Бердникова Вероника Александровна «Половые различия в
реклама
На правах рукописи Бердникова Вероника Александровна ПОЛОВЫЕ РАЗЛИЧИЯ В УСТОЙЧИВОСТИ К РАЗВИТИЮ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИИ У КРЫС И ИХ МЕХАНИЗМЫ 03.00.13 - физиология Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Астрахань - 2009 Работа выполнена на кафедре физиологии человека и животных Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского». Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Анищенко Татьяна Григорьевна Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Никулина Дина Максимовна доктор биологических наук, профессор Егоров Михаил Алексеевич ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет имени В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» Ведущая организация: Защита состоится « 12 » февраля 2010 г. в 12-00 часов на заседании диссертационного совета ДМ 212.009.01 при Астраханском государственном университете по адресу: 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, 1. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного университета по адресу: 414000, Астрахань, пл. Шаумяна, 1. Автореферат размещен на сайте университета www.aspu.ru Автореферат разослан « 2009 г. » Учёный секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук Ю.В. Нестеров 2 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Эпидемиологические данные свидетельствуют о том, что мужчины по сравнению с женщинами обладают повышенной склонностью к так называемым «болезням цивилизации», среди которых лидируют сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) (Reckelhoff J., 2001; Оганов Р.Г., 2002; Харченко В.И. и др., 2005). Одним из наиболее распространенных заболеваний сердечно-сосудистой системы (ССС) является артериальная гипертония (АГ), которая выступает в качестве самостоятельного заболевания и серьезного фактора риска при различных формах сердечно-сосудистой патологии (Шальнова С.А. и др., 2001; Беленков Ю.Б., Мареев В.Ю., 2002; Оганов Р.Г. 2002, 2003; Суслина З.А. и др., 2005; ВНОК, 2008). Несмотря на многочисленные исследования, посвященные этой теме, остается неясным, какие именно механизмы ответственны за повышенную устойчивость женского организма по сравнению мужским к развитию ССЗ, в том числе гипертонии. Одним из возможных механизмов, обеспечивающих половые различия в устойчивости к развитию кардиоваскулярной патологии, может быть различная степень выраженности холинергических влияний на ССС в мужском и женском организме. Известно, что умеренное преобладание холинергических влияний на ССС оказывает кардиопротекторный эффект при экспериментальном инфаркте миокарда (Myers R. at al., 1974; Vanoli E. et al., 1991), в то время как снижение парасимпатических влияний на ССС рассматривается как плохой прогностический признак при ССЗ (Bigger J. et al., 1995; Kannankeril P., Goldberger J., 2002; Chicos A. et al., 2009). Немногочисленные литературные данные свидетельствуют о том, что у самок крыс, по сравнению с самцами, преобладают вагусные влияния на сердечный ритм (Du X. et al., 1994). При этом, более выраженное у женских особей содержание ацетилхолина и активность холинацетилтрансферазы в мозге (Loy R. et al., 1987; Акмаева И.Г., Фиделина О.В., 1996), а также повышенная плотность мускариновых рецепторов в нервной ткани (McEwen B., Persons B., 1982; Egozi Y., Koog Y., 1985; Kaufman H. et al., 1988), сочетаются с повышенными функциональными резервами холинергической системы (Huikuri H. et al., 1996; Анищенко Т.Г. и др., 1992а; Семячкина-Глушковская О.В. и др., 2008). Кроме того, в исследованиях последних лет показано, что эстрогены через α-эстрогеновые рецепторы оказывают прямое стимулирующее влияние на функционирование холинергических нейронов (Bora S. et al., 2005). Данные о холинергических влияниях на кардиоваскулярную систему в условиях развития гипертонической болезни немногочисленны. В работе DiBona G. (2004) в качестве одной из причин в формировании ССЗ, включая гипертонию, называют дисбаланс в работе вегетативных механизмов в регуляции кардиоваскулярной активности. Известно, что развитие гипертонии сопровождается активацией симпатической системы (Somers V. et al., 1993; Chandler M., Dicarlo S., 1998; Маркель А.Л. и др., 2006), при этом повышение симпатической активности сопровождается нарушением адекватной реакции со стороны парасимпатической нервной системы, что приводит к дисбалансу автономной регуляции (Javorka K., 2001). Клинические исследования показали, что у гипертензивных пациентов при введении 3 ацетилхолина наблюдается меньший сосудорасширяющий эффект по сравнению с контрольной нормотензивной группой пациентов (Panza J., 1997). Эксперименты на спонтанно-гипертензивных крысах свидетельствуют о снижении парасимпатического тонуса по сравнению с нормотензивными особями (Chandler M., DiCarlo S., 1998). Таким образом, снижение чувствительности ССС к холинергическим влияниям может играть ведущую роль в развитии гипертонии. Как известно, устойчивость женщин к развитию ССЗ, включая гипертонию, проявляется только в репродуктивный период, в основном за счет протективного действия эстрогенов, в том числе и через вегетативный уровень регуляции (Collins P., 1996; Sevre K. et al., 2001; Ouyang P. et. al., 2006; Кобрин В.И., Порман Е.Е., 2001; Сметник В.П., 2002; Шляхто Е.В. и др., 2003). Данные о влиянии мужских половых гормонов на кардиоваскулярную систему немногочисленны и противоречивы. Установлено, что тестостерон может способствовать развитию гипертонии (Chen Y., Meng Q., 1991; Lewandowski J., Pruszczyk P., 1996). Однако, показано, что концентрация тестостерона в крови ниже у гипертензивных мужчин (Phillips G. et al., 1993; Liu P. et al., 2003). В работе Иванова Н.В. и др. (2004) было выявлено снижение андрогенпродуцирующей функции тестикул и коры надпочечников в группе обследуемых мужчин с нелеченной АГ. Эти факты подтверждают возможную защитную роль мужских половых гормонов. Влияние андрогенов на холинергическую регуляцию в условиях развития гипертонии изучено крайне недостаточно. Вышеизложенное определило цели и задачи наших исследований. Целью исследования явилось изучение половых особенностей в развитии экспериментальной гипертонии и механизмов, лежащих в их основе, в частности, влияния половых гормонов и холинергического отдела вегетативной нервной системы. Задачи исследования: 1. Исследовать половые особенности в развитии экспериментальной гипертонии у крыс. 2. Определить роль половых гормонов в обеспечении различий в устойчивости к развитию гипертонии у самок и самцов крыс. 3. Оценить влияние неонатальной андрогенизации самок крыс на гемодинамические показатели взрослых самок в норме и в условиях развития гипертонии. 4. Изучить половые особенности реакций ССС на эмоционально-болевой стресс (ЭБС) у белых крыс в норме и в условиях развития гипертонии. 5. Исследовать влияние гонадэктомии на кардиоваскулярную стресс-реактивность у нормотензивных и гипертензивных животных обоего пола. 6. Изучить половые особенности чувствительности ССС к усилению и блокаде холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных крыс в условиях покоя и стресса. 