Современная генная терапия

реклама
Федеральное государственное учреждение
"Федеральный медицинский биофизический центр имени А.И.Бурназяна"
Р.В. Деев
14 сентября 2011
Москва
Генная терапия – вид терапии
заболевания осуществляемый путем
переноса гена(ов)
Преимущество генной
терапии заключается в
том, что она
направлена на лечение
или удаление причин
заболевания, в то время
как большинство
лекарств излечивает
лишь симптомы
заболевания
Первые клинические исследования по переносу
генов были начаты в 1990 г
На настоящий момент существует более
2304 (www.clinicatrials.gov) Протоколов и
более 8000 пациентов прошли курс геннотерапевтического воздействия. Первые
испытания были направлены на
доказательство безопасности, в
настоящий момент совмещается I и II
фазы испытаний
На сегодняшний день -1703 испытания.
На 2010 год – 1669 испытаний.
Wiley Interscience Gene Therapy Trials Worldwide
N=89
N=114
N=76
N=78
Соотношение зарегистрированных клинических
испытаний генной терапии разных фаз.
По оси ординат – относительное число клинических испытаний (проценты), по оси абсцисс – дата начала клинических испытаний (годы).
Числа в столбцах – абсолютное число клинических испытаний данной фазы (Wiley Interscience Gene Therapy Trials Worldwide).
Вирусные
векторы
Невирусные
векторы
Критерии
+
Безопасность
-
+
Эффективность
+
-
-
Простота
использования
+
+
Восприятие
обществом
-
оценки
Стоимость
Генная терапия Ex Vivo
Доставить ген
в культуру клеток
Выделить
клетки
Трансплантация клеток
с геном в организм
Генная терапия In Vivo
Аэрозольно
в легкие
Прямое введение
N= 858
N=319
N=379
Заболевание
Ген
Фаза на 2010 год
Дефицит липопротеин липазы
Амавроз Лебера
X-SCID
Муковисцидоз
Дефицит альфа-1-антитрипсина
ADA-SCID
Миодистрофия Дюшенна
Серповидноклеточная анемия
Синдром Вискотта-Ольдрича
Гемофилия B
Пузырчатый эпидермолиз
Болезнь Помпе
Суставной пузырчатый эпидермолиз
Болезнь Гоше
Хронический грануламатоз
LPL
RPE65
ILRγ
CFTR
A1AT
ADA
Dystrophin
Hb
WASp
FIX
Коллаген VIIA1
Alpha-Glucosidase
LAM5β3
Glucocerebrosidase
CYBA; CYBB
III
III
II/III
IIb
II
II
II
I/II
I/II
I/II
I/II
I/II
I/II
I/II
I
Опоясывающая миодистрофия конечностей (Миодистрофия Эрба)
SCGG
I
Синдром Херлера
Beta-Glucuronidase
I
Опоясывающая миодистрофия конечностей
Анемия Фанкони
Late infantile neuronal ceroid lipofuscinosis
Семейный полипозный аденоматоз
Гемофилия А
Болезнь Кэнэвэн
Семейная гиперхолестеролемия
Миодистрофия Бекера
Дефицит орнитин-транскарбамилазы
Синдром Хантера
SCGA
FANCA
CLN2
βСatenin
FVIII
ASPA
ApoB; LDLR
Dystrophin
OTC
I2S
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
N=116
Амавроз Лебера.
Аденоассоциированный вирус, несущий кДНК гена RPE65.
Children’s Hospital of Pennsylvania. 2011-2017 годы.
Заболевание связано с дефектом гена RPE65 (Retinal
Pigment Epithelium-specific protein 65kDa), вследствие
которого происходит постепенное отмирание
светочувствительных элементов сетчатки, ведущее к
слепоте.
Частота 1/81000.
Дефицит липопротеиновой липазы.
Аденоассоциированный вирус, несущий кДНК гена LPLD.
