Министерство образования Российской Федерации Санкт-Петербургский Государственный технологический институт (технический университет) ОТЧЕТ Микробиологические исследования возможности дезинфекции объектов птицеводческого хозяйства ЗАО п/ф «Синявинская» аэрозолем йода с использованием генераторов аэрозоля антисептических составов ГААС. Санкт-Петербург 2003г. 1. ∞Объекты и методы исследования Численность контаминантной микрофлоры определяли в производственных условиях ЗАО п/ф «Синявинская» на поверхностях следующих объектов: а) скорлупы яиц и картонного лотка, помещенных на дезинфекцию в дезинфекционную камеру; б) стен и косяков дверного проема дезинфекционной камеры; в) воздушной среды дезинфекционной камеры; г) стен корпуса №9 цеха выращивания; е) скорлупы яиц, представленных птицефабрикой для лабораторных исследований с целью отработки рабочей концентрации действующего вещества. Численность контаминантной микрофлоры определяли методом посева на плотные питательные среды: сухой питательный агар (СПА) – для определения общего микробного числа ОМЧ (м.о.аммонифицирующие белки) среда Чапека – для выявления плесневых грибов – ПГ (микромиценты) среда сусло – агар - для учета дрожжей; среда - Эндо – для обнаружения бактерий группы кишечной палочки – БГКП. Для оценки обсемененности указанных объектов образцы отбирали методом мазка стерильным ватным тампоном с площади 10 см2. Забор воздуха осуществляли сотрудники микробиологической лаборатории ЗАО п/ф «Синявинская». 2. Полученные данные и их обсуждение Известно, что на скорлупе яиц можно обнаружить до 40 видов контаминирующих микроорганизмов, чаще всего это – кишечная палочка, сальмонелла, стафилококки. Эти подвижные формы микроорганизмов чрезвычайно быстро проникают внутрь яйца – в белок и желток, а затем и в эмбрион, вызывая наиболее часто встречающиеся у птиц патологии. Контаминирование скорлупы яиц различными видами микроорганизмов происходит через воздух, с пылью помещения птичника, путем контакта с подстилкой (это экзогенный путь заражения), а также при формировании их из инфицированных фолликулов или во время прохождения через яйцевод и клоаку уже зараженных птиц. Вследствие этого, как видно из табл. 1, исследуемые в лабораторных условиях образцы исходных яиц (№ 1 / 5 ) в каждом отдельном случае значительно отличаются по численности групп микроорганизмов. Таблица 1. Численность контаминантной микрофлоры на поверхности скорлупы яиц, необработанных биоцидами, КОЕ/Sяиц (Sяиц =70 см2). № яйца Бактерии группы кишечной палочки Общее микробное число Микромицеты Дрожжи/Плесневые грибы 1 0,3 132 6 1/4 2 0,3 180 9 0/5 3 1,0 120 5 0/4 4 0,6 160 5 0,3/1 5 0,3 110 7 3/5 В производственных условиях бактериальная обсеменность скорлупы яиц может достигнуть значительных величин (см табл. 2 п.1), что особенно важно в процессе ∞∞∞∞∞подвергается микробиологической порче. Таблица 2. Численность контаминантной микрофлоры на поверхности скорлупы яиц и картонного лотка до и после обработки парами йода в производственных условиях дезинфекционной камеры ЗАО п/ф «Синявинская», КОЕ/см2 (С12=0,2 г/м3, тэксп=1,0 час) № п/п 1 2 3 4 Объект обработки яйцо Картонный лоток до обработки Бактерии группы кишечной палочки ∞ после обработки 2 14*104 8*102 1*103 до обработки 20 1*105 3*103 4*105 после обработки 0 1*104 3*102 3*10 Условия обработки Аммонифицирующие бактерии (ОМЧ) Микромицеты Дрожжи ∞ 4*105 1*106 *Примечание. При выявлении бактерий группы кишечной палочки (БГКП) на среде Эндо в огромном количестве выросли морфологически однотипные бактерии, не относящиеся к Е.coli. Они были выделены в чистую культуру, работу, по идентификации которой необходимо продолжить. Данные микробиологических исследований, представленные в табл. 3, также свидетельствуют о различной и достаточно высокой степени обсеменения поверхности стен и оборудования производственных помещений птицефабрики «Синявинская». № п/п 1 2 3 4 5 6 Таблица 3. Численность контаминантной микрофлоры на поверхностях производственных помещений ЗАО п/ф «Синявинская» до и после обработки парами йода, КОЕ/см2 (С12=0,2 г/м3, тэксп-1,0 час) Бактерии Аммонифицирующ Объект Условия группы Микроие бактерии Дрожжи обработки обработки кишечной мицеты (ОМЧ) палочки Санитарные нормы Стена помещения до по хранению 0 1*107 1*103 0 обработки яиц и тары до 0 ∞ ∞ 30 Кафельная стена обработки дезинфекционной после камеры 0 12*104 0 0 обработки до Дверной косяк 0 1*107 1*103 3*105 обработки входной двери камеры после 0 2*103 0 7*102 7 8 Стена помещения корпуса 9 цеха выращивания обработки до обработки после обработки ∞ 8*106 ∞ ∞ 0 6*102 2*103 1*103 Следовательно, в комплексе санитарно-профилактических мероприятий, проводимых в птицеводческих хозяйствах с целью ликвидации заразных болезней птиц, дезинфекционная обработка яиц (и продовольственных и инкубационных) занимает важное место. При выборе дезинфицирующего средства необходимо учитывать, что основным показателем качества дезинфицирующих средств является их спектр действия, степень безвредности для человека и птицы, проникающая способность и обеззараживающее действие, влияние препарата на технологию продукции и др. Для обеззараживания яиц в ЗАО п/ф «Синявинская» обычно используют формальдегид в виде водного тумана, получаемого путем распрыскивания водовоздушными форсунками или водоструйными насадками (распрыскивателями воды) водного раствора формалина, создающими крупнодисперсные аэрозоли (80 – 100 мкм). Орошение проводят в дезинфекционной камере, используя специально выделенные транспортные тележки, которые загружают картонными лотками с яйцами. Рабочая концентрация формальдегида в дезинфекционной камере составляет 45 мл/м3, время экспозиции – 30 минут. Однако наличие в одном растворе исходного формалина кристаллической формы формальдегида – параформа часто приводит к сбою работы дезинфекционной камеры в результате забивания кристаллами параформа отверстия распрыскивателя, а высокая токсичность формальдегида повышает степень опасности для обслуживающего персонала в процессе их прочистки. В качестве альтернативного дезинфицирующего вещества предложен йод в виде тонкого дисперсного аэрозоля с размером частиц 1,0 мкм, получаемого в результате генерирования генератора аэрозоля антисептического состава – ГААС по ТУ 2449-00405121441-2002, санитарно-эпидемиологическое заключение № 78.01.06.244 П 002535.04.02 от 19.04.2002г. В табл. 4 приведены результаты лабораторных обработок поверхностей яиц и картонных лотков. Таблица 4. Влияние обработки биоцидаи на контаминирующую микрофлору поверхности Скорлупы яиц и картонных лотков для их хранения (тэксп =1,0 сутки) № п/п Материал 1 2 3 4 5 Яйцо КОЕ/Sяйца (Sяйца=70 см2) Биоцид (Доза ДВ г/м3) Бактерии группы кишечной палочки Аммонифицирующие бактерии (ОМЧ) Микромицеты Дрожжи/ Плесневые грибы Контроль (без обработки) 10 192 15 0/12 йод – 0,2 йод – 0,5 0 6 11 0/3 0 2 5 0/3 формальдегид – 0,2 Формальдегид – 0,5 0 33 8 0/6 0 2 4 0/1 Контроль (без обработки) 6 7 8 Картонный лоток, КОЕ/г йод – 0,2 йод – 0,5 20 1*105 3*103 2*107/3*102 0 1*104 3*102 0/3*102 0 2*103 1*102 0/3*102 формальдегид – 0,2 0 2*104 6*102 0/2*103 Формальдегид – 10 0 9*103 3*102 0/1*103 0,5 Как видно из табл. 4 (п.п. 2 и 3) В результате обработки яиц газовой фазой аэрозоля йода численность всех систематических групп контаминантных микроорганизмов существенно снижается. Следует отметить, что для достижения положительного эффекта обработки достаточно использовать концентрацию йода равной 0,2 г/м3, что соответствует обработке формальдегидом при концентрации, равной 0,5 г/м3 (см табл. 4. п.п. 4 и 5) Основываясь на высокой оседающей и проникающей способности тонкодисперсных частиц йода, можно будет уничтожить патогенную микрофлору не только на поверхности скорлупы яиц, но и микрофлору, проникающую на подскорлупные оболочки, т.е. обеспечить наиболее эффективное глубинное обеззараживание яиц от микробной контаминации. Результаты табл. 2 (п.3) и 4 (п.6) также свидетельствуют о достаточно высокой степени обсемененности картонного лотка, предназначенного для укладки яиц при их хранении и транспортировке, что может служить дополнительным источником обсеменения яиц контаминантной микрофлорой. При одновременной обработке яиц и картонного лотка (см. п. 4 табл. 2 и п.п. 7-10 табл. 4) степень его обсемененности существенно снижается. Результаты, приведенные в табл. 3 показывают, что санация парами йода (Ср=0,2 3 г/м ) скорлупы яиц. Помещенных в дезинфекционную камеру (табл. 2 п. 2), обеспечивает одновременно и высокий дезинфекционный эффект поверхностей помещения камеры (см. п.п. 4-7 табл. 3) Таким образом, проведенные бактериологические исследования показали, что аэрозоль йода получаемый при генерировании изделий ГААС, обладает хорошей санирующей способностью и позволяет более чем на 2 порядка снизить уровень специфической (Е-Соli) и неспецифической микрофлоры как на скорлупе яиц так и на поверхности помещений. 9