Инструкция по упаковке биологического материала для транспортировки (для сотрудников ПЗБМ) Не разрешается использовать стекло в качестве упаковочного материала при транспортировке проб для анализа во избежание поломки и возможного вреда для лиц, участвующих в транспортировке. Рекомендуется следующая структура упаковки для биологического материала: - внутренняя упаковка для материала пробы; - абсорбирующий материал; - наружная упаковка с информацией об образце и лабораторными формами назначений анализов; - термосумка. Критерии для отказа в принятии лабораторией биологического материала на анализ: • расхождение между данными заявки и этикетки (инициалы, дата, время и т.д.); • отсутствие этикетки на шприце (вакутейнере) или пробирке; • невозможность прочесть на направлении четкого перечня необходимых анализов; • гемолиз (за исключением анализов, на которые наличие гемолиза не влияет); • материал находится в несоответствующей емкости (т.е. материал взят не с тем антикоагулянтом, консервантом и др.); • наличие сгустков в пробах с антикоагулянтом; • материал взят в вакуумные емкости с просроченным сроком годности. Собранную мочу для анализа нужно как можно быстрее необходимо доставить в лабораторию. Длительное хранение мочи при комнатной температуре приводит к изменению физических свойств мочи (изменению цвета, запаха, количества в результате испарения), разрушению клеток и размножению бактерий. Моча, собранная для общего анализа, может храниться не более 1,5-2 часов, обязательно на холоде! Анализ мочи обязателен для всех декретированных работников. Его результаты, вместе с заключением терапевта записывают в санитарную книжку. Купить медкнижку можно быстро и без проволочек со стороны. Добавление консервантов в мочу нежелательно, но допускается, если между мочеиспусканием и анализом мочи проходит более 2 часов. Наиболее приемлемый способ хранения мочи - охлаждение, можно хранить в холодильнике, но не доводить до замерзания. Доставка в лабораторию любого образца мочи, предназначаемого длямикробиологического анализа, должна осуществляться не более чем через 2 часа после забора материала. Даже наиболее совершенная транспортная система не может служить заменой быстрой транспортировки. Образцы мочи для обнаружения и идентификации вирусов должны быть доставлены в лабораторию быстро, при температуре +4°С, в отдельном контейнере. В этих условиях вирусы обычно остаются стабильными в течение 2-3 дней. При длительном стоянии мочи происходит испарение амиака, моча постепенно теряет свойственный ей запах. Изменяется также цвет мочи, она становится более насыщенно-желтой, вследствие испарения. Поскольку моча, собираемая для общего анализа мочи, не стерильна, происходит размножение бактерий которые в ней находятся. А они в свою очередь, изменяют клеточный состав мочи уменьшается количество эритроцитов, лейкоцитов и эпителия. Они разрушаются под влиянием бактерий. Анализ крови лучше проводить как можно быстрее с момента забора материала. Но иногда выполнить данное условие не возможно. Большинство лабораторий имеют заборные пункты по всей стране и доставка крови для анализа может проводится только один раз в неделю. Поэтому соблюдение правил транспортировки крови и подготовки ее к анализу важный момент в лабораторной диагностике. Доктор Вера рекомендует все же прийти в лабораторию для сдачи анализа крови. Но если это не возможно - правила соблюдать стоит, ведь это залог верного результата. Кровь, как жидкая среда организма, не может длительно сохранять свои свойства. Поскольку для анализа нужна, как правило, сыворотка, то в заборном пункте кровь центрифугируют, разделяя клеточное и жидкое содержимое. Сыворотку помещают в отдельные пробирки и хранят в холодильнике. Длительность хранения сыворотки для анализа не должна превышать одной недели. Количество микроэлементов (натрия, калия, кальция, магния), некоторых ферментов может не изменятся при хранении образцов сыворотки крови при температуре холодильника до 4 дней. Гемоглобин, эритроциты стабильны в течение 1 дня при хранении в закрытой пробирке. Хранение образцов плазмы крови, предназначенной для исследований свертывающей системы, при комнатной температуре более 4 часов не рекомендуется. Анализ газов крови необходимо проводить немедленно. При невозможности неотложного анализа образцы крови в закрытых стеклянных контейнерах могут храниться в бане с ледяной водой до 2 часов. При транспортировке в лабораторию контейнеры с образцами крови следует предохранять от тряски во избежание развития гемолиза. Температура ниже +4°С и выше +30 °С может существенно изменить содержание в образце многих аналитов, в том числе и крови. Образцы цельной крови пересылке для проведения анализов не подлежат. Для получения достоверных результатов любого из существующих на сегодняшний день методов лабораторных исследований необходимо учитывать ряд факторов, оказывающих негативное влияние на его результаты. К этим факторам можно отнести: I. II. III. Состояние пациента, предшествующее взятию у него биологического материала для исследования. Свойства биологического материала. Условия взятия, временного хранения и транспортировки биологического материала. Первая группа факторов должна приниматься во внимание прежде всего врачом, назначающим лабораторное исследование пациенту и указываться в направлении на исследование. Все факторы, входящие в эту группу можно разделить на две категории: 1. факторы, которые должны быть указаны при любом виде лабораторного исследования – пол, возраст, основной диагноз; 2. факторы, которые указываются при некоторых видах лабораторных исследований - национальность, физиологическое состояние (беременность, наличие сопутствующих заболеваний, фаза менструального цикла), прием лекарственных препаратов, прием пищи, голодание, курение, прием алкоголя. Ко второй и третьей группе факторов относятся - стабильность анализируемого биологического материала и его возможный метаболизм in vitro. От этого зависят необходимость использования специальных контейнеров с консервантами и транспортных сред для временного хранения, а также условия транспортировки биологического материала в лабораторию (соблюдение температурного режима и влажности). Так, наиболее простой и в то же время эффективной мерой служит соблюдение единого правила взятия крови натощак, утром, в положении пациента лежа или сидя. Существенную помощь при этом может оказать применение различных устройств типа “вакутейнеров”. При использовании “вакутейнеров” сокращается время взятия крови за счет ее ускоренного всасывания в вакуумную пробирку, где кровь немедленно вступает в контакт с необходимым для сохранения аналита консервантом. При проведении цитологического исследования влагалищного отделяемого на бактериальный вагиноз для правильного приготовления мазков полученное отделяемое наносится на предметное стекло и равномерно мягким движением, не применяя грубого втирания, равномерно распределяется на предметном стекле. После чего, мазок фиксируют высушиванием при комнатной температуре. При исследовании методом ПЦР взятие материала для анализа производится только одноразовыми инструментами (иглами, тампонами, зондами, одноразовыми стерильными щетками для соскоба эпителия) в пластиковые пробирки одноразового использования с реактивом из набора “ДНКЭКСПРЕСС”. Взятие биологического материала и его транспортировка для проведения бактериологического исследования являются наиболее ответственными этапами, обеспечивающими успех микробиологических исследований по выделению микроорганизмов из различного клинического материала. При взятии биологического материала медицинский персонал должен использовать спецодежду – халаты, перчатки. При опасности возникновения аэрозолей должны использоваться защитные очки и маски. Нарушение правил взятия биологического материала чревато нежелательными последствиями экономического (излишняя трата расходных материалов) и медицинского характера (повторное взятие биологического материала у пациента, задержка результатов лабораторного исследования, возможность медицинских ошибок). Общими требованиями к взятию и транспортировке биологического материала являются: 1. Соблюдение оптимальных сроков для взятия биологического материала на исследование. 2. Взятие биологического материала должно осуществляться с учетом места максимальной локализации возбудителя и возможных путей его выделения в окружающую среду. 3. Биологический материал для исследования должен быть взят в необходимом и достаточном объеме с обеспечением условий, исключающих его контаминацию резидентной микрофлорой. Недостаточное количество материала может определять ложноотрицательный результат исследования. 4. Взятие биологического материала должно производиться строго до начала применения антибактериальных и химиотерапевтических препаратов или не ранее чем через 10-14 дней после их отмены. 5. Отобранный биологический материал должен быть промаркирован. В сопроводительном документе-направлении необходимо указать: пол, фамилию, имя, отчество, возраст пациента, предполагаемый диагноз или показания к обследованию, дату взятия пробы, какое учреждение направляет материал. При необходимости указывается и дополнительная информация – физиологическое состояние пациента, курение, прием алкоголя и т.д. 6. Контейнеры для транспортировки материала должны обеспечивать герметичность, стерильность, целостность образцов, а также – исключать при открытии образование аэрозоля. 7. Материал доставляется в лабораторию с учетом правил транспортировки для различных видов исследований и лицами, получившими специальный инструктаж. При направлении материала на исследование, прежде всего, необходимо исключить вероятность контаминации собранного биологического материала. В случае несоблюдения правил взятия и условий доставки биологического материала образцы не подлежат лабораторному исследованию и об этом сообщается врачу, направившему биологический материал на исследование. Подготовка обследуемых Взятие венозной крови производится натощак, в утренние часы. При взятии венозной крови необходимо учитывать ряд факторов которые могут повлиять на результат гематологических исследований: физическое перенапряжение (бег, быстрая ходьба, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение, прием пищи накануне исследования, купение, прием алкоголя и т.д. Для исключения этих факторов, следует соблюдать следующие условия подготовки пациентов: взятие венозной крови осуществляется после 15-минутного отдыха обследуемого; пациент во время взятия сидит, у тяжелых больных взятие крови может осуществляться лежа. курение, прием алкоголя и пищи непосредственно перед исследованием исключаются; Основной способ взятия венозной крови для лабораторного исследования – пунктирование вены. Венозную кровь, как правило, забирают из локтевой вены. В случае необходимости ее можно получить из любой вены (запястья, тыла ладони, над большим пальцем и т.д.). У новорожденных и грудных детей кровь обычно берется из лобной, височной или яремной вены. При взятии крови из вены необходимо избегать: мест шрамов, гематом; вен, используемых для переливания растворов; ножных вен (у больных диабетом, при нарушениях периферического кровотока, ангиопатиях). Оборудование Для венепункции можно использовать три варианта пункционных систем: одноразовые пластиковые системы (вакутейнеры), состоящие из контейнера с навинчивающейся на него одноразовой иглой и пробирки с плотно прилегающей пробкой и вакуумом внутри; одноразовые шприцы с подходящим диаметром иглы; иглы с внутренним диаметром 0,55-0,65 мм. Условия транспортировки венозной крови Правильно собранная венозная кровь должна быть своевременно доставлена в лабораторию. При комнатной температуре время доставки не должно превышать 60 мин после взятия крови. Если доставка крови в лабораторию осуществляется в течении дня, то она хранится при температуре +40С-+60С (в холодильнике) и далее в специальных транспортных контейнерах в ледяной бане доставляется в лабораторию. Во время транспортировки пробирки и контейнеры с кровью должны быть соответствующим образом защищены от вредного воздействия окружающей среды и погодных условий. При транспортировке венозной крови должны строго соблюдаться правила техники безопасности, асептики и антисептики. Пробирки должны быть промаркированы, упакованы и плотно закрыты. Упаковка должна быть удобной для транспортировки. Сроки хранения зависят от исследуемого показателя, температуры хранения и антикоагулянта, с помощью которого осуществляется взятие крови. Методика получения сыворотки крови (без использования разделительных или вспомогательных средств для центрифугирования) Оборудование 1. Центрифужные стеклянные пробирки общим объемом 10-12 мл. 2. Стеклянные палочки или Пастеровские пипетки с запаянными на конце капиллярами (для отделения сгустка). 3. Центрифуга лабораторная (до 3000 об/мин). Приготовление сыворотки Венозная кровь, полученная без антикоагулянтов в центрифужную стеклянную пробирку, отстаивается в ней при комнатной температуре (15-200С) в течение 30 минут до полного образования сгустка. По окончании образования сгустка пробирки открывают и осторожно проводят тонкой стеклянной палочкой или запаянным капилляром Пастеровской пипетки по внутренним стенкам пробирки по окружности в верхнем слое крови для отделения столбика сгустка от стенок пробирки. Сыворотку сливают в другую центрифужную пробирку, придерживая сгусток стеклянной палочкой, и центрифугируют, либо центрифугируют в тех же, первичных, пробирках. Центрифугирование После ретракции сгустка пробы центрифугируют при относительной центробежной силе RCF от 1000 до 1200 xg (максимально до 1500 xg) в течение 10 минут. В случае использования микропробирок и центрифуги для них центрифугирование проводят при 6000-15000 xg в течение 1,5 минут. После центрифугирования сыворотку сливают во вторичные (транспортные) пробирки. Сыворотка не должна быть гемолизированной. Плазма получается из крови путем отделения клеток крови. Она представляет собой бесклеточную надосадочную жидкость, которая получается при центрифугировании крови, свертываемость которой ингибирована добавлением антикоагулянтов тотчас после взятия. В плазме содержатся факторы свертывания крови. В связи с тем, что плазма и сыворотка содержат около 93% воды, в отличие от цельной крови, которая содержит около 81% воды, концентрация компонентов в плазме на 12% выше, чем в цельной крови. Это может иметь принципиальное диагностическое значение при исследовании активности, например ЛДГ у которого наиболее высокая концентрация наблюдается в сыворотке крови, чем в плазме. Широко применяются коммерческие системы для получения плазмы. Они представляют собой пробирки или устройства типа шприцев (“вакутейнер”) с вакуумом внутри, содержащие различные антикоагулянты и/или ингибиторы гликолиза. Как и в случае устройств для сыворотки, эти пробирки для плазмы имеют разные варианты, содержащие разделительные гели и гранулят из полистирола, ускоряющие получение плазмы, облегчающие транспортировку и хранение. В них уже имеются антикоагулянты и метки до которых следует набирать кровь. Методика получения плазмы Приготовление плазмы Венозную кровь, полученную с антикоагулянтом немедленно после взятия перемешивают переворачиванием пробирок с кровью, закрытых крышками, не менее 5 раз. Перемешивание должно осуществляться без встряхивания и пенообразования. Время между началом наложения жгута и смешиванием крови с антикоагулянтом не должно превышать 2 минут. После уравновешивания пробирок с кровью, их центрифугируют при RCF 10001200 xg, но не более 1500 xg, в течение 10-15 минут. Плазму немедленно сливают в транспортную центрифужную или химическую пробирку. Пробирку закрывают крышкой. Условия транспортировки плазмы крови Правильно полученная и собранная плазма крови должна быть своевременно доставлена в лабораторию. При комнатной температуре время доставки не должно превышать 24 часа. Если доставка плазмы в лабораторию осуществляется в течение дня, то она хранится при температуре +4...+80С (в холодильнике) и далее в специальных транспортных контейнерах в ледяной бане доставляется в лабораторию. Для более длительного хранения плазма может быть заморожена при температуре –200С. Правила транспортировки плазмы такие же как и венозной крови. Взятие, условия хранения и доставки материала из генитального тракта для проведения цитологического исследования на клеточный состав и атипические клетки Цитологическое исследование в настоящее время – признанный полноценный метод морфологическо-го анализа, основанный на изучении и оценке клеточного материала. Цитологическому исследованию подвергаются все женщины с выявленой патологией шейки матки, а при отсутствии таковой – цитологическому обследованию подлежат возрастные группы женщин старше 30 лет. Профилактический осмотр женщин с цитологическим исследованием должен проводиться не менее 1 раза в год. Материал для исследования Соскоб из цервикального канала и влагалищной части шейки матки, аспират или соскоб из заднего нижнего свода влагалища, соскобы с пораженных участков вульвы, наружного зева, аспираты из полости матки, пунктаты яичника или новообразований в стенке влагалища. Подготовка пациентки и взятие биологического материала В течении 24 часов перед исследованием не следует проводить спринцевание, а так же необходимо исключить применение интравагинальной терапии. Нельзя брать материал во время менструации. Для цитологических исследований взятие материала проводит врач-гинеколог. Для получения материала для исследования используют следующие инструменты: шпатель Эйра (предназначен для получения эктоцервикальных мазков и мазков заднего свода), спиретте (специальное аспирационное приспособление, предназначенное для экто- эндоцервикальной аспирации и проведения посткоитусных тестов), скринет (предназначен для взятия эндоцервикальных мазков), эндобраш (предназначен для взятия эндометриальных мазков), нейлоновые щеточки (Cervex-Brush), гинекологический пинцет, корнцанг, желобоватый зонд, ложечки Фолькмана, гинекологические зеркала и др. Все инструменты должны быть стерильными и сухими. Влагалищная часть шейки матки, наружный зев, цервикальный канал Для получения опптимальных результатов необходимо отдельно собирать эктоцервикальные и эндоцервикальные образцы. Взятие материала осуществляется до бимануального исследования. Шейку матки при помощи зеркал тщательно осматривают, затем без предварительной обработки слегка соскабливают поверхность патологически измененного участка или всей влагалищной части шейки вокруг наружного зева. Из полученного соскоба делают один тонкий равномерный мазок во всю длину предметного стекла. При взятии материала шпателем Эйра возможно получить материал одновременно с поверхности шейки матки, из зева и нижней трети цервикального канала. Шпатель Эйра имеет на одном конце неравные тупые кончики. Один, более длинный и узкий, вставляется в наружный зев цервикального канала, другой, более низкий и широкий, прилегает к поверхности шейки матки. Вращательными движениями при легком надавливании получают соскоб. Далее, этим же шпателем с полученным материалом делают тонкие мазки, получая на одном стекле сразу две полоски: в одной материал из нижней трети цервикального канала и наружного зева, в другой – с поверхности шейки матки. Далее мазки должны быть зафиксированы посредством высушивания на воздухе. Специальная конструкция для взятия эндоцервикальных мазков, скринет является обязательным дополнением к шпателю Эйра при проведении скрининга рака шейки матки. Скринет позволяет получить богатый клетками, хорошо сохраняющийся материал, что гарантирует улучшение качества получаемых мазков и показателей скрининга онкологической патологии. Будучи доступным в двух размерах, скринет может быть легко введен в любой цервикальный канал, в частности женщин постменопаузного периода. Скринет обеспечивает абсолютно безвредный доступ к зоне перехода эпителия влагалища в призматический эпителий цервикального канала, что особенно важно при ее высоком расположении. Для взятия биологического материала скринет плавно вводится в цервикальный канал. Далее, для получения мазка необходимо сделать только одно вращение (слишком большое количество оборотов может отрицательно сказаться на целостности клеток). После взятия биологического материала скринет, без совершения дополнительных вращательных движений, плавно выводится из шейки матки. Взятый биологический материал наносится на чистое обезжиренное стекло одним вращательным движением (по анологии с получением материала) и затем высушивается на воздухе. При взятии биологического материала с помощью спиретте возможно проведение экто- и эндо-цервикальной аспирации. После введения инструмента в шейку матки его дистальный конец подводится к месту, откуда необходимо взять образец ткани (эндо- или эктоцервикс). Аспирационный эффект достигается передвижением внутреннего поршня. После взятия образца биологического материала спиретте извлекается из шейки матки. Затем обратным движением поршня полученный образец биологического материала наносится на предметное стекло и фиксируется, высушиванием на воздухе. Кроме того, слущенные клетки можно получить с помощью мазков отпечатков со слизистой оболочки влагалища и шейки матки. В этом случае мазки готовят из соскобов шпателем, содержимое которых наносятся на предметное стекло в виде отпечатков. Материал отдельно из цервикального канала можно получить при помощи гинекологического пинцета, желобоватого зонда, ложечки Фолькмана и др. или путем аспирации содержимого цервикального канала. Взятие материала из цервикального канала проводят только после удаления цервикальной слизистой пробки. Исследуемый материал, нанесенный на сухое, обезжиренное предметное стекло должен быть обязательно высушен на воздухе. Подсушенное стекло (мазок) маркируется. К каждому стеклу должен прилагаться бланк-направление на цитологическое исследование, номер которого должен соосветствовать номеру (маркировке) мазка. В бланке указывается: учреждение, проводившее взятие биологического материала и дата его взятия; фамилия, имя, отчество обследуемой женщины; ее возраст, дата последней менструации, место взятия биологического материала, клинический диагноз; при отсутствии патологии необходимо указать, что шейка матки без изменений. Влагалище Взятие образцов проводится путем аспирации содержимого заднего свода или соскоба со слизистой оболочки. Аспирация содержимого из заднего свода должна проводиться под визуальным контролем при исследовании зеркалами, при этом необходимо использовать несмазанные зеркала и получать материал до пальцевого исследования. При осмотре с использованием влагалищных зеркал вводят свободный конец канюли до заднего свода, содержимое насасывают в канюлю резиновой грушей, аспират выдувают на сухое обезжиренное предметное стекло и делают тонкий мазок краем шлифованного стекла. Содержимое заднего свода представляет собой случайно накопленный пул из разных отделов генитального тракта, поэтому его исследование целесообразно проводить только как ориентировочное. При патологических находках необходимо тщательное исследование материала из отдельных мест. Материал из заднего свода может быть использован также для оценки микробиоценоза влагалища. Образцы материала из влагалища берут до манипуляций в шейке. Соскабливание проводится сверху вниз в передней, задней и боковых стенках влагалища. При наличии опухоли в стенке влагалища производят пункцию тонкой иглой. Эндометрий Использование эндобраш позволяет легко и безболезненно брать эндометриальные цитологические мазки при отсутствии необходимости тракции или расширения цервикального канала. Перед взятием мазков эндометрия необходимо исключить возможность наличия беременности, вагинита или цервицита. Все манипуляции на эндометрии могут проводиться только при условии полного излечения инфекций слизистой влагалища и шейки матки. При обследовании ряда женщин менопаузного периода, использование эндобраш может оказаться неоправданным, ввиду наличия стенотических изменений цервикального канала. После наложения зеркал и обработки шейки матки антисептическим раствором мандрен эндобраш вытягивается так, чтобы его щетка полностью исчезла внутри внешней части инструмента, а его колпачек, расположенный на дистальном конце закрыл дистальную часть внешнего контура эндоброш. Затем, инструмент плавно вводится в полость матки до тех пор, пока дистальный колпачек не достигнет дна матки (нанесенные на инструменте метки помогают определить размеры полости матки). Перед началом взятия мазков наружная часть инструмента смещается вниз, освобождая находящуюся внутри щетку. Далее делается одно или два вращательных движения мандреном вправо или влево для получения соскобов со стенок матки. После этого, наружная часть инструмента смещается в исходное положение для сохранения полученного биологического материала и эндобраш полностью извлекается из полости матки. Полученный материал наносится на предметное стекло и фиксируется на воздухе. Вульва С вульвы материал берут при подозрении на рак. Область поражения тщательно обрабатывают изотоническим раствором хлорида натрия или слабым дезинфицирующим раствором для удаления элементов воспаления и некротических масс. Промокают салфеткой и делают соскоб шпателем или каким-либо другим инструментом с несколько заостренными краями. БольницаОтделенияПациентамПресс-центрДокументы Рекомендации по забору, транспортировке, предобработке и хранению проб крови и ее компонентов Плазма крови Забор проб крови Проводить в любое время суток независимо от приема пищи, забор осуществлять из локтевой вены (объем не менее 2 мл). Взятие крови может осуществляться двумя способами: o одноразовой иглой (диаметр 0,8–1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл с последующим переносом крови в одноразовую пластиковую пробирку с антикоагулянтом; o в специальную пробирку для забора крови (вакуумные системы типа «Venoject», «Vacuett», содержащие ЭДТА). Пробирку с кровью закрыть крышкой, а затем плавно перевернуть не менее 5 раз для тщательного перемешивания. В качестве антикоагулянта рекомендуется использовать: o 6 % раствор ЭДТА в соотношении 1:20 или 10 % раствор трилона Б в соотношении 1:9; o 3,8 % раствор цитрата натрия в соотношении 1:9 или 0,5–1,0 мл 20 %-ного водного раствора цитрата натрия на 15–20 мл крови. Использование гепарина недопустимо, т.к. он ингибирует ПЦР! Все манипуляции с пробами необходимо осуществлять без пенообразования и встряхивания. Транспортировка и хранение проб крови Время от момента забора проб до их доставки в лабораторию должно составлять: o не более 6 часов при комнатной температуре (18,0–25,0 °C); o не более 24 часов при температуре 2,0–8,0 °C (при доставке проб в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Сроки транспортировки проб цельной крови и сроки их хранения совпадают при равных условиях. При транспортировке пробирки с образцами должны находиться строго в вертикальном положении. Замораживание проб цельной крови с антикоагулянтом недопустимо! Сыворотка крови Забор проб крови Проводить в любое время суток независимо от приема пищи, забор осуществлять из локтевой вены (объем 4–8 мл). Взятие крови может осуществляться двумя способами: o одноразовой иглой (диаметр 0,8–1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл с последующим переносом крови в одноразовую пластиковую пробирку безСантикоагулянта; o в специальную пробирку для забора крови (вакуумная система типа «Vacuett» без антикоагулянта). Транспортировка и хранение проб крови Время от момента забора проб до их доставки в лабораторию должно составлять: o не более 6 часов при комнатной температуре (18,0–25,0 °C); o не более 24 часов при температуре 2,0–8,0 °C (при доставке проб в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Сроки транспортировки проб цельной крови и сроки их хранения совпадают при равных условиях. При транспортировке пробирки с образцами должны находиться строго в вертикальном положении. Замораживание проб крови недопустимо! Рекомендации по забору, транспортировке, предобработке и хранению биопроб из урогенитального тракта женщин Рекомендации к забору биопроб: 1. Забор биоматериала осуществляется обычно из трех точек: o соскоб эпителиальных клеток из цервикального канала (на глубине 0,5–1,5 см); o соскоб эпителиальных клеток из уретры (на глубине 1,0–1,5 см); мазок с заднего свода влагалища. При необходимости возможно осуществлять забор материала из эрозивно-язвенных поражений. 2. Исследуемый материал должен содержать максимально возможное количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи, экссудата или примесей крови, которые могут сыграть роль ингибиторов ПЦР в случае их большой концентрации. 3. Забор биоматериала не проводится при наличии менструальных и обильных гнойных выделений, а также в случаях приема системных или местных антибактериальных или антисептических средств накануне обследования. 4. Материал из различных локализаций может быть помещен в одну пробирку для забора или одну пробирку с транспортной средой только в случае скрининговых исследований. при диагностике бактериального вагиноза и/или воспалительных заболеваний урогенитального тракта, а также в случае скрининговых исследований на наличие папилломавирусов материал с каждой локализации должен забираться в отдельную пробирку. 5. Забор биоматериала для ПЦР-анализа осуществляется одноразовыми стерильными уретральными/цервикальными зондами или одноразовыми стерильными полипропиленовыми зондами с синтетическим ворсом, отдельными для каждой локализации. Взятие пробы осуществляется при помощи аккуратных вращательных движений одноразового зонда. 6. По окончании забора материала рабочую часть зонда помещают в стерильную одноразовую пробирку, его рабочая часть отламывается или отрезается. Особенности забора, транспортировки, предобработки и хранения проб для ПЦР-анализа из урогенитального тракта женщин Забор клинического материала Соскоб эпителиальных клеток из уретры: наружное отверстие уретры обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором; провести массаж уретры о лобковое сочленение (пальцем со стороны влагалища); ввести зонд в уретру на глубину 1,0–1,5 см, аккуратными вращательными движениями произвести соскоб эпителиальных клеток, зонд вынуть и перенести в пробирку. У детей материал для исследования берут только с наружного отверстия уретры. Соскоб эпителиальных клеток из цервикального канала: при помощи тампона тщательно удалить слизистую пробку с поверхности, а затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором; ввести зонд в цервикальный канал на глубину 0,5–1,5 см, аккуратными вращательными движениями произвести соскоб эпителиальных клеток, зонд вынуть и перенести в пробирку. o При наличии эрозий цервикального канала: обработать их стерильным физиологическим раствором, забор материала осуществлять на границе здоровой и измененной ткани. При извлечении зонда полностью исключить его прикосновение к стенкам влагалища! Мазок с заднего свода влагалища: обильные выделения или избыток слизи удалить стерильным ватным тампоном; для забора материала несколько раз провести зондом по поверхности слизистой оболочки влагалища в области заднего свода или патологически измененных участков слизистой, затем зонд вынуть и перенести в пробирку. Взятие материала осуществляют до проведения мануального исследования. У девочек забор пробы осуществляется со слизистой оболочки преддверия влагалища (редко — из заднего свода через гименальные кольца). Применение антисептиков для обработки зеркала противопоказано! (можно смочить его горячей водой непосредственно перед манипуляцией). Транспортировка и хранение клинического материала Время от момента забора клинического материала до его доставки в лабораторию должно составлять: o не более 2 суток для охлажденных (температура 2,0–8,0 °C) и замороженных (температура минус 18–600 °C) проб (при доставке в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Хранение клинического материала: o при комнатной температуре (18,0–25,0 °C) — в течение 2 суток; o при температуре 2,0–8,0 °C — в течение 2 недель. Рекомендации по забору, транспортировке, предобработке и хранению биопроб из урогенитального тракта мужчин Рекомендации к забору биопроб: 1. Биоматериалами, пригодными для ПЦР-анализа, у мужчин являются: o соскоб эпителиальных клеток из уретры (на глубине 2–4 см); o секрет предстательной железы; o сперма. При необходимости возможно осуществлять забор материала из эрозивно-язвенных поражений. 2. Исследуемый материал должен содержать максимально возможное количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи, экссудата или примесей крови, которые могут сыграть роль ингибиторов ПЦР в случае их большой концентрации. 3. Забор биоматериала не проводится при наличии обильных гнойных выделений, а также в случаях приема системных или местных антибактериальных или антисептических средств накануне обследования. 4. Забор биоматериала из уретры осуществляется одноразовым стерильным уретральным зондом или одноразовым стерильным полипропиленовым зондом с синтетическим ворсом. Взятие пробы осуществляется при помощи аккуратных вращательных движений одноразового зонда. 5. По окончании забора материала рабочую часть зонда помещают в стерильную одноразовую пробирку, его рабочая часть отламывается или отрезается. 6. Перед взятием секрета предстательной железы рекомендуется половое воздержание в течение не менее двух дней. Забор секрета осуществляется после предварительного массажа предстательной железы через прямую кишку: массаж проводится с надавливанием несколькими энергичными движениями от основания к верхушке. Особенности забора, транспортировки и хранения проб для ПЦР-анализа из урогенитального тракта мужчин Забор клинического материала Соскоб эпителиальных клеток из уретры: головку полового члена в области наружного отверстия уретры обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором; ввести зонд в уретру на глубину 2–4 см, аккуратными вращательными движениями произвести соскоб эпителиальных клеток, зонд вынуть и перенести в пробирку. Перед взятием материала пациенту рекомендуют воздержаться от мочеиспускания в течение 2–3 часов;при наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15–20 минут после мочеиспускания. У детей материал для исследования берут только с наружного отверстия уретры. Секрет предстательной железы: перед забором секрета простаты головку полового члена обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором; по окончании предварительного массажа секрет простаты в количестве 0,5–1 мл следует собрать в одноразовую сухую стерильную пробирку типа Eppendorf. При невозможности получить секрет следует собрать первую порцию мочи в количестве 20–30 млсразу после массажа. Сперма: забор спермы осуществляют в стерильные одноразовые флаконы или пробирки. Транспортировка и хранение клинического материала Время от момента забора соскобов эпителиальных клеток из уретры до их доставки в лабораторию должно составлять: не более 2 суток для охлажденных (температура 2,0–8,0 °C) проб (при доставке в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Время от момента забора образцов секрета простаты и спермы до их доставки в лабораторию должно составлять: o не более 1 °Cуток для охлажденных (температура 2,0–8,0 °C) проб (при доставке в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Хранение соскобов эпителиальных клеток из уретры: o при комнатной температуре (18,0–25,0 °C) — в течение 2 суток; o при температуре 2,0–8,0 °C — в течение 2 недель. Хранение образцов секрета простаты и спермы: o при комнатной температуре (18,0–25,0 °C) — в течение 6 часов; o при температуре 2,0–8,0 °C — в течение 1 суток. o Рекомендации по забору, транспортировке, предобработке и хранению проб мочи Забор клинического материала Отобрать первую порцию мочи в количестве не менее 10 мл в сухой стерильный флакон или сухую стерильную пробирку. Мочу собирать утром после сна или не ранее чем через 2–3 часа после предыдущего мочеиспускания. Транспортировка и хранение клинического материала Время от момента забора клинического материала до его доставки в лабораторию должно составлять: o при комнатной температуре (18,0–25,0 °C) — в течение 6 часов; o при температуре 2,0–8,0 °C — в течение 1 суток (при доставке в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Сроки транспортировки проб мочи и сроки их хранения совпадают при равных условиях. До получения клеточного осадка пробирки с пробами нельзя замораживать! Рекомендации по забору, транспортировке и хранению проб спинномозговой жидкости (ликвора) Забор клинического материала Забор спинномозговой жидкости (ликвора) осуществляется врачом (в условиях лаборатории эта процедура не выполняется). Отобрать исходный материал количеством не менее 1 мл в одноразовую стерильную сухую пробирку типа Eppendorf. Транспортировка и хранение клинического материала Время от момента забора клинического материала до его доставки в лабораторию должно составлять: o не более 4 часов при комнатной температуре (18,0–25,0 °C); не более 1 суток для охлажденных (температура 2,0–8,0 °C) проб (при доставке в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Хранение проб спинномозговой жидкости: o при комнатной температуре (18,0–25,0 °C) — в течение 4 часов; o при температуре 2,0–8,0 °C — в течение 1 суток. o Рекомендации по забору, транспортировке и хранению проб слюны Забор клинического материала Перед забором материала провести трехкратное полоскание полости рта физиологическим раствором. Отобрать исходный материал количеством не менее 1 мл в одноразовую стерильную сухую пробирку типа Eppendorf. Транспортировка и хранение клинического материала Время от момента забора клинического материала до его доставки в лабораторию должно составлять: o не более 4 часов при комнатной температуре (18,0–25,0 °C); o не более 1 суток для