1 Министерство здравоохранения РФ Ставропольская государственная медицинская академия Методическое пособие по частной микробиологии с вирусологией и иммунологией для студентов лечебного факультета Ставрополь 2010 г. 2 УДК 616- 0931 -098 (07) Методическое пособие по частной микробиологии для студентов лечебного факультета. Ставрополь – Изд: СГМА, С.39 Составители: зав. каф. проф. И. А. Базиков, доценты А.Х. Казиев, Е.В. Лысогора, ассистенты И. В. Климанович, В.А. Лысогора, М.М. Минасян, Е. В. Чекрыгина Ставропольская государственная медицинская академия 3 ПЛАНЫ ЗАНЯТИЙ ПО ЧАСТНОЙ МИКРОБИОЛОГИИ ДЛЯ СТУДЕНТОВ ЛЕЧЕБНОГО ФАКУЛЬТЕТА ПЕРЕЧЕНЬ ОСНОВНЫХ ТЕОРЕТИЧЕСКИХ ВОПРОСОВ, ОБСУЖДАЕМЫХ НА ЛЕКЦИЯХ И ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЯХ ПО ЧАСТНОЙ МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ 1. Краткая характеристика и формы заболевания. 2. Классификация возбудителей и формы заболевания. 3. Основные биологические свойства возбудителей заболевания (морфология, ультраструктура, тинкториальные, культуральные, биохимические, резистентные, антигенные, факторы патогенности, патогенность для животных). 4. Патогенез и иммунитет. 5. Эпидемиология (источник заражения, факторы передачи инфекции, механизм заражения и восприимчивый организм). 6. Лабораторные методы диагностики (материал для исследования, питательные среды, основные, ориентировочные, ретроспективные, ускоренные, экспресс методы диагностики, а также методы индикации и идентификации). 7. Препараты для специфической диагностики, профилактики и лечения. (Содержание, изготовление, применение) 4 ЗАНЯТИЕ 1 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА КОЛИ-ИНФЕКЦИИ. Семейство: Enterobacteriaceae Род: Еsherichia Вид: E. coli А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Самостоятельное изучение демонстрационного материала: а) морфология кишечной палочки в мазках, окрашенных по Граму; б) стенд-информация по теме: " Кишечное семейство бактерий"; 2 коли-инфекции. БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД: - первый этап: посев исследуемого материала на среду Эндо; - второй этап: учет результатов роста на среде Эндо, микроскопия подозрительных колоний; а) постановка реакции агглютинации на стекле со смесью ОВагглютинирующих сывороток и материалом из колоний; б) по результатам положительной реакции агглютинации сделать пересев красной колонии на скошенный агар; в) агглютинирующие сыворотки (диагностические), их получение. -третий этап: изучение чистой культуры на скошенном агаре; а) микроскопия мазков (окраска по Граму) б) пересев на "пестрый ряд"; в) постановка развернутой реакции агглютинации с моноспецифическими сыворотками; г) учет результатов роста на средах "пестрого" ряда, учет развернутой реакции агглютинации; Вывод: заключение по бактериологическому исследованию. 3. Санитарно-бактериологическое исследование воды: определение колититра двухфазным бродильным методом. Б. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Почему кишечную палочку считают санитарно – показательным микроорганизмом при загрязнении внешней среды? б) Что такое коли – титр и коли – индекс? в) Какое антигенное строение кишечной палочки? г) Как выделяют чистую культуру диареегенной кишечной палочки? д) Какой антиген (О или К) определяют в реакции агглютинации с живой культурой? е) Как обнаруживается О – антиген у кишечной палочки? 5 ж) По какому антигену окончательно судят о принадлежности бактерий к патогенному серовару? з) На какие категории и по каким признакам подразделяют диареегенные кишечные палочки? и) Какими факторами патогенности обладают энтеротоксигенные кишечные палочки? Каков генетический контроль их синтеза? к) Чем обусловлена патогенность энтеротоксигенных кишечных палочек? л) Чем обусловлена патогенность энтероинвазивных кишечных палочек? м) Чем объясняется некоторое антигенное и патогенное сходство энтероинвазивных кишечных палочек и шигелл? н) С чем связана патогенность энтерогеморрагических кишечных палочек? о) Каковы основные способы заражения диареегенными кишечными палочками? п) Можно ли отличить колонии диареегенных кишечных палочек от колоний непатогенных кишечных палочек на дифференциально диагностических средах? Если можно, то в каких случаях? II. Письменное задание: а) Роль неспецифической защиты при коли-инфекциях. Записать определение коли-титра двухфазным бродильным методом. б) Решение ситуационных задач по теме занятия. ЗАНЯТИЕ 2 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРЮШНОГО ТИФА, ПАРАТИФОВ И ДИЗЕНТЕРИИ. Семейство: Enterobacteriаceae Род: Salmonella Род: Shigella Виды: S. typhi – возб. тифа Виды: S. flexneri – возб. дизентерии S. paratyphi А- возб. паратифа А S. Sonnei возб. дизентерии S. schotmulleri – возб. паратифа В S. dysenteriae- возб. дизентерии S. boydii возб. дизентерии А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Общая характеристика основных представителей: а) демонстрация морфологии возбудителей брюшного тифа, паратифов и бактериальной дизентерии в окраске по Граму; б) демонстрация биохимической активности этих представителей (короткий "пестрый" ряд), демонстрация роста на дифференциальнодиагностических средах (Эндо, Плоскирева, Левина, висмут-сульфит агар). 2. Бактериологический метод диагностики брюшного тифа, паратифов, дизентерии: а) выделение гемокультуры (демонстрация) - 1 неделя заболевания; 6 б) выделение копрокультуры - 3 неделя заболевания. Посев испражнений на среду обогащения Мюллера и среды Эндо и Плоскирева; 3. Серологичесский метод диагностики - 2 неделя заболевания; а) учет результатов реакции Видаля и диз.Видаля; б) диагностикумы, используемые в этих реакциях. В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Чем отличаются сальмонеллы брюшного тифа от сальмонелл паратифов А и В по биохимическим свойствам? б) Какова антигенная структура сальмонелл? в) Какие микробиологические методы используются для диагностики брюшного тифа и паратифов? г) Какой материал берется для ранней диагностики брюшного тифа и как этот материал исследуется? д) Почему при серологической диагностике брюшного тифа используются «О» и «Н» - антигены? е) Какое значение имеет исследование испражнений при брюшном тифе и паратифах? ж) Каков порядок исследования испражнений? з) Какой материал берется для бактериологического исследования на брюшнотифозное бактерионосительство и каким образом он исследуется? и) Как осуществляется серологическая диагностика брюшнотифозного бактерионосительства? к) Каковы особенности патогенеза брюшного тифа? л) Какие существуют иммунопрепараты для профилактики брюшного тифа и паратифов? II. Письменное задание: 1. Записать качественный состав элективных и дифференциальнодиагностических сред для возбудителей кишечного семейства. 2. Какие результаты реакции Видаля подтверждают клинический диагноз брюшного тифа у детей и взрослых. Решение ситуационных задач по теме занятия. ЗАНЯТИЕ 3 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРЮШНОГО ТИФА, ПАРАТИФОВ И БАКТЕРИАЛЬНОЙ ДИЗЕНТЕРИИ (ПРОДОЛЖЕНИЕ). Семейство: Enterobacteriаceae Род: Salmonella Род: Shigella Виды: S. typhi – возб. тифа Виды: S. flexneri – возб. дизентерии S. paratyphi А- возб. паратифа А S. Sonnei возб. дизентерии S. schotmulleri – возб. паратифа В S. dysenteriae- возб. дизентерии S. boydii возб. дизентерии А. Обсуждаемые вопросы: 7 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: Выделение копрокультуры. - второй этап: учет результатов роста на средах Мюллера, Эндо, Плоскирева. микроскопия отдельных колоний, окраска по Граму, пересев на среду Ресселя и скошенный агар для получения чистой культуры. - третий этап: а) микроскопия культуры со скошенного агара, окраска по Граму; б) учет результатов роста копрокультуры на среде Ресселя; в) посев копрокультуры на "пестрый" ряд, демонстрация учета; г) постанова развернутой реакции агглютинации с копрокультурой и специфическими агглютинирующими сыворотками, демонстрация учета; 2. Демонстрация биопрепаратов: вакцины, диагностические сыворотки, диагностикумы, бактериофаги. В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Какие микроорганизмы являются возбудителями дизентерии? б) Какие принципы используют для классификации возбудителей дизентерии? в) Как отличаются различные виды дизентерийных бактерий по биохимическим свойствам? г) Каковы особенности патогенеза дизентерии? д) Какие микробиологические методы используются для диагностики дизентерии? е) Какой материал исследуется для выделения возбудителей дизентерии и на какие питательные среды его засевают? ж) Где в организме больного локализуется возбудитель дизентерии? з) Как следует брать материал от больного дизентерией? и) По каким признакам идентифицируют возбудителей дизентерии? к) Для чего необходимо серологическое типирование возбудителей? л) Чем обусловлена вирулентность дизентерийных бактерий? II.