М И Н И СТ Е РСТ В О О Б РА ЗО В А Н И Я РО ССИ Й СК О Й Ф Е Д Е РА Ц И И В О РО Н Е Ж СК И Й ГО СУ Д А РСТ В Е Н Н ЫЙ У Н И В Е РСИ Т Е Т И спользов ание колорим етриии фотоколорим етриив анализе лекарств енныхсредств П ракт и ч ес ко е руко во дс т во для с т удент о в С пец и аль но с т ь 040500 «Ф армац и я» ВОРОН ЕЖ 2003 2 УДК661. 12 : 616–073. 524 Ут верждено науч но –мет о ди ч ес ки м с о вет о м фармац евт и ч ес ко го факуль т ет а (15 января 2003 гпро т о ко л № 1) С о с т ави т ель Н ес т еро ва Т. А. П ро грамма по дго т о влена на кафедре фармац евт и ч ес ко й хи ми и и фармац евт и ч ес ко йт ехно ло ги и фармац евт и ч ес ко го факуль т ет а Во ро нежс ко го го с ударс т венно го уни верс и т ет а. Реко мендует с я для с т удент о в 4, 5 курс а. 3 Оглавлени е Введени е… … .… … … … … … … .… … … … … … … … … … … ................... … … ....… … 4 1. Ц ель з анят и я… … … … … .… … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..............4 2. Ко нт ро ль ны е во про с ы ............................................................ … … … … … … … … ...6 3. И нфо рмац и о нны йбло к.................................................................. … … .....… … ......7 3.1. Общ и е по ло жени я мет о да фо т о мет ри и .............................................. … … … … ..7 3.2. Задани я для с амо по дго т о вки ............................................. … … … … … … … … ...13 4. П лан з анят и я......................................................................... … … … … … … … … … .13 5. С пи с о ки с по ль з о ванно йли т ерат уры .......................................... … … .… … … … ....14 6. С амо с т о ят ель ная рабо т а ............................................................. … … ..… … … … ...16 6.1. П о дго т о вка реферат о в по т еме элект и вно го курс а (курс о во й рабо т ы )… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .… ....… … … ......… … … 16 6.2. Вы бо р о пт и маль ны хус ло ви йи раз рабо т ка мет о ди ки фо т о мет ри ч ес ко го о пределени я препарат а .… … … … … … … … … … … … … … .… … … … … .....… … … .16 6.3. И с по ль з о вани е фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го мет о да в анали з е го т о вы х лекарс т венны хфо рм ................................… … … … … … … … .… … .................… … ..18 6.4. И с по ль з о вани е фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го мет о да для о пределени я ч и с т о т ы препарат о в ......................................................................… … … … … … … … … … .… ..18 6.5. М ет о д ви з уаль но йко ло ри мет ри и в анали з е лекарс т венны хфо рм и нди ви дуаль но го и з го т о влени я .................................… … … … .… ........................… 18 6.6. И с по ль з о вани е с о ч ет ани я фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го и т и т ри мет ри ч ес ки х мет о до в в анали з е мно го ко мпо нент ны х лекарс т венны хфо рм................................19 6.7. И с по ль з о вани е экс т ракц и о нно йфо т о мет ри и в анали з е лекарс т венны хфо рм ......................................................................................20 6.8. И с по ль з о вани е фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го мет о да для анали з а лекарс т венно го рас т и т ель но го с ы рь я ..................................… … … … … … … … … … … … … … … … ..22 7.Ф о рма о т ч ет но с т и с т удент о в и о фо рмлени е про т о ко ла....… … … … … … … … ...22 8.Задани я для вы яс нени я ус пеш но с т и ус во ени я уч ебно го мат ери ала (т ес т ы )...… 23 9. П ри ло жени я… … … … … … … … … … … … … … … … … … … ...… … … … … … … … 25 9.1. М ет о ди ки анали з а (1 – 9)… … … … … … … … … … … ...… … … … … … … … … ...25 9.2. Ф о т о ко ло ри мет р, ус т ро йс т во , т ехни ка вы по лнени я и з мерени й… … ...… … … 35 10. От вет ы кт ес т ам… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ...… … … ...42 4 Введени е В с о временно м фармац евт и ч ес ко м анали з е для ко нт ро ля лекарс т венны х вещ ес т в нахо ди т при менени е фо т о ко ло ри мет ри ч ес ки ймет о д. Вы с о кая и з би рат ель но с т ь мет о да делает его нез амени мы м при анали з е мно го ко мпо нент ны х лекарс т венны х фо рм, о с о бенно с о держащ и х малы е до з ы с и ль но дейс т вую щ и х лекарс т венны х вещ ес т в, ко гда при менени е хи ми ч ес ки х мет о до в о каз ы вает с я нево з мо жны м. С о ч ет ани е его с о бъемны ми мет о дами по з во ляет рас ш и ри т ь во з мо жно с т и фармац евт и ч ес ко го анали з а. Ф о т о ко ло ри мет ри ч ес ки й мет о д нахо ди т ш и ро ко е и с по ль з о вани е для анали з а лекарс т венны х вещ ес т в в би о ло ги ч ес ки х жи дко с т ях (мо ч е, кро ви и др.), а т акже в хи ми ко -т о кс и ко ло ги ч ес ко м анали з е. Вы с о кая ч увс т ви т ель но с т ь мет о да дает во з мо жно с т ь о пределят ь с о держани е би о ло ги ч ес ки акт и вны х с о еди нени й, при меняемы х в малы х до з ах (0,001 - 0,000001г). М ет о д экс т ракц и о нно йфо т о мет ри и по з во ляет о с ущ ес т влят ь раз делени е и ко нц ент ри ро вани е анали з и руемо го вещ ес т ва, по эт о му ч ас т о и с по ль з ует с я для о пределени я лекарс т венны хвещ ес т в в рас т и т ель но м с ы рь е, нас т о йках, экс т ракт ах, маз ях с малы м с о держани ем дейс т вую щ и х вещ ес т в. В с вяз и с эт и м для улуч ш ени я про фес с и о наль но йпо дго т о вки будущ и х с пец и али с т о в т ема "И с по ль з о вани е фо т о ко ло ри мет ри и в анали з е лекарс т венны х с редс т в" вклю ч ена в элект и вны йкурс о буч ени я с т удент о в по фармац евт и ч ес ко му анали з у на 5 курс е. 1. Ц Е ЛЬ ЗА Н Я Т И Я 1.1. Ц елев ыезадач и: - углублени е т ео рет и ч ес ки х з нани й в о блас т и фо т о мет ри ч ес ко го 5 анали з а; - фо рми ро вани е умени й вы по лнени я с амо с т о ят ель но й рабо т ы по анали з у лекарс т венны хвещ ес т в фо т о ко ло ри мет ри ч ес ки м мет о до м; - о владени е элемент ами науч но -и с с ледо ват ель с ко йрабо т ы . 1.2. Знать: • т ео рет и ч ес ки е о с но вы фо т о мет ри и ; • с хо дс т во и о т ли ч и е с пект ро фо т о мет ри и и фо т о ко ло ри мет ри и ; • о пределени е по нят и я анали т и ч ес ко йдли ны во лны ; • мат емат и ч ес ко е вы ражени е з ако на Б угера-Л амберт а-Б ера; • при ч и ны о т кло нени йо т о с но вно го з ако на с вет о по гло щ ени я; • о пределени е по нят и я градуи ро во ч но го графи ка; • о пределени е удель но го и мо лярно го по каз ат елейпо гло щ ени я; • о пределени е по нят и я Го с ударс т венны х с т андарт ны х о браз ц о в (ГС О) и рабо ч и х с т андарт ны х о браз ц о в (РС О); • при нц и п дейс т ви я и ус т ро йс т во фо т о ко ло ри мет ра; • о с но вы экс т ракц и о нно йфо т о мет ри и . 1.3. У м еть: • о бо с но ват ь , и с хо дя из хи ми ч ес ки х с во йс т в препарат а, во з мо жно с т ь и с по ль з о вани я фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го мет о да анали з а; • рабо т ат ь на фо т о ко ло ри мет ре, по дго т о ви т ь про бу для анали з а; • вы брат ь о пт и маль ны е ус ло ви я фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го ко ли ч ес т венно го о пределени я препарат а (реакт и в, анали т и ч ес кую дли ну во лны , ко нц ент рац и ю рас т во ра и с с ледуемо го лекарс т венно го вещ ес т ва, рас т во ри т ель , рас т во р с равнени я); • по с т ро и т ь градуи ро во ч ны йграфи к; • делат ь вы во д о по дч и нени и о пт и ч ес ко й пло т но с т и о с но вно му 6 з ако ну с вет о по гло щ ени я; • рас с ч и т ат ь удель ны йи мо лярны йпо каз ат ели с вет о по гло щ ени я; • про во ди т ь с т ат и с т и ч ес кую о брабо т ку по луч енны хрез уль т ат о в; • рас с ч и т ы ват ь ч увс т ви т ель но с т ь мет о да; • рас с ч и т ы ват ь вещ ес т ва, и с по ль з уя ко ли ч ес т венно е с о держани е градуи ро во ч ны й графи к, лекарс т венно го рас т во р рабо ч его с т андарт но го о браз ц а (РС О) и удель ны йпо каз ат ель с вет о по глащ ени я; • про во ди т ь с равнени е рез уль т ат о в ко ли ч ес т венно го о пределени я по Н Д с т ребо вани ями Гф XI и з дани я; • делат ь вы во д о кач ес т ве анали з и руемы хвещ ес т в. 2. К О Н Т РО ЛЬ Н ЫЕ В О П РО СЫ 1. Н а како м фи з и ч ес ко м с во йс т ве вещ ес т в о с но ван фо т о мет ри ч ес ки ймет о д анали з а? 2. Каки е о блас т и о пт и ч ес ко го с пект ра о т но с ят с я к уль т рафи о лет о во й, ви ди мо й, и нфракрас но йо блас т и ? 3. В како й о блас т и о пт и ч ес ко го с пект ра про во дят с я и з мерени я в фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко м мет о де? 4. Как вы би рает с я анали т и ч ес кая дли на во лны , при ко т о ро й про во дят с я и з мерени я о пт и ч ес ко й пло т но с т и в ко ли ч ес т венно м фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко м анали з е? 5. Вч ем с хо дс т во и в ч ем о т ли ч и е фо т о ко ло ри мет ри и и с пект рафо т о мет ри и ? 6. Для како йц ели с лужат с вет о фи ль т ры в фо т о ко ло ри мет рах? 7. Како в при нц и п ус т ро йс т ва фо т о ко ло ри мет ра? 8. Опи ш и т е прави ла рабо т ы на фо т о ко ло ри мет ре? 9. Ч т о т ако е о пт и ч ес кая пло т но с т ь ? 