охлажденных (температура 2,0–8,0 °C) проб (при доставке в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Хранение проб слюны: o при комнатной температуре (18,0–25,0 °C) — в течение 4 часов; o при температуре 2,0–8,0 °C — в течение 1 суток. Рекомендации по забору, транспортировке, предобработке и хранению биопроб из ротоглотки Забор клинического материала (мазок из ротоглотки) Забор биоматериала проводится натощак или не ранее чем через 2–4 часа после еды. Взятие мазка осуществлять с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки. Забор проводить вращательными движениями при помощи сухого стерильного одноразового аппликатора (ватных тампонов на пластиковой основе). По окончании процедуры извлечь аппликатор, не касаясь поверхности языка, а также слизистой щек и зубов, и поместить его в стерильную одноразовую пробирку и аккуратно обломить, после чего закрыть пробирку. Транспортировка и хранение клинического материала Время от момента забора клинического материала до его доставки в лабораторию должно составлять: o не более 2 суток для охлажденных (температура 2,0–8,0 °C) проб (при доставке в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Хранение клинического материала: o o при комнатной температуре (18,0–25,0 °C) — в течение 2 суток; при температуре 2,0–8,0 °C — в течение 2 недель. Рекомендации по забору, транспортировке и хранению биопсийного и аутопсийного материала Забор клинического материала Забор биоматериала проводить из зоны предполагаемой локализации инфекционного агента, из поврежденной ткани или из пограничного с повреждением участка. Кусочки ткани размером 10–25 мм3 (диаметром не более 5 мм) поместить в стерильную одноразовую пробирку. Транспортировка и хранение клинического материала Время от момента забора клинического материала до его доставки в лабораторию должно составлять: o не более 2 часов при комнатной температуре (18,0–25,0 °C); o не более 1 суток для охлажденных (температура 2,0–8,0 °C) проб (при доставке в лабораторию в специальных термоконтейнерах с хладогеном, термосах с термопакетами). Хранение клинического материала: o при комнатной температуре (18,0–25,0 °C) — в течение 2 часов; o при температуре 2,0–8,0 °C — в течение 1 суток. № 1. 2. 3. Вид исследования Исследования мочи Исследования кала Исследование на энтеробиоз Хранение при комнатно й температу ре Хранение при температуре + 2-8° С Транспортиров ка материала До 6-ти часов В термоконтейнер е без охлаждающих элементов До 6-ти часов В термоконтейнер е без охлаждающих элементов До 6-ти часов В термоконтейнер е без охлаждающих элементов 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10 . 11 . Спермограмма После забора, немедленно доставить контейнер с образцом в лабораторию Назоцитограмма В термоконтейнер е без охлаждающих элементов До 24-х часов ПЦР-исследования (моча) ПЦР-исследования (ликвор) ПЦР-исследования (слюна) ПЦР-исследования (буккальный соскоб) ПЦР-исследования (материал из ротоглотки) ПЦР-исследования (сперма) До 6 часов До 6-ти часов До 6-ти часов До 6-ти часов До 24-х часов В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До 24-х часов В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До 24-х часов В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До 3-х суток В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До 3-х суток В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До 24-х часов В термоконтейнер ес охлаждающими элементами 12 . 13 . 14 . ПЦР-исследования (секрет предстательной железы) ПЦР-исследования (у/г материал) Общеклинические исследования у/г материала: - кольпоцитология; - анализ мазка на микрофлору; - цитология До 6-ти часов До 48 часов До 24-х часов В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До 2-х недель В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До 24-х часов Пеналы с предметными стеклами транспортируют ся в термоконтейнер е без охлаждающих элементов До 72-х часов (3 дня) В термоконтейнер ес охлаждающими элементами 15 . ПАП-тест 16 . Бактериологические исследования: - биоматериал из зева; - биоматериал из носа; - биоматериал из глаза; - биоматериал из раны; - урогенитальный биоматериал До 48 часов В термоконтейнер е без охлаждающих элементов (в летнее время -с охлаждающими элементами) 17 . Посев на микоплазму/уреапла зму M DUO, IST До 5-ти часов В термоконтейнер ес До 7-ми суток До 48 часов охлаждающими элементами 18 . 19 . 20 . 21 . 22 . Бак. исследование грудного молока Бак. исследование кала на дисбактериоз Бак. исследование спермы Бак. исследование материала секрета предстательной железы Бак. исследование мочи с использованием вакуумной системы VACUETTE с консервантом «борная кислота» До 2-х часов В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До 2-х часов В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До 2-х часов В термоконтейнер ес охлаждающими элементами Нативный материал - до 5-ти часов Туба -- до 48-ми часов Нативный материал -- в термоконтейнер ес охлаждающими элементами. Туба -- в термоконтейнер е без охлаждающих элементов (в летнее время -с охлаждающими элементами) До 48-ми часов В термоконтейнер е без охлаждающих элементов (в летнее время -с охлаждающими элементами) 23 . 24 . Кровь-сыворотка (пробирки-гель) Кровь с ЭДТА, цитратом Na и LEклетки 30 мин. 30 мин. До транспортиров ки В термоконтейнер ес охлаждающими элементами До транспортиров ки В термоконтейнер ес охлаждающими элементами
