Проект РФФИ (0.4Mб, doc) - Институт фундаментальной

ФОРМА 1. ДАННЫЕ О ПРОЕКТЕ
1.0.1. Номер проекта:
07-04-01340
1.0.2. Руководитель проекта:
Кратасюк Валентина Александровна
1.1.1. Название проекта:
Гелевая модель функционирования ферментов в клетке на примере ферментов светящихся бактерий
1.1.2. Название проекта на английском языке:
A gel model for the functioning of enzymes in the cell: enzymes of luminous bacteria
1.2.1. Вид конкурса:
а - Инициативные проекты
1.2.2. Область знания:
04 - БИОЛОГИЯ И МЕДИЦИНСКАЯ НАУКА
1.3.
Научная дисциплина:
04-240
Биофизика
04-230
Биохимия
1.4.
Ключевые слова:
Биолюминесценция, ферментативная кинетика, микроокружение, цепи сопряжения ферментов с
люциферазой, иммобилизация, НАДН:ФМН-оксидоредуктаза
1.5.
Краткая аннотация:
Для решения фундаментальной задачи понимания механизмов сопряжения и функционирования
ферментативных метаболических цепей в клетке будет создана экспериментальная модель, в
которой будет реконструирована цепь сопряжения люциферазы с другими ферментами светящихся
бактерий в матричной структуре геля. Благодаря совместной иммобилизации всех необходимых для
свечения компонентов (ферментов и субстратов) модель проявляет биолюминесцентную активность.
В модели имитируется вязкое микроокружение ферментов в матриксе, а также связь с мембранными
структурами. Оптимизация микроокружения достигается за счет подбора соответствующей
гелеобразующей системы в качестве носителей для иммобилизации (желатиновый или крахмальный
гели). Изучение поведения и кинетики ферментов, иммобилизованных на белковых и
полисахаридных матрицах, позволит понять закономерности их функционирования in vivo и
взаимодействия с другими химическими компонентами матрикса клетки, определить ферменты, с
которыми люцифераза связана в метаболической цепи, истинные субстраты люциферазы, влияние
микроокружения внутриклеточного матрикса на взаимодействие субстратов и ферментов. Будет
проведено сравнение поведения фрагментов метаболических цепей с люциферазой в
экспериментальной модели и в растворе.
1.6.
Количество ученых - основных исполнителей:
9
1.7.
Сроки выполнения:
2007-2009
1.8.
Объем финансирования на 2007 год:
350000 руб.
Подпись руководителя проекта:
ФОРМА 2. ДАННЫЕ О РУКОВОДИТЕЛЕ И ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЯХ
2.1.1. Фамилия, Имя, Отчество:Кратасюк Валентина Александровна
2.1.2. Фамилия, Имя, Отчество (на английском языке):Kratasyuk Valentina Aleksandrovna
2.2.1. Дата рождения:01.12.1952
2.2.2. Пол:женский
2.3.1. Ученая степень:доктор биологических наук
2.3.2. Год присуждения ученой степени:1995
2.4.1. Ученое звание:Профессор
2.4.2. Год присвоения ученого звания:2003
2.5.1. Полное название организации - места работы:ФГОУ ВПО ``Сибирский федеральнфй университет''
2.5.2. Сокращенное название организации - места работы:СибФУ
2.5.3. ИНН организации - места работы:
2.6.
Должность:Заведующий кафедрой
2.7.1. Область научных интересов (ключевые слова):биофизика, биохимия, экология биосистем,
биолюминесценция, биотестирование, биолюминесцентный анализ, биосенсоры, стресс
2.7.2. Область научных интересов (коды по классификатору):
04-200
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ БИОЛОГИЯ
2.8.
04-230
Биохимия
04-240
Биофизика
Общее число публикаций:82
2.9.1. Почтовый индекс домашнего адреса:660036
2.9.2. Домашний адрес:г.Красноярск, Академгородок, д.13, кв.14
2.9.3. Почтовый индекс рабочего адреса:660041
2.9.4. Рабочий адрес:Красноярск, пр-т Свободный, 79, кафедра биофизики
2.10. Телефон рабочий:(3912)440841
2.11. Телефон домашний:(3912)495642
2.12. Факс:(3912)495642
2.13. Электронный адрес:VKratasyuk@yandex.ru
2.14. Участие в проекте:руководитель
2.15. Участие в других проектах, поддерживаемых РФФИ или другими организациями:РФФИ, 07-04-08456-з, РРФФИ,
07-04-01340-а, РРФФИ, 07-04-96802-р_енисей_а, И
2.16. Номер страхового свидетельства государственного пенсионного страхования:027-910-447-50
2.17. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) - физического лица:246300980803
ФОРМА 2. ДАННЫЕ О РУКОВОДИТЕЛЕ И ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЯХ
2.1.1. Фамилия, Имя, Отчество:Белосков Николай Александрович
2.1.2. Фамилия, Имя, Отчество (на английском языке):Beloskov Nikolay Aleksandrovich
2.2.1. Дата рождения:10.04.1985
2.2.2. Пол:мужской
2.3.1. Ученая степень:Без ученой степени
2.3.2. Год присуждения ученой степени:
2.4.1. Ученое звание:Без ученого звания
2.4.2. Год присвоения ученого звания:
2.5.1. Полное название организации - места работы:Научно исследовательская часть Красноярского
государственного университета
2.5.2. Сокращенное название организации - места работы:КрасГУ НИЧ
2.5.3. ИНН организации - места работы:2463011853/246302002
2.6.
Должность:Студент
2.7.1. Область научных интересов (ключевые слова):биолюминесценция, биолюминесцентный анализ,
иммобилизация, экология
2.7.2. Область научных интересов (коды по классификатору):
2.8.