Письменное задание: 1. Записать состав среды Ресселя. 2. Перечислить биопрепараты для кишечной группы. Решение ситуационных задач по теме занятия. ЗАНЯТИЕ 4 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПИЩЕВЫХ ОТРАВЛЕНИЙ МИКРОБНОЙ ЭТИОЛОГИИ. ДИСБАКТЕРИОЗЫ. Семейство: Enterobacteriaceae 8 Роды: ЕShrichia.Salmonella, Shigella, Proteus, и др. Семейство: Micrococcaceae Род: Staphylococcus А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Самостоятельное изучение демонстрационного материала (стендинформация по теме "Пищевые отравления"). 2. Приготовление мазка-отпечатка из пищевого продукта, окраска по Граму, приготовление суспензии и посев на среды: - Эндо для обнаружения кишечной палочки и сальмонелл; - на МПА с 10% поваренной соли и 1%глюкозы в чашках для обнаружения стафилококка; - на скошенный агар по Шукевичу для обнаружения протея; 3. Учет результатов роста, микроскопия со сред отдельных колоний. Вывод. 4. Бактериологический метод исследования испражнений на дисбактериоз: 1 день: а) разведение 1,0 испражнений в изотоническом растворе до 1:10‾¹¹; б) посев испражнений из различных разведений на следующие питательные среды (или посев в чашки по секторам без предварительного разведения): на кровяной агар, на ЖСА, на среды Левина и Эндо, на среду Сабуро, на среду Блаурока в анаэробных условиях. 2 день: а) учет роста на питательных средах: наличие патогенной микрофлоры кишечника завершается выделением чистой культуры возбудителя и его идентификацией, определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам проводится по показаниям; б) количественное содержание микроорганизмов определенного вида в 1 г испражнений рассчитывается по таблицам. 5 день – заполнение бланка по количественной и качественной характеристике состояния микрофлоры кишечника. 5. Записать норму количественного содержания микрофлоры при микробиологической диагностике дисбактериоза. Перечислить степени дисбактериоза с применением показателей количественного содержания различных микроорганизмов. В.Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Какие микроорганизмы чаще всего вызывают пищевые токсикоинфекции? б) Какие условия способствуют возникновению пищевых токсикоинфекций? 9 в) Какие микроорганизмы чаще всего оказываются возбудителями пищевых токсикоинфекций? г) Каковы морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства микроорганизмов – возбудителей пищевых токсикоинфекций? д) Каковы особенности патогенеза пищевых токсикоинфекций? е) Какие микробиологические методы используются для диагностики пищевых токсикоинфекций? ж) Что подлежит исследованию при пищевых токсикоинфекциях? з) На какие питательные среды следует сеять материал при пищевых токсикоинфекциях? и) Как производится идентификация микроорганизмов – возбудителей пищевых токсикоинфекций? к) Как производится исследование пищевых продуктов на наличие условно патогенных микробов кишечной группы? л) Как производится исследование пищевых продуктов на наличие стафилококка? м) Каковы эпидемиологические особенности пищевых токсикоинфекий? н) Каковы меры предупреждения пищевых токсикоинфекций? о) Что такое дисбактериоз? п) Причины возникновения дисбактериоза? р) Методы установления дисбактериоза? II. Письменное задание: 1.Перечислить возбудителей пищевых токсикоинфекций. 2.Записать состав облигатной, факультатив ной и транзиторной микрофлоры полости рта, желудка, 12-перстной кишки, тонкого и толстого кишечника. 3.Перечислить факторы, влияющие на развитие дисбактериоза в организме детей и взрослого населения. ЗАНЯТИЕ 5 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ (особо опасная инфекция). Семейство: Vibrionaceae Род: Vibrio Виды: V. cholerae биовар cholerae V. cholerae биовар eltor V. cholerae серовар О 139. А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Демонстрационный материал: а) стенд: "Возбудители холеры"; 10 б) морфология холерного классического и вибриона Эль-Тор в мазках. в) дифференциальные признаки вибрионов: холерного классического, Эль-Тор, холероподобного; 2. Исследование воды на холеру. Бактериологический метод: - методика взятия материала из воды, от больного с подозрением на холеру, из трупа. Патрон для пересылки фекалий; - изучение колоний холероподобного вибриона на щелочном агаре, приготовление мазков, окраска по Граму; - биохимические свойства и реакция холера-рот; - сероидентификация холерных вибрионов, постановка развернутой реакции агглютинации с "О" холерной сывороткой, учет результатов; - ускоренная диагностика холеры по Ермольевой, учет результатов; 3. Биопрепараты: вакцина, диагностические агглютинирующие сыворотки, бактериофаг. В.Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Каковы морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические особенности холерного вибриона? б) По каким признакам отличают холерный вибрион от холероподобных? в) Как происходит заражение при холере? г) Где в организме больного локализуется холерный вибрион? д) Какие микробиологические методы применяют для диагностики холеры? е) Какой материал берут от больного для исследования? ж) Какой трупный материал подвергают исследованию? з) Какие правила следует соблюдать при взятии, пересылке и исследовании материала при подозрении на холеру? и) Какие питательные среды применяют для выделения холерного вибриона? к) Как выделяют чистую культуру холерного вибриона? л) Какова сущность иммунофлуоресцентного метода ускоренного обнаружения холерного вибриона? м) По каким признакам отличают классический вибрион от вибриона Эль Тор? н) Какие токсины образует холерный вибрион? о) Какое действие оказывает энтеротоксин (холероген) на организм человека? п) В чем заключается принцип патогенетического лечения больных холерой? р) Как ставят пробу со специфическими холерными монофагами? с) Какие серотипы различают у холерных вибрионов? т) Какова природа и структура холерного энтеротоксина (холерогена)? у) Каким образом идентифицируют холероподобные, т.е. не относятся к ОI группе, вибрионы? II. Письменное задание: 1. Написать методы экспресс-диагностики холеры. 11 2. Решение ситуационных задач по теме занятия. ЗАНЯТИЕ 6 ИТОГОВОЕ ПО ТЕМЕ: "МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ". Вопросы к итоговому занятию по микробиологической диагностике кишечных инфекций: 1. Холерные вибрионы, биологические свойства (морфологические, культуральные, ферментативные, антигенные 2. Микробиологическая диагностика эшерихиозов (экспресс-диагностика с помощью прямой РИФ, ингредиенты, положительный и отрицательный результаты). 3. Сальмонеллы – возбудители госпитальных инфекций, их свойства. 4. Санитарно-показательное значение кишечной палочки. Определение коли-титра воды. 5. Монофаги диагностические холерные жидкие, состав, назначение. 6. Шигеллы. Патогенез дизентерии. Роль факторов инвазии, распространение. 7. Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов. Серодиагностика (РИФ, РПГА). 8. Сыворотка диагностическая холерная люминесцирующая, приготовление, назначение. 9. Факторы патогенности холерного вибриона. Токсины и их характеристика. 10.Бактериологическое исследование при пищевых токсикоинфекциях. Особенности. 11.Агглютинирующие сыворотки шигелл Флекснера, Зонне и др., состав, назначение. 12.Семейство энтеробактерий. Таксономия. Общая характеристика. Морфология, культуральные, биохимические свойства. Антигенная структура. 13.Микробиологическая диагностика сальмонеллезов. 14.Брюшнотифозный ОН-диагностикум, получение, назначение. 15.Сальмонеллы. Особенности антигенной структуры по Кауфману-Уайту. Патогенность для человека и животных. 16.Микробиологическая диагностика дизентерии. Серодиагностика. 17.Агглютинирующие ОВ коли-сыворотки поливалентные. Получение. Назначение. 18.Протей. Свойства. Виды. Этиологическая и патогенетическая роль протея при пищевой токсикоинфекции. 19.Микробиологическая диагностика дизентерии. Бактериологический метод. 12 20.Люминесцирующая брюшнотифозная сыворотка. Получение. Назначение. 21.Возбудители дизентерии. Биологические свойства (морфологические, культуральные, ферментативные, антигенные, токсинообразование). 22.Микробиологическая диагностика брюшного тифа на 2-й неделе заболевания. 23.Лактобактерин сухой. Состав. Назначение. Холерная вакцина. Состав. Назначение. 24. Возбудители дизентерии Зонне. Биологические свойства (морфологические, культуральные, ферментативные, антигенные, токсинообразование). 