7. Оценить влияние дефицита половых гормонов на кардиоваскулярную чувствительность к модуляции холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных самок и самцов крыс в условиях покоя и стресса. Научная новизна. Получены новые данные о повышенной устойчивости самок белых крыс по сравнению с самцами к развитию экспериментальной почечной гипертонии. Впервые проведены систематические исследования роли половых гормонов в механизмах, обеспечивающих устойчивость к развитию гипертонической 4 болезни. Показано, что эстрогены оказывают защитный эффект при развитии гипертонии, вызванной нарушением почечного кровоснабжения. Новыми являются данные о более выраженных у самок холинергических влияниях на ССС не только в условиях нормы, но и при развитии гипертонии. Установлено положительное влияние половых гормонов на холинергические механизмы регуляции ССС, которое проявляется при различных физиологических состояниях организма (нормы, стресса, гипертонии). Новыми являются данные о программирующем влиянии андрогенов на устойчивость к развитию гипертонии. Во взрослом организме выявлен «прогипертензивный» эффект андрогенов, который активно проявляется на фоне развития гипертонии и не выявляется у нормотензивных самцов. Таким образом, убедительно показано, что эффекты андрогенов, в отличие от эстрогенов, зависят от физиологического состояния организма. Оригинальными являются данные о более благоприятной стрессорной динамике гемодинамических показателей у самок по сравнению с самцами, что особенно резко проявляется при развитии гипертонии. Таким образом, в работе выявлена взаимосвязь между половыми различиями в устойчивости к гипертонии, половыми гормонами, холинергическими механизмами регуляции ССС и кардиоваскулярной стресс-реактивностью. Научно-практическая значимость работы. Результаты опытов, проведенных на белых крысах, позволили выявить общебиологический характер феномена половых различий в устойчивости к ССЗ, характерных для человека, и приблизиться к решению важной в медицинском и социальном плане проблемы полового диморфизма в устойчивости, выживании и продолжительности жизни. Результаты исследования проливают свет на механизмы, обеспечивающие повышенную устойчивость женского организма по сравнению с мужским к развитию гипертонической болезни. Данные о положительном влиянии женских половых гормонов на устойчивость к гипертонии имеют важное теоретическое и практическое значение. Действительно, преимущества женского пола сохраняются лишь до наступления менопаузы, что ставит вопрос о целесообразности эстрогеновой заместительной терапии в этом возрасте. Полученные результаты о влиянии эстрогенов на ССС через вегетативный уровень открывают возможность использования для постменопаузальных женщин не только эстрогеновой терапии, но и воздействие на холинергические механизмы регуляции ССС, осуществляемое, в частности, через подавление активности симпато-адреналовой системы. Результаты опытов показывают, что относительное усиление холинергических влияний на ССС может быть полезно и для особей мужского пола, поскольку будет способствовать ограничению сосудистых и кардиальных эффектов стресса, которые усиливаются под влиянием андрогенов. Результаты наших наблюдений указывают на возможность снижения риска развития гипертонии и её прогрессирования путем ограничения интенсивности стрессорных реакций, что предполагает разработку комплексных мероприятий, включающих медикаментозные и психотерапевтические подходы. В целом наши результаты свидетельствуют о важной роли полового фактора в устойчивости к развитию ССЗ и в механизмах, её обеспечивающих, что делает 5 необходимым дифференцированный подход к женщинам и мужчинам при профилактике, диагностике и лечении заболеваний ССС. Положения, выносимые на защиту 1. Женские особи по сравнению с мужскими более устойчивы к развитию экспериментальной почечной гипертонии, что в значительной мере обусловлено более существенным у них вкладом холинергических механизмов в регуляцию активности ССС в условиях покоя, стресса, нормы и патологии. 2. Половые гормоны играют важную роль в обеспечении половых различий в устойчивости к гипертонии. «Антигипертензивные» эффекты эстрогенов связаны с усилением холинергических влияний на ССС в покое, при стрессе (нормотензивные самки), в покое (гипертензивные самки). «Прогипертензивные» эффекты андрогенов определяются их программирующим действием в период половой дифференцировки мозга и потенцирующими влияниями при развитии гипертонии, частично опосредованными через усиление сосудистых и кардиальных эффектов стресса. 3. Половые различия в кардиоваскулярной стресс-реактивности играют существенную роль в обеспечении половых различий в устойчивости к гипертонии. У нормотензивных и еще в большей степени у гипертензивных самцов стрессорная динамика гемодинамических показателей менее благоприятна, чем у самок, с точки зрения устойчивости к развитию сердечно-сосудистой патологии, что повышает риск ее возникновения и прогрессирования у самцов по сравнению с самками. Апробация работы. Основные результаты исследования были представлены на V Международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2006 г.), 17-ом Европейском конгрессе по гипертонии «17th European Meeting on Hypertension» (Италия, Милан, 2007 г.), VI Международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2008 г.), 19-ом Европейском конгрессе по гипертонии «19th European Meeting on Hypertension» (Италия, Милан, 2009 г.), научных конференциях студентов и молодых ученых биологического факультета СГУ им. Н.Г. Чернышевского (Саратов, 2005 г., 2006 г., 2009 г.). Публикации. По теме диссертации опубликовано 39 работ, 5 из которых в изданиях перечня ВАК РФ. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 176 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, четырех глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы, включающего 79 отечественных и 273 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 55 рисунками и 7 таблицами. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Эксперименты выполнены на интактных (120 нормотензивных и 96 гипертензивных) и гонадэктомированных (96 нормотензивных и 96 гипертензивных) самках и самцах белых крыс массой 200-300 г. Опыты по 6 изучению влияния неонатальной андрогенизации на гемодинамические параметры взрослых самок в норме и в условиях развития гипертонии были проведены на интактных (10 нормотензивных и 10 гипертензивных) и неонатально андрогенизированных (8 нормотензивных и 8 гипертензивных) беспородных самках массой 200-250 г. Животных содержали в виварии кафедры физиологии человека и животных Саратовского государственного университета в контролируемых условиях. Манипуляции с экспериментальными животными выполнялись в соответствии с положениями Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным, методическими рекомендациями по их выведению из опыта и эвтаназии (Guiding principles for research…, 2002). Исследования по выявлению роли половых гормонов проводились на гонадэктомированных животных. За 10 дней до начала исследования выполняли удаление половых желез у самок и самцов (Киршенблат Я.Д., 1969). Почечную гипертонию вызывали методом Голдблета (Goldblatt H. et al., 1934) в нашей модификации (Семячкина-Глушковская О.В., Анищенко Т.Г., 2007), накладывая клипсу на артерию левой почки. Животных брали в эксперимент спустя 7 недель после наложения клипсы, когда уровень артериального давления (АД) достигал гипертензивных значений. Неонатальная андрогенизация беспородных самок проводилась в течение суток после рождения путем подкожного введения 1 мг препарата «Сустанон-250». Животных брали в эксперимент по истечению 3 месяцев после введения препарата. Контролем для всех групп крыс служили животные, подвергнутые лапаротомии. Для регистрации сигналов кровяного давления и введения препаратов за день до эксперимента животным были имплантированы полиэтиленовые катетеры в аорту и в верхнюю полую вену под общим наркозом (Мурашев А.Н. и др., 1992). Все хирургические манипуляции осуществляли под нембуталовой анестезией (Sigma, 40мг/кг, ip). Непрерывная регистрация кровяного давления осуществлялась с помощью совместимого с компьютером многоканального измерительно-вычислительного комплекса PoweLab/400 ML-401 и программного обеспечения Chart 4 (ADInstruments Ltd, Австралия). Через 24 часа после операции по имплантации катетеров у бодрствующих крыс измеряли фоновые уровни ср.АД и ЧСС в течение 30 мин (после 30 мин адаптации). Крысы подвергались следующим воздействиям: 1) введению фармакологического препарата, усиливающего или блокирующего холинергические влияния; 2) ЭБС в течение 60 мин без фармакологических воздействий; 3) ЭБС в течение 60 мин на фоне усиления или блокады парасимпатического отдела вегетативной нервной системы. Для усиления и блокады холинергических влияний использовали ацетилхолин хлорид (Pharma, Czechia, 0,3мкг/100г веса) и атропин сульфат (Воронеж, Россия, 0,2мг/100г веса), соответственно. Фармакологические препараты вводили болюсным методом через венозный катетер. Статистическая обработка экспериментальных данных осуществлялась с помощью программы Statistica for Windows 5.0. Для сравнения внутри группы относительно исходного состояния применялся тест Wilcoxon, для межгрупповых сравнений использовали тест Mann-Whitney и ANOVA-2 с постхоковым анализом 7 ранговым тестом Duncan. Различия считались достоверными при p<0,05. Данные представлены как среднее±стандартная ошибка среднего. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 3.1 Половые различия в развитии экспериментальной гипертонии у белых крыс Результаты исследований показали, что у беспородных самок и самцов белых крыс во всех опытах базальные уровни ср.АД и ЧСС отличались незначительно. Через 7 недель ишемия почки привела к развитию гипертензии, более выраженной у самцов, чем у самок (рис. 1). Наложение клипсы на левую почечную артерию сопровождалось атрофическими изменениями в ренальной ткани, причем более выраженными у гипертензивных самцов по сравнению с гипертензивными самками (p<0,05). Таким образом, наши результаты свидетельствуют о пониженной устойчивости самцов по сравнению с самками к развитию экспериментальной гипертензии. 3.2 Роль женских и мужских половых гормонов в устойчивости к развитию экспериментальной гипертонии 3.2.1 Влияние гонадэктомии на показатели артериального давления у нормотензивных и гипертензивных самок и самцов крыс Дефицит половых гормонов сопровождался увеличением базальных значений ср.АД у самок, но не у самцов. Развитие гипертонии сопровождалось значительным повышением ср. АД у овариэктомированных самок по сравнению с гипертензивными интактными самками. У самцов удаление гонад на фоне развития гипертонии привело к менее значительному увеличению ср.АД по сравнению с гипертензивными интактными самцами (рис. 1). Проведенные эксперименты позволяют заключить, что в условиях патологии эстрогены оказывают защитное влияние на кардиоваскулярную систему, тем самым, повышая устойчивость женских особей к развитию гипертонии, в то время как андрогены в условиях развития гипертонии играют роль фактора, усугубляющего тяжесть этого заболевания. Рис. 1 Показатели ср.АД у нормотензивных и гипертензивных самок и самцов до и после удаления гонад (по данным опыта №1) Примечание: p<0,05 относительно: ∆ – самцов, † - интактных особей; - самки, - самцы 8 3.2.2 Влияние неонатальной андрогенизации на гемодинамические параметры взрослых самок в норме и в условиях развития гипертонии Одноразовое подкожное введение новорожденным самкам тестостерона сопровождалось изменениями в развитии половой системы у взрослых самок. При этом неонатальная андрогенизация самок приводила в половозрелом состоянии к увеличению базальных уровней ср.АД по сравнению с интактными самками. Через 7 недель после наложения клипсы у андрогенизированных взрослых самок наблюдалось развитие гипертонии, причем уровни ср.АД повышались до таковых у гипертензивных самцов. Значения ЧСС как у нормотензивных самок с маскулинизированным мозгом, так и на фоне развития гипертонии не отличались от таковых у интактных самок и самцов. Таким образом, данные исследования позволяют сделать вывод, что половые различия в развитии гипертонии могут детерминироваться процессами половой дифференцировки мозга в эмбриогенезе и на ранних этапах неонатального развития. Мужские половые гормоны, оказывая программирующие влияние в раннем возрасте, могут способствовать более значительному увеличению АД в условиях развития гипертонии у взрослых самцов по сравнению с самками. 3.3 Роль половых гормонов в холинергической регуляции сердечнососудистой системы у нормотензивных и гипертензивных крыс в условиях покоя 3.3.1 Половые особенности чувствительности сердечно-сосудистой системы к усилению холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных крыс У нормотензивных животных усиление холинергических влияний с помощью введения ацетилхолина сопровождалось кратковременной брадикардией и гипотензией, более выраженными у самок, чем у самцов (61% против 27%, р<0,05, для ЧСС и 74% против 40%, р<0,05, для ср.АД, соответственно). При этом, процесс восстановления исходного уровня ЧСС у самок был более длительным, чем у самцов. Однако, нормализация ср.АД у самок, как и у самцов, заканчивалась к 5 мин наблюдения, что свидетельствует об эффективной работе компенсаторных механизмов в мужском и особенно в женском организме. У гипертензивных крыс при отсутствии существенных изменений в кардиальной чувствительности к ацетилхолину, значительно понижалась сосудистая реактивность к ацетилхолину, причем, в большей степени у самцов, чем у самок. В первую минуту действия ацетилхолина величина ср.АД уменьшалась у самок на 27% (р<0,05), а у самцов лишь на 9% (р<0,05), то есть, по сравнению с нормотензивными животными, амплитуда гипотензивных реакций на ацетилхолин была снижена при гипертензии у самок в 2,7, а у самцов в 4,4 раза (р<0,05). Таким образом, более эффективная холинергическая регуляция кардиоваскулярной системы у самок по сравнению с самцами в условиях нормы и патологии может повышать устойчивость женского организма к развитию гипертонии. 3.3.2 Влияние гонадэктомии на чувствительность сердечно-сосудистой системы к усилению холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных самок и самцов У овариэктомированных самок введение ацетилхолина сопровождалось менее значительной брадикардией и гипотензией, чем у интактных самок. Так, на первой 9 минуте воздействия препарата амплитуда снижения ЧСС у гонадэктомированных самок составила 23%, что в 2,6 раза меньше по сравнению с интактными самками (p<0,05). Сосудистые реакции на ацетилхолин у гонадэктомированных самок были намного меньше по сравнению с интактными самками (24% против 74%, p<0,05). В отличие от самок, у самцов кастрация не привела к каким-либо изменениям кардиальной и васкулярной чувствительности к ацетилхолину. Гонадэктомия приводила к инверсии обычных половых различий в сосудистой чувствительности к ацетилхолину и устраняла половые различия в кардиальной чувствительности. Опыты с гонадэктомией позволяют сделать вывод о том, что эстрогены, но не андрогены, влияют на холинергические механизмы, усиливая их действие на кардиоваскулярную систему. Дефицит эстрогенов на фоне развития гипертонии сопровождался снижением чувствительности к ацетилхолину. На первой минуте воздействия препарата у овариэктомированных самок наблюдалось уменьшение ЧСС и ср.АД на 29% (р<0,05) и 17% (р<0,05) соответственно, что было в 2,1 раза (р<0,05) и 1,6 раза (р<0,05) меньше, чем у интактных самок. В отличие от интактных самцов, у гипертензивных самцов кастрация значительно усилила брадикардию и вазодилатацию в ответ на введение ацетилхолина. У кастрированных самцов усиление холинергических влияний сопровождалось снижением ЧСС в 1,8 раза (р<0,05) и ср.АД в 3,4 раза (р<0,05) по сравнению с интактными самцами. Гонадэктомия на фоне развития гипертонии приводила к инверсии половых различий в чувствительности ССС по показаниям ЧСС и ср.АД к стимуляции парасимпатической системы, наблюдаемых у интактных животных. Гонадэктомия привела к более значительной брадикардии и гипотензии у гипертензивных самцов по сравнению с гипертензивными самками (46% против 29%, р<0,05 для ЧСС и 31% против 17%, р<0,05 для ср.АД). Таким образом, эстрогены в естественных условиях усиливают чувствительность к холинергическим влияниям не только в условиях нормы, но и при развитии гипертонии. В отличие от эстрогенов, андрогены в естественных условиях уменьшают кардиоваскулярную чувствительность к стимуляции холинергических влияний при развитии гипертонии, что может значительно снижать устойчивость мужских особей к формированию патологии. 3.3.3 Половые особенности чувствительности сердечно-сосудистой системы к блокаде холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных крыс У нормотензивных животных блокада холинергической системы атропином сопровождалась длительной тахикардией без существенных изменений в уровне ср.