ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ОРГАНИЗМА КАРПОВЫХ

НТП: ЖИВОТНОВОДСТВО И КОРМОПРОИЗВОДСТВО
рованных клона (в зависимо
Таблица 2. Эффективность генетической трансформации клеток семен
сти от используемой генной ников хрячков in vivo генной конструкцией pXIns
конструкции). При инфициро Исследовано животных, n
3
вании клетокмишеней ви Исследовано срезов, n
60
Эффективность трансформации семенных канальцев
русным препаратом величи
558
на этого показателя была в Исследовано семенных канальцев, n
Число срезов с трансформированными семенными канальцами, n (%)
30 (50)
4,56 раз меньше.
Интеграция и экспрессия Число трансформированных канальцев, %:
0,29±0,06
генной конструкции pX!Ins в минимальное на одном трансформированном срезе
1,42±0,10
максимальное
на
одном
трансформированной
срезе
клетках сперматогенного эпи
0,39±0,11
телия в условиях in vivo была в среднем по группе
Эффективность трансформации сперматогоний*
установлена практически у
36
всех подопытных хрячков. Им Число трансформированных сперматогоний, n
Среднее
количество
клеток
в
семенном
канальце,
n
40
муногистохимический анализ
Число семенных канальцев, n
558
после инъекции клетокупа
Общее количество клеток, n
22320
ковщиц выявил наличие транс
Общая эффективность трансгенеза (отношение числа
формированных клеток в 30 из
трансформированных сперматогоний к их общему числу во всех
-3
60 проанализированных сре исследованных канальцах)
1,6*10
зов семенников. Число транс
*суммарные данные по группе (по 60 гистологическим срезам).
формированных клеток в од
матогенного эпителия хряков посредством использова
ном семенном канальце варьировало от 1 до 5 (см. рису
ния ретровирусных векторов. При использовании генных
нок), а общее их количество на одном срезе достигало 8.
конструкций pX!RSVhgh и pX!ins осуществлена трансфор
При этом доля трансформированных канальцев варьиро
мация этих клетокмишеней in vitro и in vivo. Наибольшая
вала от 0,29±0,06 до 1,42±0,10 % при общей эффективно
результативность трансгенеза установлена в варианте с
сти трансгенеза 1,6⋅103 (табл. 2).
Выводы. Проведенные эксперименты показали воз
генной конструкцией pXins в виде суспензии клетокупа
можность переноса рекомбинантной ДНК в клетки спер
ковщиц – от 4,1·104 (in vitro) до 1,6·103 (in vivo).
Литература.
1. Эрнст Л.К. Роль биологии в развитии животноводства в XXI веке // Достижения науки и техники АПК. – 2008. – №10. – С. 7!8.
2. Некоторые аспекты клеточной инженерии животных / Эрнст Л.К., Багиров В.А., Томгорова Е.К., Сингина Г.Н.,
Волкова Н.А., Зиновьева Н.А., Чаушев И.Н., Чаушева А.И. // Достижения науки и техники АПК. – 2008. – №12 – С. 39!42.
3. Генетическая трансформация сперматогониев кроликов in vivo / Новгородова И.П., Мормышев А.Н., Волкова Н.А.,
Зиновьева Н.А. // Биотехнология. – 2008. – №1. – с.24!28.
4. Культивирование и трансплантация сперматогоний типа А хряков / Савченкова И.П., Коржикова С.В., Костерева
Н.В., Эрнст Л.К. // Онтогенез. – 2006. – Т. 37. – № 4. – С. 292!300.
5. Spadafora C. Sperm cells and foreign DNA: a controversial relation. Bioassays. – 1998. – Р. 302!324.
6. Коржикова С.В. Выделение, характеристика и трансплантация сперматогоний типа А хряка: Автореф. дис...канд.
биол. наук . – ВИЖ, Дубровицы, 2002. – 27 с.
EFFICIENCY OF THE USING THE RETROVIRAL VECTORS FOR OF THE RECOMBINANT DNA
TRANSFERINTO THE SPERMATOGONIA OF PIGS
N.S. Lozmanova, N.A.Volkova, V.A.Bagirov, N.A.Zinovieva, L.A. Volkova, L.K. Ernst
Summary. The efficiency testicular stem cells in vitro and in vivo using the retroviral vectors was investigated. The
genetic transformation frequency of targeting cells was estimated at the level of 4,1 x 104 to 1,6 x 103.
Key words: retrovirus vectors, spermatogonia cells, pig.
УДК. 591.1:639.215
ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ОРГАНИЗМА
КАРПОВЫХ РЫБ ПЕРЕД ЗИМОВКОЙ
В.П. КУЛАЧЕНКО, доктор биологических наук, профес!
