R-6040 ИХТ «АСТРО ТЕСТ

28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area
P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL
Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852
e-mail: info@novamed.co.il
Astrovirus Тест
ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО ОДНОЭТАПНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ АСТРОВИРУСА В ФЕКАЛИЯХ ЧЕЛОВЕКА.
Кат. № R-6040.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
НАЗНАЧЕНИЕ
Astrovirus Тест - иммунохроматографическая тест-система для
качественного выявления антигена Астровируса в фекалиях
человека с целью ранней диагностики астровирусной инфекции.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
Семейство
Astroviridae,
представленное
мелкими
икосаэдрическими вирусами 28-30 нм в диаметре, содержит 2
рода: Avastrovirus, включающий все известные астровирусы
птиц, и Mamastrovirus, в который входят все астровирусы
млекопитающих,
в
частности
астровирусы
человека.
Астровирусы
млекопитающих
являются
причиной
астровирусной инфекции - острого кишечного заболевания
,называемого некротизируюшим энтероколитом. По данным
эпидемиологических исследований, астровирусы человека
являются вторым-третьим по значимости этиологическим
агентом,
вызывающим
острые
кишечные
инфекции,
преимущественно у детей раннего возраста (в основном первого
года жизни) и у пожилых людей с ослабленным иммунитетом. К
настоящему времени известно 8 серотипов астровирусов
человека: HAstV-1 - HAstV-8. У детей раннего возраста чаще
всего регистрируют первый и второй серотипы астровирусов, а у
людей старше 20 лет – четвертый серотип. Астровирусной
инфекцией приемущественно болеют дети до 7 лет, причем
наиболее часто заболевание регистрируется у детей до года.
Астровирусы - частый возбудитель диарей у лиц с
иммунодефицитом , например у реципиентов костного мозга и
больных СПИДом. Сезонность при астровирусной инфекции
нетипична. Источник инфекции: больной человек.Путь передачи:
фекально-оральный и контактный.
ПРИНЦИП
Astrovirus Тест производства компании Novamed Ltd., Израиль
представляет собой помещенную в пластиковый футляр (кассету)
полоску нитроцеллюлозной мембраны с фиксированными на ней
в области добавления пробы моноклональными антителами к
антигенам астрконъюгированные с окрашенными частичками
латекса. В области тестового окошка также зафиксированы
моноклональные
антитела
к
антигенам
Astrovirus.
Поликлональные анти-антитела зафиксированы в контрольной
зоне полоски. Антигены Astrovirus, содержащиеся в пробе,
реагируют со специфическими меченными моноклональными
антителами, формируя комплекс антиген-антитело, который
мигрирует по мембране, образуя красную цветную линию в
тестовом окошке, что оценивается как положительный результат.
Непрореагировавший конъюгат мигрирует далее к контрольной
зоне, где захватывается поликлональными анти-антителами,
формируя зеленую линию в контрольной зоне тестового окошка.
Kонтрольная линия появляется всегда. Наличие контрольной
линии
подтверждает
корректность
результатов
теста
(правильный объем пробы, необходимый темп миграции,
требуемое качество реагентов).
КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
В состав набора входит:
20 тестовых устройств (кассет) Astrovirus Тест упакованных в
индивидуальные алюминиевые пакетики;
20 одноразовых пластиковых пробирок-капельниц содержащих 1
мл буферa для разведения пробы;
1 инструкция к применению.
Необходимые,
не
предоставляемые
материалы:
- контейнер для отбора образца
- одноразовые перчатки
- таймер
производителем
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Набор Astrovirus Тест предназначен только для использования
in vitro в целях лабораторной диагностики.
2. Не допускается использование набора и его компонентов после
истечения срока годности.
3. Не использовать тест из поврежденной упаковки.
4. При проведении исследования необходимо следовать правилам
работы
в
лаборатории,
в
частности,
использовать
специализированную одежду, одноразовые перчатки, не
принимать пищу и не курить на рабочем месте.
5. Исследование проб фекалий регламентируется правилами
работы с инфекционными агентами.
6. После проведения исследования устройство должно быть
утилизировано в соответствующий контейнер для отходов.
7. Необходимо провести тест не позднее 2 ч после вскрытия
упаковки.
ХРАНЕНИЕ
Astrovirus Тест необходимо хранить при температуре 2-30оС. Не
замораживать! Не допускается использование набора и его
компонентов после истечения срока годности. Срок годности
набора указан на упаковке. До использования тестовое устройство
должно находиться в неповрежденной индивидуальной упаковке.
ОТБОР, ХРАНЕНИЕ И ПОДГОТОВКА ПРОБ.
Фекалии собирают в чистый сухой контейнер без следов
консервантов или транспортных сред. Не рекомендуется
обрабатывать пробу растворами, содержащими формальдегид
или его производные. Для проведения теста необходима проба в
количестве 1-2 г или 1-2 мл, в случае жидкого образца. До
исследования пробу хранят в холодильнике при температуре
+2+4 °С в течение 1-2 дней, если исследование в течение этого
периода невозможно, пробу необходимо поместить в
морозильную камеру при температуре -20 оС. Перед
исследованием пробу размораживают и доводят до комнатной
температуры. Остатки проб утилизируют в соответствии с
правилами, принятыми в данном учреждении.
