Н.В. Бугрым, А.М. Земсков ОСОБЕННОСТИ ПРОЦЕССОВ

Научно-практический журнал, 2011
Н.В. Бугрым, А.М. Земсков
ОСОБЕННОСТИ ПРОЦЕССОВ ИММУНОРЕГУЛЯЦИИ
У НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ, ПЕРЕНЕСШИХ ТЯЖЕЛУЮ
АСФИКСИЮ
ГОУ ВПО ВГМА им. Н.Н. Бурденко Минздравсоцразвития России
Резюме. Было проведено комплексное клинико-иммунологическое исследование, с
использованием четырехцветной проточной цитофлуориметрии, которое включало
определение клеточного и гуморального иммунитета у 51 доношенного
новорожденного сразу после рождения и на 4-5 сутки. Проведенное исследование
показало, что дети, перенесшие тяжелую асфиксию, имеют снижение абсолютного
количества CD3, CD4, CD8, CD19, CD56, ФП, на фоне достоверного повышения
абсолютного и относительного количества CD95, IgA, IgG при рождении. В период
ранней неонатальной адаптации т.е на 4-5 сутки также отмечалось достоверное
снижение абсолютного содержания основных субпопуляций лимфоцитов CD3, CD4,
CD8, CD19, CD56, IgG, в то время как имелось повышение относительного
содержания CD3, CD4, CD95, НСТ сп., IgA, IgM, что свидетельствует о напряжении
системы местного иммунитета и срыва механизма адаптации, это может являться
фоном для развития в дальнейшем хронической патологии респираторного тракта, а
также инфекционной и аллергической патологии.
Ключевые слова: асфиксия, иммунитет, новорожденные.
Актуальность. В последние годы пристальное внимание исследователей и
практических врачей уделяется комплексу проблем, связанных с изучением иммунной
системы в норме и функционированием её при патологических состояниях в ранний и
поздний неонатальные периоды. По значимости становление иммунной системы в
перинатальный период уникален и не сопоставим ни с одним другим возрастным
периодом [1]. Становление иммунитета происходит постепенно и зависит от целого ряда
факторов:
гестационного
возраста
новорожденного,
наличия
локальных
или
генерализованных воспалительных процессов, перенесения острой и/или хронической
гипоксии и.т.д. [2]. Известно, что соотношение
субпопуляций
Т-лимфоцитов у
новорожденных не имеет существенных возрастных особенностей, а
количество
В-лимфоцитов у плодов (старше 26 недель) и новорожденных – чаще повышено. Среди Вклеток преобладают незрелые В-лимфоциты с низкой способностью к изотипическому
переключению классов иммуноглобулинов [4, 5, 6, 7]. Имеются данные о преобладании в
эмбриональном периоде и у новорожденных в составе В-клеток субпопуляции В1лимфоцитов, которые способны к синтезу IgM и IgA, но не IgG [2, 8].
Ведущее место в структуре заболеваемости и смертности новорожденных занимает
асфиксия новорожденных [1, 8, 9]. По данным мировой статистики частота асфиксии в
популяции новорожденных составляет от 0,5% до 10%. При этом летальность от асфиксии
у недоношенных детей составляет 30%, а у доношенных новорожденных 20%.
Тяжелая асфиксия, развившаяся на фоне острой или хронической внутриутробной
гипоксии, вызывает инволюцию тимуса, при этом нарушается как клеточный, так и
106
«Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья» № 43
гуморальный иммунитет. Этим объясняется высокая частота нарушений иммунного
статуса и инфекционно-воспалительных заболеваний у
новорожденных детей,
перенесших асфиксию [3, 4, 9].
Материал и методы исследования. Был обследован 51 ребенок. На основании
клинико-анамнестических данных были выделены 2 группы. Основную 1-ю группу
составил 31 ребенок (20 мальчиков и 11 девочек), перенесших тяжелую асфиксию.
Средний возраст женщин составил 26,8±0,8 лет. На основании анамнестических,
клинических и лабораторных данных, включая кардиотокографию и допплерометрию,
была установлена хроническая внутриутробная гипоксия плода (ХВГП). Настоящая
беременность протекала на фоне длительно текущего позднего гестоза у всех женщин.
Осложненный соматический анамнез имели 93,5% женщин, осложненный акушерскогинекологический анамнез имели 87% женщин, угроза прерывания беременности и
анемия встречались у каждой второй беременной. Длительный безводный промежуток
наблюдался у 16% женщин.
