Посмотреть автореферат - Северо

На правах рукописи
Владыкин Максим Сергеевич
ИММУННЫЙ СТАТУС ПОРОСЯТ ПРИ ПНЕВМОНИИ,
ВЫЗВАННОЙ ВИРУСОМ РЕПРОДУКТИВНОРЕСПИРАТОРНОГО СИНДРОМА СВИНЕЙ
06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология,
микология с микотоксикологией и иммунология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
г. Новочеркасск
2011
эпизоотология,
2
Работа выполнена в Государственном научном учреждении Северо-Кавказский
зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской
академии сельскохозяйственных наук
Научный руководитель:
доктор ветеринарных наук
Бутенков Александр Иванович
Официальные оппоненты:
доктор ветеринарных наук, доцент
Хабузов Иван Павлович
(Донской госагроуниверситет)
доктор биологических наук, доцент
Слободяник Валентина Сергеевна
(Воронежский гостехуниверситет)
Ведущая организация:
ГНУ Краснодарский научноисследовательский ветеринарный институт
Россельхозакадемии
Защита состоится 11 октября 2011 года в 1200 часов на заседании
диссертационного совета Д 006.106.01 при Государственном научном
учреждении Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский
ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук.
346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, Ростовское шоссе, 0
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ СевероКавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт
Россельхозакадемии - 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск,
Ростовское шоссе, 0.
Автореферат разослан «
» сентября 2011 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета, профессор
А.М. Ермаков
3
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Основной проблемой для свиноводства остаются
респираторные заболевания поросят, несмотря на разработанные современные
методы лечения и превентивные меры. Репродуктивно-респираторный
синдром свиней (РРСС) - контагиозное заболевание, характеризующееся
нарушением функции воспроизводства у свиноматок, абортами, рождением
мёртвых или слабых поросят с высокой смертностью. У молодых поросят и
животных на откорме вирус вызывает поражение респираторного тракта с
преимущественным развитием пневмоний.
По данным многочисленных авторов, изучающих РРСС, на сегодняшний
день заболевание приобретает характер панзоотии. Болезнь регистрируется в
большинстве стран мира с развитым промышленным свиноводством, наносит
значительный экономический ущерб, состоящий как из прямых потерь недополучения продуктов животноводства, связанных с прохолостами
свиноматок, рождением мертвых, так и косвенных - затрат на проведение
ветеринарно-санитарных и охранных мероприятий.
Болезнь была впервые зарегистрирована в Америке в 1987 г., в Европе в
1990 г, в настоящее время заболевание распространилось практически во всех
странах мира. В России РРСС зарегистрировано официально в 1993 г., затем и
в других странах СНГ. Серопозитивных к вирусу РРСС свиней выявляют в
более чем 80% хозяйств, заболевание характеризуется широким
варьированием клинических проявлений. По данным официальных отчетов
ветеринарной службы Российской Федерации за период с 2000 по 2009 гг., на
территории России в 73 % обследованных хозяйств у животных были
обнаружены специфические к вирусу антитела, а в 25 % выделен вирус РРСС.
При заносе в свиноводческое хозяйство вирус РРСС вызывает у
животных генерализованную инфекцию с виремией и распространением по
всему организму. Болезнь протекает в острой, хронической и инаппарантной
форме, с высокой степенью контагиозности, с потерей животных до 80-100%.
На поздних сроках супоросности наблюдают аборты, преждевременные
опоросы, рождение мертвых или живых поросят, погибающих в неонатальный
период. Респираторные нарушения проявляется у животных на доращивании и
в возрасте 14-20 недель, у новорожденных - респираторный синдром
характеризуется одышкой, лихорадкой, потерей аппетита, снижением
эффективности усвояемости кормов и замедлением роста.
В отдельных хозяйствах сохраняется длительное неблагополучие по
данной инфекции, что связано с эпизоотологическими особенностями болезни,
обусловленной ВРРСС - наличием длительной персистенции вируса,
инаппарантной формы течения болезни.
На сегодняшний день в доступной нам литературе отсутствуют сведения
о распространении и клиническом течении заболевания, вызванного ВРРСС,
на территории Ростовской области. Нет сведений по клиникоморфологическому и иммунологическому статусу поросят при пневмонии,
вызванной ВРРСС, что и послужило основанием для нашего исследования.
4
Цели и задачи исследования. Провести мониторинг распространения
РРСС, выяснить региональные особенности динамики инфекционного
процесса РРСС на основе изучения морфофункциональных изменений и
иммунного статуса у поросят, больных пневмонией, вызванной ВРРСС.
Для решения данной цели были поставлены следующие задачи:
1. Изучить распространение инфекции, вызванной вирусом РРСС, в
Ростовской области.
2. Изучить морфофункциональные изменения у поросят при пневмонии,
вызванной вирусом РРСС.
3. Изучить состояние гуморального иммунитета у поросят при пневмонии,
вызванной вирусом РРСС.
4. Изучить состояние клеточного иммунитета у поросят при пневмонии,
вызванной вирусом РРСС.
5. Подобрать эффективную схему лечения иммунного статуса при разной
тяжести пневмонии у поросят, вызванной вирусом РРСС.
Научная новизна работы.
Представлены новые данные по
распространению РРСС в свиноводческих хозяйствах Ростовской области.
Изучены клинико-эпизоотологические особенности проявления инфекции,
вызванной вирусом РРСС. Впервые определено влияние РРСС на
морфологические и биохимические показатели крови, гистологические
структуры в легких в зависимости от тяжести течения при спонтанной
инфекции. Автором впервые получены данные по иммунному статусу поросят
при РРСС разной степени тяжести. Апробирована и предложена практике
новая схема коррекции иммунного статуса у поросят при пневмонии,
вызванной вирусом РРСС. Разработаны и апробированы схемы лечения
животных для различных клинических форм заболевания.
Теоретическая и практическая значимость. Представленные результаты
по распространению РРСС в свиноводческих хозяйствах могут быть
использованы при разработке планов противоэпизоотических мероприятий.
Полученные данные по иммунологическому статусу поросят при инфекции,
вызванной ВРРСС, могут использоваться в учебном процессе по
специальностям «Биология», «Ветеринария» и «Зоотехния», написании
учебных пособий и практических рекомендаций. Рекомендована эффективная
схема лечения животных при РРСС.