сор
И.В. КУЛАЧЕНКО, кандидат биологических наук, доцент
Белгородская ГСХА
E!mail: bsau@belgtts.ru
Резюме. Изучено физиологическое состояние сего!
летков чешуйчатого и зеркального карпов с учетом об!
щей массы, упитанности, химического состава тела
40
и коэффициента физиологической устойчивости в ус!
ловиях Белгородской области.
Ключевые слова: рыба, тело, состав, упитанность,
устойчивость, зимовка.
Сегодня особое внимание уделяется развитию прудо
вого рыбоводства, которое по принципу организации и
средствам производства относится к сельскохозяйствен
ному сектору экономики страны [1,2,3]. Основной вид по
требляемой прудовой рыбы – карповые. Наиболее труд
Достижения науки и техники АПК, №102010
НТП: ЖИВОТНОВОДСТВО И КОРМОПРОИЗВОДСТВО
ный период в жизни рыб – зимовка. В это время карповые
не питаются и на них действует много неблагоприятных
факторов. Накопленные за лето питательные вещества
сеголетки расходуют в течение зимы. При нормальном
ходе зимовки потери массы не должны превышать 14 %,
сухого вещества – 20, протеина – 16, жира – 30 %. Значи&
тельное использование за зиму сухого вещества и проте&
ина (в среднем 35 % и более), жира (60 % и более), потери
массы (25 % и более) приводят не только к снижению вы&
хода рыб после зимовки, но и к резкому уменьшению тем&
пов роста, сопротивляемости заболеваниям и повыше&
нию отхода до 40…50 % на втором году жизни.
Цель наших исследований – оценить физиологичес&
кое состояние организма карповых рыб перед зимовкой.
Для ее достижения изучали морфометрические показа&
тели и химический состав тела сеголетков чешуйчатого и
зеркального карпов, определяли индексы физиологичес&
кой устойчивости рыбы.
Условия, материалы и методы. Для оценки физи&
ологического состояния сеголетков карпа чешуйчатого
(I группа) и зеркального (II группа) отбирали особей (сам&
цов и самок) по случайной выборке в период облова выро&
стных прудов племенного рыбопитомника «Шараповский»
в 2007 г. В каждой группе определяли зоологическую длину
(от рыла до начала хвостового плавника), общую массу,
упитанность, химический состав тела и коэффициент
физиологической устойчивости. При выполнении рыбовод&
но&биологических исследований применяли ихтиологи&
ческие и химические методы. Полученные результаты об&
рабатывали статистическими и биометрическими мето&
дами с использованием компьютерных программ. Вычис&
ляли среднюю величину, ее квадратическую ошибку, ко&
эффициент вариации, критерии достоверности, коэффи&
циенты корелляции и их достоверность, уравнение рег&
рессиии первого и второго порядка.
Результаты и обсуждение. Зоологическая длина
тела исследуемых рыб в I группе была равна 15,1 см, во II
– 11,5 см, а общая масса соответственно 70,6 и 66 г (стан&
дарт по общей массе 25…30 г). По литературным данным
зимостойкие сеголетки карпа должны содержать воды не
более 78 % [4]. В наших исследованиях величина этого
показателя составляла 66,25…67,76 %. Размах индивиду&
альных колебаний находился в пределах от 62,34 до 72,42 %
в I группе и от 66,12 до 68,19 % – во II группе (см. табл.).
Рекомендуемое содержание белка в теле сеголетков –
12 %. Мы установили, что оно как и водно&белковый коэф&
фициент были примерно одинаковыми 13,67 и 13,84 % и
4,85 и 4,89 соответственно.
Исход зимовки во многом определяется резервами на&
копленного жира. У сеголетков чешуйчатого карпа его со&
держание составляло 17,97 %, а у зеркального – 16,2 % и
было выше рекомендуемого в 2,99…2,25 и 2,70…2,02 раза.
Коэффициент упитанности определяют на основа&
нии индивидуальных измерений и взвешиваний. У хоро&
шо упитанных особей он превышает 2,5, а если величи&
на этого показателя меньше 2,5 – рыба истощена. У изу&
ченных сеголетков чешуйчатого карпа коэффициент упи&
танности в среднем составлял 2,74, у зеркального – 3,00.
При этом у зеркальные карпа наименьшая его величина
была равна 2,62.
Соотношение самых важных химических веществ тела
жира и белка у чешуйчатого карпа было выше, чем у зер&
кального – 1,31 против 1,17.
Физиологическая роль минеральных веществ в пери&
од зимовки сеголетков изучена недостаточно. Вместе с
тем, имеются данные о том, что критическое содержание
золы при гибели сеголетков составляет 4,2 % от живой
массы [5].