АД. Амплитуда увеличения ЧСС была достоверно выше у самок, чем у самцов (2329% против 15-17%, р<0,05). Несмотря на более выраженную тахикардию у самок по сравнению с самцами, нормализация сердечного ритма в женском организме происходила быстрее, чем в мужском. У гипертензивных животных наблюдалось снижение кардиальной чувствительности к атропину, примерно одинаковое у самок и самцов. Положительные хронотропные эффекты атропина на протяжении 60 мин наблюдения составили у 10 гипертензивных самок 19-21% (р<0,05), у гипертензивных самцов - 9-10% (р<0,05). Как и у нормотензивных животных, в условиях гипертензии процессы нормализации ЧСС протекали быстрее у самок, чем у самцов. У гипертензивных крыс в отличие от нормотензивных, наблюдались длительные гипотензивные реакции. Введение атропина сопровождалось у самок тенденцией к длительной гипотензии на протяжении 80 мин наблюдения. У гипертензивных самцов, в отличие от гипертензивных самок, наблюдалось достоверное снижение ср.АД на 815% (р<0,05) в течение 120 мин исследования. Таким образом, чувствительность ССС гипертензивных крыс к выключению холинергической иннервации была значительно ниже, чем у нормотензивных животных. В условиях атропинизации амплитуда увеличения ЧСС у гипертензивных крыс была снижена по сравнению с нормотензивными животными, что свидетельствует об уменьшении выраженности холинергических влияний в условиях развития гипертонии. 3.3.4 Влияние гонадэктомии на чувствительность сердечно-сосудистой системы к блокаде холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных самок и самцов У овариэктомированных самок увеличение ЧСС составило 8-14% (p<0,05), что почти в 2 раза меньше (p<0,05), чем у интактных самок. Процесс нормализации ЧСС протекал быстрее у овариэктомированных самок по сравнению с интактными самками. Значения ср.АД у гонадэктомированных самок, как и у интактных при введении атропина, почти не отличались от исходных значений на всем протяжении эксперимента. В отличие от самок, кастрация самцов не вызывала существенных изменений в хронотропной и сосудистой чувствительности к атропину. У гонадэктомированных самок и самцов при введении атропина не наблюдается половых различий ни по сердечному, ни по сосудистому компоненту. Таким образом, результаты эксперимента позволяют сделать вывод о том, что в естественных условиях эстрогены способствуют увеличению чувствительности сердца к М-холиноблокатору. Андрогены такой выраженной способностью не обладают. У гипертензивных самок с дефицитом эстрогенов наблюдалось снижение показателей ЧСС при введении атропина относительно гипертензивных интактных самок. Амплитуда снижения ЧСС была практически в равной степени выражена у нормотензивных и гипертензивных самок на фоне дефицита эстрогенов относительно интактных групп. При этом не наблюдалось существенных изменений в АД при введении атропина. У гипертензивных самцов, как и у нормотензивных особей, кастрация сопровождалась тенденцией к снижению хронотропного эффекта атропина. При этом, у гипертензивных самцов по сравнению с нормотензивными особями эта тенденция была более выражена прежде всего по продолжительности положительного хронотропного эффекта атропина. Сосудистые реакции на атропин у гипертензивных гонадэктомированных самцов значительно отличались от интактных особей. Дефицит андрогенов у гипертензивных самцов «снимал» гипотензивные реакции на блокаду холинергических влияний. 11 У гипертензивных самок и самцов в отсутствии половых гормонов не наблюдалось достоверных половых различий на блокаду холинергических влияний атропином. Однако, отмечалась тенденция к снижению хронотропного эффекта атропина у гонадэктомированных самцов по сравнению с самками. Полученные результаты свидетельствуют о том, что дефицит эстрогенов снижает чувствительность к блокаде холинергических влияний по показателям ЧСС в норме и при развитии гипертонии. В отличие от самок, у самцов дефицит андрогенов как у нормотензивных, так и гипертензивных особей сопровождается лишь тенденцией к снижению хронотропных эффектов атропина и подавлению компенсаторных гипотензивных реакций. 3.4 Роль половых гормонов в холинергической регуляции сердечнососудистой системы у нормотензивных и гипертензивных крыс при стрессе 3.4.1 Половые различия в кардиоваскулярной чувствительности к стрессу у нормотензивных и гипертензивных крыс ЭБС вызывал значительное увеличение пульса у нормотензивных самок и самцов. Повышенные значения ЧСС регистрировались с 1 мин и до конца стрессорного периода. При этом у самок уровень ЧСС при ЭБС составлял 132%-122% (p<0,05), а у самцов 124%-113% (p<0,05) от исходных значений. В постстрессорный период отмечалось постепенное восстановление ЧСС, причем у самок снижение пульса происходило быстрее, чем у самцов. Сосудистые эффекты стресса были слабее хронотропных эффектов и у самок, и у самцов. Достоверно повышенные значения ср.АД наблюдались у самок в течение 1 мин ЭБС, а у самцов - 15 мин стресса. После отмены стрессорного воздействия у самок, но не у самцов, наблюдались слабые гипотензивные реакции, что можно рассматривать как проявление компенсаторных реакций в ответ на стрессорную гипертензию. К концу восстановительного периода ср.АД у самок нормализовалось, а у самцов отмечалась тенденция к сохранению повышенных его значений. Таким образом, в условиях ЭБС у нормотензивных самок по сравнению с самцами, несмотря на более высокую тахикардию, увеличение ср.АД было менее значительным по амплитуде и длительности, что свидетельствует о более благоприятном у них режиме функционирования ССС в условиях ЭБС. У самок гипертония сопровождалась снижением стресс-индуцированной тахикардии по сравнению с нормотензивными самками. У гипертензивных самок ЧСС при стрессорном воздействии возрастала только на 16-10% (p<0,05), в то время как у нормотензивных этот параметр увеличился на 32-22% (p<0,05) (рис.2а). Прессорные реакции у гипертензивных и нормотензивных самок наблюдались лишь на 1 мин ЭБС и были одинаковыми по амплитуде. Однако, у гипертензивных самок, начиная с 15 мин стресса и в течение 60 мин постстрессорного периода отмечались гипотензивные реакции (рис. 2б). Таким образом, у гипертензивных самок как кардиальные, так и прессорные компоненты стрессорных реакций свидетельствуют о включении защитных механизмов, не допускающих при стрессе длительного повышения АД. 12 а б Рис. 2 Изменение ЧСС (а) и ср.АД (б) у гипертензивных самок и самцов в условиях стресса Примечание: p<0,05 относительно: * - исходного уровня, ∆ - самцов; - самки, - самцы В противоположность самкам, у самцов гипертензия сопровождалась усилением кардиоваскулярной стресс-реактивности как по сердечному, так и по сосудистому компоненту (рис. 2). Снижение при гипертензии хронотропного компонента стресса у самок и усиление его у самцов привело к инверсии половых различий в уровне стресс-индуцированной тахикардии. Таким образом, у нормотензивных и еще в большей степени у гипертензивных животных динамика сердечно-сосудистых реакций при стрессах более благоприятна у самок, чем у самцов, с точки зрения устойчивости к кардиоваскулярной патологии. 3.4.2 Влияние гонадэктомии на активность сердечно-сосудистой системы в условиях стресса у нормотензивных и гипертензивных самок и самцов крыс Результаты исследования показали, что ЭБС у овариэктомированных самок, как и у интактных, сопровождался значительной тахикардией. При этом, у интактных и гонадэктомированных самок амплитуда стрессорного увеличения и постстрессорные уровни ЧСС практически не отличалась (32-22% и 31-25%, соответственно, p>0,05). На всем протяжении стресса и после его отмены показатели тахикардии у кастрированных и интактных самцов были практически одинаковыми (p>0,05). Таким образом, дефицит андрогенов также не оказывал существенного влияния на кардиоваскулярную стресс-реактивность по показаниям ЧСС и ср.АД. Дефицит половых гормонов практически не изменял кардиальные и сосудистые эффекты стресса ни у самок, ни у самцов, что привело к сохранению половых различий в реакциях ЧСС и ср.АД. Стресс у гипертензивных овариэктомированных самок, как и у интактных, сопровождался тахикардией. При этом, амплитуда увеличения пульса и длительность хронотропных реакций в условиях ЭБС практически не отличались между двумя группами животных. Овариэктомия гипертензивных самок сопровождалась значительными изменениями в стрессорных и постстрессорных уровнях ср.