧ инфицированных пациентов.
 Отчеты о патентных исследованиях.
- «Разработка новых тест-систем и методов диагностики нарушений иммунного
сопутствующих заболеваний» (шифр «Тест-системы»)
ответа и
Разработан и апробирован тест дегрануляции базофилов крови больных аллергическими
заболеваниями, осложненными стафилококковой инфекцией.
Показано, что введение аллергенов пыльцы растений (тимофеевки, березы, полыни) в
культуру мононуклеарных клеток здоровых людей оказывает регулирующее действие на
экспрессию гена GATA3, кодирующего транскрипционный фактор GATA-3, ответственный за
дифференцировку Th2-клеток.
Выделены аллергены из картофеля, моркови, яблока, корневого сельдерея, имеющие
перекрестные реакции с пыльцевыми аллергенами. Все аллергены соответствовали
требованиям по подлинности и специфичности, показано отсутствие токсичности.
Установлено, что отработанная методика повышения чувствительности животных к
МИБП с помощью предварительной обработки мышей (CBAхС57Вl/6) F1
противоопухолевым антибиотиком «Дактиномицин» позволяет в несколько десятков
4
тысяч раз снизить летальную дозу исследуемого препарата по сравнению с интактными
животными.
Документы, разработанные на этапе:




Методика оценки уровня либерации гистамина из базофилов.
Заключение об эффективности оценки прямого действия аллергенов на CD4+ Tлимфоциты.
Проекты лабораторных регламентов (4) получения аллергенов из пищевых продуктов
растительного происхождения (картофеля, моркови, яблока, корневого сельдерея).
Акты апробации модели в лабораториях различных медицинских учреждений.
- «Иммуноэпидемиология последствий в Чернобыле и деятельности предприятий атомно энергетического комплекса" (шифр "Радиация")
Изучены особенности формирования, распространенности, частоты встречаемости и
структуры соматической патологии у ликвидаторов в зависимости от сроков участия в
ликвидации последствий аварии, зоны выполнения работ и дозы облучения, по данным
мониторинга 5-го пятилетия после аварии на Чернобыльской АЭС. Проведен мониторинг в
регионах наблюдения.
Изучены особенности формирования иммунозависимой и соматической патологии,
изменений в иммунном статусе у персонала Горно-химического комбината (ГХК) в
зависимости от воздействующих факторов профвредности в условиях прямого и косвенного
воздействия. Изучены особенности факторов профвредности от характера выявленной
патологии. Проведен мониторинг персонала ГХК и населения г. Железногорска.
Проведен мониторинг персонала Сибирского химического комбината (СХК) и населения г.
Северска. Изучены особенности формирования иммуноопосредованной и соматической
патологии, изменений в иммунном статусе у персонала СХК и зависимости от факторов
профвредности в условиях прямого и косвенного воздействия. Изучение особенностей
факторов профвредности от характера патологии. Изучены особенности клинических
проявлений и характеристики иммунного статуса при хронической лучевой болезни у
персонала СХК.
Документы, разработанные на этапе:
 Алгоритм формирования иммунозависимой и соматической патологии и изменений в
иммунном статусе у лиц, принимавших участие в ЛПА на ЧАЭС.
 Алгоритм выявления изменений в иммунном статусе при иммуноопосредованной и
соматической патологии у персонала основного производства ГХК и населения г.
Железногорска.
 Алгоритм выявления изменений в иммунном статусе при иммуноопосредованной и
соматической патологии у персонала основного производства СХК и населения г. Северска.
«Разработка
новых
методов
лечения
различных
форм
иммунопатологии,
иммуноопосредованных профзаболеваний и их осложнений» (шифр «Иммунопатология»)
Разработан Протокол проведения клинико-экономического анализа терапии больных БА и
Алгоритм «Ведение больных БА с целью достижения контроля за состоянием».
Проведено исследование перекрестно-реагирующих свойств аллергенов грибов и латекса у
больных атопической бронхиальной астмой.
Проведен анализ эффективности терапии острого периода опоясывающего герпеса
различными ациклическими нуклеозидами, и периода постгерпетической невралгии.
У всех больных с АтД и пиодермией выявлено снижение уровня внутриклеточных αдефензинов в периферической крови по сравнению со здоровыми донорами.
