Цитологический мониторинг эпителиальной ткани пародонта в оценке эффективности бальнеотерапии

ортопедическая стоматология
Цитологический мониторинг эпителиальной ткани
пародонта в оценке эффективности бальнеотерапии
у пациентов с дефектами челюстей
Четвертных В.А.
зав.кафедрой гистологии,
цитологии и эмбриологии
ГОУ ВПО «Пермская ГМА им.
ак. Е.А. Вагнера», д.м.н., проф.
caddis@permonline.ru
Рогожников Г.И.
заведующий кафедрой
ортопедической стоматологии
ГОУ ВПО «Пермская ГМА им. ак.
Е.А.Вагнера», д.м.н., профессор,
caddis@permonline.ru
Асташина Н.Б.
доцент кафедры
ортопедической
стоматологии ГОУ
ВПО «Пермская ГМА им.
ак. Е.А.Вагнера», д.м.н.,
caddis@permonline.ru
Рогожников А.Г.
ассистент кафедры
ортопедической
стоматологии ГОУ ВПО
«Пермская ГМА им. ак.
Е.А.Вагнера», к.м.н.,
caddis@permonline.ru
Мартюшева М.В.
доцент кафедры
ортопедической
стоматологии ГОУ ВПО
«ПермскаяГМА им. ак.
Е.А.Вагнера», к.м.н., caddis@
permonline.ru
Резюме
В данной статье рассматриваются возможности использования природных
ресурсов местных курортов на этапах комплексного лечения пациентов с дефектами челюстей. Представлены методы восстановительного лечения пациентов с
использованием орошений минеральной водой курорта «Ключи». Показаны результаты восстановительного лечения пациентов с дефектами верхней челюсти и
перенесших пластические операции на нижней челюсти. Полученные результаты
позволяют рекомендовать указанные методы лечения у пациентов с дефектами
верхней челюсти и после остеопластических операций на нижней челюсти.
Ключевые слова: дефект челюсти, восстановительное лечение, бальнеологические ресурсы, минеральная вода.
Cytological monitoring of the epithelium of periodontal tissue to assess
the effectiveness of balneotherapy in patients with defects of the jaws
Chetvertnyh V.A., Astashina N.B., Rogozhnikov G.I. Rogozhnikov A.G., Martyusheva M.V.
The summary
Possibilities of the natural resources of local health resorts at the stages of complex
treatment of patients with jaw defects are analyzed in the abstract. Methods of
rehabilitation treatment of patients with the use of mineral water irrigation from health
resort «Kluchi» are presented. Results of complex treatment of patients with upper jaw
defects and after osteoplastic operations on lower jaw are demonstrated.
The results of the investigation permit to recommend the above mentioned methods
to patients with defects of upper jaw and after osteoplastic operations on lower jaw.
Keywords: jaw defect, rehabilitation treatment, balneological resources, mineral water.
Слизистая оболочка полости рта является мощным барьером, который предупреждает проникновение чужеродных антигенов во внутреннюю среду организма. Наиболее
значимую роль в этом процессе играет система местной
www.dental-press.com актуальные вопросы стоматологии
защиты, направленная на инактивацию бактериальных, вирусных и других антигенов, имеющих непосредственное
отношение к формированию неспецифической резистентности и специфического иммунитета организма [5].
Одной из важных особенностей слизистой полости рта
является способность ее к самоочищению за счет защитных
факторов слюны и барьерных свойств слизистой оболочки.
Нарушение этого процесса не безразлично для микроэкологии и цитологического состояния полости рта. Хирургическое
вмешательство, наличие глубоких пародонтальных карманов,
воздействие различных внешних и внутренних факторов могут привести к ослаблению защитной функции и явиться причиной развития воспалительного процесса [4]. Поиск методов, направленных на поддержание резистентности слизистой
оболочки ротовой полости, является приоритетной задачей в
лечении стоматологических заболеваний [1].