АД. У гипертензивных самок дефицит эстрогенов «снимал» гипотензивные реакции (рис. 3). Таким образом, при стрессе дефицит эстрогенов у гипертензивных самок приводил к устранению компенсаторных гипотензивных реакций на фоне неизмененных кардиальных эффектов стресса. У гипертензивных самцов по сравнению с интактными кастрация приводила к достоверному снижению хронотропных эффектов стресса. Во время стрессорного воздействия у кастрированных самцов по сравнению с интактными наблюдалось 13 подавление реакции по ЧСС в 2,8 раза (p<0,05). У гипертензивных кастрированных самцов стресс сопровождался увеличением ср.АД, выраженным в той же степени, что и у интактных. Однако, длительность стресс-индуцированной гипертензии у гонадэктомированных самцов уменьшилась. Гонадэктомия привела к инверсии половых различий в хронотропных эффектах стресса, наблюдаемых у гипертензивных крыс. У гипертензивных кастрированных самцов по сравнению с самками отмечались более значительные прессорные реакции на стресс (11-13% и 8%, соответственно, Рис. 3 Изменение ср.АД у гипертензивных p<0,05), наблюдаемые на первых интактных и гонадэктомированных самок в 10 мин ЭБС. условиях стресса Таким образом, эффекты Примечание: p<0,05 относительно: * - исходных значений, † – интактных самок; - гонадэктомии были более выражены у самцов, чем у интактные самки, - гонадэктомированные гипертензивных самки гипертензивных самок. У самцов гонадэктомия на фоне развития гипертонии сопровождалась ослаблением хронотропных и сосудистых эффектов стресса; у самок гонадэктомия приводила к снижению компенсаторных гипотензивных реакций. Результаты опытов с удалением гонад позволяют заключить, что в естественных условиях у гипертензивных животных эстрогены способствуют развитию компенсаторных гипотензивных реакций при стрессе, т.е. обладают антигипертензивными эффектами. У гипертензивных самцов андрогены усиливают хронотропные и сосудистые эффекты стресса, т.е. обладают прогипертензивными эффектами. 3.4.3 Половые особенности чувствительности сердечно-сосудистой системы к усилению холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных крыс в условиях стресса В условиях ЭБС введение ацетилхолина нормотензивным животным сопровождалось резким и кратковременным замедлением пульса и снижением ср.АД, более выраженным у самок, чем у самцов (62% против 32%, p<0,05 для ЧСС, 50% против 32%, p<0,05 для ср.АД). При этом активация холинергической системы существенно подавляла чувствительность ССС к стрессу, причем в большей степени у самок, чем у самцов. Ацетилхолин в целом значительно изменял стрессорную динамику гемодинамических показателей, особенно у самок. В условиях стрессорного воздействия на фоне введения ацетилхолина, в отличие от ЭБС, достоверно повышенные значения ЧСС у самок наблюдались лишь в конце стресса – на 40-60 мин (8-9%, p<0,05), в то время как в первые 40 мин стресса увеличение ЧСС было статистически недостоверным. При этом у самок уровень ср.АД на протяжении всего стрессорного воздействия оставался в пределах нормы. Отмена стресса у женских особей сопровождалась тенденцией к брадикардии и гипотензии. 14 Результаты наших опытов показали, что как в покое, так и в условиях стресса у самок по сравнению с самцами наблюдалась более высокая чувствительность к ацетилхолину по показаниям ср.АД и ЧСС. У гипертензивных животных, как и у нормотензивных особей, при стрессе сохраняются половые различия в кардиальной чувствительности к холинергическим влияниям. В условиях стресса введение ацетилхолина на 1 мин сопровождалось более выраженным снижением ЧСС у гипертензивных самок, чем у гипертензивных Рис. 4 Изменение ЧСС у гипертензивных самок и самцов в условиях стресса на фоне введения самцов (рис. 4). У гипертензивных по сравнению с ацетилхолина Примечание: p<0,05 относительно: * - исходного нормотензивными животными наблю- уровня, ∆ - самцов; - самки, далось уменьшение кардиальной - самцы чувствительности к препарату у самок, но не у самцов. При этом, как у самок, так и у самцов отмечалось значительное снижение сосудистой реактивности к ацетилхолину. Максимальное уменьшение ср.АД наблюдалось на 1 мин стресса при введении препарата: у самок – на 12% (p<0,05), у самцов - на 8% (p<0,05) от исходных значений, что было соответственно в 4,2 раза (p<0,05) и 4 раза (p<0,05) меньше, чем у нормотензивных самок и самцов. У гипертензивных самок под влиянием ацетилхолина снимались положительные хронотропные эффекты стресса и наблюдалось уменьшение компенсаторных гипотензивных реакций. У стрессированных гипертензивных самцов усиление холинергических влияний сопровождалось снижением амплитуды стрессиндуцированной тахикардии и отсутствием изменений в сосудистых эффектах стресса. Таким образом, у гипертензивных животных по сравнению с нормотензивными при стрессе наблюдалось снижение чувствительности к ацетилхолину по кардиальному (самки) и сосудистому (самки и самцы) компонентам. При этом, как в покое, так и в условиях стресса у самок наблюдалась более высокая чувствительность к ацетилхолину. 3.4.4 Влияние гонадэктомии на чувствительность сердечно-сосудистой системы к усилению холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных самок и самцов в условиях стресса Проведенные исследования по изучению влияния половых гормонов на чувствительность ССС к ацетилхолину в условиях стресса у нормотензивных и гипертензивных животных выявили изменения преимущественно в сосудистых эффектах. Введение ацетилхолина в условиях ЭБС овариэктомированным самкам привело к снижению ср.АД на 1 мин на 22% от исходных значений (p<0,05), что достоверно ниже реакции интактных самок на данное комбинированное воздействие. При этом у гонадэктомированных самок к 5 мин эксперимента отмечалось значительное 15 повышение ср.АД по сравнению с исходным значением на 15-8% (p<0,05), что можно трактовать как ослабление эффектов ацетилхолина и преобладание стрессиндуцированной гипертензии. С 50-60 мин стрессорного воздействия и на протяжении всего восстановительного периода у овариэктомированных самок наблюдались продолжительные гипотензивные реакции. У кастрированных и интактных самцов амплитуда гипотензивных реакций на введение ацетилхолина в условиях ЭБС достоверно не отличалась. Однако, у кастрированных самцов введение ацетилхолина значительно снижало стрессорные и постстрессорные уровни ср.АД. Таким образом, результаты экспериментов свидетельствуют о повышении чувствительности ССС к ацетилхолину при кастрации самцов. Следовательно, в естественных условиях эстрогены способствуют усилению чувствительности к ацетилхолину в условиях стресса, в то время как андрогены снижают чувствительность к ацетилхолину в условиях стресса. Усиление холинергических влияний в условиях ЭБС сопровождалось на 1 мин после введения ацетилхолина более значительными гипотензивными реакциями у гипертензивных овариэктомированных самок по сравнению с гипертензивными интактными самками (22% и 12%, p<0,05). В остальной период наблюдения стрессорные и постстрессорные уровни ср.АД практически не отличались между этими двумя группами самок. Из рисунка 5 видно, что сосудистые реакции на 1 мин сочетанного воздействия стресса и ацетилхолина практически не отличались у гипертензивных интактных и кастрированных самцов. Однако, в отличие от интактных самцов, Рис. 5 Изменение ср.АД у гипертензивных интактных и гонадэктомированных самцов у кастрированных самцов, начиная с 5 крыс в условиях стресса на фоне введения мин и до окончания стресса, ацетилхолина наблюдалось полное подавление Примечание: p<0,05 относительно: * - исходного уровня, † - интактных самцов; - интактные реакции ср.АД на ЭБС, что самцы, - гонадэктомированные самцы свидетельствует об усилении чувствительности к ацетилхолину в условиях стресса у кастрированных самцов. Отмена стресса у гонадэктомированных самцов сопровождалась тенденцией к гипотензивным реакциям, в то время как у интактных самцов отмечалась нормализация АД. У гипертензивных овариэктомированных самок по сравнению с нормотензивными гонадэктомированными самками на фоне неизмененной чувствительности к ацетилхолину по показателям ср.