26 Íîâîñòè êëåòî÷íûõ òåõíîëîãèé Âîññòàíîâëåíèå ïðîòÿæåííûõ äåôåêòîâ ïåðèôåðè÷åñêèõ íåðâîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì àóòîãåííîé áåñêëåòî÷íîé ìàòðèöû è øâàííîâñêèõ êëåòîê Âîññòàíîâëåíèå ïðîòÿæåííûõ äåôåêòîâ ïåðèôåðè÷åñêèõ íåðâîâ (áîëåå 3-5 ñì) îñòàåòñÿ íåðåøåííîé ïðîáëåìîé ñîâðåìåííîé ðåêîíñòðóêòèâíîé õèðóðãèè.  íàñòîÿùåå âðåìÿ â ìåäèöèíñêîé ïðàêòèêå íåò òåõíîëîãèé, ñ ïîìîùüþ êîòîðûõ ìîæíî áûëî áû ïîìî÷ü ïàöèåíòàì, óòðàòèâøèì çíà÷èòåëüíóþ ÷àñòü íåðâà. Òîãäà êàê ìåíåå ïðîòÿæåííûå äåôåêòû ìîæíî âîññòàíîâèòü ñ ïîìîùüþ ìîáèëèçàöèè êîíöîâ ïîâðåæäåííîãî íåðâà. Èñïîëüçîâàíèå æå äîíîðñêèõ òðàíñïëàíòàòîâ íåðâîâ îñëîæíÿåòñÿ èììóíîëîãè÷åñêèìè ðåàêöèÿìè íà ÷óæåðîäíûå òêàíè. Ðîñò àêñîíà ïðè ðåïàðàöèè íåðâíîãî âîëîêíà - ñëîæíûé è çàâèñÿùèé îò ðÿäà ôàêòîðîâ ïðîöåññ. Íàïðèìåð, ðîñòîâîé êîíóñ àêñîíà, äâèãàÿñü ñîãëàñíî õåìîòàêñèñó äîëæåí íàõîäèòüñÿ â «ñîïðîâîæäåíèè» øâàííîâñêèõ êëåòîê. Îòñóòñòâèå èõ äîñòàòî÷íîãî êîëè÷åñòâà è ñëàáûé ïðîëèôåðàòèâíûé ïîòåíöèàë, à òàêæå âñòðå÷àþùèåñÿ íà ïóòè ðóáöîâûå òêàíè îñòàíàâëèâàþò ðîñò àêñîíîâ ñ îáðàçîâàíèåì íåâðîìû. Äëÿ ðåøåíèÿ çàäà÷è áåñïðåïÿòñòâåííîãî ïðîäâèæåíèÿ â ïðîñòðàíñòâå ðîñòîâûõ àêñîíàëüíûõ êîíóñîâ íåîáõîäèìî èìåòü â äîñòàòî÷íîì êîëè÷åñòâå øâàííîâñêèå êëåòêè ñ àêòèâíûì ïðîëèôåðàòèâíûì ïîòåíöèàëîì è «ðàñ÷èñòèòü» ïóòü ïðîäâèæåíèÿ àêñîíà îò îêðóæàþùèõ òêàíåé.  ïîñëåäíåå âðåìÿ äëÿ ðåøåíèÿ äàííîé ïðîáëåìû áûëî ïðåäëîæåíî íåñêîëüêî ïîäõîäîâ, èñïîëüçóþùèõ ìåòîäû òêàíåâîé èíæåíåðèè. Äëÿ ýòîãî èñïîëüçîâàëè êàê ñèíòåòè÷åñêèå ìàòåðèàëû [2, 3], òàê è êîëëàãåíîâûå òðóáêè [1]. Ñîâñåì íåäàâíî ãðóïïà Hisasue S. ïîêàçàëà âîçìîæíîñòü ðåêîíñòðóêöèè óòðà÷åííîé ÷àñòè íåðâíîãî ñòâîëà (äåôåêò - 1 ñì) òðóáêîé èç PGA, âíóòðè êîòîðîé íàõîäèëñÿ êîëëàãåíîâûé ãåëü. Êîíöû òðóáêè ôèêñèðîâàëèñü ê ðåçåöèðîâàííûì ó÷àñòêàì ïîëîâîãî íåðâà êðûñ [4]. Èññëåäîâàòåëè ïðåäïîëîæèëè, ÷òî â ðåàëèçàöèè ìåõàíèçìà äåéñòâèÿ ìåòîäà îñíîâíàÿ ðîëü ïðèíàäëåæèò øâàííîâñêèì êëåòêàì. Ïîêàçàíî, ÷òî ïîâðåæäåíèå àêòèâèðóåò ïðîëèôåðàöèþ ýòèõ êëåòîê, ïî íèì äâèæåòñÿ ðîñòîâîé êîíóñ àêñîíà, â ðåçóëüòàòå ÷åãî ïðîèñõîäèò âîññòàíîâëåíèå ñòðóêòóðû è ôóíêöèè íåðâà, ÷òî âûðàæàåòÿ â ïîÿâëåíèè ýðåêöèè è ñïîñîáíîñòè ê ñîâîêóïëåíèþ [4]. Äàííóþ òåõíîëîãèþ, ïî ìíåíèþ àâòîðîâ, íåëüçÿ èñïîëüçîâàòü äëÿ ïðîòÿæåííûõ äåôåêòîâ. Âîçìîæíûì ðåøåíèåì ïðîáëåìû ìîãëî áû ñòàòü èñïîëüçîâàíèå øâàíîâñêèõ êëåòîê, íàíåñåííûõ âíóòðü òðóáêè èç áèîñîâìåñòèìîãî ìàòåðèàëà, ÷òî îáåñïå÷èâàëî áû íåïðåðûâíûé ðîñò àêñîíà (âíå çàâèñèìîñòè îò ñêîðîñòè ïðîëèôåðàöèè ýòèõ êëåòîê) ñî ñòîðîíû ïîâðåæäåííîãî íåðâíîãî ñòâîëà.  æóðíàëå Tissue Engineering îïóáëèêîâàíî èññëåäîâàíèå, ïîêàçûâàþùåå âîçìîæíîñòü çàìåùåíèÿ ïðîòÿæåííîãî ó÷àñòêà íåðâíîãî ñòâîëà áåñêëåòî÷íûìè ìàòðèöàìè ñ íàíåñåííûìè íà íèõ àóòîãåííûìè øâàííîâñêèìè êëåòêàìè. ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ: 1. Ahmed M.R., Vairamuthu S., Shafiuzama M. åt al. Microwave irradiated collagen tubes as a better matrix for peripheral nerve regeneration. Brain Res. 2005; 1046: 55-67. 2. Rutkowski G.E., Miller C.A., Jeftinija S., Mallapragada S.K. Synergistic effects of micropatterned biodegradable conduits and Schwann cells on sciatic nerve regeneration. J. Neural Eng. 2004; 1: 151-7. 3. Bryan D.J., Tang J.B., Doherty S.A. åt al. Enhanced peripheral nerve Ó êðûñ çàáèðàëè àóòîãåííûé ìàòåðèàë: øâàííîâñêèå êëåòêè èç ïàðàâåðòåáðàëüíûõ ãàíãëèåâ è ó÷àñòîê ïðÿìîé ìûøöû æèâîòà. Îäíîâðåìåííî ïðîèçâîäèëè ðåçåêöèþ ñåäàëèùíîãî íåðâà íà ïðîòÿæåíèè 2 ñì. Èç ãàíãëèåâ âûäåëÿëè è ïåðåâîäèëè â êóëüòóðó øâàííîâñêèå êëåòêè, àóòîìûøöà áûëà äåöåëëþëèðîâàíà êðèîäåñòðóêöèåé èëè õèìè÷åñêèì ñïîñîáîì. Íà äåöåëëþëèðîâàííûå ìàòðèöû íàíîñèëè øâàííîâñêèå êëåòêè, è êîíñòðóêöèÿ êóëüòèâèðîâàëàñü åùå â òå÷åíèå 5 äíåé. Çàòåì êîíñòðóêöèè òðàíñïëàíòèðîâàëèñü â çîíó ñôîðìèðîâàííîãî äåôåêòà ñåäàëèùíîãî íåðâà, íàêëàäûâàëè àíàñòîìîç «êîíåö â êîíåö» ñ èñïîëüçîâíèåì ìèêðîõèðóðãèè.  êà÷åñòâå êîíòðîëÿ ïðîèçâîäèëàñü àóòîòðàíñïëàíòàöèÿ ôðàãìåíòà ñåäàëèùíîãî íåðâà, âçÿòîãî ñ ïðîòèâîïîëîæíîé ñòîðîíû ó êîíòðîëüíîé ãðóïïû êðûñ.  êîíòðîëüíîé ãðóïïå ðåãåíåðàöèþ íåðâíîãî ñòâîëà íàáëþäàëè ó 6 êðûñ èç 7 (ó îäíîé êðûñû àêñîíû â íåðâå íàéäåíû íå áûëè, ÷òî ãîâîðèò î ãèáåëè òðàíñïëàíòàòà).  ãðóïïå ñ òðàíñïëàíòàöèåé êîíñòðóêöèè èç øâàííîâñêèõ êëåòîê è âíåêëåòî÷íîé ìàòðèöû, äåöåëëþëèðîâàííîé êðèîäåñòðóêöèåé, ðåãåíåðàöèÿ íåðâà ïðîèçîøëà ó 4 êðûñ èç 7.  