Самостоятельные роды были у 33%, путем кесарева сечения было рождено 67%
детей. Практически у каждого второго ребенка была обнаружена патология пуповины
(тугое обвитие вокруг шеи и туловища, истинный узел пуповины). Средняя оценка по
шкале Апгар на 1 минуте у этих детей была 2,7±0,5, на 5 минуте 5,2±0,6 баллов, pH крови
составляла 7,06-7,19 (тяжелый ацидоз). Все дети были доношенными, масса при рождении
3240±118 г, длина тела 52±0,61 см, окружность головы 34±0,4 см, окружность груди
32±0,6 см.
Все новорожденные дети
1-й группы нуждались в проведении комплекса
реанимационных мероприятий. Двенадцать детей находились на аппарате искусственной
вентиляции легких (ИВЛ). Всем новорожденным проводилась инфузионная терапия,
антибактериальная терапия и посиндромная медикаментозная терапия.
В контрольную 2-ю группу вошли 20 новорожденных (10 мальчиков и 10 девочек)
без асфиксии, оценка по шкале Апгар на 1 минуте составила 6,6±0,1, на 5 минуте 7,8±0,1
баллов, pH крови 7,25-7,35. В контрольной группе 43% женщин имели угрозу прерывания
и гестоз первой и второй половины беременности.
Возраст матери составил 26,3±1,3 лет. При проведении кардиотокографии (КТГ) и
допплерометрии во время беременности отмечались умеренные признаки ХВГП и
хронической фетоплацентарной недостаточности (ХФПН).
Длительный безводный
промежуток наблюдался у 12,5 % беременных женщин. Доля оперативного
родоразрешения составила 18%. Масса детей при рождении составила 3698±93 г, длина
тела 5±0,42 см, окружность головы 34±0,4 см, окружность груди 34±0,4 см.
Объектом иммунологического исследования была пуповинная и периферическая
кровь новорожденных детей. Исследование осуществляли при рождении и на 4-5 сутки
жизни. Проводился подсчет количества лейкоцитов, лимфоцитов, ретикулоцитов,
тромбоцитов, нейтрофилов, анализ субпопуляций лимфоцитов проводили на проточном
107
Научно-практический журнал, 2011
цитофлуориметре (Beckman Coulter), определяли относительное и абсолютное количество
Т-лимфоцитов CD3, Т-хелперов CD4, Т-киллеров/ супрессоров CD8, В-лимфоцитов
CD19, CD95 маркер FAS-АГ опосредующего апоптоз. Оценка гуморального звена
иммунитета включала в себя определение концентрации в сыворотке крови IgA, IgM, IgG
методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Оценка функционального состояния
фагоцитирующих клеток проводилась с помощью определения фагоцитарной активности
нейтрофилов - фагоцитарного показателя (ФП) и фагоцитарного числа (ФЧ).
Метаболическую активность нейтрофилов определяли с помощью НСТ спонтанного и
НСТ активного.
Статистическая обработка полученных результатов проводилась на персональном
компьютере с помощью пакета универсальных программ «Excel» и «Statistica v.6» с
использованием общепринятых параметрических и непараметрических методов.
Обработка вариационных рядов включала подсчет значений средних арифметических
величин (М), стандартной ошибки (m), стандартного отклонения (σ). Частота признаков
представлена c указанием стандартной ошибки для качественных признаков, стандартного
отклонения для количественных признаков. Для сравнения средних величин
количественных переменных использовали t-критерий Стьюдента. Качественные
показатели сравнивали по критериям Хи-квадрат и точного критерия Фишера. При
анализе количественных признаков при сравнении двух независимых выборок применяли
критерий Манна-Уитни и дисперсионный анализ.
В случае отсутствия согласия данных с нормальным распределением для оценки
различий между зависимыми выборками применяли непараметрический критерий
Уилкоксона. Достоверными считались различия между группами при вероятности ошибки
менее 5% (р<0,05).
Полученные результаты и их обсуждение. В таблице 1 приведены данные
абсолютного и относительного количества иммунологических показателей у
новорожденных в пуповинной крови и на 4-5 день жизни, средние значения, стандартные
отклонения, а также достоверности различий между сравниваемыми группами.
Таблица 1.
Показатели иммунного статуса у новорожденных
перенесших тяжелую асфиксию и здоровых новорожденных.