Glybera™, Amsterdam Molecular Therapeutics. 2007-2013 годы.
Заболевание связано с дефектом гена липопротеинлипазы - фермента,
регулирующего уровень липидов в крови, вследствие чего развивается
гиперлипопротеинемия.
Встречается очень редко.
N=593
Карцинома
Аденовирус, несущий ген p53.
Gendicin®, Shenzhen SiBiono GeneTech Co.,Ltd
Лейкемия
Ретровирус, несущий ген тимидинкиназы
вируса герпеса.
TK, MolMed S.p.a. 2014 год
Глиома
Аденовирус, несущий ген
тимидинкиназы вируса герпеса.
CerePro®, Ark Therapeutics.
Рак простаты
Аденовирус, несущий ген тимидинкиназы вируса
герпеса.
Немелкоклеточный рак легких
Henry Ford Health System.
ДНК-вакцина
Аденовирус, несущий ген тимидинкиназы вируса MVA, несущий гены антигена MUC1 и
IL2
герпеса.
TG4010, Transgene
ProstAtak™, Advantagene. III фаза испытаний в
процессе подготовки.
Рак кожи
ДНК-вакцина
Меланома и карцинома
Плазмида, экспрессирующая HLA-B7
HSV, несущий ген GM-CSF
and β2 микроглобулин.
OncoVex (GM-CSF), BioVex Inc.
Allovectin-7®, Vical
Карцинома
Аденовирус, несущий антисенс19 препаратов на II фазе
последовательность гена TGFβ-2.
Lucanix®, NovaRx. Сентябрь, 2011.
N=128
Инфаркт и стенокардия
Аденовирус, несущий ген FGF-4.
Generx, Cardium Therapeutics
Аденовирус, несущий ген SERCA2a
MYDICAR®, Celladon
Периферическая артериальная болезнь
Плазмида, содержащая ген FGF-1.
NV1FGF, Vical совместно с sanofi-aventis. Испытания
завершились неудачей.
Плазмида, содержащая ген HGF (Hepatocyte Growth
Factor).
Collategene, Anges. III фаза готовится.
N=38
Вирусные
Невирусные
Ретровирусы
Генное ружье
Аденовирусы
Гидроудар
Аденоассоциированные
вирусы
Электропорация
HSV
MVA
Ультразвук
Прямое введение
плазмидной ДНК
N=341
N=908
N=431
Геном 30-35 килобаз:
• Ранние гены E1-E4
• Поздние гены L1-L5
I поколение
II поколение
III поколение
Геном аденовируса
Персистируют в ядре в форме эписомы
Высокая эффективность
Низкая патогенность
VS Иммуногенность
Мутационная безопасность
Иммуногенность аденовирусов нашла применение в терапии с
применением фактически не изменённого аденовируса
Нозология: Head and Neck Cancer
Препарат: Onyx-15
Фаза: IV
• Сопровождение генной терапии приемом
имууносупрессирующих препаратов
• Использование серии векторов на основе вирусов
различных серотипов
• Использование векторов на основе аденовирусов
других видов (Pan sp., Equs sp., Vacca sp.)
Jesse Gelsinger
• Маскировки иммуннодоминантных эпитопов
вирусного капсида
• Блокировка иммунодоминантных эпитопов
антителами
• Conditionally Replicating Adenoviruses (CRA)
Иммуногенность аденовирусов нашла применение в терапии с
применением фактически не изменённого аденовируса
Нозология: Head and Neck Cancer
Препарат: Onyx-15
Фаза: IV
По оси абсцисс – количество работ с использованием аденовирусных векторов. По оси ординат – год начала испытаний.
•Cerepro® Ark Therapeutics. Препарат предназначен для лечения глиомы.
•Trinam® Ark Therapeutics. Препарат предназначен для лечения почечной гиперплазии интимы.
Предположительная дата завершения испытаний – Сентябрь 2011 года.