Общее число публикаций:2
2.9.1. Почтовый индекс домашнего адреса:660095
2.9.2. Домашний адрес:г. Красноярск, пр-т Красноярский рабочий, д.106А, кв.18
2.9.3. Почтовый индекс рабочего адреса:660041
2.9.4. Рабочий адрес:г. Красноярск, Свободный пр-т, 79 кафедра биофизики
2.10. Телефон рабочий:(3912)494242; 440841
2.11. Телефон домашний:
2.12. Факс:(3912)448781
2.13. Электронный адрес:aleka1985@yandex.ru
2.14. Участие в проекте:исполнитель
2.15. Участие в других проектах, поддерживаемых РФФИ или другими организациями:Федеральное агентство по
науке и образованию, 2006-РИ-19.0/001/454, И
2.16. Номер страхового свидетельства государственного пенсионного страхования:141-236-848-38
2.17. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) - физического лица:
ФОРМА 2. ДАННЫЕ О РУКОВОДИТЕЛЕ И ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЯХ
2.1.1. Фамилия, Имя, Отчество:Ветрова Елена Владимировна
2.1.2. Фамилия, Имя, Отчество (на английском языке):Vetrova Elena Vladimirovna
2.2.1. Дата рождения:02.01.1975
2.2.2. Пол:женский
2.3.1. Ученая степень:кандидат биологических наук
2.3.2. Год присуждения ученой степени:2003
2.4.1. Ученое звание:Без ученого звания
2.4.2. Год присвоения ученого звания:
2.5.1. Полное название организации - места работы:Институт биофизики СО РАН
2.5.2. Сокращенное название организации - места работы:ИБФ СО РАН
2.5.3. ИНН организации - места работы:2463030912/246301001
2.6.
Должность:Научный сотрудник
2.7.1. Область научных интересов (ключевые слова):физико-химическая биология, биолюминесценция, редокспроцессы
2.7.2. Область научных интересов (коды по классификатору):
2.8.
Общее число публикаций:9
2.9.1. Почтовый индекс домашнего адреса:660036
2.9.2. Домашний адрес:г. Красноярск, Академгородок, д.4, кв.18
2.9.3. Почтовый индекс рабочего адреса:660036
2.9.4. Рабочий адрес:г. Красноярск, Академгородок, ИБФ СО РАН
2.10. Телефон рабочий:(3912)494242
2.11. Телефон домашний:
2.12. Факс:(3912)433400
2.13. Электронный адрес:vetrova@ibp.ru
2.14. Участие в проекте:исполнитель
2.15. Участие в других проектах, поддерживаемых РФФИ или другими организациями:Грант РАН, программа
«Физико-химическая биология», ИCRDF и Министерство образования РФ, Y1-B-02-12, ИРФФИ-ККФН
05-03-97701-р_енисей_а, ИCRDF, KY-002-X1, РРГНФ, 06-06-00229a, ИГранты Президента РФ, MK
1950.2005.4, РBritish Development Bank, ELSP/B3/Gr/001/011, И
2.16. Номер страхового свидетельства государственного пенсионного страхования:033-023-921-99
2.17. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) - физического лица:246301102671
ФОРМА 2. ДАННЫЕ О РУКОВОДИТЕЛЕ И ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЯХ
2.1.1. Фамилия, Имя, Отчество:Есимбекова Елена Николаевна
2.1.2. Фамилия, Имя, Отчество (на английском языке):Esimbekova Elena Nikolaevna
2.2.1. Дата рождения:29.08.1969
2.2.2. Пол:женский
2.3.1. Ученая степень:кандидат биологических наук
2.3.2. Год присуждения ученой степени:2000
2.4.1. Ученое звание:Без ученого звания
2.4.2. Год присвоения ученого звания:
2.5.1. Полное название организации - места работы:Институт биофизики СО РАН
2.5.2. Сокращенное название организации - места работы:ИБФ СО РАН
2.5.3. ИНН организации - места работы:2463030912/246301001
2.6.
Должность:Научный сотрудник
2.7.1. Область научных интересов (ключевые слова):физико-химическая биология, биолюминесценция,
иммобилизация, биосенсоры, биотестирование
2.7.2. Область научных интересов (коды по классификатору):
04-230
Биохимия
04-240
2.8.
Биофизика
Общее число публикаций:30
2.9.1. Почтовый индекс домашнего адреса:660036
2.9.2. Домашний адрес:г. Красноярск, Академгородок д.23, кв. 132
2.9.3. Почтовый индекс рабочего адреса:660036
2.9.4. Рабочий адрес:Красноярск, Академгородок, Институт биофизики СО РАН
2.10. Телефон рабочий:(3912)494242
2.11. Телефон домашний:(3912)907685
2.12. Факс:(3912)433400
2.13. Электронный адрес:esim@akadem.ru
2.14. Участие в проекте:исполнитель
2.15. Участие в других проектах, поддерживаемых РФФИ или другими организациями:CRDF REC002, KY-002-X1,
РРФФИ-ККФН 05-03-97701-р_енисей_а, ИCRDF и Министерство образования РФ Y1-B-02-11,
ИФедеральное агентство по науке и образованию, 2006-РИ-19.0/001/454, ИРГНФ, 06-06-00229a,
ИПрограмма СО РАН по молекулярной и клеточной биологии, 10-7, И Федеральное агентство по науке
и образованию, 2006-РИ-19.0/001/454, И
2.16. Номер страхового свидетельства государственного пенсионного страхования:080-506-527-43
2.17. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) - физического лица:246300986837
ФОРМА 2. ДАННЫЕ О РУКОВОДИТЕЛЕ И ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЯХ
2.1.1. Фамилия, Имя, Отчество:Парфенчук Татьяна Александровна
2.1.2. Фамилия, Имя, Отчество (на английском языке):Parfenchuk Tatyana Aleksandrovna
2.2.1. Дата рождения:30.12.1984
2.2.2. Пол:женский
2.3.1. Ученая степень:Без ученой степени
2.3.2. Год присуждения ученой степени:
2.4.1. Ученое звание:Без ученого звания
2.4.2. Год присвоения ученого звания:
2.5.1. Полное название организации - места работы:Научно исследовательская часть Красноярского
государственного университета
2.5.2. Сокращенное название организации - места работы:КрасГУ НИЧ
2.5.3. ИНН организации - места работы:2463011853/246302002
2.6.
Должность:Студент
2.7.1. Область научных интересов (ключевые слова):биотехнология, биолюминесценция, иммобилизация
ферментов, биосенсоры
2.7.2. Область научных интересов (коды по классификатору):
2.8.