Содержание кальция и фосфора в теле исследован&
ных рыб находилось на уровне 0,51 и 0,40 %, а соотно&
шение кальция к фосфору в I группе равнялось 1:1,25, а
во II – 1:1,29.
Мы установили высокие коэффициенты корреляции
между массой тела и содержанием жира (r=0,95, P=0,99),
массой тела и содержанием фосфора (r=0,94, P=0,97),
содержанием жира и фосфора (r=0,99, P=0,997).
Высокий положительный коэффициент корреляции
(r=0,71...0,95) с высокой степенью достоверности
(P=0,94...1,00) установлен для показателей массы тела и
зоологической дины.
Корреляция отсутствовала или ее величина была ме&
нее 0,5 между массой тела и коэффициентом упитаннос&
ти (r=от &0,26 до +0,45 с критерием достоверности
1,37…1,73 и вероятностью 0,81…0,89). Следовательно,
определение только средней массы сеголетков не дает
возможности прогнозировать вероятность их зимовки и со&
хранности.
Установлена высокая обратная зависимость между
коэффициентом упитанности и зоологической длины тела
(I группа – r=&0,69, p=0,993; II группа – r=&0,94, p=0,999).
На большой выборке сеголетков мы вывели уравне&
ния регрессии, используя которые можно быстро и точ&
но по длине тела определить массу и коэффициент упи&
танности:
у = 21,2х – 223,5,
где у – масса тела, г; х – длина тела, см;
у = 9,79 – 0,473х,
где у – коэффициент упитанности; х – длина тела, см.
Таблица. Химический состав тела карповых рыб
Карп
Карп
Показатели
чешуйчатый
зеркальный
Средняя штуч70,6±4,58
66±2,84
ная масса, г/гол.
20,5
25,9
Сv,%
Жир, %
17,97±0,92
16,2±0,34
Сv.%
16,2
11,44
Протеин, %
13,67±0,24
13,84±0,12
Сv,%
5,59
4,78
0,50±0,02
0,53±0,01
Кальций, %
12,2
10,01
Сv,%
Фосфор, %
0,40±0,01
0,41±0,01
Сv,%
6,52
6,91
Жир : белок
1,31
1,17
Кальций: фосфор
1,25
1,29
Вода : белок
4,85
4,87
Выводы. Исследуемые виды рыб несущественно раз&
личались по содежанию в их теле протеина, жира, кальция
и фосфора. Сеголетки и чешуйчатого, и зеркального кар&
пов характеризовались высокими показателями качества.
Содержание сухого вещества, протеина и жира в теле рыб
вполне достаточно для обеспечения нормальной зимов&
ки. Индекс физиологической устойчивости рыб высокий.
У чешуйчатых карпов он равен – 7,46, а у зеркальных –
6,54. Выведенные уравнения регрессии можно использо&
вать для быстрого и точного определения массы и коэф&
фициента упитанности по длине тела.
Литература.
1. Гордеев А. В. Состояние и перспективы развития рыбного хозяйства России. //Рыбное хозяйство. – 2005. – №4. – С. 38.
2. Бакунович А., Кулинцев В., Чайка В. Состояние и тенденции развития аквакультуры в мире и ее перспективы в
России. // Межд. с/х журнал. – 2008. – №1. – С. 4244.
Достижения науки и техники АПК, №102010
41
НТП: ЖИВОТНОВОДСТВО И КОРМОПРОИЗВОДСТВО
3. Серветник Г.Е. Стратегия развития рыбоводства в АПК // Достижения науки и техники АПК. – 2008. – № 10. – С. 4042.
4. Анисимова И.М., Лавровский В.В. Ихтиология. – М., 1983. – 255 с.
5. Лав Р.М. Химическая биология рыб. М.: Пищевая промть. – 1976. – 349 с.
PHYSIOLOGICAL STATE OF CARPS’ FISH BEFORE WINTERING.
V.P.Kulachenko, I.V.Kulachenko
Summary. Physiological state of mirror and scales carps in Belgorod region were studied. Weight, wellfed, body’s
chemical composition and physiological stability coefficient were taken into consideration.
Key words: fish, body, composition, stability, wintering.
УДК 638.123
ВЫЯВЛЕНИЕ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЧИСТОПОРОДНЫХ ПЧЕЛ
Т.Т. ТОРМОСИНА, кандидат сельскохозяйственных наук
Ярославская ГСХА
А.И. ПЕТРОВ, кандидат сельскохозяйственных наук
Департамент АПК администрации Тверской области
М.К. ЧУГРЕЕВ, кандидат сельскохозяйственных наук
Поволжский НИИ производства и переработки мясо
молочной продукции
Email: zoo@timacad.ru
Резюме. Представлены результаты работы по улучше
нию чистопородных карпатских пчел. Всесторонняя оцен
ка племенного материала позволила выявить различия
между линиями карпатских пчел по морфологическим и
хозяйственно полезным признакам. Изучен характер на
следования морфологических признаков рабочих пчел,
маток и трутней при межпородном скрещивании карпатс
ких и кавказских пчел. Разработана концепция надежного
оперативного метода биоморфологического контроля по
родности пчел.