25.Микробиологическая диагностика брюшного тифа на 3-й неделе заболевания. 26.Бифидумбактерин сухой. Состав. Назначение. 27.Сальмонеллы – возбудители паратифа В. Биологические свойства (морфологические, культуральные, ферментативные, антигенные).Патогенез. 28.Колибактерин сухой. Состав. Назначение. Холероген-анатоксин. Состав. Назначение. 29.Сальмонеллы – возбудители паратифа А. Биологические свойства (морфологические, культуральные, ферментативные, антигенные). Патогенез. 30.Физиологическая роль в кишечнике человека и санитарно-показательное значение эшерихий. Коли-титр. Коли-индекс. Определение. 31.Бактериофаг протейный жидкий. Состав. Назначение. 32.Сальмонеллы – возбудителибрюшного тифа. Биологические свойства (морфологические, культуральные, ферментативные, антигенные). Патогенез. 33.Микробиологическая диагностика эшерихиозов. 34.Бактерифаг брюшнотифозный поливалентный с кислотоустойчивым покрытием. Состав. Назначение. 35.Диарейные эшерихии. Их биологические свойства.дифференциация патогенных эшерихий от представителей нормальной микрофлоры. 36.Вакцина тифозно-паратифозная столбнячная химическая сорбированная. Состав. Назначение. 37.Эшерихии, их основные свойства (морфологические, культуральные, ферментативные,антигенные). 38.Микробиологическая диагностика пищевых токсикоинфекций, вызываемых протеем. 39.Вакцина брюшнотифозная споровая, обогащенная Vi-антигеном. Состав. Назначение. 40.Значение нормальной микрофлоры. 41.Диагностика дисбактериоза. 42.Факторы, влияющие на состав нормальной микрофлоры. 13 43.Лечение и профилактика дисбактериозов. ЗАНЯТИЕ 7 ОБЩАЯ ВИРУСОЛОГИЯ. А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. практическая работа: Методы лабораторных исследований при вирусных заболеваниях: 1. Вирусоскопический: микроскопия мазков с внутриклеточными включениями. 2. Вирусологический: а) выделение вирусов из инфекционного материала (культура клеток, куриный эмбрион, животные); б) определение вируса в материале (ЦПД, реакция гемагглютинации, гемадсорбции); в) идентификация выделенного вируса (РСК, преципитация, РИФ, РТГА, цветная проба, реакция нейтрализации вируса и др.); 3. Биологический: способы заражения животных, определение вирусного инфицирования. 4. Серологический: а)реакции иммунитета, РТГА, РН, РСК, РИФ, ИФА, РНГА, преципитации, задержки ЦПД и др. б)учет реакции нейтрализации для обнаружения титра антител (цветная проба, РН). В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Какие методы используются для культивирования вирусов? б) Как заражают новорожденных мышей? в) Что собой представляют тельца Негри и какимиметодами их окрашивают? г) Что такое культура ткани? д) Ткани каких органов используются для получения культур клеток? ж) Какие среды и солевые растворы применяют для выращивания и для обработки культур ткани? з) В каком положении ставят пробирки в термостат и сколько времени выращивают клетки до заражения их вирусом? и) По каким признакам судят о размножении клеток? к) Как делают пересев клеток для поддержания данного штамма в лабораторных условиях? л) Какого строение куриного эмбриона? м) Какого возраста эмбрионы используются для заражения? н) Как определяют место расположения эмбриона при овоскопии? о) Как обрабатывается эмбрион перед заражением? 14 п) Какие существуют методы заражения куриного эмбриона? р) На сколько времени ставят зараженный эмбрион в термостат для размножения вируса? с) Как обнаруживают наличие вируса в культуре ткани? т) С какой целью может быть использован метод цветных проб? у) Как ставят реакцию гемадсорбции? Как выглядит положительная реакция гемадсорбции? ф) Что собой представляет метод бляшек? х) Как обнаруживают вирус гриппа в курином эмбрионе? ц) Как вскрывают зараженныйэмбрион? ч) Почему происходит реакция агглютинации эритроцитов в присутствии вируса гриппа? Каков механизм этой реакции? ш) Что такое реакция торможения (нейтрализация) гемагглютинации? Для чего она используется? щ) Как обнаруживают изменения в хорионаллантоисной оболочке, вызванные вирусом? II. Письменное задание: 1. Записать методику заражения куриного эмбриона. 2. Перечислить ингредиенты для постановки РГА. 3. Перечислить ингредиенты для постановки РТГА. ЗАНЯТИЕ 8 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ. ГРИПП. Семейство: Orthomyxoviridae Род: Influenzavirus Вид: Грипп А Грипп В Грипп С А. Обсуждаемые вопросы: Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: Методы лабораторной диагностики гриппа: 1. Вирусоскопический: риноцитоскопия, РИФ; 2. Вирусологический: методика выращивания чистой культуры вируса с использованием куриного эмбриона, культуры клеток. Постановка РГА для доказательства накопления вирусов в клетках и идентификация вирусов в РТГА, РСК и др. 3. Профилактика и лечение респираторных вирусных инфекций с помощью биопрепаратов. Диагностические препараты. 4. Произвести забор материала от больного респираторными вирусными инфекциями (носоглоточный смыв, мазок-отпечаток). 5. Поставить РГА, провести учет этой реакции. 15 В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Дайте общую характеристику ортомиксовирусов? б) Какую структуру имеет вирион гриппа? в) Какие микробиологические методы применяются для диагностики вирусных респираторных инфекций? г) В чем особенность серологических методов диагностики вирусных респираторных инфекций? д) Как производится выделение вируса гриппа? е) Как обнаруживается вирус гриппа в курином эмбрионе? ж) В чем сущность РТГА? Каковы особенности ее постановки и учета результатов при обнаружении противогриппозных антител? з) В чем заключается сущность иммунофлуоресцентного метода диагностики гриппа? и) Как определяется гемагглютинирующий титр вируса гриппа? ЗАНЯТИЕ 9 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЭНТЕРОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ И ГЕПАТИТОВ Семейство: Picornaviridae Род: Enterovirus Виды: возбудитель полимиелита - Poliovirus poliomielitis возбудитель Коксаки A,B возбудитель ECHO ВИРУСЫ ВЫЗЫВАЮЩИЕ ГЕПАТИТЫ Семейство: Picornaviridae Род: Hepatovirus Вид: HAV. Семейство: Hepadnaviridae Род: Orthohepadnavirus Вид: HBV. Семейство: Caliciviridae Вид: HEV. Семейство: Flaviviridae Род: Hepacivirus Вид: HCV, HGV. Семейство: Deltavirus Вид: HDV (дефектный) Семейство: Circinoviridae Вид: HTTV. 16 А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Вирусологический метод диагностики полиомиелита: а) выращивание вируса на культурах клеток и лабораторных животных; б) идентификация вирусов в реакции нейтрализации вирусов методом цветной пробы. 2. Серологический метод: Обсуждение реакций, применяемых для серодиагностики заболеваний, вызываемых ЕСНО (РТГА), вирусами КОКСАКИ А и В (реакция нейтрализации и цветной пробы), вирусами полиомиелита (РН, преципитации, РСК, ИФА). 3. Диагностика вирусных гепатитов. а) свойства возбудителей вирусных гепатитов; б) лабораторная диагностика вирусного гепатита В: - определение австралийского антигена в крови больного иммуноф ментным методом, методом встречного иммуноэлектрофореза, РСК, преципитации. в) методы лабораторной диагностики вирусного гепатита А: - обнаружение вируса в фекалиях больного вируса с помощью ИФА, РИА, РЭМ. - серодиагностика - определение нарастания титра антител с помощью ИФА. Записать схему. 4. Специфическая профилактика и лечение энтеровирусных инфекций. В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Какова классификация пикорновирусов? б) Дайте общую характеристику группы энтеровирусов? в) Какие микробиологические методы применяют для диагностики полиомиелита и других энтеровирусных заболеваний? г) Как выделяют вирус полиомиелита от больных? д) Какие серологические методы диагностики могут быть использованы при полиомиелите? е) Какие заболевания вызывают вирусы Коксаки и Есно? ж) Какие способы применяются для обнаружения и выделения вирусов Коксаки? з) Как обнаруживают и идентифицируют вирусы Коксаки А и В? и) Как определяется цитопатическое действие вируса полиомиелита? к) Каковы пути заражения А-, В-, дельта – гепатитами? л) Что такое вирусный В- гепатит? С- и Е- гепатиты? м) Какими биохимические тесты применяются для диагностики вирусного гепатита? н) Что такое интерферон? 17 II. Письменное задание: 1. Записать методику получения культуры вируса полиомиелита из испражнений больного; 2. Составить таблицу дифференциальных признаков энтеровирусов по принципу культивирования и патогенности. ЗАНЯТИЕ 10 ИТОГОВОЕ ЗАНЯТИЕ ПО ТЕМЕ: "ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ". (Зачет) Вопросы к итоговому занятию по вирусным инфекциям: 1.