10. Каки е о пт и ч ес ки е ко нс т ант ы и с по ль з ую т для и дент и фи кац и и вещ ес т в? 11. Зави с и т ли о пт и ч ес кая пло т но с т ь от ко нц ент рац и и и т о лщ и ны 7 по гло щ аю щ его с ло я? 12. Дайт е о пределени е по нят и я: удель ны й и мо лярны й ко эффи ц и ент ы с вет о по гло щ ени я? Ф о рмулы рас ч ет а. 13. Каки з уч и т ь и по с т ро и т ь с пект р? Каквы брат ь с вет о фи ль т р? 14. П ри веди т е графи ч ес ко е и мат емат и ч ес ко е вы ражени е з ако на Б угераЛ амберт а-Б ера. 15. Вч ем с ут ь мет о ди ки по с т ро ени я градуи ро во ч но го графи ка? 16. Каки е при ч и ны мо гут вы з ват ь о т кло нени я о т з ако на Б угера-Л амберт аБ ера? 17. Каки е с по с о бы рас ч ет а ко ли ч ес т венно го с о держани я вещ ес т в и з вес т ны ? 18. Ч т о т ако е с т андарт ны е рас т во ры ? 19. Ч т о с о бо й предс т авляю т Го с ударс т венны е с т андарт ны е о браз ц ы и рабо ч и е с т андарт ны е о браз ц ы ? 3. И Н Ф О РМ А Ц И О Н Н ЫЙ Б ЛО К 3.1.О бщ иеполож ения м етода фотом етрии Ф о т о ко ло ри мет ри ч ес ки е и з би рат ель но м по гло щ ени и вещ ес т во м с лужат и ко ли ч ес т венно го для мет о ды элект ро магни т но го и с с ледо вани я анали з а и з луч ени я с т ро ени я, о с но ваны на анали з и руемы м и дент и фи кац и и и анали з а с вет о по гло щ аю щ и х с о еди нени й. П ри ро да по ло с по гло щ ени я в УФ (190-400 нм) и ви ди мо й (400-760 нм) о блас т ях с пект ра о ди нако ва и с вяз ана с ч и с ло м и рас по ло жени ем элект ро но в в по гло щ аю щ и х мо лекулах и и о нах. В и нфракрас но й о блас т и (98-1000 мкм) о на в бо ль ш ей с т епени с вяз ана с ко лебани ями ат о мо в в мо лекулах по гло щ аю щ его вещ ес т ва. П о эт о му в ли т ерат уре ч ас т о о пт и ч ес ки е с пект ры по гло щ ени я анали з и руемы х вещ ес т в наз ы ваю т элект ро нны ми , а и нфракрас ны е - мо лекулярны ми . В з ави с и мо с т и о т и с по ль з уемо йаппарат уры в фо т о мет ри ч ес ко м анали з е раз ли ч аю т с пект ро фо т о мет ри ч ес ки й мет о д - анали з по по гло щ ени ю мо но хро мат и ч ес ко го 8 и з луч ени я и фо т о ко ло ри мет ри ч ес ки й - анали з по по гло щ ени ю по ли хро мат и ч ес ко го и з луч ени я. Оба мет о да о с но ваны на о бщ ем при нц и пе с ущ ес т во вани и про по рц и о наль но й з ави с и мо с т и между с вет о по гло -щ ени ем и ко нц ент рац и ейпо гло щ аю щ его вещ ес т ва в рас т во ре. Ко ли ч ес т венно е о пределени е в ви ди мо й о блас т и с пект ра не и меет при нц и пи аль ны х раз ли ч и й о т по до бны х и з мерени й в УФ -о блас т и . П ри менени е с т андарт ны х (ГС О и РС О) о браз ц о в о бяз ат ель но во вс ех с луч аях анали з а. Ф о т о ко ло ри мет ри ч ес ки е мет о ды , и с по ль з ую щ и е с равни т ель но нес ло жную аппарат уру, о бес печ и ваю т вы с о кую т о ч но с т ь (1-2%) и ш и ро ко при меняю т с я в ко ли ч ес т венно м анали з е. Для эт о го лекарс т венны е вещ ес т ва до лжны бы т ь ли бо с ами о краш ены , ли бо дават ь о краш енны е про дукт ы реакц и и при вз аи мо дейс т ви и с реакт и вами . П ри ч ем, ес ли ко ли ч ес т венно е о пределени е и с по ль з ует с я для анали з а лекарс т венно йс мес и , т о други е ко мпо нент ы не до лжны вз аи мо дейс т во ват ь с и с по ль з уемы м реакт и во м. Так, для ко ли ч ес т венно го о пределени я препарат о в, с о держащ и х фено ль ны й ги дро кс и л, при меняет с я реакц и я о браз о вани я аз о крас и т еля, для о пределени я 3кет о с т еро и до в – реакц и я с ги драз и до м и з о ни ко т и но во й ки с ло т ы , на ги дро кс амо во йреакц и и о с но вано ко ли ч ес т венно е о пределени е с ло жны х эфи ро в, лакт о но в, лакт амо в и др. Окраш енно е с о еди нени е до лжно бы т ь до с т ат о ч но ус т о йч и вы м и про ч ны м, а т акже с по с т о янны м с о с т аво м, о т веч аю щ и м о пределенно йхи ми ч ес ко йфо рмуле. П о с т о янны йс о с т ав о краш енно го с о еди нени я о бес печ и вает с т аби ль но с т ь о крас ки рас т во ра, ч т о являет с я о дни м и з факт о ро в т о ч но с т и фо т о мет ри ч ес ко го о пределени я. В фо т о мет ри ч ес ко м анали з е мо жно и с по ль з о ват ь т аки е с о еди нени я, ко т о ры е с о храняю т ус т о йч и вую о крас ку не менее 10-15 ми нут . Н а ус т о йч и во с т ь о краш енны х ко мплекс о в о каз ы ваю т вли яни е рН с реды , ко ли ч ес т во до бавляемо го реакт и ва и по рядо к до бавлени я-с ли вани я реакт и ва. Органи ч ес ки е рас т во ри т ели в фо т о мет ри ч ес ко м анали з е при меняю т для раз делени я лекарс т венны х вещ ес т в, по вы ш ени я ч увс т ви т ель но с т и и т о ч но с т и о пределени я (экс т ракц и о нная фо т о мет ри я). 9 В фо т о мет ри ч ес ко м мет о де и с по ль з ую т т ри с по с о ба рас ч ет а ко нц ент рац и й: по с т андарт но му рас т во ру, по кали бро во ч но му графи ку, по удель но му по каз ат елю с вет о по гло щ ени я. К фо т о мет ри ч ес ки м мет о дам о т но с ят с я: раз ли ч ны е вари ант ы ко ло ри мет ри и , фо т о ко ло ри мет ри и , экс т ракц и о нно йфо т о мет ри и . Ко ло ри мет ри я - мет о д ко ли ч ес т венно го анали з а, о с но ванны й на ви з уаль но м с равнени и и нт енс и вно с т и о крас о крас т во ро в и с с ледуемо го вещ ес т ва и с т андарт но го о браз ц а. В ко ло ри мет ри и ч ас т о при меняю т мет о д с т андарт ны х с ери й и ли мет о д ш калы . Ко ло ри мет ри ч ес ки й анали з о т но с и т с я к экс прес с ны м мет о дам, но т о ч но с т ь его невы с о ка. Д л я про в ед ен и я и зм ерен и й го т о вят ш калу с т андарт ны х рас т во ро в. В ш т ат и в ус т анавли ваю т 3-10 про би ро к о ди нако во го ди амет ра и з о дно т и пно го с т екла. В первую про би рку вно с ят о пределенны й о бъем рас т во ра с т о ч но й ко нц ент рац и ейи с с ледуемо го вещ ес т ва. Во вс е по с ледую щ и е про би рки вли ваю т по с т епенно во з рас т аю щ и е на о дну и т у же вели ч и ну ко ли ч ес т ва т о го же рас т во ра т о ч но й ко нц ент рац и и . Зат ем во вс е про би рки до бавляю т во ду и ли друго й рас т во ри т ель с т аки м рас ч ет о м, ч т о бы о бъем жи дко с т и во вс ех про би рках бы л о ди нако в. Ж и дко с т и в про би рках перемеш и ваю т , при бавляю т в каждую о ди нако во е ко ли ч ес т во реакт и во в для по луч ени я о крас ки . Одно временно т о ч ны й о бъем и ссл ед уем о го раст в о ра вно с ят в про би рку и з т ако го же с т екла и ди амет ра, до бавляю т нео бхо ди мы йо бъем рас т во ри т еля и реакт и вы в т аки х же ко ли ч ес т вах. Зат ем ч ерез указ анно е в мет о ди ке время с равни ваю т и нт енс и вно с т ь о краш и вани я и с с ледуемо го рас т во ра с и нт енс и вно с т ь ю о крас ки жи дко с т ей в про би рках с т андарт но й с ери и и ус т анавли ваю т , с како й про би рко й с т андарт но й с ери и с о впадает о крас ка и с с ледуемо го рас т во ра. П ри мер (с м. П ри ло жени е). Ф о т о ко ло ри мет ри ч ес ки ймет о д. Эт о т мет о д о с но ван на и з мерени и 10 с т епени по гло щ ени я вы делени я с вет а о краш енны ми мо но хро мат и ч ес ко го и з луч ени я. рас т во рами Зави с и мо с т ь без и нт енс и вно с т и по гло щ ени я с вет о во го по т о ка, ко т о ры йпро ш ел ч ерез рас т во р, о т т о лщ и ны с ло я и ко нц ент рац и и вещ ес т ва в рас т во ре вы ражает с я о бъеди ненны м з ако но м Б угераЛ амберт а-Б ера. С о глас но эт о му з ако ну, о пт и ч ес кая пло т но с т ь (экс т и нкц и я) рас т во ра про по рц и о наль на т о лщ и не его с ло я, ко нц ент рац и и вещ ес т ва в рас т во ре и ко эффи ц и ент у по гло щ ени я (при ро де вещ ес т ва). Опт и ч ес кую пло т но с т ь рас т во ро в и з меряю т с по мо щ ь ю ф о т о эле к т ро к о ло ри м е т ро в . П ри нци п рабо т ы эт и х при бо ро в з аклю ч ает с я в т о м, ч т о с вет о во йпо т о к о пределенны х дли н во лн при про хо ждени и ч ерез кю вет у с о краш енны м рас т во ро м и ли рас т во ри т елем по падает на фо т о элемент , превращ аю щ и й с вет о вую энерги ю в элект ри ч ес кую . Для вы делени я луч ей с о пределенны м и нт ервало м дли н во лн фо т о ко ло ри мет ры с вет о фи ль т рами . В нас т о ящ ее время при меняю т с набжены фо т о элект ро ко ло ри мет ры раз ли ч ны х с и с т ем. Техни ка фо т о ко ло ри мет ри ч ес ки х о пределени й по дро бно о пи с ана в пас по рт ах, ко т о ры ми с набжены при бо ры . Ф о т о ко ло ри мет ри ч ес ки е мет о ды до с т ат о ч но т о ч ны (1-3%) и ш и ро ко при меняю т с я для о пределени я ко нц ент рац и и вещ ес т в. К о нце нт раци ю ко ло ри мет ро в мо жно рас про с т раненны м и и с с ледуемы х о пределят ь при емлемы м вещ ес т в с нес ко ль ки ми по мо щ ь ю фо т о элект ро - с по с о бами . Н аи бо лее для анали т и ч ес ко й с лужбы апт еч ны х уч реждени й являет с я ус т ано влени е ко нц ент рац и и вещ ес т в пут ем с равнени я о пт и ч ес ко йпло т но с т и с т андарт но го и и с с ледуемо го рас т во ро в и ли о пределени е ко нц ент рац и и вещ ес т в по кали бро во ч но му графи ку. П ри нци п о пре де ле ни я и с с ледуемы х вещ ес т в пут е м с