Ключевые слова: чистопородные пчелы, племенная ра
бота, морфологические признаки, хозяйственно полезные
признаки, яйценоскость маток, зимовка пчел, весеннее
развитие пчелиных семей, наследование, контрастные
признаки, скрещивание пород пчел.
Племенная работа в пчеловодстве играет одну из клю
чевых ролей в интенсификации отрасли. Биологические
особенности медоносных пчел вносят специфику в селек
ционную работу. Сегодня по ряду причин большинство
местных аборигенных пород оказались метизированны
ми [2, 3, 6]. Особенно значительный вред приносит мети
зация пчел северных районов с продолжительными и хо
лодными зимами южными породами. При бесконтроль
ном спаривании пчелиных маток и трутней возникает опас
ность повсеместной метизации, которая влечет за собой
ухудшение биологических и хозяйственно полезных при
знаков. Во многих регионах наблюдается значительное со
кращение числа пчелиных семей, их продуктивности, зи
мостойкости, устойчивости к болезням.
В этой обстановке следует ориентироваться на чис
топородное разведение и создание сплошных массивов
чистопородных пчел. Однако такая работа достаточно
сложна и рассчитана на длительный период. Начинается
она с выявления и оценки племенного материала, затем
необходимо закрепить ценные качества в потомстве и да
лее осуществлять собственно чистопородное разведение.
Племенной материал выявляют методом индивидуально
го отбора с проверкой маток по качеству потомства. При
этом наибольшее внимание уделяют таким селективным
42
признакам как плодовитость маток, медопродуктивность
и зимостойкость семей [4]. Успех в этой работе зависит от
состояния изученности вопроса. Вопервых следует от
четливо понимать как правильно выбирать исходный пер
спективный племенной материал. Вовторых, необходи
мо изучить характер наследования признаков рабочих пчел,
маток и трутней и на основе этого разработать надежный
оперативный метод биоморфологического контроля по
родности, доступный для широкого использования пчело
водамиселекционерами и практиками. Втретьих, нужен
способ стабилизации ценной генетической основы в по
колениях. Эти задачи в некоторой степени решаются в
наших исследованиях.
Условия, материалы и методы. Эксперименталь
ную часть работы проводили в рамках научных программ
кафедры пчеловодства и кафедры разведения сельско
хозяйственных животных РГАУМСХА им. К.А.Тимирязева
на пасекеиспытательнице №21 пчелосовхоза «Кисловод
ский» Ставропольского края, на пасеке Литовского НИИ
земледелия, на изолированном случном пункте, располо
женном на Кушской косе Балтийского моря и на кафедре
пчеловодства РГАУМСХА им. К.А.Тимирязева. Измерения
экстерьерных признаков проводили с помощью микроско
пов МБС1 и МБС9 на временных глицериновых препара
тах по методике Г.К. Гетце (1930) и В.В. Алпатова (1948).
Определяли следующие экстерьерные признаки: длина
хоботка, длина и ширина правого переднего крыла – дли
на 3го и 4го тергитов, ширина 3го тергита, длина и ши
рина 3го стернита, кубитальный индекс, тарзальный ин
декс, дискоидальное смещение, форма задней границы
воскового зеркальца 5го стернита.
Материалом для проведения исследований по выяв
лению и изучению племенного материала служили пчели
ные семьи карпатской породы линий 77, 62 и 69 селекции
кафедры пчеловодства РГАУМСХА им. К.А. Тимирязева и
групп 159 и 50, выведенных в пчелосовхозе «Кисловодс
кий». Спаривание маток линий 77, 62 и 69 проводили на
производящих их пасеках, расположенных на территории
Закарпатской области Украины. Маток групп 159 и 50 спа
ривали на специально организованном случном пункте, рас
положенном в 20 км от пчелосовхоза «Кисловодский». Туда
вывозили отцовские семьи с трутнями и нуклеусы с неплод
ными матками. Для сравнительного изучения карпатских
пчел были созданы опытные группы по принципу семей
аналогов с учетом их массы, количества расплода и корма,
возраста маток. Для изучения экстерьерных признаков от
каждой семьи отбирали по 30 молодых нелетных пчел.
Хозяйственно полезные признаки (характер зимовки,
весеннее развитие, способность семей наращивать боль
шую массу пчел, сила семей, плодовитость маток, про
Достижения науки и техники АПК, №102010