Основы классификации вирусов. 2.Интеграция вирусной нуклеиновой кислоты в клеточный геном. 3.Молекулярно-генетическая организация вирусов. 4.Типы вирусных инфекций. 5.Взаимодействие вируса с клеткой хозяина (стадии). 6.Вирионы, вироиды, прионы. 7.Основы гемагглютинации и гемадсорбции при вирусных инфекциях. 8.Основные свойства вирусов. 9.Химический состав вирионов. Вирусная ДНК и РНК. 10.Внутриклеточные включения вирусного происхождения. Методы их обнаружения. 11.Формы персистенции вирусов. 12.Интеграция нуклеиновой кислоты вирусов в клеточный геном. Примеры. 13.Морфология и структура вирионов. 14.Особенности вирусных инфекций. 15.Методы идентификации вирусов. 16.Методы культивирования вирусов. 17.Патогенез ВИЧ-инфекции 18.Патогенез гепатита А и В. 19.Патогенез гриппозной инфекции. 20.Лабораторная диагностика: методы диагностики вирусных инфекций. 21.Лабораторная диагностика полиомиелита – серологический метод, особенности. 22.Лабораторная диагностика и патогенез гепатита В. 23.Лабораторная диагностика полиомиелита – вирусологический метод, особенности. 24.Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции. 25.Патогенез полиомиелита. 26.Лабораторная диагностика вирусных инфекций. Экспресс-диагностика. 27.Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций Коксаки А и В.. 18 28.Лабораторная диагностика гепатита В. 29.Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций (общие принципы). 30.Лабораторная диагностика гепатита А. 31.Лабораторная диагностика гриппозной инфекции. 32.Морфология и структура вируса гриппа. 33.Специфические препараты для лечения гриппа 34.Донорский иммуноглобулин, его использование 35.Противогриппозные сыворотки, получение, применение. 36.Интерферон, характеристика препарата, его применение 37.Специфическая профилактика гриппа. Типы вирусных противогриппозных вакцин. 38.Химическая гриппозная вакцина. Принципы приготовления. Достоинства 39.Убитая полиомиелитная вакцина, характеристика, недостатки, назначение. 40.Пассивная иммунопрофилактика гепатита А. Характеристика препарата. 41.Специфическая профилактика гепатита А. 42.Препараты для специфической профилактики полиомиелита. 43.Морфология и структура вируса иммунодефицита человека (ВИЧ). 44.Генно-инженерная противогепатитная В вакцина. Принципы получения. Назначение. 45.Принципы приготовления генно-инженерных вирусных вакцин. 46.Живая полиомиелитная вакцина. Характеристика, преимущества перед убитой, назначение. 47.Морфология и структура вируса гепатита А. 48.Признаки, отличающие вирусы от прокариот. 49.Убитые вакцины для профилактики вирусных инфекций. 50.Принцип постановки реакций ГА и РТГА. 51.Использование РСК при лабораторной диагностике вирусных инфекций. 52.Постановка реакции нейтрализации и цветной пробы. ЗАНЯТИЕ 11 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА АНАЭРОБНЫХ ИНФЕКЦИЙ (СТОЛБНЯК, ГАЗОВАЯ ГАНГРЕНА, БОТУЛИЗМ). Семейство: Bacillaceae Род: Clostridium Виды: Cl. Tetani – возбудитель столбняка Cl. botulinum – возбудитель ботулизма Cl. perfringens – возбудители газовой анаэробной инфекции Cl. septicum - --//--//--//--//--//--//--//Cl. histolyticum -- //--//--//--//--//--//--//Cl. novi - -//--//--//--//--//--//--//- 19 А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Демонстрационный материал: а) морфология возбудителей анаэробных инфекций в мазках, окрашенных по Граму; б) метод Оухтерлони для определения токсигенности возбудителя ботулизма; в) биопрепараты: столбнячная, противогангренозная, противоботулиническая сыворотки (лечебные и диагностические), столбнячный анатоксин; г) наглядные пособия: информация по теме: "Возбудители инфекции с антитоксическим иммунитетом; 2. Бактериологическое исследование при анаэробных раневых инфекциях: - микроскопирование раневого отделяемого в мазках, окрашенных по Граму; - посев раневого отделяемого на среду Китт-Тароцци и молоко; - учет результатов роста на среде Китт-Тароцци и молоке; - пересев в трубки Вейон-Веньяля анаэробной культуры; - учет роста в трубках и пересев колоний на среду Китт-Тароцци; - микроскопия выделенной чистой анаэробной культуры. 3. Дать заключение о способах приготовления и использования бактерийных препаратов при анаэробных инфекциях. 4. Решение ситуационных задач по теме занятия. В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Каковы основные биологические свойства анаэробных бактерий? б) Каков механизм заражения газовой гангрены? в) Какие возбудители чаще всего вызывают газовую гангрену? г) Какие токсины образуют возбудители газовой гангрены? д) Каковы особенности патогенеза газовой гангрены? е) По каким основным признакам различаются между собой C. perfringens, C. novyi, C. septicum, C. Histolyticum? ж)Какие ускоренные методы применяются для обнаружения C. Perfringens? з) Какие микробиологические методы используются для диагностики анаэробных инфекций? и) Каковы основные морфологические, культуральные и биохимические особенности возбудителя столбняка? к) Какова природа токсина столбнячной палочки и на что он действует? л) Каковы основные морфологические и биологические свойства возбудителя ботулизма? м) Какова природа палочки ботулизма? Какие типы токсина продуцирует возбудитель и что поражает токсин? 20 н) Какие условия способствуют размножению возбудителя ботулизма и накоплению токсина в пищевом продукте? о) Какой материал берется для исследования при подозрении на ботулизм? п) Какие методы применяются для обнаружения токсина возбудителя ботулизма и определения его типа? р) Как осуществляется специфическая профилактика и лечение ботулизма? Какие препараты применяются для этой цели? с) Какова природа и структура столбнячного токсина? т) Что поражает столбнячный токсин? у) как осуществляется специфическое лечение и специфическая профилактика столбняка? ф) Как обеспечивается формирование коллективного иммунитета против столбняка и какие препараты применяют для этой цели? ЗАНЯТИЕ 12 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ПАТОГЕННЫМИ КОККАМИ. Семейство: Micrococcaceae Род: Staphylococcus Виды: S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus Семейство: Streptococcaceae Род: Streptococcus Виды: S. pyogenes А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Демонстрационный материал: а) стенд-информация: "Стафилококки, стрептококки"; б) демонстрация стафилококка и стрептокока в мазках; в) демонстрация колоний стафилококка и стрептококка на кровяном и сывороточном агаре; 2. Микроскопическое исследование гноя фурункула: приготовление мазков, окраска по Граму. 3. Бактериологическое исследование: - посев гноя на кровяной агар и ЖСА; - учет роста на кровяном агаре и ЖСА. Определение гемотоксина и лецитиназы, микроскопия отдельных колоний; - пересев колоний на скошенный агар для накопления культуры стафилококка и на сывороточный агар для накопления стрептококка. Учет роста на скошенном и сывороточном агаре; 21 - определение патогенности (проба на плазмокоагулазу выделенной культуры стафилококка); - определение чувствительности к антибиотикам методом бумажных дисков. Заключение о проведенном бактериологическом исследовании. 4.Биопрепараты: анатоксин, иммуноглобулин, бактериофаг, стафилококковый и стрептококковый аллергены. 5. Самостоятельная работа: определение чувствительности стафилококка, выделенного из фурункула, к антибиотикам методом бумажных дисков. Дать заключение о выборе антибиотиков для лечения. 6. Распределение тем в плане УИРС:"Патогенные кокки". В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Какова классификация стафилококков? б) Какие заболевания вызывают стафилококки? в) Какой материал берут от больных при различных стафилококковых заболеваниях и как его доставляют в лабораторию? г) Какие микробиологические методы используют для диагностики заболеваний, вызываемых гноеродными кокками? д) Как производят бактериологическое исследование гноя при стафилококковых заболеваниях? е) Как производят выделение гемокультуры при стафилококковом сепсисе? ж) Какова морфология стрептококков? Чем отличается их морфология на жидких и плотных питательных средах? з) Какова классификация стрептококков по характеру роста на кровяном МПА? и) Каково антигенное строение стрептококков? к) Какие заболевания вызывают стрептококки? л) Какой материал берут от больных при различных стрептококковых заболеваниях и как его доставляют в лабораторию? м) Как производят бактериологическое исследование при различных стрептококковых заболеваниях? н) Какие питательные среды применяются для выращивания стрептококков? о) По каким признакам определяют патогенность выделенной культуры стафилококка? п) Как определяют наличие у стафилококка плазмокоагулазы? р) Какие токсины образует стафилококк и как они обнаруживаются? с) Каким образом решается вопрос о выборе антибиотиков для лечения заболеваний, вызываемых стафилококками? т) Как и с какой целью осуществляют фаготипирование стафилококков? II. Письменное задание: 1.