Группа мышей - некробактериоза

УДК 619:616.9-085:579.852.13Н
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МАЗИ НЕКРОГЕЛЬ
ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАН ДИСТАЛЬНЫХ ОТДЕЛОВ
КОНЕЧНОСТЕЙ ЖИВОТНЫХ
// Диагностика, профилактика и лечение болезней животных // Сб.науч.тр.,
Россельхозакадемии Сиб. отд-ние. ИЭВСиДВ.  Новосибирск, 2008.  С. 3741.
С.В. Лопатин, А.А. Самоловов
Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока,
п. Краснообск, Новосибирская область
В лаборатории некробактериоза животных ГНУ ИЭВСиДВ разработаны
состав и технология изготовления мази некрогель. Некрогель – комплексный
лечебный препарат для местного применения, обладает высокой антимикробной
активностью в отношении Fusobacterium necrophorum и сопутствующей
микрофлоры. При производственном испытании на поголовье 1989 животных
лечебная эффективность составила 85,67±1,89% (Р<0,01), экономический эффект
– 3,58–5,39 руб. на 1 рубль затрат.
В
работе представлены результаты токсикологического изучения мази
некрогель, местно-раздражающего и аллергизирующего действия ее на организм
животных.
Материалы и методы. Изучение токсичности мази некрогель проводили
согласно «Методическим указаниями по определению токсических свойств
препаратов,
применяемых
Токсикологические
токсичности на
в
исследования
ветеринарии
препарата
и
животноводстве»
включали
изучение
[1].
острой
белых мышах и крысах при введении в желудок, а также
определение местно-раздражающего действия на кожу лабораторных (кролики,
морские свинки) и сельскохозяйственных животных (коровы) с проведением
общего анализа крови.
При изучении острой токсичности некрогеля для белых мышей на первом
этапе определяли ориентировочные переносимые и токсические дозы препарата
1
при введении в желудок. В опыте использовали 18 белых мышей 50–60-дневного
возраста с массой 1822 г, прошедших карантинирование. Животных разделили
на 6 групп по 3 мыши в каждой (5 опытных и 1 контрольная). Из препарата
некрогель готовили 2-кратные разведения и вводили подопытным мышам в
желудок через зонд однократно. Доза по препарату составляла: 12500, 6250, 3125,
1562,5 и 781,25 мг/кг массы. Животным контрольной группы в этот же срок
вводили по 0,5 мл физраствора хлорида натрия. За мышами наблюдали в течение
10 дней.
На втором этапе опыта определяли
параметры острой токсичности
некрогеля. В опыте использовали 80 белых мышей 5060-дневного возраста с
массой 1922 г, прошедших карантинирование. Животных разделили на 8 групп
по 10 мышей в каждой (5 самцов и 5 самок), из них 7 опытных и 1 контрольная.
Препарат вводили подопытным животным в желудок однократно в следующих
дозах: 4000, 5000, 6000, 7000, 8000, 9000 и 10000 мг/кг массы. Животным
контрольной группы тем же способом
и в те же сроки вводили по 0,5 мл
физраствора хлорида натрия. За животными наблюдали в течение 15 дней,
отмечая внешний вид, поведение, картину отравления и фиксируя число павших.
При
изучении
острой
токсичности
некрогеля
для
белых
крыс
первоначально определяли ориентировочные переносимые и токсические дозы
препарата при введении в желудок. Исследования провели на 16 белых крысах
23-месячного возраста массой 150200 г, прошедших карантинирование.
Животных разделили на 4 группы (3 опытных и 1 контрольная) по 4 гол. в
каждой (2 самца
и 2 самки). Крысам опытных групп некрогель вводили в
желудок через зонд однократно в следующих дозах (по сумме компонентов):
7500, 15000, 30000 и 45000 мг/кг массы. Контрольным животным в те же сроки и
тем же способом вводили по 3 мл физраствора хлорида натрия. За животными
наблюдали в течение 10 дней.
Изучение местно-раздражающего действия некрогеля проводили на
кроликах, морских свинках и коровах. Перед нанесением препарата на кожу, а
затем на 5-й и 10-й день брали пробы крови для гематологического исследования.
2
За животными наблюдали в течение 20 дней, определяя состояние кожи и измеряя
толщину кожной складки.
Аллергизирующее действие некрогеля
изучали на 10 морских свинках
массой 450500 г методом накожной аппликации нативного препарата. Животных
предварительно выдерживали в карантине 15 дней. На боковой поверхности
туловища подопытных животных выстригали участки площадью 2 см2, на
которых фиксировали (в течение 4 ч) мазь некрогель. Длительность опыта 14
дней.
На
15-й
день
и
в
последующие
сенсибилизирующего влияния препарата
участки
другой боковой поверхности
10
дней
для
определения
на симметрично расположенные
туловища накладывали аналогичное
количество некрогеля.
Капиллярную проницаемость
введения
кожи изучали методом внутрикожного
0,2 мл физиологического раствора хлорида натрия на участках
аппликации некрогеля на 15-й день опыта.
Расчет LD50 осуществляли
при помощи статистического
метода
Г.Н. Першина [2]. Стерильность некрогеля определяли методом мембранной
фильтрации [3].
Результаты исследований. Введение некрогеля в желудок в дозе 12500
мг/кг привело к гибели мышей, доза 6250 мг/кг вызывала понижение аппетита,
двигательной активности, норкового рефлекса, дозы 3125 мг/кг и менее не
вызывали видимых отклонений клинического состояния мышей (табл. 1).
Т а б л и ц а 1 – Переносимые и токсические дозы некрогеля (по сумме
компонентов) для мышей
Группа мышей Доза препарата, мг/кг
Гибель мышей
I
II
III
IV
VI
Контрольная
12500,00
6250,00
3125,00
1562,50
781,25