Общее число публикаций:
2.9.1. Почтовый индекс домашнего адреса:660025
2.9.2. Домашний адрес:г. Красноярск, ул. Красноярский рабочий, д.118, кв.139
2.9.3. Почтовый индекс рабочего адреса:660041
2.9.4. Рабочий адрес:г. Красноярск, Свободный пр-т, 79 кафедра биофизики
2.10. Телефон рабочий:(3912)494242; 440841
2.11. Телефон домашний:
2.12. Факс:(3912)448781
2.13. Электронный адрес:tanchik4584@mail.ru
2.14. Участие в проекте:исполнитель
2.15. Участие в других проектах, поддерживаемых РФФИ или другими организациями:Федеральное агентство по
науке и образованию, 2006-РИ-19.0/001/454, И
2.16. Номер страхового свидетельства государственного пенсионного страхования:134-044-931-30
2.17. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) - физического лица:245306773985
ФОРМА 2. ДАННЫЕ О РУКОВОДИТЕЛЕ И ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЯХ
2.1.1. Фамилия, Имя, Отчество:Прохорова Елена Владимировна
2.1.2. Фамилия, Имя, Отчество (на английском языке):Prochorova Elena Vladimirovna
2.2.1. Дата рождения:18.06.1983
2.2.2. Пол:женский
2.3.1. Ученая степень:Без ученой степени
2.3.2. Год присуждения ученой степени:
2.4.1. Ученое звание:Без ученого звания
2.4.2. Год присвоения ученого звания:
2.5.1. Полное название организации - места работы:Институт биофизики СО РАН
2.5.2. Сокращенное название организации - места работы:ИБФ СО РАН
2.5.3. ИНН организации - места работы:2463030912/246301001
2.6.
Должность:Аспирант
2.7.1. Область научных интересов (ключевые слова):биолюминесценция, редокс-процессы
2.7.2. Область научных интересов (коды по классификатору):
2.8.
Общее число публикаций:2
2.9.1. Почтовый индекс домашнего адреса:660075
2.9.2. Домашний адрес:г. Красноярск, ул. Маерчака, д.45, кв.12
2.9.3. Почтовый индекс рабочего адреса:660036
2.9.4. Рабочий адрес:г. Красноярск, Академгородок, ИБФ СО РАН
2.10. Телефон рабочий:(3912)494242
2.11. Телефон домашний:(3912)205598
2.12. Факс:(3912)433400
2.13. Электронный адрес:prochorova@list.ru
2.14. Участие в проекте:исполнитель
2.15. Участие в других проектах, поддерживаемых РФФИ или другими организациями:CRDF, KY-002-X1,
ИФедеральное агентство по науке и образованию, 2006-РИ-19.0/001/454, И
2.16. Номер страхового свидетельства государственного пенсионного страхования:124-644-109-36
2.17. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) - физического лица:246007169287
ФОРМА 2. ДАННЫЕ О РУКОВОДИТЕЛЕ И ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЯХ
2.1.1. Фамилия, Имя, Отчество:Реммель Наталья Николаевна
2.1.2. Фамилия, Имя, Отчество (на английском языке):Remmel Natalia Nikolaevna
2.2.1. Дата рождения:02.11.1971
2.2.2. Пол:женский
2.3.1. Ученая степень:кандидат биологических наук
2.3.2. Год присуждения ученой степени:2003
2.4.1. Ученое звание:Без ученого звания
2.4.2. Год присвоения ученого звания:
2.5.1. Полное название организации - места работы:Научно исследовательская часть Красноярского
государственного университета
2.5.2. Сокращенное название организации - места работы:КрасГУ НИЧ
2.5.3. ИНН организации - места работы:2463011853/246302002
2.6.
Должность:Старший преподаватель
2.7.1. Область научных интересов (ключевые слова):светящиеся бактерии, биолюминесцентный анализ,
свободные радикалы, окислительный стресс, антиоксидантные системы, симбиоз, экологическая ниша
2.7.2. Область научных интересов (коды по классификатору):
2.8.
Общее число публикаций:7
2.9.1. Почтовый индекс домашнего адреса:660028
2.9.2. Домашний адрес:Красноярск, ул. Омская, д. 16, кв. 65
2.9.3. Почтовый индекс рабочего адреса:660041
2.9.4. Рабочий адрес:Красноярск, пр-т Свободный, 79
2.10. Телефон рабочий:(3912)446740
2.11. Телефон домашний:(3912)983548
2.12. Факс:(3912)448781
2.13. Электронный адрес:remmel@lan.krasu.ru
2.14. Участие в проекте:исполнитель
2.15. Участие в других проектах, поддерживаемых РФФИ или другими организациями:ККФН, 14G219, РCRDF, KY-002X1, ИРГНФ, 06-06-00229a, ИCRDF, Y2-B-02-19Федеральное агентство по науке и образованию, 2006РИ-19.0/001/454, И
2.16. Номер страхового свидетельства государственного пенсионного страхования:027-910-449-52
2.17. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) - физического лица:246000823260
ФОРМА 2. ДАННЫЕ О РУКОВОДИТЕЛЕ И ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЯХ
2.1.1. Фамилия, Имя, Отчество:Суковатая Ирина Егоровна
2.1.2. Фамилия, Имя, Отчество (на английском языке):Sukovataya Irina Egorovna
2.2.1. Дата рождения:22.04.1972
2.2.2. Пол:женский
2.3.1. Ученая степень:кандидат биологических наук
2.3.2. Год присуждения ученой степени:2000
2.4.1. Ученое звание:Без ученого звания
2.4.2. Год присвоения ученого звания:
2.5.1. Полное название организации - места работы:ФГОУ ВПО ``Сибирский федеральнфй университет''
2.5.2. Сокращенное название организации - места работы:СибФУ
2.5.3. ИНН организации - места работы:
2.6.
Должность:Доцент
2.7.1. Область научных интересов (ключевые слова):бактериальная биолюминесценция, ферменты,
ферментативный катализ, механизмы ферментативного катализа, белковая стабильность, связывание
с лигандами, биокатализ в нетрадиционных реакционных средах
2.7.2. Область научных интересов (коды по классификатору):
04-200
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ БИОЛОГИЯ
2.8.
04-230
Биохимия
04-240
Биофизика
Общее число публикаций:20
2.9.1. Почтовый индекс домашнего адреса:660028
2.9.2. Домашний адрес:г. Красноярск, ул. Ладо Кецховели, д.75, кв.94
2.9.3. Почтовый индекс рабочего адреса:660041
2.9.4. Рабочий адрес:г. Красноярск, пр. Свободный, 79
2.10. Телефон рабочий:(3912)440841
2.11. Телефон домашний:(3912)984666
2.12. Факс:(3912)448781
2.13. Электронный адрес:irinas@lan.krasu.ru
2.14. Участие в проекте:исполнитель
2.15. Участие в других проектах, поддерживаемых РФФИ или другими организациями:РФФИ, 07-04-01340а, ИРГНФ,
06-06-00229а , ИGrant of British Development Bank № ELSP/B3/Gr/001/011 Krasnoyarsk state university.
