Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис» Перейти на страницу с полной версией» ÄËß ÏÅÄÀÃÎÃÈ×ÅÑÊÈÕ ÂÓÇΠÏÐÀÊÒÈÊÓÌ ÏÎ ÌÎËÅÊÓËßÐÍÎÉ ÁÈÎËÎÃÈÈ Ðåêîìåíäîâàíî ÓÌÎ ïî ñïåöèàëüíîñòÿì ïåäàãîãè÷åñêîãî îáðàçîâàíèÿ â êà÷åñòâå ó÷åáíîãî ïîñîáèÿ äëÿ ñòóäåíòîâ âûñøèõ ó÷åáíûõ çàâåäåíèé, îáó÷àþùèõñÿ ïî ñïåöèàëüíîñòè «Áèîëîãèÿ» ÌÎÑÊÂÀ «ÊîëîñÑ» 2012 1 Перейти на страницу с полной версией» Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис» Перейти на страницу с полной версией» ÓÄÊ 577(075.8) ÁÁÊ 28.070ÿ73 Ï69 À â ò î ð û: äîêòîð áèîëîãè÷åñêèõ íàóê À. Ñ. Êîíè÷åâ, äîêòîð áèîëîãè÷åñêèõ íàóê È. Ë. Öâåòêîâ, êàíäèäàò áèîëîãè÷åñêèõ íàóê À. Ï. Ïîïîâ, êàíäèäàò áèîëîãè÷åñêèõ íàóê Ò. Í. Øàìøèíà, äèðåêòîð ÎÎÎ «ÊÎÌÏÀÍÈß «ÁÈÎÊÎÌ» À. Á. Êîìàðîâ Ð å ä à ê ò î ð À. Ñ. Ìàêñèìîâà Ð å ö å í ç å í ò û: äîêòîð ïåäàãîãè÷åñêèõ íàóê Ñ. Â. Ñóìàòîõèí (ÌÃÏÈ), äîêòîð áèîëîãè÷åñêèõ íàóê À. Í. Èãíàòîâ (Öåíòð «Áèîèíæåíåðèÿ» ÐÀÍ) Èçäàíèå îñóùåñòâëåíî ïðè ôèíàíñîâîé ïîääåðæêå ÎÎÎ «ÊÎÌÏÀÍÈß «ÁÈÎÊÎÌ» Ïðàêòèêóì ïî ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè / À. Ñ. Êîíè÷åâ, Ï69 È. Ë. Öâåòêîâ, À. Ï. Ïîïîâ è äð. — Ì.: ÊîëîñÑ, 2012. — 151 ñ.: èë. — (Ó÷åáíèêè è ó÷åá. ïîñîáèÿ äëÿ ñòóäåíòîâ âûñø. ó÷åá. çàâåäåíèé). ISBN 978—5—9532—0815—4 Ïðèâåäåíû ïðîïèñè äëÿ ïðîâåäåíèÿ öèêëà ïðàêòè÷åñêèõ ðàáîò, ñâÿçàííûõ ñ èçó÷åíèåì ñòðîåíèÿ è ôóíêöèé íóêëåèíîâûõ êèñëîò è áåëêîâ, ñ èñïîëüçîâàíèåì íàèáîëåå øèðîêî ðàñïðîñòðàíåííûõ ìåòîäîâ ñîâðåìåííîé ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè. Íàðÿäó ñ ðàáîòàìè, òðåáóþùèìè ñîâðåìåííîãî è â ðÿäå ñëó÷àåâ äîñòàòî÷íî äîðîãîñòîÿùåãî îáîðóäîâàíèÿ è ðåàêòèâîâ, ïðèâåäåíû ïðîïèñè âûïîëíåíèÿ ýëåìåíòàðíûõ ðàáîò, ïîçâîëÿþùèõ òåì íå ìåíåå ïîëó÷èòü îïðåäåëåííûå êà÷åñòâåííûå è êîëè÷åñòâåííûå ðåçóëüòàòû, õàðàêòåðèçóþùèå ñâîéñòâà áåëêîâ è íóêëåèíîâûõ êèñëîò. Êàæäàÿ ðàáîòà ñîäåðæèò òåîðåòè÷åñêîå îïèñàíèå òîãî èëè èíîãî ìåòîäà è íàèáîëåå âàæíûå àñïåêòû åãî ïðàêòè÷åñêîãî èñïîëüçîâàíèÿ, öåëåâîå íàçíà÷åíèå âñåõ íåîáõîäèìûõ ðåàêòèâîâ è îáîðóäîâàíèÿ, ïîäðîáíîå ïîñòàäèéíîå îïèñàíèå ëàáîðàòîðíûõ îïåðàöèé. Âñå ïðåäñòàâëåííûå â ïðàêòèêóìå ðàáîòû ïðîøëè àïðîáàöèþ â ó÷åáíûõ è íàó÷íûõ ëàáîðàòîðèÿõ ÌÃÎÓ è ÎÎÎ «ÊÎÌÏÀÍÈß «ÁÈÎÊÎÌ» è ñíàáæåíû èëëþñòðàöèÿìè. Äëÿ ñòóäåíòîâ ïåäàãîãè÷åñêèõ âóçîâ, îáóùàþùèõñÿ ïî ñïåöèàëüíîñòè «Áèîëîãèÿ». ÓÄÊ 577(075.8) ÁÁÊ 28.070ÿ73 Îðèãèíàë-ìàêåò êíèãè ÿâëÿåòñÿ ñîáñòâåííîñòüþ èçäàòåëüñòâà «ÊîëîñÑ», è åãî âîñïðîèçâåäåíèå â ëþáîì âèäå, âêëþ÷àÿ ýëåêòðîííûé, áåç ñîãëàñèÿ èçäàòåëÿ çàïðåùåíî. ISBN 978—5—9532—0815—4 Èçäàòåëüñòâî «ÊîëîñÑ», 2012 2 Перейти на страницу с полной версией» Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис» Перейти на страницу с полной версией» ÎÃËÀÂËÅÍÈÅ • Ïðåäèñëîâèå .................................................................................................................. 