Особую актуальность приобретает указанная проблема при
оказании комплексной стоматологической помощи пациентам с
дефектами верхней челюсти и перенесших пластические операции на нижней челюсти. Комплексное лечение пациентов с
приобретенными дефектами челюстей (ПДЧ) включало в себя
следующие этапы: проведение профессиональной гигиены и
обучение правилам ухода за полостью рта; санация полости
рта; рациональное ортопедическое лечение и реабилитация с
применением бальнеологической терапии. Проанализирована
эффективность применения лечебно-столовой минеральной
37
4
1
ортопедическая стоматология
Рис. 1.Определялись
Клетки эпителияклетки,
слизистой
пародонтальных
воды (МВ) «Ключи» у обследованной категории пациентов до орексиса.
находящиеся
в состоянии
карманов зубов, ограничивающих дефект челюсти (до лечения):
проведения комплексного лечения и после него.
цитолиза и имевшие размытые границы. Встречались так
1 - клетки IV типа; 2 - клетки V типа;
Было изучено 80 препаратов цитологических мазков, называемые «голоядерные
В мазках- отпечатках
3 - разрушенныеклетки».
нейтрофилы;
полученных у 40 человек, в том числе у 15 больных с де- определялись
4 - повсеместное
скопление
полиморфной флоры
и полностью
лизированные
клетки. Все это
(кокки, candida).
фектами верхней челюсти (I основная группа) и у 15 паци- свидетельствует о деструктивных
изменениях эпителия с наОкраска по Романовскому; ув. х 1000
ентов с дефектами нижней челюсти (II основная группа), рушением его защитных и барьерных функций.
при восстановительном лечении которых применялась
минеральная вода для орошений и полосканий. Десять
2
пациентов с дефектами челюстей (составивших группу
сравнения) для процедуры полоскания использовали дистиллированную воду. Исследование являлось клинико-лабораторным, рандомизированным, краткосрочным, группы
были сопоставимы по полу и возрасту.
1
Цитологические исследования эпителия слизистой пародонтальных карманов зубов, ограничивающих дефект
3
челюсти, показали наличие у пациентов острого воспаления (рис. 1). В эпителии пародонтальных карманов вы4
делены эпителиоциты: базальные (1 тип), парабазальные
(2 тип), промежуточные (3, 4 тип), поверхностные (5 тип)
Рис.2. Клетки эпителия слизистой пародонтальных карманов зубов,
и роговые чешуйки (6 тип).
ограничивающих
дефектслизистой
челюсти (до
лечения):
Рис. 2.
Клетки эпителия
пародонтальных
В мазках-отпечатках обнаружены клетки разной сте1 - клетка II
типа;ограничивающих
2 - скопление кокковой
флоры;
карманов
зубов,
дефект
челюсти
пени зрелости и находящиеся в разных морфологических
3 - нити мицелия (сandida); 4 - разрушенные нейтрофилы.
(до лечения):
Окраска по Романовскому; ув. х 1000
состояниях (рис. 1).
1 – клетка II типа; 2 – скопление кокковой флоры;
3 – нити мицелия (сandida); 4 – разрушенные нейтрофилы.
После проведения курса
лечения
больных ув.
с х ПДЧ
Окраска
по Романовскому;
1000 (основная группа)
3
2
1
4
лечебно-столовой минеральной водой «Ключи» в мазках-отпечатках со
После проведения курса лечения больных с ПДЧ
слизистой пародонтальных карманов зубов, ограничивающих дефект челюсти,
(основная группа) лечебно-столовой минеральной водой
наблюдали снижение
деструктивного
изменения
в клетках эпителия.
«Ключи»процессов
в мазках-отпечатках
со слизистой
пародонтальных карманов зубов, ограничивающих дефект челюсти, на1
блюдали снижение процессов деструктивного изменения в
Лейкоциты выявлялись единично (от 2-5 в поле зрения), клетки имели
клетках эпителия. Лейкоциты выявлялись единично (от 2-5
жизнеспособныйв поле
вид зрения),
(рис. 3).
Признаков
незавершенного
фагоцитоза не
клетки
имели жизнеспособный
вид (рис. 3).
Признаков незавершенного фагоцитоза не установлено.
установлено.
Рис. 1. Клетки эпителия слизистой пародонтальных
Рис. 1.