•Generx® Cardium Therapeutics. Препарат предназначен для лечения стенокардии и профилактики
инфарктов.
•mutTKSR39rep-ADP Henry Ford Health System. Препарат предназначен для лечения рака
простаты. В настоящее время проходит II/III фаза клинических испытаний.
•INGN201 Introgen Corporation. Препарат предназначен для лечения плоскоклеточной карциномы.
•SCH58500 McGill Centre for Translational Research in Cancer. Препарат предназначен для лечения
рака яичников.
•Gendicine® Shenzhen SiBiono GeneTech. Препарат для лечения плоскоклеточной
карциномы.
Геном 8-11 килобаз:
gag, pol, env
Встраиваются в
геном
клетки-хозяина
Инсерционный
мутагенез
VS
Высокая эффективность и селективность
трансдукции
Долгосрочная и стабильная экспрессия
трансгена
Низкая иммуногенность
Marina Cavazzano-Calvo
Scheller and Krebsbach, 2009
III фаза: TK от MolMed/Takara Bioscience для лечения лейкемии
Геном 177 килобаз
Персистируют в форме
эписомы
Большой размер
терапевтической кассеты
Низкая патогенность
VS Короткое время
Низкая иммунногенность
Мутационная безопасность
экспресии
трансгена
Геном 4 килобаз
Эписома/интеграция
Xie Q et al. PNAS 2002;99:10405-10410
Высокая эффективность
Низкая патогенность
Низкая иммунногенность
Мутационная безопасность
VS
Небольшой размер
терапевтической
кассеты
Специфический сайт встраивания
III фаза
• Glybera® Amsterdam Molecular Therapeutics – дефицит липопротеиновой липазы
• RPE65 Children’s Hospital of Pennsylvania – амавроз Лебера
Высокая эффективность
Большой объем
терапевтической кассеты
VS
Геном 150 килобаз
Высокая патогенность
Xie Q et al. PNAS 2002;99:10405-10410
В среднем утверждается 4-5 протоколов клинических испытаний с
использованием HSV в год
Препараты на III фазе клинических испытаний:
• HSV1716 University of Glasgow. Препарат создан для лечения
глибластомы
• OncoVEXGM-CSF BioVex. Препарат направлен на лечение
меланомы и плоскоклеточной карциномы.
III фаза:
Lucanix® от NovaRx- плазмида, несущая
антисмысловую последовательность к гену TGFβ
для лечения рака
NV1FGF от Vical (совместно с Sanofi-Aventis) –
плазмида, содержащая ген FGF-1 для лечения
периферической болезни сосудов
•Генное ружье
•Гидроудар
•Ультразвук
•Электропорация
(Inovio Pharmaceuticals)
• Липоплексы
• Полиплексы
• Липополиплексы
Нозология:
• Наибольшее число клинических испытаний стартовало в 2008
году.
• Происходит снижение числа клинических испытаний генной
терапии онкологических (основной используемый вектор –
аденовирусы) и сердечно-сосудистых заболеваний (основной
вектор плазмиды).
•Число клинических испытаний генной терапии инфекционных
заболеваний увеличивается. Основным вектором является
MVA.
•Число клинических испытаний генной терапии моногенных
заболеваний стабильно. Основным вектором являются
ретровирусы.
• Происходит расширение спектра патологий, для которых
разрабатывается генная терапия
Векторы:
• Наиболее популярными векторами на данный момент
являются аденовирусы и плазмидная ДНК.
• Основную роль при выборе вектора играют размер
терапевтической кассеты и безопасность использования
• Происходит постепенный отход от использования
аденовирусных векторов в качестве носителей, использование
плазмид напротив увеличивается
• Использование ретровирусов, после падения их популярности
в качестве носителей в 2003 году, носит стабильный характер.
«Кузница природы», иллюстрация к «Роману о розе», XIV в
Спасибо за внимание!
Скачать