вет о по гло щ ени я со ст андарт ны м раст в о ро м срав не ни я и х с о с т о и т в с ледую щ ем. В дв е ко лбо ч ки вно с ят о ди нако вы е о бъемы с т андарт но го и и с с ледуемо го рас т во ро в. К рас т во рам при бавляю т о ди нако во е ко ли ч ес т во реакт и во в, по луч енны е рас т во ры 11 перено с ят в две кю вет ы о ди нако во го ди амет ра и о пределяю т и х о пт и ч ес кую пло т но с т ь . С о держани е и с с ледуемо го вещ ес т ва в про бе о пределяю т по фо рмуле: Сx = Dx ⋅ Co , Do где: Сх - с о держани е вещ ес т ва в 1 мл и с с ледуемо го рас т во ра; Со - с о держани е вещ ес т ва в 1 мл с т андарт но го рас т во ра; Dx - о пт и ч ес кая пло т но с т ь и с с ледуемо го рас т во ра; Dо - о пт и ч ес кая пло т но с т ь с т андарт но го рас т во ра. П ри с ери йны х о пределени ях к о нце нт раци ю и с с ледуемо го вещ ес т ва ц елес о о браз нее ус т анавли ват ь по к али бро в о чно м у граф и к у. Для по с т ро ени я кали бро во ч но го графи ка го т о вят рас т во р с т о ч ны м с о держани ем о пределяемо го вещ ес т ва (с т андарт ны й рас т во р). Рас т во р по мещ аю т в кю вет ы о ди нако во го ди амет ра. Зат ем в ряд ко лб вно с ят раз ли ч ны е о бъемы с т андарт но го рас т во ра, при бавляю т рас т во ри т ель с т аки м рас ч ет о м, ч т о бы о бъемы вс ех эт и х рас т во ро в бы ли о ди нако вы . Зат ем вли ваю т равны е ко ли ч ес т ва реакт и ва. Далее и з меряю т о пт и ч ес кую пло т но с т ь по луч енны храс т во ро в при с о о т вет с т вую щ ем с вет о фи ль т ре в кю вет ах с о ди нако во й т о лщ и но й с ло я. Рас т во ро м с равнени я с лужи т с мес ь реакт и во в (без и с с ледуемо го вещ ес т ва), ко т о ры е и с по ль з о вали с ь для по луч ени я о краш енно го с о еди нени я. Зави с и мо с т ь о пт и ч ес ко й пло т но с т и от ко нц ент рац и и рас т во ра предс т авлена на ри с унке 1. Д Ри с .1 0,3 _ 0,2 _ 0,1 _ 0,1 0,2 0,3 0,4 мкг/мл С 12 Н а о с но вани и по луч енны х данны х на ми лли мет ро во йбумаге вы ч ерч и ваю т кали бро во ч ны йграфи к. Н а о с и абс ц и с с о т клады ваю т с о держани е вещ ес т ва, а на о си о рди нат - о пт и ч ес ки е пло т но с т и с о о т вет с т вую щ и х рас т во ро в. Рас ч ет с о держани я вещ ес т ва в и с с ледуемо м рас т во ре про и з во дят по с ле нанес ени я на о с ь о рди нат вели ч и ны и з меренно й о пт и ч ес ко й пло т но с т и и с пы т уемо го рас т во ра и о пус кани я перпенди куляра на о с ь абс ц и с с о т т о ч ки перес еч ени я найденно й о пт и ч ес ко й пло т но с т и с кали бро во ч но й кри во й. То ч ка перес еч ени я перпенди куляра и о с и абс ц и с с по кажет с ко ль ко вещ ес т ва в о бъеме и с с ледуемо го рас т во ра, в зят о го для о пре де ле ни я. Кали бро во ч ны е графи ки вы ч ерч и ваю т для с о о т вет с т вую щ его препарат а и пери о ди ч ес ки про веряю т и х. П о д т ерми но м "экст ракци о н н ая ф о т о м ет ри я" по ни маю т мет о д анали з а, ко т о ры йо с но ван на о браз о вани и ц вет ны х и ли о краш енны х про дукт о в, с по с о бны х легко экс т раги ро ват ь с я с о о т вет с т вую щ и м о ргани ч ес ки м рас т во ри т елям. Вс луч ае экс т ракц и о нно -фо т о мет ри ч ес ко го мет о да для раз делени я вещ ес т в при меняю т нес меш и ваю щ и ес я с во до й о ргани ч ес ки е рас т во ри т ели . Экс т раги ро вани е по з во ляет з нач и т ель но по вы с и т ь ч увс т ви т ель но с т ь о пределени я з а с ч ет ко нц ент ри ро вани я о пределяемо го ко мпо нент а. В о с но ве фо т о мет ри ч ес ки х мет о до в лежи т о с но вно й з ако н с вет о по гло щ ени я - з ако н Л амберт а-Б угера-Б ера. Он фо рмули рует с я т ак: Опт и ч ес кая пло т но с т ь рас т во ра прямо про по рц и о наль на ко нц ент -рац и и о пределяемо го вещ ес т ва, дли не кю вет ы и вели ч и не по каз ат еля по гло щ ени я, ч т о вы ражает с я уравнени ем: А=К*С *l; где : А - о пт и ч ес кая пло т но с т ь ; К- ко эффи ц и ент по гло щ ени я; l - т о лщ и на с ло я о краш енно го рас т во ра, в с м.; С - ко нц ент рац и я рас т во ра (%). 13 Графи ч ес кая з ави с и мо с т ь вели ч и ны пло т но с т и о т ко нц ент рац и и вещ ес т ва вы ражает с я прямо й ли ни ей, про хо дящ ей ч ерез нач ало ко о рди нат (Ри с .1). Ко эффи ц и ент по гло щ ени я по гло щ аю щ и х с о еди нени й. Он являет с я мо жет важно й и с по ль з о ват ь с я характ ери с т и ко й для о пределени я по дли нно с т и , ч и с т о т ы и ко ли ч ес т венно го с о держани я и с с ледуемы хвещ ес т в. 3.2. ЗА Д А Н И Я Д ЛЯ СА М О П О Д ГО Т О В К И Для вы по лнени я практ и ч ес ко йрабо т ы с т удент до лжен: • по вт о ри т ь т ео рет и ч ес ки е о с но вы фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го мет о да анали з а; • и з уч и т ь во з мо жно с т и и с по ль з о вани я данно го мет о да в ко ли ч ес т венно м анали з е лекарс т венны х препарат о в, го т о вы х лекарс т венны х фо рм, фи т о препарат о в, би о ло ги ч ес ки хжи дко с т ей. • з нат ь раз ли ч ны е ви ды фо т о мет ри и ; • з нат ь о т ли ч и е фо т о ко ло ри мет ри и о т с пект ро фо т о мет ри и ; • о з нако ми т ь с я с ус т ро йс т во м фо т о ко ло ри мет ра и прави лами рабо т ы на нем; • по вт о ри т ь с по с о бы рас ч ет а ко нц ент рац и и о пределяемы хвещ ес т в; • умет ь реш ат ь т и по вы е з адач и по фо т о ко ло ри мет ри и ; • с о брат ь карт о т еку по и с по ль з о вани ю фо т о ко ло ри мет ри и в фармац евт и ч ес ко м анали з е по з адани ю препо дават еля. 4. П ЛА Н ЗА Н Я Т И Я 1. С о бес едо вани е для о пределени я и с хо дно го уро вня по дго т о вки с т удент о в к з анят и ю . 2. Рас пределени е з адани й для с амо с т о ят ель но й рабо т ы вы по лняет 5 з адани й). 3. Вы по лнени е с амо с т о ят ель но йрабо т ы . 4. П ро верка вы по лнени я з адани я. с т удент о в (с т удент 14 5. Ко нт ро ль з нани й и умени й, по луч енны хс т удент о м. 5. ЛИ Т Е РА Т У РА Ос но вная ли т ерат ура 1. Б ели ко в В.Г. Ф армац евт и ч ес кая хи ми я: В2-х ч .-М .: Вы с ш . ш к., 1996.–Ч . 2: С пец и аль ная фармац евт и ч ес кая хи ми я: Уч еб. для фармац . и н-т о в / В. Г. Б ели ко в. – 608 с . 2. Б ели ко в В.Г. Ф армац евт и ч ес кая хи ми я: В2-х ч .- М .: Вы с ш . ш к., 1993.- Ч . 1: Общ ая фармац евт и ч ес кая хи ми я: Уч еб. для фармац . и н-т о в /В.Г. Б ели ко в.-432 с . До по лни т ель ная ли т ерат ура 3. Б ели ко в В.Г. С уль фо фт алеи но вы е крас и т ели в кач ес т ве экс т ракц и о нны х реагент о в на ч ет верт и ч ны е аммо ни евы е с о еди нени я / В. Г. Б ели ко в, Г. И . Л укь янч и ко ва, Л . Н . Дуккардт // Ф армац и я.–1983.–№ 1.- С .26-29. 4. Б улат о в М .И . П ракт и ч ес ко е руко во дс т во по фо т о мет ри ч ес ки м мет о дам анали з а / М . И . Б улат о в, И . П . Кали нки н.- Л .: Х и ми я, 1988. – 432 с . 5. Го с ударс т венная фармако пея С С С Р.-10-е и з д.–М .: М еди ц и на, 1968.-1079 с . 6. Го с ударс т венная фармако пея С С С Р.-11-е и з д. –М .: М еди ц и на, 1987.-Ч . 1 7. Б ели ко в В. Г. Л або рат о рны е рабо т ы по фармац евт и ч ес ко йхи ми и : Уч ебно е по с о би е для фармац . и н-т о в и фармац . фак. мед. и н-т о в / В.Г. Б ели ко в, Е. Н . Вергейч и к, В. Е. Го дяц ки йи др.; П о д ред. В. Г. Б ели ко ва.– М .: Вы с ш . ш к., 1989. – 375 с . 8. Кулеш о ва М .И . П о с о би е по хи ми ч ес ко му анали з у лекарс т в / М . И . Кулеш о ва, Л . Н . Гус ева, О. К. С и ви ц кая; П о д ред. М . И . Кулеш о во й.– М .: М еди ц и на, 1974.–248 с . 9. Кулеш о ва М . И . Анали з лекарс т венны х фо рм, и з го т о вляемы х в апт еках: П о с о би е - / М . И . Кулеш о ва, Л . Н . Гус ева, О. К. С и ви ц кая. – 2-е и з д. перераб. и до п. – М .: М еди ц и на, 1989.– 288 с . 15 10. Б ели ко в В.Г. М ет о ди ч ес ки е реко мендац и и анали з у мно го ко мпо нент ны х лекарс т венны х фо рм по ко ли ч ес т венно му / В. Г. Б ели ко в, Г. И . Л укь янч и ко ва; по д ред. В.Г. Б ели ко ва. – П ят и го рс к: Го с . фармац . академи я, 1988. – 95 с . 11. Ки с ло т а ац ет и лс али ц и ло вая. Ф С 42-2688-99. 12. Ко ренман Н . М . Ф о т о мет ри ч ес ки йанали з / Н . М . Ко ренман – М .: Х и ми я, 1975. – 359 с . 13. Ко ренман Н . М . Экс т ракц и я в анали з е о ргани ч ес ки х вещ ес т в / Н . М . Ко ренман – М .: Х и ми я, 1977. –200 с . 14. Л укь янч и ко ва Г.И . Экс т ракц и о нно –фо т о мет ри ч ес ко е о пределени е ко т арни на хло ри да и мет и лено во го с и него / Г. И . Л укь янч и ко ва, Э. Я .М ус аэль янц , // Н ауч .–практ . реф. с б. /Н И И ТЭХ И М – М .; 1979.- № 10.- С . 71-73. 15. М З РФ . О ко нт ро ле кач ес т ва лекарс т венны х с редс т в, и з го т о вляемы х в апт еках: П ри каз М З РФ № 214 о т 15. 08. 97 г. 16. М З РФ . О но рмах о т кло нени й, до пус т и мы х при и з го т о влени и лекарс т венны х с редс т в и фас о вке про мы ш ленно йпро дукц и и в апт еках: П ри каз М З РФ № 305 о т 16. 10. 97 г. 17. С ауш ки на А. С . С бо рни к з адач по фармац евт и ч ес ко й хи ми и : Уч ебно е по с о би е по фармац .хи ми и для с т удент о в фармац . и н-т о в и фармац . фак. мед. ВУЗо в / А. С . С ауш ки на; П о д ред. В. Г. Б ели ко ва. – П ят и го рс к: И з д-во П ят ГФ А, 2003. – 274 с . 