1 группа (n=31) 2 группа (n=20) Норма
Уровень достоверности
Критерий
Показатель
M
σ
M
σ
Фишера
Пуповинная кровь
108
Критерий
Стьюдента
Критерий
МаннаУитни
р
СД3(Тлим)%
78,6
9,99
67,3
11,9
58-67
Абс. в 1 мкл
2291
1255
2870
751
19003600
СД4(Тхел) %
57,6
9,42
47,5
9,85
38-50
Абс. в 1 мкл
1662
942
1976
691
15002800
0,39
0,003 *
0,07
0,80
0,02 *
0,002 *
0,20
0,081
«Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья» № 43
СД8(Тсуп) %
20,5
6,28
18,8
4,99
19-35
Абс. в 1 мкл
580
317
791
301
450-1500
СД19(Влим)%
8,98
6,06
14,9
7,75
14-31
Абс. в 1 мкл
332
271
749
414
378-1500
СД56(NК) %
3,23
2,19
5,90
3,03
3-23
Абс. в 1 мкл
113
97
249
164
216-918
СД95- маркер
апоптоза %
24,8
14,7
12,8
8,10
5-10
Абс. в 1 мкл
85
69
51
33
54-270
НСТ спон. %
10,5
6,3
11,0
5,8
5- 12
НСТакт. %
14,2
7,9
19,1
8,5
ИАН %
1,50
0,51
1,86
Фаг. пок. %
53,2
18,9
Фаг. чис. %
6,45
IgA г/л
0,35
0,31
0,02 *
0,24
0,01 *
0,0001*
0,15
0,004 *
0,0001 *
0,01*
0,0001 *
0,0001 *
0,0007 *
0,04 *
0,03 *
0,83
0,8
0,8
10-35
0,47
0,054
0,06
0,89
2 -5
0,01*
0,07
0,18
64,0
13,3
60-90
0,25
0,03 *
0,03 *
2,17
6,63
2,45
6- 9
0,56
0,81
0,75
0,28
0,59
0,19
0,16
0-0,4
0,003*
0,37
0,05*
IgM г/л
0,18
0,22
0,27
0,24
0,010,98
0,49
0,13
0,08
IgG г/л
10,1
4,43
8,13
2,78
5,7-12,9
0,05*
0,06
0,05 *
4-5-е сутки
р
СД3(Тлим) %
80,9
9,04
74,4
6,56
58-67
Абс. в 1 мкл
2054
1290
2800
1009
19003600
СД4(Тхел) %
60,6
14,2
55,1
6,34
38-50
Абс. в 1 мкл
1486
877
2043
559
15002800
СД8(Тсуп) %
18,3
6,89
19,2
3,59
19-35
Абс. в 1 мкл
458
302
706
212
450-1500
СД19(В лим)%
8,05
5,09
13,1
7,29
14-31
Абс. в 1 мкл
255
313
786
520
378-1500
СД56(NК) %
3,16
2,17
4,75
4,61
3-23
Абс. в 1 мкл
73
58
171
116
216-918
СД95-апоптоз %
23,1
17,9
17,1
10,2
5-10
Абс. в 1 мкл
68
85
74
58
54-270
НСТ спон. %
9,52
7,15
6,4
3,4
5-12
НСТ акт. %
13,3
10,2
11,8
6,9
ИАН %
1,51
0,69
1,96
Фаг. пок. %
54,8
16,9
Фаг. чис. %
6,10
IgA г/л
0,19
0,006 *
0,03 *
0,001 *
0,003 *
0,07
0,02 *
0,009 *
0,0001 *
0,58
0,002 *
0,09
0,0001 *
0,02 *
0,0001 *
0,0004 *
0,0001 *
0,21
0,0001 *
0,02*
0,0001 *
0,15
0,8
0,15
0,002 *
0,07
0,1
10-35
0,06
0,32
0,9
1,06
2-5
0,04*
0,14
0,13
55,6
13,9
60-90
0,51
0,85
0,6
1,68
5,63
1,54
6-9
0,74
0,6
0,6
0,39
0,76
0,24
0,27
0-0,4
0,002*
0,4
0,3
IgM г/л
0,44
0,61
0,32
0,28
0,010,98
0,004 *
0,45
0,8
IgG г/л
7,0
4,10
7,3
3,0
5,7-12,9
0,17
0,7
0,6
Примечание: * достоверность различий показателей при р<0,05.