Записать современную классификацию стафилококков. 2.Перечислить токсины и ферменты агрессии стафилококков и стрептококков. 22 3. Представители кокковой флоры полости рта. 4. Решение ситуационных задач по теме занятия. ЗАНЯТИЕ 13 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫМИ ПАТОГЕННЫМИ КОККАМИ. Семейство: Nesseriaceae Род: Nesseria Вид: N. gonorrhoeae – возбудитель гонореи N. meningitides - возбудитель менингококковой инфекции. А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Демонстрационный материал: а) стенд-информация по теме "Менингококки и гонококки"; б) демонстрация морфологии менингококка в мазках, окрашенных по Граму; в) демонстрация характера роста менингококка на сывороточном агаре; г) демонстрация морфологии гонококка в мазках, окрашенных по Граму; д) демонстрация колоний гонококка на асцит-агаре; 2. Лабораторная диагностика: - дифференциация менингококка от гонококка по биохимическим свойствам; - дифференциация менингококка и катарального диплококка; - постановка реакции преципитации с ликвором больного менингококковым менингитом; - методы диагностики острой и хронической гонореи; 3. Значение менингококка в детской патологии (педиатрический аспект). 4. Биопрепараты: гонококковая вакцина, иммуноглобулин, диагностические сыворотки менингококковая вакцина. 5. Решение ситуационных задач по теме занятия. В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Какова морфология, тинкториальные и культуральные свойства гонококков и менингококков? В чем отличие их биохимических свойств? б) Какие заболевания вызывает менингококк, какой материал берется при разных формах менингококковых заболеваний и как он исследуется? в) Как осуществляют микроскопическую диагностику гонорее? На основании каких признаков делается заключение об обнаружении гонококков в микропрепарате из гнойного отделяемого? 23 г) Как осуществляют бактериологическую и серологическую диагностику гонококковых заболеваний? ЗАНЯТИЕ 14 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА И ПРОКАЗЫ. Семейство: Мicobacteriacia Род: Мicobacterium Вид: M. tuberculosis - возбудитель туберкулеза M. leprae - возбудитель лепры А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Демонстрация: а) стенд-информация по теме: "Возбудители туберкулеза и проказы; б) демонстрация роста туберкулезной палочки на специальных средах; в) демонстрация печени, легких, селезенки морских свинок, погибших от туберкулеза; г) Демонстрация мазка из язв больного лепрой; 2. Лабораторная диагностика туберкулеза: - микроскопический метод: приготовление мазков из прокипяченой мокроты больного туберкулезом легких, окрасить по ЦилюНильсену, микроскопия. Методы обогащения материала для обнаружения возбудителя; - метод микрокультур Прайса-Школьниковой; - серодиагностика туберкулеза, постановка коалиновой реакции агглютинации, демонстрация результатов реакции. 3. Биопрепараты: вакцина БЦЖ, туберкулин. 4. Заполнить карту 13 "Туберкулез". 5. Обосновать показания и противопоказания к ревакцинации БЦЖ. В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Каковы морфологические особенности туберкулезной палочки? б) Как растут туберкулезные палочки на жидких и твердых питательных средах? в) Какие существуют типы туберкулезной палочки и какова их роль в патологии человека? г) По каким свойствам различают патогенные типы туберкулезных палочек? д) Почему возбудители туберкулеза относительно устойчивы к воздействию внешних факторов? е) Как происходит заражение человека туберкулезом? 24 ж) Какова природа иммунитета при туберкулезе? з) Какую роль играют лимфоциты в реакции повышенной чувствительности замедленного типа при туберкулезе? и) Какова природа туберкулина, его назначение и применение? к) Какие микробиологические методы применяются для диагностики туберкулеза? л) Как осуществляется бактериоскопическая диагностика туберкулеза? м) Какие методы используют для обогащения материала при бактериоскопической диагностике туберкулеза? н) Как осуществляется ускоренная диагностика туберкулеза (метод микрокультур)? о) Каково значение туберкулиновых проб в диагностике туберкулеза? п) Какие препараты применяются для диагностики и специфической профилактики туберкулеза? р) Каковы морфологические свойства возбудителя проказы? с) Какие микробиологические методы используются для диагностики проказы? II. Письменное задание: а) Записать методы обогащения материала туберкулезной палочки. б) Решение ситуационных задач по теме занятия. для обнаружения ЗАНЯТИЕ 15 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ДИФТЕРИИ. Семейство: Сorynebacteriaceae Род: Сorynebacterium Вид: C. diphteriae - возбудитель дифтерии А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Б. Практическая работа: 1. Демонстрационный материал: а) морфология дифтерийных палочек в мазках, окрашенных по Леффлеру и Нейссеру; б) характер колоний дифтерийных палочек на средах Леффлера, теллуритовой среде Клауберга; в) ферментативные свойства дифтерийных палочек (демонстрация); г) определение токсигенности методом Оухтерлони; д) биопреператы: АД, ДС, АКДС, АДС, противодифтерийная сыворотка, токсин Шика; 25 е) наглядные пособия: стенд-информация по теме: "Возбудитель дифтерии". 2. Этапы бактериологического метода исследования при дифтерии: - ознакомление с бланками анализа; - приготовление мазка с тампона, окраска по методу Нейссера, микроскопия; - посев исследуемого материала на теллуритовый агар. 3. Дать заключение о способах приготовления и использования АД, ДС, АДС, АКДС, токсина Шика, противодифтерийной сыворотки. В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Какие микробиологические методы применяются для диагностики дифтерии? б) Какой материал берется для исследования при подозрении на дифтерию и при обследовании на бактерионосительство? в) Какие морфологические признаки присущи дифтерийной палочке? г) По каким признакам дифференцируют типы гравис, митис и интермедиус? д) По каким биохимическим признакам отличают дифтерийную палочку от дифтероидов? е) Какими методами и как определяют токсигенность возбудителя дифтерии? ж) Каковы пути и способы заражения дифтерией? з) Как и с какой целью ставят пробу Шика? и) Почему для микробиологической диагностики дифтерии необходимо выделение чистой культуры возбудителя и изучение его свойств? к) Какие иммунопрепараты применяют для специфической профилактики дифтерии? л) Какими факторами патогенности обладает возбудитель дифтерии? м) Что поражает (какие органы и системы органов) дифтерийный токсин? н) Каковы природа и структура дифтерийного токсина? о) Каким образом возможно превращение нетоксигенной дифтерийной бактерии и токсигенную? п) Каковы особенности современной классификации дифтерийных бактерий и какие критерии с этой целью используются? II. Письменное задание: 1. Записать состав среды Леффлера и теллуритовых сред. 2. Записать препараты для специфической плановой профилактики и лечения дифтерии. ЗАНЯТИЕ 16 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЗООНОЗНЫХ 26 ИНФЕКЦИЙ. Семейство: Enterobakteriacea Род: Yersinia Вид: Y. pestis - возбудитель чумы Семейство: Brucellaсеае Род: Brucella Виды: В. Melitensis, b. abortus, B. suis, B. neotomae, B. ovis, B. canis возбудители бруцеллеза. Род: Francisella Вид: F. Tularensis – возбудитель туляремии Семейство: Bacillaceae Род: Bacillus Вид: B. anthracis – возбудитель сибирской язвы А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Стенд-информация по теме: "Возбудители бруцеллеза, чумы, сибирской язвы, туляремии". 1. РОД БРУЦЕЛЛ: а) демонстрация морфологии возбудителей бруцеллеза в мазках из чистой культуры и органов зараженных животных; б) демонстрация роста бруцелл на печеночном агаре; в) серодиагностика бруцеллеза, демонстрация реакции Райта и РПГА; г) демонстрация биопрепаратов: бруцеллезная вакцина, бруцеллин, бруцеллезный диагностикум. 2. РОД ИЕРСИНИЙ: а) демонстрация морфологии палочек чумы в мазках из чистой культуры и органов зараженных животных; б) демонстрация характера колоний; в) демонстрация биопрепаратов; г) возбудители псевдотуберкулеза, их свойства и методы диагностики. 