Диссертационное исследование проведено в соответствии с темой
научных исследований Государственного научного учреждения СевероКавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт
Россельхозакадемии “Разработать методы ранней диагностики, эффективные
средства и способы профилактики и лечения массовых заболеваний у
молодняка высокопродуктивных животных”, государственная регистрация
№15070.3666026906.06.8.001.2.
Реализация результатов исследований. Результаты исследований
используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических
занятий по эпизоотологии и патанатомиии в ФГОУ ВПО «Донской
5
государственный аграрный университет», в работе Ростовской областной
ветеринарной лаборатории, в трех хозяйствах Ростовской области.
Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и
обсуждены на ежегодных научно-практических конференциях ГНУ «СевероКавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт» в
2008-2010 гг.; на VII Международной конференции молодых ученых,
посвященной 75-летию профессора А.В. Газданова, «Актуальные и новые
направления сельскохозяйственной науки», г. Владикавказ, 2011 г.; на III
Международной научно–практической конференции
«Инновационные
процессы в АПК», посвященной 50-летию образования аграрного факультета
РУДН, Москва, 2011 г.
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликованы 10
научных работ, из них 4 – в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК
РФ.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора
литературы, описания материала и методов исследований, результатов
собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических
предложений, списка литературы. Работа изложена на 133 страницах
компьютерного текста, содержит 23 таблицы, иллюстрирована 38 рисунками.
Библиографический список включает 203 источника, в том числе 144
зарубежных.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Динамика показателей морфологических и биохимических
исследований крови, отражающая развитие пневмонии поросят, вызванной
вирусом РРСС, носит диагностический характер при определении тяжести
течения заболевания.
2. Динамика иммунного статуса у свиней, инфицированных вирусом
РРСС, отражает тяжесть течения инфекционного процесса, а изменения в
легких носят типичный характер и могут развиться до развития клинических
форм. Коррекция иммунного статуса улучшает курабельность РРСС.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы, методы и объемы исследований
Работу выполняли с 2008 по 2010 гг. в лаборатории функциональной
диагностики болезней сельскохозяйственных животных ГНУ СКЗНИВИ
Россельхозакадемии, в Ростовской областной ветеринарной лаборатории, а
также в хозяйствах Ростовской области.
При изучении распространения инфекционных и инвазионных
заболеваний использовались отчетные данные ГУРО «Ростовская областная
ветеринарная лаборатория».
6
За период с 2008 по 2010 гг. в хозяйствах Ростовской области осмотру
подвергнуто 6481 свиней. Из них у 22% выявлена инфекционная патология. За
подопытными животными было установлено постоянное клиническое
наблюдение, при этом учитывали процент заболеваемости, выздоровления и
падежа. Ежедневно клинически обследовали поросят, а лабораторные
исследования проводили при первичном и повторном осмотрах и при
выздоровлении.
Для изучения эпизоотической ситуации по пневмонии поросят,
вызванной вирусом РРСС, было проведено обследование поголовья свиней в
10 хозяйствах Ростовской области: ООО "Урсдон" Усть-Донецкого района,
ОАО «Боковский» Боковского района, ОНО ОПХ "Красноармейское"
Орловского района, ООО "Донская Нива" Октябрьского района, ИП
Васильченко Семикаракорского района, ЗАО «Русская свинина» Каменского
и Миллеровского районов, ЗАО «Батайское» Азовского района, СПК «к-з
Краснокутский» Боковского района, СПК «Русь» Сальского района, СПК
«Родина» Матвеево-Курганского района.
Опыты
по
изучению
морфологических,
биохимических
и
иммунологических показателей у свиней, больных РРСС, были проведены на
базе следующих хозяйств: ООО "Бусел" г. Новочеркасска, ООО "Донская
Нива" Октябрьского района, ИП Васильченко Семикаракорского района
Ростовской области (табл. 1).
Таблица 1
Объем проведенных исследований, голов
№
Вид проведенного исследования
п./п.
1
Исследовано животных клинически, голов
2
Вирусные заболевания
3
Выявлено
больных В том числе РРСС
животных, голов:
Бактериальные
4
заболевания
5
Вскрыто павших поросят, голов
6
Гематологических
7
Проведено лабораторных Иммунологических
8
Биохимических
исследований:
9
ПЦР
Всего проведено
исследований
4674
644
334
472
43
460
360
460
1514
Диагностику пневмонии поросят, вызванной вирусом РРСС, проводили
в ГУРО «Областная ветеринарная лаборатория» с помощью тест-системы для
выявления ДНК возбудителя в патологическом материале методом
полимеразно-цепной реакции (ПЦР) с электрофоретической детекцией
продуктов амплификации в агарозном геле, а также определяли наличие
специфических антител к возбудителю пневмонии поросят, вызванной
вирусом РРСС, в сыворотке крови методом ИФА.
В целях определения тяжести и особенностей течения пневмонии,
вызванной ВРРСС, для животных проводили морфологические и
7
биохимические исследования крови в ГУРО «Областная ветеринарная
лаборатория» и в лаборатории функциональной диагностики болезней с.-х.
животных ГНУ СКЗНИВИ РАСХН.
Опыты по иммунологическому состоянию больных животных
проводили на трех группах поросят по 40 голов в каждой. Первая группа,
контрольная, включала клинически здоровых животных без признаков
заболевания. Во второй группе были животные с первой стадией заболевания,
у которых отмечался кашель, но был сохранен аппетит. В третья опытной
группе включали поросят со второй стадией заболевания, характеризующейся
кашлем, тяжелой одышкой, адинамией, анорексией. Определение
концентрации сывороточных иммуноглобулинов проводили с помощью
реакции Манчини; количества Т – лимфоцитов и их субпопуляций методом
розеткообразования — Е-РОК. Тимусзависимые Т-лимфоциты имеют
рецепторы для эритроцитов барана, которые выступают, таким образом,
специфическим маркером для их распознавания (Е-РОК: Erythrocyte —
розеткообразующие
клетки).
Выявляли
2
субпопуляции:
теофиллинчувствительные
Т-лимфоциты
(Т-супрессоры),
утратившие
способность к розеткообразованию под влиянием обработки теофиллином, и
теофиллинустойчивые Т-клетки (Т-хелперы) лимфоциты, сохранившие такую
способность.
Статистическую обработку результатов исследований проводили по
Н.А. Плохинскому (1970), Хитоси Кумэ (1990) с использованием
компьютерной техники.
2.2. Структура инфекционной патологии свиней в Ростовской области
В хозяйствах региона ежегодно переболевают инфекционными
болезнями от 35 до 98% поросят. Из общего количества павших поросят в
2008-2010 гг. гибель их от респираторных болезней составила 52,1%.
Мы провели ретроспективный анализ уровня заболеваемости свиней
инфекционными болезнями в Ростовской области за период 2008-2010 годы.
Из заболеваний, причиной которых являются вирусы, следует назвать
парвовирусную
инфекцию,
РРСС,
цирковирусную
инфекцию,
трансмиссивный гастроэнтерит и ротавирусную инфекцию.
Нами изучен удельный вес РРСС в сравнительном аспекте и в динамике.
Наиболее часто за исследуемый период регистрировали микоплазмоз – 22,8 %,
цирковирусную инфекцию – 15.9%, РРСС и колибактериоз – по 12,5%, ПВИС
– 10,1%, пастереллез – 8,5%. На долю остальных заболеваний приходилось в
сумме 17,7% (рис. 1).
Пик заболеваемости свиней РРСС приходился на конец зимы – начало
весны, что, по-видимому, связано со снижением иммунного статуса свиней на
фоне гиповитамонозов, ухудшение качества комбикормов в зимне-весенний
период. Такую динамику можно объяснить и резкими изменениями
климатических факторов, которые приводят к манифестации инфекции при
наличии возбудителя в организме.
8
Рис. 1. Нозологический профиль инфекционной патологии свиней в
Ростовской области в 2008-2010 годах
В 2008 г. смертность от РРСС у подсвинков составила 2,53% при
летальности 29,1%. В 2009 г. эти показатели существенно не изменились –
смертность составила 2,62%, а летальность – 25,2%.
Таблица 2
Динамика заболеваемости, смертности и летальности при РРСС
Год
Восприимчивых
животных, гол
2008
2009
2010
1341
1256
1127
Заболело, Пало,
гол.
гол.
117
131
142
34
33
29
Заболеваемость, %
Смертность,
%
Летальность,
%
8,7
10,4
12,5
2,53
2,62
2,57
29,1%
25,2%
20,4%
Соотношение вирусных и бактериальных заболеваний свиней в
Ростовской области с учетом сочетанных проявлений инфекционной
патологии составляет приблизительно 1:1. По распространенности инфекций
свиней РРСС занимает ведущее место. Кроме того, наиболее часто
регистрируют микоплазмоз-22,8%, цирковирусную инфекцию – 15,9%,
колибактериоз –12,5%, ПВИС – 10,1%, пастереллез – 8,5%. На долю
остальных заболеваний приходится в сумме 17,7%. За период с 2008 по 2010
гг. заболеваемость свиней РРСС составила в среднем 10,5% .
Из 360 поросят, у которых возбудитель был выделен методом ПЦР, 131
голов (40,0%) были 0-8-недельного возраста, 100 голов – в возрасте 9-16
недель (30,5%), 86 голов – в возрасте 17-24 недель (26,3%). Пик
заболеваемости приходился на возраст 8-18 недель.
9
2.3. Манифестация инфекции, вызванной вирусом РРСС
Репродуктивно-респираторный синдром - вирусное заболевание,
манифестирующееся
абортами,
рождением
мертвых
поросят,
преждевременными опоросами или задержанием опороса, поражением
органов дыхания и окрашиванием кожи ушей и других органов.
В откормочных хозяйствах болезнь у подсвинков проявляется
симптомами поражения органов дыхания, чаще болеет молодняк от 4 до 6
месяцев. У инфицированного поголовья вирус выделяется во внешнюю среду
с калом, мочой, мокротой и выдыхаемым воздухом. Молодняк заражается
трансплацентарным, алиментарным и аэрогенным путями. Способствуют
возникновению болезни повышенная влажность и загазованность воздуха,
сквозняки. У подсвинков заболевание протекает в виде бронхопневмоний развивается катаральная, катарально-гнойная или крупозная пневмония с
изменениями в интерстиции. У больных бронхопневмонией поросят отмечают
лихорадку, угнетение, анорексию, истощение и глухой кашель. Респираторная
форма ассоциированной инфекции характеризуется внезапным повышением
температуры тела до 41-42°С, гиперемией слизистой оболочки носа,
носоглотки и трахеи, угнетением, сухим болезненным кашлем, обильным
серозно-слизистым истечением из носа (ринитом) и пенистым
слюноотделением. По мере развития болезни слизь становится густой, в дыхательных путях образуются слизистые пробки и очаги гнойного воспаления,
иногда некроза. При тяжелом течении болезни отмечают признаки асфиксии.
По степени тяжести пневмония, вызванная вирусом РРСС, у
подопытных поросят протекала легко, средне, тяжело и крайне тяжело.
Тяжесть течения заболевания мы определяли по совокупности шести
неспецифических симптомов и степени их проявления, которые можно
оценить визуально и по результатам специальных лабораторных
исследований.
2.4. Морфофункциональные изменения при пневмонии, вызванной
вирусом РРСС
Для изучения клинико-морфологической картины пневмонии,
вызванной вирусом РРСС, рассмотрены 134 секционных наблюдений поросят
2-6 месяцев. Грипп, энзоотическая пневмония, цирковироз, пастереллез,
гемофилез, микоплазмоз, бардотелиоз исключались методом ПЦР в областной
ветеринарной лаборатории. На анализ отправляли кусочки легких.
Исследования в период с 2008 по 2010 гг., базировались на сопоставлении
клинической картины, морфологических, биохимических показателей крови и
патологоанатомических вскрытий. У животных с субклиническим течением и
отдельными участками поражения легких на гистологическом уровне не
отмечали резко выраженных границ поражения легочной ткани. Участки
поражения
носили
локальный
аспект
и
характеризовались
10
перибронхиальными и периваскулярными пролифератами альвеолярных
клеток и макрофагов, которые располагались хорошо выраженными
островками и были хорошо заметны при обзорной микроскопии.
При поражении отдельных долек легкого граница между пораженным и
непораженным участком легкого была хорошо заметна, на пораженном
участке отмечалась повышенная клеточность легочной ткани и заполнение
альвеол экссудатом. При отсутствии экссудата в альвеолах отмечался отек
межальвеолярных перегородок и стенки бронхиол, в острой стадии
заболевания − ярко выраженная экссудация в просвет альвеол. В экссудате
обнаруживалось большое количество эритроцитов и лейкоцитов, при окраске
гематоксилин – эозином он имел красный цвет, при окраске трихром по
Масону в нем выделялись синие нити фибрина. Такую картину мы
интерпретировали как фибринозное воспаление, которое проходило все
стадии. В просвете альвеол увеличивалось количество лейкоцитов, они
постепенно замещали эритроциты, затем клеточность альвеол снижалась и в
итоге рассасывался фибринозный экссудат и восстанавливалась воздушность
легочной ткани. При массивном распространении процесса обнаруживались
по всем полям легких участки на разной стадии фибринозного воспаления, при
этом величина участков зависела от тяжести течения заболевания и
локальности процесса. Так, при легком течении отмечались поражения только
в краниальных долях легких, а участки воспаления ограничивались диаметром
от 0,3 до 1 см.
Была выражена мозаичность поражения, при более тяжелом течении
заболевания целые доли одновременно имели темно-красный цвет легкого,
при гистологическом исследовании в альвеолах обнаруживалось много
эритроцитов. Если поражалась большая часть легкого, животные, как правило,
погибали, а стадия разрешения так и не наступала.
Таким образом, при пневмонии, вызванной вирусом РРСС, у свиней в
легких можно выделить несколько гистологических паттернов: при
субклиническом течении возможна локальная пролиферация альвеолярного и
бронхиального эпителия с формированием периваскулярных островков; при
лобулярных поражениях пневмония носит интерстициальный характер с
развитием участков фибринозного воспаления которые находятся на разных
стадиях разрешения; при лобарных поражениях всегда развивается
фибринозная пневмония, можно выделить практически все ее стадии.
У поросят с субклинической формой пневмонии, вызванной вирусом
РРСС, были следующие показателей крови: к четырехмесячному возрасту эритропения до 50,9×1012/л и лейкопения до 13,73,9×109/л, до 5,80,1
ммоль/л; снижение уровня ионизированного калия. Уровень общего белка
снизился и составил 57,62,1г/л; повысились СОЭ (9,14,1 мм/ч), количество
альбуминов (24,81,9 г/л), уровень мочевины (8,61,3 ммоль/л), глюкозы
(5,50,1 ммоль/л) и активность аланинаминотрансферазы (113,612,2Е/л),
щелочной фосфатазы (103,914,1 Е/л), лактатдегидрогеназы (209,13,6 Е/л). У
поросят с острым течением заболевания к четырехмесячному возрасту
снизились: количество эритроцитов до 3,90,7 ×1012/л и лейкопении до 10,62
11
×109г/л, до 3,90,1 ммоль/л, и уровень ионизированного калия. Уровень
общего белка снизился и составил 51,52,2 г/л; повысились СОЭ (14,53,8
мм/ч), количество альбуминов (19,32,2 г/л), уровень мочевины (11,51,8
ммоль/л), глюкозы (9,30,1 ммоль/л) и активность аланинаминотрансферазы
(136,612,7 Е/л), щелочной фосфатазы (185,112,9 Е/л), лактатдегидрогеназы
(214,93,8 Е/л).
2.5. Результаты изучения иммунологического статуса у поросят с
пневмонией, вызванной вирусом РРСС
Результаты определения относительного и абсолютного содержания Тлимфоцитов у подопытных поросят в возрасте двух месяцев представлены в
табл. 3.
Таблица 3
Показатели клеточного иммунитета периферической крови у подопытных
поросят в 2-месячном возрасте
Группа, (n = 20)
Контрольная
I опытная
II опытная
III опытная
Т - лимфоциты
Т-лимфоциты
Т-хелперы,
Т-супрессоры,
%
×109/л
%
×109/л
%
×109/л
59,1 ±
1,0±
0,6±0,0
3,5±0,1 30,1 ± 1
19,4 ± 1,3
0,6
0,1
2
49,2 ±
1,2±0,02 26,9 ±
0,3±0,02
0,2±0,0
16,8± 1,8
1,5*
***
2,1*
***
2***
34,4±
0,4±0,04 25,1 ±
0,08±0,0
0,02±0,
12,3 ± 1*
1,5**
***
1,2**
1***
02***
15,7 ±
0,3±0,09 21,3 ±
0,04±0,0
0,01±0,
8,9 ± 1,2*
2,1**
***
1,5**
6***
02***
Тх/Тс
1,7
1,7
2,2
2,6
* p<0,05,** p <0,01,*** p <0,001 - в сравнении с животными
контрольной группы.
Результаты определения относительного и абсолютного содержания Влимфоцитов у подопытных поросят представлены в табл. 4.
Таблица 4
Показатели гуморального иммунитета у подопытных поросят
в 2-месячном возрасте
Группа, (n = 20)
Контрольная
I опытная
II опытная
III опытная
В-лимфоциты
%
×109/л
50,9 ± 2,3 24,1±0,1
60,8 ± 0,4 15,7±0,07
75,6
± 13,3±0,1**
2,3**
77,9
± 11,1±0,1**
2,7**
Иммуноглобулины
А, мг/мл
G, мг/мл
4,7±0,1
16,9±0,2
3,5±0,05
16,1±0,2
2,7±0,1
14,1±0,2
**
2,6±0,2
12,5±0,3
**
М, мг/мл
1,7±0,03
1,6 ± 0,1
1,5± 0,04
1,5± 0,06
*p<0,06,** p <0,01 - в сравнении с животными контрольной группы
12
Установлено, что у поросят контрольной группы число лейкоцитов
периферической крови было 13,9×109г/л, процентное количество Тлимфоцитов составило 59,1, а абсолютное 3,5×109/л; Т-хелперов и Тсупрессоров соответственно 1×109/л и 0,6×109/л.
У поросят первой опытной группы отмечалась лейкопения до
10,8×109/л., сопровождаясь снижением процентного содержания Тлимфоцитов до 49,2, а абсолютного до 1,2×109/л, что на 2,3×109/л меньше, чем
в контрольной группе. Процентное и абсолютное значение Т-хелперов и Тсупрессоров составило 26,9 и 0,3×109/л, 16,8% и 0,2×109/л соответственно, что
на 0,7×109/л и 0,5×109/л меньше, чем в контрольной группе.
Во второй опытной группе лейкопения была до 7,1×109/л и
лимфопения до 19,4×109/л. Лимфопения сопровождалась снижением
процентного содержания Т-лимфоцитов до 34,4, а абсолютного - до 0,4×109/л,
что на 3,1×109/л меньше, чем в контрольной группе. Процентное и абсолютное
значения Т-хелперов и Т-супрессоров составили 25,1 и 0,1×109/л; 12,3 и
0,03×109/л соответственно, что на 0,9×109/л и 0,6×109/л меньше, чем в
контрольной группе.
В третьей опытной группе лейкопения доходила до 6,5×109/л и
лимфопения до 15,6×109/л, сопровождаясь снижением процентного
содержания Т-лимфоцитов до 15,7, а абсолютного - до 0,3×109/л, что на
3,1×109/л меньше, чем в контрольной группе. Процентное и абсолютное
значения Т-хелперов и Т-супрессоров составили 21,3 и 0,04×109/л; 8,9 и
0,01×109/л соответственно - на 0,9×109/л и 0,6×109/л меньше, чем в
контрольной группе.
Анализ показателей, характеризующих гуморальное звено иммунитета
у поросят в возрасте двух месяцев (табл. 4), выявил, что относительное
содержание в крови В-лимфоцитов у поросят контрольной группы составил
50,9%, а в абсолютном значении 24,1±0,1×109/л, средний уровень
иммуноглобулина А, G и М - соответственно 4,7; 16,9; 1,7.
У поросят первой опытной группы процентное количество Влимфоцитов периферической крови увеличилось до 60,8, но, учитывая
лейкопению и лимфопению, абсолютное значение В-лимфоцитов снизилось до
15,7±0,1×109/л, что на 35% ниже, чем в контрольной группе. Средний уровень
иммуноглобулина А, G и М составил соответственно 3,5; 16,1; 1,6 мг/мл, то
есть на 27,1; 5,1 и 3,6 % ниже, чем в контрольной группе.
Во второй опытной группе процентное количество В-лимфоцитов
периферической крови увеличилось до 75,6, но, учитывая лейкопению и
лимфопению, абсолютное значение В-лимфоцитов оказалось 13,3±0,1×109/л,
что на 49,4% ниже, чем в контрольной группе. Средний уровень
иммуноглобулина А, G и М составил соответственно 2,7; 14,1; 1,5 мг/мл, что
на 45,8, 17,9 и 7,9 % ниже, чем в контрольной группе.
В третьей опытной группе процентное количество В-лимфоцитов
периферической крови увеличилось до 77,9, но, учитывая лейкопению и
лимфопению, абсолютное значение В-лимфоцитов оказалось 11,1±0,1×109/л, на 59,6% ниже, чем в контрольной группе. Средний уровень иммуноглобулина
13
А, G и М составил соответственно 2,6; 12,5; 1,5 мг/мл, что на 49, 28,8 и 9,4 %
ниже, чем в контрольной группе.
Результаты определения относительного и абсолютного содержания Тлимфоцитов и В-лимфоцитов у подопытных поросят в возрасте трех месяцев
представлены в табл. 5.
Установлено, что у поросят контрольной группы число лейкоцитов
периферической крови было 15,1×109/л, процентное количество Т-лимфоцитов
- 60,7, абсолютное 4,5±0,1×109/л, Т-хелперов и Т- супрессоров соответственно
33,2%, абсолютное 1,2±0,01×109/л; 14%, абсолютное 0,5±0,02×109/л.
Таблица 5
Показатели клеточного иммунитета периферической крови у
подопытных поросят в возрасте трех месяцев
Группа, (n = 20)
Контрольная
I опытная
II опытная
III опытная
Т - лимфоциты
Т-лимфоциты
%
×109/л
60,7 ± 4,2±0,0
0,6
4
54,5 ± 2,2±0,0
1,6*
2
40±
0,8±0,0
1,7** 4
33,3± 0,3±0,0
1,4** 4
Т-хелперы,
%
×109/л
33,2 ± 1,2±0,0
1
2
30,4 ± 0,6±0,0
1,9*
4
26,5 ± 0,2±0,0
1,3** 3
21,3 ± 0,07±0,
1,5** 06
Т-супрессоры,
%
×109/л
0,5±0,0
14 ± 0,7
3
0,3±0,0
13,6± 2
3
12,6±
0,09±0,
0,8**
01
10,6±
0,03±0,
0,9**
01
Тх/Тс
2,6±0,
01
2,5±0,
01
2,3±0,
01
2,2±0,
01
* p<0,06,** p <0,01 - в сравнении с животными контрольной группы.
У поросят первой опытной группы отмечали лейкопению до 12,7×109/л
и лимфопению до 38,6×109/л, что сопровождалось снижением процентного
содержания Т-лимфоцитов до 54,6, а абсолютного до 2,2±0,1×109/л, то есть на
51,8% меньше, чем в контрольной группе. Процентное и абсолютное значения
Т-хелперов и Т-супресоров составили 30,4%, абсолютное 0,6×109/л и 13,6%,
абсолютное 0,3×109/л соответственно, что на 56,9% и 55% меньше, чем в
контрольной группе.
Во второй опытной группе отмечалась лейкопения до 8,4×109/л и
лимфопения до 27,9×109/л, сопровождаясь снижением процентного
содержания Т-лимфоцитов до 40%, а абсолютного до 0,8±0,04×109/л, что на
89,6% меньше в сравнении с контрольной группой. Процентное и абсолютное
значения Т-хелперов и Т-супрессоров составили 26,5%, 0,2±0,03×109/л и
12,6%, 0,09±0,01×109/л соответственно - на 94,6% и 91,7% меньше, чем в
контрольной группе.
В третьей опытной группе лейкопения была до 5,8×109/л и лимфопения
до 21,8×109/л, сопровождаясь снижением процентного содержания Тлимфоцитов до 33,3%, а абсолютного до 0,3±0,04×109/л - на 100,9% меньше в
сравнении с контрольной группой. Процентное и абсолютное значения Тхелперов и Т-супрессоров составили 21,3%, 0,07±0,05×109/л и 10,6%,
0,03±0,01×109/л соответственно, что на 104,2 и 103,1% меньше, чем в
контрольной группе.
14
Все эти изменения: снижение общего числа Т-лимфоцитов и
отдельных популяций РОК и их соотношений (р-РОК и в-РОК) - по всей
видимости, отражают нарушение лимфопоэза, перераспределение клеток и
изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей при постоянном
потреблении микотоксинов с кормами.