18. С ено в Л . П . Руко во дс т во клабо рат о рны м з анят и ям по фармац евт и ч ес ко й хи ми и / Л . П . С ено в – М .: М еди ц и на, 1978. –360 с . 19. Таблет ки угля акт и ви ро ванно го 0,25 и ли 0,5. Ф С 42-3246-95 20. Ф урац и ли н. Ф С 42-2522-88 21. С и пли вая Л . Е. М ет о ди ч ес ки е указ ани я к практ и ч ес ки м з анят и ям по фармац евт и ч ес ко й хи ми и для и но с т ранны х с т удент о в ч ет верт ы х курс о в фармац евт и ч ес ки х факуль т ет о в /Л . Е. С и пли вая, А. И . С ли вки н, Н . Д. Афо ни на; 16 П о д ред. Л . Е. С и пли во й. – Во ро неж: РИ Ц ВГУ, 1996. –91с . 22. Рас т во р нафт и з и на 0,05 и 0,1%. Ф С 42-1217-78 6. СА М О СТ О Я Т Е ЛЬ Н А Я РА Б О Т А СТ У Д Е Н Т О В 6.1. П о дго т о вка реферат о в по т еме элект и вно го курс а ТЕМ Ы РЕФ ЕРАТОВ: 1. Тео рет и ч ес ки е о с но вы фо т о мет ри ч ес ко го мет о да анали з а. 2. С хо дс т во , о т ли ч и е и с пец и фи ка с пект ро фо т о мет ри ч ес ко го и фо т о ко ло ри мет -ри ч ес ко го мет о до в анали з а. 3. И с по ль з о вани е раз ли ч ны х ви до в фо т о ко ло ри мет ри и в анали з е го т о вы х лекарс т венны хфо рм. 4. И с по ль з о вани е фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го мет о да для анали з а лекарс т венны хфо рм и нди ви дуаль но го и з го т о влени я. 5. Ос о бенно с т и вари ант о в фо т о мет ри ч ес ко го анали з а (с пект ро фо т о мет ри и , фо т о ко ло ри мет ри и , ви з уаль но йко ло ри мет ри и ). 6. Ти пы хи ми ч ес ки х реакц и й, и с по ль з уемы е в фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко м анали з е лекарс т венны хвещ ес т в. 7. Ко ло ри мет ри я как раз но ви дно с т ь мет о да фо т о ко ло ри мет ри и и ее и с по ль з о вани е в фармац евт и ч ес ко м анали з е. 8. И с по ль з о вани е экс т ракц и о нно йфо т о мет ри и в фармац евт и ч ес ко м анали з е. 9. Ви з уаль ная ко ло ри мет ри я в анали з е лекарс т венны хфо рм. 10. Ос о бенно с т и экс т ракц и о нно -фо т о мет ри ч ес ко го мет о да и его и с по ль з о вани е в фармац евт и ч ес ко м анали з е. 6.2. Вы бо р о пт и маль ны х ус ло ви йи раз рабо т ка мет о ди ки фо т о мет ри ч ес ко го о пределени я препарат а (8-10 ч ас ). ОБ Ъ ЕКТЫ И С С Л ЕДОВАН И Я : П ро пи с и (1- 6) а) и с по ль з о вани е реакц и и вз аи мо дейс т ви я с рас т во ро м ги дро кс и да нат ри я: 17 Рут и н [7, 9] 1. 2. Ф урац и лли н [5, 7, 8] 3. Ф урадо ни н [7] 4. Ф ураз о ли до н [7] б) и с по ль з о вани е реакц и и ди аз о т и ро вани я: 5. Эт акри ди на лакт ат [8] в) и с по ль з о вани е реакц и и о ки с лени я 6. Ко феи н-бенз о ат нат ри я Н а при мере о дно го и з вы бранны хпрепарат о в вы по лни т ь экс пери мент аль но е и с с ледо вани я: 1. И з уч и т ь о пт и ч ес ки й с пект р и с вет о фи ль т ра рас т во ра, при го т о вленно го о с ущ ес т ви т ь по вы бо р рабо ч его мет о ди ке ко ли ч ес т венно го о пределени я. 2. И з уч и т ь ус т о йч и во с т ь при го т о вленно го рас т во ра в т еч ени е 5-15 ми нут . 3. П ри го т о ви т ь 5 рас т во ро в РС О анали з и руемо го вещ ес т ва и и з мери т ь и х о пт и ч ес кую пло т но с т ь . 4. Определи т ь грани ц ы по дч и нени я о пт и ч ес ко й пло т но с т и о с но вно му з ако ну с вет о по гло щ ени я. 5. Рас с ч и т ат ь удель ны й по каз ат ель с вет о по гло щ ени я для препарат а в при го т о вленны храс т во рах. Н айт и с реднее з нач ени е. 6. Раз рабо т ат ь мет о ди ку ко ли ч ес т венно го о пределени я вы бранно го препарат а. 7. Рас с ч и т ат ь ко ли ч ес т венно е с о держани е препарат а, и с по ль з уя кали бро во ч ны й графи к, удель ны й по каз ат ель с вет о по гло щ ени я и рас т во р рабо ч его с т андарт но го о браз ц а. 8. Н а о с но вани и 6 о пределени йрас с ч и т ат ь при мер по мо дель но йс мес и с т ат и с т и ч ес ки е характ ери с т и ки предло женно ймет о ди ки анали з а (1,2,5,12). 18 9. Апро би ро ват ь мет о ди ку на при мере лекарс т венно йфо рмы , при го т о в-ленно й с т удент ами . 6.3. И с по ль з о вани е фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го мет о да в анали з е го т о вы х лекарс т венны хфо рм (2 ч ас .). ОБ Ъ ЕКТЫ И С С Л ЕДОВАН И Я : П ро пи с и (7-9) 7 Рас т во р адренали на ги дро хло ри да для и нъекц и й. [5]. 8. Таблет ки фураз о ли до на [5]. 9. Рас т во р нафт и з и на 0,05 и 0,1% -10,0 [22]. 1. П ро вес т и фо т о мет ри ч ес ки й анали з вы бранно й лекарс т венно й фо рмы (по о пи с анно ймет о ди ке). 2. Оц ени т ь кач ес т во лекарс т венно й фо рмы и с равни т ь по луч енны е рез уль т ат ы с т ребо вани ями при каз о в 214, 305 [15–16]. 6.4. И с по ль з о вани е фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го мет о да для о пределени я ч и с т о т ы препарат о в (2 ч ас .). ОБ Ъ ЕКТЫ И С С Л ЕДОВАН И Я : П ро пи с и (10-11) 10. Ац ет и лс али ц и ло вая ки с ло т а [5]. 11. Уго ль акт и ви ро ванны й [5]. 1. П ро вес т и о пределени е при мес и в о дно м и з вы бранны х лекарс т венны х с редс т в. 2. С равни т ь с данны ми фармако пейно йс т ат ь и и с делат ь з аклю ч ени е о кач ес т ве препарат а. 6.5. М ет о д ви з уаль но й ко ло ри мет ри и в анали з е лекарс т венны х фо рм и нди ви дуаль но го и з го т о влени я (2 ч ас .). ОБ Ъ ЕКТЫ И С С Л ЕДОВАН И Я : П ро пи с и (12-16) 19 12*. Рас т во р Ри бо флави на 0,02%- 10,0 [8,9]. 13*. Рас т во р ди каи на 0,5%-10,0 М ет и лено во го с и него - 0,015. 14*. Ки с ло т а фо ли евая 0,0001 С ахара 0,2 [8]. 15*. Л ево ми ц ет и на 0,25%-10,0 Ки с ло т ы бо рно й0,2 (и ли нат ри я хло ри да 0,09). 16. Рас т во ра фурац и ли на 0,02%-10,0 Н ат ри я хло ри да 0,09. 1. П ро вес т и ко ли ч ес т венны й анали з вы бранно й лекарс т венно й фо рмы мет о до м ви з уаль но йко ло ри мет ри и . 2. Оц ени т ь кач ес т во анали з и руемо й лекарс т венно й фо рмы и с равни т ь по луч енны е рез уль т ат ы с т ребо вани ями при каз о в 214, 305 [15 – 16 ] 6.6. И с по ль з о вани е с о ч ет ани я фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го и т и т ри мет ри ч ес ки х мет о до в в анали з е мно го ко мпо нент ны х лекарс т венны хфо рм (4-5 ч ас .). ОБ Ъ ЕКТЫ И С С Л ЕДОВАН И Я : П ро пи с и (17-27) а) и с по ль з о вани е с о бс т венно го с вет о по гло щ ени я: 17. Глю ко з ы 25% - 100,0 М ет и лено во го с и него 1,0 [10]. 18. Ри бо флави на 0,005 Ки с ло т ы ас ко рби но во й С ахара по 0,1 [21]. 19. Ри бо флави на 0,002 Рас т во ра нат ри я хло ри да 0,9% - 10,0 [8]. 20. Ри бо флави на 0,002 Рас т во ра кали я и о ди да 3% - 10,0 [8,21]. 20 21. Ри бо флави на 0,001 Ки с ло т ы ас ко рби но во й0,02 Кали я и о ди да 0,2 Рас т во ра глю ко з ы 2% - 10,0 [8,21]. 22. Рас т во ра ри бо флави на 0,05% - 50,0 Н о во каи на 1,0 Ки с ло т ы ни ко т и но во й0,3 Ди медро ла 0,04 [10]. б) и с по ль з о вани е реакц и и вз аи мо дейс т ви я с рас т во ро м ги дро кс и да нат ри я: 23. Ки с ло т ы ац ет и лс али ц и ло во й0,3 Рут и на 0,02 С ахара 0,2 [8,21]. 24. Ф урац и ли на 0,002 Рас т во ра бо рно йки с ло т ы 2% - 10,0 [8,21]. 25*. Ф урац и ли на 0,001 С т репт о ц и да рас т во ри мо го 0,8% - 10,0 [8,9,21]. 26. Рас т во ра фурац и ли на 1:5000 - 10,0 С уль фац и ла нат ри я 2,0 Ки с ло т ы бо рно й0,1 [8,9,10]. 27. Эри т ро ми ц и на 0,02 г Глю ко з ы 0,2 1. П ро вес т и ко ли ч ес т венны йанали з и нгреди ент о в вы бранно йлекарс т венно й фо рмы фо т о ко ло ри мет ри ч ес ки м и т и т ри мет ри ч ес ки м мет о дами . 2. Оц ени т ь кач ес т во и с с ледуемо йлекарс т венно йфо рмы . 21 6.7. И с по ль з о вани е экс т ракц и о нно й фо т о мет ри и в анали з е лекарс т венны х фо рм (4-5 ч ас ). ОБ Ъ ЕКТЫ И С С Л ЕДОВАН И Я : П ро пи с и (28 - 36) а) о браз о вани е и о нны х ас с о ц и ат о в с крас и т елями : 28. Таблет ки ко т арни на хло ри да [13]. 29. М аз ь деками но вая 1% - 30,0 [13]. 30. Ко т арни на хло ри да 0,2 Во ды для и нъекц и й10,0 31. Рас т во ра ц ет и лпи ри ди ни я хло ри да 1:7500 - 300,0 32. Рас т во р ац екли ди на для и нъекц и й0,2% [3,5]. [5]. 33. Каль ц и я хло ри да 0,5 М ет и лено во го с и него 0,02 Гекс амет и лент ет рами на 10,0 С пи рт а 95% - 37,5 Во ды о ч и щ енно йдо 250,0 [10]. 34. Н о во каи на 0,5 М ет и лено во го с и него 0,05 Во ды о ч и щ енно йдо 24,0 [10]. 35*. Анес т ез и на 0,3 Экс т ракт а крас авки с ухо го 0,03 36*. Ф ени лс али ц и лат а 0,3 П апавери на ги дро хло ри да 0,03 Экс т ракт а крас авки с ухо го 0,03 1. П ро вес т и анали з вы бранно й лекарс т венно й фо рмы с и с по ль з о вани ем экс т ракц и о нно йфо т о мет ри и . 2. Оц ени т ь кач ес т во лекарс т венно й фо рмы рез уль т ат ы с т ребо вани ями при каз о в 214, 305 [15-16] и с равни т ь по луч енны е 22 6.8. И с по ль з о вани е фо т о ко ло ри мет ри ч ес ко го мет о да для анали з а лекарс т венно го рас т и т ель но го с ы рь я (4-5ч ас о в). ОБ Ъ ЕКТЫ И С С Л ЕДОВАН И Я : П ро пи с и (37-40) 37. Ко ра круш и ны [6]. 38. Л и с т ь я вакт ы т рехли с т но й [6]. 39. Ко рень ревеня [6]. 40. Ко рневи щ а и ко рни марены крас и ль но й [6]. 