5 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 1. ÎÇÍÀÊÎÌËÅÍÈÅ Ñ ÎÑÍÎÂÍÛÌÈ ÏÐÈÁÎÐÀÌÈ È ÎÁÎÐÓÄÎÂÀÍÈÅÌ ÄËß ÏÐÀÊÒÈÊÓÌÀ ÏÎ ÌÎËÅÊÓËßÐÍÎÉ ÁÈÎËÎÃÈÈ .............................................................................................. 7 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 2. ÀÍÀËÈÇ ÄÍÊ ÌÅÒÎÄÎÌ ÝËÅÊÒÐÎÔÎÐÅÇÀ  ÀÃÀÐÎÇÍÎÌ ÃÅËÅ ................................................................................................ 10 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 3. ÂÛÄÅËÅÍÈÅ È ÔÐÀÊÖÈÎÍÈÐÎÂÀÍÈÅ ÍÓÊËÅÈÍÎÂÛÕ ÊÈÑËÎÒ ÝÓÊÀÐÈÎÒ ÊËÀÑÑÈ×ÅÑÊÈÌÈ ÌÅÒÎÄÀÌÈ ........ 15 Ç à í ÿ ò è å ¹ 1. Ýêñòðàêöèÿ ÄÍÊ èç æèâîòíûõ îðãàíèçìîâ ñ ÄÄÑ-Na .............. 18 Ç à í ÿ ò è å ¹ 2. ÑÒÀÂ-ýêñòðàêöèÿ ÄÍÊ èç ðàñòåíèé ........................................... 20 Ç à í ÿ ò è å ¹ 3. Âûäåëåíèå òîòàëüíîé ÐÍÊ ïî Øåððåðó ..................................... 23 Ç à í ÿ ò è å ¹ 4. Ôðàêöèîíèðîâàíèå è îïðåäåëåíèå ñîîòíîøåíèé ðèáîñîìàëüíûõ è òðàíñïîðòíûõ ÐÍÊ ìåòîäîì ýëåêòðîôîðåçà â ïîëèàêðèëàìèäíîì ãåëå .... 25 Ç à í ÿ ò è å ¹ 5. Îïðåäåëåíèå êîíñòàíòû ñåäèìåíòàöèè ÐÍÊ ìåòîäîì ýëåêòðîôîðåçà â ïîëèàêðèëàìèäíîì ãåëå ................................................................. 28 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 4. ÂÛÄÅËÅÍÈÅ ÍÓÊËÅÈÍÎÂÛÕ ÊÈÑËÎÒ Ñ ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅÌ ÑÎÐÁÅÍÒΠ................................................................... 29 Ç à í ÿ ò è å ¹ 1. Âûäåëåíèå ÄÍÊ ñ èñïîëüçîâàíèåì íàáîðà DiatomTM DNA Prep 100 ........................................................................................................................ 30 Ç à í ÿ ò è å ¹ 2. Âûäåëåíèå ÐÍÊ ñ èñïîëüçîâàíèåì íàáîðà DiatomTM RNA Prep 100 ........................................................................................................................ 32 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 5. ÂÛÄÅËÅÍÈÅ ÏËÀÇÌÈÄÍÎÉ ÄÍÊ ÈÇ ÐÅÊÎÌÁÈÍÀÍÒÍÛÕ ÁÀÊÒÅÐÈÀËÜÍÛÕ ÊËÅÒÎÊ ................................................ 33 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 6. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÊÎÍÖÅÍÒÐÀÖÈÈ È ÊÀ×ÅÑÒÂÀ ÏÐÅÏÀÐÀÒΠÍÓÊËÅÈÍÎÂÛÕ ÊÈÑËÎÒ ÌÅÒÎÄÎÌ ÑÏÅÊÒÐÎÔÎÒÎÌÅÒÐÈÈ ........................................................................................ 37 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 7. ÏÎÑÒÀÍÎÂÊÀ ÏÎËÈÌÅÐÀÇÍÎÉ ÖÅÏÍÎÉ ÐÅÀÊÖÈÈ ................................................................................................................... 41 149 Перейти на страницу с полной версией» Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис» Перейти на страницу с полной версией» Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 8. Î×ÈÑÒÊÀ ÄÍÊ-ÔÐÀÃÌÅÍÒΠÏÎÑËÅ ÈÕ ÐÀÇÄÅËÅÍÈß ÌÅÒÎÄÎÌ ÏÐÅÏÀÐÀÒÈÂÍÎÃÎ ÝËÅÊÒÐÎÔÎÐÅÇÀ  ÀÃÀÐÎÇÍÎÌ ÃÅËÅ .............................................................................................. 50 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 9. ÐÅÀÊÖÈß ÎÁÐÀÒÍÎÉ ÒÐÀÍÑÊÐÈÏÖÈÈ ........... 56 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 10. ÐÅÑÒÐÈÊÖÈÎÍÍÛÉ ÀÍÀËÈÇ ÄÍÊ ................... 61 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 11. ÄÍÊ—ÄÍÊ-ÃÈÁÐÈÄÈÇÀÖÈß ............................... 65 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 12. ÊËÎÍÈÐÎÂÀÍÈÅ ÔÐÀÃÌÅÍÒΠÄÍÊ Â ÊËÅÒÊÀÕ E. ñoli .................................................................................................. 73 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 13. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÏÅÐÂÈ×ÍÎÉ ÑÒÐÓÊÒÓÐÛ ÄÍÊ ............................................................................................................................ 80 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 14. ÈÍÔÎÐÌÀÖÈÎÍÍÛÉ ÏÎÈÑÊ Ñ ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅÌ ÁÀÇ ÄÀÍÍÛÕ ÈÍÒÅÐÍÅÒÀ ............................................................ 87 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 15. ÝÊÑÒÐÀÊÖÈß ÁÅËÊΠÈÇ ÆÈÂÎÒÍÛÕ È ÐÀÑÒÈÒÅËÜÍÛÕ ÒÊÀÍÅÉ ................................................................................ 90 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 16. ÎÑÀÆÄÅÍÈÅ ÁÅËÊΠÑÓËÜÔÀÒÎÌ ÀÌÌÎÍÈß ............................................................................................................... 93 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 17. ÄÈÀËÈÇ ÁÅËÊΠ.................................................... 98 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 18. ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÅ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÁÅËÊÀ ÏÎ ÌÅÒÎÄÓ ËÎÓÐÈ .............................................................................................. 