The development of educational institutions having the correspondence high school, И
2.16. Номер страхового свидетельства государственного пенсионного страхования:069-311-039-52
2.17. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) - физического лица:246300928360
ФОРМА 2. ДАННЫЕ О РУКОВОДИТЕЛЕ И ОСНОВНЫХ ИСПОЛНИТЕЛЯХ
2.1.1. Фамилия, Имя, Отчество:Торгашина Ирина Геннадьевна
2.1.2. Фамилия, Имя, Отчество (на английском языке):Torgashina Irina Gennadevna
2.2.1. Дата рождения:28.05.1982
2.2.2. Пол:женский
2.3.1. Ученая степень:Без ученой степени
2.3.2. Год присуждения ученой степени:
2.4.1. Ученое звание:Без ученого звания
2.4.2. Год присвоения ученого звания:
2.5.1. Полное название организации - места работы:Научно исследовательская часть Красноярского
государственного университета
2.5.2. Сокращенное название организации - места работы:КрасГУ НИЧ
2.5.3. ИНН организации - места работы:2463011853/246302002
2.6.
Должность:Аспирант
2.7.1. Область научных интересов (ключевые слова):биотехнология, биолюминесценция, иммобилизация
ферментов, биосенсоры
2.7.2. Область научных интересов (коды по классификатору):
2.8.
Общее число публикаций:2
2.9.1. Почтовый индекс домашнего адреса:660118
2.9.2. Домашний адрес:г. Красноярск, ул. 9 Мая, д.45-а, кв.2
2.9.3. Почтовый индекс рабочего адреса:660041
2.9.4. Рабочий адрес:г. Красноярск, Свободный пр-т, 79, кафедра биофизики
2.10. Телефон рабочий:(3912)494242; 440841
2.11. Телефон домашний:(3912)553627
2.12. Факс:(3912)448781
2.13. Электронный адрес:torira@mail.ru
2.14. Участие в проекте:исполнитель
2.15. Участие в других проектах, поддерживаемых РФФИ или другими организациями:CRDF, KY-002-X1, РПрограмма
СО РАН по физикохимической биологии, 10-7, И Федеральное агентство по науке и образованию,
2006-РИ-19.0/001/454, И
2.16. Номер страхового свидетельства государственного пенсионного страхования:125-560-878-65
2.17. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН) - физического лица:246511337623
ФОРМА 3. ДАННЫЕ ОБ ОРГАНИЗАЦИИ
3.1.
Сокращенное название:ИБФ СО РАН
3.2.1. Полное название:Институт биофизики СО РАН
3.2.2. Полное название на английском языке:Institute of Biophysics RAS (Sib. Div.)
3.3.
Ведомственная принадлежность:СО РАН - Сибирское отделение РАН
3.4.1. Почтовый индекс:660036
3.4.2. Почтовый адрес:г. Красноярск, Академгородок, д. 50, стр. 50
3.5.
Город, населенный пункт:Красноярск
3.6.
Код региона:19 - Красноярский край
3.7.
Телефон руководителя организации:(3912)43-15-79
3.8.
Телефон бухгалтерии организации:(3912)43-09-00
3.9.
Факс организации:(3912)43-34-00
3.10. Вид организации:
Ф
- Организация финансирования проекта
К
- Организация исполнения проекта
3.11. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН):2463030912
3.12. Код причины постановки организации на учет (КПП):246301001
3.13. Электронный адрес организации:ibp@ibp.krasnoyarsk.su
Подпись главного бухгалтера организации:Место печати
ФОРМА 3. ДАННЫЕ ОБ ОРГАНИЗАЦИИ
3.1.
Сокращенное название:НИЧ КГУ
3.2.1. Полное название:Красноярский государственный университет, Научно-исследовательская часть
3.2.2. Полное название на английском языке:Scientific department of Krasnoyarsk state university
3.3.
Ведомственная принадлежность:Минобразнаука России - Министерство образования и науки Российской
Федерации
3.4.1. Почтовый индекс:660041
3.4.2. Почтовый адрес:г. Красноярск, Свободный пр-т, д.79
3.5.
Город, населенный пункт:Красноярск
3.6.
Код региона:19 - Красноярский край
3.7.
Телефон руководителя организации:(3912)448790
3.8.
Телефон бухгалтерии организации:(3912)448669
3.9.
Факс организации:(3912)448781
3.10. Вид организации:
Р
- Организация - место работы руководителя проекта
3.11. Идентификационный номер налогоплательщика (ИНН):246301185
3.12. Код причины постановки организации на учет (КПП):246302002
3.13. Электронный адрес организации:nich@lan.krasu.ru
Подпись главного бухгалтера организации:Место печати
ФОРМА 4. СОДЕРЖАНИЕ ИНИЦИАТИВНОГО ПРОЕКТА
4.1.
Фундаментальная научная проблема, на решение которой направлен проект:В последние годы получено
много новых данных о молекулярной организации клетки. Клетку уже больше не рассматривают
просто как вместилище равномерно распределенных ферментов и субстратов, так как установлено,
что ее составные части и происходящие в ней процессы организованы совершенно определенным
образом. Например, метаболические пути функционируют более эффективно, если субстраты для
ферментативных реакций оказываются в соответствующем месте в нужное время. Исследование
высокоочищенных ферментов в разбавленных растворах, где кинетика реакции соответствует
уравнению Михаэлиса-Ментен, много дало для понимания их поведения в этих условиях. Однако
большинство внутриклеточных ферментов никогда не функционирует в условиях, отвечающих
уравнению Михаэлиса-Ментен, и обычно находится не в разбавленном растворе, а в сложной
неоднородной среде (М. Тривен Иммобилизованные ферменты. М.: Мир. 1983). Кроме того, в
последние годы получено немало доказательств того, что многие ферменты в клетках работают в
виде структурно и кинетически единых комплексов. В них проходит цепь последовательных
процессов, когда продукт первого фермента является субстратом для второго фермента и т.д. (Т.Т.
Березов, Б.Ф. Коровкин Биологическая химия. М.: Медицина, 1998.). С этой точки зрения гораздо
важнее исследовать функционирование не отдельно взятого фермента, а цепей сопряженных
ферментативных реакций. Прямые исследования этих комплексов в клетке произвести трудно.
Поэтому весьма актуальной для понимания процессов, происходящих в клетке, является создание
моделей структурно и кинетически единых ферментативных комплексов, находящихся в
соответствующем микроокружении.
4.2.