3. РОД ФРАНЦИСЕЛЛ: а) демонстрация морфологии туляремийных палочек в мазках из чистой культуры и органов зараженных животных; б) демонстрация характера роста колоний на специальных средах; в) методы лабораторной диагностики; г) демонстрация биопреператов: вакцина тулярин, туляремийный диагностикум; 4. РОД БАЦИЛЛ: а) демонстрация морфологии сибиреязвенной палочки в мазках из чистой культуры; б) демонстрация роста колоний на МПА и МПБ; в) демонстрация реакции Асколи для обнаружения сибиреязвенного антигена. 27 г) демонстрация биопрепаратов: вакцина, антраксин, иммуноглобулин; 5. Дать заключение о показании к вакцинации и способах приготовления и использования бактерийных препаратов при зоонозных инфекциях. В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Какие виды бруцелл вызывают бруцеллез у человека? б) Каковы основные хозяева бруцелл соответствующих видов? в) Каковы морфология и культуральные свойства различных видов бруцелл? г) Какой из видов бруцелл наиболее патогенен для человека? д) Каковы пути заражения бруцеллезом? е) Какие микробиологические методы применяются для диагностики бруцеллеза? ж) Какой берется от больного материал для выделения возбудителя бруцеллеза? Как осуществляется выделение возбудителя из разного материала? з) Какими методами осуществляется серологическая диагностика бруцеллеза? Какова техника постановки серологических реакций? и) Как производится оценка реакции Райта? Какова ее диагностическая ценность? к) Как ставится аллергическая проба Бюрне? Через сколько времени и как производится ее оценка? л) С какого дня заболевания рекомендуется ставить реакцию Райта и пробу Бюрне? м) Что такое бруцеллин и как его получают? н) Как производится специфическая профилактика бруцеллеза? Как производится отбор лиц, подлежащих специфической вакцинации? II. Письменное задание: 1. Записать особенности единого бруцеллезного диагностикума. 2. Записать особенности активной специфической профилактики, проводимой при данных инфекциях. 3. Решение ситуационных задач по теме занятия. ЗАНЯТИЕ 17 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА СПИРОХЕТОЗОВ Семейство: Spirochaetaceae Род: Borrelia Вид: B. recurrentis – возбудитель эпидемического возвратного тифа. Род: Treponema Вид: T. pallidum - возбудитель сифилиса Род: Leptospira Вид: L. Icterohaemorrhagiae – возбудитель лептоспироза 28 А. Обсуждаемые вопросы: 1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме. Стенд-информация по теме: "Возбудители сифилиса, возвратного тифа и лептоспирозов". Б. Практическая работа: 1. Микробиологическая диагностика сифилиса: а) ранняя диагностика сифилиса (демонстрация препарата из отделяемого твердого шанкра в темном поле зрения). б) экспресс-диагностика сифилиса (ИФА, темнопольная микроскопия); в) серодиагностика: учет реакции Вассермана, РСК со специфическим антигеном и обсуждение других серологических реакций. 2. Демонстрация возбудителей ангины Венсана, инфекционной желтухи и клещевого возвратного тифа. Методы диагностики. 3. Особенности серодиагностики лептоспирозов (демонстрация препарата микроскопической реакции агглютинации). 4. Демонстрация биопрепаратов: кардиолипиновый антиген, ультраозвученный трепонемный антиген, комплемент, гемолитическая сыворотка. В. Вопросы для самоподготовки: I. Контрольные вопросы: а) Какие заболевания вызывают спирохеты? б) Классификация семейства спирохет? в) Особенности строения спирохет видимые в электронный микроскоп? г) Особенности биологии спирохет? д) Какие микробиологические методы используются для диагностики сифилиса? е) Серологические реакции, используемые для диагностики сифилиса? ж) Какие микробиологические методы используются для диагностики лептоспироза? з) Какие микробиологические методы используются для диагностики возвратного тифа? и) Препараты для специфической профилактики лептоспироза? к) Антигенные диагностикумы для реакции Вассермана? II. Письменное задание: 1. Охарактеризовать антигены, используемые в серодиагностике сифилиса; 2. Патогенные спирохеты полости рта. 3. Решение ситуационных задач по теме занятия. ЗАНЯТИЕ 18 ТЕСТЫ ПО ЧАСТНОЙ МИКРОБИОЛОГИИ ЗАЧЕТ ПО БИОПРЕПАРАТАМ 29 ЗАНЯТИЕ 19 СДАЧА ПРАКТИЧЕСКИХ НАВЫКОВ ТЕСТЫ ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЕ ПО МИКРОБИОЛОГИИ ТЕМАТИЧЕСКИЙ ПЛАН ЛЕКЦИЙ ПО ЧАСТНОЙ МИКРОБИОЛОГИИ ДЛЯ СТУДЕНТОВ ЛЕЧЕБНОГО ФАКУЛЬТЕТА. 1. Возбудители брюшного тифа, паратифов и дизентерии. Виды сальмонелл – возбудители брюшного тифа и паратифов. Шигеллы. Возбудители бактериальной дизентерии..Биологические свойства. 2. Возбудители пищевых отравлений токсикоинфекции и интоксикации. микробной этиологии: 3. Холера. Классификация. Биологические свойства. Особенности патогенеза. Особенности иммунитета. Микробилогическая диагностика. Профилактика, лечение. 4. Вирусы – возбудители заболеваний иммунитета при вирусных инфекциях, диагностики. человека. Особенности методы лабораторной 5. Вирусы - возбудители острых респираторных заболеваний: гриппа, кори, краснухи, герпеса.Классификация, этиология, патогенез медленных вирусных инфекций. 6. Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ). Этиология, патогенез. СПИД как клиническое проявление ВИЧ инфекции. Методы лабораторной диагностики. 7. Возбудители вирусных гепатитов. ДНК – содержащие вирусы – НВV, HTTV и РНК – содержащие вирусы HDV (дельта), HАV, HСV, HЕV и HGV. Структура вирионов, антигены и их характеристика. Резистентность вирусов, механизм и пути передачи возбудителя. Патогенез, иммунитет. Методы лабораторной диагностики. Проблемы вакцинопрофилактики. 8. Персистирующие вирусные инфекции (ЕСНО, коксаки, герпес и др). Методы лабораторной диагностики. 30 9. Лекция-конференция: «Патогенные кокки - возбудители гнойных инфекций». Грамположительные кокки – стафилококки. Золотистый стафилококк. Роль в патологии эпидермального и сапрофитного стафилококков. 10.Грамотрицательные кокки - менингококки и гонококки. Особенности биологических свойств гонококков. Эволюция кокковой группы. Гноеродные кокки, особенности морфологии и физиологии возбудителей. Эпидемиология, особенности иммунологического процесса, диагностика и лечение. Специфическая профилактика. Методы микробиологической диогностики острой и хронической гонореи. Этиотропное лечение гонореи и бленнореи. 11.Микобактерии. Возбудители туберкулеза и проказы. Биологические свойства возбудителей: морфология, культуральные, тинкториальные и биохимические свойства. Особенности химического состава, резистентности. Факторы патогенности. Антигенные и аллергические свойства. Особенности иммунитета. Методы лабораторной диагностики заболевания. Специфическое лечение и профилактика туберкулеза. 12.Возбудитель дифтерии- представитель семейства коринебактерий. Биологические свойства. Факторы патогенности. Дифтерийный токсин: генетический контроль его образования. Патогенез дифтерии. Антитоксический иммунитет. Бактерионосительство. Методы лабораторнаой диагностики возбудителя. Специфическое лечение и профилактика. Определение постпрививочного иммунитета. Профилактика осложнений при лечении противодифтерийной антитоксической сывороткой. 13.Клостридии - возбудители раневой аэробной инфекции, ботулизма, столбняка. Микроиологическая характеристика представителей инфекции, их факторы патогенности, токсинообразование, резистнтность к факторам окружающей среды. Патогенез заболеваний. Методы лабораторной диагностики. Специфическое лечение и профилактика. 14.Риккетсиозы и хламидиозы. Виды патогенные для человека. Риккетсии – возбудитель сыпного тифа. 15. Особо - опасные инфекции: туляремия, сибирская язва, бруцеллез, чума и другие. Этиология, патогенез. Методы лабораторной диагностики. 31 16.Патогенные спирохеты. Общая характеристика трепонем, боррелий и лептоспир. Бледная трепонема - возбудитель сифилиса. Этиология, патогенез. Методы лабораторной диагностики. 17.Клиническая микробиология. Условия возникновения заболеваний, вызванных микроорганизмами в неинфекционных лечебных учреждениях. Особенности биологических свойств внебольничных и внутрибольничных эковаров, возбудители внутрибольничных инфекционных заболеваний. 18.Дисбактериоз. Истинный дисбактериоз и дисбактериальные явления. Причины, клинические проявления, диагностика, специфическое лечение и профилактика развития дисбактериоза. СПИСОК ПРАКТИЧЕСКИХ НАВЫКОВ К ЭКЗАМЕНУ ПО МИКРОБИОЛОГИИ 1. Приготовить микропрепарат из смеси бактерий, окрасить простым методом, микроскопировать, описать свойства бактерий. 2. Приготовить микропрепарат из смеси бактерий, окрасить по Граму, микроскопировать, описать свойства бактерий. 3. Приготовить микропрепарат из мокроты больного с подозрением на туберкулез полости рта, окрасить по Цилю-Нильсену, микроскопировать, описать свойства бактерий. 