+





3
При
определении
параметров
острой
токсичности
некрогеля
для
белых мышей при введении в желудок клиническая картина острого отравления
характеризовалась понижением аппетита, двигательной активности, норкового
эффекта. Через 46 ч отмечали коматозное состояние и гибель подопытных
животных. У выживших мышей признаки отравления исчезали через 34 дня.
Данные для расчета параметров токсичности приведены в табл. 2.
Т а б л и ц а 2 – Соотношение погибших и выживших мышей при
введении разных доз некрогеля (n=10)
Доза некрогеля, Пало мышей
Смертность,%
мг/кг
4000
0
0
5000
2
20
6000
4
40
7000
6
60
8000
8
80
9000
9
90
10000
10
100
Среднюю смертельную дозу (LD50) рассчитывали по формуле:
LD50=_(а+b)х(m-n) = 1320000 = 6600 мг/кг,
200
200
где а и b – величины смежных доз, m и n – соответствующие этим дозам
частоты смертельных исходов в процентах.
Таким образом, токсикологические параметры некрогеля для белых мышей
при
введении
в
желудок
характеризовались
следующими
величинами:
максимально переносимая доза (МПД)  4000, LD100 – 10000; расчетная LD50 –
6600 мг/кг массы.
При изучении острой токсичности некрогеля для белых крыс за 10-дневный
период наблюдений ни одно из подопытных и контрольных животных не пало,
что свидетельствует о безопасности этого препарата для них. Поэтому считаем не
целесообразным
проводить
дальнейшие
опыты
по
определению
острой
токсичности некрогеля для данного вида животных.
При изучении местно-раздражающего действия некрогеля
на организм
лабораторных животных (кролики и морские свинки) и крупного рогатого скота
(коровы)
ни у одного животного как после первого, так и
после второго
4
нанесения препарата на кожу не отметили
увеличения кожной складки от
исходного состояния. Не зафиксировали также гиперемии, отека и болезненности
кожи при пальпации. Применение некрогеля в виде аппликации на кожу не
оказывало какого-либо влияния на гематологические показатели крови
у
кроликов и коров.
Экспериментальные исследования на морских свинках показали, что мазь
некрогель не обладает аллергизирующим действием.
Препарат стерилен, что подтверждено методом мембранной фильтрации.
На основании результатов исследований можно сделать заключение, что в
соответствии ГОСТ 12.1.00.776 «Вредные вещества. Классификация и общие
требования безопасности» некрогель относится к препаратам 4-го класса
опасности – малоопасным.
Список литературы
1.
Методические указания по определению токсических свойств препаратов,
применяемых в ветеринарии и животноводстве // Ветеринарные препараты:
Справочник / Сост.: Л.П. Маланин, А.П. Морозов, А.С. Селиванова; Под
ред. А.Д. Третьякова. – М.: Агропромиздат, 1988. – С. 239 – 289.
2.
Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического
эффекта / М.Л. Беленький.  Л., 1963.  С. 49  52.
3.
Государственная фармакопея СССР.  Вып.2. Общие методы анализа.
Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. – 11- е изд., доп. – М.:
Медицина, 1989. – С. 187 – 192.
5