Клетки
эпителия слизистой
пародонтальных
карманов
зубов,
ограничивающих
дефект челюсти
(до лечения):
карманов
зубов,IV
ограничивающих
дефект
1 - клетки
типа; 2 - клетки V
типа; челюсти
(до лечения):
3 - разрушенные
нейтрофилы;
1 – клеткископление
IV типа; 2полиморфной
– клетки V типа;
4 - повсеместное
флоры
3 – разрушенные
нейтрофилы;
(кокки, candida).
4 – повсеместное
скопление полиморфной
Окраска по Романовскому;
ув. х 1000 флоры
(кокки, candida). Окраска по Романовскому; ув. х 1000
2
В мазках-отпечатках из пародонтального
кармана зуба,
2
1
ограничивающего дефект, выявлено значительное количество
лейкоцитов, большая часть которых находилась в состоянии
деструкции, эпителиальные клетки и межклеточное проэпителияэпителия
слизистойслизистой
пародонтальных
карманов зубов,
странство обильно обсеменены микробной флорой (рис. 2). Рис.3. Клетки
Рис. 3. Клетки
пародонтальных
ограничивающих
дефект
челюсти, у пациентов
I челюсти,
основной группы:
1
карманов
зубов,
ограничивающих
дефект
До лечения в цитограммах пациентов с дефектами че1 - клетка IVу типа,
2 - единичные
нейтрофилы.
пациентов
I
основной
группы:
люстей в 60% случаях выявлялись клетки 3-го типа и в 19%
Окраска
по IV
Романовскому;
увеличение
х 1000
1 – клетка
типа, 2 – единичные
нейтрофилы.
3 Клетки базального
случаев – 4-го типа (промежуточные).
Окраска по Романовскому; увеличение х 1000
слоя (1 тип) не определялись, но в 13% случаев обнаружиВ цитограмме мазков-отпечатков
в 86% случаях
выяв-5-го типа
В цитограмме мазков-отпечатков
в 86% случаях выявлялись
клетки
4
вались парабазальные
клетки (2 тип).
лялись клетки 5-го типа (рис. 4), имеющие плоскую, полиПрисутствие незрелых клеток (2-3 типа) парабазального
(рис.4), имеющие
плоскую,
полигональную
форму,
крупные
размеры; их
гональную
форму,
крупные размеры;
их диаметр
составлял
слояКлетки
свидетельствует
о выраженных
дистрофических
измеРис.2.
эпителия слизистой
пародонтальных
карманов зубов,
около
50 мкм.
диаметр составлял
около
50 мкм.
дефект
челюсти (до
лечения):
ненияхограничивающих
эпителия данных
зон. Размеры
клеток
составляли
меЯдра
имели преимущественно овальную форму, разме1
клетка
II
типа;
2
скопление
кокковой
флоры;
нее 20 мкм. Цитоплазма базофильна, гликоген выявлялся не
3 - нити мицелия (сandida); 4 - разрушенные нейтрофилы.
ром около 5 мкм. Центрально расположенные ядра имели
у всех клеток.
В то по
жеРомановскому;
время у большинства
Окраска
ув. х 1000 их цитоплазма
ровные четкие контуры. Хроматин ядер плотно упакованвакуолизирована. Ядра многих клеток – с признаками кариПосле проведения курса лечения больных с ПДЧ (основная группа)
38
чебно-столовой минеральной водой «Ключи» в мазках-отпечатках со
изистой пародонтальных карманов зубов, ограничивающих дефект челюсти,
2
Проблемы стоматологии.
2011. № 2
циты выявлялись единично (от 2-5 в поле зрения), клетки имели
способный вид (рис. 3). Признаков незавершенного фагоцитоза не
ортопедическая стоматология
овлено.
ный, равномерно окрашен. Наиболее зрелые клетки располагались преимущественно разрозненно, цитоплазма
нежная, прозрачная, в некоторых клетках определяются
липидные гранулы и гранулы гликогена. У части клеток
2
края цитоплазмы загнуты (признак зрелости и готовности
перехода в 6-й тип). Данные морфологические признаки
свидетельствуют о «здоровом» состоянии эпителиальных
клеток наружного слоя, способных обеспечивать защиту
слизистой ротовой полости. Клетки
2 промежуточного слоя
1
выявлялись в 10%; они меньше по размерам (диаметр их
25-30 мкм). Ядра клеток пузырьковидные, округлые, с хорошо выраженным
тонкопетлистым хроматином. В базо1
Рис. 6.
Клеткислизистой
эпителияпародонтальных
слизистой пародонтальных
эпителия
карманов зубов,
фильно окрашенной цитоплазме выявляются глыбки гли-Рис.6. Клетки
карманов зубов,
ограничивающих
дефект
челюсти,
ограничивающих
дефект
челюсти,
у пациентов
I основной
группы:
когена. Клетки преимущественно залегают поодиночке или
у пациентов
группы:
1- клетка
V типа; 2 I-основной
единичные
кокки.
группами
2-3. Клетки
базального
слоя (1 тип)
не опреде1- клетка V типа; 2 – единичные кокки.
Рис.3.
Клеткипо
эпителия
слизистой
пародонтальных
карманов
зубов,
Окраска по Романовскому; увеличение х 1000
лялись,
но
в
3%
случаев
обнаруживались
клетки
3 типа
и
ограничивающих дефект челюсти, у пациентов I основной
группы:
1 - клетка
IV парабазального
типа, 2 - единичные
до 1%
– клетки
слоянейтрофилы.
(2 тип, рис. 5). Все они
Таким образом, после проведенного лечения наблюОкраска
по Романовскому;
увеличение
х 1000
также имели
нормальное
строение.
Признаков
дистрофичедался процесс нормализации дифференцировки эпителия,
ских изменений клеток не установлено.
что подтверждается присутствием в мазках в большем коМикрофлора в большинстве
препаратов
не определяограмме мазков-отпечатков
в 86% случаях
выявлялись
клетки 5-го типа
лась, а единично выявляющиеся микроорганизмы имели личестве клеток не глубоких, а поверхностных слоев. По), имеющие
плоскую,
полигональную
форму,
крупные эпиразмеры;
их
ложительный
эффект в нормализации клеточного состава
вид мелких
кокковых
форм с адгезией
на поверхности
эпителия
слизистой
ротовой полости на фоне ее санации
телиоцитов
(рис. 6).
тр составлял около 50 мкм.
объясняется специфическим влиянием содержащихся в
минеральной воде микроэлементов, а также механическим,
термическим ее воздействием [2]. Комплекс микроэлементов формирует в слизистой ротовой полости, так называемый «олигодинамический эффект» [3].
2
Входящие в состав МВ «Ключи» ионы металлов блокируют свободные карбонильные, сульфгидрильные группы
на поверхности микробных клеток, что приводит к подавлению активности микроорганизмов. Можно предположить, что в дальнейшем «свободные» от микроорганизмов
1
эпителиальные клетки становятся доступными для таких
важных факторов естественной резистентности, входящих
в состав слюны, как: лизоцим, интерферон, Jq A, фибронектин, инсулин, фактор регенерации эпителия и т.п., способРис. 4. Клетки
слизистойслизистой
пародонтальных
карманов зубов,
ствующих защите поверхности эпителия от повреждаюРис. 4.эпителия
Клетки эпителия
пародонтальных
ограничивающих
у пациентов
II основной
группы: щего действия патогенов и процессам его регенерации [2].
кармановдефект
зубов, челюсти,
ограничивающих
дефект
челюсти,
1 - клетка
V типа; 2 - IIединичные
кокки.
у пациентов
основной группы:
Анализ результатов, полученных в группе сравнения
оение. Признаков дистрофических
изменений
клеток
не установлено.
Окраска
по
Романовскому;
ув.
х 1000
1 – клетка V типа; 2 – единичные
кокки.
(состоящей из пациентов с дефектами верхней челюсти и
Окраска по Романовскому; ув. х 1000
перенесших пластические операции на нижней челюсти,
2
регулярно
выполняющих полоскания полости рта дистиллированной водой), показал, что происходило некоторое
улучшение гигиенического состояния ротовой полости. Что,
вероятно. связано с механическим воздействием при проведении процедуры полоскания, поскольку общепризнано [6],
что механическое удаление субстанций, насыщенных микроорганизмами, приводит к санации воспалительного очага.