АД устранялись гипотензивные реакции на всем протяжении эксперимента, что свидетельствует о некотором снижении чувствительности ССС к ацетилхолину при развитии гипертонии. В отличие от самок, у гипертензивных кастрированных самцов сосудистая чувствительность к препарату была ниже в 2,4 раза (p<0,05) по сравнению с 16 нормотензивными гонадэктомированными самцами, что отражает очень значительное снижение чувствительности к ацетилхолину у самцов при развитии гипертонии. Таким образом, как в условиях покоя, так и при стрессе развитие гипертонии сопровождалось снижением чувствительности ССС к ацетилхолину, более выраженным у самцов, чем у самок. Полученные результаты свидетельствуют о том, что дефицит эстрогенов у гипертензивных самок не приводит к существенному изменению в чувствительности к ацетилхолину на фоне стресса. У гипертензивных самцов дефицит андрогенов существенно повышает чувствительность к усилению холинергических влияний при стрессе. Таким образом, в естественных условиях андрогены снижают чувствительность к ацетилхолину в условиях ЭБС у гипертензивных самцов. 3.4.5 Половые особенности чувствительности сердечно-сосудистой системы к блокаде холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных крыс в условиях стресса У нормотензивных животных блокада холинергических влияний на сердечный ритм сопровождалась повышением чувствительности ССС самок, но не самцов, к стрессорному воздействию. У атропинизированных самок, по сравнению с интактными женскими особями, стресс индуцировал более значительную тахикардию и гипертензию (42% против 32%, p<0,05 для ЧСС и 20% против 11%, p<0,05 для ср.АД). В то же время стрессированные самцы оказались нечувствительными к введению атропина по показаниям ЧСС и ср.АД (24% и 25% для ЧСС, 17% и 18% для ср.АД). Таким образом, у атропинизированных животных, по сравнению с интактными, в условиях стрессорного воздействия увеличение пульса у самок было еще более выраженным, чем у самцов. Увеличение стресс-индуцированной гипертензии у атропинизированных самок привело к тому, что стрессорная динамика ср.АД была практически одинакова у самок и самцов. Таким образом, в женском организме по сравнению с мужским холинергические механизмы играют более значительную роль в регуляции ССС как в условиях покоя, так и при стрессе. В условиях сочетанного воздействия ЭБС и атропина у гипертензивных животных, по сравнению с нормотензивными особями, наблюдалось снижение кардиальной чувствительности к стрессу у самок, но не у самцов. У гипертензивных самок при стрессе на фоне введения атропина амплитуда увеличения ЧСС уменьшилась в 1,9 раза (p<0,05) относительно нормотензивных особей. Стрессированные гипертензивные самцы, как и нормотензивные, оказались нечувствительны к введению атропина по показаниям ЧСС на всем протяжении эксперимента. Снижение стресс-индуцированной тахикардии на фоне введения атропина у гипертензивных самок, но не у гипертензивных самцов, привело к тому, что у гипертензивных животных практически отсутствовали половые различия в стрессорной динамике ЧСС. У гипертензивных самок и самцов по сравнению с нормотензивными животными отмечалось снижение сосудистых реакций на стресс в условиях блокады холинергических влияний. Амплитуда прессорных реакций у гипертензивных самок 17 была снижена в 1,6 раза (p<0,05), а у гипертензивных самцов в 2,8 раза (p<0,05) относительно нормотензивных особей. У гипертензивных самцов по сравнению с нормотензивными особями введение атропина сопровождалось недостоверным увеличением ср.АД в первые 5 мин стресса, после чего наблюдалась тенденция к снижению ср.АД. После отмены стресса у атропинизированных самцов развивались длительные гипотензивные реакции. Разнонаправленные сосудистые реакции у гипертензивных самок и самцов на сочетанное воздействие ЭБС и атропина привели к тому, что на всем протяжении эксперимента наблюдались половые различия, нехарактерные для нормотензивных животных. Таким образом, у гипертензивных животных по сравнению с нормотензивными ЭБС на фоне атропина сопровождался снижением сосудистых реакций, более выраженным у самцов по сравнению с самками. Следовательно, результаты наших экспериментов показали, что в условиях развития гипертонии снижается кардиальная (самки) и сосудистая (самки и самцы) чувствительность к атропину на фоне стресса по сравнению с нормотензивными животными. Наши эксперименты показали, что у гипертензивных самок, как и у нормотензивных, стресс на фоне введения атропина сопровождался более значительной тахикардией и гипертензией по сравнению со стрессом в условиях гипертонии. Стрессированные гипертензивные самцы, как и нормотензивные, оказались практически нечувствительны к холинергической блокаде по показаниям ЧСС. Гипертензивные самки в отличие от самцов чувствительны к блокаде холинергических влияний в условиях стресса, что проявляется в усилении кардиальных и сосудистых эффектов стресса. Следовательно, как нормотензивные, так и гипертензивные самки как в условиях покоя, так и при стрессе демонстрируют более высокую чувствительность к блокаде холинергических влияний. 3.4.6 Влияние гонадэктомии на чувствительность сердечно-сосудистой системы к блокаде холинергических влияний у нормотензивных и гипертензивных самок и самцов в условиях стресса Сравнительный анализ гонадэктомированных нормотензивных и гипертензивных групп животных при стрессорном воздействии, введении атропина и сочетанном воздействии стресса и атропина выявил изменения преимущественно в кардиальных эффектах. ЭБС на фоне введения атропина у овариэктомированных самок сопровождался значительным снижением стресс-индуцированной тахикардии по сравнению с интактными женскими особями. У гонадэктомированных самок на 1 мин сочетанного воздействия стресса и атропина амплитуда увеличения пульса составила 10% (p>0,05), что в 4,2 раза меньше (p<0,05), чем у интактных самок. У атропинизированных кастрированных самцов при стрессе наблюдалось недостоверное увеличение пульса на 6-10% (p>0,05), в то время как у интактных самцов стресс-индуцированная тахикардия при введении атропина составляла 25-19% (p<0,05). Через 10 мин после отмены ЭБС у кастрированных самцов наблюдалось повышение ЧСС до уровней интактных самцов, которое, как и у интактных особей сохранялось до конца восстановительного периода. 18 Таким образом, дефицит половых гормонов подавил чувствительность хронотропной функции сердца к выключению холинергических влияний в условиях стресса как у самок, так и у самцов. Уменьшение хронотропного эффекта атропина у гонадэктомированных животных при стрессе свидетельствует об уменьшении у них вклада холинергических влияний в регуляцию сердечного ритма в отсутствии половых гормонов. Сочетанное воздействие стресса и атропина вызывало у гипертензивных овариэктомированных самок более значительное увеличение стресс-индуцированной тахикардии по сравнению с гипертензивными интактными самками. Более значительные показатели ЧСС сохранялись у овариэктомированных самок, по сравнению с интактными, и после отмены стресса (рис. 6). Таким образом, если у нормотензивных самок гонадэктомия снижала чувствительность к атропину на фоне ЭБС, то у гипертензивных самок, напротив, овариэктомия повышала чувствительность к атропину на фоне ЭБС. У гипертензивных кастрированных самцов уровень тахикардии, вызванный сочетанным воздействием стресса и атропина, практически не отличался от такового у гипертензивных интактных самцов на протяжении всего периода наблюдения. У гипертензивных овариэктомиРис. 6 Изменение ЧСС у гипертензивных интактных и гонадэктомированных самок в рованных самок наблюдалось условиях стресса на фоне введения атропина повышение стресс-индуцируемой Примечание: p<0,05 относительно: * - исходного уровня, † - интактных самок; - интактные тахикардии при введении атропина по самки, - гонадэктомированные самки сравнению с нормотензивными гонадэктомированными женскими особями. Действительно, у гипертензивных самок амплитуда увеличения ЧСС была в 2-3 раза выше (p<0,05), чем у нормотензивных самок. Как и у самок, у гипертензивных кастрированных самцов наблюдается более значительная тахикардия на комбинированное воздействие по сравнению с гонадэктомированными нормотензивными самцами. Так, у нормотензивных самцов отмечалось недостоверное повышение показателей ЧСС на 6-10% (p>0,05), в то время как у гипертензивных самцов ЧСС увеличилась на 19-24% (p<0,05) относительно исходных значений. Таким образом, эффекты гонадэктомии у самок и самцов в отношении чувствительности к атропину на фоне ЭБС зависят от физиологического состояния организма. Овариэктомия нормотензивных самок приводит к снижению чувствительности, в то время как овариэктомия гипертензивных самок приводит к повышению чувствительности к атропину на фоне ЭБС. Кастрация нормотензивных самцов сопровождается снижением чувствительности, в то время как кастрация гипертензивных самцов не вызывает изменений в чувствительности к атропину на фоне ЭБС. Эти результаты позволяют заключить, что роль половых гормонов в холинергических механизмах регуляции ССС в условиях стресса зависят от физиологического состояния организма. 