Антигены цитоплазматических структур нейтрофилов (ANCA

ANCA-Profile ELISA (IgG), EUROIMMUN
1
_____________________________________________________________________________________________________
Регистрационное удостоверение ФС №2005/1125 от 18.08.2005 г.
Антигены цитоплазматических структур нейтрофилов
(ANCA-Profile ELISA IgG)
Иммуноферментный набор для полуколичественного определения аутоантител класса IgG к 6 различным
антигенам цитоплазматических структур нейтрофилов в сыворотке или плазме крови человека.
Номер по каталогу: EA 1200-1208-1 G
Набор рассчитан на 96 определений
ПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ
Гранулематоз Вегенера, микроскопический артериит, нодозный полиартериит, синдром Чарга-Стросса,
язвенный колит, болезнь Крона, аутоиммунный гепатит.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Тест ANCA-Profile ELISA (IgG) предназначен для полуколичественного определения in vitro IgGаутоиммунных антител человека к шести различным антигенам: протеиназе 3, лактоферрину,
миелопероксидазе, эластазе нейтрофилов, катепсину G и BPI (бактерицидному белку,
увеличивающему проницаемость мембран) в сыворотке и плазме крови. Данный набор содержит
стрипы, состоящие из восьми лунок, каждая из которых покрыта одним из этих антигенов. На первой стадии
реакции разведенные образцы пациентов инкубируют в лунках. Если образцы положительные,
специфические IgG-антитела (а также IgA- и IgM-антитела) будут связываться с антигенами на твердой
фазе. Для определения связанных антител проводится вторая инкубация с использованием меченных
ферментом антител к IgG человека (ферментный конъюгат), которые затем обеспечивают развитие
цветной реакции. Интенсивность образующегося окрашивания пропорциональна концентрации
соответствующих антител.
МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ
Состав набора:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Компонент
Цвет
Количеств
о
12 × 8
Лунки микропланшета
12 стрипов, в рамке-держателе, готовых к
использованию. Каждый стрип содержит по 8
лунок, покрытых соответствующими антигенами:
1. – нет антигена, 2. – смесь антигенов, 3. –
протеиназа 3, 4. – лактоферрин, 5. –
миелопероксидаза, 6. – эластаза нейтрофилов,
7. – катепсин G, 8. – BPI.
Калибратор
(IgG, человеческий) готов к использованию
Ферментный конъюгат
Кроличьи антитела к IgG человека,
конъюгированные с пероксидазой хрена; готов к
использованию
Буфер для образцов
Готов к использованию
Промывочный буфер
10×концентрат
Раствор хромогена/субстрата
Хромоген – тетраметилбензидин, субстрат –
перекись водорода, готов к использованию
Стоп-реагент
0,5 М серная кислота, готов к использованию
Инструкция по применению
Протокол с заданными величинами
Серия
–
Обозначение
STRIPS
темнокрасный
зеленый
1 × 2,0 мл
CAL 3
1 × 12 мл
CONJUGATE
голубой
1 × 100 мл
SAMPLEBUFFER
бесцветный
1 × 100 мл
WASHBUFFER 10×
бесцветный
1 × 12 мл
SUBSTRATE
бесцветный
1 × 12 мл
STOP SOLUTION
–
–
1 буклет
1 протокол
Температура хранения
_____________________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
ANCA-Profile ELISA (IgG), EUROIMMUN
2
_____________________________________________________________________________________________________
Невскрытый набор
использовать до
Для in vitro диагностики
Хранение и стабильность набора: Набор следует хранить при температуре от +2 °С до +8 °С. Не
замораживать. Невскрытые компоненты набора сохраняют стабильность в течение всего указанного срока
годности набора.
Утилизация отходов: Образцы пациентов, калибраторы, контроли и стрипы после инкубации следует
рассматривать как инфицированные отходы и обращаться с ними соответствующим образом. Все реагенты
следует удалять в соответствии с действующими официальными инструкциями.