Анализ показателей, характеризующих гуморальное звено иммунитета
в возрасте трех месяцев (табл. 6), выявил, что относительное содержание в
крови В-лимфоцитов у поросят контрольной группы составило 49,3%, а в
абсолютном значении 24,6±0,1×109/л, средний уровень иммуноглобулинов А,
G и М соответственно 3,9; 16,4; 2,9 мг/мл.
Таблица 6
Показатели гуморального иммунитета у подопытных поросят в
возрасте трех месяцев
Группа,
(n = 20)
Контрольная
I опытная
II опытная
III опытная
В-лимфоциты
%
×109/л
49,3± 2,2
24,6±0,05
55,4±2
19,4±0,1
69,9±2,7**
17,7±0,1**
76,7±2,6**
15,2±0,1**
Иммуноглобулины
А, мг/мл
G, мг/мл
3,9±0,6
16,4±0,3
3,2±0,8
15,7±0,5
2,5±1,6**
14,9±0,8
2,4±1,4**
14,8±0,6
М, мг/мл
2,9±0,1
1,9 ± 0,1
1,4± 0,5**
1,3± 0,4**
* p<0,06,** p <0,01 - в сравнении с животными контрольной группы.
У поросят первой опытной группы процентное количество Влимфоцитов периферической крови увеличилось до 55,4, но, учитывая
лейкопению и лимфопению, абсолютное значение В-лимфоцитов снизилось до
19,4±0,1×109/л, что на 23,2% ниже, чем в контрольной группе. Средний
уровень иммуноглобулина А, G и М составил соответственно 3,2; 15,7; 1,9
мг/мл, что на 32,5; 5,2 и 33,5 % ниже показателей контрольной группы.
Во второй опытной группе процентное количество В-лимфоцитов
периферической крови увеличилось до 69,9, но, учитывая лейкопению и
лимфопению, абсолютное значение В-лимфоцитов оказалось 17,7±0,1×109/л,
что на 31% ниже, чем в контрольной группе. Средний уровень
иммуноглобулина А, G и М был соответственно 2,5; 14,9; 1,4 мг/мл - на 38,1,
9,6 и 56,8 % ниже показателей контрольной группы.
В третьей опытной группе процентное количество В-лимфоцитов
периферической крови увеличилось до 76,7, но, учитывая лейкопению и
лимфопению, абсолютное значение В-лимфоцитов оказалось 15,2±0,1×109/л,
что на 42,2% ниже, чем в контрольной группе. Средний уровень
иммуноглобулина А, G и М составил соответственно 2,4; 14,8; 1,3 мг/мл, что
на 30,6; 11,1 и 59,7 % ниже, чем в контрольной группе.
Результаты определения относительного и абсолютного содержания Тлимфоцитов и В-лимфоцитов у поросят с пневмонией, вызванной вирусом
РРСС , в возрасте четырех месяцев представлены в табл. 7.
Установлено, что у поросят контрольной группы среднее число
лейкоцитов в периферической крови было 17,7×109/л, процентное количество
15
Т-лимфоцитов составило 53,4, а абсолютное среднее 4,5×109/л, Т-хелперов и
Т- супрессоров соответственно 31,6%, 1,3×109/л и 15,2%, 0,6×109/л.
У поросят первой опытной группы отмечалась лейкопения до
13,7×109/л и лимфопения до 38,2×109/л, что сопровождалось снижением
процентного содержания Т-лимфоцитов до 49,9, а среднего абсолютного - до
2,2×109/л, то есть на 57,3% меньше, чем в контрольной группе. Процентное и
абсолютное значения Т-хелперов и Т-супрессоров - 24,7; 0,5×109/л и 13,5;
0,3×109/л соответственно, что на 68,9 и 62,9% меньше, чем в контрольной
группе.
Таблица 7
Показатели клеточного иммунитета периферической крови у
подопытных поросят в возрасте четырех месяцев
Группа, (n = 20)
Контрольная
I опытная
II опытная
III опытная
Т - лимфоциты
Т-лимфоциты
%
×109/
53,4 ± 4,5±0,
л
0,4
01
49,9 ± 2,2±0,
1,3
1
37,1 ± 0,9±0,
1,4** 01
34,7 ± 0,5±0,
1,8** 02
Т-хелперы,
%
×109/л
31,6 ± 1,3±0,0
0,9
2
24,7 ± 0,5±0,1
1,9*
5
20,1 ± 0,1±0,0
1,5**
2
18,2 ± 0,07±0,
1,3**
01
Т-супрессоры,
%
×109/л
15,2 ± 0,6±0,0
0,6
2
13,5±
0,3±0,0
1,6
3
11,1 ± 0,09±0,
0,8**
01
10,5 ± 0,04±0,
1**
02
Тх/Тс
2,3±0,
02
2±0,0
1
1,9±0,
01
1,9±0,
02
* p<0,06,** p <0,02 - в сравнении с животными контрольной группы.
У поросят второй опытной группы - лейкопения до 10,6×109/л и
лимфопения до 28,3×109/л, сопровождаясь снижением процентного
содержания Т-лимфоцитов до 37,1, а абсолютного - до 0,9×109/л, что на 88,6%
меньше, чем в контрольной группе. Процентное и абсолютное значения Тхелперов и Т-супрессоров - 20,1; 0,1×109/л и 11,1; 0,09×109/л соответственно,
что на 96,9 и 94,3% меньше, чем в контрольной группе.
Таблица 8
Показатели гуморального иммунитета у подопытных поросят в
возрасте четырех месяцев
Группа, (n = 20)
Контрольная
I опытная
II опытная
III опытная
В-лимфоциты
%
56,6
2,5
16,1
2,8
72,9
3,2
75,4
2,9
Иммуноглобулины
×10 /л
± 29,7±0,2
А, мг/мл
4,1±0,9
G, мг/мл
12,6±0,2
М, мг/мл
2,1 ± 0,2
± 20,9±0,2
2,8±1,4
11,8±0,4
1,3 ± 0,4
± 18,7±0,03
**
± 14,7±0,1
**
2,4±1,6
**
2,2±1,3
**
11,5±0,5
1,6 ± 0,8
11,1±0,4
1,5 ± 0,3
9
p<0,06,** p <0,01 - в сравнении с животными контрольной группы
16
В третьей опытной группе - лейкопения до 8,2×109/л и лимфопения до
21,5×109/л, сопровождаясь снижением процентного содержания Т-лимфоцитов
до 34,7, а абсолютного - до 0,5×109/л, то есть на 97,9% меньше, чем в
контрольной группе. Процентное и абсолютное значения Т-хелперов и Тсупрессоров - 18,2; 0,07×109/л и 10,5; 0,04×109/л соответственно, что на 103,5 и
102,1% меньше, чем в контрольной группе.
Снижение общего числа Т-лимфоцитов и отдельных популяций РОК и
их соотношения (р-РОК и в-РОК) отражает нарушение лимфопоэза при
постоянном потреблении микотоксинов с кормом, перераспределение клеток и
изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей.
Анализ показателей, характеризующих гуморальное звено иммунитета
у поросят в возрасте четырех месяцев (табл. 8), выявил, что относительное
содержание в крови В-лимфоцитов у животных контрольной группы
составило 56,6%, а среднее абсолютное значение 29,7×109/л, уровень
иммуноглобилина А, G и М составил соответственно 4,1; 12,6; 2,1 мг/мл.
У поросят первой опытной группы процентное количество Влимфоцитов периферической крови снизилось до 16,1, но, учитывая
лейкопению и лимфопению, абсолютное число В-лимфоцитов снизилось до
20,9×109/л, что на 32,7% меньше, чем в контрольной группе. Уровень
иммуноглобулина А, G и М составил соответственно 2,8; 11,8; 1,3 мг/мл, то
есть на 32,3; 6,7 и 42,9 % ниже показателей контрольной группы.
Во второй опытной группе процентное количество В-лимфоцитов в
периферической крови увеличилось до 72,9, но, учитывая лейкопению и
лимфопению, абсолютное среднее значение В-лимфоцитов оказалось
18,7±0,03, что на 40,7% ниже, чем в контрольной группе. Средний уровень
иммуноглобулина А, G и М - соответственно 2,4; 11,5; 1,6 мг/мл - на 44,7; 10,5
и 28,6 % ниже, чем в контрольной группе.
В третьей опытной группе процентное количество В-лимфоцитов в
периферической крови увеличилось до 75,4, но, учитывая лейкопению и
лимфопению, абсолютное среднее значение В-лимфоцитов оказалось 14,7±0,1,
что на 40,7% ниже, чем в контрольной группе. Средний уровень
иммуноглобулина А, G и М составил соответственно 2,2; 11,1; 1,5 мг/мл, то
есть на 48,6; 13,4 и 33,2 % ниже показателей контрольной группы.
2.6. Сравнительный анализ схем лечения свиней, больных
пневмонией, вызванной вирусом РРСС
Для сравнительной оценки эффективности различных схем лечения
свиней при пневмонии, вызванной вирусом РРСС, было создано 3 группы
животных по 21 животному в каждой группе.
Первая группа - 21 животное в возрасте 4 мес., с диагнозом пневмония,
вызванная вирусом РРСС средней тяжести.
Вторая группа - 21 животное в возрасте 4 мес., с диагнозом пневмония,
вызванная вирусом РРСС с тяжелым течением заболевания.
17
Третья группа - 21 животное в возрасте 4 мес. с диагнозом пневмония,
вызванная вирусом РРСС с очень тяжелым течением заболевания.
Каждая группа была разбита на три подгруппы: контрольную и две
опытные.
Животных контрольных подгрупп всех групп лечили одинаково, по
следующей схеме: драксин, в/м в дозе 1 мл (100 мг) на 40 кг массы животного
однократно; ронколейкин, подкожно в дозе 3 000 МЕ/кг с интервалом 24 часа
пять дней подряд.
Животных первых опытных подгрупп каждой группы лечили по
следующей схеме: драксин, в/м в дозе 1 мл (100 мг) на 40 кг массы животного
однократно; ронколейкин, подкожно в дозе 3 000 МЕ/кг с интервалом 24 часа
пять дней подряд; интровит-е-селен, в/м в дозе 1 мл на 10 кг массы тела
однократно.
Животных вторых опытных подгрупп каждой группы лечили по
следующей схеме: драксин, в/м в дозе 1 мл (100 мг) на 40 кг массы животного
однократно; ронколейкин, подкожно в дозе 3 000 МЕ/кг с интервалом 24 часа
пять дней подряд; интровит-Е-селен, в/м в дозе 1 мл на 10 кг массы тела
однократно; оксодигидроакридинилацетат натрия в/м, в дозе 5 мг/кг 2
инъекций с интервалом 48 часов.
Динамику заболевания отслеживали по клиническим и лабораторным
признакам. При этом морфологические исследования крови проводили один
раз в день, а биохимические один раз в 3 дня.
Наиболее
эффективной схемой лечения поросят при пневмонии,
вызванной вирусом РРСС, является сочетание драксина, в/м в дозе 1 мл на 40
кг массы животного однократно; ронколейкина, подкожно в дозе 3 000 МЕ/кг
с интервалом 24 часа пять дней подряд; интровита-Е-селена, в/м в дозе 1 мл на
10 кг массы тела однократно; оксодигидроакридинилацетата натрия в/м, в дозе
5 мг/кг 2 инъекций с интервалом 48 часов.
3. ВЫВОДЫ
1. Инфекционная патология свиней в Ростовской области представлена в
основном бактериальными заболеваниями (48,1% от общей инфекционной
патологии). По распространенности инфекций свиней РРСС занимает третье
место (12,5%). Кроме того наиболее часто регистрируют микоплазмоз – 22,8%,
цирковирусную инфекцию – 15,9%, РРСС и колибактериоз – по 12,5%, ПВИС
– 10.1%, пастереллез – 8,5%. На долю остальных заболеваний 21,5%.
2. За период с 2008 по 2010 гг. заболеваемость свиней пневмонией,
вызванной вирусом РРСС, составила в среднем 10,4% . За этот период
заболеваемость свиней РРСС была относительно стабильна, варьируя от 8,7%
в 2008 году до 12,5% в 2010 году.
3. Наряду с РРСС из 94 клинически больных поросят у 26 (30,43%) из
них зарегистрирован пастереллез, у 15 – цирковирусная инфекция, 12 случаев
(14,05%) приходилось на РРСС и 10 (11,7%) на пастереллез с репродуктивно-
18
респираторным синдромом. У 8 (9,36%) поросят наряду с РРСС выявляли
бордетеллиоз. Только в двух случаях (2,34%) РРСС был обнаружен без
присутствия других возбудителей. Как выяснилось, наиболее часто
респираторному РРСС сопутствуют пастереллез (42,1%), РРСС (35,1%) и
ЦВИС (26,9%).
4. Из 370 поросят, у которых возбудитель выделен методом ПЦР, 135
голов (36,5%) были 10-15-недельного возраста, 100 голов – в возрасте 15-20
недель (27%), 88 голов – в возрасте 5-10 недель (26,1%). Пик заболеваемости
приходился на возраст 8-18 недель.
5. У поросят тяжелым течением заболевания к трехмесячному возрасту
отмечались снижение количества эритроцитов до 4,11,3 ×1012/л
и
9
лейкопения до 8,41,9×10 г/л и до 4,10,1 ммоль/л, а также уровень
ионизированного калия. Уровень общего белка снизился и составил 54,54,1
г/л; повысились СОЭ (9,25,6 мм/ч), количество альбуминов (20,52,5 г/л),
уровень мочевины (12,51,1 ммоль/л), глюкозы (10,10,1 ммоль/л) и
активность аланинаминотрансферазы (140,1 Е/л), щелочной фосфатазы
(184,17,1 Е/л), лактатдегидрогеназы (180,96,4 Е/л).
6. У поросят со средним течением заболевания выраженных изменений
иммунного статуса не было. У поросят с РРСС тяжелой формы отмечалось
снижение Т-хелперов с 33,2до 26,5; Т-супрессоров с14 до
12,6В-лимфоцитов
с
49,3
до
69,9содержание
иммуноглобулинов А и М снизилось с 3,9=0,6 и 2,9=0,1мг/мл до 2,5=1,6 и
1,4=0,5 мг/мл соответственно. У животных с очень тяжелым течением
заболевания при РРСС снижение Т-хелперов до 21,3 Т-супрессоров до
10,6 В- лимфоцитов до 76,7 содержание иммуноглобулинов А и
М уменьшилось до 2,4 и 1,3мг/мл соответственно относительно
показателей у животных контрольной группы
7. Наиболее эффективной схемой лечения при пневмонии поросят,
вызванной вирусом РРСС, является сочетание драксина в/м в дозе 1 мл на 40
кг массы животного однократно; интровита-Е-селена, в/м в дозе 1 мл на 10 кг
массы тела однократно; оксодигидроакридинилацетата натрия в/м, в дозе
5 мг/кг 2 инъекций с интервалом 48 часов.
Данная схема оказалась эффективной при лечении животных с
хроническим течением пневмонии, вызванной вирусом РРСС.
4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1.
Для лечения свиней при пневмонии, вызванной вирусом РРСС,
рекомендовать сочетание драксина, в/м в дозе 1 мл на 40 кг массы животного
однократно; интровит-Е-селена, в/м в дозе 1 мл на 10 кг массы тела
однократно; оксодигидроакридинилацетат натрия в/м, в дозе 5 мг/кг 2
инъекций с интервалом 48 часов.
2.
Полученные данные по морфофункциональным изменениям при
19
РРСС лежат в основе классификации заболевания по тяжести течения, что дает
основание строить прогноз эффективности проводимой терапии.
3.
Результаты исследований могут быть использованы как
справочный материал при составление учебных пособий и руководств по
физиологии и патологии домашних животных для студентов по специальности
«Ветеринария» и «Зоотехния».
4.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ:
1.
Ключников, А.Г. Место РРСС в нозопрофиле инфекционной
патологии свиней в Ростовской области / А.Г. Ключников, А.Н. Бодряков,
М.С. Владыкин //Ветеринарная патология, 2010 – N 3(34). – С. 32-37.
2.
Бодряков, А.Н. Морфофункциональные изменения крови при
пневмонии, вызванной вирусом РРСС. / А.Н. Бодряков, М.С. Владыкин //
Ветеринарная патология, 2011 – N 1(36). – С. 9-11.
3.
Ключников, А.Г. Состояние гуморальной и клеточной
системы иммунитета у свиней с репродуктивно-респираторным
синдромом свиней/ А.Г. Ключников, Л.П. Миронова, С.Н. Карташов, М.С.
Владыкин //Ветеринарная патология, 2011 – N 1(36) – С. 13-15.
4.
Ключников, А.Г. Влияние инфицирования свиней вирусом
РРСС на иммунный статус / А.Г. Ключников, Л.П. Миронова, С.Н.
Карташов, А.Н. Бодряков, М.С. Владыкин. //Вестник Саратовского
госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова, 2011 – N 3 – С. 9-11.
5.
Бодряков, А.Н. Биохимические исследования крови у поросят,
больных РРСС / А.Н. Бодряков, М.С. Владыкин // Инновационные процессы в
АПК. Сборник статей III Международной научно-практической конференции
преподавателей, молодых ученых, аспирантов и студентов факультета РУДН –
Москва, 2011 – С. 313-314.
6.
Бодряков, А.Н. . Иммунный статус у свиней, больных пневмонией,
вызванной вирусом РРСС / А.Н. Бодряков, М.С. Владыкин // Инновационные
процессы в АПК. Сборник статей III Международной научно-практической
конференции преподавателей, молодых учёных, аспирантов и студентов
факультета РУДН - Москва, 2011 – С. 315-316.
7.
Владыкин, М.С.
Особенности морфологических изменений
легких при репродуктивно-респираторном синдроме / М.С. Владыкин //
«Научное
обеспечение
инновационного
развития
отечественного
животноводства».
Материалы
Всероссийской
научно-практической
конференции ГНУ СКЗНИВИ г. Новочеркасск, 2011 – С. 69-72.
8.
Владыкин, М.С. Особенности иммунного статуса при
репродуктивно-респираторном синдроме свиней / М.С. Владыкин // «Научное
обеспечение инновационного развития отечественного животноводства».
Материалы Всероссийской научно-практической конференции ГНУ
СКЗНИВИ, г. Новочеркасск, 2011 – С. 75-78.
20
9.
Владыкин, М.С. Место РРСС в нозопрофиле инфекционной
патологии свиней Ростовской области / М.С. Владыкин // «Научное
обеспечение инновационного развития отечественного животноводства».
Материалы Всероссийской научно-практической конференции ГНУ
СКЗНИВИ, г. Новочеркасск, 2011. – С. 162-165.
10.
Владыкин, М.С. Характеристика клеточного иммунитета при
репродуктивно-респираторном синдроме свиней / М.С. Владыкин //
Материалы VII Международной конференции молодых ученых, посвященной
75-летию профессора А.В. Газданова, «Актуальные и новые направления
сельскохозяйственной науки», г. Владикавказ, 2011 – С. 257-261.