4. Приготовить микропрепарат из зубного налета, окрасить по Граму, микроскопировать, описать свойства бактерий. 5. Приготовить микропрепарат из кислого молока, окрасить по Неиссеру, микроскопировать, описать свойства бактерий. 6. Микроскопировать с иммерсией готовые микропрепараты,окрашенные методом Грама, Циля-Нильсена, Нейссера. Описать свойства бактерий. 7. Микроскопировать мазок из отделяемого твердого шанкра полости рта. Описать свойства бактерий. 8.Микроскопировать мазок из осадка ликвора при эпидемическом менингите и описать свойства бактерий. 9.Произвести посев исследуемого материала из отделяемого гнойного очага нижней челюсти на МПА с целью выделения чистой культуры. 10.Произвести посев однородной изолированной колонии с МПА в чашке Петри на скошенный агар и среду Ресселя. Объяснить цель посева. 11.Произвести посев "раневого отделяемого" на среду Китт-Тарроцци и в высокий столбик сахарного агара. Объяснить цель посева. 32 12. Произвести учет результатов роста бактерий на средах Плоскирева и Эндо при подозрении на дизентирию и колиэнтерит. 13.Произвести учет результатов роста потогенных стафилококков на кровяном и желточно-солевом агаре. 14. Назвать состав, назначение компонентов и провести учет результатов роста бактерий на среде Китта-Тароцци. 15.Произвести учет чувствительности стафилококков полости рта к антибиотикам методом стандартных дисков. 16.Произвести посев выделенной чистой культуры бактерий на среды для изучения биохимических свойств. 17. Произвести учет биохимической активности выделенной чистой культуры. 18.Произвести учет результатов роста E.coli на среде Ресселя. 19.Произвести постановку ориентировочной реакции агглютинации для определения диареегенных эшерихий. 20.Учесть результаты титрования комплемента. Определить его рабочую дозу. 21. Определить токсигенность Corynebacterium diphtheriae методом Оухтерлони. 22. Микроскопия мазка мокроты от больного туберкулезом. Назвать метод окраски.Описать свойства бактерий. 23. Определение токсигенности дифтерийной палочки методом Оухтерлони. 24.Произвести учет развернутой РА в пробирках с культурой кишечной палочки при диагностике колиэнтеритов. 25.Учесть результаты реакции Видаля при диагностике брюшного тифа, паратифов А иВ. 26.Учесть результаты реакции диз. Видаля при диагностике дизентирии. 27.Учесть результаты РПГА в диагностике гриппа. 28.Учесть результаты РПГА с эритроцитарными диагностикумами из шигелл Зонне иФлекснера. 29. Учесть результаты реакции Райта в диагностике бруцеллеза. 30. Определить факторы патогенности стафилококков. 31. ЦПД в культуре ткани. Определить титр вируса полиомиелита по цветной пробе. 32. Произвести учет результатов ИФА (иммуноферментный анализ) при диагностике ВИЧ-инфекции. 33. Произвести учет РГА с целью определения титра вируса. 34. Произвести учет РТГА с целью серодиагностики гриппа в парных сыворотках. 35.Учесть результаты ИФА для выявление HBs-антигена вируса гепатита В. 36. Учесть результаты определения чувствительности вирулентной чистой культуры S.aureus к бактериофагу. 33 37. Учет результатов РСК при диагностике сифилиса. Объяснить результаты реакций. 38. Произвести посев Proteus vulganis по методу Шукевича. 39. Приготовить мазок из крови. ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЕ ВОПРОСЫ ДЛЯ СТУДЕНТОВ ЛЕЧЕБНОГО ФАКУЛЬТЕТА 1. Значение медицинской микробиологии в практической деятельности врача. 2.Значение открытия Д.И. Ивановского. Роль отечественных ученых в развитии вирусологии (М.П. Чумаков, В.М. Жданов, А. А. Смородинцев и др.) в создании профилактических вакцин. 3.Медицинская биотехнология, её задачи и достижения. 4. Основные принципы классификации микробов. 5.Структура и химический состав бактериальной клетки. Особенности строения грамположительных и грамотрицательных бактерий. 6. Тинкториальные свойства бактерий. Методы окраски. 7. Структура и химический состав бактериальной клетки. Капсулы, жгутики, спорообразование. 8.Особенности биологии вирусов. 9. Структура и химический состав вирусов и бактериофагов. 10. Типы взаимодействия вируса с клеткой. Фазы репродукции вирусов. 11.Бактериофагия. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные бактериофаги. Лизогения. 12. Применение фагов в медицине и биотехнологии. 13. Бактериологический метод исследования. Цель исследования. Этапы работы. 14.Искусственные питательные среды, их классификация. Требования, предъявляемые к питательным средам. 15.Рост и размножение бактерий. Фазы размножения. 16.Способы получения энергии бактериями (дыхание, брожение). Методы культивирования анаэробов. 17.Принципы и методы выделения чистых культур бактерий. 18.Ферменты бактерий, значение их в идентификации возбудителя. 19. Методы культивирования вирусов. 20.Нормальная микрофлора организма человека и её функции. Дисбиозы. Пробиотики. 21.Микрофлора воздуха и методы её исследования. Значение микрофлоры воздуха для родильных отделений и палат новорожденных. 34 22.Методы санитарно-бактериологического исследования воды: определение микробного числа, коли-титра и коли – индекса. 23.Понятие о дезинфекции. Методы. Дезинфектанты. 24.Понятие о стерилизации, методы, аппаратура. 25.Понятие о химиотерапии и антибиотиках. Механизм действия антибиотиков. 26. Антибиотики, классификация по источнику получения, способу получения. 27. Антибиотики. Источники и способы получения. Классы антибиотиков. 28. Классификация антибиотиков по химической структуре, механизму и спектру действия. 29.Механизм лекарственной устойчивости возбудителей инфекционных болезней. Пути преодоления устойчивости. 30.Осложнения антибиотикотерапии, их предупреждение. Применение эубиотиков (пробиотиков). 31.Лекарственная устойчивость бактерий. Механизмы. Пути преодоления. 32.Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам. 33. Строение генома бактерий. Понятие о генотипе и фенотипе. Виды изменчивости. 34.Плазмиды бактерий, их функций и свойства. Использование плазмид в генной инженерии. 35. Механизм передачи генетического материала у бактерий. 36. Понятие об инфекции. Условия возникновения инфекционного процесса. Патогенность и вирулентность бактерий. 37. Патогенность и вирулентность бактерий. Факторы патогенности. 38.Токсины бактерий, их природа, свойства, получение. 39.Понятие об инфекционной болезни. Стадии развития и характерные признаки. 40.Понятие о клинической микробиологии. Роль условно - патогенных микроорганизмов в патологии ребенка. 41.Методы микробиологической диагностики инфекционных болезней. 42.Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций. 43.Особенности микробиологической диагностики при карантинных инфекциях. Экспресс-диагностика. 44.Внутривидовая идентификация бактерий (эпидемиологическое маркирование.). 45.Роль И.И. Мечникова в формировании учения об иммунитете. Развитие клеточных неспецифических механизмов защиты. Особенности реакции у детей раннего возраста. Незавершенность фагоцитоза. 46.Комплемент, его структура, функции, пути активации, роль в неспецифической защите у детей. 47.Интерфероны. Природа, способы получения. Применение. 48.Понятие об иммунитете. Виды иммунитета. 49.Классы иммуноглобулинов, их характеристика. Особенности иммунологической реактивности и динамика антителообразования в 35 развивающемся детском организме. 50.Иммунокомпетентные клетки: Ти В- лимфоциты, макрофаги, их кооперация 51.Антителообразование: первичный и вторичный иммунный ответ. 52.Иммунологическая память. Иммунологическая толерантность. 53.Структура и функции иммунной системы. Кооперация иммунокомпетентных клеток. 54.Антигены, определение, основные свойства. Антигены бактериальной клетки 55.Анатоксины. Получение, очистка, титрование и применение. 56.Агглютинирующие адсорбированные сыворотки. Приготовление, при менение. 57.Гиперчувствительность немедленного типа. Механизм возникновения и значение. Профилактика анафилактического шока. 58. Анафилактический шок и сывороточная болезнь. Причины возникновения, механизм. Предупреждение анафилактического шока 59.Механизмы гиперчувствительности замедленного типа. Клиникодиагностическое значение. Аллергические пробы у детей раннего возраста, особенности проявления 60.Аллергические пробы, их сущность, применение. Особенности проявления кожно-аллергических проб у детей разного возраста. Их значение в оценке диагностических реакций. 61.Диагностические препараты, получение, применение. 62. Живые вакцины, получение. Достоинства и недостатки при введении детям. 63. Убитые вакцины, получение, применение. Достоинства и недостатки 64.Химические вакцины. Получение. Достоинства. Применение. Роль адъювантов. 65.Генно-инженерные вакцины. Принципы получения, применение 66.