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Примечание: Перед использованием температуру всех реагентов необходимо довести до комнатной (от
+18 °С до +25 °С) в течение 30 минут. После первого использования реагенты сохраняют стабильность в
течение указанного срока годности, если они хранятся при температуре от +2 °С до +8 °С и защищены от
микробного загрязнения. Прочие сведения о стабильности отдельных реагентов указаны ниже.
- Лунки, покрытые антигенами: Готовы к использованию. Откройте застежку защитной упаковки
микропланшета. Во избежание конденсации влаги внутри лунок, не вскрывайте упаковку до тех пор, пока
она не нагреется до комнатной температуры. Отломив необходимое количество лунок, остальные
неиспользованные лунки немедленно верните в ту же упаковку и плотно закройте ее на застежку (не
вынимайте из упаковки пакетик с осушителем).
После того, как упаковка была вскрыта, неиспользованные лунки с антигенами в ней можно хранить
минимум 4 месяца в сухом месте при температуре от +2 °С до +8 °С.
- Калибратор: Готов к использованию. Тщательно перемешать перед использованием.
- Ферментный конъюгат: Готов к использованию. Тщательно перемешать перед использованием.
- Буфер для образцов: Готов к использованию.
- Промывочный буфер: Поставляется в виде 10-кратного концентрата. Если образовались кристаллы,
перед разведением буфера их необходимо растворить, нагревая концентрат до 37°С и интенсивно
взбалтывая. Необходимое количество концентрата следует отобрать из бутыли чистой пипеткой и
растворить деионизированной или дистиллированной водой (1 часть концентрированного реагента плюс 9
частей воды).
Например, для проведения анализа в 1 стрипе: к 5 мл концентрата следует добавить 45 мл воды.
Готовый разведенный промывочный буфер стабилен до 1 месяца, если его хранят при температуре от +2
о
С до +8 оС и правильно используют.
- Раствор хромогена/субстрата: Готов к использованию. После отбора необходимого количества реагента
из флакона немедленно вновь закройте его, так как раствор чувствителен к свету. Во время использования
раствор хромогена/субстрата должен быть бесцветным. Не используйте раствор, если он приобрел
голубую окраску.
- Стоп-реагент: Готов к использованию.
Предостережение: Использованные контрольные сыворотки были проверены на антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2
и вирусу гепатита С, а также на наличие HBsAg методами иммуноферментного анализа и иммунофлуоресценции и при этом показали отрицательные результаты. Тем не менее, все используемые
материалы следует считать потенциально опасными и обращаться с ними, соблюдая необходимые меры
предосторожности. Некоторые реагенты содержат токсичный азид натрия. Избегайте его попадания на
кожу.
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ ОБРАЗЦОВ ПАЦИЕНТОВ
Материал образцов: Сыворотка или плазма (ЭДТА, гепарин или цитрат) крови человека.
Стабильность: Образцы пациентов, предназначенные для исследования этим методом, можно хранить до
14 дней при температуре от +2 оС до +8 оС. Разведенные образцы необходимо использовать в течение
одного рабочего дня.
Разведение образцов: Образцы пациентов разводят 1:101 буфером для образцов. Например: разведите
10 мкл сыворотки в 1,0 мл буфера для образцов и тщательно перемешайте на вортексе (пипетки для этого
не подходят).
_____________________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
ANCA-Profile ELISA (IgG), EUROIMMUN
3
_____________________________________________________________________________________________________
ПРИМЕЧАНИЕ: Калибратор готов к использованию, его разводить не надо.
ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ
Инкубация с образцом (1 стадия)
Внесите по 100 мкл калибратора или разведенных образцов пациентов в отдельные лунки микропланшета
в соответствии со схемой. Инкубируйте планшет при комнатной температуре (от +18 °С до + 25 °С) в
течение 30 минут.
Промывка
Ручная: Удалите жидкость из лунок и затем промойте 3 раза, используя каждый раз по 300 мкл
разведенного промывочного буфера на лунку.
Автоматическая: проводите в режиме с переполнением (установите в программе для соответствующего
автоматического вошера параметр “Overflow”, с 3-мя циклами промывки и внесением в лунки по 400 мкл
рабочего промывочного буфера.