19 ВЫВОДЫ 1. Самки белых крыс по сравнению с самцами более устойчивы к развитию экспериментальной почечной гипертонии, что проявляется в менее значительном у них увеличении показателей ср. АД и менее выраженной атрофии ишемизированной почки при нарушении почечного кровообращения. 2. Овариэктомия женских особей приводит к повышению уровня ср.АД и снижению устойчивости к развитию экспериментальной почечной гипертонии, что свидетельствует о защитных эффектах эстрогенов в отношении устойчивости к данной патологии. У мужских особей кастрация, не изменяя показатели ср.АД, способствует повышению устойчивости к экспериментальной гипертонии, что подтверждает роль андрогенов как фактора, усугубляющего тяжесть этого заболевания. 3. Неонатальная андрогенизация самок приводит в половозрелом состоянии к повышению уровня ср.АД и формированию почечной гипертонии по мужскому типу, что свидетельствует о том, что половые различия в развитии гипертонии в значительной степени определяются программирующим влиянием андрогенов в период половой дифференцировки мозга. 4. Половые различия в устойчивости к гипертонии обеспечиваются и за счет различной у самок и самцов кардиоваскулярной чувствительности к стрессам. У нормотензивных самок, в противоположность самцам, хронотропные эффекты стресса преобладают над сосудистыми, и выше скорость восстановления гемодинамических параметров. Развитие гипертонии сопровождается снижением кардиоваскулярной чувствительности к стрессу у самок и усилением сердечных и сосудистых эффектов стресса у самцов, что усугубляет тяжесть развивающейся у них гипертонии. 5. Как нормотензивные, так и гипертензивные самки по сравнению с самцами более чувствительны к усилению и блокаде холинергических влияний в состоянии покоя и стресса. Эти факты говорят о более выраженных холинергических влияниях на ССС у самок по сравнению с самцами в условиях нормы, патологии, покоя и стресса, что значительно повышает устойчивость женского организма к развитию кардиоваскулярной патологии. 6. Опыты с овариэктомией позволяют заключить, что защитные эффекты эстрогенов в отношении устойчивости к развитию гипертонии в значительной степени реализуются через усиление холинергических влияний на ССС в условиях покоя и стресса (нормотензивные самки) и в условиях покоя (гипертензивные самки). 7. Опыты с кастрацией самцов показали, что в отличие от эстрогенов, влияние андрогенов на ССС определяется исходным состоянием организма. У нормотензивных самцов дефицит андрогенов не изменяет АД, стрессреактивность и чувствительность к холинергическим влияниям (в условиях покоя). У гипертензивных самцов дефицит андрогенов приводит к устойчивому снижению АД и ослаблению сосудистых и кардиальных эффектов стресса. Эти факты позволяют заключить, что андрогены обладают потенцирующим эффектом при развитии гипертонии, частично опосредованным через усиление кардиоваскулярной стресс-реактивности. 20 СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Статьи в журналах перечня ВАК РФ 1. Бердникова, В.А. Половые различия в содержании оксида азота в крови у здоровых и гипертензивных крыс в условиях покоя и стресса [Текст] / Т.Г. Анищенко, О.В. Семячкина–Глушковская, Т.А. Синдякова, О.В. Лексина, В.А. Бердникова // Бюл. эксперим. биол. мед. – 2006. – Т. 142, № 7. – С. 13–17. 2. Бердникова, В.А. Половые особенности кардиоваскулярной стресс–реактивности у здоровых и гипертензивных крыс [Текст] / Т.Г. Анищенко, О.В. Семячкина–Глушковская, В.А. Бердникова, Т.А. Синдякова // Бюл. эксперим. биол. мед. – 2007. – Т.143, № 2. – С. 136–140. 3. Бердникова, В.А. Половые особенности холинергической регуляции сердечнососудистой системы у здоровых и гипертензивных крыс [Текст] / О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, В.А. Бердникова, О.С. Найденова // Бюл. эксперим. биол. мед. – 2008. – Т. 146, № 7. – С. 33–36. 4. Бердникова, В.А. Роль стресса и оксида азота в развитии гипертонии [Текст] / О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, В.А. Бердникова, А.С. Кузнецова, Я.Д. Круглова, А.В. Каширина // Изв. Самарского научного центра РАН. Спец. вып. «XIII конгресс «Экология и здоровье человека». – 2008. – Т. 2. – С. 154–158. 5. Бердникова, В.А. Влияние возраста и пола на показатели артериального давления, развитие почечной гипертонии и содержание оксида азота в крови у белых крыс [Текст] // Т.Г. Анищенко, О.В. Семячкина–Глушковская, В.А. Бердникова, Т.А. Синдякова / Бюл. эксперим. биол. мед. (принято к печати). Статьи в журналах и сборниках 6. Бердникова, В.А. Половые особенности чувствительности сердечно–сосудистой системы к адреналину у гипертензивных крыс [Текст] / В.А. Бердникова, О.В. Семячкина– Глушковская // Исследования молодых ученых и студентов в биологии, Сб. науч. тр. – Саратов: Изд–во Сарат. ун–та, 2005. – Вып. 3. – С. 13–17. 7. Бердникова, В.А. Половые различия в чувствительности сердечно–сосудистой системы к адреналину у гипертензивных крыс [Текст] / Т.Г. Анищенко, О.В. Семячкина–Глушковская, В.А. Бердникова // Изв. Сарат. гос. ун-та. Сер. биол. – 2005. – Т. 5, № 1. – С. 49–51. 8. Бердникова, В.А. Половые особенности кардиоваскулярной чувствительности к ацетилхолину у здоровых и гипертензивных крыс [Текст] / В.А. Бердникова, О.С. Найденова // Исследования молодых ученых и студентов в биологии, Сб. науч. тр. – Саратов: Изд–во Сарат. ун–та, 2006. – Вып. 4. – С. 7–10. 9. Бердникова, В.А. Половые особенности кардиоваскулярной чувствительности к ацетилхолину у здоровых и гипертензивных крыс [Текст] / В.А. Бердникова, О.С. Найденова, О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко // Матер. науч.–практ. конф. с междунар. участием «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» – Астрахань: АГМА, 2006. – С. 122–127. 10. Бердникова, В.А. Кардиоваскулярная чувствительность к адреналину у здоровых и гипертензивных самок крыс [Текст] / В.А. Бердникова, О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко // Матер. IX междунар. конф. «Эколого–Биологические проблемы бассейна Каспийского моря». – Астрахань: Астраханский ун–т, 2006. – С. 162–164. 11. Бердникова, В.А. Сердечно-сосудистые эффекты адреналина в норме и при стрессе у здоровых и гипертензивных крыс [Текст] / В.А. Бердникова, О.В. Семячкина– Глушковская, Т.Г. Анищенко // Матер. I конф. молодых ученых мед.-биол. секции 21 Поволжской ассоциации гос. ун-тов. Ульяновск, 27 апреля 2007. – Ульяновск, 2007. – С.17-19. 12. Бердникова, В.А. Роль половых гормонов в регуляции базальной и стрессорной секреции оксида азота у крыс [Текст] / О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, Т.А. Синдякова, В.А. Бердникова, О.П. Епифанова // Астраханский медицинский журнал. – Астрахань: АГМА, 2008. - Т. З, № 3 (прил.). – С. 130–133. 13. Berdnikova, V. Wavelet–based analysis of blood pressure dynamics in rats [Текст] / A.N. Pavlov, A.A. Anisimov, O. V. Semyachkina–Glushkovskaya, V.A. Berdnikova, A. S. Kuznetsova, E.G. Matasova // Complex dynamics and fluctuations in biomedical photonics, Proc. of SPIE; ed. by Tuchin V.V., Wang L.V., Duncan D.D., 2009. – Vol. 7176. – P. 71760 M. 14. Бердникова, В.А. Половые различия в чувствительности сердечно–сосудистой системы к стрессу и к модуляции симпатической активности у нормотензивных и гипертензивных крыс [Текст] / Т.Г. Анищенко, О.В. Семячкина–Глушковская, В.А. Бердникова, А.Д. Рудковская // Изв. Сарат. гос. ун-та. Сер. Хим. Биол. Экол. – 2009. – Т. 9. – С. 13–20. 15. Бердникова, В.А. Роль социального стресса в развитии гипертонии [Текст] / В.А. Бердникова // Исследования молодых ученых в биологии и экологии, Сб. науч. тр. – Саратов: Изд–во Сарат. ун–та, 2009. – Вып. 7. – С. 20–23. Тезисы конференций 16. Бердникова, В.