Конкретная фундаментальная задача в рамках проблемы, на решение которой направлен проект:Для решения
фундаментальной задачи понимания механизмов сопряжения и функционирования ферментативных
метаболических цепей в клетке используются разные подходы, одним из которых является
исследование работы ферментов в условиях различного микроокружения, в том числе при
иммобилизации. Для того чтобы лучше понять поведение и регуляцию ферментов in vivo, было
предпринято много попыток изучить влияние на них условий иммобилизации и определенной
гетерогенной среды, а затем соотнести полученные сведения с ситуацией in vivo (Mattiason G.,
Mosbach K. Biochim. Biophys. Acta, 235, 253. 1971). Уникальные возможности для подобного рода
исследований представляет собой бактериальная люцифераза – фермент, участвующий в
преобразовании энергии химической связи в излучение видимого оптического диапазона.
Действительно, люцифераза обладает существенным преимуществом благодаря удобному параметру
регистрации ее активности посредством измерения интенсивности свечения. Проведение прямых
экспериментов на живых светящихся организмах затруднено, так как работает сложная цепь
метаболических процессов, а клеточная оболочка препятствует прямому воздействию на клетку. С
другой стороны, использование выделенных фермент-субстратных систем для интерпретации
процессов, происходящих внутри клетки, часто приводит к артефактам, так как в системах in vitro
нарушаются все связи, имеющиеся у люциферазы в клетке, и исследователь имеет дело с
люциферазой, извлеченной из привычного и оптимального для нее окружения - вязкость среды и
микроокружение люциферазы в клетке значительно отличаются от таковых в пробирке. Таким
образом, ответа на вопрос о структурно-функциональной организации люминесцентной системы
светящихся бактерий до сих пор нет.По аналогии с известным, но не всегда доказанным
предположением о том, что ферменты многих метаболических путей связаны с теми или иными
мембранными структурами клетки (Garrett R.H., Grisham C.M. Biochemistry. Thomson Learning. 1999),
имеются все основания считать, что, не смотря на высокую растворимость люциферазы (Светящиеся
бактерии. Новосибирск: Наука. 1984), она может быть связана внутри клетки с клеточными
структурами (Tu S.-C., Hastings W. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 77 (1). 1980). Проверка этого
предположения проводится в основном косвенными методами. Тем не менее, есть возможность на
примере бактериальной люциферазы создать экспериментальную модель, исследование которой
приведет к пониманию процессов функционирования цепей ферментов внутри клетки. При этом
предполагается, что иммобилизованная люцифераза и другие ферменты будут встраиваться в
матричную структуру геля, приобретать определенное строго фиксированное место в гелевом
микроокружении. При таком подходе возможно также конструирование связей между несколькими
ферментами, составляющими метаболическую цепочку. Поведение иммобилизованного фермента,
или цепей из 2-3 и более ферментов будет приближаться к естественному in vivo.Цель проекта –
разработка и исследование экспериментальной модели для изучения функционирования цепей
сопряжения ферментов внутри клетки на примере люминесцентной системы светящихся бактерий. В
качестве модели люминесцентной системы будет использована иммобилизованная в полимерные
гели различной природы сопряженная система НАДН:ФМН-оксидоредуктаза-люцифераза.
4.3.
Предлагаемые методы и подходы:Предлагается принципиально новый подход к изучению механизмов
сопряжения и функционирования цепей сопряжения ферментов в клетке - создание и исследование
иммобилизованных ферментативных комплексов. Будет создана экспериментальная модель, в
которой будет реконструирована цепь сопряжения люциферазы с другими ферментами светящихся
бактерий в матричной структуре геля. Благодаря совместной иммобилизации всех необходимых для
свечения компонентов (ферментов и субстратов) модель проявляет биолюминесцентную активность.
В модели имитируется вязкое микроокружение ферментов в матриксе, а также связь с мембранными
структурами. Оптимизация микроокружения достигается за счет подбора соответствующей
гелеобразующей системы в качестве носителей для иммобилизации. Используя полимерные
носители с различными физическими свойствами можно варьировать создаваемое ими
микроокружение для иммобилизованных ферментов. Для понимания процессов поведения и
регуляции ферментативной люминесцентной системы светящихся бактерий in vivo будет изучено
влияние иммобилизации и определенной гетерогенной среды на сопряженную биферментную
систему НАДН:ФМН-оксидоредуктаза-люцифераза. Наиболее перспективными для создания
оптимального микроокружения ферментов следует признать полимерные гели, позволяющие
добиться высокой каталитической активности иммобилизованных ферментов. Метод иммобилизации
в гели состоит в том, что молекулы фермента включаются в трехмерную сетку из тесно
переплетенных полимерных цепей, образующих гель. Среднее расстояние между соседними цепями
в геле меньше размера молекулы включенного фермента, поэтому он не может покинуть
полимерную матрицу и выйти в окружающий раствор. Поскольку многие ферменты в клетке
функционируют в тесном контакте с другими ее компонентами, в частности с углеводами и белками,
изучение поведения ферментов иммобилизованных на белковых и полисахаридных матрицах
позволяет понять закономерности их функционирования in vivo. В качестве носителей для
иммобилизации выбраны желатиновый и крахмальный гели, относящиеся к белкам и полисахаридам
соответственно. Изучение поведения и кинетики ферментов, иммобилизованных на белковых и
полисахаридных матрицах, позволит понять закономерности их функционирования in vivo и
взаимодействия с другими химическими компонентами матрикса клетки, определить ферменты, с
которыми люцифераза связана в метаболической цепи, истинные субстраты люциферазы, влияние
микроокружения внутриклеточного матрикса на взаимодействие субстратов и ферментов. Будет
проведено сравнение поведения фрагментов метаболических цепей с люциферазой в
экспериментальной модели и в растворе.Предлагаемые методы и подходы является оригинальными,
никем ранее не использованными, соответствуют мировому уровню исследования в области
биофизики биологических объектов. Исследования, проведенные на ферментах светящихся
бактерий, могут быть перенесены далее на другие метаболические пути клеток живых организмов.
4.4.
Ожидаемые в конце 2007 года научные результаты:
Этап 1. Январь – июнь 2007 г. Исследование возможности стабилизации биферментной системы
светящихся бактерий НАДН:ФМН-оксидоредуктаза-люцифераза путем иммобилизации ферментов.