Показана целесообразность оценки экспрессии генов определенных цитокинов IL2, IL2r,
IL8, IL12В, IL23, IFN-α, IL5 в коже и периферической крови больных АтД для определения
прогноза течения заболевания и эффективности наружной терапии.
Регистр пополнился 9-ю наблюдениями вновь выявленных пациентов с первичной
иммунной недостаточностью.
40 пациентам с поллинозом, проведен курс АСИТ методом, соответствующим
рандомизации по группам.
5
Изучено воздействие иммунокорригирующих препаратов при проведении терапии в послеоперационном периоде у пациенток со злокачественными новообразованиями молочной
железы.
Отрабатывались различные методы выявления истинной лекарственной аллергии на
рентгено-контрастные средства.
Проведена АСИТ при аллергии к комарам с использованием нового отечественного
лечебного аллергена и разработанной схемы введения препарата.
Разработаны ПРОЕКТЫ новых Стандартов медицинской помощи больным бронхиальной
астмой, атопическим дерматитом и крапивницей.
Документы, разработанные на этапе:
 Протокол проведения клинико-экономического анализа терапии больных формой БА.
 Алгоритм по ведению больных бронхиальной астмой с целью оптимального контроля за
состоянием пациента.
 Алгоритм ведения больных бронхиальной астмой с сенсибилизацией к грибам.
 Методические рекомендации по ведению пациентов в острый период Herpes zoster и период
постгерпетической невралгии (проект).
 Алгоритм подбора иммунокорригирующей терапии у больных атопическим дерматитом и
пиодермиями.
 Заключение о влиянии топических ГКС и иммуннотропных препаратов на экспрессию генов
цитокинов в коже и крови больных АтД.
 Алгоритм обследования больных АТД и ТКЛК.
 Протокол обследования детей с иммуноопосредованными заболеваниями.
 Заключение о сравнительном клинико-иммунологическом анализе различных схем АСИТ.
 Протокол изучения эффективности иммунокоррекции при опухолях молочных желез в
послеоперационном периоде.
 Алгоритмы лечения лекарственной непереносимости.
 Протокол проведения генетических исследований у больных с первичными
иммунодефицитами.
 Алгоритм терапии рецидивирующей бронхолегочной патологии у детей.
 Заключение об оценке безопасности и клинической эффективности АСИТ с применением
ЛФАК у больных ИА к НН.
 Инструкция по отработке доз и схем введения комбинаций иммунотропных препаратов.
 Методические рекомендации по проведению аллерген-специфической иммунотерапии
(проект).
 Отчеты о патентных исследованиях.

в рамках ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям
развития научно-технологического комплекса России на 2007-2012 годы» (заказчик
Минобрнауки России)- 4 темы:
- «Изучение аллергенности и иммуногенности искусственных конструкций, полученных в
результате различных модификаций аллергенов»
Создан комплексный препарат на основе аллергоида пыльцы березы и мурамилпептидов,
который сохранил иммуногенность исходного аллергена параллельно с уменьшением
аллергенности. Полученный аллергоид нетоксичен. Разработана собственная лабораторная
технология получения мурамилпептидов клеточной стенки бактерий Escherichia coli M-17,
обеспечивающая получение максимального количества препарата. Показана выраженная
иммуномодулирующая активность полученного препарата мурамилпептидов при отсутствии
токсичности.
Дальнейшее исследование аллергенных и иммуногенных свойств комбинации комплексного
препарата на основе аллергоида пыльцы березы и мурамилпептидов позволит отобрать наилучший
вариант.
- «Исследование процессов стимуляции иммунного ответа на антигены опухолевых клеток с целью
разработки медицинской технологии по подавлению метастазирования у онкологических больных»
Введение экспериментальным животным дендритных клеток (ДК), пульсированных
конъюгатом синтетических аналогов углеводных цепей опухолеассоциированного ганглиазида
GM3 и белка гемоцианина, приводит к индукции гуморального иммунного ответа, развивающегося
6
по классическому типу с образованием клеток памяти. При этом, наиболее сильный и
продолжительный иммунный ответ развивался после 2-х кратного введения ДК, пульсированных
конъюгатом, с интервалом в 3 месяца. Антитела специфически взаимодействуют с опухолевыми
клетками, структурным элементом поверхностных мембран которых является ганглиозид
GM3.Вакцинация мышей зрелыми ДК, нагруженными конъюгатом, приводит к формированию
клона лимфоцитов, обладающих цитотоксической активностью по отношению к клеткам меланомы
В16.