А. Половые особенности кардиоваскулярной чувствительности к адреналину у здоровых и гипертензивных крыс [Текст] / О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, В.А. Бердникова // Фундаментальные исследования. – 2006. – № 3.– С. 33–34. 17. Бердникова, В.А. Половые особенности кардиоваскулярной чувствительности к дефициту оксида азота [Текст] / О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, В.А. Бердникова, А.Е. Смирнова, О.С. Найденова // Современные проблемы науки и образования. – 2006. – № 5. – С. 91. 18. Бердникова, В.А. Кардиоваскулярная стресс–реактивность у гипертензивных самок и самцов крыс [Текст] / О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, В.А. Бердникова, Т.А. Синдякова // Фундаментальные исследования. – 2006. – № 9. – С. 48. 19. Бердникова, В.А. Кардиоваскулярная чувствительность к дефициту оксида азота у здоровых и гипертензивных крыс в условиях покоя и стресса [Текст] / В.А. Бердникова, А.Е. Смирнова, О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко // Успехи современного естествознания. – 2007. – № 1. – С. 51–52. 20. Бердникова, В.А. Кардиоваскулярная чувствительность к атропину у здоровых и гипертензивных самок и самцов крыс в норме и при стрессе [Текст] / В.А. Бердникова, О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, О.С. Найденова // Фундаментальные исследования. – 2007. – № 7. – С. 54–55. 21. Бердникова, В.А. Половые особенности кардиоваскулярной чувствительности к блокаде холинергических влияний у здоровых и гипертензивных самок крыс в условиях покоя и стресса [Текст] / О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, В.А. Бердникова, О.С. Найденова // Фундаментальные исследования. – 2007. – № 7. – С. 34–35. 22. Berdnikova, V. Sex differences in cardiovascular sensitivity to propranolol in hypertensive rats under normal and stress conditions [Текст] / V. Berdnikova, О. Semyachkina–Glushkovskaya, Т. Anishchenko, A. Kurisheva // 17th European Meeting on Hypertension, Milan, Italy, June 15–19, 2007. – J. Hypertension. – 2007. – Vol.25, no. 2. – P. 251–252. 23. Berdnikova, V. Deficiency of nitric oxide increases vascular stress–responces in hypertensive female but not hypertensive male [Текст] / О. Semyachkina–Glushkovskaya, Т. Anishchenko, 22 V. Berdnikova, Т. Sindyakova, A. Smirnova // 17th European Meeting on Hypertension, Milan, Italy, June 15–19, 2007. – J. Hypertension. – 2007. – Vol. 25, no. 2. – P.125–126. 24. Berdnikova, V. Gender differences in nitrergic control of cardiovascular activity in hypertensive rats [Текст] / О. Semyachkina–Glushkovskaya, Т. Anishchenko, V. Berdnikova, Т. Sindyakova, A. Smirnova // Fourth Mediterranean Meeting on Hypertension and Atherosclerosis, Turkey, Fethiye, May 9–12, 2007. – Р. 115. 25. Бердникова, В.А. Половые особенности кардиоваскулярной чувствительности к атропину и ацетилхолину у здоровых и гипертензивных крыс [Текст] / В.А. Бердникова, О.С. Найденова, О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко // Матер. науч.-практ. конф. «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины – 2007», СанктПетербург, 16 мая 2007. – Санкт-Петербург, 2007. – С. 67-68. 26. Бердникова, В.А. Кардиоваскулярная стресс–реактивность у самок и самцов половозрелых и старых крыс [Текст] / В.А. Бердникова, О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко // Фундаментальные исследования. – 2007. – № 11. – С. 52. 27. Бердникова, В.А. Половые особенности эндотелийзависимой релаксации у здоровых и гипертензивных крыс [Текст] / О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, В.А. Бердникова // Успехи современного естествознания. – 2007. – №12 (прил.). – С. 172–173. 28. Berdnikova V. Effect of stress on cardiovascular activity and serum cholesterol in normotensive and hypertensive rats [Текст] / V. Berdnikova, О. Semyachkina–Glushkovskaya, D. Leontiev // 77th European Atherosclerosis Society Congress, Istanbul, Turkey, April 26–29, 2008. – Atherosclerosis Supplements. – 2008. – Vol. 9, no. 1. – P. 228. 29. Berdnikova V. Effect of aging and sex on the endothelial function in normotensive and hypertensive rats [Текст] / О. Semyachkina–Glushkovskaya, V. Berdnikova // 77th European Atherosclerosis Society Congress, Istanbul, Turkey, April 26–29, 2008. – Atherosclerosis Supplements. – 2008. – Vol. 9, no. 1. – P. 101. 30. Berdnikova, V. Mechanisms of sex differences in cardiovascular resistance to stress and development of hypertension [Текст] / О. Semyachkina–Glushkovskaya, Т. Anishchenko, V. Berdnikova, Т. Sindyakova // 9th Congress of the European Federation of Sexology, Italy, Rome, April 13–17, 2008. – Suppl. of European Journal of Sexology. – 2008. – P. 156. 31. Berdnikova, V. Sex particularities in cardiovascular responses to blockade adrenergic influence in healthy and hypertensive rats [Текст] / V. Berdnikova, О. Semyachkina–Glushkovskaya, T. Anishchenko // Fifth Mediterranean Meeting on Hypertension and Atherosclerosis, Izmir, Turkey, April 23–27, 2008. – OP-18. – P. 31. 32. Berdnikova, V. Effect of stress and gender on the cardiovascular activity and the serum cholesterol level in normotensive and hypertensive rats [Текст] / V. Berdnikova, O. Semyachkina–Glushkovskaya, T. Anishchenko, T. Rusyaeva // Hypertension, 2008, Berlin, Germany, June 14–19, 2008. – J. Hypertension. – Vol. 26, no. 1. – P. 352. 33. Berdnikova, V. Mechanisms for gender differences in development of renal hypertension: role of sex hormones and nitric oxide [Текст] / O. Semyachkina–Glushkovskaya, T. Anishchenko, V. Berdnikova, T. Syndyakova, T. Kuznetsova // Hypertension, 2008, Berlin, Germany, June 14–19, 2008. – J. Hypertension. – Vol. 26, no. 1. – P. 80. 34. Бердникова, В.А. Диагностика изменений динамики кровяного давления белых крыс с помощью вейвлетов при различных функциональных состояниях сердечно-сосудистой системы [Текст] / А.А. Анисимов, А.Н. Павлов, О.В. Семячкина–Глушковская, В.А. Бердникова, Е.Г. Матасова, А.С. Кузнецова // Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине – 2008. – Матер. ежег. Всерос. научной школы–семинара. – Саратов: Изд–во Сарат. ун–та, 2008. – С. 61. 23 35. Бердникова, В.А. Роль симпатических влияний в механизмах кардиоваскулярной стресс– устойчивости у нормотензивных и гипертензивных крыс [Текст] / В.А. Бердникова, О.В. Семячкина–Глушковская, Т.Г. Анищенко, А.Д. Рудковская // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. – 2008. – № 7 (6), прил.1. – С. 48. 36. Berdnikova, V. Role of social stress in hypertension development [Текст] / O. Semyachkina– Glushkovskaya, T. Anishchenko, V. Berdnikova, T. Kuznetsova, Ya. Kruglova // 6th Mediterranean Meeting on Hypertension and Atherosclerosis, Antalya, Turkey, March 24–28, 2009. – P. 121. 37. Berdnikova, V. Role of enhanced vascular stress–reactivity in hypertension formation: possible mechanisms [Текст] / V. Berdnikova, О. Semyachkina–Glushkovskaya, T. Anishchenko, A. Kuznetsova // 19th European Meeting on Hypertension, Milan, Italy, June 12–16, 2009. – J. Hypertension. – Vol.27, no. 4. – P. 440. 38. Berdnikova, V. Sex differences in cardiovascular sensitivity to acetylcholine in normotensive and hypertensive rats [Текст] / V. Berdnikova, О. Semyachkina–Glushkovskaya, T. Anishchenko // 19th European Meeting on Hypertension, Milan, Italy, June 12–16, 2009. – J. Hypertension. – Vol. 27, no. 4. – P. 300. 39. Berdnikova, V. Role of stress and nitric oxide in development of hypertension [Текст] / A. Kuznetsova, О. Semyachkina–Glushkovskaya, T. Anishchenko, V. Berdnikova, Ya. Kruglova, A. Kashirina // 19th European Meeting on Hypertension, Milan, Italy, June 12–16, 2009. – J. Hypertension. – Vol. 27, no. 4. – P. 287. ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ АГ – артериальная гипертония ССС – сердечно-сосудистая система АД – артериальное давление ЧСС – частота сердечных сокращений ССЗ – сердечно-сосудистые заболевания ЭБС – эмоционально-болевой стресс Подписано в печать 00.12.2009. Формат 60х84 /16. Бумага офсетная. Гарнитура Times. Печать офсетная. Объем 1.0 печ. л. Тираж 100 экз. Заказ № 1 Типография Издательства Саратовского университета 410012, г. Саратов, ул. Астраханская, 83 24