Будут подобраны условия иммобилизации бактериальной люциферазы и НАДН:ФМНоксидоредуктазы, а также совместной иммобилизации биферментной системы НАДН:ФМНоксидоредуктаза-люцифераза в крахмальный и желатиновый гели, обеспечивающие высокий выход
активности ферментов. Будет исследована биолюминесценция растворимой биферментной системы,
функционирующей в условиях различной вязкости и биферментной системы, иммобилизованной в
гели различных концентраций и различной степени высушивания. Увеличение вязкости в растворе
будет достигаться путем добавления сахарозы в реакционную смесь. Кроме того, будут исследованы
возможности увеличения эффективности работы биферментной системы путем совместной
иммобилизации в гели различной природы ферментов и их субстратов и кофакторов. Особое
внимание будет уделено условиям, обеспечивающим стабилизацию биферментной системы
НАДН:ФМН-оксидоредуктаза-люцифераза. Предполагается, что стабильность ферментов при
иммобилизации в гель возрастет, поскольку включение фермента в матричную структуру геля
препятствует распаду на мономеры и образованию конгломератов белка. Кроме того, при совместной
иммобилизации ферментов высокая локальная концентрация люциферазы будет способствовать
быстрому удалению ФМНН2 из микроокружения НАДН:ФМН-оксидоредуктазы, препятствуя тем
самым протеканию обратной реакции. Таким образом, благодаря соответствующему расположению
ферментов последовательная цепь реакций будет протекать более эффективно. Это особенно
актуально для бактериальной биферментной системы, т.к. время, требуемое для одного
каталитического цикла намного больше, чем время жизни субстрата ФМНН2, который
автокаталитически окисляется кислородом менее чем за 1 с.
Этап 2. Июль – декабрь 2007 г. Сравнительный анализ физико-химических характеристик
растворимой НАДН:ФМН-оксидоредуктаза-люцифераза, иммобилизованной биферментной системы,
а также биферментной системы, иммобилизованной совместно с субстратами и кофакторами. Для
ответа на вопрос: образует ли оксидоредуктаза и люцифераза в растворе мультиферментный
комплекс или они действуют независимо, а сопряжение осуществляется общим промежуточным
продуктом ФМНН2 будет проведено сравнение физико-химических характеристик
иммобилизованной и растворимой биферментной системы (стабильность работы, рН-оптимум,
термостабильность и т.д.), рассчитаны энергия активации и константы скорости термоинактивации
ферментов. Будет исследовано влияние процесса иммобилизации в гели на специфичность
люциферазы к субстратам, а именно, вычислены константы Михаэлиса для иммобилизованных
ферментов и проведено сравнение с таковыми для ферментов в свободном растворе. Для
обеспечения различных условий микроокружения будут взяты растворы сахарозы, желатина и
крахмала различной концентрации. Таким образом, в 2007 г. будут найдены условия, при которых не
происходит инактивации и сохраняется высокая субстратная специфичность ферментов, что
наилучшим образом отвечает условиям работы ферментов in vivo.
4.5.
Современное состояние исследований в данной области науки, сравнение ожидаемых результатов с мировым
уровнем:На протяжении последних 20 лет иммобилизованные биолюминесцентные системы (главным
образом, светящиеся бактерии, светляковая и бактериальная люцифераза) остаются весьма
популярными среди исследователей. Однако интерес к этим системам вызван в первую очередь
перспективами биолюминесцентных иммобилизованных систем для аналитических измерений.
Действительно, получение иммобилизованных биолюминесцентных систем является ключевым для
создания биосенсоров и позволяет максимально упростить (в некоторых случаях полностью
автоматизировать) процедуру проведения анализов. В настоящее время разработано более 40
различных способов иммобилизации светящихся организмов и выделенных из них ферментов.
Чрезвычайно широка и область их использования – от аналитической химии (анализ НАДН, ФМН,
АТФ и других веществ), медицины (анализ D- и L-лактата, желчных кислот в сыворотке крови,
аминокислот аланина и фенилаланина, НАДН-зависимых ферментов и т.д.), пищевой
промышленности (анализ общей бактериальной обсемененности) до экологического мониторинга.
Однако, методы иммобилизации могут быть использованы не только для прикладных работ, но и
имеют огромный потенциал в области фундаментальных исследований. Известно несколько работ по
созданию моделей ферментативных комплексов с использованием иммобилизации. Однако по
отношению к светящимся организмам предлагаемая работа является пионерской. Исключение
составляет лишь иммобилизoванная в биогель люцифераза, с помощью которой изучали механизмы
реакции бактериальной биолюминесценции, в частности взаимодействие с альдегидами, оборот
фермента, свойства долгоживущего интермедиата люциферазы (Erlanger et al., Biochem. and Biophys.
Rcs. Communs. 1970. V.40. p.70-76). Однако связывание люциферазы с биогелем происходит с
участием активных групп фермента важных для катализа. Это приводит к существенной инактивации
фермента и мешает правильной количественной интерпретации результатов. В проекте предлагается
иммобилизация люциферазы в нейтральные гели(например, гели крахмала и желатина), при
которой не происходит ковалентного взаимодействия с активными группами ферментов и полностью
сохраняется их активность. Не обладающие токсичностью и не образующие в процессе
иммобилизации ковалентных связей с ферментом гели пригодны для моделирования окружения
ферментов, близкого к in vivo. При совместной иммобилизации 2-х ферментов достигается
дополнительное преимущество - субстрат для второго фермента (люциферазы) образуется
непосредственно в том месте, где расположен этот фермент, т.е. на поверхности полимера, и поэтому
реальная концентрация субстрата ФМНН2 вокруг люциферазы всегда выше, чем его средняя
концентрация во всем растворе, что наибольшей степени отвечает условиям in vivo. Поэтому
предлагаемые исследования принимаются мировым научным сообществом как новые и
перспективные.
4.6.
Имеющийся у коллектива научный задел по предлагаемому проекту: полученные ранее результаты:Авторы
проекта являются специалистами международного уровня в области исследования механизма,
метаболической и структурной организации люминесцентной системы светящихся бактерий.