109
Научно-практический журнал, 2011
Как следует из данных таблицы 1, иммунологический статус у новорожденных,
перенесших тяжелую асфиксию (1-я группа), по средним показателям на 1-е сутки
характеризовался снижением только абсолютного, но не относительного количества
основных субпопуляций лимфоцитов CD3, CD4, CD8.
Кроме того отмечалось
достоверное снижение как относительных так и абсолютных показателей CD19, CD56,
фагоцитарного показателя, на фоне достоверного повышения абсолютного и
относительного количества CD95 маркера апоптоза.
Исследование содержания иммуноглобулинов выявило значительное повышение
уровня IgA, IgG и снижение IgM. Во 2-й группе показатели Т-клеточного иммунитета
находились в пределах возрастной нормы.
На 5-е сутки у новорожденных 1-й группы также отмечалось достоверное снижение
абсолютного содержания основных субпопуляций лимфоцитов CD3, CD4, CD8, CD19,
CD56, в то время как относительное содержание CD3, CD4, CD95, НСТ спонт., по
сравнению с контрольной группой было повышено. Уровень IgG был снижен и
приближался к значениям контрольной группы, которая взята за норму. Уровень IgA,
IgM увеличивался, что по-видимому, было связано с усилением их синтеза в ответ на
антигенную стимуляцию.
Уровень CD3 (Т-лимфоцитов) в основной группе при рождении и на 4-5 сутки жизни
был ниже, чем в группе контроля. Статистически значимое преобладание уровня CD3 в
контрольной группе сохранялось к 4-5 дню (p=0,003). Медиана показателя CD3
лимфоцитов снижалась к 4-5 суткам в 1-й группе на 4,1% (с 1882 мкл до 1803 мкл), во 2-й
группе на 8,2% (с 2868 мкл до 2632 мкл). Динамика значений уровня CD3 в пуповинной
крови и на 4-5-е сутки представлена на рисунке 1.
Рис. 1. Динамика уровня CD3 от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
110
«Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья» № 43
Из рисунка 2 видно, что в группе условно здоровых детей, уровень CD4 (Т-хелперы)
на 4-5-е сутки жизни достоверно выше, чем в основной группе (р=0,001). Динамическое
исследование CD4 к 4-5 дню жизни отражало его снижение у детей, перенесших
асфиксию на 1,8% (с 1392 мкл до 1367 мкл), у детей контрольной группы на 3,9% (с 1900
мкл до 1826 мкл).
Рис. 2. Динамика уровня CD4 от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
Рассматривая показатель CD8 (Т супрессоры), была обнаружена достоверная
разница между основной и контрольной группами при рождении (р=0,02) и на 4-5 день
жизни (р=0,002). Уровень CD8 в контрольной группе был значимо выше, чем в основной
группе. Медиана данного показателя снижалась к 4-5 дню жизни в 1-й группе на 29,6%,
во 2-й группе 11,3% (рис.3).
111
Научно-практический журнал, 2011
Рис. 3. Динамика уровня CD8 от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
Рис. 4. Динамика уровня CD19 от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
Как видно из рисунка 4, у новорожденных контрольной группы уровень CD19 (Влимфоциты) в пуповинной крови и на 4-5 сутки жизни был достоверно выше, чем в
исследуемой группе (р=0,001). При этом к 4-5 дню у детей основной группы уровень
CD19 снижался на 45% (с 264 мкл до 144 мкл), в то время как во 2-й группе повышался
на 6,7% (с 704 мкл до 755 мкл).
На рисунке 5, изображены достоверные связи между основной и контрольной
группой по уровню CD56 при рождении (р=0,001) и на 4-5 день жизни (р=0,001). Также
отмечается достоверная разница в уровне CD56 (натуральные киллеры) в основной группе
между пуповинной кровью и 4-5 сутками (р=0,005). При этом снижение уровня CD56 от
рождения к 4-5 дню у детей, перенесших асфиксию, происходило на 47% (со 104 мкл до
55 мкл), у новорожденных 2-й группы на 26% (с 192 мкл до 142 мкл).
112
«Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья» № 43
Рис. 5. Динамика уровня CD56 от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
Рис. 6. Динамика уровня CD95 от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
Как видно из рисунка 6, у новорожденных основной группы уровень CD95 (маркер
FAS-АГ опосредующего апоптоз) в пуповинной крови был достоверно выше, чем в группе
контроля (р=0,035). Кроме того у детей из 1-й группы уровень CD95 в пуповинной крови
был достоверно выше, чем на 4-5 сутки (р=0,004).