- «Разработка микробицидов с антивирусными свойствами»
Подготовлены
клеточные
модели
для
исследования
цитотоксических
свойств
экспериментальных образцов микробицидов и их влияния на пролиферативную активность in vitro.
Наработаны образцы микробицидов – 12 представителей группы гуматов и 3 представителя
полифенолов растительного происхождения.Проведено исследование in vitro цитотоксических
свойств экспериментальных образцов микробицидов на основе полиоксидония и его композиций с
гуматами или полифенолами и их влияния на пролиферативную активность. Показано, что гуматы,
как и полиоксидоний, относятся к слаботоксичным веществам. Растительные полифенолы
обнаруживают токсичность, характерную для большинства соединений этой группы. Первая
нетоксичная концентрация, не вызывающая гибели клеток, составляет 10 мкг/мл. В субтоксическом
ряду концентраций исследуемые вещества как в виде монопрепаратов, так и при сочетанном
применении полиоксидония с гуматами и полиоксидония с полифенолами не подавляют
пролиферацию клеток. Проведен скрининг и эпидемиологическое обследование пациентов СПИДцентров. Разработаны критерии включения/исключения добровольцев в клинические испытания
микробицидов.
- «Разработка средств, функционирующих на основе механизма РНК-интерференции, для лечения
бронхиальной астмы и осложняющих ее респираторных вирусных инфекций»
Продемонстрирована возможность успешного использования молекул миРНК в качестве
высокоспецифичного средства «выключения» экспрессии вирусных генов. В ходе экспериментов
репродукция РСВ была специфично подавлена молекулами миРНК в экспериментах in vitro.
Молекулы кшРНК, направленные против гена р РСВ, также показали выраженный
противовирусный эффект, однако использование кшРНК имеет преимущество перед миРНК, в
частности обеспечивается более длительный эффект. Проведенные эксперименты in vitro
подтвердили наши предположения о том, что мРНК гена Р является удобной мишенью для
разработки противовирусных средств на основе механизма РНКи. Кроме того, в данной работе
нами были протестированы шесть спроектированных потенциально эффективных молекул siRNA,
направленных против мРНК-il-4 и три против мРНК-il-13. Их эффективность была оценена с
использованием полученной ранее модели экспрессии IL-4 и IL-13 мыши in vitro различными
методами. Суммировав все полученные результаты, удалось отобрать для дальнейшей работы две
из 6 протестированных siRNA (siIL4-267 и siIL4-406) эффективно подавляющих экспрессию IL-4; в
экспериментах in vitro до 10 раз на уровне конечного белкового продукта. Также перспективным
является вариант siIL-13-366 подавляющий экспрессию IL-13 до трех раз.

в рамках ФЦП «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности
Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу»
(заказчики Минобрнауки России, Минпромторг России) -3 темы:
- «Доклинические исследования лекарственного средства – профилактической вакцины против
гемофильной инфекции»
Проведено выращивание H. influenzae и подбор оптимальных условий инкубации в
полусинтетической среде: отработаны условия культивирования посевного материала щтамма(ов)
H.influenzae для последующего засева промышленного ферментера, проведено масштабирование
процессов культивирования H. influenzae капсульного штамма, составлен план доклинических
исследований лекарственного средства против гемофильной инфекции, оформлены паспорта
отобранных штаммов.
- «Доклинические исследования лекарственного средства для комплексной терапии гепатита С на
основе естественных и искусственных регуляторов иммунного ответа».
Проведена трансформация пяти клеточных штаммов E. coli плазмидой, кодирующей
рекомбинантный белок ИПФ III. Проведена селекция трансформированных плазмидой pIPF-3
штаммов на различных антибиотиках. Проведен анализ наличия рекомбинантного белка ИПФIII
после индукции, проведен анализ его специфичной противовирусной активности, получен штамм-
7
продуцент BL(21)IPF3(7). Проведен патентный поиск. Рекомбинантный белок ИПФIII является
патентноспособным. Составлен протокол доклинических исследований.