Руководитель проекта занимается исследованиями процесса биолюминесценции светящихся
бактерий более 30 лет. Работа соискателей прошла многостадийную международную экспертизу: по
результатам исследований опубликованы более 30 статей в реферируемых журналах, учебное
пособие “Физико-химические основы биолюминесцентного анализа”, соискатели являются
участниками более 35 Международных научных конференций. Изучение иммобилизованных
биолюминесцентных систем – одна из приоритетных задач научных исследований авторов. В этой
области достигнуты значительные результаты: получены реагенты для биолюминесцентного анализа
на основе иммобилизованных светящихся бактерий и выделенных из них ферментных систем;
впервые в мире разработаны методы биолюминесцентного анализа с использованием
иммобилизованных реагентов для проведения экологического мониторинга, анализа степени
эндотоксикоза у хирургических и терапевтических больных, для определения степени поражения
фузариозом зерна пшеницы и другие. По заказу Международного общества по биокапсулированию
авторами проекта был проведен анализ и обобщение накопленных научных результатов в области
иммобилизованных биолюминесцентных систем и написан обзор, опубликованный в 2003 г.
издательством Citus Books, UK (in Arshady R.Ed., Polymeric Biomaterials, The PBM Series, V.1:
Introduction to Polymeric Biomaterials, Citus Books, London, pp 301-343). Только авторам этого проекта
удалось получить иммобилизованный многокомпонентный дозированный реагент. В 2005 г.
технология была запатентована. Недавно стало понятно, что методы иммобилизации, применяемые
для получения иммобилизованных реагентов, могут быть использованы для исследования
фундаментальных процессов, происходящих в клетке, в частности для изучения симбиотических
отношений у светящихся бактерий (Kratasyuk et al.Immobilization of luminous bacteria into starch gel:
Light intensity and stability.//International Workshop on Bioencapsulation VI, (From fundamental to
industrial applications), Universitat Autonoma de Barcelona, Belaterra, Barcelona, Aug.29th - Sept.1st,
Barselona, Spain, Ed. F. Godia, D. Poncelet, 1997, Talk 13, 4 pages.), проблем взаимодействия ферментов
с люциферазой. Предварительные исследования, проведенные с гелевой моделью люциферазы в
клетке (Кратасюк В.А. и др. //Биохимия. 1994. Т.59, Вып.7. с.1020-1026) показали перспективность
такого подхода не только для люциферазы, но и других ферментов. Таким образом, соискатели
гранта обладают высокой квалификацией, позволяющей им выполнить заявленную работу в срок.
4.7.1.
Список основных публикаций коллектива, наиболее близко относящихся к предлагаемому проекту:1. Кратасюк
В.А., Есимбекова Е.Н. Способ получения иммобилизованного многокомпонентного реагента для
биолюминесцентного анализа. Патент РФ № 2252963 (приоритет от 21.08.2003). Заявка № 2003
125836. 2. Kratasyuk V.A. Esimbekova E.N. Polymeric Biomaterials, The PBM Series, V.1:Introduction to
Polymeric Biomaterials, Arshady R (Ed), Citus Books, London 2003, pp 301-343.3. Кудряшева Н.С.,
Кратасюк В.А., Есимбекова Е.Н. «Физико-химические основы биолюминесцентного анализа». Учебное
пособие, 2002, Изд-во КрасГУ: Красноярск:154 с.4. Гительзон И.И., Кратасюк В.А. Биолюминесценция
в экологии – В кн.: Экологическая биофизика. Учебное пособие: В 3т. Под ред. И.И.Гительзона, Н.С.
Печуркина. Т.1. Фотобиофизика экосистем - М.Логос, 2002 – С.8-127.5. Kratasyuk V.A., Esimbekova E.N.
Immobilization of bioluminescent systems and their applications. In «Bioluminescence &
chemiluminescence: progress & current applications». Editors: Stanley, Pe & Kricka, Lj. Publisher: world
scientific publishing, 2005. P.237-240.6. Esimbekova E.N., Kratasyuk V.A., Torgashina I.G. Disk-shaped
immobilized multicomponent reagent for bioluminescent analyses: correlation between activity and
composition/ Enzyme and microbial technology, 2006. Принята в печать.7. Vetrova, E.V., Kotova S.A.,
Beloskov N.N., Esimbekova E.N., Remmel N.N., Kratasyuk V.A., Gitelson I.I. Bioluminescent signal system.
Part 1. Detection of the chemical toxicants in water. // Luminescence, 2006. Принята в печать.8.
Есимбекова Е.Н., Кратасюк В.А., Торгашина И.Г., Никифорова М.А. Иммобилизованный
многокомпонентный реагент для биолюминесцентных биотестов токсичности. //Приложение к
Вестнику КрасГАУ. Сборник научных статей № 1. Производство экологически безопасной продукции
(Проблемы и пути решения). 2005. с. 109-114.9. Кратасюк В.А., Егорова О.И., Есимбекова Е.Н.,
Кудряшева Н.С., Орлова Л.Ю. Люциферазный биотест для определения степени поражения
фузариозом зерна пшеницы. //"Прикладная биохимия и микробиология" 1998, N6. с.688-691.10.
Kudryasheva N.S., Kudinova I.Y., Esimbekova E.N., Kratasyuk V.A., Stom D.I. The influence of quinones and
phenols on the triple NAD(H)-depent enzyme systems. //Chemosphere, 1999, V.38 N4. p.751-758.11.
Kudryasheva N.S., Kratasyuk V.A., Esimbekova E.N., Vetrova E.V., Nemtseva E.N., Kudinova I.Y.
Development of the bioluminescent bioindicators for analyses of environmental pollutions. //J.Field
Analytical Chemistry and Technology, 1998, V.2 N5. p.277-280.12. Esimbekova E.N., Kratasyuk V.A.,
Abakumova V.V. Bioluminescent method to determine non-specific endotoxicosis in therapy.
//J.Luminescence, 1999. N 14. p.197-198.13. Кузнецов А.М., Тюлькова Н.А., Кратасюк В.А., Абакумова
В.В., Родичева.Э.К. Изучение характеристик реагентов для биолюминесцентных
биотестов.\\Сибирский экологический журнал, -1997 -№5, С.459-465.14. Kratasyuk V.A., Shilova E.V.,
Abakumova V.V., Rodicheva E.K. Immobilization of luminous bacteria into starch gel: Light intensity and
stability.//International Workshop on Bioencapsulation VI, Barcelona, Spain (Ed. F. Godia, D. Poncelet),
1997, Talk 13, 4 pages.15. Abakumova V.V., Kratasyuk V.A. Bioluminescent immobilized sensors.