В ходе исследования было зарегистрировано присутствие клеток разного типа: 5 тип – 55%; 4 тип – 20%; 3 тип –
20%; 2 тип – 5%. Микрофлора в большинстве препаратов
была полиморфной; микроорганизмы имели вид мелких
кокковых форм с адгезией их на поверхности эпителио1
цитов (рис. 7), а также отдельно лежащие нити Candida.
2
В этих же препаратах отмечалось присутствие клеток нейРис. 5.
Клетки
эпителия
слизистой
пародонтальных
карманов зубов,
Рис. 5.
Клетки
эпителия
слизистой
пародонтальных
ограничивающих
дефект
челюсти, у пациентов
IIчелюсти,
основной угруппы: трофильного ряда (до 15 в поле зрения). Следует отметить,
карманов зубов,
ограничивающих
дефект
что в группе больных, перенесших пластические операции,
1 - единичные
нейтрофилы;
2
клетка
пациентов II основной группы: II типа.
количество лейкоцитов было ниже (до 10 в поле зрения).
Окраска
по
Романовскому;
ув.
х
1000
1 – единичные нейтрофилы; 2 – клетка II типа.
Часть нейтрофильных гранулоцитов находилась на стадии
Окраска по Романовскому; ув. х 1000
крофлора в большинстве препаратов не определялась, а единично
www.dental-press.com актуальные вопросы стоматологии
вляющиеся микроорганизмы имели вид мелких кокковых форм с адгезией
оверхности эпителиоцитов (рис.6).
3
39
ортопедическая стоматология
полуразрушенных нейтрофилов скапливались фрагменты
клеточного детрита и микроорганизмы (рис. 8).
Сами эпителиальные клетки сохраняли четкие контуры,
но в части из них сохранялась размытость контуров ядер.
В цитоплазме ряда клеток выявлены базофильные гранулы. У клеток 4-го и 5-го типа в цитоплазме присутствовали вакуоли разного размера и пикнотичные ядра (рис. 9).
1
2
В целом, грубых деструкций клеток не установлено,
1
2
но постоянно отмечалась тенденция к нарушению морфофункциональных свойств эпителия. Следовательно, положительный эффект, полученный в группе сравнения, был
3
значительно менее выражен.
3
Сравнительные цитологические исследования эпителия
тканей пародонта показали положительное влияние лечебностоловой минеральной воды «Ключи» на состояние полости
рта. При лечении у пациентов значительно снижались при4
знаки воспаления, что способствовало нормализации диф4
ференцировки клеток эпителия. При проведении процедур
Рис. 7. Клетки эпителия слизистой пародонтальных карманов зубов, орошения и полоскания дистиллированной водой в слизиРис. 7. Клетки эпителия
слизистой
пародонтальных
карманов
зубов,
ограничивающих
дефект челюсти,
у пациентов
группы
сравнения:
стой оболочке продолжали выявляться различные микроорРис. 7. Клетки
эпителия
слизистой
пародонтальных
ограничивающих
дефект
пациентов
группы сравнения:
1 - клетка
IIIчелюсти,
типа;
2 -уклетка
II типа;
карманов
зубов,
ограничивающих
дефект
челюсти,
1
клетка
III
типа;
2
клетка
II
типа;
ганизмы и определялась лейкоцитарная инфильтрация.
3 - кокки на поверхности клетки; 4 - нейтрофилы.
у пациентов
группы
сравнения:
3 - кокки
на поверхности
клетки;
4 - нейтрофилы.
Окраска
по Романовскому;
ув.
х 1000
Таким образом, полученные данные свидетельствуют
ув. хII1000
1 –Окраска
клеткапо
III Романовскому;
типа; 2 – клетка
типа;
об имеющихся лечебно-профилактических свойствах ми3 – кокки на поверхности клетки; 4 – нейтрофилы.
неральной воды «Ключи». Вода оказывает оздоровительОкраска по Романовскому; ув. х 1000
ное, санирующее воздействие на слизистую ротовой полости, предупреждает и снижает воспалительный процесс.
Это является фактом, предопределяющим возможность
1
использования минеральной воды «Ключи» для профилак1
тики и лечения заболеваний пародонта у больных с дефектами верхней челюсти и перенесших пластические опера2
2
ции на нижней челюсти. Полученные результаты являются
тем более важными в связи с тем, что пациентам с приобретенными дефектами челюстей, образовавшимися вследствие хирургического лечения опухолей и опухолеподобных
заболеваний, противопоказано применение более активных
бальнеологических ресурсов.