При исследовании НСТ спонтанного нами не выявлено достоверных различий
между основной и контрольной группой при рождении и на 4-5 день жизни. Однако
наблюдается достоверная разница в уровне НСТ спонтанного в контрольной группе
между пуповинной кровью и 4-5 сутками (р=0,006). Следует заметить, что значение НСТ
спонтанного при рождении в 1-й группе ниже на 10% чем во 2-й группе, в то время как на
4-5 день отмечается повышение его значения в 1-й группе на 14% по сравнению со 2-й
группой (рис.7).
113
Научно-практический журнал, 2011
Рис. 7. Динамика уровня НСТсп. от рождения к 4-5 дню жизни в основной
и контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа
– серый цвет.
По НСТ активному, была обнаружена достоверная разница между основной и
контрольной группой при рождении (р=0,05), а также в уровне НСТ активного у детей
контрольной группы между пуповинной кровью и 4-5 сутками (р=0,005). Динамическое
исследование данного показателя к 4-5 дню жизни отражало его снижение у детей,
перенесших асфиксию на 28%, у детей контрольной группы на 50% (рис.8).
Рис. 8. Динамика уровня НСТак от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
В таблице 2 представлены сравнительные данные индекса активации нейтрофилов в
группах исследования.
Таблица 2.
Динамика ИАН от рождения к 4-5 дню жизни в основной и контрольной группе
114
«Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья» № 43
Группа.
Контроль (N=20) Основная (N=31)
p
ИАН
Пуповинная кровь
1,84 ± 0,81
1,75 (1 – 4,29)
1,50 ± 0,52
1,4 (0,4 – 3)
0,184
(np)
ИАН
День 5
2,04 ± 1,04
1,9 (0,8 – 4,1)
1,52 ± 0,70
1,3 (0,9 – 4,5)
0,128
(np)
0,02 ± 0,53
0 (-1 – 1,7)
p = 0,882 (np)
0,283
(np)
0,20 ± 1,15
ИАН
0,33 (-2,96 – 1,8)
Динамика 0-5 день
p = 0,316 (np)
Из таблицы следует, что не найдено значимых различий в значениях индекса
активации нейтрофилов (ИАН) между основной и контрольной группой как при рождении
так и на 4-5 день жизни. Динамическое исследование данного показателя от рождения к 45 дню жизни также не выявило существенных различий.
Рис. 9. Динамика уровня ФП от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
Как видно из рисунка 9, у новорожденных основной группы ФП (фагоцитарный
показатель) в пуповинной крови был значимо ниже, чем в контрольной группе (р=0,031).
При этом сравнение данных ФП во 2-й группе между пуповинной кровью и 4-5 днем
свидетельствовали о достоверной разнице значений ФП (р=0,027).
Таблица 3
Динамика уровня ФЧ от рождения к 4-5 дню жизни
в основной и контрольной группе.
Группа.
Контроль (N=20) Основная (N=31)
p
ФЧ
Пуповинная кровь
6,55 ± 2,26
6 (4 – 13)
6,45 ± 2,17
6 (3 – 11)
0,754
(np)
ФЧ
День 5
5,85 ± 1,69
5,5 (3 – 9)
6,10 ± 1,68
6 (4 – 9)
0,673
(np)
ФЧ
Динамика 0-5 день
-0,70 ± 2,83
-1 (-8 – 4)
p = 0,283
-0,35 ± 2,90
0 (-7 – 5)
p = 0,502
0,677
115
Научно-практический журнал, 2011
Как видно и таблицы 3, нами не найдено существенных различий в значениях
фагоцитарного числа (ФЧ) между основной и контрольной группой как при рождении так
и на 4-5 день жизни. Динамическое исследование данного показателя от рождения к 4-5
дню жизни также не выявило достоверных различий.
По уровню IgA, была обнаружена достоверная разница между основной и
контрольной группой при рождении (р=0,05). При этом абсолютные значения уровня IgA
в основной группе при рождении выше на 30%, на 4-5 сутки выше на 38,5% по сравнению
с группой контроля (рис.10).