При каждом цикле промывки после заполнения лунок буфером оставляйте планшет на 30-60 секунд и
затем опорожняйте. По окончании промывки (ручной или автоматической) тщательно удалите остатки
жидкости из лунок, энергично постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
Примечание: Остаточная жидкость (больше 10 мкл), обычно остающаяся в лунках после промывки, может
помешать действию субстрата и снизить оптическую плотность (ОП) раствора в лунках. Недостаточно
полная промывка (например, менее 3 раз, или при маленьком объеме добавляемого промывочного
буфера, или при коротком времени выдерживания буфера в лунках) может в результате привести к
завышенным величинам ОП в лунках.
Инкубация с конъюгатом (2 стадия)
Внесите в каждую лунку по 100 мкл ферментного конъюгата (меченные пероксидазой антитела к IgG
человека). Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (от +18 °С до + 25 °С).
Промывка
Удалите жидкость из лунок. Промойте, как описано ранее.
Инкубация с субстратом (3 стадия)
Внесите в каждую лунку по 100 мкл раствора хромогена/субстрата. Инкубируйте планшет в течение 15
минут при комнатной температуре (от +18 °С до +25 °С) в защищенном от прямого солнечного света месте.
Раствор содержит токсичный азид натрия. Избегайте контакта с кожей.
Остановка реакции
Добавьте в каждую лунку по 100 мкл стоп-реагента (в той же последовательности и с такой же скоростью,
как вносился раствор хромогена/субстрата).
Измерение
Фотометрическое измерение интенсивности окрашивания раствора в лунках проводят при основной
длине волны 450 нм и при длине волны сравнения между 620 нм и 650 нм в течение 30 минут после
добавления стоп-реагента. Перед измерением слегка покачайте планшет, чтобы добиться гомогенного
распределения раствора.
СХЕМА РАЗМЕЩЕНИЯ НА ПЛАНШЕТЕ ОБРАЗЦОВ И КОНТРОЛЕЙ
Покрытие лунок:
A: нет антигена
B: смесь антигенов
C: PR3
D: лактоферрин
E: MPO
F: эластаза
G: катепсин G
H: BPI
A
B
C
D
E
F
G
H
1
Bl
C
P1
P1
P1
P1
P1
P1
2
Bl
C
P2
P2
P2
P2
P2
P2
3
Bl
C
P3
P3
P3
P3
P3
P3
4
Bl
C
P4
P4
P4
P4
P4
P4
5
6
7
8
9
10
11
12
Представленная выше схема представляет собой пример размещения на планшете 4 образцов сыворотки
крови пациентов (от Р 1 до Р 4) при определении антител. Буфер для образцов (Bl) и калибратор (С)
инкубировали в соответствующих лунках каждого стрипа. Образцы пациентов инкубировали в шести
лунках, каждая из которых была покрыта одним из шести индивидуальных антигенов.
_____________________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
ANCA-Profile ELISA (IgG), EUROIMMUN
4
_____________________________________________________________________________________________________
РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Полуколичественное определение: Если в фотометре нет автоматического обнуления по бланку для
реагентов, вначале необходимо рассчитать среднее значение оптического поглощения бланков, а затем
вычесть его из всех других измеренных величин. Затем рассчитывают среднее значение поглощения
калибратора во всех измерениях и умножают его на фактор 0,2. Таким образом получают верхний предел
нормальных значений (уровень отсечения, cut-off). Более высокие значения следует рассматривать как
положительные, а более низкие значения – соответственно как отрицательные. Кроме такой качественной
оценки результаты можно оценить полуколичественно, рассчитывая отношение (Ratio) в соответствии с
формулой:
ОП образца пациента ОП образца пациента
=
= Ratio
ОП cut - off
ОП калибратора × 0,2
Исключение PR3 (Протеиназа 3): Для PR3 рассчитанное отношение необходимо умножить на фактор 1,4.