разрушения. Контуры лейкоцитов – размытые, сегменты
ядер увеличенные, рыхлые, что является функциональным
проявлением
незавершенного
фагоцитоза.
цитоплазме
Окраска
по Романовскому;
увеличение хВ
1000
фагоцитовОкраска
определялись
крупные
и
мелкие
вакуоли,
в них
по Романовскому; увеличение х 1000
содержались остатки поглощенного материала. Вокруг
Рис.8.
Клетки
эпителия
слизистой
пародонтальных
карманов зубов,
зубов,
Рис. 8.
Клетки
эпителия
слизистой
пародонтальных
Рис.8.
Клетки
эпителия
слизистой
пародонтальных
карманов
Литература
ограничивающих
дефект
челюсти,
группы
сравнения:
ограничивающих
дефект
челюсти, уу пациентов
пациентов
группы
сравнения:
карманов зубов,
ограничивающих
дефект
челюсти,
1.
Асташина
Н.Б.
Комплексное
лечение и реабилитация па11- -разрушенные
нейтрофилы;
22 --вклетка
III типа.
типа. присутствовали
разрушенные
нейтрофилы;
клетка
III
у пациентов
сравнения:
зофильные гранулы.
У
клеток
4-го
и группы
5-го типа
цитоплазме
Окраска
по
Романовскому;
ув.
х
1000
циентов
с
приобретенными
дефектами
челюстей. ЭкспеОкраска
по
Романовскому;
ув.
х
1000
1 – разрушенные нейтрофилы; 2 – клетка III типа.
куоли
разного размера иОкраска
пикнотичные
ядра четкие
(рис.9).
Романовскому;
ув. контуры,
х 1000
риментально-клиническое
исследование: Дис. … д-ра мед.
Сами
сохраняли
контуры,
но вв части
части из
из них
них
Самиэпителиальные
эпителиальные клетки
клеткипо
сохраняли
четкие
но
наук. Пермь, 2009. – 365с.
сохранялась
ряда клеток
клеток выявлены
выявлены
сохранялась размытость
размытость контуров
контуров ядер.
ядер. В цитоплазме ряда
2. Корюкина И.П., Туев А.В., Бобровницкий И.П. Лечение
3
3.
2
4.
5.
1
Рис.9.
Клетки
эпителия
слизистой
пародонтальных
карманов зубов,
Рис. 9.
Клетки
эпителия
слизистой
пародонтальных
ограничивающих
дефект
челюсти, у пациентов
группы
сравнения:
карманов зубов,
ограничивающих
дефект
челюсти,
1 - клетка V утипа;
2 - единично
присутствующие
пациентов
группы
сравнения: кокки;
3 - разрушенные
нейтрофилы.
1 – клетка V типа;
2 – единично
присутствующие кокки;
Окраска по Романовскому; ув. х 1000
3 – разрушенные нейтрофилы.
Окраска по Романовскому; ув. х 1000
40
6.
хронического тонзиллита питьевой минеральной водой
«Усть-Качкинская».
Москва-Пермь, 2006. – С.2-11.
44
Леонова Л.Е., Собянина Л.И., Коробейникова Е.П. и др.
Результаты применения орошений питьевой минеральной
водой «Устькачкинская» при лечении пародонтита // Курортология и курортное дело. – 2004. – №1. – С.117.
Микробная флора полости рта и ее роль в развитии патологических процессов / Е.А. Кузнецов, В.Н. Царев, М.М.
Давыдова и др. – М., 2000. – 74 с.
Микрофлора полости рта: норма и патология / Е.Г. Зеленова, М.И.Заславская, М.И. Салина и др.- Н. Новгород:
Изд-во НГМА, 2004. – 156 с.
Kutsik R.V., Pavliuk T.D. Investigation of qantitative and antifungal drug susceptibility of yeasts isolated from patients with
generalized periodontits complicated by candidosis // J. Microbiol. Z. 2003. – Vol. 65. – №5. – P.26-29.
Проблемы стоматологии. 2011. № 2