ãðóïïå ñ õèìè÷åñêîé äåöåëëþëÿöèåé ðåãåíåðàöèÿ íå ïðîèçîøëà äàæå ñïóñòÿ 12 íåäåëü, à êîíñòðóêöèÿ â çíà÷èòåëüíîé ìåðå äåãðàäèðîâàëà. Îöåíêà ðåçóëüòàòà îñíîâûâàëàñü íà ãèñòîëîãè÷åñêîì èññëåäîâàíèè òðàíñïëàíòàòîâ.  ãðóïïå ñ êîìáèíèðîâàííûì òðàíñïëàíòàòîì (àóòîêëåòêè + ìàòðèöà) ðîñò àêñîíîâ è èõ êîëè÷åñòâî áûëè ñíèæåíû ïî ñðàâíåíèþ ñ àóòîíåðâîì (êîíòðîëü). Ïðîðàñòàíèå ñîñóäèñòîé ñåòè â ðåãåíåðèðóåìûé íåðâíûé ñòâîë ïðîèñõîäèëî, â îñíîâíîì, ñî ñòîðîíû íåïîâðåæäåííîãî ó÷àñòêà íåðâà. Ôóíêöèÿ íåðâà îïðåäåëÿëàñü òåïëîâîé è áîëåâîé ÷óâñòâèòåëüíîñòüþ.  ãðóïïå êîíòðîëÿ îíà áûëà íîðìàëüíîé, â ãðóïïàõ ñ êîìáèíèðîâàííûì òðàíñïëàíòàòîì - áûëà ñíèæåíà (êðèîäåöåëëþëèðîâàííàÿ ìàòðèöà + êëåòêè) èëè îòñóòñòâîâàëà (õèìèîäåöåëëþëèðîâàííàÿ ìàòðèöà + êëåòêè). Òàêèì îáðàçîì, äàííîå èññëåäîâàíèå ïðîäåìîíñòðèðîâàëî âîçìîæíîñòü èñïîëüçîâàíèÿ áåñêëåòî÷íîé ìàòðèöû ñ íàíåñåííûìè íà íåå øâàííîâñêèìè êëåòêàìè äëÿ ðåãåíåðàöèè íåðâíîãî ñòâîëà è âîññòàíîâëåíèÿ åãî ïðîòÿæ¸ííûõ äåôåêòîâ. Íåóäà÷à ñ áåñêëåòî÷íîé ìàòðèöåé, ïîëó÷åííîé õèìè÷åñêèì ìåòîäîì, âîçìîæíî, ñâÿçàíà ñ íåäîñòàòî÷íîé îòìûâêîé îáðàçöîâ îò ðåàãåíòîâ, ïîñêîëüêó ïðîòîêîë ïîçâîëÿåò ðàçðóøèòü êëåòêè, óäàëèòü ôðàãìåíòû ìåìáðàí è ðàçðóøèòü ìîëåêóëû ÄÍÊ, íå ïîâðåæäàÿ áåëêè âíåêëåòî÷íîãî ìàòðèêñà. Ýôôåêòèâíîñòü òàêîãî ñïîñîáà îáðàáîòêè òêàíè áûëà ïîêàçàíà â ýêñïåðèìåíòàëüíûõ ðàáîòàõ [5]. Òåì íå ìåíåå, äàííàÿ òåõíîëîãèÿ ïîñëå èçó÷åíèÿ âñåõ íåäîñòàòêîâ è äîðàáîòêè ìîæåò ïîêàçàòü õîðîøèå ðåçóëüòàòû â ïðåêëèíè÷åñêèõ èññëåäîâàíèÿõ, à â äàëüíåéøåì - â êëèíèêå äëÿ âîññòàíîâëåíèÿ ïðîòÿæåííûõ ó÷àñòêîâ íåðâîâ. regeneration through a poled bioresorbable poly(lactic-co-glycolic acid) guidance channel. J. Neural. Eng. 2004; 1: 91-8. 4. Hisasue S., Kato R., Sato Y. åt al. Cavernous nerve reconstruction with a biodegradable conduit graft and collagen sponge in the rat. J. Urol. 2005; 173: 286-91. 5. Schultheiss D., Gabouev A.I., Cebotari S. et al. Biological vascularized matrix for bladder tissue engineering: matrix preparation, reseeding technique and shortterm implantation in a porcine model. J. Urol. 2005; 173: 276-80. Ïîäãîòîâèë À.Â. Âîëêîâ Ïî ìàòåðèàëàì Tissue Eng. 2005; 11; 7-8: 1004-14 Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 1 (3), 2006