Анализ протеома бактерии S.agalactiae, штамм 2603V/R А. Артемов, студент 1 курса Введение. Русское название бактерии Streptococcus agalactiae не определено, но в проекте существует вариант агалактийный стрептококк [2]. Вид S.agalactiae относят к роду Streptococcus, семейству Streptococcaceae, порядку Lactobacillales, классу Bacilli, типу Firmicutes, царству Bacteria [1] Вид бактерии в световой микроскоп см. в файле S_agalactiae.jpg (взят с сайта www.fujitahu.ac.jp/) . Вид бактерии Streptococcus agalactiae под электронным микроскопом (х 24.000) см. в файле S_agalactiae_m.jpg (взят с сайта http://www.primer.ru/) . Размеры 0,5 - 2 мкм Среда обитания и условия. Стрептококки группы В (Streptococcus agalactiae) являются представителями нормальной микрофлоры человека. Стрептококки группы В обычно присутствуют во влагалищной флоре у 1/3 здоровых женщин. В разных группах населения S. agalactiae обнаруживают в половом и желудочно-кишечном тракте 5 - 40% здоровых людей, которые являются носителями данных бактерий. Этот резервуар вместе с внутрибольничными очагами инфекции обеспечивает постоянное заражение детей, которое обычно происходит при рождении. Во время родов через естественные родовые пути 65—75 % новорожденных инфицируются стрептококками, если эта инфекция наблюдается у матери. Отмечены уретральная (в мочеиспускательном канале) и фарингеальная (в глотке) формы носительства. Также бактерии Streptococcus agalactiae могут жить и размножаться в вымени коров, что вызывает у коров мастит. S.agalactiae интересна в связи ее широкой распространенностью в микрофлоре человека, способностью становиться возбудителем мочеполовых инфекций человека и опасностью для новорожденных (у 0,5 - 1,0% новорождённых развивается стрептококковая пневмония (воспаление лёгких), сепсис и (или) менингит (воспаление оболочек головного мозга)). [3,4] Также бактерия вызывает мастит у коров. Геном бактерии S.agalactiae секвенирован для того, чтобы способствовать разработке новых способов борьбы с ней. Для отбора статей, посвященных среде обитания S.agalactiae, был составлен запрос (S* agalactiae[title] OR Streptococcus agalactiae[title]) AND (commensal OR pathogen) AND infection. В БД PubMed по запросу найдено 29 статей (из них 8 с доступным открыто полным текстом). В статье [5] дается обзор мастита у коров, вызванного S.agalactiae. Особенность бактерий S.agalactiae в том, что они имеют капсулу, состоящую из гиалуроновой кислоты, которая затрудняет фагоцитоз фагоцитами организма-хозяина. Геном и протеом S.agalactiae Статистические данные о геноме приведены в табл.1. Они взяты с сайта http://www.ebi.ac.uk/genomes/bacteria.html Табл.1 Статистические данные о геноме S.agalactiae Хромосома Число пар Число генов Суммарная или плазмида нуклеотидов длина генов (% от длины хромосомы или плазмиды) хр.1 кольцевая 2160267 2123 87% (*) Всего 2160267 2123 87% Суммарная длина межгенных промежутков (%) 13% 13% GC состав (%) 35.6% 35.6% Я вычислил длины межгенных промежутков в хромосоме 1, используя таблицу AE009948.S_agalactiae_V.Chromosome.CP с сайта ftp.ebi.ac.uk/pub/databases/integr8/chromosome_tables/ (см. файл S_agalactiae_chr_table.xls лист lengths). Учитывались только положительные межгенные промежутки, то есть те участки хромосомы, на которых действительно не записано никаких генов. Оказалось, что средняя длина межгенных промежутков – 167,88 пар оснований (п.о), общая – 295643 п.о., тогда как средняя длина генов 879,57 п.о., общая – 1867323 п.о. Таким образом, 14% всего генома не кодирует гены. Предполагаю, что в межгенных промежутках могут находится участки, ответственные за регуляцию экспрессии генов, например, промоторы. Также там могут находиться участки «испорченных» генов, то есть тех, у кого не стало start кодона, и прочий мусор. На 2 цепях расположено примерно одинаковая доля генов (48% на цепи F, 52% на цепи R) По данным с сайта http://www.ebi.ac.uk/genomes/bacteria.html число белков протеома S.agalactiae совпадает с числом генов (2123). Видимо, ген определяли как участок ДНК, с которого может синтезироваться белок Самый большой белок состоит из 2274 аминокислотных остатков (а.о.), тогда как самый маленький – всего из 23 а.о. (см. диаграмму Protein length distribution). Наиболее часто встречаются белки из 200-400 а.о. Я построил гистограмму длин белков S.agalactiae (см. файл S_agalactiae_chr_table.xls лист prot_hist). Предлагаю следующее деление белков по их размеру (табл.2). При нём распределение напоминает нормальное. Табл.2 Распределение протеома S.agalactiae по категориям на основании их размера, исчисляемого в числе а.о. Категория Критерий (а.о.) Число белков (%) Маленькие < 100 17 0.80% Небольшие 100-500 611 28.78% Средние 500-1000 825 38.86% Большие 1000-2000 554 26.10% Очень большие >2000 116 5.46% На основании данных из табл.2 оцениваю по размеру мой белок MURG из генома E.coli , содержащий 355 а.о., как небольшой. Литература [1] NCBI – National Center for Biotechnology Information: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?lvl=0&id=240292 ) [2] http://www.umj.com.ua/pdf/53/1915.pdf [3] http://www.primer.ru/std/gallery_std2/streptococcus.htm [4] http://www.ebi.ac.uk/2can/genomes/genomes.html?http://www.ebi.ac.uk/2can/genomes/bacteria/ Streptococcus_agalactiae.html [5] Can Vet J. 1997 July; 38(7): 429–437.