Рис. 10. Динамика уровня IgA от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
При исследовании уровня IgМ нами не выявлено достоверных различий между
основной и контрольной группой при рождении и к 4-5 дню жизни. Но при этом
наблюдается достоверная разница в уровне IgМ в основной группе между пуповинной
кровью и 4-5 сутками (р=0,027). Динамическое исследование IgМ к 4-5 дню жизни
отражало повышение его уровня у детей в 1-й группе на 52% (с 0,1 г/л до 0,21 г/л), во 2-й
группе на 11,7% (с 0,30 г/л до 0,34 г/л) (рис.11).
116
«Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья» № 43
Рис. 11. Динамика уровня IgМ от рождения к 4-5 дню жизни. Примечание:
основная группа – черный цвет, контрольная группа – серый цвет.
Рис. 12. Динамика уровня IgG от рождения к 4-5 дню жизни в основной и
контрольной группе. Примечание: основная группа – черный цвет, контрольная группа –
серый цвет.
Из рисунка 12 видно, что у детей из основной группы уровень IgG в пуповинной
крови был достоверно выше, чем на 4-5 сутки (р=0,001). Уровень IgG у новорожденных
основной группы к 4-5 дню жизни снижался на 32% (с 10,6 г/л до 7,2 г/л), у детей
контрольной группы на 8,3% (с 8,4 г/л до 7,7 г/л).
Таким образом, при анализе иммунологических показателей у детей, родившихся в
тяжелой асфиксии, отмечается незрелость Т клеточного звена иммунитета, низкий
уровень (CД56) натуральных
киллеров, что обуславливает
повышенную
восприимчивость новорожденных детей к вирусным и бактериальным инфекциям как за
117
Научно-практический журнал, 2011
счет дефицита клеток – эффекторов, так и за счет отсутствия адекватного регуляторного
сигнала на антигенный стимул. Кроме того отмечалась тенденция к снижению
относительного и абсолютного содержания В-клеток (CD19), что связано со сниженным
антителообразованием и с возможным развитием инфекционного процесса, который
нарушает динамику содержания В-лимфоцитов в неонатальном периоде, изменяет их
функциональную активность. Снижение фагоцитарного показателя компенсируется
повышением количества фагоцитов способных активизироваться в процессе
воспалительной реакции. Снижение уровня IgG, ближе к значениям контрольной группы
и достоверное повышение показателей уровня IgМ, IgA на 4-5 день жизни указывает на
напряженную работу гуморального звена местного иммунитета в условиях антигенной
стимуляции и повышение проницаемости клеточных мембран в очаге воспаления, что
свидетельствует об остром периоде заболевания. По НСТ–тесту наблюдается активация
фагоцитоза и уменьшение ИАН за счет возрастания НСТ-спонтанного, что
свидетельствует об остром воспалительном процессе.
В ходе исследования дети основной группы были разделены на 2 подгруппы. В 1А
подгруппу вошли дети, перенесшие тяжелую асфиксию, которые в раннем неонатальном
периоде не находились на аппарате искусственной вентиляции легких (ИВЛ). 1Б
подгруппу составили дети, перенесшие тяжелую асфиксию и находились в раннем
неонатальном периоде на аппарате ИВЛ. Средняя длительность проведения ИВЛ
составляла – 5,5 суток. Эти подгруппы были сопоставимы по факторам анте и
интранального риска, сроку гестации, оценке по шкале Апгар.
В таблице 4, представлено сравнение иммунного статуса между двумя подгруппами
при рождении и на 4-5е сутки.
Таблица 4
Сравнительная характеристика иммунологических показателей между
новорожденными находившимися на аппарате ИВЛ и детьми без ИВЛ.