Реакция преципитации. Механизм. Компоненты. Способы постановки. 67.Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки 68.Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации. Компоненты. Применение. 69.Полные и неполные антитела. Реакция Кумбса. Механизм. Компоненты. Применение. 70.Реакция связывания комплемента. Механизм. Компоненты. Применение. 71.Серологические реакции, используемые при диагностике вирусных инфекций 72.Радиоиммунный метод. Механизм, компоненты, применение 73.Препараты иммуноглобулинов. Получение, очистка, показания к применению у детей. 74.Реакция иммунофлюоресценции. Механизм. Компоненты, применение. 75.Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Механизм. Способы постановки, применение. 36 76.Иммуноферментный анализ, механизм, компоненты, применение 77.Антитоксические сыворотки. Получение, очистка, титрование и применение. Осложнения при использовании и их предупреждение. 78.Понятие о клинической иммунологии. Иммунный статус ребенка и факторы, влияющие на него. Оценка иммунного статуса. 79.Первичные и вторичные иммунодефицита. Диагностика, лечение. 80.Плановая иммунопрофилактика детей против инфекционных заболеваний. 81.Моноклональные антитела. Принципы получения и применение. 82.Диагностические препараты, получение, применение. 83.Возбудители эшерихиозов у детей. Таксономия. Характеристика. Особенности патогенеза, иммунитета. Роль кишечной палочки в норме и патологии. Микробиологическая диагностика эшерихиозов. Принципы профилактики и лечения. 84.Диарейные эшерихии, виды, роль в детской патологии. Применение бактериальных препаратов и значение естественного вскармливания при лечении кишечных инфекций у детей младшего возраста. 85.Возбудители брюшного тифа и паратифов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 86.Возбудители сальмонеллезов. Таксономия. Характеристика. Микробиологический диагноз сальмонеллезов. Принципы профилактики и лечения. 87.Возбудитель шигеллеза. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Принципы профилактики и лечения дисбактериоза у детей путем применения препаратов. 88. Возбудитель холеры. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 89.Возбудитель кишечного иерсиниоза. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Принципы профилактики и лечения у детей. 90.Синегнойная палочка. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Принципы профилактики и лечения. 91.Возбудитель дифтерии. Таксономия. Характеристика. Условнопатогенные коринебактерии. Микробиологическая диагностика. Выявление антитоксического иммунитета. Специфическая профилактика и лечение у детей. 92.Определение иммунитета у детей к дифтерии. Реакция Шика, метод введения, оценка результатов. 93.Возбудитель анаэробной газовой инфекции. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 94.Возбудитель ботулизма. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 37 95.Возбудитель столбняка. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическое профилактика и лечение. 96.Менингококки. Таксономия. Характеристика биологических свойств. Патогенез. Формы инфекции. Микробиологическая диагностика. Лечение. Специфическая профилактика. 97.Возбудитель гонореи. Таксономия. Микробиологическая диагностика. Специфическое лечение. Гонококки – возбудители бленнореи. 98.Гонорея у детей, механизм заражения. Осложнения. 99.Возбудитель сифилиса. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическое лечение. Врожденный сифилис. 100.Возбудители боррелиозов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Профилактика. 101.Возбудители лептоспироза. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 102.Стафилококки. Таксономия. Характеристика биологических свойств. Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых стафилококками. Специфическая профилактика и лечение. 103.Стрептококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций. Принципы профилактики и лечения. Роль стрептококков при скарлатине. Иммунитет после перенесенного заболевания, определение его напряженности. 104.Возбудители хламедиозов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическое лечение. Роль хламидий в патологии беременности и поражении плода. 105.Возбудитель туберкулеза. Таксономия. Характеристика. Условнопатогенные микобактерии. Микробиологическая диагностика туберкулеза. Специфическая профилактика и лечение у детей. 106.Возбудитель туляремии. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 107.Возбудитель сибирской язвы. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. Проблемы биотерроризма. 108. Возбудитель бруцеллеза. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 109.Дрожжеподобные грибы рода кандида. Заболевания у новорожденных (молочница). Возбудители дерматомикозов. Значение в детской патологии. 110. Возбудитель чумы. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 111.Возбудители коклюша и паракоклюша. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 112.Возбудитель сыпного тифа. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Профилактика и лечение. 38 113. Проблема госпитальной инфекции, вызванной бактериями из семейства кишечных бактерий (сальмонеллы, клебсиеллы) в педиатрической клинике. Пути профилактики. 114.Неспорообразующие анаэробы. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика и лечение. 115.Возбудитель полиомиелита. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение 116.Энтеровирусы. Возбудители гепатитов А и Е. Характеристика свойств. Патогенез заболевания. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 117.Вирусы КОКСАКИ, ЭСНО. Характеристика свойств. Патогенез заболевания. Лабораторная диагностика. Лечение, профилактика. 118.Вирус кори. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение. Понятие о медленных вирусных инфекциях. 119.Арбовирусы. Классификация. Возбудитель клещевого энцефалита. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика. 120.Возбудители гепатитов В, С, Д. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика у детей. 121.Возбудители ОРВИ. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение у детей. 122.Герпес- инфекция: таксономия, характеристика возбудителей. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 123.Возбудитель бешенства. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. 124.Возбудители ВИЧ/СПИД инфекции. Таксономия. Особенности ВИЧинфекции у детей. Лабораторная диагностика. Специфическое лечение. 125.Возбудитель гриппа. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение. 126.Классификация и характеристика онкогенных вирусов 39 Литература: 1. Микробиология с вирусологией иммунологией / Под ред. Л.Б. Борисова, А.М. Смирновой. – М., 1994. 2. Микробиология и иммунология / Под ред. А.А. Воробьева. – М., 1999. 3. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии / Под ред. Л.Б. Борисова. – М., 1984. 4. Вирусология. В 3 тт. / Под ред. Б. Филсца, Д. Найца. – М., 1989. 5. Кочемасова З.Н., Ефремова С.А., Рыбакова А.М. Санитарная микробиология и вирусология. – М., 1987. 6. Воробьев А.А. Основы медицинской биотехнологии. – М., 1990. 7. Внутрибольничные инфекции / Под ред. В.П. Венцела. – М., 1990. 8. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология. – М.: Изд-во ВНИРО, 195. 9. Клиническая иммунология / Под ред. А.В. Караулова. – М.: Мед. инф. агентство, 1999. 10. Галактионов В.Г. Иммунология. – М.: Изд-во Московского ун-та, 1998. 11. Ярилин А.А. Основы иммунологии. – М.: Медицина, 1999. 12. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. – СПб., 1998. 13. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С., Воробьев А.А. Эндогенные иммуномодуляторы. – СПб.: Гиппократ, 1992. 14. Медуницин Н.В. Вакцинология. – М.: Медицина, 1998. 15. Бухарин О.В., Литвин В.Ю. Патогенные бактерии в природных экосистемах. – Екатеринбург, 1997. 16. Красильников А.П., Романовская Т.Р. Микробиологический словарьсправочник. – Минск: Асар, 1999. 17. Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. – М.: Медицина, 1999. 18. Краткий терминологический словарь микробиолога-биотехнолога / Под ред. Ю.А. Овчинникова. – М.: АН СССР, 1989. 19. Елинов Н.П. Основы биотехнологии. – СПб.: Изд. фирма «Наука», 1995. 20. Микробиология/ А.А. Воробьев, А.С. Быков, Е.П. Пашков, А.М.Рыбакова. – М, 1998 г. 21. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. А.И. Коротяев, С.А. Бабичев. – С- Петербург, 1998г. 40 22. Общая микробиология с вирусологией и иммунологией. Б.Н. Райкис, В.О. Пожарская, А.Х. Казиев. – М. 2002 г. 23. Медицинская микробиология. акад. РАМН В.И. Покровский, проф. Проф. О.К. Поздеев. – М, 1998г.