К вопросу объективности микробиологического исследования AG Medical Company Authorized representative of HiMedia Laboratories in Kazakhstan Консультативная группа «HiMedia Kazakhstan - AG Medical Company» tel: + 7 727 250-17-88; 250-14-88, Fax: + 7 727 250-10-21 e-mail: inform@himedia.kz; adviser@agmedcom.kz; web: www.himedia.kz Отбор, транспортировка, хранение, обработка материала Выбор питательных сред (с учетом их элективности и селективности) Изучение биологии микроорганизма (культуральный метод, идентификация изолята, постановка антибиотикограммы ) Уровень квалификации специалистов среднего звена Интерпретация результатов (в зависимости от цели исследования) Наличие квалификационной категории врача Отбор материала Клинический материал должен быть отобран в стерильную емкость, обеспечивающую сохранность и безопасность материала Отбор проб должен осуществляться стандартными тампонами, имеющими одинаковые гигроскопичность, плотность, размеры Транспортировка и хранение образцов При невозможности своевременной доставки материала лабораторию, следует воспользоваться транспортными средами (среды Стюарта, Амиеса, Кэри — Блера). Транспортная среда составляется таким образом, чтобы поддерживать жизнеспособность бактерий, не допуская их гибели и размножения Хранение сухих питательных сред, добавок к ним, реагентов и других ингредиентов, используемых в микробиологической лаборатории • Особенности по температуре хранения указаны на этикетке. Все остальные продукты хранят при температуре ниже 30О С. • Материалы следует хранить в сухом, хорошо проветриваемом месте без резких колебаний температуры, вдали от открытого огня • Нельзя допускать к реактивам посторонних лиц • Опасные вещества надо хранить отдельно • Периодически необходимо проводить ревизию и удалять со склада испорченные материалы • Нельзя допускать курения в местах, где хранятся огнеопасные реактивы • Необходимо осторожно обращаться с контейнерами, где могут быть остатки опасных веществ Хранение сред на этапе преаналитики (использовать предпочтительно только свежеприготовленные среды) • Чашки с агаровыми средами следует хранить при +2…8ОС. Жидкие среды в пробирках и флаконах также желательно закрывать герметично. Испарение влаги можно привести к кристаллизации некоторых компонентов среды. • В случаях, если среда не использована в день приготовления, ее, необходимо хранить в плотно закрытом контейнере (готовые жидкие среды не следует хранить в течение длительного времени; агаровые среды не должны подвергаться длительному воздействию высоких температур (4050О С). • Питательные среды с такими лабильными веществами, как бета-лактамные антибиотики, во избежание потери активности последних, необходимо использовать в течение нескольких дней после приготовления. • Не рекомендуется хранить среды при отрицательных температурах, так как при этом нарушается структура геля. • Перед посевом чашки тщательно проверяют на отсутствие контаминации, неровностей агаровой поверхности, пузырьков, изменений цвета, гемолиза и разрывов, усыхания среды. Пробирки и чашки с такими дефектами бракуются По ассортименту выпускаемых питательных сред компания Himedia Laboratories Pvt Ltd не имеет аналогов в мире. Общее количество выпускаемых сред составляет около полутора тысяч. К отдельным средам выпускаются стерильные, готовые к применению, добавки. Селективные, содержащие антибиотики, добавки, так и добавки с необходимыми для роста бактерий компонентами (сыворотка крови, витамины, факторы крови, некоторые соли типа пирувата, сукцината и т.д.). Всего выпускается около 200 различных добавок. Сухие питательные среды: представлены в виде порошка; высоко гигроскопичны; каждая питательная среда сопровождается специальной инструкцией по приготовлению и применению; компания AGMedical обеспечивает консультативную помощь специалистам практической лабораторной службы Качество лабораторных исследований Методологическая точность выполнения манипуляций Качество используемых материалов Грамотная оценка результатов Разнообразие ассортимента продукции HiMedia (охватывает различные области применения микробиологических исследований, включая): • • • • • • • медицинскую и санитарную