- «Доклиническое исследование лекарственных средств для специфической иммунотерапии
аллергии».
Разработана унифицированная лабораторная технология выделения аллергенов клещей
домашней пыли. Из полученных аллергенов выделяли аллергоиды. По содержанию белка (более
33%) оба аллергоида соответствовали требованиям технического задания и не имели токсических
свойств в тесте острой токсичности. Разработана система контроля качества аллергопрепаратов для
определения их подлинности и специфической активности. Изготовленные аллергопрепараты будут
использованы для приготовления аллерготропинов.
 в рамках федеральной целевой программы «Предупреждение и борьба с социально
значимыми заболеваниями (2007-2012 годы)», подпрограммы «Вакцинопрофилактика»
(заказчик Минздравсоцразвития) -1 тема
- «Анализ эпидемиологических и иммуногенетических особенностей распространенности вирусов
папилломы человека высокого онкогенного риска. Оценка медицинской и социальной значимости
проблемы» (шифр "Вакцинопрофилактика")
Проведен ретроспективный анализ медицинской документации 300 пациенток с
папилломавирусной инфекцией, осуществлен анализ данных о продолжительности и характере
течения заболевания за последние 3 года, наличии сопутствующих урогенитальных
заболеваний, инфекций, передающихся половым путем, влиянии факторов на развитие
клинических форм заболеваний (экзофитных кондилом, цервикальной эпителиальной
неоплазии CIN), характер и эффективность терапевтических мероприятий в течение последних
3-х лет, направленных на лечение клинических форм папилломавирусной инфекции.
Выполнено
клинико-лабораторное
обследование
группы
из
30
пациенток
с
папилломавирусной инфекцией, включающее клиническое исследование и лабораторное
обследование. Анализ показал высокую распространенность инфицированности вирусами
папилломы человека высокого онкогенного риска молодых женщин репродуктивного возраста
(20-40 лет), развитие клинических форм заболевания у 77% пациенток (в 65% случаев кондиломатоз наружных половых органов, влагалища, шейки матки, в 12,3% - цервикальная
интраэпителиальная неоплазия I-III степени), наличие рецидивов заболевания после
применения хирургического лечения.

по программе Российского фонда фундаментальных исследований (РФФИ) –
5 тем:
- «Гомеостатические процессы в популяции Т-лимфоцитов, вызванные лимфопенией. Анализ
механизмов и предпосылок развития иммунопатологии»
Изучена динамика восстановления Т-лимфоцитов и их субпопуляций в тимусе, селезенке и
лимфатических узлах после общего сублетального (4 Гр) гамма-облучения, исследованы
миграционные характеристики Т-клеток, а также уровень и соотношение пролиферации и апоптоза
Т-клеток в различные сроки после облучения. Подтвержден ряд ранее установленных
закономерностей - двухфазный характер восстановления клеточности тимуса и более высокая
эффективность восстановления популяции Т-клеток в селезенке по сравнению с лимфатическими
узлами, в которых через 2 мес. после облучения численность Т-клеток составляет 60-80% от уровня
контроля при 110-120% в селезенке. Получен ряд новых данных.
- «Роль лимфоцитарного фосфатазо-ассоциированного протеина (LPAP) в образовании и
функционировании межмолекулярного комплекса белков CD4 и CD45»
Впервые были получены моноклональные антитела, реагирующие с белком LPAP. Это позволило
более детально охарактеризовать экспрессию белка LPAP на различных клетках, обнаружить и
описать отдельные изоформы белка LPAP и изучить его взаимодействие со своими партнерами по
межмолекулярному комплексу, образуемому молекулой CD45. Были обнаружены взаимные
переходы между отдельными изоформами при поликлональной стимуляции лимфоцитов. Для
проверки гипотезы о множественном фосфорилировании получены мутантные формы LPAP с
аминокислотными заменами в сайтах возможного фосфорилирования. Полученные мутантные
формы будут исследованы на следующем этапе изучения белка LPAP.