1 А подгруппа без 1 Б подгруппа на ИВЛ
ИВЛ (n=19)
(n=12)
Показатель
M
σ
M
t-критерий
Стьюдента
σ
р
Пуповинная кровь
118
СД3(Тлим) %
77,54
10,39
82,34
7,99
>0,05
Абс. в 1 мкл
2406
1297
1692
866
>0,05
СД4(Тхел) %
57,88
57,88
56,90
10,37
>0,05
Абс. в 1 мкл
1763
969
1137
605
>0,05
СД8(Тсуп) %
19,18
4,96
25,10
8,46
>0,05
Абс. в 1 мкл
586
315
543
360
>0,05
СД19(В лимф) %
9,79
6,32
6,20
4,33
>0,05
Абс. в 1 мкл
349
288
244
140
>0,05
СД56(NК) %
3,38
2,05
2,69
2,71
>0,05
«Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья» № 43
Абс. в 1 мкл
113
100
111
83
>0,05
СД95-апоптоз %
23,43
11,85
29,54
22,55
>0,05
Абс. в 1 мкл
65
30
88
74
>0,05
НСТ спон. %
10,8
6,5
8,6
4,7
>0,05
НСТакт. %
14,8
8,19
11,2
6,4
>0,05
ИАН %
1,50
0,51
1,26
0,06
0,05 *
Фаг. пок. %
52,9
20
54,6
12,4
>0,05
Фаг. чис. %
6,6
2,13
5,4
2,3
>0,05
IgA г/л
0,34
0,65
0,05
0,10
0,04*
IgM г/л
0,19
0,23
0,09
0,13
>0,05
IgG г/л
10,76
4,5
7,4
2,5
0,04*
4-5-е сутки
СД3(Тлим) %
80,72
8,86
74,4
6,56
>0,05
Абс. в 1 мкл
2272
1279
919
578
0,03*
СД4(Тхел) %
60,63
15,16
55,1
6,34
>0,05
Абс. в 1 мкл
1636
860
701
474
0,03*
СД8(Тсуп) %
17,40
5,97
19,2
3,59
>0,05
Абс. в 1 мкл
504
300
217
177
0,05*
СД19 (В лимф) %
8,33
5,34
13,1
7,29
>0,05
Абс. в 1 мкл
278
334
128
118
0,056
СД56(NК) %
3,21
2,33
4,75
4,61
>0,05
Абс. в 1 мкл
78
60
43
25
>0,05
СД95-апоптоз %
22,27
16,33
17,1
10,2
>0,05
Абс. в 1 мкл
74
91
37
23
>0,05
НСТ спон. %
10,6
7,3
3,8
0,8
0,04*
НСТ акт. %
14,9
10,3
4,6
0,54
0,03*
ИАН %
1,58
0,74
1,22
1,12
>0,05
Фаг. пок. %
55,3
17,1
51,6
17,3
>0,05
Фаг. чис. %
6,19
1,7
5,63
1,67
>0,05
IgA г/л
0,44
0,82
0,11
0,12
0,03*
IgM г/л
0,5
0,64
0,07
0,1
0,01*
IgG г/л
7,7
4,04
3,04
0,69
0,05*
При сравнении показателей иммунного статуса между двумя подгруппами при
рождении, отмечалось достоверное увеличение индекса активации нейтрофилов (ИАН)
(р=0,05), IgA (р=0,04), IgG (р=0,04), IgM у детей 1А подгруппы. У детей 1Б подгруппы
наблюдалось снижение абсолютного количества основных субпопуляций лимфоцитов
CD3, CD4, CD8, CD19, CD56, но при этом относительное содержание CD3, CD8, CD95 в
пуповинной крови было повышено. Также отмечалось снижение НСТ сп., НСТ акт., ИАН,
IgA, IgM, IgG по сравнению со значениями детей 1А подгруппы. Эти данные
свидетельствуют об активности протекающего процесса, выраженности иммунного
ответа.
119
Научно-практический журнал, 2011
При исследовании показателей иммунного статуса у детей
на 4-5 сутки,
обнаружены достоверные различия между группой «ИВЛ» и группой «без ИВЛ». У 1Б
подгруппы отмечалось достоверное снижение таких показателей как CD3 (р=0,03), CD4
(р=0,03), CD8 (р=0,05), НСТ акт. (р=0,03), НСТ сп. (р=0,04), IgA (р=0,03), IgG (р=0,05),
IgM (р=0,01) в сравнении с 1А подгруппой. Изменение содержания В-лимфоцитов (CD19)
в неонатальном периоде, изменяет их функциональную активность и обуславливает
патологическую динамику содержания иммуноглобулинов.
При сравнении показателей иммунологического статуса между пуповинной кровью
и 4-5 сутками у новорожденных находившихся на искусственной вентиляции легких
(ИВЛ) была выявлена тенденция к повышению ФЧ, IgA, снижению CD95, ФП, НСТ сп,
НСТ акт, IgM, IgG на пятые сутки, что указывало на слабую способность нейтрофилов
продуцировать активные формы кислорода и участвовать в фагоцитозе, снижение
иммуноглобулинов свидетельствовало об отсутствии гуморальной противоинфекционной
защиты в дыхательных путях. У детей 1А подгруппы к 4-5 суткам наблюдалась тенденция
повышения IgA, IgM, и снижение IgG, что возможно связано с присоединением
инфекционного процесса (таблица 4).