103 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 19. ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÅ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÁÅËÊÀ ÏÎ ÌÅÒÎÄÓ ÁÐÝÄÔÎÐÄ ...................................................................................... 106 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 20. ÏÎËÓ×ÅÍÈÅ ÑÓÁÊËÅÒÎ×ÍÛÕ ÔÐÀÊÖÈÉ ÌÅÒÎÄÎÌ ÄÈÔÔÅÐÅÍÖÈÀËÜÍÎÃÎ ÖÅÍÒÐÈÔÓÃÈÐÎÂÀÍÈß ................ 108 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 21. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÑÓÁÚÅÄÈÍÈ×ÍÎÉ ÑÒÐÓÊÒÓÐÛ È ÌÎËÅÊÓËßÐÍÛÕ ÌÀÑÑ ÑÓÁÚÅÄÈÍÈÖ ÁÅËÊΠÌÅÒÎÄÎÌ ÝËÅÊÒÐÎÔÎÐÅÇÀ  ÏÎËÈÀÊÐÈËÀÌÈÄÍÎÌ ÃÅËÅ Ñ ÄÎÄÅÖÈËÑÓËÜÔÀÒÎÌ ÍÀÒÐÈß ................................................................... 114 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 22. ÔÐÀÊÖÈÎÍÈÐÎÂÀÍÈÅ ÍÀÒÈÂÍÛÕ ÁÅËÊΠÐÀÑÒÅÍÈÉ ÌÅÒÎÄÎÌ ÝËÅÊÒÐÎÔÎÐÅÇÀ  ÏÎËÈÀÊÐÈËÀÌÈÄÍÎÌ ÃÅËÅ .......................................................................................................................... 121 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 23. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÈÇÎÝËÅÊÒÐÈ×ÅÑÊÈÕ ÒÎ×ÅÊ ÁÅËÊΠÌÅÒÎÄÎÌ ÈÇÎÝËÅÊÒÐÎÔÎÊÓÑÈÐÎÂÀÍÈß Â ÒÎÍÊÎÌ ÑËÎÅ ÏÎËÈÀÊÐÈËÀÌÈÄÍÎÃÎ ÃÅËß ........................................ 126 Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 24. ÂÅÑÒÅÐÍ-ÁËÎÒÒÈÍà ............................................ 132 Ïðèëîæåíèÿ ................................................................................................................ 138 Ïðèëîæåíèå 1. Ïðèãîòîâëåíèå áóôåðíûõ ðàñòâîðîâ ............................................. 138 150 Перейти на страницу с полной версией» Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис» Перейти на страницу с полной версией» Ïðèëîæåíèå 2. Ïðèíÿòûå ñîêðàùåíèÿ â áèáëèîãðàôè÷åñêèõ ññûëêàõ íà ðàçíûõ ÿçûêàõ ...................................................................................................... 140 Ïðèëîæåíèå 3. Ïðàâèëà òåõíèêè áåçîïàñíîñòè ïðè ðàáîòå â ëàáîðàòîðèè ........ 141 Ïðèëîæåíèå 4. Îêàçàíèå ïåðâîé ìåäèöèíñêîé ïîìîùè ...................................... 144 Ïðèëîæåíèå 5. Ïåðå÷åíü ïðåïàðàòîâ è ñðåäñòâ ïåðâîé ïîìîùè â àïòå÷êå ........ 145 Ëèòåðàòóðà ............................................................................................................... 147 151 Перейти на страницу с полной версией»