ОП образца пациента ОП образца пациента
=
= Ratio ×1.4
ОП cut - off
ОП калибратора × 0,2
Полученные результаты интерпретируют с помощью таблицы:
Ratio
Результат:
< 1,0
отрицательный
от ≥ 1,0
до
2,0
слабо положительный
от ≥ 2,0
до
5,0
положительный
≥ 5,0
сильно положительный
Параллельно с иммуноферментным определением антител к белкам гранул нейтрофилов всегда
необходимо проводить непрямой иммунофлуоресцентный тест. С одной стороны, это позволяет
контролировать достоверность и гарантирует отсутствие ошибочных положительных результатов
иммуноферментного определения, а, с другой стороны, при использовании гранулоцитов EUROIMMUN, в
особенности, в комбинации с замороженными срезами печени приматов, метод иммунофлуоресценции
позволяет обнаружить более широкий спектр антител к белкам гранул, так как в настоящее время известны
не все антигены гранулоцитов.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
Калибровка: Тест ANCA Profile ELISA калибруют, используя смешанную сыворотку крови. В результате
можно получить более широкий спектр параметров, чем при использовании моноспецифических тестов
EUROIMMUN ELISA. В этих иммуноферментных тестах есть специфические калибраторы и контроли для
каждого антигена, а стандартная кривая состоит из нескольких измеренных точек.
Для каждой группы тестов, выполненных на наборах определенной серии, значения бланка для реагентов и
ОП калибратора должны лежать в границах, установленных для наборов этой серии. Протокол с
установленными значениями включается в поставку набора. Если обнаружены отклонения контрольных
значений от значений, указанных в спецификации, результаты теста могут быть ошибочными и тест
следует повторить.
Активность фермента, используемого в составе набора, зависит от температуры, поэтому, если не
используется термостат, величины ОП могут различаться. Чем выше температура воздуха в помещении (от
+18оС до +25оС) во время инкубации с субстратом, тем выше величины ОП. Сходные изменения
происходят и при варьировании времени инкубации. Однако, таким же воздействиям подвергаются и
сыворотки калибраторов, поэтому при расчете результатов возможные колебания в основном
компенсируются.
Антигены: Все антигены, используемые в этом иммуноферментном наборе, представляют собой нативные
белки, очищенные из нейтрофилов человека.
Протеиназа 3 – нейтральная сериновая протеаза, которая способна разрушать белки экстрацеллюлярного
матрикса, такие как эластин, фибронектин и коллаген IV типа. Фермент имеет три изоформы, при этом
главная полоса в электрофорезе с додецилсульфонатом натрия (SDS) соответствует молекулярному весу
_____________________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
ANCA-Profile ELISA (IgG), EUROIMMUN
5
_____________________________________________________________________________________________________
26,8 кДа. Лунки микропланшета покрыты смесью рекомбинантной и нативной протеиназы 3.
Рекомбинантный белок базируется на человеческой cDNA и произведен с использованием линии клеток
человека. Нативная протеиназа 3 выделена из человеческих нейтрофилов.
Лактоферрин (молекулярная масса 77 кДа) способен связывать железо и таким образом оказывать
бактериостатический эффект, так как рост большинства патогенных бактерий зависит от концентрации
ионов железа.
Миелопероксидаза (молекулярная масса 118 кДа) вовлечена в продукцию свободных радикалов
кислорода (О2-, Н2О2, OCl-), которые токсичны для многих бактерий.
Эластаза (молекулярная масса 30 кДа) и катепсин G (молекулярная маса 23,5 кДа) принадлежат к группе
протеаз. Эти ферменты в норме изолированы присоединением к полисахаридному остатку матрикса гранул
и освобождаются только в процессе фагоцитоза. Оба фермента могут расщеплять белки соединительной
ткани, такие как эластин, коллагены, протеогликаны и фибронектин. Катепсин G также может вызывать
высвобождение ангиотензина II из ангиотензина I.
BPI (молекулярная масса 55 кДа) - положительно заряженный белок, ассоциированный с мембраной,
токсичный для грамотрицательных бактерий.