Широкий диапазон колебаний концентрации иммуноглобулинов, по всей
вероятности, связан с разной степенью их проницаемости из кровяного русла в ткани, с
интенсивностью расходования иммуноглобулинов в ходе иммунологических реакций при
их взаимодействии с антигенами, со скоростью выведения иммунных комплексов и
интенсивностью процессов катаболизма иммуноглобулинов. Возможно, на содержание
иммуноглобулинов в ткани и в просвете дыхательных путей влияют также наличие отека
и частота санирующих мероприятий.
Выводы. Проведенное исследование показало, что у детей перенесших тяжелую
асфиксию наблюдается нарушение процессов иммунорегуляции, которая приводит к
срыву механизмов адаптации и запускает развитие патологических реакций характерных
для инфекций. Учитывая это детям, перенесшим тяжелую асфиксию, необходимо
назначать иммунокорригирующую терапию.
Литература.
1. Актуальные вопросы перинатальной иммунологии / В.А. Таболин., Н.Н.Володин., М.В.
Дегтярева [и др.]. Актуальные вопросы перинатальной иммунологии. International Journal on
Immunorehabilitation. – 1997. –N 6. –P. 112-122.
2. Асфиксия новорожденных / Н.П. Шабалов., В.А. Любименко., А.Б. Пальчик [и др.]– М.:
МЕДпресс-информ, 2003.– 368 с.
3. Воробьев А.А. Иммунология и аллергология / А.А. Воробьев., А.С. Быков., А.В. Караулов
// Практическая медицина.– М., 2006.–С. 72-74.
4. Заболевания иммунной системы. Диагностика и фармакотерапия /Н.М. Калинина., С.А.
Кетлинский., С.В. Оковитый [и др.]. – М.: Эксмо, 2008. – 496c.
5.
Лебедев К.А. Иммунограмма в клинической практике/ К.А.Лебедев., И.Д.Понякина. –
М.: Мед.книга, Н.Новгород: Изд-во НГМА, 2003. –С.443.
120
«Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья» № 43
6. Орехов К.В. Формирование системы иммунитета у детей с врожденными инфекциями /
К.В.Орехов., Л.Ю. Барычева.– Ставрополь, 2006.
7. Хаитов Р.М. Иммунология: учебник для студентов мед. вузов / Р.М.Хаитов.– М.:
ГЭОТАР-Медиа, 2006. –320с.
8. Aggarwal A. Evalluation of function in asphyxiated newborns / A. Aggarwal // J. Trop. Pediatr.
– 2005. – Vol. 167, N 5. –P. 295-299.
9. Ghosh B., Mittal S. Risk factors predictive of neurological sequelae in term infants with
perinatal asphyxia / B. Ghosh., S. Mittal, J.Vioque // Rev. Neurol. – 2003. – Vol. 32, № 3. – Р. 210-216.
Abstract
N.V.Bugrym, I.I.Logvinova, A.M.Zemskov, I.N.Рopova
FEATURES OF SUBPOPULATION STRUCTURE OF LYMPHOCYTES AT THE NEWBORN
CHILDREN WHO HAVE TRANSFERRED A SERIOUS ASPHYXIA.
The Voronezh state medical academy of N.N.Burdenko.
Research, with use quadricolour flowing cytofluorymetrii which included definition of cellular and
humoral immunity at 51 full-term newborn right after births and for 4-5 days has been carried out
complex clinico-immunologicheskoe. The carried out research has shown, that children who have
transferred a serious asphyxia, have depression of absolute quantity CD3, CD4, CD8, CD19, CD56, ФП,
against authentic rising of absolute and relative quantity CD95, IgA, IgG at a birth. In early neonatal
adaptation т.е for 4-5 days authentic depression of the absolute maintenance of the basic subpopulations
of lymphocytes CD3, CD4, CD8, CD19, CD56, IgG while there was a rising of relative maintenance
CD3, CD4, CD95, НСТ сп also became perceptible. IgA, IgM, that testifies to a strain of system of local
immunity and failure of the mechanism of adaptation, it can be a background for development further a
chronic pathology of a respiratory tract, and also an infectious and allergic pathology.
Keywords: an asphyxia, immunity, newborn.
121