- «Роль иммунологического синапса и его молекулярных компонентов в межклеточной передаче
вирусов человека ВИЧ-1 и HTLV-1»;
Осуществили нок-даун экспрессии указанных белков в трех Т-клеточных линиях человека Jurkat,
8
CEM и HPB-ALL, используя shRNA технологию. Кроме того, восстановили процесс нормального
О-гликозилирования белков путем стабильной экспрессии шаперона Cosmc в клетках Jurkat.
Результаты измерения уровня межклеточной инфекции HTLV-1 с модифицированными клетками
показал следующее. Снижение уровня экспрессии CD43 и CD45 приводило к значительному
снижению уровня инфекции вируса HTLV-1, хотя нок-даун CD45 снижал также инфекцию ВИЧ-1.
Восстановление О-гликозилирования в клетках Jurkat способствовало 10-кратному увеличению
инфекции HTLV-1 и не влияло на ВИЧ-1 инфекцию. Все указанные эффекты наблюдались только в
том случае, если модификация осуществлялась в клетках-эффекторах, но не в клетках-мишенях.
Также показали, что клетки Jurkat-Cosmc с самым высоким уровнем передачи вируса HTLV-1
экспрессируют на своей поверхности крупные единичные скопления вируса по сравнению с
другими клетками, где вирус собирается в мелкие множественные образования. На основании
данных построили модель, которая объясняет роль CD43, CD45 и О-гликозилирования в инфекции
HTLV-1 и подчеркивает значимость баланса про- и анти-адгезивных молекул на поверхности Тлимфоцитов человека в межклеточной передаче вируса HTLV-1
- «Изучение функциональной гетерогенности NK-клеток в норме и при патологии»
Показано, что сочетание маркеров CD94 и CD335 позволяет идентифицировать
CD94brightCD335dim субпопуляцию CD56dim NK-клеток, обладающую высоким цитотоксическим
потенциалом. Кроме того, глобальный анализ транскриптомов позволил идентифицировать гены,
кодирующие потенциальные поверхностные маркеры «эффекторной» субпопуляции NK-клеток,
способной к быстрой дегрануляции при взаимодействии с клетками-мишенями. Необходима
проверка экспрессии этих генов «эффекторной» субпопуляцией NK-клеток на уровне белка.
Результаты данного этапа будут использованы на следующем этапе работы при подтверждении
результатов транскриптомного анализа путем анализа экспрессии кандидатных маркеров на уровне
белка с помощью проточной цитометрии.
- «Исследование механизмов дифференцировки CD4+ цитотоксических Т-лимфоцитов»
Показано, что дифференцировка CD4+ ЦТЛ in vitro лучше идет после активации низкими (10 пг/мл)
нежели высокими (1000 пг/мл) концентрациями праймирующего суперантигена. CD4+ ЦТЛ,
полученные in vitro, являются функционально активными, поскольку экспрессируют перфорин и
дегранулируют при взаимодействии со специфическими мишенями. Дифференцировке CD4+ ЦТЛ
способствуют повышенные концентрации IL-2 в процессе экспансии, а также присутствие IL-10
или IFN- α на этапе экспансии. Дифференцировка CD4+ ЦТЛ из «обычных» CD4+ Т-клеток лучше
идет у тех доноров, у которых имеется повышенное содержание CD4+ ЦТЛ в крови. Выявленные
закономерности дифференцировки CD4+ ЦТЛ in vitro могут в дальнейшем быть использованы при
получении таких клеток для иммунотерапии злокачественных новообразований.

По гранту Президента Российской Федерации по государственной поддержке
молодых российских ученых – докторов наук - 1 тема:
- «Разработка средств адресной доставки лечебно-профилактических препаратов, работающих на
основе механизма интерференции РНК»
По результатам исследования разработан эффективный способ трансдукции первичных клеток
мышей, что с успехом позволило внедрить в них репортерную генетическую конструкцию. Для
получения стабильной во времени трансдукции дендритных клеток(DC), клеток селезенки и
перитонеальных макрофагов(ПМф), нами использовался интегрирующий лентивирусный вектор
(LV-вектор). В качестве репортерного гена применялась генетическая конструкция несущая и
экспрессирующая ген gfp. DC являются наиболее важными клетками-мишенями для трансдукции,
поскольку являются антиген-презентирующими и вовлечены в адаптивный иммунный ответ. Кроме
того в экспериментах in vivo на лабораторных мышах была показана возможность доставлять
генетические конструкции посредством лентивирусных частиц в клетки-мишени, в данном случае в
клетки лимфоузлов.
Научные мероприятия
Специалисты Института принимали активное участие в работе около 150 научных и научнопрактических мероприятий, из них в 10 странах дальнего и ближнего зарубежья. Сотрудниками
Института сделано свыше 200 докладов, в том числе 88 на международных или с международным
участием конгрессах. Институт принимал также участие в 3 выставках, в том числе
международной.
Публикации и патенты
9
Сотрудниками Института опубликовано 9 монографий, 100 статей и 44 тезиса в отечественных,
9 статей и 18 тезисов в зарубежных журналах, получено 2 патента, получено 1 положительное
решение на выдачу патента и 1 положительное решение на регистрацию товарного знака.
Участие в реализации международных проектов
Институт сотрудничает со странами АТЭС по проблемам ВИЧ/СПИДа. В г. Сан-Франциско
(США) состоялось второе заседание Рабочей группы по здравоохранению. Институтом разработан
и представлен проект «Рабочее совещание АТЭС «Анти-ВИЧ-вакцины как часть комплексного
подхода к
предотвращению и контролю СПИДа в регионе АТЭС». Проект получил
положительную оценку стран-участниц АТЭС и заявлен к финансированию. Предполагается
провести в Москве (июнь 2012 г.) двухдневное рабочее совещание с участием 50-60 человек из
стран АТЭС.
Предполагается участие иностранного партнера (профессор П. Чандра) в совместном проекте
«Разработка новой технологии создания вакцин и лекарственных препаратов против социально
значимых заболеваний, включая ВИЧ-инфекцию/СПИД», который планируется подать в Фонд
Центра разработки и коммерциализации новых технологий при инновационном центре «Сколково».
Продолжаются совместные научные исследования на условиях личной договоренности, без
финансовых обязательств по теме: «Активация макрофагов и их роль в вирус-индуцированном
обострении бронхиальной астмы» с Европейским Респираторным Обществом (ERS Long Term
Fellowsip).
Поддерживаются рабочие контакты с лабораторией ретровирусов Национального Института
рака (г. Фредерик, США) в области изучения вирусной природы рака.
Научно-просветительская и общественная деятельность
Специалисты Института регулярно читают лекции для практических врачей, принимают
участие в телевизионных программах,
телемостах, дискуссиях,
научно-практических
конференциях, семинарах, школах.
Сотрудники Института активно участвуют в работе редколлегий 18 научных журналов:
«Иммунология», «Физиология и патология иммунной системы», «Российский аллергологический
журнал», «Молекулярная биология», «Радиационная биология. Радиоэкология» и др.
Участие в работе:
 Совета по науке, технологиям и образованию при Президенте РФ.
 Совета генеральных и главных конструкторов, ведущих ученых и специалистов в области
высокотехнологичных секторов экономики при Председателе Правительства РФ.
 Экспертного совета в сфере здравоохранения МЗСР РФ
 Рабочей группы по спортивной медицине и антидопинговому обеспечению Совета при
Президенте Российской Федерации по развитию физической культуры и спорта, спорта
высших достижений, по подготовке и проведению ХХII Олимпийских зимних игр и ХI
Параолимпийских зимних игр 2014 года в г. Сочи, ХХVII Всемирной летней универсиады
2013 г.
 Правительственной Комиссии по вопросам профилактики, диагностики и лечения
заболевания, вызываемого вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ–инфекции)
 Рабочей группы по решению вопросов включения Российской Федерации в международный
регистр доноров костного мозга и создания Российского национального регистра доноров
костного мозга, содержащего не менее 5 тысяч образцов.
 Сессии Общего собрания отделения физиологии и фундаментальной медицины РАН
Награды
 Премия РАН им. И.И.Мечникова за цикл работ «Молекулярно-клеточные механизмы
организации лимфоидных органов человека и мыши» - Ярилин А.А.
 Нагрудный знак «Золотой крест ФМБА России» - Мартынов А.И., Ильина Н.И., Латышева
Л.В., Лусс Л.В., Ярилин А.А.
Первый заместитель директора
А.И. Мартынов
10