микробиологию, вирусологию, микологию, паразитологию, прикладную фармакологию, биотехнологию, пищевую и парфюмерную промышленности. Продукция HiMedia это: • Диагностические и культуральные питательные среды • Системы для выделения гемокультур • Системы для определения антибиотикочувствительности • Оборудование и материалы для бактериологических лабораторий • Тест-системы для быстрой идентификации микроорганизмов • Расходные материалы (красители, посуда, пробоотборники, инструментарий и пр.) Техническое оснащение лаборатории предполагает наличие: Для анаэробного культивирования имеются 2 типа удобных в работе анаэростатов, рассчитанных на 1012 чашек Петри, предназначенных как для работы с газогенераторными пакетами, так и для внешнего источника газовой смеси. Для отбора и анализа проб воздуха предназначен прибор HiAir Petri, рассчитанный на чашки диаметром 90 и 100 мм. LE001 Система для анаэробного культивирован ия HiAnaerobicTM System-10 Клинический материал Aside Blood Agar Base M 158 Основа агара для дерматофитов с селективной добавкой * Хлортетрациклин * Гентамицин * Амфотерицин В Среды выделения и идентификации, использованные каф. микробиологии АГИУВ SS- Agar М 108 Bismuth Sulphite Agar M 027, Endo Agar M 029R Columbia Blood Agar Base M144газорегенерат орными пакетами AnaeroGasPack (HiMedia Диски и полоски для идентификации микроорганизмов Для дифференциации микроорганизмов удобны диски и полоски с оптохином, бацитрацином, эскулином и желчью, X и V факторами, реагентом Ковача, углеводами (более 40 наименований), диски для определения оксидазной и галактозидазной активности, продукции сероводорода. Оксидазные диски позволяют осуществить дифференциацию представителей родов: • Neisseria, • Alcaligenes, • Aeromonas, • Vibrio, • Campylobacter, • Pseudomonas( обладающих оксидазной активностью) от энтеробактерий (оксидазноотрицательных) Диски пропитаны оксалатом N,N-диметил –р-парафенилендиамином, аскорбиновой кислотой и альфа-нафтолом.ɑɑ Учет результата: в результате окислительно-восстановительных реакций с участием микробной оксидазы образуется индофенол вещество синего цвета. Штаммы микроорганизмов (АТСС) Реакция результат Цвет Pseudomonas aeruginosa (27853) + Темно-лиловый, синий Escherichia coli (25922) - - Staphylococcus aureus (25923) - - Neisseria gonorrhoeae (19424) + Темно-лиловый, синий Полоски с рективом Ковача (на индол) • Реагент представляет собой полоски из фильтровальной бумаги, пропитанные реактивом Ковача (10г парадиметил-аминобензальдегида в 150мл изоамилового спирта с+ 50 мл концентрированной соляной кислоты). • При ферментации микроорганизмами триптофана образуется индол. При взаимодействии с бензальдегидом образуется окрашенные в красный цвет соединения «розиндолы» . Штаммы микроорганизмов (АТСС) Рост Индол Escherichia coli (25922) обильный + Enterobacter aerogenes (13048) обильный - Полоски с ацетатом свинца(образование сероводорода) Реактив представляет собой полоски фильтровальной бумаги, пропитанные ацетатом свинца. Некоторые микроорганизмы способны ферментативным путем освобождать серу из серосодержащих соединений аминокислот или неорганических веществ. Образующийся сероводород вступает в реакцию с ацетатом свинца с образованием сульфита свинца и, соответственно, наблюдается почернение индикаторной полоски. Штаммы микроорганизмов (АТСС) Рост Сероводород Escherichia coli (25922) обильный - Salmonella серовар Typhimurium (14028) обильный + Salmonella серовар Enteritidis (13076) обильный + Диски с углеводами • Используются для дифференциации микроорганизмов по их способности ферментировать различные углеводы • Микроорганизмы выращивают в питательной среде с соответствующим диском и индикатором Андраде, который под действием кислых продуктов расщепления углевода изменяет первоначальный соломенножелтый цвет на красный • Оценка: ферментация микроорганизмами специфического углевода приводит к образованию кислоты или кислоты и газа. БЛАГОДАРИМ ЗА ВНИМАНИЕ! AG MEDICAL COMPANY Представительство HiMedia Laboratories в Казахстане Al-Farabi Ave. 16V/16, 050051 Almaty,Republic of Kazakhstan Tel: +7-727-250-14-88, Fax: +7-727-250-10-21 E-mail: inform@himedia.kz www.himedia.kz