Граница определения: Граница определения – это величина, равная 3SD образца, не содержащего
аналита, и представляет собой наименьший определяемый титр антител. Граница определения теста
ANСA-Profile ELISA (IgG) составляет приблизительно 0,04.
Перекрестная реактивность: Этот ИФА тест не обладает перекрестной реактивностью.
Вещества, мешающие определению: На результаты анализа не влияли признаки гемолиза, липемии и
иктеричности в образцах с концентрациями гемоглобина вплоть до 10 мг/мл, триглицеридов – до 20 мг/мл и
билирубина – до 0,4 мг/мл.
Воспроизводимость: Воспроизводимость теста исследовали, определяя коэффициент вариации (CV)
результатов анализа трех сывороток для каждого из антигенов с концентрациями антител, попадающими
на разные участки калибровочной кривой. Величины CV внутри одного опыта определяли из 20
параллельных измерений каждой сыворотки. Величины CV в разных опытах получали, проводя по 4
параллельных измерения каждой сыворотки в течение 6 различных дней.
Вариабельность в разных опытах, n = 4 × 6
Сыворотка
CV
(%)
Протеиназа 3
4,5
Лактоферрин
3,5
Миелопероксидаза
3,8
Эластаза
5,6
Катепсин G
11,6
BPI
4,5
Вариабельность внутри одного опыта, n = 20
Антиген
CV
(%)
Протеиназа 3
2,6
Лактоферрин
3,5
Миелопероксидаза
3,8
Эластаза
3,9
Катепсин G
11,1
BPI
3,3
Референтный интервал: Уровни IgG-антител к ANСA анализировали, используя этот ИФА набор
EUROIMMUN, на панели из 200 здоровых доноров крови. При уровне отсечения (cut-off), равном 1,0, были
получены следующие результаты:
Антитела
Распространенность
Протеиназа 3
1%
Лактоферрин
0%
Миелопероксидаза
0%
Эластаза
0%
Катепсин G
0%
BPI
1,5%
Распространенность IgG-антител к протеиназе 3, лактоферрину, миелопероксидазе, эластазе, катепсину G,
BPI в четырех различных группах пациентов:
_____________________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
ANCA-Profile ELISA (IgG), EUROIMMUN
6
_____________________________________________________________________________________________________
Группа
пациентов
n
Антитела к
протеиназе 3
Антитела к
лактоферрину
Антитела к миелопероксидазе
Антитела к
эластазе
Антитела к
катепсину G
Антитела
к BPI
Гранулематоз
Вегенера
60
-
0%
1,7%
0%
0%
5%
ANCAассоциированные
васкулиты
(cANCA
положительные)
163
95%
-
-
-
-
-
Микроскопически
й артериит
30
0%
3,3%
53,3%
6,7%
0%
0%
Синдром
Стросса
10
0%
0%
0%
0%
0%
0%
Чарга-
АНТИТЕЛА К ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИМ АНТИГЕНАМ ГРАНУЛОЦИТОВ
Серологическое тестирование антител к цитоплазматическим структурам нейтрофилов (ANCA) является
важнейшим инструментом при диагностике аутоиммунных заболеваний, таких как гранулематоз Вегенера,
быстро прогрессирующий гломерулонефрит, полиартериит, язвенный колит, первичный склерозирующий
холангит. Для обнаружения ANCA используют несколько методов. Стандартный метод – непрямой
иммунофлуоресцентный тест нейтрофильных гранулоцитов, фиксированных этанолом. Таким образом
можно дифференцировать по крайней мере два типа образцов: зернистая флуоресценция в цитоплазме
гранулоцитов (cANCA: цитоплазматические структуры, гранулематоз Вегенера) и однородная или
мелкозернистая флуоресценция вокруг клеточного ядра гранулоцитов (pANCA: перинуклеарные структуры).
cANCA представлены антителами к протеиназе 3. В качестве антигенов к pANCA к настоящему времени
идентифицированы лактоферрин, миелопероксидаза, эластаза, катепсин G, лизоцим и β-глюкуронидаза.
Антитела к BPI относят к структурам и cANCA, и pANCA.