1. П ро вес т и ко ли ч ес т венны йанали з дейс т вую щ и х вещ ес т в лекарс т венно го рас т и т ель но го с ы рь я фо т о ко ло ри мет ри ч ес ки м мет о до м. 2. Оц ени т ь кач ес т во лекарс т венно го рас т и т ель но го с ы рь я в с о о т вет с т ви и с т ребо вани ями Ф С . [6]. 7. Ф О РМ А О Т Ч Е Т Н О СТ И СТ У Д Е Н Т О В (О Ф О РМ ЛЕ Н И Е П РО Т О К О ЛА ) 1. П ерви ч ная о т ч ёт но с т ь : 1.1. П редс т ави т ь ли т ерат урны йо бз о р в фо рме реферат а. 1.2. Во время бес еды с препо дават елем о т вет и т ь на ко нт ро ль ны е во про с ы (не бо лее 2-х), т ес т о вы е з адани я (не бо лее 2-х) и реш и т ь с и т уац и о нную о буч аю щ ую з адач у. 1.3. П ро вес т и экс пери мент аль ны е и с с ледо вани я по каждо му з адани ю , рез уль т ат ы о фо рми т ь в ви де про т о ко ло в. 2. Вт о ри ч ная о т ч ет но с т ь : 2.1. Офо рми т ь по луч енны е рез уль т ат ы в ви де курс о во йрабо т ы (элект и ва). 2.2. В раз деле “Экс пери мент аль ны е и с с ледо вани я” до бави т ь по драз дел: “Обс уждени е рез уль т ат о в” и “Вы во ды ”, 2.3. Защ и т и т ь курс о вую рабо т у (Элект и в) на з ас едани е С Н О кафедры и ли на 23 с т уденч ес ко й ко нференц и и и ли о публи ко ват ь по луч енны е рез уль т ат ы . 8. ЗА Д А Н И Я Д ЛЯ У СП Е Ш Н О СТ И У СВ О Е Н И Я У Ч Е Б Н О ГО М А Т Е РИ А ЛА (Т Е СТ Ы) Б и лет 1 С о о т нес и т е парамет ры фи з и ко -хи ми ч ес ки х мет о до в с и х о бо з нач ени ями и еди ни ц ами и з мерени й. 1. То лщ и на по гло щ аю щ его с ло я (кю вет ы ) А) Н ано мет р 2. Удель но е вращ ени е Б ) С ант и мет р 3. П о каз ат ель прело млени я В) Дец и мет р 4. Дли на во лны в УФ и ви ди мо йо блас т и с пект ра С ) Б ез о бо з нач ени я и 5. То лщ и на с ло я жи дко с т и (дли на т рубки ) еди ни ц и з мерени я Д) Обрат ны йс ант и мет р Е) М и нус (-) и ли (+) Б и лет 2 1.Ус т ано ви т е с о о т вет с т ви е: Ос но вны е т ерми ны фо т о мет ри и – Определени е 1. Х ро мо фо ры А) С вет , по гло щ аю щ и йс я при 2. Аукс о хро мы ко нкрет но йдли не во лны 3. М о но хро мат и ч ес ки йс вет Б ) С вет , по гло щ аю щ и йс я при 4. Н емо но хро мат и ч ес ки йс вет уз ко м и нт ервале дли н во лн (по ли хро мат и ч ес ки й) В) Х и ми ч ес ки е группы , о бус лавли ваю щ и е с вет о по гло щ ени е Г) Х и ми ч ес ки е группы , ус и ли ваю щ и е с вет о по глащ ени е Б и лет 3 1. Анали т и ч ес кая дли на во лны 2. Ви ди мая о блас т ь с пект ра 3. Уль т рафи о лет о вая о блас т ь с пект ра 4. То лщ и на по гло щ аю щ его с ло я А) С ант и мет р (с м) Б ) Дли на во лны с макс и маль но й о пт и ч ес ко йпло т но с т ь ю В) С пект раль ная о блас т ь о т 200 до 800 нм Г) С пект раль ная о блас т ь о т 200 до 400 нм 24 Б и лет 4 1. С вет о фи ль т ры 2. М о но хро мат о р 3. Ф о т о элемент ы 4. Опт и ч ес кая пло т но с т ь Б и лет 5 1. Зако н Б угера-Л амберт а-Б ера 2. Кали бро во ч ны йграфи к С т андарт ны е о браз ц ы 3. С пект р А) Ч ас т ь фо т о ко ло ри мет ра, вы деляю щ ая уз ки йи нт ервал дли н во лн Б ) Ч ас т ь с пект ро фо т о мет ра, вы деляю щ ая с вет ко нкрет но йдли ны во лны В) Ус т ро йс т во для прео браз о вани я с вет о во йэнерги и в элект ри ч ес кую Г) От но ш ени е ло гари фма и нт енс и вно с т и и з луч ени я падаю щ его на вещ ес т во к и нт енс и вно с т и и з луч ени я, про ш едш его ч ерез вещ ес т во А) Ус т о йч и вы е хи ми ч ес ки е с о еди нени я с по вы ш енны ми т ребо вани ями ккач ес т ву Б ) Графи ч ес ко е и з о бражени е з ави с и мо с т и о пт и ч ес ко йпло т но с т и о т дли ны во лны падаю щ его на рас т во р с вет а В) Графи ч ес ко е и з о бражени е прямо йпро по рц и о наль но й з ави с и мо с т и о пт и ч ес ко йпло т но с т и о т ко нц ент рац и и рас т во ренно го вещ ес т ва Б и лет 6 С о о т нес и т е фо т о мет ри ч ес ки е мет о ды анали з а с ус ло ви ями и х про ведени я А) С пект ро фо т о мет ри ч ес ки й 1. Окраш енны е рас т во ры Б ) Ф о т о ко ло ри мет ри ч ес ки й 2. Б ес ц вет ны е рас т во ры 3. М о но хро мат и ч ес ки йс вет 4. Н емо но хро мат и ч ес ки йс вет (по ли хро мат и ч ес ки й) 5. Уль т рафи о лет о вая о блас т ь (УФ ) 6. Ви ди мая о блас т ь с пект ра 7. С пект ро фо т о мет р 8. Ф о т о ко ло ри мет р 25 9. Н або р с вет о фи ль т ро в 10. Ш кала дли н во лн а- прави ль ны йо т вет б- прави ль ны йо т вет в- прави ль ны йо т вет г- прави ль ны йо т вет д- прави ль ны йо т вет 1,4,6,8,9 1,3,5,6,8 2,4,6,7,9 1,2,3,5,6,7,10 1,3,6,8,10 Б и лет 7 С о о т нес и т е лекарс т венно е вещ ес т во и реакт и в с с о еди нени ем, по о крас ке ко т о ро го про во ди т с я фо т о мет ри ч ес ко е о пределени е 1. Н о во каи н, пара- ди мет и лА) Аз о крас и т ель ами но бенз аль деги д Б ) Ги дро кс амат желез а 2. Н о рс уль фаз о л, нат ри я ни т ри т , В) Ос но вани е Ш и ффа ки с ло т а хло ри с т о во до ро дная, Г) Ац и -с о ль щ ело ч но йрас т во р β-нафт о ла Д) С о бс т венная о крас ка 3. Ф урац и ли н, нат ри я ги дро кс и д анали з и руемо го с о еди нени я 3. Ри бо флави н, во да Е) Умень ш ени е и нт енс и вно с т и 4. Ки с ло т а ас ко рби но вая, о крас ки реакт и ва 2,6,- ди хло рфено ли ндо фено лят нат ри я 9. П РИ ЛО Ж Е Н И Я 9.1. М ет о ди ки анали з а (1-9) П рилож ение№ 1 П ро пи с ь 12. Раст в о р ри бо ф лав и на 0,02% -10м л Рибофлав ин. В изуальная колорим етрия В т ри ко ли бро ваны е про би рки и з о дно т и пно го с т екла и о ди нако во го ди амет ра о т мери ваю т пи пет ко й: в первую − 0,9 мл, во вт о рую − 1,1 мл с т андарт но го 0,02 % рас т во ра ри бо флави на, в т рет ь ю −1 мл и с с ледуемо го 0,02% рас т во ра ри бо флави на. Во вс е про би рки до бавляю т ди с т и лли ро ванную во ду до 26 о бъема 10 мл. С о держи мо е про би ро к т щ ат ель но перемеш и ваю т , вли ваю т по 0,5 мл 0,1 н. рас т во ра ни т рат а с еребра в каждую , по с ле ч его вно вь перемеш и ваю т . Ч ерез 10 ми н. наблю даю т по яви вш ую с я о крас ку. В и с пы т уемо м рас т во ре о на до лжна бы т ь не с лабее, ч ем в перво йпро би рке, и не и нт енс и внее, ч ем во вт о ро й. П ри го т о влени е с т андарт но го рас т во ра ри бо флави на: 0,02г (т о ч ная навес ка) ри бо флави на вно с ят в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 100 мл, при бавляю т 80-90 мл во ды и нагреваю т до рас т во рени я препарат а, по с ле о хлаждени я о бъем рас т во ра до во дят во до йдо мет ки . 1 мл с т андарт но го рас т во ра с о держи т 0,0002 гри бо флави на. П рилож ение№ 2 П ро пи с ь 13. Раст в о ра ди к аи на 0,5% −10,0 Ме т и ле но в о го сине го 0,015 М етиленов ый синий. К олич еств енноеопределение В т ри про би рки и з о дно т и пно го с т екла и о ди нако во го ди амет ра вно с ят : в первую −2,4 мл, во вт о рую − 3 мл, в т рет ь ю − 3,6 мл с т андарт но го рас т во ра Б , до бавляю т ди с т и лли ро ванно й во ды до о бъема 10 мл, перемеш и ваю т . Зат ем в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 100 мл о т мери ваю т 1 мл и с пы т уемо го рас т во ра, до бавляю т ди с т и лли ро ванную во ду до мет ки и перемеш и ваю т (рас т во р В). В ч ет верт ую про би рку вли ваю т 3 мл рас т во ра В, при бавляю т 7 мл ди с т и лли ро ванно йво ды и перемеш и ваю т . Окрас ка и с пы т уемо го рас т во ра до лжна бы т ь не с лабее о крас ки рас т во ра, с о держащ его 2,4 мл, и не и нт енс и внее о крас ки рас т во ра, с о держащ его 3,6 мл рас т во ра с т андарт но го о браз ц а мет и лено во го с и него . П ри го т о влени е с т андарт но го рас т во ра мет и лено во го с и него . 0,1500 гмет и лено во го с и него по мещ аю т в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 100 мл, рас т во ряю т в 70−80 мл го ряч ейди с т и лли ро ванно йво ды ; по с ле о хлаждени я о бъем рас т во ра до во дят во до йдо мет ки (рас т во р А). Рас т во р А го ден в т еч ени е 3 27 мес . 1 мл рас т во ра А перено с ят в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 100 мл и до во дят о бъем рас т во ра во до йдо мет ки (рас т во р Б ). Д икаин. К олич еств енноеопределение В мерную про би рку и ли мерны й ц и ли ндр на 25 мл (ди амет ра ≈2 с м) по мещ аю т 5 мл хло ро фо рма, 1 мл и с с ледуемо го рас т во ра, 1 мл во ды и т и т рую т медленно по каплям 0,02 мо ль /л. рас т во ро м ги дро кс и да нат ри я. Внач але т и т рую т жи дко с т ь при перемеш и вани и без вс т ряхи вани я, а з ат ем вс т ряхи ваю т и о с т авляю т ее по с ле при бавлени я каждо й капли т и т ро ванно го рас т во ра. Ти т ро вани е з аканч и ваю т по с ле и з менени я о крас ки хло ро фо рма о т го лубо йв фи о лет о вую . 1 мл 0,02 мо ль /л . рас т во ра ги дро кс и да нат ри я с о о т вет с т вует 0,006016 гди каи на. П рилож ение№ 3 П ро пи с ь 14. К и сло т ы ф о ли е в о й 0,001 Сахара 0,2 К ислота фолиев ая. К олич еств енноеопределение 0,1 гс мес и по мещ аю т в про би рку, вно с ят 2 мл 1% рас т во ра амми ака (т о ч но при го т о вленно го ), 6 мл во ды и 2 мл 0,1 мо ль /л. рас т во ра ни т рат а с еребра, перемеш и ваю т . Одно временно в две про би рки о т мери ваю т с т андарт ны йрас т во р фо ли ево й ки с ло т ы : в первую − 0,9 мл, во вт о рую − 1,1 мл, при бавляю т с о о т вет с т венно 1,55 и 1,45 мл 1% рас т во ра амми ака, 5,55 и 5,45 мл во ды и по 2 мл 0,1 мо ль /л. рас т во ра ни т рат а с еребра, перемеш и ваю т . Окрас ка и с пы т уемо го рас т во ра до лжна бы т ь и нт енс и внее, ч ем о крас ка рас т во ра в перво йпро би рке, и менее и нт енс и вна, ч ем о крас ка во вт о ро йпро би рке. П ри го т о влени е с т андарт но го рас т во ра фо ли ево йки с ло т ы . 0,0500 г (т о ч ная навес ка) фо ли ево й ки с ло т ы вно с ят в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 100 мл, до бавляю т 50 мл во ды и 2 мл ко нц ент ри ро ванно го рас т во ра амми ака, до во дят во до й до мет ки и перемеш и ваю т . Рас т во р с ледует храни т ь в 28 про хладно м и т емно м мес т е. С ро к хранени я − 1 мес . П рилож ение№ 4 П ро пи с ь 15. Раст в о ра ле в о м и це т и на 0,25% и ли 0,3% − 10,0 К и сло т ы бо рно й 0,2 г Лев ом ицетин. О пределениеподлинности К 1 мл фи ль т рат а (рас т во р А) при бавляю т 2−3 капли 0,1 мо ль /л рас т во ра нат ри я ни т ри т а и 0,5 мл по луч енно й с мес и , вли ваю т в 1−2 мл 1% рас т во ра β−нафт о ла, при го т о вленно го на 10% рас т во ре нат ри я ги дро о ки да. П о являет с я крас но е о краш и вани е. Лев ом ицетин. К олич еств енноеопределение. В изуальный м етод В6 кали бро ванны х про би ро ки з о дно т и пно го с т екла и о ди нако во го ди амет ра с при т ерт ы ми про бками вли ваю т 1,8 мл; 2,0 мл; 2,2 мл; 2,4 мл; 2,6 мл с т андарт но го рас т во ра лево ми ц ет и на; в ш ес т ую про би рку – 1,5 мл рас т во ра А*. Во вс е про би рки при бавляю т по 1 мл 0,1% рас т во ра нат ри я ни т ри т а и ч ерез 3 ми нут ы о бъем до во дят во до йдо 8 мл. Зат ем в каждую про би рку при бавляю т по 2 мл 1% рас т во ра β - нафт о ла, при го т о вленно го на 10% рас т во ре нат ри я ги дро кс и да, и перемеш и ваю т . Окрас ку анали з и руемо го рас т во ра с равни ваю т с о крас ко й эт ало нно го рас т во ра, рас с мат ри вая по о с и про би ро к с верху вни з на бело м фо не. С о держани е лево ми ц ет и на (Х ,%) вы ч и с ляю т по фо рмуле: Х = а ⋅ 0,00002 ⋅ 25 ⋅1000 5 ⋅1,5 * П ри го т о влени е рас т во ра А. К 5 мл препарат а при бавляю т 1 мл ко нц ент ри ро ванно й хло ро во до ро дно й ки с ло т ы и по с т епенно 0,1 гц и нко во йпы ли , о с т авляю т на 15 ми н. Зат ем рас т во р ко ли ч ес т венно перено с ят в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 25 мл. Объем до во дят во до йдо мет ки , перемеш и ваю т и фи ль т рую т . Рас т во р А. 29 П рилож ение№ 5 П ро пи с ь 16. Раст в о р ф ураци ли на 0,02% -10м л Ф урацилин. В изуальная колорим ерия А. В пят ь ко ли бро ванны х про би ро к и з о дно т и пно го с т екла и о ди нако во го ди амет ра с при т ерт ы ми про бками вли ваю т 0,4; 0,45; 0,5; 0,55 и 0,6 мл 0,02% с т андарт но го рас т во ра фурац и ли на, ко т о ры й го т о вят рас т во рени ем в мерно й ко лбе вмес т и мо с т ь ю 100 мл 0,0200 гпрепарат а (0,0002 г/мл)*. Вш ес т ую про би рку вно с ят 0,5 мл анали з и руемо го рас т во ра. Во вс е про би рки вли ваю т во ду до о бъема 8 мл, по 2 мл 0,1 мо ль /л. рас т во ра нат ри я ги дро кс и да и перемеш и ваю т . Ч ерез 20 ми н. с равни ваю т о крас ку анали з и руемо го и эт ало нны х рас т во ро в. С о держани е фурац и ли на в про ц ент ах (С %) вы ч и с ляю т по фо рмуле: С= а ⋅ 0,0002 ⋅100 %, 0,5 где а - о бъем с т андарт но го рас т во ра фурац и ли на в рас т во ре, с хо дно м по о крас ке с анали з и руемы м (в мл). Вы ш еуказ анны й рас т во р мо жно анали з и ро ват ь ко ло ри мет ри ч ес ки бо лее упро щ енны м с по с о бо м. Б . В т ри (*) про би рки и з о дно т и пно го с т екла и о ди нако во го ди амет ра о т мери ваю т пи пет ко йс ц ено йделени я 0,01 мл: в первую - 0,45 мл с т андарт но го 0,02% рас т во ра фурац и ли на, во вт о рую - 0,55 мл, в т рет ь ю - 0,5 мл и с с ледуемо го 0,02% рас т во ра фурац и ли на. Во вс е про би рки о т мери ваю т ди с т и лли ро ванную во ду до о бъема 5 мл (в первую - 4,55 мл, во вт о рую - 4,45 мл, в т рет ь ю - 4,5 мл). С о держи мо е про би ро кт щ ат ель но перемеш и ваю т и вли ваю т по 0,5 мл 0,1 мо ль /л. рас т во ра нат ри я ги дро кс и да в каждую , вно вь перемеш и ваю т и ч ерез 10 ми н. наблю даю т по яви вш ую с я о крас ку. В и с с ледуемо м рас т во ре о на до лжна бы т ь не 30 с лабее, ч ем в перво й про би рке, и не и нт енс и внее, ч ем во вт о ро й. П рилож ение№ 6 П ро пи с ь 25. Раст в о р ст ре пт о ци да раст в о ри м о го 0,8%; 1%; 2%; 5% и ли 10% Стрептоцид. О пределениеподлинности 1. К 2-3 каплям рас т во ра при бавляю т 5-6 капель раз веденно й хло ро во до ро дно йки с ло т ы и нагреваю т до ки пени я. Вы деляю т с я фо рмаль деги д и с ерни с т ы йанги дри д, о бнаружи ваемы е по з апаху. П о с ле о хлаждени я до бавляю т 56 капель во ды , 2-3 капли 0,1 мо ль /л рас т во ра нат ри я ни т рат а и 0,1-0,3 мл по луч енно йс мес и и вли ваю т в 1-2 мл щ ело ч но го рас т во ра β-нафт о ла. П о являет с я ви ш нево -крас но е о краш и вани е. 2. К 2-3 каплям рас т во ра при бавляю т 4-5 капель реакт и ва Н ес с лера. П о с т епенно о браз ует с я с еры йо с адо к. 3. К 3-5 каплям рас т во ра при бавляю т по 2-3 капли рас т во ро в переки с и во до ро да и хло ри да желез а(111). П о являет с я крас но е о краш и вани е, бы с т ро перехо дящ ее в буро е. 4. Ч ас т ь рас т во ра на графи т о во йпало ч ке вно с ят в бес ц вет но е пламя. П ламя о краш и вает с я в желт ы йц вет . Стрептоцид. К олич еств енноеопределение К1 мл 0,8%, 1% и 5% и ли 0,5 мл 2% и ли 10% рас т во ра препарат а при бавляю т 1 мл рас т во ра нат ри я ги дро кс и да и вы пари ваю т на во дяно йбане. Кс ухо му о с т ат ку до бавляю т 10 мл во ды , 5 мл раз веденно йхло ро во до ро дно йки с ло т ы и ки пят ят 5 ми н. П о с ле о хлаждени я до бавляю т 5 мл во ды , 0,2 г кали я бро ми да, 2 капли рас т во ра т ро пео ли на 00, 1 каплю рас т во ра мет и лено во го с и него и при 18 - 20 ˚ С т и т рую т 0,02 мо ль /л (0,8%;1%;2%) и ли 0,1 мо ль /л (5% и 10%) рас т во ро м ни т рат а нат ри я, до бавляю т его в нач але по 0,2 - 0,3 мл ч ерез 1 ми н, а в ко нц е т и т ро вани я (з а 0,1 - 0,2 мл до т о ч ки экви валент но с т и ) по 1 – 2 капли ч ерез 1 ми н. до перехо да крас но -фи о лет о во йо крас ки в го лубую . 31 П ри т и т ро вани и 0,02 мо ль /л рас т во ро м нат ри я ни т ри т а параллель но про во дят ко нт ро ль ны йо пы т . 1 мл 0,02 мо ль /л рас т во ра нат ри я ни т ри т а с о о т вет с т вует 0,005766 г,а 0,1 мо ль /л - 0,02883 гс т репт о ц и да рас т во ри мо го . П рилож ение№ 7 П ро пи с ь 27 . Эри т ро м и ци на 0,02 г Глю к о зы (и ли сахара) 0,2 г Э ритром ицин. О пределениеподлинности К 0,02 г по ро ш ка при бавляю т 1 мл ац ет о на и 1 мл ко нц ент ри ро ванно й хло ро во до ро дно й ки с ло т ы . П о являет с я о ранжево е о краш и вани е, по с т епенно перехо дящ ее в т емно -крас но е. Зат ем до бавляю т 2 мл хло ро фо рма и вз балт ы ваю т . Х ло ро фо рмны йс ло йо краш и вает с я в фи о лет о вы йц вет . Глю ко з а. Определени е по дли нно с т и . К 0,01г. по ро ш ка при бавляю т 0,5 мл во ды , 1 - 2 мл реакт и ва Ф ели нга и нагреваю т до ки пени я. Образ ует с я о с адо к ки рпи ч но -крас но го ц вет а. Э ритром ицин. К олич еств енноеопределение. А цидим етрия Рас т во ряю т 0,15 г по ро ш ка в 2 мл 96% эт ано ла, нейт рали з о ванно го по мет и ло во му крас но му, при бавляю т 10 мл с вежепро ки пяч енно йо хлажденно йво ды и т и т рую т 0,02 мо ль /л рас т во ро м хло ро во до ро дно й ки с ло т ы до ро з о во го о краш и вани я. 1 мл 0,02 мо ль /л рас т во ра хло ро во до ро дно йки с ло т ы с о о т вет с т вует 0,01468 г эри т ро ми ц и на. Э ритром ицин. К олич еств енноеопределение. Ф отоколорим етрия Око ло 0,7 г по ро ш ка (т о ч ная навес ка) по мещ аю т в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 100 мл, при бавляю т 10 мл 95% с пи рт а эт и ло во го , перемеш и ваю т 12 ми н., до во дят о бъем во до йдо мет ки . 2 мл рас т во ра перено с ят в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 25 мл, при бавляю т 10 мл 9 мо ль /л рас т во ра с ерно й ки с ло т ы и 32 нагреваю т на во дяно й бане 5 ми н. Рас т во р бы с т ро о хлаждаю т и о бъем до во дят т о йже с ерно йки с ло т о йдо мет ки . И з меряю т о пт и ч ес кую пло т но с т ь (D1) о краш енно го рас т во ра при дли не во лны о ко ло 410 нм в кю вет е с т о лщ и но йс ло я 1с м о т но с и т ель но рас т во ра с равнени я. П араллель но и з меряю т о пт и ч ес кую пло т но с т ь рабо ч его с т андарт но го о браз ц а (РС О) эри т ро ми ц и на, 1 мл ко т о ро го с о держи т 0.00008 гэри т ро ми ц и на. П ри го т о влени е с т андарт но го рас т во ра эри т ро ми ц и на. Око ло 0,1 г(т о ч ная навес ка) эри т ро ми ц и на рас т во ряю т в 10 мл 95% с пи рт а эт и ло во го в мерно йко лбе вмес т и мо с т ь ю 100 мл. С о держи мо е до во дят во до йдо мет ки , перемеш и ваю т (0,1% рас т во р). 2мл 0,1% рас т во ра перено с ят в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 25 мл, при бавляю т 10мл 9 мо ль /л рас т во ра с ерно йки с ло т ы и нагреваю т на во дяно йбане 5 ми н., рас т во р о хлаждаю т и до во дят т о йже с ерно йки с ло т о йдо мет ки . И з меряю т о пт и ч ес кую пло т но с т ь (D2) о краш енно го рас т во ра при дли не во лны о ко ло 410 нм в кю вет е с т о лщ и но йс ло я в 1 с м о т но с и т ель но рас т во ра с равнени я. П ри го т о влени е рас т во ра с равнени я: в мерную ко лбу вмес т и мо с т ь ю 25 мл о т мери ваю т 0,2 мл 95% с пи рт а эт и ло во го , 1,8 мл во ды и до во дят с о держи мо е ко лбы 9 мо ль /л рас т во ро м с ерно йки с ло т ы до мет ки , перемеш и ваю т . С о держани е эри т ро ми ц и на (Х ) в граммах вы ч и с ляю т по фо рмуле: X= D1 ⋅ 0,002 ⋅ 100 ⋅ P , D2 ⋅ 2 ⋅ a где: Р- с редняя мас с а по ро ш ка, г; а - мас с а навес ки по ро ш ка, вз ят ая для анали з а, г. D 1, D2 – о пт и ч ес кая пло т но с т ь с о о т вет с т венно и с пы т уемо го и с т андарт но го рат с т во ро в. Глю коза. К олич еств енноеопределение К 0,1 г по ро ш ка при бавляю т 1 - 1,5 мл во ды и вс т ряхи ваю т 1 ми н. Зат ем о бъем рас т во ра до во дят во до йдо 2 мл, перемеш и ваю т , фи ль т рую т ч ерез с ухо й фи ль т р и о пределяю т по каз ат ели прело млени я фи ль т рат а (n) и во ды (n0) при 200С . 33 С о держани е глю ко з ы Х = (Х ) в граммах вы ч и с ляю т по фо рмуле: (n − n0 ) ⋅ P ⋅ 2 ⋅ 1,11 , где 0,1 ⋅ 0,00142 ⋅ 100 Р - с редняя мас с а по ро ш ка, г; 0,00142-факт о р по каз ат еля прело млени я рас т во ра без во дно й глю ко з ы ; 1,11 - ко эффи ц и ент перес ч ет а на во дную глю ко з у при с о держани и 10% влаги в препарат е. П рилож ение№ 8 Ме т о ди к а анали за ле к арст в е нно й ф о рм ы : Ане ст е зи на 0,3 Эк ст рак т а к расав к и сухо го 0,03 А нестезин. К олич еств енноеопределение 0,1 г по ро ш ка рас т во ряю т в 10 мл раз веденно йхло ро во до ро дно йки с ло т ы , до бавляю т 1 гбро ми да кали я и т и т рую т 0,1 мо ль /л рас т во ро м ни т ри т а нат ри я до по явлени я с и него о краш и вани я (и нди кат о р-2 капли рас т во ра т ро пео ли на 00 и 1 капля рас т во ра мет и лено во го с и него ). А лкалоиды сухог о экстракта красав ки. К олич еств енноеопределение Око ло 0,33 г по ро ш ка по мещ аю т в дели т ель ную во ро нку, при бавляю т 5 капель ко нц ент ри ро ванно го рас т во ра ги дро кс и да аммо ни я, 10 мл хло ро фо рма, вс т ряхи ваю т 2 ми нут ы . Х ло ро фо рмны е и з влеч ени я фи ль т рую т ч ерез бумажны й фи ль т р с 1 г без во дно го с уль фат а нат ри я в вы пари т ель ную ч аш ку. Рас т во р в дели т ель но й во ро нке и фи ль т р про мы ваю т 10 мл хло ро фо рма. Х ло ро фо рмны е и з влеч ени я о бъеди няю т и вы пари ваю т до с уха на ки пящ ей во дяно й бане. Ос т ат о к в вы пари т ель но йч аш ке рас т во ряю т в 20 мл хло ро фо рма, перено с ят в дели т ель ную во ро нку, при бавляю т 3,5 мл ги дро фт алат но го буферно го рас т во ра с рН = 5,4; 1,5 34 мл рас т во ра мет и ло во го о ранжево го и вс т ряхи ваю т 4 ми н. Опт и ч ес кую пло т но с т ь по луч енно го и з влеч ени я (А) и з меряю т на фо т о элект ро ко ло ри мет ре при дли не во лны о ко ло 434 нм, в кю вет е с т о лщ и но йс ло я 1с м. Рас т во р с равнени я хло ро фо рм. П араллель но и з меряю т о пт и ч ес кую пло т но с т ь эт ало нно го рас т во ра ат ро пи на о с но вани я (Ас т ), для ч его 4 мл с т андарт но го рас т во ра ат ро пи на о с но вани я по мещ аю т в дели т ель ную во ро нку, при бавляю т 3,5 мл ги дро фт алат но го буферно го рас т во ра с рН = 5,4; 1,5 мл рас т во ра мет и ло во го о ранжево го , 15 мл хло ро фо рма. 1 мл с т андарт но го рас т во ра с о держи т 0,00005 го с но вани я ат ро пи на (С с т ). С о держани е алкало и до в крас авки в граммах (Х ) в лекарс т венно й фо рме вы ч и с ляю т по фо рмуле: X= A ⋅ CCT ⋅ P , ACT ⋅ a ⋅ K ⋅ 250 где К= 1,17, ко эффи ц и ент перес ч ет а на ат ро пи н о с но вани е; А - о пт и ч ес кая пло т но с т ь и с пы т уемо го рас т во ра экс т ракт а; Ас т - о пт и ч ес кая пло т но с т ь с т андарт но го рас т во ра; а - навес ка (г) лекарс т венно йфо рмы , вз ят о йдля при го т о влени я рас т во ра А; Р - о бщ ая мас с а лекарс т венно йфо рмы . С о держани е алкало и до в в лекарс т венно й фо рме до лжно бы т ь в пределах 0,00019г-0,00026 г. П рилож ение9 Ме т о ди к а анали за ле к арст в е нно й ф о рм ы : Фе ни лсали ци лат а 0,3 П апав е ри на ги дро хло ри да 0,03 Эк ст рак т а к расав к и сухо го 0,03. П апав ерина г идрохлорид. К олич еств енноеопределение 35 Око ло 0,36 г по ро ш ка по мещ аю т в дели т ель ную во ро нку, до бавляю т 5 мл хло ро фо рма. Вс т ряхи ваю т 2 ми н., до бавляю т 2 мл во ды . Х ло ро фо рмны е и з влеч ени я перено с ят в ко лбу, с о держи мо е во ро нки про мы ваю т 5 мл хло ро фо рма. Х ло ро фо рмны е и з влеч ени я о бъеди няю т и упари ваю т на ки пящ ейво дяно йбане. Ос т ат о к в ко лбе рас т во ряю т в 10 мл с пи рт а, нейт рали з о ванно го по фено лфт алеи ну, т и т рую т 0,02 мо ль /л рас т во ро м ги дро кс и да нат ри я до ро з о во го о краш и вани я. 1 мл 0,02 мо ль /л рас т во ра ги дро кс и да нат ри я с о о т вет с т вует 0,007518 гпапавери на ги дро хло ри да. Ф енилсалицилат. К олич еств енноеопределение В ко лбу по с ле о пределени я папавери на ги дро хло ри да при бавляю т 20 мл 0,1 мо ль /л рас т во ра ги дро кс и да нат ри я, при с о еди няю т о брат ны й хо ло ди ль ни к и нагреваю т на ки пящ ей во дяно й бане 40-60 ми н. до и с ч ез но вени я мас ляни с т ы х капель . П о о хлаждени и и з бы т о к 0,1 мо ль /л рас т во ра ги дро кс и да нат ри я т и т рую т 0,1 мо ль /л рас т во ро м хло ро во до ро дно йки с ло т ы (и нди кат о р - 3 капли рас т во ра бро мкрез о ло во го пурпурно го ) до желт о го о краш и вани я. 1 мл 0,1 мо ль /л рас т во ра ги дро кс и да нат ри я с о о т вет с т вует 0,02142 гфени лс али ц и лат а. О пределение тропанов ых алкалоидов в с ухо м экс т ракт е крас авки . К во дно му рас т во ру ко нц ент ри ро ванно го в дели т ель но й во ро нке при бавляю т рас т во ра ги дро кс и да аммо ни я, 10 мл 5 капель хло ро фо рма, вс т ряхи ваю т 2 ми н. Далее по с т упаю т , как о пи с ано в преды дущ ей мет о ди ке (П ри ло жени е 8), нач и ная с о с ло в: хло ро фо рмно е и з влеч ени е фи ль т рую т ч ерез бумажны йфи ль т р. С о держани е алкало и до в крас авки в граммах (Х ) рас с ч и т ы ваю по фо рмуле: X = A ⋅ CCT ⋅ P ACT ⋅ a ⋅ K ⋅ 250 9.2. Ф О Т О К О ЛО РИ М Е Т Р, У СТ РО Й СТ В О , Т Е Х Н И К А В ЫП О ЛН Е Н И Я И ЗМ Е РЕ Н И Й 36 Ф о т о мет р (ри с . 1) вы по лнен в ви де о дно го бло ка. На мет алли ч ес ко м о с но вани и 3 з акреплены уз лы фо т о мет ра, ко т о ры е з акры ваю т с я ко жухо м 1. Кю вет но е о т делени е з акры вает с я с ъемно йкры ш ко й5. В фо т о мет р вхо дят фо т о мет ри ч ес ки й бло к 2 (ри с .), бло к пи т ани я 3, ми кро про ц ес с о рная с и с т ема 4. Н а бо ко во йс т енке фо т о мет ра (ри с . 5) рас по ло жена о с ь рез и с т о ра 1 (УС Т. 0) и т умблер 2 (С ЕТЬ). Н а з аднейс т енке о с но вани я фо т о мет ра (ри с . 3) рас по ло жена ро з ет ка 5 для по дклю ч ени я кфо т о мет ру т ермо печ ат аю щ его ус т ро йс т ва т и па УТП -2. 1. Б лок фотом етрич еский В фо т о мет ри ч ес ки й бло к вхо дят : о с вет и т ель , мо но хро мат о р, кю вет но е о т делени е, кю вет о держат ель , фо т о мет ррч ес ко е механи з ма о с вет и т еля о бес печ и вает ус т ро йс т во . перемещ ени е лампы Ко нкуренц и я в т рех вз аи мно перпенди кулярны х направлени ях. М о но хро мат о р 1 (с м. ри с . 2) с лужи т для по луч ени я и з луч ени я з аданно го с пект раль но го с о с т ава и с о с т о и т и з ко рпус а, уз ла вхо дно й щ ели , с фери ч ес ко го з еркала, ди фракц и о нно йреш ет ки ч ерез с и нус но го механи з ма. Руч ка 2 (с м. ри с . 1) с лужи т для по во ро т а ди фракц и о нно й реш ет ки ч ерез с и нус ны ймехани з м и ус т ано вки т ребуемо йдли ны во лны в нано мет рах. Кю вет но е о т делени е 6 (с м. ри с . 2) предс т авляет с о бо й ко рпус , ко т о ры й с по мо щ ь ю бо лт о в крепи т с я к ко рпус у мо но хро мат о ра. В право й ч ас т и эт о го ко рпус а рас по ло жен карман 5 с кры ш ко й, в ко т о ро м раз мещ ено фо т о мет ри ч ес ко е ус т ро йс т во . В фо т о мет ри ч ес ко е ус т ро йс т во вхо дят фо т о ди о д и ус и ли т ель 37 по с т о янно го т о ка. Ус и ли т ель по с т о янно го т о ка ус т анавли вает с я в фо т о мет р ч ерез раз ъем. Для ко нт ро ля вы хо дно го напряжени я УП Т на печ ат но йплат е, нахо дящ ейс я у бо ко во йс т енки фо т о мет ра, и меет с я 2 гнез да, з акры т ы х ко жухо м 1 (ри с . 3). Н а эт о йже плат е нахо ди т с я рез и с т о р 1 (ри с . 3). В кю вет о держат ель ус т анавли ваю т кю вет ы с рас т во ри т елем (ко нт ро ль ны м рас т во ро м) и и с с ледуемы м рас т во ро м и по мещ аю т и х в кю вет но е о т делени е 6 (с м. ри с . 2). П О РЯ Д О К РА Б О Т Ы 1. И з мерени е ко эффи ц и ент а про пус кани я и ли о пт и ч ес ко йпло т но с т и 1.1. Ус т ано ви т ь в кю вет но е о т делени е кю вет ы с рас т во ри т елем и ли ко нт ро ль ны м рас т во ро м, по о т но ш ени ю к ко т о ро му про и з во ди т с я и з мерени е, и и с с ледуемы м рас т во ро м. Кю вет у с рас т во ри т елем и ли ко нт ро ль ны м рас т во ро м ус т ано ви т ь в даль нее гнез до кю вет о держат еля, а кю вет у с и с с ледуемы м рас т во ро м — в бли жнее гнез до кю вет о держат еля. В с вет о во йпуч о кус т ано ви т ь кю вет у с рас т во ри т елем (руко ят ка 4 (с м. ри с . 1) — влево до упо ра). Ес ли и з мерени е про во ди т с я о т но с и т ель но во з духа, напри мер, для о браз ц а и з с т екла и ли друго го про з рач но го мат ери ала, т о в эт о м с луч ае даль нее гнез до кю вет о держат еля до лжно бы т ь с во бо дны м. 1.2. Ус т ано ви т ь руч ко й2 (с м. ри с . 1) дли ну во лны , на ко т о ро йпро во дят с я и з мерени я рас т во ра. Дли на во лны вы с вет и т с я на верхнем ц и фро во м т абло . П ри меч ани е. П ри рабо т е на дли не во лны 400 нм во з мо жна нес т аби ль ная рабо т а фо т о мет ра. Во и з бежани е эт о го ус т анавли вайт е дли ну во лны (400±2) нм, где с т аби ль но с т ь рабо т ы Вас ус т ро и т . 1.3. П ри з акры т о йкры ш ке кю вет но го о т делени я нажат ь клави ш у «Г». Н а ни жнем ц и фро во м т абло с лева о т ми гаю щ ей з апят о й вы с вет и т с я с и мво л «Г». Н ажат ь клави ш у «П » и ли «Е». С лева о т ми гаю щ ей з апят о й вы с вет и т с я 38 с о о т вет с т венно с и мво л «П » и ли «Е», а с права от ми гаю щ ей з апят о й — с о о т вет с т венно з нач ени я «100,0±0,2» и ли «0,000 ±0,002», о з нач аю щ и е, ч т о нач аль ны йо т с ч ет про пус кани я (100,0%) и ли о пт и ч ес ко йпло т но с т и (0,000) ус т ано ви лс я на фо т о мет ре прави ль но . Ес ли о т с ч ет ы «100,0±0,2» и ли «0,000±0,002» ус т ано ви ли с ь с бо ль ш и м о т кло нени ем, нажат ь на клави ш и «Г», «П » и ли «Е» по вт о рно , с о блю дая небо ль ш ую пауз у (3— 5 с ). От кры т ь кры ш ку кю вет но го о т делени я и нажат ь клави ш у Н УЛ Ь, з акры т ь кры ш ку, нажат ь клави ш у П и ли Е. П р и м еч ан и е. Для про верки прави ль но с т и уч ет а «нуля» о т кро йт е кры ш ку кю вет но го о т делени я, при эт о м о т с ч ет на т абло до лжен бы т ь (0,00±0,02). 1.4. Зат ем руко ят ку 4 (с м ри с . 10) ус т ано ви т ь вправо до упо ра, при эт о м в с вет о во йпуч о к вво ди т с я кю вет а с и с с ледуемы м рас т во ро м. От с ч ет на с вет о во м т абло с права о т ми гаю щ ей з апят о й с о о т вет с т вует ко эффи ц и ент у про пус кани я и ли о пт и ч ес ко йпло т но с т и и с с ледуемо го рас т во ра. 1.5. П о вт о ри т ь о перац и и по пп. 1.1 — 1.4 т ри раз а, вы ч и с ли т ь с реднее ари фмет и ч ес ко е з нач ени е и з меряемо йвели ч и ны . 1.6. Для по с т ро ени я с пект раль но й кри во й ко эффи ц и ент а про пус кани я и ли о пт и ч ес ко йпло т но с т и о браз ц а и з мерени я про вес т и по мет о ди ке пп. 1.1 — 1.4. 1.7. П о с т ро и т ь с пект раль ную кри вую с вет о про пус кани я и ли о пт и ч ес ко й пло т но с т и и с с ледуемо го рас т во ра, о т клады вая по го ри з о нт аль но йо с и дли ны во лн в нано мет рах, а по верт и каль но й— с вет о про пус кани е и ли о пт и ч ес кую пло т но с т ь . 2. И з мерени е ко нц ент рац и и вещ ес т ва в рас т во ре Для и з мерени я ко нц ент рац и и вещ ес т ва в рас т во ре нео бхо ди мо предвари т ель но вы по лни т ь ряд по дго т о ви т ель ны х о перац и йв с ледую щ ейпо с ледо ват ель но с т и : вы бо р дли ны во лны ; вы бо р кю вет ы ; по с т ро ени е градуи ро во ч но го графи ка для данно го вещ ес т ва и о пределени е ко эффи ц и ент а факт о ри з ац и и F; 39 введени е ко эффи ц и ент а F в памят ь вы ч и с ли т ель но го бло ка; и з мерени е ко нц ент рац и и вещ ес т ва. 2.1. Вы бо р дли ны во лны Для до с т и жени я наи мень ш ей по греш но с т и в о пределени и ко нц ент рац и и с ледует прави ль но вы брат ь дли ну во лны , на ко т о ро й будет вы по лнят ь с я и з мерени е. Для эт о го по с пект раль но йкри во йрас т во ра, с нят о йпо мет о ди ке пп. 1.1.— 1.7, вы брат ь т ако йуч ас т о к, на ко т о ро м вы по лняю т с я с ледую щ и е ус ло ви я: о пт и ч ес кая пло т но с т ь и меет макс и маль ную вели ч и ну; хо д кри во йпри мерно параллелен го ри з о нт аль но йо с и , т . е. о пт и ч ес кая пло т но с т ь мало з ави с и т о т дли ны во лны . Дли на во лны , с о о т вет с т вую щ ая эт о му уч ас т ку, вы би рает с я для и з мерени я. Ес ли для неко т о ры х рас т во ро в вт о ро е ус ло ви е не вы по лняет с я, т о рабо ч ая дли на во лны вы би рает с я по перво му ус ло ви ю . 2.2. Вы бо р кю вет ы Как указ ы вало с ь вы ш е, абс о лю т ная по греш но с т ь и з мерени я ко эффи ц и ент а про пус кани я не превы ш ает 0,5%. От но с и т ель ная по греш но с т ь и з мерени я о пт и ч ес ко й пло т но с т и рас т во ра будет раз ли ч но й и до с т и гает ми ни мума при з нач ени и о пт и ч ес ко й пло т но с т и 0,4. П о эт о му при рабо т е на фо т о мет ре реко мендует с я пут ем с о о т вет с т вую щ его вы бо ра дли ны кю вет рабо т ат ь вбли з и указ анно го з нач ени я о пт и ч ес ко йпло т но с т и , напри мер, в пределах о т 0,3 до 0,6. 2.3. П о с т ро ени е градуи ро во ч но го графи ка и о пределени е ко эффи ц и ент а факт о ри з ац и и П о с т ро ени е градуи ро во ч но го графи ка про во ди т ь с ледую щ и м о браз о м. П ри го т о ви т ь ряд рас т во ро в данно го вещ ес т ва с и з вес т ны ми ко нц ент рац и ями , о хват ы ваю щ и ми о блас т ь во з мо жны х и з менени йко нц ент рац и йэт о го вещ ес т ва в и с с ледуемо м рас т во ре. 40 И з мери т ь о пт и ч ес ки е пло т но с т и вс ех градуи ро во ч ны й графи к, о т клады вая по рас т во ро в и по с т ро и т ь го ри з о нт аль но й о с и и з вес т ны е ко нц ент рац и и , а по верт и каль но й— с о о т вет с т вую щ и е и м з нач ени я о пт и ч ес ко й пло т но с т и . С ледует убеди т ь с я в т о м, ч т о з ави с и мо с т ь ко нц ент рац и и о т о пт и ч ес ко й пло т но с т и — ли нейная, т . е. вы ражает с я на графи ке прямо йли ни ей. Рас с ч и т ат ь по графи ку ко эффи ц и ент факт о ри з ац и и F, для эт о го по графи ку ко нц ент рац и й с ни маю т з нач ени е С для с редней ч ас т и графи ка и с о о т вет с т вую щ ую эт о йко нц ент рац и и о пт и ч ес кую пло т но с т ь D: F=C ⁄ D Ес ли при по с т ро ени и градуи ро во ч но го графи ка будет ус т ано влено , ч т о з ави с и мо с т ь между о пт и ч ес ко й пло т но с т ь ю и ко нц ент рац и ей не ли нейная, ко эффи ц и ент факт о ри з ац и и F о пределят ь не т ребует с я. Определени е ко нц ент рац и и в эт о м с луч ае про во ди т ь по градуи ро во ч но му графи ку. 2.4. Введени е ко эффи ц и ент а факт о ри з ац и и F в памят ь вы ч и с ли т ель но го бло ка. Ввес т и в памят ь вы ч и с ли т ель но го бло ка ко эффи ц и ент F. Для эт о го нажат ь клави ш у «F», на ц и фро во м т абло с лева о т ми гаю щ ейз апят о йвы с вет и т с я с и мво л «F». Н абрат ь с по мо щ ь ю клави ат уры з нач ени я ко эффи ц и ент а F. Н а ц и фро во м т абло с права от ми гаю щ ей з апят о й вы с вет и т с я набранно е з нач ени е ко эффи ц и ент а. Ф о т о мет р для и з мерени я ко нц ент рац и и по дго т о влен. П р и м еч ан и е. П ри по вт о рно м вы ведени и ко эффи ц и ент а факт о ри з ац и и на ц и фро во м т абло во з мо жно умень ш ени е по с ледней з нач ащ ей ц и фры на еди ни ц у. 2.5. И з мерени е ко нц ент рац и и вещ ес т ва в рас т во ре. П ро вес т и о перац и ю по пункт ам 1.1.-1.4. П ри эт о м и с с ледуемы й рас т во р нали т ь в кю вет ы т о й же рабо ч ейдли ны , с ко т о ро йпро во ди лас ь градуи ро вка и ус т ано ви т ь дли ну во лны , вы бранную по пункт у 2.1. 41 Н ажат ь клави ш у «С ». От с ч ет на ц и фро во м т абло с права о т ми гаю щ ей з апят о йс о о т вет с т вует з нач ени ю ко нц ент рац и и и с с ледуемо го рас т во ра. 3. Определени е с ко ро с т и и з менени я о пт и ч ес ко йпло т но с т и рас т во ра. Для о пределени я с о с т о яни я реакц и и , про т екаю щ ей в рас т во ре, бы вает нео бхо ди мо о пределят ь с ко ро с т ь и з менени я о пт и ч ес ко йпло т но с т и з а како й-т о з аданны йпро межут о квремени t. 3.1. П ро вес т и о перац и и по пункт ам 1.1.-1.4. при эт о м по пункт ам 1.2. ус т ано ви т ь т ребуемую дли ну во лны . 3.2. Н ажат ь на клави ш у «А». Н а ц и фро во м т абло с лева о т ми гаю щ ей з апят о йвы с вет и т с я с и мво л «А». 3.3. Ввес т и в памят ь время t, з а ко т о ро е нео бхо ди мо о предели т ь с ко ро с т ь А и з менени я о пт и ч ес ко йпло т но с т и (время вво ди т с я в ми нут ах и мо жет при ни мат ь з нач ени я ц елы х ч и с ел о т 1 до 9). 3.4. Ч ерез время t на ц и фро во м т абло с права о т ми гаю щ ей з апят о й вы с вет и т с я з нач ени е с ко ро с т и и з менени я о пт и ч ес ко йпло т но с т и . 3.5. Ес ли т ребует с я о предели т ь с ко ро с т ь и з менени я о пт и ч ес ко йпло т но с т и т о го же рас т во ра в с ледую щ и йпро межут о к времени t, ус т ано вленны йв пункт е 3.3., – нажат ь вно вь клави ш у «А». 42 Ри с .1. Общ и йви д фо т о мет ра Ри с . 2. Ви д фо т о мет ра без ко жуха Ри с .3. Ви д фо т о мет ра с з ади 10. О Т В Е Т Ы К Т Е СТ А М 43 1) 1-Б ;2-Е; 3-С ; 4-А,Д; 5-В. 2) 1-В; 2-Г; 3-А; 4-Б . 3) 1-Б ; 2-В; 3-Г; 4-А. 4) 1-Б ; 2-А; 3-В; 4-Г. 5) 1-Г; 2-В; 3-А; 4-Б . 6) А-г; Б -а 7) 1-В; 2-А; 3,4-Д; 5-Б ; 6-Г. С о с т ави т ель Н ес т еро ва Тамара Алекс андро вна Редакт о р О. А. Ти хо ми ро ва