ТЕХНИКА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА
Подготовка образца к тестированию (см. Рис.1):
Для каждого образца фекалий следует использовать отдельную
пробирку-капельницу с буфером для разведения. Открутить
крышку емкости пробоотборника с вмонтированным в нее
аппликатором. Аппликатор дважды погружают в фекальную
массу, при этом на кончике аппликатора должно остаться
приблизительно 150 мг образца. В случае жидкого стула,
забрать в качестве образца 150 мкл испражнений пипеткой и
перенести в пробирку-капельницу с буфером.
Рисунок 1
Pick up the sample
Mix the sample with
the buffer
Break the cap
FAECES
Процедура выполнения теста (см. Рис.2):
Перед началом тестирования следует довести тестовую кассету и
образец до комнатной температуры (15-30ºC). Не вскрывать
индивидуальную упаковку теста до начала исследования.
1. Непосредственно перед проведением исследования вскрыть
индивидуальную упаковку теста.
2. Маркировать
тестовую
кассету
инициалами
или
идентификационным номером пациента.
3. Суспендировать пробу энергичным встряхиванием пробиркикапельницы.
4. Отломить кончик крышки-капельницы и через открывшееся
отверстие внести 4 капли (100 мкл) тестируемой суспензии в
окошко для внесения пробы (S).
5. Результат анализа учитывают через 10 мин после загрузки
тестовой кассеты пробой.
Рисунок 2
4 drops of the mixture “sample + buffer”
S
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Рисунок 3
NEGATIVE
C
T
C
T
C
T
POSITIVE
INVALID
Отрицательный результат: одна зеленая линия появляется в
контрольной зоне (С) тестового окошка кассеты;
Положительный результат: в дополнение к зеленой контрольной
линии появляется красная линия в тестовой зоне (Т) тестового
окошка кассеты;
Недействительный результат: отсутствие зеленой контрольной
линии (С) вне зависимости от наличия или отсутствия красной
линии в тестовой зоне (Т). Неправильный объем пробы,
несоблюдение процедуры тестирования или качество реагентов –
наиболее частые причины отсутствия контрольной линии.
Проанализируйте процедуру тестирования и повторите ее с
использованием новой тест-кассеты. Если проблема остается,
следует прекратить тестирование и связаться с
местным
дистрибьютором.
Замечания по интерпретации результатов
Интенсивность окраски красной линии в тестовой зоне кассеты
меняется в зависимости от концентрации антигенов в образце.
Однако ни количественное содержание антигенов, ни степень их
возрастания не могут быть установлены с помощью данного
качественного теста.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
1. Тест предусматривает внутренний контроль за правильностью
проведения процедуры. Зеленая линия появляющаяся в
контрольной зоне (C) тестового окошка кассеты, указывает на
правильность проведения процедуры теста.
2. Результаты теста не учитывают в случае если неясный фон
мешает интерпретировать результаты.
ОГРАНИЧЕНИЯ
1. Устройство указывает исключительно на наличие вирусa в
образцах, обеспечивая качественную детекцию и может
использоваться только для исследования фекальных образцов.
2. Избыточное количество образца может повлечь за собой
получение некорректных результатов (появление коричневой
полосы). Необходимо повторно развести образец буферным
раствором и повторить тест.
3. Не использовать для исследования образцы, содерщащие
формальдегид и его производные.
4. Для постановки корректного диагноза необходимо обязательно
сопоставление результатов теста с прочей клинической
информацией.
Тест
обеспечивает
предварительную
диагностику и должен использоваться в совокупности с
результатаи прочих клинических тестов.
5. Отрицательный результат теста не исключает возможность
инфекции в отдельных случаях по причине низкой
концентрации вирусных антигенов.
6. Для повышения вероятности обнаружения антигенов
возбудителя тест рекомендуется проводить не позднее 1 недели
после возникновения первых симптомов заболевания
ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА
Чувствительность и специфичность теста
Сравнительное исследование фекальных образцов методом
Astrovirus Тест производства компании Novаmed Ltd, Израиль и
методом коммерчески приемлемого иммуносорбентного метода
(ELISA) для определения антигена астровируса в кале, показало
более чем в 94% совпадение в результатах чувствительности и
более чем в 99% совпадение в результатах специфичности в
обоих методах.
Перекрестное реагирование
При исследовании с помощью Astrovirus Тест производства
компании Novаmed Ltd, Израиль фекальных образцов,
содержащих
заведомо известные количества антигенов
Cryptosporidium
parvum,
Giardia
intestinalis,
Rotavirus,
Adenovirus, Еscherichia coli, Campylobacter и человеческого
гемоглобина, не было обнаружено каких-либо неспецифических
перекрестных реакций.
ЛИТЕРАТУРА:
1.
2.
SUNITA SHASTRI et al., “Prevalence of Astroviruses in a Children’s
Hospital”, JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY Sept. 1998, p.
2571–2574 Vol. 36, No. 9.
ASHLEY et al., “Astrovirus-associated gastroenteritis in children”, Journal
of Clinical Pathology,. 1978, 31, 939-943.
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор ООО «ГЕМ»
_____________С.А. Гольдберг
«23» июня 2010 г.
Представительство в РФ: ООО «ГЕМ»
г. Москва, Новый Зыковский проезд, д. 4А.
+7 (495) 787-04-32
www.hemltd.ru
IFU-Astrovirus—R-6040c-HEM-russ- v.01-26.08.11