//International Workshop on Bioencapsulation, Potsdam, Germany, September 22-25, 1996, Talk 10, 5
pages.16. Кратасюк. В.А., Абакумова В.В., Ким Н.Б. Гелевая модель функционирования люциферазы в
клетке. //Биохимия. 1994. т.59, вып.7. с.1020-1026.17.Shilova E.V., Abakumova V.V., Rodicheva E.K.,
Kratasyuk V.A. Immobilization of luminous bacteria into starch gel. Abstr.of the 8th European Congress on
Biotechnology, Budapest 17-21 august 1997, p.369.18. Шилова Е.В., Абакумова В.В., Родичева Э.К.,
Кратасюк В.А. Иммобилизация как способ консервации бактерий. Материалы VIII Всероссийского
симпозиума “Гомеостаз и окружающая среда”. Т.2/ Ред. В.П. Нефедов; Красноярск: КНЦ СО РАН,
1997, С.257-259.19. Суковатая И.Е. , Тюлькова Н.А. Моделирование физико-химических свойств
реакционной среды биолюминесцентной реакции» // Сборник материалов III Всероссийского
семинара «Моделирование неравновесных систем – 2000», Красноярск, 2000, с. 250251.20.Суковатая И.Е., Тюлькова Н.А. Влияние диэлектрических свойств среды на кинетические
параметры биолюминесцентной реакции // Вестник МГУ, серия: химия, 2000, т.41, N 6, стр. 8-11.21.
Sukovataya I.E., Tyulkova N.A. Kinetic analysis of bacterial bioluminescence in water-organic media //
Luminescence, 2001, 16, p.271-273.22. Суковатая И.Е. , Тюлькова Н.А. Эффекты органических
растворителей на бактериальную биолюминесцентную реакцию // Вестник МГУ: Химия, 2003, Т. 44,
с. 9-12.23. Rodicheva E.K. , Medvedeva S.E. , Tyulkova N.A., Kotov D.A., Kuznetsov A.M., Sukovataya I.E.
Bacterial bioluminescent system as visual indicator of metabolic and biocatalytic processes // In: Lima, N.
and Smith, D. (eds) Biological Resouce Centres and the Use of Microbes, Micoteca da Universidade do
Minho, Braga, 2003, p: 57-68.24. Суковатая И.Е., Тюлькова Н.А. Влияние микроокружения на
каталитическую активность и стабильность бактериальной люциферазы // Сборник трудов III
Съезда биофизиков России, Воронеж, 24 - 29 июня, 2004, т. 1, с. 109-110.25. Mezhevikin V.V.,
Sukovataya I.E., Tyulkova N.A. Kinetic investigation of bacterial luciferase // В книге: Akio Tsuji,
Masakatsu Matsumoto и др. (eds) “Bioluminescence and Chemiluminescence: Progress and Perspectives”,
World Scientific Publishing, Singapore, 2005, p. 79-82.
4.7.2.
Список основных публикаций руководителя проекта в рецензируемых журналах за последние 3 года:1. Кратасюк
В.А., Есимбекова Е.Н. Способ получения иммобилизованного многокомпонентного реагента для
биолюминесцентного анализа. Патент РФ № 2252963 (приоритет от 21.08.2003). Заявка № 2003
125836. 2. Kratasyuk V.A. Esimbekova E.N. Polymeric Biomaterials, The PBM Series, V.1: Introduction to
Polymeric Biomaterials, Arshady R (Ed), Citus Books, London 2003, pp 301-343.3. Esimbekova E.N.,
Kratasyuk V.A., Torgashina I.G. Disk-shaped immobilized multicomponent reagent for bioluminescent
analyses: correlation between activity and composition. //Enzyme and microbial technology, 2006.
Принята в печать.4. Vetrova, E.V., Kotova S.A., Beloskov N.N., Esimbekova E.N., Remmel N.N., Kratasyuk
V.A., Gitelson I.I. Bioluminescent signal system. Part 1. Detection of the chemical toxicants in water. //
Luminescence, 2006. Принята в печать.5. Kratasyuk V.A., Esimbekova E.N. Immobilization of
bioluminescent systems and their applications. In «Bioluminescence & chemiluminescence: progress &
current applications». Editors: Stanley, Pe & Kricka, Lj. Publisher: world scientific publishing, 2005. P.237240.
4.8.
Перечень оборудования и материалов, имеющихся у коллектива для выполнения проекта:Имеются помещения
и все технические условия для проведения работ по проекту. Имеется в наличии практически все
необходимое оборудование (хроматографическое оборудование для очистки белков,
регистрирующий спектрофотометр, планшетные и кюветные биолюминометры).Проект будет
выполнен с использованием оборудования Центра коллективного пользования Института биофизики
и Красноярского исследовательского центра СО РАН а также REC-002 «Енисей» Красноярского
госуниверситета, который включает следующее аналитическое оборудование: хроматографический
масс-спектрометр GCD Plus “Hewlett Packard” (США), двулучевой регистрирующий спектрофотометр
UVIKON-943 (Thermo Spectronic, USA), газовый хроматограф «Цвет-550», сканирующий
спектрофлуориметр AmicoBowman, Series 2 (Unicam Spectronics, USA), Планшетный биолюминометр
Luminoskan ascent (Thermo Electron Corp., Finland) высокоэффективный жидкостной хроматограф
“Milichrom-1” (Россия), биолюминометр BLM-8802 (Россия) с набором реагентов.Разработан
регламент получения лиофилизированных и иммобилизованных бактерий. Разработана технология
получения ферментов люминесцентной реакции люциферазы и НАДН-ФМН-оксидопедуктазы.
Имеется банк данных по результатам исследования биолюминесценции.
4.9.
Перечень оборудования и материалов, которые необходимо дополнительно приобрести, изготовить или
отремонтировать для успешного выполнения проекта:Для проведения биохимических анализов
необходимо дополнительно приобрести pH-метр, химические реактивы (соли для буфера, НАДН,
ФМН), мелкое оборудование (электроды для определения рН, пипетки и т.д.), расходные материалы
и химическую посуду на сумму 50000 руб. Участниками проекта являются студенты и аспиранты
Красноярского государственного университета и Института биофизики, выполняющие свои
дипломные и диссертационные работы по данной тематике. Поэтому, несмотря на то, что у
коллектива имеется в наличии все необходимое оборудование, для проведения экспериментов
необходимо приобрести дополнительный кюветный биолюминометр БЛМ 8800 (СКТБ «Наука»,
Россия) стоимостью 70000 рублей.
4.10.1. Сроки проведения в 2007 г. экспедиции по тематике проекта, если это необходимо:
4.10.2. Ориентировочная стоимость экспедиции (в руб.):
4.10.3. Регион проведения экспедиции:
4.10.4. Название района проведения экспедиции:
Подпись руководителя проекта: