III Научно-техническая конференция с международным участием «НАУКА НАСТОЯЩЕГО И БУДУЩЕГО» 12-13 марта 2015 г. ФОРМИРОВАНИЕ МАТРИЦ НАНОПОРИСТЫХ МИКРОПЛОЩАДОК НА ОСНОВЕ АНОДНОГО ОКСИДА АЛЮМИНИЯ В КАЧЕСТВЕ СУБСТРАТОВ ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ Е. Е. Нестеров, Т. М. Зимина, М. Н. Серкова, С. А. Корлякова, Е. А. Севостьянов Санкт-Петербургский государственный электротехнический университет «ЛЭТИ» им. В.И. Ульянова (Ленина) (СПбГЭТУ «ЛЭТИ»)ё Цель работы Пример структуры с ростовыми порами Формирование пористых структур с заданной морфологией и топологией на основе анодного оксида алюминия (АОА) для создания ростовых платформ, интегрированных в лабораторию на чипе (ЛНЧ) для микробиологического анализа. Поперечное сечение сэндвич-структуры для анодирования алюминия с образованием ростовых площадок для микробиологического анализа Актуальность задачи Нанопористые биосреды являются быстро развивающейся областью нанотехнологии с большим потенциалом развития и дальнейшего применения в областях медицинской диагностики инфекционных заболеваний, что является очень актуальным направлением в связи с рядом существующих на сегодня проблем. В настоящее время из-за отсутствия информации об этиологии инфекционного процесса, в подавляющем большинстве случаев лечение является неэффективным или несвоевременным, что опасно для здоровья мн огих заболевших людей. Разработка диагностических средств нового поколения на основе АОА позволит решить многие из этих проблем. 1 – предметное стекло 28 х 75 мм, 2 – полимерная пленка с клеевым слоем, 3 – отверстие для подачи питательной среды, 4 – окно ростовой площадки, 5 – алюминиевая фольга. Постановка задачи При создании миниатюрных диагностических средств для микробиологического анализа одной из основных проблем является создание биосовместимых и пригодных для интегрирования сред с заданной морфологией для формирования ростовых платформ. Преспективным материалом, обладающим высокоаспектной пористой структурой и экономически обоснованным, представляется АОА. Для достижения цели данной работы необходимо решить следующие задачи: разработать технологию создания пористых структур АОА с заданными свойствами, интегрированных в аналитический чип в едином технологическом цикле; достич гомогенности пористой структуры, позволяющей оптическую регистрацию кластеров микроорганизмов, а так же прочности и надежности. Реакция анодирования В технологии производства интегральных схем и элементов для ЛНЧ широко используется метод анодирования, описываемый системой уравнений: А 𝐌𝐞 + 𝐇𝟐 𝐎 → 𝐌𝐞𝐱 𝐎𝐲 + 𝟐𝐇 + + 𝐞, в области анода e + 2 𝑯𝟐 𝑶 → 𝑯𝟐 ↑ + 2𝑶𝑯− (в области катода). Фотографии миниатюрных ростовых платформ. Размер ростовой зоны 1 мм. Толщина 100 мкм. Тип пленки определяется составом электролита и параметрами процесса анодирования. Электролит на основе 5% серной кислоты. (А) Схематическое изображение фрагмента АОА пористого типа На поверхности анода происходит окисление металла, а у катода – выделение восстановленного из воды водорода. К металлам, которые можно анодировать с образованием относительно толстой оксидной пленки, относятся AL, Ta, Nb, Ti, Zr. Эти оксиды проявляют асимметрию проводимости, т. е. обладают вентильными свойствами (образуются АОП с хорошими диэлектрическими свойствами: электрическое сопротивление ≥1014 Ом×м, электрическая прочность ≥108 В×м-1, ширина запрещенной зоны >3эВ). Огромные возможности открываются при оксидировании металлов в растворах электролитов, поскольку применение различных электролитов позволяет варьировать структуру и морфологию пленок и, как следствие, их свойства. В С Лабораториная установка для анодирования Установка содержит источник тока, амперметр, ванну для анодирования. Отличительной особенностью явлется анодирование ростовых площадок, встроенных в сэндвич-структуру, которая далее используется для анализа. В качестве катода использовали графитовый картон, встроенный в сэндвич-структуру, симметричную анодируемому изделию. Для преодоления краевых эффектов величины «апертуры» анода и катода равны. D Изображения фрагмента пористой структуры АОА . Размер пор 100 – 200 нм (В), 30-50нм (С). (D) – схема устройства ячейки для выращивания микроорганизмов АОА мембраны как класс самоорганизующихся материалов являются высоко упорядоченным и биосовместимым субстратом с регулярным размером пор, их равномерной плотностью, высокой пористостью и большой площадью поверхности. Эти важные свойства являются полезными для различных применений АОА мембран в биотехнологии и медицине, начиная от биофильтрации, опорных конструкций, биодатчиков, покрытий имплантов, системы доставки лекарств и каркасов для тканевой инженерии. В данной работе рассматривается использование АОА в микробиологической ЛНЧ в качестве субстрата для миниатюрной ростовой платформы. Это позволит радикально сократить время микробиологического анализа, повысить точность и, благодаря портативности, сделать его децентрализованным и доступным для широкой врачебной практики. Это внесет вклад в решение проблемы хронизации и носительства инфекций, сократит срок временной нетрудоспособности, инвалидизации и смертности населения из-за бактериальных инфекций, благодаря оперативной постановке диагноза и эффективного использования антибиотиков. Литература 1. Патент на изобретение № 2522005. Способ выращивания колоний микробных клеток и устройство для его осуществления. Заявл. 30.12.2011. Заявитель: Санкт-Петерб. гос. электротехн. ун-т. Авторы: Т.М. Зимина, А.В.Соловьев, В.В.Лучинин, Е.Н.Соколова, Л.А.Краева, Г.Я. Ценева, Н.И.Мухуров. 2. Ingham CJ, Sprenkels A, Bomer J, et al. The micro-Petri dish, a million-well growth chip for the culture and high-throughput screening of microorganisms / Proc Natl Acad Sci U S A. 2007. Vol. 104(46). P. 18217-22. 2. Т. М.Зимина, В. В. Лучинин, Е. Н. Муратова и др. Принципы создания гибридных миниатюрных приборов для выращивания колоний микробных клеток на основе пористого анодного оксида алюминия. / НМСТ. 2013. № 12. С. 19-33.