Непрямая иммунофлуоресценция – скрининговый тест для определения всех аутоантител к гранулоцитам.
Но этим методом нельзя дифференцировать соответствующие антигены pANCA. Для дифференциации
антигенов-мишеней для pANCA в тестах EUROIMMUN ANCA Profile ELISA или в моноспецифических
тестах ИФА используют очищенные и охарактеризованные белки. Иногда pANCA определяют в
иммунофлуоресцентном тесте, реагенты которого не взаимодействуют ни с одним из перечисленных выше
антигенов. Не вызывает сомнения, что в настоящее время известны не все важнейшие антигены.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Аутоантитела к гранулоцитам обнаруживаются при целом ряде заболеваний:
Флуоресцирующие структуры
Ассоциированные болезни
Гранулематоз Вегенера
Микроскопический артериит
Синдром Чарга-Стросса
Нодозный полиартериит
Ревматоидный артрит
Диссеминирующая красная
волчанка
Язвенный колит (57%)
Первичный склерозирующий
холангит
Болезнь Крона (7%)
Аутоиммунный гепатит
Антигены
cANCA, редко pANCA
cANCA, pANCA
pANCA
ANCA (малый процент)
pANCA, атипичные ANCA
pANCA
PR3, редко MPO
PR3, MPO
MPO
редко PR3, MPO
редко MPO, лактоферрин
редко MPO, лактоферрин
pANCA, атипичные ANCA
катепсин G, лактоферрин
эластаза, лизоцим
другие неизвестные антигены
pANCA, атипичные ANCA
cANCA демонстрируют высокую чувствительность и специфичность при гранулематозе Вегенера
(встречаемость 80-95%). Титр антител коррелирует с активностью заболевания. Кроме того, в редких
случаях cANCA можно обнаружить при микроскопическом артериите или нодозном полиартериите.
_____________________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
ANCA-Profile ELISA (IgG), EUROIMMUN
7
_____________________________________________________________________________________________________
Основным антигеном-мишенью для cANCA является протеиназа 3, присутствие других мишеней (например,
BPI) в настоящее время обсуждается.
Аутоантитела к лактоферрину, миелопероксидазе, эластазе и катепсину G ассоциированы с различными
аутоиммунными заболеваниями, такими как системная красная волчанка, ревматоидный артрит, синдром
Фёлти, быстро прогрессирующий гломерулонефрит, микроскопический полиартериит, нодозный
полиартериит, болезнь Крона и язвенный колит. Аутоантитела к BPI были описаны при различных
заболеваниях, среди них гранулематоз Вегенера, микроскопический артериит, язвенный колит, болезнь
Крона, васкулит, аутоиммунный гепатит.
Антитела к лактоферрину обнаружены, например, у 45% пациентов с ревматоидным артритом с
сопутствующим васкулитом. рANCA, индуцированные антителами к МРО, главным образом ассоциированы
с микроскопическим артериитом. Кроме того, МРО-ANCA обнаружены при классическом нодозном
полиартериите, синдроме Чарга-Стросса и синдроме Гудпасчера. В редких случаях их обнаруживают при
диссеминирующей красной волчанке и ревматоидном артрите. Антитела к МРО класса IgA описаны у
пациентов с пурпурой Шонлейна-Геноха. Антитела к эластазе нейтрофилов обнаруживаются редко,
например, при системной красной волчанке с встречаемостью 6%. Клиническое значение этих аутоантител
в настоящее время изучено недостаточно.
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
Список литературы приведен в оригинале инструкции на английском языке.
Внимание! Перевод сделан с английского оригинала инструкции. Перед постановкой исследования
сверьте номер и дату издания вложенного в набор оригинала с указанными в настоящем переводе (см.
внизу справа). При несовпадении номеров или дат обратитесь в «Аналитику» за новым переводом, либо
руководствуйтесь оригиналом инструкции.
ANCA-Profile_IgG_ELISA_EA_1200-1208-1G_rus.doc
10/20/2008 3:47:00 PM
Оригинал EA_1200-1G_A_UK_С02.doc
26.09.2008
_____________________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru