Закопайло Виктория Александровна ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНЕТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ, ВЛИЯЮЩИХ НА СОДЕРЖАНИЕ СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК

РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ
На правах рукописи
Закопайло Виктория Александровна
ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНЕТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ,
ВЛИЯЮЩИХ НА СОДЕРЖАНИЕ СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК
В МОЛОКЕ КОРОВ
06.02.07 - Разведение, селекция и генетика
сельскохозяйственных животных
ДИССЕРТАЦИЯ
на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Научный руководитель: доктор биологических наук Б.С. Иолчиев
Москва – 2011
1
СОДЕРЖАНИЕ
Стр.
ВВЕДЕНИЕ
3
1. Обзор литературы
7
1.1. Генетические факторы, влияющие на молочную продуктивность
и состав молока
1.2.
Состав соматических клеток молока
7
8
1.2.1. Содержание соматических клеток в молоке коров
10
1.2.2. Мировые нормы содержания соматических клеток в молоке
10
1.2.3. Связь между количественным содержанием соматических
клеток в молоке и молочной продуктивностью коров
1.2.4. Влияние количества соматических клеток на физикохимические показатели и органолептические свойства молока
1.2.5. Влияние заболевания коров маститом на качество молочной
продукции
1.2.6. Влияние количества соматических клеток на производство
сыра
1.2.7. Влияние молока c повышенным содержанием соматических
клеток на здоровье человека
1.3.Факторы, влияющие на содержание соматических клеток в
молоке коров
1.3.1. Паратипические факторы, влияющие на число соматических
клеток в молоке
1.3.2. Генетические факторы, влияющие на содержание
соматических клеток в молоке коров
12
13
14
16
17
18
18
23
1.3.3. Влияние породы
23
1.3.4. Влияние генеалогии на число соматических клеток в молоке
25
2
1.4. Полиморфизм белков молока крупного рогатого скота
27
1.4.1. Взаимосвязь полиморфизма белков с молочной
34
продуктивностью и составом молока
2. Собственные исследования
39
2.1. Материал и методы исследований
39
2.2. Результаты исследований
48
2.2.1. Характеристика молочной продуктивности коров дочерей
48
разных быков-производителей.
2.2.2.
Взаимосвязь
между
количественным
содержанием
соматических клеток в молоке коров и удоем
2.2.3.
Содержание
соматических
клеток
в
молоке
коров
в
зависимости от сезона года
2.2.4. Взаимосвязь между генеалогической принадлежностью коров
и содержанием соматических клеток в их молоке
2.2.5. Влияние быков-производителей на содержание соматических
клеток в молоке дочерей
2.3. Полиморфные системы белков молока
2.3.1.Взаимосвязь
между
молочной
52
55
56
57
61
продуктивностью
полиморфными системами белков молока
2.3.2. Взаимосвязь между содержанием соматических клеток
в молоке c вариантами бета-лактоглобулина у коров
и
70
74
ОБСУЖДЕНИЕ
77
ВЫВОДЫ
81
Сведения о практическом использовании научных результатов
82
Предложения производству
82
Список литературы
83
3
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Молоко и молочные продукты занимают одно из
ведущих мест в обеспечении людей продуктами питания. Более
25% протеина, потребляемого населением земного шара, приходится на долю
белка молочного происхождения. Молоко, которое используется как продукт
питания, должно соответствовать санитарно–гигиеническим требованиям, а
молоко, которое предназначено для переработки на различные молочные
продукты, кроме санитарно–гигиенических требований должно соответствовать
и определенным технологическим требованиям [Иолчиев Б.С. и др., 31,
Смирнов А.А.,79].
Показатели, которые характеризуют технологические свойства молока, в
значительной степени обусловлены генетическими факторами [Марзанов Н.С.,
и др., 53]. Для управления селекционными процессами по показателям,
характеризующим состав молока, его технологические свойства, необходимо
наряду с фенотипическими факторами изучать и генетические факторы.
Качество молока (чистота, бактериальная обсемененность, число соматических
клеток, содержание белка и т.д.) является одним из основных факторов,
влияющих на рентабельность отрасли молочного скотоводства.
Одним из
гигиенические
основных
и
показателей,
технологические
характеризующих
свойства
молока,
санитарно
является
–
число
соматических клеток, содержащихся в 1 мл молока. В странах с развитой
молочной
промышленностью
проводится
строгий
мониторинг
числа
соматических клеток в 1 мл молока. При высоком содержании соматических
клеток изменяются химический состав молока, его физические и биологические
свойства, а также нарушаются технологические процессы переработки молока
вплоть до его непригодности для производства молочных продуктов, например
сыра [Сычева О.В., 79]. С увеличением уровня содержания соматических клеток
4
в молоке наблюдается и рост заболеваемости животных маститом [Белкин Б.Л.,
6].
Изучение
генетических
факторов,
влияющих
на
молочную
продуктивность и состав молока, является очень актуальным, особенно при
крупномасштабной селекции. При такой селекции семенем одного быка
осеменяются сотни, даже тысячи коров, следовательно, влияние быковпроизводителей на результаты селекции очень велико.
Цель и задачи исследований. Цель работы - изучение генетических
факторов, влияющих на молочную продуктивность коров и состав молока. Для
достижения цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Изучить молочную продуктивность коров в течение лактации;
2. Изучить физико-химический состав и свойства молока коров;
3. Определить полиморфизм белков молока и провести популяционногенетический анализ полиморфных систем;
4. Провести анализ взаимосвязи между полиморфными системами молока с
молочной продуктивностью и составом молока;
5. Изучить взаимосвязь между количеством соматических клеток в молоке с
молочной продуктивностью коров;
6. Определить влияние генотипа отца на содержание соматических клеток в
молоке дочерей;
7. Провести анализ взаимосвязи между генотипом по локусу -Lg и
содержанием соматических клеток в молоке.
Научная
новизна,
практическая
значимость
работы.
Впервые
проведен комплексный анализ влияния генетических факторов на молочную
продуктивность и состав молока. Изучено генетическое влияние быковпроизводителей на содержание соматических клеток в молоке их дочерей.
Выполнены исследования по изучению взаимосвязи генотипа животных по
полиморфным системам белков молока, и содержанию соматических клеток в
5
молоке.
Проведена
ранжировка
быков-производителей
по
молочной
продуктивности дочерей и содержанию соматических клеток в их молоке.
Теоретическая и практическая значимость работы. Установлено
влияние быков-производителей на удой, содержание жира и белка в молоке их
дочерей, оно составляет 22%, 38% и 31% соответственно. Степень влияния
линейной принадлежности животных выражена в меньшей степени по удою, и
составляет 19%, а по содержанию жира в молоке - 20%. Наименьшее число
соматических клеток обнаружено в молоке коров со среднесуточным удоем 2025кг,
наибольшее
количественного
–
при
удое
содержание
10-15кг.
соматических
Проведен
анализ
динамики
клеток
молоке
коров
в
в
зависимости от сезона года. Наибольшее число соматических клеток в молоке
наблюдалось в апреле и составляло 429 тыс. в 1 мл молока. Низкий уровень
соматических клеток в молоке коров отмечали в летне-осенний период, от 98
тыс. до 210 тыс. в 1 мл молока. Однофакторный дисперсионный анализ показал,
что влияние отца, на содержание соматических клеток в молоке дочерей
составляет 14,3%. Дана оценка зависимости технологических свойств молока от
генетического полиморфизма его белков. В молоке коров с -CnВВ содержится
на 0,42 % больше белка, чем в молоке коров с -CnАА. От коров с -CnАВ за
законченную лактацию получено на 103 кг молока больше, чем от животных с
-CnАА и на 423 кг, чем от -CnВВ. В молоке коров с β-Lg ВВ на 47 % меньше
содержится соматических клеток, чем в среднем по стаду и на 181,17 тыс., чем у
коров с β-Lg АА. Предрасположенность к маститу у коров обусловлена их
генеалогической принадлежностью.
Положения, выносимые на защиту. Выявление генетических факторов
влияющих
на
молочную
продуктивность
и
состав
молока
у
коров.
Популяционно-генетический анализ полиморфных систем белков молока.
Оценка взаимосвязи между полиморфными системами молочных белков и
6
составом молока, а также молочной продуктивностью. Учет числа соматических
клеток в молоке дочерей при оценке быков-производителей.
Апробация работы. Результаты исследований были доложены и
обсуждены на научной конференции аграрного факультета РУДН «Концепции,
практика и перспективы современного земледелия» [Москва, 2003]; на научнопрактической конференции аграрного факультета РУДН «Агробиологические
проблемы современного сельскохозяйственного производства» [Москва, 2004];
на международной научно-практической конференции ВИЖа «Прошлое,
настоящее
и
будущее
зоотехнической
науки»
[Дубровицы,2004];
на
международной научно-практической конференции аграрного факультета
РУДН «Инновационные процессы в АПК» [Москва, 2010].
Публикации материалов. По материалам диссертации опубликовано 7
научных работ, в том числе 1 в издании, рекомендованном ВАК РФ (Вестник
Российского
университета
дружбы
народов.
Серия
«Агрономия
и
животноводство». – 2009. - №2).
Объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, материалов
и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения,
выводов, практических предложений, списка использованной литературы.
Материал изложен на 104 страницах машинописного текста, содержит 21
таблицу и 12 рисунков. Список литературы включает 185 источников, в том
числе 91 на иностранных языках.
7
1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Генетические факторы, влияющие на молочную
продуктивность и состав молока
Молоко и молочные продукты занимают важное место в сельском
хозяйстве. В настоящее время, развитие молочного скотоводства в мире
характеризуется
интенсификацией
селекционных
процессов,
с
целью
повышения рентабельности производства молока за счет использования
современных технологий, методов племенной оценки животных и программ
разведения [Стрекозов Н.И., Легошин Г.П., 76].
Эффективность селекции по признакам, характеризующим молочную
продуктивность, зависит от
доли влияния генетических и паратипических
факторов на изменчивость того или иного признака. Из селекционных
признаков молочного скота, удой является наиболее зависимым от внешних
факторов признаком, и имеет высокую степень изменчивости. Содержание жира
и белка в молоке в большей степени сопряжено с генетическими факторами.
По данным отечественных и зарубежных ученых показатель удоя
на 25 %
обусловлен генетическими факторами и на 75% паратипическими, из которых
35% составляют условия кормления и содержания, 25% - состояние здоровья
животного и 15 % - возраст и сезон лактации. С повышением уровня удоя
влияние паратипических факторов возрастает, а генетических – снижается
[Климова Е.Н., 41, Андреев Д.П.,2].
В среднем, около 80% различий между стадами обусловлено окружающей
средой и 20%-генетическими факторами [Кондратьева Т.Н., 44].
Выраженность признаков зависит от двух факторов: наследственности и
окружающей среды. Наследуемость составляет 100%, если выраженность
признака варьирует исключительно в зависимости от наследственности и 0 %,
если она целиком обусловлена внешними факторами. Наследуемость составляет
8
около 30%, а показатели состава молока такие как содержание жира, белка,
сухого вещества 50% [Савельева Е.Ю., 71].
По сообщению Москаленко Л. П., [56], из генетических факторов,
достоверное влияние на фенотипическую изменчивость признаков оказывает
фактор «линия» и кровность по голштинской породе.
Автор указывает на
большую вариабельность коэффициентов наследуемости в исследованных им
стадах, например, этот показатель по удою варьирует от 5,8 до 40%, по
количеству молочного жира - 26,2-73,6%, и по количеству молочного белка 4,2-36,8%. Поэтому, по мнению автора, для достижения высоких результатов
селекции по данным показателям, необходимо использовать индивидуальный
отбор, а не массовую селекцию.
Лещук Г.П., [49] отмечает, что сила влияния на показатели удоя дочерей
быков-производителей зависит от линейной принадлежности этих быков. По
данным автора, сила влияния на удой дочерей быков- производителей линии
Монтвик Чифтейна составил 20% , а быков линии Вис Айдиала - 33%. Сила
влияния таких паратипических факторов как тип телосложения составила 32%.
Результаты исследования Шендакова А.И. [89] показывают, что в
реализации генетического потенциала по удою коров, большой вклад вносит
линейная принадлежность животных. По данным автора, вклад дедов со
стороны отца на молочную продуктивность коров составил 64%, а со стороны
матерей 14%, а матерей и матерей отцов 12% и 10% соответственно.
1.2. Состав соматических клеток молока
Клетки соматические – все клетки организма, за исключением половых
[Бакулов И.А., Таршис М.Г., 5]. Соматические клетки являются постоянным
составным элементом молока и представлены:
1. эпителиальными клетками слизистой оболочки молочных желез, альвеол и
мелких молочных ходов, представляющих собой крупные полигональные
9
или округлые клетки (размером от 12 до 100 мкм и более) обычно в виде
групп или пластов, реже в виде единичных клеток;
2. дегенерированными эпителиальными клетками неопределенной формы
разрушенной структуры;
3. форменными элементами крови: лейкоцитами (в основном лимфоцитами,
нейтрофилами,
эозинофилами
и
др.)
и
эритроцитами
[Лях В.Я.,
Харитонов В.Д. и др., 50].
При морфологическом анализе состава соматических клеток в молоке
здоровых животных эпителиальные клетки составили 41%, лимфоциты – 23%,
нейтрофильные гранулоциты – 36% [Коротков А.С., 45].
В молоке здоровых коров обычно содержится до 300 тыс. соматических
клеток в 1 мл. Когда вымя инфицировано, число патогенных клеток в молоке
увеличивается, и процентное соотношение клеток изменяется. В молоке от
больных коров количество эпителиальных клеток остается на уровне их
содержания в нормальном молоке. Количество лимфоцитов в молоке
уменьшается и прямо зависит от заболевания коров маститами как с ярка
выраженными клиническими признаками, так и с субклиническими (скрытыми)
маститами [Буткус К.-С., 10; Савельев А.А., Сорокин М.Ю. и др., 70].
Содержание лейкоцитов повышается
до 90%, так как, согласно клеточной
теории воспаления, созданной Мечниковым, лейкоциты начинают процесс
фагоцитоза, усиленно мигрируя в очаг воспаления [Канеев А.З., 36].
В молочной железе также синтезируются антибактериальные вещества –
лизоцимы, лактенины, лактоферон. Их концентрация и активность возрастают с
увеличением числа соматических клеток в молоке, так как эти вещества
являются ответом на проникновение макрофлоры [Дмитриев Н.Г., 21].
10
1.2.1. Содержание соматических клеток в молоке коров
Количество соматических клеток входит в перечень показателей,
подлежащих подтверждению при обязательной сертификации молока и
молочных продуктов.
Постановлением Госстандарта России № 154-ст от 22.05.2003 г. принят
государственный стандарт Российской Федерации ГОСТ Р 52054-2003 «Молоко
натуральное коровье - сырье. Технические условия» с датой введения с 1 января
2004 года. Этим же постановлением с 1 января 2004 года отменено действие на
территории Российской Федерации ГОСТ 13264 - 88 «Молоко коровье.
Требования при закупках». Согласно требованиям нового ГОСТа количество
соматических клеток в 1 мл молока высшего сорта не должно превышать 500
тысяч, I и II сорта – 1000 тысяч.
Этим документом предписывается
периодичность контроля – один раз в 10 дней, место отбора проб –
объединенная проба молока или сливок из каждой партии тары.
В сборном молоке стада допускается до 1 млн. соматических клеток в
1мл молока. Если в сборном молоке содержится от 30 тысяч до 300 тысяч
соматических клеток в 1 мл, то такое стадо считается в отличном состоянии,
если - от 300 тысяч до 500 тысяч - в хорошем состоянии.
1.2.2. Мировые нормы содержания соматических клеток в молоке
В Финляндии молоко соответствует наивысшему сорту Е1 при количестве
соматических клеток до 250 тыс./см3, второму сорту Е2 при количестве
соматических клеток до 400 тыс./см3. В странах ЕС уровень содержания
соматических клеток в молоке составляет для первого сорта от 300 до 400
тыс./cм3 [постановление EC №853/2004 от 29.04.2004] . В Европейском союзе
молоко с числом соматических клеток выше 400 тыс./мл не применимо на
молокозаводы. В Германии, когда эта цифра равна 125 тыс./мл, стадо
оценивается как очень хорошее; при 125 — 250 тыс./мл — хорошее;
11
при 350 тыс./мл — удовлетворительное; при 350—500 тыс./мл — опасное; при
500—750 тыс./мл — неудовлетворительное; при более 750 тыс./мл — плохое.
В Швейцарии, Норвегии, Дании, Австрии стадо считается здоровым при
содержании соматических клеток в молоке до 280 тыс./мл, в Швеции – до 400
тыс./мл, в Болгарии – до 500 тыс./мл [Ковтунова Л.Е., 42]. На Украине молоко
считается высшего сорта с содержанием в нем соматических клеток до 400
тыс./мл, I сорт – до 600 тыс./мл, II сорт – до 800 тыс./мл. [Васильева О.К., 11].
В США существует универсальная система подсчета соматических клеток,
которая называется Калифорнийский маститный тест [Mellenberger R., 146]
(табл.1).
Таблица 1
Калифорнийский маститный тест
Параметры теста Количество соматических клеток (тыс/мл)
отрицательный
0-200
незначительный
200-400
1
400-1200
2
1200-5000
3
>5000
Стадо считается здоровым при показателях до 200 тыс./мл.
Определяется число соматических клеток в разных странах от 1 до 4 раз в
месяц.
12
1.2.3. Связь между количественным содержанием соматических
клеток в молоке и молочной продуктивностью коров
Между показателем количества соматических клеток в молоке коров и
удоем имеется обратно пропорциональная связь: чем выше число соматических
клеток, тем ниже удой. По сообщению
S.Wyatt [185], если количество
соматических клеток не превышает 300 тысяч в 1мл, снижения продуктивности
молока не наблюдается; до 500 тысяч в 1мл - потери молока составляют от 4 до
5%; если количество соматических клеток превышает 750 тысяч в 1мл, потери
молока составляют 12%. По мнению российских ученых, при содержании в
молоке свыше 900 тысяч соматических клеток в 1 мл, при удое 4000 кг потеря
молока равна 600 кг, а при продуктивности 6000 кг – 900 кг. [Методические
рекомендации по контролю числа соматических клеток в молоке, 55; Бакай
Р.Ф., 57]. R. Powell и др. [159] подсчитали суточные потери молока, которые
напрямую зависели от количества соматических клеток (табл. 2).
Таблица 2
Снижение молочной продуктивности
Количество соматических
Потери молока
клеток (тыс/мл.)
(кг. на 1 корову в день)
50
0,0
100
0,7
200
1,4
400
2,0
800
2,7
1600
3,4
13
Ученые Новой Зеландии отмечают, что при уровне в 500 тыс.
соматических клеток в 1мл молока удои падают на 10%, при 1 млн. клеток – на
30%.
По оценкам американских ученых, при содержании в молоке свыше
1млн/мл соматических клеток потери молочной продуктивности могут
составлять 14,1% или 0,39 кг за дойку от одной четверти вымени, по другим
данным – 548,1 кг за лактацию [Мiller R. N., 152].
1.2.4. Влияние количества соматических клеток на физикохимические показатели и органолептические свойства молока
В норме цвет молока белый с желтым оттенком; консистенция слегка
вязкая; вкус приятный, слегка сладковато-солоноватый; слабый приятный запах.
Плотность молока составляет 1032,6 кг/м3 при t=50С, 1028,7 кг/м3 при t=200С,
pH=6.6-6.8 [Бредихин С. А., 9].
Увеличение соматических клеток в молоке свыше 1 млн. в 1 мл приводит
к следующим изменениям:
 Органолептические свойства: Цвет со слабо-синим или слабо-желтым
оттенком. Консистенция водянистая, часто хлопьевидная, слизистотворожистая, иногда пенящаяся. Могут присутствовать следы крови,
гноя. Запах неприятный, вкус слабосолено-горький, прогорклый;
 Физико-химические показатели: Снижение содержания жира с 3,8 до
2,2%, лактозы с 4,6 до 3,6%. Повышение содержания белка с 3,2 до
6,0%, хлора со 120 до 300 мг%. Уменьшение плотности до 1025 кг/м3,
кислотности с 16…20 до 5…130Т., pH>6.8 [Шидловская В.П., 91].
Немецкие ученые отмечают, что при увеличении числа соматических
клеток, в молоке повышается содержание жирных кислот, белка, в т.ч.
альбуминов и иммуноглобулинов, каппа–казеина, лактоферрина, Na, Cl
14
и усиливается
дегидрогеназы,
активность
ряда
ферментов,
в т.ч.
аспартатаминотрансферазы,
каталазы, лизоцима,
карбоксилэстеразы,
арилсульфатазы, щелочной фосфатазы. Содержание s, -казеина,
–лактоглобулина, Ca, Mg, P, ксантиноксидазы снижается [Heeschen W., 126].
По данным многих авторов, отмечается положительная связь между
количеством соматических клеток в молоке и содержанием в нем белка и жира.
Отрицательная корреляция отмечена между удоем и соматическими клетками, а
также содержанием лактозы. Если количество соматических клеток свыше 900
тысяч на 1мл молока, то содержание общего белка в молоке повышается на
0,09% за счет увеличения содержания альбумина и глобулина. Наблюдается
закономерное снижение содержания лактозы на 0,08%. Содержание основных
фракций казеина понижается с 2,54% до 2,25% и ниже [Сычева О.В., 79; Колчев
А.Г., 43].
Б.Л. Белкин и др. [6] считают, что повышение иммуноглобулинов в
сыворотке молока коров свидетельствует как о продолжении развития
воспалительного процесса в молочной железе, так и об активизации в организме
процессов иммунной защиты.
Ввиду выше перечисленных изменений ухудшаются технологические
свойства молока. Оно плохо свертывается сычужным ферментом, в нем хуже
размножаются молочнокислые микроорганизмы. При первичной обработке и
хранении молока может произойти гидролиз или окисление его компонентов.
Все это приводит к увеличению расхода сырья, снижению качества продукта.
1.2.5.Влияние заболевания коров маститом на качество
молочной продукции
Высокосортное молоко должно содержать мало соматических клеток.
Принято считать, что повышение количества соматических клеток в молоке
15
связано с воспалительным процессом тканей молочной железы и используется
для диагностики маститов.
Мастит - это воспаление вымени коровы, сложное и многофакторное
заболевание. Это реакция молокопроизводящих тканей на повреждения,
наиболее часто вызываемые микроорганизмами. Количество соматических
клеток неинфицированного вымени в среднем составляет 350 тыс. клеток
на 1 мл.
По данным Всемирной организации ветеринарного здравоохранения,
мастит вызывает значительно больший ущерб, чем все болезни коров вместе
взятые. Во всех странах мира ежегодно переболевает от 15 до 50% и более
поголовья. При поражении одной четверти вымени удои снижаются на 20%, а
двух четвертей на 40%. В дальнейшем у таких коров нередко наблюдается
гипогалактия, т.е. низкая молочная продуктивность вследствие перерождения
паренхимы молочной железы [Рубцов В.И., 68].
Мастит продолжает оставаться одной из самых дорогостоящих болезней
для молочной индустрии. Ущерб наносят выбраковка животных, сокращение
удоев, а также общее снижение качества сырого молока, которое наносит
большой убыток молочной промышленности. Установлено, что даже небольшая
примесь (5-10%) молока от коров со скрытой формой мастита в сборном делает
невозможным
приготовление
из
него
высококачественных
молочных
продуктов.
Исследования многих ученых показали, что большое количество
соматических клеток в молоке связано с изменением физических, химических,
биологических
и производственных
характеристик. Эти воздействия
изменения состава приводят к:
 сокращению выхода сыра из-за низкого содержания казеина в молоке;
 более длительному времени коагуляции продукции сыроварения;
 пониженной температурной устойчивости порошкового молока;
и
16
 сокращению срока годности молочных продуктов;
 появлению осадка в стерилизованном молоке;
 снижению стабильности сгущенного молока;
 риску органолептических дефектов, например, в сливочном масле.
[Сычева О.В., 79; Лях В.Я., Харитонов В.Д. и др., 50].
1.2.6.Влияние количества соматических клеток
на производство сыра
Особенный
интерес,
представляют
неблагоприятные
эффекты
на
производство сыра, так как 30-40% от общего количества молока во многих
традиционно молочных странах используется на изготовление сыров. Если 10%
поставленного коровьего молока имеет число соматических клеток выше 1 млн.
на 1 мл, выход сыра сокращается на 1%. Это большие экономические убытки
для крупных заводов по производству сыра.
Одна из весьма существенных особенностей сыроделия – исключительно
высокие требования к качеству и составу молока, идущего на производство
сыра. Один из самых важных показателей сыропригодности молока –
содержание в нем соматических клеток.
Исследователи макдональдского колледжа Макджиллского университета
установили, что с увеличением содержания соматических клеток в молоке
коров уменьшается содержание жира, белка, сухих веществ и жира в сухом
веществе сыра. Так, при увеличении содержания в молоке соматических клеток
с 100 тыс. до >1млн. в 1 мл содержание жира, белка, сухого вещества и жира в
сухом веществе сыра уменьшилось на 6,8%; 3,6%; 4,9% и 1,5%, а содержание
воды в СОМО и белка в сухом веществе увеличилось на 4,4% и 2,0%.
Увеличение
содержания
соматических
клеток
в
молоке
положительно
коррелировало с потерями белка из молочной сыворотки. В среднем при
17
увеличении содержания соматических клеток до 1 млн. эти потери повышались
на 6,8% [Politis I., 157, 158].
По данным К.Д. Буткуса [10], сгусток молока, содержащего от 228 до 677
тыс. соматических клеток в 1 мл, получается плотный, от 947 тыс. до
1,38 млн. - слабый, дряблой консистенции, сыворотка белая, процессы в сырной
ванне значительно затягиваются, зерно медленнее обрабатывается. Кроме того,
во время созревания сыров разложение молочного сахара, лимонной и
молочной кислот происходило медленнее, а соответственно биохимические и
микробиологические процессы протекали значительно слабее, чем в сырах,
вырабатываемых из молока, содержащего 460 тыс. соматических клеток.
Органолептической
производственных
оценкой
условиях
установлено,
из
молока,
что
сыры,
содержащего
выработанные
более
500
в
тыс.
соматических клеток в 1 мл, получаются низкого качества, непригодными для
реализации, и используются на переработку.
1.2.7. Влияние молока c повышенным содержанием
соматических клеток на здоровье человека
Молоко с повышенным количеством соматических клеток имеет высокую
бактериальную обсемененность и, как правило, содержит стафилококки,
обладающие
повышенной
продуцируют
энтеротоксины,
биологической
которые
активностью.
вызывают
Стафилококки
пищевые
отравления.
Пастеризация или термическая обработка не инактивирует энтеротоксины
[Зеккони А., Кальвинхо Л., Фокс Л., 25].
Наличие больших количеств соматических клеток является косвенным
показателем
высокой
вероятности
содержания
в
молоке
золотистого
стафилококка (Staphylococcus aureus) [Ronda R., Martinez E., 165; Heeschen W.,
126; Савельев А.А., Сорокин М.Ю. и др., 70].
18
В настоящее время описано 13 видов стафилококков, причем девять из
них можно признать патогенными [Гуськова Л.Д., 18]. Источники пищевых
токсикоинфекций
стафилококковой
этиологии
–
животные,
болеющие
обильно
обсеменено
маститом.
При
заболевании
патогенными
коров
маститом
микроорганизмами
молоко
(стрептококками,
эшерихиями,
токсиногенными стафилококками и др.), представляющими опасность для
здоровья людей, особенно детей, а в животноводстве – для молодняка. При
употреблении
такого
молока
возникают
токсикоинфекции,
ангины
и
желудочно-кишечные заболевания [Рубцов В.И., 68].
1.3. Факторы, влияющие на содержание соматических клеток
в молоке коров
Содержание соматических клеток в молоке, как и все количественные
признаки, контролируются генетическими факторами, и
имеет тесную
взаимосвязь с паратипическими факторами.
1.3.1. Паратипические факторы, влияющие на число
соматических клеток в молоке
Повышение уровня соматических клеток в молоке может быть связано со
следующими паратипическими факторами:

Условия содержания животных,

Состав кормов,

Возраст, в котором происходит отёл,

Количество лактаций,

Стадия лактации,

Время года, когда происходит лактация.
19
Самое большое влияние на число соматических клеток в молоке коров, из
выше перечисленных факторов, оказывают условия фермы, на которой
содержатся животные, немаловажное значение имеет и сезон года, а также
месяц лактации.
Наличие сезонных колебаний в динамике содержания соматических
клеток
отмечают большинство авторов. Однако единого мнения по этому
вопросу нет. О.К. Васильева [11]
наблюдала наибольшее количество
соматических клеток в молоке у коров ПЗ «Детскосельский» в весенний период
488 тыс./мл, а наименьшее - зимой 416 тыс./мл. В ПЗ «Петровский» высокое
содержание соматических клеток в молоке наблюдается летом, низкое – в
осенний и зимний период. Меньшее число мастита в осенний и зимний период
можно объяснить тем, что окрепшие животные переходят на стойловое
содержание после активной пастьбы и полноценного летнего кормления.
Вспышку мастита весной вызывают такие неблагоприятные факторы, как
недостаток кормов и ухудшение их качества, отсутствие или нерегулярный
моцион, ослабление общей резистентности организма животных в процессе
длительного стойлового содержания. Высокий уровень заболеваемости коров
маститом в летний период во многом обусловлен неправильным переводом
скота на пастбищное содержание, низким качеством пастбищ, большой
функциональной нагрузкой на вымя.
Исследованиями А.С. Короткова [45] установлена динамика соматических
клеток за год. Было обнаружено, что наибольшее значение показателя числа
соматических клеток в молоке отмечено в летние месяцы, июне – августе. Так, с
июня по август число соматических клеток превысило их содержание в
остальные месяцы в среднем на 83 тыс./мл (табл. 3).
20
Таблица 3
Изменение содержания соматических клеток
в молоке коров в течение года
Месяц
Январь
Февраль
Март
Апрель
Май
Июнь
Июль
Август
Сентябрь
Октябрь
Ноябрь
Декабрь
Число СК (тыс./мл)
106,7±5,7
112,6±5,5
92,2±4,2
94,3±5,2
126,3±7,4
152,8±6,9
199,4±6,8
198,0±7,0
118,2±7,2
80,6±2,1
97,4±5,3
73,9±5,7
Е.Н. Климова [41] отмечала повышенное содержание соматических
клеток в молоке в январе и апреле – 358 тыс./мл и 357 тыс./мл соответственно. В
период зимних морозов, а также во время перехода со стойлового содержания
на пастбищное, резко увеличивалось содержание соматических клеток.
По мнению А.Г. Колчева [43] в летний и зимний периоды уровень
соматических клеток остается стабильным, в весенний и осенний - он
увеличивается на 51-85 тыс. ед./см3. Таким образом, зависимость мастита от
сезона года не подчиняется определенным закономерностям.
Обычно
наивысшее
количество
соматических
клеток
в
молоке
наблюдается в конце лактации на 10-11-м месяце. Минимальное количество
соматических клеток регистрируется на 2-м месяце лактации. Также было
замечено, что коровы, отелившиеся в апреле, имели самое большое количество
соматических клеток в молоке в течение лактации. Доданное молоко содержит
больше соматических клеток, чем первые порции молока, вечернее молоко
содержит больше клеток, чем утреннее. Также содержание соматических клеток
21
повышается в молозиве. Далее, в первую лактацию их количество низкое, но с
каждой последующей лактацией оно увеличивается [Климова Е.Н., 41; Лях В.Я.,
Харитонов В.Д. и др., 50]. По данным американских ученых, в 34 стадах штата
Виргиния среднее число соматических клеток для 23598 суточных проб молока
от первотелок составило 231 тыс./мл в сравнении с 410 тыс./мл от коров второй
и более поздней лактации [Jones G. M., 132].
С увеличением уровня содержания соматических клеток наблюдается
рост заболеваемости животных маститом. Так как повышение уровня
соматических клеток вызывается воздействием на молочную железу и
провоцируется медиаторами воспаления, основным фактором, влияющим на
количество соматических клеток в молоке, является наличие инфекции.
В возникновении мастита у коров принимают участие более 20
патогенных и условно патогенных микроорганизмов [Рубцов В.И., 68].
Воспаление молочной железы в субклинической или клинической форме
зависит от многих факторов, но чаще всего от резистентности организма
коровы, вирулентности и патогенности маститогенных микробов, а также от
силы и продолжительности действия на животное предрасполагающих
факторов.
К числу предрасполагающих факторов следует отнести следующие:

Механические:
К ним относится самая большая группа факторов, вызывающая микротравмы
сосков (раны, ушибы, трещины) и микротравмы, возникновение которых
обусловлено нарушениями технологии машинного доения коров, пропуск
очередного доения нарушение правил санитарной обработки доильного
оборудования.

Физические:
- действие низких и высоких температур (охлаждение, обморожение, солнечный
ожог), воздействие повышенной влажности (сырые помещения, отсутствие
22
резиновых ковриков в стойлах и твердых покрытий на выгульных площадках),
сквозняки;

Химические:
- действие раздражающих веществ (щелочей, кислот);
- действие фитоэстрогенов (при обильном скармливании зеленой массы
и бобовых культур).

Биологические:
- возбудители инфекции вымени (чаще выделяются Str. agalactiae, Str.
disgalactiae, Str. uberis, E. coli, Staph. aureus, и различные виды
Pseudomonas и Klebsiella, реже встречается Staph. Epidermides) [Ronda
R. 165], (табл. 4).
Таблица 4
Влияние возраста коровы и инфекционного статуса
на содержание соматических клеток в молоке
Возраст
животного
[ год]
Инфекционный статус
Количество
коров
Отсутствие
Небольшое
инфекции
заражение*
Высокий
уровень
заражения**
2
232
126
190
614
3
314
149
218
661
4
390
148
233
753
5
564
180
308
977
6
544
194
322
880
7
654
251
320
986
Более 7
868
113
519
1207
* - Corinobacterium bovis, коагулазо-отрицательный стафилококк.
** - Staph. aureus, Strep. ag., колиформы, стрептококки и энтерококки внешнего
происхождения
23
1.3.2. Генетические факторы, влияющие на содержание
соматических клеток в молоке коров
Большое влияние на содержание соматических клеток оказывают
генетические факторы такие как:
 Порода, породность животного
 Линейная принадлежность
 Генотип отца и матери
1.3.3. Влияние породы
Многие исследователи отмечают зависимость количества соматических
клеток в молоке от породы коров.
По результатам исследования А.Е. Болгова и др. [7] , В.М. Карташова,
А.И. Ивашура [40], черно-пестрая порода по сравнению с другими молочными
породами отличается высокой резистентностью. Эти данные не нашли
подтверждение в исследованиях Л.К. Попова [63] . По данным автора, у чернопестрой породы широко распространен скрытый мастит, причиной этого
явления исследователь видит в неудовлетворительных условиях содержания и
уровне
кормления животных. Результаты сравнительных исследований
W.
Brade [110] в Баварии показали, что симментальская порода по сравнению с
черно-пестрыми
и
бурыми
породами
отличается
высокой
маститоустойчивостью, кроме этого авторы заметили, что у симментальской
породы
коэффициент наследуемости по предрасположенности
к маститу
равен нулю.
Л.В.
Пешук
маститоустойчивости
[61]
было
проведено
чистопородных
исследование
животных
и
по
помесей.
изучению
Результаты
исследования показали, что наиболее устойчивыми к маститу являются
24
трехпородные помеси (красная степная х англерская х красная датская). Среди
коров-первотелок
высокий
процент
заболеваемости
зарегистрирован
у
полукровных помесей (8,1%) , по второму отелу — у чистопородных англеров
(17,3%)
и по третьему отелу — у высококровных помесей по англерской
породе (11,1%) . Коровы красной степной породы наиболее часто поражались
маститом в возрасте старше четырех лактации (17,6%).
Г.В. Родионов и др. [66] проводили анализ межпородных различий коров
молочного комплекса «Нарский» в племзаводе «Маро-Осановский». Результаты
исследования показали, что наиболее восприимчивы к маститу животные
черно-пестрой породы и ее помеси с голландской и голштинской породами. В
то же время помеси холмогорской с теми же породами имели более низкую
заболеваемость, что говорит о наследственной обусловленности устойчивости к
маститу и о более высокой резистентности к этой болезни помесей с «кровью»
холмогорской породы.
При анализе показателя числа соматических клеток в молоке коров
разных пород обнаружено, что в молоке коров айрширской породы количество
соматических клеток на 25% меньше, чем у коров черно-пестрой и голштинской
пород [Коротков А.С., Табакова Л.П. 45].
По данным Е.Ю. Савельевой [71], в молоке помесей холмогорской
породы содержалось больше соматических клеток (193 тыс./мл), чем в молоке
помесей черно-пестрой породы (155 тыс./мл). У черно-пестрых помесей в
большей части проб молока содержалось от 500 тыс. до 1 млн. соматических
клеток в 1 мл молока, а у помесей холмогорской породы соотношение между
пробами с содержанием соматических клеток от 500 тыс. до 1 млн. и 1 млн. и
более составило 1:1.
Литовскими учёными было установлено, что доля влияния породы на
количество соматических клеток составляет 3,52% [Шимкус А. и др., 93].
25
1.3.4. Влияние генеалогии на число соматических клеток
в молоке
Количество соматических клеток в молоке является селекционным
критерием для улучшения состояния здоровья вымени коров. В последние годы
изучается возможность ведения селекции скота на устойчивость к воспалению
молочной железы с учетом принадлежности животных к линиям и родственным
группам.
О.А. Калмыковой [34] обнаружена взаимосвязь между генеалогией, и
устойчивостью коров к маститу. Автором были исследованы более двадцати
трех
семейств,
уровень предрасположенности к маститу в семействах
колебался от 0 до 71,4%. Из исследованных семейств в двух семействах (15%)
за период исследования не было обнаружено больных маститом животных, а в
четырех семействах заболеваемость коров была менее 20%.
Взаимосвязь между линейной принадлежностью и маститоустойчивостью
коров оказалась менее значимой. В исследованной популяции не было выявлено
ни одной линии свободной от заболевания маститом. Удельный вес больных
животных колебался от 10% в линии Барона 307369 до 83% в линии Рикуса
25415.
По данным Г. В. Родионова и др. [66], различия по предрасположенности
к маститу между коровами отдельных линий черно-пестрой породы, хотя менее
значительны, чем между дочерьми разных быков, но также существенны и
достигают 16,2%.
По сообщению Н.Г.Рузановой [69], коэффициент маститоустойчивости
варьирует в зависимости от генеалогической принадлежности. В своих
исследованиях автором было установлено, что этот показатель у группы коров-
26
первотелок
из
родственных
групп
быков-производителей
американской
селекции: Мастера 106902, Меридиана 90827, Хилла 7915 имели коэффициент 0
- 0,02, а коровы линии Минуса, Амура и Салата — 0,5-1,0.
Межлинейные различия по устойчивости коров к маститу установлены
также в красных породах [А.И. Ивашура, В. К. Шмайлов, 28; Л. В.Пешук, 61].
Исследования, проведенные Л.К. Поповым [63] по распространению
скрытого мастита у коров черно-пестрой породы, выявили взаимосвязь между
генеалогической принадлежностью животных и их маститоустойчивостью. По
данным автора, наиболее устойчивыми к маститу являются коровы линий
Силинг Трайджун Рокета, Пилота, Бис-Берк-Идеала. Предрасположенными к
маститу были животные линий Аннас-Адема, и Хильтьес-Адема. По расчетам
Л. Попова, коэффициент наследуемости предрасположенности к скрытому
маститу коров разных линий был равен 0,185.
Важную теоретическую и практическую значимость в селекционной
работе
имеет
способность
отцов
передавать
по
наследству
дочерям
устойчивость (или предрасположенность) к различным заболеваниям, в том
числе к маститу.
О.А. Калмыкова [34] проводила оценку быков производителей по
признаку маститоустойчивости дочерей. Уровень восприимчивости варьировал
от 7,14% у дочерей Модельного 369461 до 90,00% у потомков Масленка 700, то
есть максимальные различия составили 12,61 раза (Р<0,001). Четыре быкапроизводителя
из шестнадцати были
отнесены к улучшателям, три - к
нейтральным, девять — к ухудшателям по признаку маститоустойчивости
дочерей. Доля влияния производителя на формирование устойчивости к
маститу составила - 0,153.
По сообщению Г.В. Родионова и др. [66], различия между быками по
заболеваемости их дочерей маститом
достигает более 19%. Как сообщают
авторы, коэффициент наследуемости устойчивости коров к маститу составляет
27
0,33. Анализируя наследуемость заболевания маститом, авторами было
установлено влияние матерей на резистентность их дочерей. У 65,6 чернопестрых коров и у 58,1% их помесей с голштинской породой отмечено влияние
матерей на заболеваемость их дочерей воспалением вымени.
Установлено, что признак устойчивости коров к маститу в определенной
мере наследственно обусловлен. Следовательно, наряду с традиционными
методами селекции крупного рогатого скота по продуктивным качествам
необходимо проводить селекцию животных на устойчивость к маститу.
По мнению литовских учёных, доля влияния быков на количество
соматических клеток составляет 19,71% [Шимкус А. и др., 93].
По данным немецких ученых, оценка наследуемости (h2) содержания
соматических клеток в среднем за лактацию составляет 0,13 [Trappmann W.,
178].
Американские ученые отмечают, что коэффициент наследуемости числа
соматических клеток
в молоке составляет 0,2, что отражает генетическую
изменчивость показателей устойчивости к инфекции, вызывающей мастит,
процесса фагоцитоза или иммунной реакции [Miller R.N., 152].
1.4. Полиморфизм белков молока крупного рогатого скота
Молоко по своему химическому составу
является очень сложной
биологической жидкостью секретируемой молочной железой. Состав молока
входят белки, жиры, углеводы, витамины и другие жизненно необходимые
вещества (рис. 1).
Молоко содержит несколько белковых компонентов, различающихся по
составу и свойствам. Классическое разделение белков молока основано на
данных о различной чувствительности их к изменению концентрации
28
водородных ионов и ионов кальция. Белки молока разделяются на две группы:
сывороточные белки и казеин.
Молоко
вода (86-88%)
сухое вещество (12-14%)
жир (3,0-4,5%)
сухой обезжиренный
остаток (8,5-9,0)
молочный сахар
(4,7-4,8%)
казеин
сывороточные
(2,8-3,2%)
белки (0,6-0,8%)
минеральные
вещества
(0,6-0,85%)
( полунасыщение (NH4) 2SO4
или насыщение с помощью Mg)
(фильтрование)
Осадок – лактоглобулин
( 0,15%)
лактоальбумин в фильтрате
(0,45%)
Рис.1.Состав молока
29
Казеиновый комплекс уже давно известен как основная фракция белков
молока. Его можно легко выделить путем коагуляции сычужным ферментом
или же в результате естественного брожения. Остающиеся в растворе белки
названы сывороточными белками. Первоначально их рассматривали как одно
вещество. Однако позже было установлено, что их можно разделить на две
различные фракции в полунасыщенном растворе сульфата аммония или
насыщенном растворе сульфата магния. Растворимая фракция получила
название лактальбумин, нерастваримая – лактоглобулин [Хаертдинов Р.А.,
Гатауллин А.М., 88, Иолчиев Б.С., и др., 32].
Казеиновый комплекс
имеет гетерогенную структуру и состоит из
следующих фракций: s0, s1,s2, , некоторые из этих фракции (s1,)
проявляют генетический полиморфизм и имеют от двух до одиннадцати
вариантов, различающихся между собой аминокислотным составом [Гроклод
Ф., 17; Кривенцов Ю. М., Щербакова Г.В.,46; Хаертдинов Р. А., 87, Марзанов
Н.С., и др., 53].
 s1-казеин. Как было отмечено, данная фракция является полиморфным и
обусловлена аллелями: s1-CnA, s1-CnB, s1-CnC и
s1-CnD. Имеются
существенные различия по встречаемости генотипов и аллелей белков молока
между породами, стадами внутри одной породы.
По сообщению большинство авторов наиболее часто встречается аллель
s1-CnB [Жебровский Л. С., Митютько В. Е. 24; Карликов Д. В., Зыскунова Р. Н.,
38; Тарасевич Л. Ф., Повлюченко Т. А. 81; Томме А. А. 84, Хаертдинов Р. А. 87;
Alanpri, Buttazoni S. G. 95; Litwenzuk A. 140; Tejedor T., Alfarriba J., Zarazaga J
177], частота его встречаемости у большинства пород колеблется от 0,900 до
1,000. Это обусловлено высокой частотой гомозиготного генотипа s1-Cn
BB
.
Аллель s1-CnC выявлен как в гомозиготном состоянии, так и в сочетании с
30
гетерозиготным (частота от 0,025 до 0,090) [Poli M.A., Antonini A.G., 168].
Аллели s1-CnA и s1-CnD встречаются только в гетерозиготном состоянии.
-казеин (-Cn). В локусе -Cn встречаются аллели: -CnA1, -CnA2, CnA3,
-CnB,
-CnC,
-CnD.
В
локусе
-Cn
преобладающим
по
распространенности является аллель -CnA и гомозиготный генотип -CnAA
[Зыскунова Р. Н., 26; Погоняло Д. И., 62; Litwenzuk A. 140; Poli M. A., Antonini
A. G., 168]. Встречаемость аллеля -CnB незначительна, за исключением
джерсейской, нормандской и бурой швицкой пород. Очень редкими являются
аллели -CnC и -CnD, последний обнаружен только у зебувидного скота.
Каппа-казеин (-Cn) . В настоящее время известно семь аллелей каппаказеина: -Cn А, -CnB [Grosclaude F., 124], -CnС [Di Stsaio, Merlin], -CnЕ
[Erhardt G., 120], -CnF [Сулимова Г. Е. и др., 77, 78; Erhardt G., 120], -CnG
[Бадагуева Ю. Н. и др., 4].
Аллели -Cn А и -CnВ с различной частотой встречаются у всех пород
крупного рогатого скота. Очень редкими являются -CnС и -CnЕ аллели.
-казеин (-Cn) растворяется в 3,3 М растворе мочевины. -Cn, по
сравнению с другими фракциями казеина, содержит мало фосфора (0,11%) и
много серы. Содержание -Cn в молоке черно-пестрой породы составляет
0,41%.
-Lg. Бета-лактоглобулин составляет 50-60% от всей сыворотки молока
и
выкристаллизуется
при
диализе
концентрированного
раствора
лактоальбумина при рН 5,2. Кристаллы в воде нерастворимы, но сравнительно
хорошо растворяются в разбавленных солевых растворах, как например, в
полунасыщенном
растворе
сульфата
аммония
(NH4)2SO4.
По
своему
элементарному и аминокислотному составу -лактоглобулин мало отличается
от казеина. При пастеризации молока -Lg денатурируется. Сычужный фермент
при обычных условиях -Lg не свертывает [R. Davoli, 117]. Содержание -Lg в
31
% от общего белка молока составляет 10,2. Его относительная молекулярная
масса = 36000, изоэлектрическая точка (рН) = 5,3 [K. Bell, 101]
Молекула этого белка содержит 162 аминокислотных остатка. В
сыворотке молока коров большинства европейских пород лишь один белок бета-лактоглобулин полиморфный. Этот белок имеет четыре
основных
генетически обусловленных варианта, которые отличаются аминокислотным
составом и обозначаются в порядке уменьшения их электрофоретической
подвижности как -LgA, -LgB, -LgC, -LgD. К настоящему времени известно по
меньшей мере 12 вариантов от A до J [A. Lundén, M. Nilsson, L. Janson,142]
Различные молекулярные формы одного и того же белка возникли в
результате мутации и закрепились в процессе микроэволюции молочного скота.
Они строго наследуются по законам Менделя и обуславливаются аллельными
генами. Эти наследственные формы (генетические варианты)
различаются
лишь по одной или же двум аминокислотам, остальные аминокислоты у них
идентичные. Как известно из курса биохимической генетики, белковая
молекула является прямым продуктом гена, состоящего из ДНК, сочетание
которых называется триплетом или же кодоном. Поэтому, когда известна
аминокислотная последовательность молекулы белка, не представляет большую
трудность определение нуклеотидной последовательности структурного гена,
что было сделано в отношении бета-лактоглобулина.
Диагностика четырех наиболее часто встречающихся аллеля гена беталактоглобулина крупного рогатого скота –
-LgА, -LgВ, -LgС , и -LgD
основана на определении аллелеспецифических точковых мутаций посредством
соответствующих рестрикционных ферментов.
Исследованием последовательностей аллельных вариантов гена беталактоглобулина
крупного
рогатого
скота,
было
установлено,
что
полиморфизм обусловлен точковыми мутациями (базовыми заменами)
его
в
32
позициях 2206 в экзоне I, а также в позициях 3065 и 3109 экзона II [Gene Bank
Access № Х 14710].
Вариант -LgВ бета-лактоглобулина может быть принят как основной,
поскольку он является наиболее частым у большинства пород. Генетические
различия между ним и другим распространенным вариантом -LgА выявляются
в позиции 64, где в результате мутации второго основания триплета GGT на
GAT происходит аминокислотное замещение Гли на Асп, а также в позиции
118, где GCC меняется на GTC и соответственная замена аминокислот Ала на
Вал.
Вариант -LgD отличается аминокислотной заменой Глу на Глн в позиции
45, а вариант -LgС характеризуется заменой Глн на Гис в позиции 59 беталактоглобулина.
Бета-лактоглобулин - основной сывороточный белок коровьего молока, и
после кристаллизации Palmer в 1934 г. он использовался много лет как модель в
структурных и ферментных исследованиях белка, касающихся денатурации и
связей между ионами и белками. Бета-лактоглобулин не присутствует у всех
млекопитающих, так, например, в молоке человека его нет. Биологические
функции данного белка ещё мало изучены, возможно, его роль заключается в
метаболизме фосфатов в молочной железе и транспорте ретинола и жирных
кислот в кишечнике.
Наиболее распространённый вариант -LgВ состоит из 162 аминокислот с
молекулярным весом 18.277. Основная последовательность была впервые
установлена Braunitzer et al. [112], (схема 1).
33
Схема 1
Последовательность аминокислот в молекуле -лактоглобулина коровьего
молока:
Лей- Иле- Вал- Тре- Глн- Тре- Мет- Лиз- Гли- Лей-
10
Асн- Иле- Глн- Лиз- Вал- Ала- Гли- Тре- Три- Тир-
20
Сер- Лей- Ала- Мет- Ала- Ала- Сер- Асп- Иле- Сер-
30
Лей- Лей- Асп- Ала- Глн- Сер- Ала- Про- Лей- Про-
40
45
Вал- Тир- Вал- Глу- Глу- Лей- Лиз- Про- Тре- Про-
50
Глн-вариант -LgD
59
Глу- Гли- Асп- Лей- Глу- Иле- Лей- Лей- Глн- Лиз-
60
Гис-вариант -LgC
64
Три- Глу- Асп- Гли- Глу- Цис- Ала- Глн- Лиз- Лиз-
70
Асп-вариант -LgA
Иле- Иле- Ала- Глу- Лиз- Тре- Лиз- Иле- Про- Ала-
80
Вал- Фен- Лиз- Лей- Асп- Ала- Иле- Асп- Глу- Асп-
90
Лиз- Вал- Лей- Вал- Лей- Асп- Тре- Асп- Тир- Лиз-
100
Лиз- Тир- Лей- Лей- Фен- Цис- Мет- Глу- Асп- Сер-
110
118
Ала- Глу- Про- Глу- Глн- Сер- Лей- Ала- Цис- Глн-
120
Вал-вариант -LgA
Цис- Лей- Вал- Арг- Тре- Про- Глу- Вал- Асп- Асп-
130
Глу- Ала- Лей- Глу- Лиз- Фен- Асп- Лиз- Ала- Лей-
140
Лиз- Ала- Лей- Про- Мет- Гис- Иле- Арг- Лей- Сер-
150
Фен- Асп- Про- Тре- Глн- Лей- Глу- Глу- Глн- Цис-
160
Гис- Иле-
162
В рамку заключены аминокислоты, по которым существует замена у трех наиболее часто
встречающихся молекулярных форм  -лактоглобулина.
34
В системе -Lg наиболее распространены аллели -LgA и -LgB. При этом
у животных большинства пород аллель -LgB превышает по концентрации
аллеля -LgA. Вариант -LgD выявлен у джерсейского скота Англии и
Австралии. Коровы айрширской и бурой латвийской пород имеют самую
низкую встречаемость -LgAA генотипа и наоборот, высокую - -LgBB. Что
касается черно-пестрой и голштинской пород, то у них высока встречаемость
генотипа -LgAB. Установлено, что локус бета-лактоглобулина не сцеплен с
казеиновой группой генов и входит в другую группу сцепления. Генетические
варианты наследуются кодоминантно, поэтому по фенотипическому рисунку
белковых фракций на гелевой пластинке (фореграмме) можно легко определить
генотип коровы. Определение генотипа быков-производителей осуществляется
путем семейного анализа его 10-15 лактирующих дочерей.
1.4.1. Взаимосвязь полиморфизма белков с молочной
продуктивностью и составом молока
Исследованиями последних лет установлено, что имеется взаимосвязь
между полиморфными системами белков молока c молочной продуктивностью
и составом молока. Поэтому эти белки используются, как генетические маркеры
для селекции животных.
По сообщению Schааr J. et аl. [172] , Robitaille G. [164], аллельные варианты
каппа-казеина оказывают значительное влияние на физические и химические
свойства молока, его сыропригодность, поэтому этот локус в программах
разведения скота используются как селекционный критерий. Практика
сыропроизводства показывает, что твердые сыры могут быть изготовлены
только из молока, полученного от коров, имеющих ВВ генотип.
По сообщениям K. F. Ng-Kwai Hang [154], при производстве сыра «Чеддер»
из молока коров, имеющих каппа-казеин ВВ, бета-казеин А1А1, беталактоглобулин ВВ, получается больший выход сыра, чем из молока коров,
35
несущих аллели АА; А1 А2, АА или АВ: АВ соответствующих молочных белков.
Генотипы каппа-казеин ВВ, бета-казеин А1А1 и бета-лактоглобулин ВВ
связаны также с большим содержанием жира, чем другие варианты.
M. Ron еt аl. [166] , Б.С. Иолчиев,. Г.Н. Левина [33] также отмечают, что в
молоке коров, несущих ВВ-генотип бета-лактоглобулина, было более высокое
содержание жира, а в молоке коров, несущих ВВ-генотип каппа-казеина - более
высокое процентное содержание белка по сравнению с АА-генотипом каппаказеина.
M. Ron et al. [166] отмечают, что при производстве сыра из молока коров с
генотипом ВВ каппа-казеина время коагуляции было короче на 24% и
консистенция сгустка была лучше, чем при производстве сыра из молока коров,
несущих гомозиготу АА (генотип АВ в этом отношении занимал среднюю
позицию). Подтверждающие это данные были получены в США: ВВ-генотип
дает на 5% больший выход сыра, чем АА-генотип [Jersay I].
Исследованиями K. Walawski, G. Sowinski, U. Czarnik, T. Zabolewicz [183]
установлено, что генотипы животных по белкам оказывают существенное
влияние на технологические свойства и пищевые качества молока, а также на
содержание количества соматических клеток в молоке (табл. 5). Показатели
изучались в течение трёх лактаций в периоды 20-30, 100-120 и 200-220 дней
данных лактаций.
36
Таблица 5
Диагностические показатели молока у коров с различными генотипами
бета-лактоглобулина
ГенотиПоказатель
пическая
группа
Периоды
Лактация
лактации
I
II
III
1
2
Вместе
3
Удой
АА
17,8
19,1
23,4
22,0
21,9
15,1 19,7
молока
АВ
14,5
18,1
20,8
20,5
17,7
13,3 17,2
(кг)
ВВ
13,8
17,4
22,1
20,8
17,2
13,1 17,1
Сухое
АА
12,58
12,76
13,28
12,74
12,65
13,00 12,80
вещество
АВ
12,73
12,68
13,11
12,64
12,85
13,07 12,84
(%)
ВВ
12,66
12,83
13,89
12,68
12,71
12,06 12,82
АА
4,00
4,09
4,06
4,05
4,00
4,06 4,04
АВ
4,08
4,03
3,97
4,01
4,01
4,04 4,03
ВВ
4,05
4,08
4,07
4,05
4,06
4,08 4,07
АА
3,17
3,33
3,55
3,16
3,30
3,52 3,32
АВ
3,17
3,30
3,40
3,08
3,33
3,44 3,27
ВВ
3,18
3,29
3,33
3,10
3,26
3,44 3,25
АА
2,37
2,43
2,56
2,39
2,42
2,52
2,44
АВ
2,38
2,41
2,48
2,31
2,42
2,55
2,42
ВВ
2,35
2,39
2,42
2,32
2,37
2,47
2,38
Жир ( %)
Белок (%)
Казеин (%)
АА
4,87
4,76
5,09
4,95
4,82
4,82
4,86
АВ
4,87
4,78
5,08
4,97
4,87
4,83
4,90
ВВ
4,83
4,79
4,89
5,00
4,90
4,83
4,91
Лимонная
АА
14,4
9,4
6,7
10,0
12,0
10,2
10,7
кислота
АВ
13,7
9,0
7,4
10,3
10,7
10,6
10,5
(ммоль/л)
ВВ
12,7
9,7
7,1
9,9
10,5
10,4
10,2
Лактоза ( %)
37
АА
26,3
28,0
29,0
28,9
26,4
27,4
27,6
АВ
27,3
27,7
27,4
27,8
26,8
27,9
27,5
ВВ
28,1
27,7
27,2
28,6
27,4
27,2
27,8
АА
4,28
4,23
4,02
3,88
4,29
4,42
4,19
АВ
4,14
4,15
4,11
3,72
4,20
4,59
4,14
ВВ
4,01
4,20
3,82
3,66
3,98
4,51
4,03
АА
34,7
32,5
35,6
34,4
34,7
33,8
34,7
АВ
35,0
33,7
34,5
34,4
34,7
34,2
34,5
ВВ
35,4
33,6
33,9
35,1
34,1
33,9
34,2
АА
22,0
16,7
17,4
18,6
18,2
20,7
19,1
АВ
21,7
19,3
18,0
20,9
18,5
20,6
20,0
ВВ
21,0
19,8
17,1
21,5
18,4
18,8
19,6
АА
45,0
39,1
37,3
41,7
42,2
39,4
41,1
АВ
44,4
39,5
37,7
42,5
40,9
39,2
41,0
ВВ
44,5
38,9
37,6
42,4
41,4
38,3
40,8
АА
32,5
34,2
35,1
31,9
33,7
35,7
33,7
АВ
31,7
33,8
34,8
31,9
32,8
35,3
33,2
ВВ
31,7
34,0
34,6
31,7
32,8
35,4
33,2
АА
0,131
0,146
0,169
0,149
0,165
0,123 0,146
АВ
0,130
0,143
0,168
0,152
0,142
0,136 0,144
ВВ
0,119
0,143
0,175
0,156
0,141
0,129 0,142
Число сома-
АА
320
441
606
447
403
431
427
тич. Клеток
АВ
263
336
624
368
364
416
381
(х1000/мл)
ВВ
244
401
444
249
321
496
350
Тест клеточ-
АА
2,53
4,24
4,39
2,93
3,58
4,22
3,56
ной реакции
АВ
2,61
3,49
4,86
2,90
3,64
4,03
3,48
(0-16 pnt)
ВВ
2,90
4,08
4,42
2,61
4,02
4,60
3,70
Кальций
(ммоль/л)
Магний
(ммоль/л)
Фосфор
(ммоль/л)
Натрий
(ммоль/л)
Калий
(ммоль/л)
Хлориды
(ммоль/л)
Лизоцим
(мкг/мл)
38
АА
29,1
29,0
29,5
28,9
29,2
29,5
29,2
АВ
29,0
29,0
28,8
28,6
29,1
29,2
28,9
ВВ
28,9
29,3
28,8
28,8
29,2
29,1
29,0
АА
6,65
6,71
6,79
6,70
6,71
6,72
6,71
АВ
6,66
6,69
6,74
6,69
6,69
6,72
6,69
ВВ
6,65
6,69
6,72
6,64
6,68
6,71
6,67
Время
АА
374
489
443
362
439
486
428
коагуляции
АВ
354
426
430
343
406
455
397
(с)
ВВ
320
424
395
328
399
404
375
Устойчивос
АА
11,1
12,6
12,2
10,7
12,6
12,3
11,9
ть к нагре-
АВ
11,2
12,6
12,5
11,2
12,5
12,4
12,0
ванию (мл
ВВ
10,7
11,9
11,6
11,0
11,8
13,3
11,3
Плотность
(0Ld)
Кислотность (рН)
этанол 10
мл-1 молока)
По данным таблицы можно сделать выводы:
1.
Коровы с бета-лактоглобулином ВВ отличаются низким показателем
нарушения
секреции,
а также
несколько
меньшей
молочной
продуктивностью. Их молоко характеризовалось более высоким
содержанием сухого вещества, жира и кальция, правильным
соотношением лактозы и хлоридов, натрия и калия, а также высокими
показателями технологической пригодности.
2.
У коров с бета-лактоглобулином АА определяется повышенное
содержание соматических клеток в молоке, что сопровождается
характерными
для
мастита
показателей крови и молока.
изменениями
диагностических
39
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материал и методы исследований
Работа была выполнена в период с 2000 по 2010 гг. на кафедре генетики и
селекции аграрного факультета Российского университета дружбы народов, по
схеме, представленной на рисунке 2.
Серии опытов по изучению генетических факторов, влияющих на
содержание соматических клеток в молоке коров, были проведены на ферме
«Дубровицы» в экспериментальном хозяйстве
«Кленово-Чегодаево» и в
Государственном
научном
учреждении
«Всероссийский
исследовательский
институт
животноводства»
Российской
научноакадемии
сельскохозяйственных наук.
Биохимический
полиморфизм
белков
молока
изучали
методом
вертикального электрофореза белков молока на полиакриламидном геле.
Анализ популяционно-генетических параметров проводили с помощью
разработанной
нами
компьютерной
программы.
Статистический
анализ
результатов исследования проводили с применением компьютерной программы
Excel.
Ежемесячно
проводили
контрольные
дойки
для
учета
молочной
продуктивности животных и определения содержания соматических клеток в
молоке. Для подсчета числа соматических клеток в молоке был использован
анализатор молока вискозиметрический «СОМАТОС» КНЖГ.414117.001.
41
Характеристика генетических факторов,
влияющих на содержание
соматических клеток
в молоке коров
Установление взаимосвязи между
количеством соматических клеток
в молоке и молочной
продуктивностью коров за лактацию
Изучение молочной
продуктивности
и состава молока коров
за лактацию
Определение
взаимосвязи
между удоем и
числом
соматических
клеток в 1 мл
молока
Влияние
быков-производителей
на содержание соматических клеток
в молоке дочерей
Выявление
взаимосвязи
между числом
соматических
клеток
и
химическим
составом молока
Взаимосвязь
между генотипом по локусу -Lg и
числом соматических клеток
в 1 мл молока
Рис.2. Схема исследований
42
Анализатор молока «СОМАТОС» предназначен для контроля молока
на
молочных
фермах,
приемных
пунктах,
предприятиях
молочной
промышленности с целью определения количества соматических клеток в
молоке
по
условной
вязкости,
измеряемой
по
времени
вытекания
контролируемой пробы через капилляр.
Биохимический
полиморфизм
белков
молока
изучали
методом
вертикального электрофореза белков молока на полиакриламидном геле
(Иолчиев Б.С., 1993).
Для проведения электрофореза белков молока необходимы следующие
реактивы и приборы.
Реактивы:
1. Акриламид для электрофореза белков (ПАА);
2. Метилен-бис-акриламид (МБА);
3. Трис( гидроксиметил) аминометан;
4. Глицин;
5. Персульфат аммония (ПСА);
6. Тетраметилэтилендиамин (ТЕМЭД);
7. 2-Меркаптоэтанол;
8. Мочевина;
9. Ледяная уксусная кислота;
10. Соляная кислота (HCl);
11. Этиловый спирт;
12. Бромфеноловый синий;
13. Уксуснокислый натрий;
14. Сахароза;
15. Кумаси R-250;
16. Тиомерсал (или хромпик).
43
Приборы и оборудование:
1. Полиэтиленовые стаканчики объемом 30 мл для отбора молока;
2. Полиэтиленовые стаканчики объемом 10 мл;
3. Маркер (фломастер по стеклу и пластмассе);
4. Прибор вертикального электрофореза;
5. Источник постоянного тока;
6. Центрифуга;
7. Лабораторные весы;
8. Лабораторный pH–метр;
9. Мерные цилиндры емкостью 50,100,1000 мл;
10. Мерные стаканы на 50, 100, 200мл;
11. Микропробирки типа "Эппендорф" на 1,5 мл;
12. Автоматические пипетки (пипетманы) на 200 и 1000 мкл;
13. Ванночки для окрашивания геля;
14. Микрошприц 10 и 50 мкл;
15. Флуоресцентная лампа дневного света.
Для проведения электрофореза необходимо приготовить следующие
растворы:
1. 30% раствор мономера (58,4 г акриламида, 1,6 г МБА,
дистиллированной воды - 200 мл);
2. Буфер I для разделяющего геля 1,5M Tрис- HCl pH 8,8;
3. Буфер II для концентрирующего геля 1M Tрис- HCl pH 6,8;
4. Электродный буфер pH 8,3 (0,6 г Трис + 2,9 г глицина + 1,0л
дистиллированной воды);
5. 10% раствор ПСА готовится перед использованием;
6. 0,001%-ный раствор бромфенолового синего;
7. Раствор для фиксации и окрашивания белков (10 мл этилового
спирта + 5мл уксусной кислоты + 75 мл дистиллированной воды);
44
8. 1% раствор Кумаси;
9. 40% раствор сахарозы буфера №2;
10. Ацетатный буфер (25 мл ледяной уксусной кислоты + 35 г
трехводного уксуснокислого натрия + 100 мл дистиллированной
воды);
11. 6М раствор мочевины буфера №2.
Отбор проб молока и их подготовка для электрофореза
Отбор проб молока проводили в чистые сухие полиэтиленовые
стаканчики емкостью 30 мл.
В качестве консерванта использовали 20% раствор тиомерсала или же
10% раствора двухромовокислого калия (K2Cr2O7). Конечная концентрация
тиомерсала в молоке составляла 0,003%.
Перед
проведением
анализа
молоко
обезжиривали
методом
центрифугирования при 3000 об/мин в течение 10 мин (t=50C). Для изучения
полиморфизма белков молока достаточно 1,5 мл обезжиренного молока. Для
осаждения казеина в образец добавляли 50 мкл ацетатного буфера. Смесь
перемешивали и оставляли на 20-30 минут. В течение этого времени казеин
осаждался, но для получения чистой сыворотки и казеина смесь в течение 15
мин. при 5000 об/мин центрифугировали. Затем сыворотку отделяли и
хранили в пробирке в замороженном виде при -180 - 200С до проведения
исследований.
Техника проведения электрофореза сывороток молока коров
1. Все растворы доводили до комнатной температуры.
2. Перед сборкой кассеты, стёкла тщательно вымывали и ополаскивали
дистиллированной водой, затем их обрабатывали смесью спирт/эфир (1:1).
3. После сборки, прежде чем налить в кассету раствор геля, проверяли
ее герметичность. Для этого наливали 1-2 мл
наблюдали.
дистиллированной воды и
45
4. Затем с помощью фильтровальной бумаги удаляли воду и готовили
раствор разделяющего геля. В таблице 6 приводятся
компоненты
разделяющего и концентрирующего геля.
5. Раствор геля до добавления в него ПСА и ТЕМЭД тщательно
дегазировали для удаления молекулярного кислорода. Молекулярный
кислород препятствует полимеризации.
6. После этого в раствор добавляли ТЕМЭД и ПСА, тщательно
смешивали и заливали в кассету. Время приготовления раствора и заливка
геля в кассету не должны превышать 1-2 мин. Кассету с разделяющим гелем
заполняли на 3/4.
7. Во избежание получения волнообразной поверхности разделяющего
геля на его поверхность с помощью микрошприца наслаивали бутанол.
Таблица 6
Состав геля для электрофореза белков молока (pH 8,0)
Растворы
Разделяющий гель,
10 % по акриламиду
Концентрирующий
гель,
5% по акриламиду
Раствор мономера, мл
16,00
2,66
Буфер 1 pH 8,8, мл
15,00
-
Буфер 2 pH 6,8, мл
-
5,00
Дистиллированная вода, мл
29,10
10,00
Пересульфат амония, мкл
300,00
100,00
ТЕМЭД, мкл
20,00
10,00
Мочевина 4М
14,40 г
4,80 г
2-меркаптоэтанол, мкл
20,00
10,00
8. По завершению полимеризации разделяющего геля бутанол с его
поверхности удаляли.
46
9. В раствор концентрирующего геля добавляли
недостающие
компоненты и вносили сверх разделяющего геля, затем быстро вставляли
гребенки до начала полимеризации.
10. После полимеризации концентрирующего геля, гребенки осторожно
вынимали, 2-3 раза ополаскивали лунки раствором электродного буфера,
потом их заполняли этим же раствором.
11. В каждую лунку вносили по 5 мкл образца. Одну из лунок оставляли
пустой и для маркировки движущейся пограничной линии в нее вносили
0,001% раствор бромфенолового синего или маркер.
12.
Верхнюю
и
нижнюю
камеру
сначала
прополаскивали
дистиллированной водой, потом электродным буфером.
13. Нижнюю камеру минимум на 2/3 заполняли охлажденным
электродным буфером, а верхнюю камеру заполняли на 2-3см выше
электрода. Электрофорез проводят в холодильнике при t=4-50C. В первые 5
минут устанавливали силу тока 1 мА, затем до перехода пограничной линии
в разделяющий гель по 2 мА, а после перехода - 3-4 мА на каждый образец.
По завершению процесса электрофореза кассету вынимали, осторожно
извлекали пластинку и помещали в ванночку для окрашивания. Для
окрашивания использовали раствор, состоящий на 10% из этилового спирта,
5% из уксусной кислоты и 85% дистиллированной воды. На каждые 100 мл
этого раствора добавляли 500 мкл 1% раствора Кумаси.
Популяционно-генетический анализ:
Анализ популяционно-генетических параметров проводили с помощью
разработанной
нами
компьютерной
программы,
вычисляющей
перечисленные показатели:
Частота распределения генотипов:
р =ni /N, где:
р - частота определяемого генотипа;
n - число носителей определяемого i генотипа;
N - общее число особей.
ниже
47
Частота встречаемости отдельных аллелей:
рА = 2nii+ nij/2N
Коэффициента гомозиготности локуса:
Са=q2i
Число эффективных аллелей:
Na=1/Ca
Степень генетической изменчивости:
V=(1-Ca/1-1:n) *100, где:
n- число тестированных особей
Са -коэффициент гомозиготности
Для определения генетического равновесия использовали метод квадрата.
= (f-F) 2/F, где:
f- фактическое наблюдаемое число генотипов
F - теоретическое ожидаемое число генотипов.
Статистический анализ результатов исследования проводили с
применением компьютерной программы Excel.
48
2.2. Результаты исследований
2.2.1. Характеристика молочной продуктивности коров
дочерей разных быков-производителей
В период исследования ежемесячно проводили контрольные дойки
коров (n=243), изучали молочную продуктивность. В изучаемых нами
группах были потомства линий:
Уес Идеала 933122 (n=62), Рефлекшен
Соверинга 198998 (n=78), Силинг Тpайджун Рокита 252803 (n=43) и 60 голов
- других линий.
Как показывают данные таблицы 7 высоким удоем отличаются
потомки линии Силинг Тpайджун Рокита 252803. От них за
лактации
получено 7331 кг молока, что больше на 83 кг, чем у потомков линии Уес
Идеала, и на 284 кг больше, чем у Рефлекшен Соверинга. Коровы линии
Силинг Тpайджун Рокита 252803 также отличались жирномолочностью,
среднее содержание жира в их молоке за лактацию составило 4,33%, что
больше на 0,12%, чем содержание жира в молоке коров линии Рефлекшен
Соверинга и на 0,20% чем у Уес Идеала.
Следовательно,
животные линии Силинг Тpайджун Рокита 252803,
имея преимущество над животными принадлежащими двум другим линиям,
как по удою, так и по содержанию жира, превосходили их и по количеству
полученного молочного жира. От них за лактации было получено 319кг
молочного жира, что больше на 22кг, чем от коров линии Рефлекшен
Соверинг и на 19 кг линии Уес Идеала.
Наибольше содержание белка в молоке коров за лактации из трех
исследованных линий установлено у Уес Идеала - 3,03%. По содержанию
белка в молоке между линиями Рефлекшен Соверинга и Силинг Тpайджун
Рокита 252803 существенная разница не наблюдается, они находятся на
одном уровне.
49
Таблица 7
Молочная продуктивность коров за законченную лактацию
в зависимости от линейной принадлежности
Линия быков-производителей
РЕФЛЕКШЕН
СИЛИНГ
СОВЕРИНГ
ТPАЙДЖУН
198998
РОКИТ 252803
62
78
43
Удой за лактацию, кг
7248130
7047230
7331+254
Содержание жира, %
4,130,02
4,210,03
4,33+0,12
молочного жира, кг
300***2,40
297***3,60
3193,30
Содержание белка, %
3,03+0,03
2,970,03
2,99+0,03
2204,60
208*3,90
2202,80
12,800,09
13,10,12
13,60,18
92914,50
92216,20
99612,80
8,20,10
7,950,06
8,250,09
5936,80
5607,50
6038,90
Показатели
УЕС ИДЕАЛ
933122
Количество животных, гол.
Количество полученного
Количество полученного
молочного белка, кг
Содержание сухого
вещества, %
Количество полученного
сухого вещества, кг
Содержание СОМО, %
Количество полученного
СОМО, кг
Примечание: здесь и далее *p<0,05; **p<0,01; * **p<0,001
За лактацию от коров линии Уес Идеала и Силинг Тpайджун Рокита
получено 220 кг молочного белка, что больше на 12 кг, чем от коров линии
Рефлекшен Соверинга.
Потомства линии Силинг Тpайджун Рокита по
50
количеству полученного сухого вещества и СОМО
превосходили коров
линии Уес Идеала на 67 и 10 кг, а потомков Рефлекшен Соверинга на 74 и
43 кг соответственно. Как показывают результаты наших исследований при
одинаковых условиях содержания и кормления в данном случае высокой
продуктивностью отличались потомки линии Силинг
Трайджун Рокита
252803.
Для изучения влияния отцов на продуктивные качества дочерей мы
проанализировали показатели характеризующие молочную продуктивность у
дочерей разных быков-производителей (табл. 8).
Таблица 8
Молочная продуктивность дочерей быков-производителей
за лактацию
Инвентарный
номер быков-
Содержание, %
n
Удой, кг
58
36
101
жира
белка
7384223
4,300,08
2,910,04
38
7074191
4,500,09
3,200,03
4466
44
7282254
4,250,12
3,050,03
190
43
7333228
4,330,10
2,990,02
98
52
6763161
4,000,10
3,080,04
11
30
6270***132
4,110,08
3,030,05
243
704669
4,260,08
3,050,06
производителей
Среднее
по группе
Результаты анализов полученных данных показывают, что двое из
шести использованных быков-производителей оказались ухудшателями по
удою дочерей при сравнении их молочной продуктивности со средним
показателем выборки. Удой за законченную лактацию в среднем по выборке
составил 7046 кг, с содержанием жира 4,26 и белка 3,05%. От дочерей быка
51
с инвентарным номером 98 за лактации было получено 6763 кг, что на 283 кг
меньше, чем в среднем по выборке. Содержание жира в молоке дочери этого
быка-производителя было также ниже, чем среднее по выборке. От дочерей
этого производителя за лактации был получен 271кг молочного жира и 208кг
молочного белка, это меньше на 11 и 3,3% соответственно, чем среднее по
выборке. В исследованной выборке в сравнительном аспекте самую низкую
продуктивность имели дочери быка-производителя с инвентарным номером
11. От дочерей данного быка за лактации было получено на 12% меньше
молока, чем в среднем по выборке. За лактации от дочерей этого быка было
получено 258 кг молочного жира и 190 кг молочного белка, что меньше на
16 и 13% соответственно, чем в среднем по выборке.
Был проведен анализ степени влияния на молочную продуктивность
коров, таких генетических показателей, как линейная принадлежность их
отцов (рис.3). Как видно из рисунка степень влияния быков-производителей
больше чем, линейной принадлежности. Сила влияния линии на удой
составляет 19 %, а быков-производителей 22%. Проведенный нами
дисперсионный анализ показал, что сила влияние быков на содержание жира
в
молоке
дочерей
составляет
38%.
Степень
влияния
белковомолочность коров составил 20%, а производителей 31%.
линии
на
сила вил%
52
40
35
30
25
20
15
10
5
0
удой
показатели
жир
линии
белок
быки
Рис.3 Степень влияния линии и быков-производителей на
показатели молочной продуктивности коров
2.2.2. Взаимосвязь между количественным содержанием
соматических клеток в молоке коров и удоем
Молоко как продукт питания и сырьё для производства других
продуктов питания должно соответствовать не только определенным
органолептическим требованиям (цвет, вкус, запах), но еще обладать
энергетической и пищевой ценностью, и самое главное,
соответствовать
санитарно-гигиеническим
требованиям.
оно должно
Для
контроля
качества молока разработан специальный нормативный документ ГОСТ
Р52054-2003 «Молоко натуральное коровье - сырье. Технические условия».
По данному ГОСТу одним из основных показателей при оценке качества
молока является количество соматических клеток.
Содержание
соматических
клеток
в
молоке
обусловлено
паратипическими и генетическими факторами. Одним из таких факторов
является состояния молочной железы. В нормальном физиологическом
53
состоянии, в молоко коров в основном попадают эпителиальные клетки, при
воспалении, особенно инфекционного характера, в молоке стремительно
растет количество лейкоцитов и соответственно увеличивается общее
количество
соматических
отечественных, так и
отрицательная
клеток.
Результаты
исследования
как
зарубежных ученных показывают, что существует
взаимосвязь
между
молочной
продуктивностью
и
количественным содержанием соматических клеток в молоке коров. Нами
был проведен анализ взаимосвязи между количеством соматических клеток
в 1 мл молока и суточным удоем коров (табл. 9).
Таблица 9
Содержание соматических клеток в молоке в зависимости от уровня
среднесуточного удоя коров
Градация
суточного
n
удоя
Среднесуточный
удой, кг
КСК
тыс./мл
Содержа
Содержан
ние
ие белка,
жира, %
%
>10<=15
88
13,000,15
44121
4,200,08
3,040,06
>15<=20
184
17,740,10
19125,90
4,290,09
3,230,08
>20<=25
211
22,560,10
15121,00
4,300,06
3,080,06
>25<=30
104
27,130,12
28536,00
4,200,07
2,980,05
>30<=35
27
32,240,23
2927,80
4,200,06
3,12 0,34
>35<=40
8
36,170,26
26525,09
3,980,05
2,670,12
Анализ данных таблицы 9 показывает, что существует взаимосвязь
между количественным содержанием соматических клеток в 1 мл молока и
удоем
и
она
носить
криволинейный
характер.
С
увеличением
среднесуточного удоя с 10 кг до 20-25 кг количество соматических клеток в
1 мл молока уменьшается, но у коров, удой которых составляет более 25 кг
снова наблюдается увеличение соматических клеток в молоке.
54
Для детального изучения взаимосвязи между среднесуточным удоем и
содержанием соматических клеток в молоке мы вычисляли фенотипические
корреляции между этими показателями (табл. 10).
Анализ данных показывает, что существует отрицательная корреляция
между удоем и содержанием соматических клеток в 1 мл молока, но следует
отметить, что значение коэффициента корреляции не превышает -0,25, то
есть она соответствует низкому порогу взаимосвязи и кроме того она
достоверна только для некоторых градаций. В исследованной нами
популяции корреляционная взаимосвязь между содержанием жира в молоке
и числом соматических клеток в 1 мл молока носила
криволинейный
характер, и варьировала от – 0,01 до +0,014. Корреляционное отношение
между содержанием белка в молоке и числом соматических клеток также
имело минимальное значение и колеблется от -0,05 до +0,003.
Таблица 10
Коэффициент корреляции между числом соматических клеток
в молоке и уровнем суточного удоя
Градация суточного
удоя
Корреляции
Удой
Жир
Белок
>10<=15
-0,200,09
0,0040,09
-0,0130,08
>15<=20
-0,200,06
-0,0030,06
-0,050,03
>20<=25
-0,190,06
0,0010,06
0,0030,05
>25<=30
-0,190,09
0,0130,09
0,0230,07
>30<=35
-0,210,18
0,0140,19
0,0010,40
>35<=40
-0,200,34
-0,010,35
0,0030,50
55
2.2.3. Содержание соматических клеток в молоке коров
в зависимости от сезона года
Одним из паратипических факторов, влияющих на состав и свойства
молока, является сезон года. Нами был проведен анализ динамики
количественного содержание соматических клеток в молоке коров в
зависимости от сезона года ( рис.4) .
500
450
429
400
366
ЧСК тыс./мл
350
300
308 313 310
250
233
230
210 198
200
150
126
100
98
118
50
ию
ль
ав
гу
се ст
нт
яб
р
ок ь
тя
бр
ь
но
яб
рь
ию
нь
ма
й
де
ка
бр
ь
ян
ва
р
фе ь
вр
ал
ь
ма
рт
ап
ре
ль
0
мес.
соматические клетки
Рис. 4. Содержание соматических клеток в молоке в зависимости
от сезона года
Как показывают результаты наших исследования, имеется тесная
взаимосвязь между содержанием соматических клеток и сезоном года.
Максимальное количество соматических клеток в молоке коров обнаружено
в зимне-весенний период. Пик количественного содержания соматических
56
клеток в молоке, исследованной нами популяции, приходится на апрель и
составляет 429 тыс. в 1 мл молока. Минимальное количество соматических
клеток в молоке коров обнаружено в летне-осенний период. В данный сезон
года число соматических клеток в молоке
не превышает 210 тыс. и
варьирует от 98 тыс. до 210 тыс.
2.2.4. Взаимосвязь между генеалогической
принадлежностью коров и содержанием соматических клеток
в их молоке
О существовании взаимосвязи между содержанием соматических
клеток в молоке коров и их генеалогической принадлежностью сообщают
Л.К. Попов [63], Т. Mark, W. F. Fikse, U. Emanuelson, I. Philipsson [119], Г.В.
Г.В. Родионов и др., [66] Нами проведен анализ содержания соматических
клеток в молоке коров в зависимости от их линейной принадлежности. Были
проанализированы данные трех линий (табл. 11).
Как видно из таблицы 11 по содержанию соматических клеток в
молоке коров между линиями существуют различия. Больше всего
соматические клетки обнаружены в молоке коров, принадлежащие к линии
Уес Идеал 933122, число соматических клеток в 1 мл молока, полученных от
коров этой линии, составило 340,50 тыс., что больше на 109,9 тыс., чем в
молоке коров линии Релекшен Соверинг 198998 (Р<0,001), и на 93,7 тыс.
больше, чем у коров линии Силинг Трайджун Рокит 252803 (Р<0,05).
57
Таблица 11
Содержание соматических клеток в молоке коров за лактацию
зависимости от линейной принадлежности
Линия быков-производителей
УЕС ИДЕАЛ
РЕФЛЕКШЕН
СИЛИНГ
933122
СОВЕРИНГ
ТРАЙДЖУН
198998
РОКИТ 252803
62
78
43
340,5030,71***
230,612,57
246,821,63
Удой за лактацию, кг
7248130
7047230
7331+254
Содержание жира, %
4,130,02
4,210,03
4,33+0,12
Содержание белка, %
3,03+0,03
2,970,03
2,99+0,03
12,800,09
13,10,12
13,60,18
Показатели
Количество
животных, гол.
Количество
соматических клеток,
тыс./мл3
Содержание сухого
вещества, %
2.2.5. Влияние быков-производителей на содержание
соматических клеток в молоке дочерей
В нормальном физиологическом состоянии вымени соматические
клетки в молоке в основном представлены эпителиальными клетками, а при
нарушении физиологического состояния, особенно при
воспалении
молочной железы, 90% обнаруженных в молоке соматических клеток состоит
из лейкоцитов. Воспалительный процесс, происходящий в молочной железе,
при
неблагоприятном
отечественной
и
течении
зарубежной
может
научной
привести
к
литературы
маститу.
Анализ
показывает,
что
58
содержание соматических клеток в молоке коров обусловлено рядом
генетических факторов. Результаты исследования [Д.В. Карликов и др., 37]
показывают, что число соматических клеток в молоке можно включать в
селекционный показатель, так как этот показатель передается по наследству.
В странах с развитым молочным скотоводством ведется планомерная
селекционная работа по содержанию соматических клеток в молоке. По
сообщению
швецких
ученых
[119]
тщательной селекционной работы
в
им
результате
пятнадцатилетней
удалось снизить содержание
соматических клеток с 3400 тыс./мл до 225 тыс./мл.
По мнению [T. Mark, W. F. Fikse, U. Emanuelson, I. Philipsson, 119] для
успешной селекционной работы, направленной на снижение соматических
клеток в молоке необходимо отказаться от включения коров пораженных
маститом в быкопроизводящую группу, а также не использовать семя быковпроизводителей в качестве отцов ( для получения племенных быков) , чьи
дочери имеют высокое содержание соматических клеток в молоке и
отличаются восприимчивостью к маститу. Исследования В.И.Остроуховой
[59] показывают, что наследуемость устойчивости к маститу соответствует
среднему порогу наследуемости признака.
показали, что существенное влияние на
Исследования
ряда авторов
маститоустойчивость оказывает
наследственность быков-производителей. Результаты проведенных анализов
содержания соматических клеток в молоке дочерей показали, что потомства
быков-производителей с наименьшим количеством соматических клеток в 1
мл молока более устойчивы к маститу.
Мы в своих исследованиях изучали влияние быков-производителей на
содержание соматических клеток в молоке дочерей (табл. 12) .
Таким образом, анализ, приведенных выше данных, показывает, что
молоко дочерей большинства из исследованных быков-производителей
(60%) по нормам ГОСТ Р52054-2003 по содержанию соматических клеток в
молоке соответствует высшему сорту. В молоке дочерей остальных (40%)
быков-производителей содержание соматических клеток не превышает 500
59
тыс./мл, следовательно, молоко этих животных соответствует первому сорту.
Содержание соматических клеток в молоке в среднем по стаду составил 317
тыс./мл. Шесть из десяти быков-производителей в сравнении со средними
показателями стада по числу соматических клеток в молоке оказались
улучшателями, то есть в их молоке содержится соматических клеток меньше,
чем в среднем по стаду.
Таблица 12
Содержание соматических клеток в молоке дочерей быковпроизводителей в сравнительном аспекте со средним показателем стада
Инвентарный
номер быков
Количество соматических
клеток в молоке дочерей (
тыс.\мл)
 к сред. показателю
стада
4
41112,6***
94
58
2446,4
-73
98
3618,5*
-61
101
2565,6
44
111
3847,9*
67
154
36518,6
48
190
2428,2
-75
257
18223,5***
-135
2170
1517,6***
-166
4466
28028,5
-37
Сред. по стаду
31717,6
На основе полученных данных провели ранжировку использованных в
стаде быков-производителей по молочной продуктивности и по содержанию
соматических клеток в молоке дочерей (табл. 13). Быков-производителей
ранжировали по возрастанию удоя их дочерей, то есть производители с
наивысшим удоем у дочери занимают первое место, с наименьшем удоем -
60
последнее, а по количеству соматических клеток в молоке дочерей быков
ранжировали наоборот: с наименьшем количеством - первое место, с
наибольшем количеством - последнее.
Таблица 13
Ранжировка быков-производителей по удою и по содержанию
соматических клеток в молоке дочерей
Инвентарный номер
Ранг по содержанию
Количество
Ранг по
дочерей
удою
111
15
6
6
98
14
5
5
101
11
4
3
446
11
3
4
190
12
2
1
58
9
1
2
быковпроизводителей
соматических клеток
в молоке дочерей
Как показывают результаты ранжировки быков-производителей (табл.
13), занимаемые ими ранги по удою и по количеству соматических клеток в
1 мл молока дочерей в основном совпадают. Быки-производители, в молоке
дочерей которых содержались более 300 тыс./мл в ранге по содержанию
соматических клеток в молоке занимают 5 и 6 место, и этим же местам
соответствуют их ранги и по удою. В молоке быка с инвентарным номером
190 содержалось 242 тыс./мл соматических клеток, по рангу он занимает
первое место, удой дочерей этого быка за лактации составил 7333кг, что
соответствует 2 месту по удою. Анализ выше приведенных данных еще раз
подтверждает существование взаимосвязи между содержанием соматических
клеток и удоем коров.
Мы в своих исследованиях изучали доли влияния фактора отца (быкапроизводителя) на содержание соматических клеток в молоке дочерей (табл.
14).
61
Таблица 14
Влияние генотипа отца, как фактора, на содержание соматических
клеток в молоке дочерей по периодам лактации
Месяцы лактации
Сила влияния генотипа
1
25,9
2
15,9
3
16,8
4
23,8
5
14,2
6
23,0
9
9,5
За лактации
14,3
Анализ данных показывает, что
влияние отца, как фактора, на
содержание соматических клеток в молоке дочерей
нельзя отрицать. Из
результатов исследования видно, что в течении всей лактации влияние этого
фактора было, хотя амплитуда колебания составляет более 15% (от 9,5 до
25,9%).
2.3. Полиморфные системы белков молока
В результате электрофореза казеина на ПАГ (полиакриламидном геле)
после окраске геля краской кумаси G на нем были зафиксированы
следующие шесть фракций,s0 -Cn, s1 -Cn,s2 -Cn,-Cn, k-Cn и -Cn.
s0-казеин имеет наивысшую электрофоретическую подвижность и
является мономорфной.
s1. Количество полос у фракции
s1 –казеин зависит от генотипа
животных по донному покусу у гомозиготнх животных на фореграмме
фиксируется одна полоса у гетерозиготных две полосы.
Исследованном
стаде был зафиксирован два варианта: s1-CnA и s1 -СnB . Аллель А
встречался только в гетерозиготном состояние.
62
s2-Cn. Эта фиксируется на фореграмме
фиксируется в виде двух
полос.
-Сn. В стаде численное преимущество имеют носители А аллеля.
Частота его встречаемость составила 0,70 а альтернативного В варианта
соответственно 0,30 (рис.5).
Наиболее часто
встречались животные с
гетерозиготным АВ генотипом (0,54).
аллели и генотипы
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
частота
АА
АВ
ВВ
А
В
Рис.5 Частота встречаемость аллелей и генотипов в локусе -Сn
-Cn. В стаде были обнаружен два аллеля каппа-казеина -CnА и -CnВ.
Частота встречаемость алеля А каппа-казеина составляет 0,7 тогда как
альтернативного Варианта всего 0,30. Более 50% животных стада является
гомозиготным по аллелю А, 42% коров являются продуцентами АВ варианта
каппа-казеина и всего 8% животных ВВ варианта (рис.6).
63
0
0,2
0,4
АА
АВ
0,6
ВВ
А
0,8
частота
В
Рис.6 Частота встречаемость аллелей и генотипов -Cn.
Не смотря на то, что между линиями наблюдается различная частота
встречаемости вариантов
каппа-казеина, закономерность преимущества
гомозиготов по аллелью А сохраняется во всех трех линиях (табл.15).
Таблица 15
Частота встречаемости генотипов по локусу каппа-казеина
у разных линии
Генотипы
Линии
АА
АВ
ВВ
РЕФЛЕКШЕН СОВЕРИНГ 198998
0,67
0,33
-
СИЛИНГ ТРАЙДЖУН РОКИТ
0,60
0,40
-
0,76
0,13
0,11
252803
УЕС ИДЕАЛ 933122
Результаты
анализа
пуляционно-генетических
параметров
полиморфных систем фракции казеина показывают, что в целом в стаде
сохраняется генетическое равновесие, не смотря на то, что по локусу s1-Cn
численное преимущество имеют гомозиготные особи по В аллелью.
64
Генетическое равновесие сохраняются и по остальным двум фракциям
казеина.
После коагуляции (осаждения)
казеина в растворе остаются так
называемые сывороточные белки. Сывороточные белки молока в свою
очередь разделяются на следующие
фракции:
быстрая фракция (F), -
лактоглобулин ( -Lg) , -лактальбумин ( -La) , альбумин сыворотки крови
(Al) , протеозопептонная фракция (Pp) , иммуноглобулин (Ig) . Эти фракции в
отличие от казеиновых фракций
не коагулируются под воздействием
сычужного фермента или слабых кислот, они денатурируют при нагревании
до 90оС и выпадают в осадок под воздействием сильных кислот, при
подкислении до рН 4,6.
Из сывороточных белков молока наиболее интересна с хозяйственной
точки зрении фракция -лактоглобулина. Исследования ряда ученых
подтверждают о взаимосвязи этого белка с хозяйственно-полезными
признаками, что дает основания для возможного использования беталактоглобулина в качестве маркера.
Содержание -лактоглобулина в молоке коров зависит от ряда
генетических и паратипических факторов и оно варьируется от 0,25 до 0,40
г/100 мл - это в абсолютном выражении, а в относительном – около 10% всех
белков молока.
-лактоглобулин в воде нерастворим, но сравнительно хорошо
растворяется
в
разбавленных
солевых
растворах,
как
например,
в
полунасыщенном растворе сульфата аммония (NH4) 2SO4. По составу лактоглобулин схож с аминокислотным составом казеина. Молекула беталактоглобулина содержит 162 аминокислотных остатка. Еще в 1955 году
R.Aschaffenburg [107] обнаружил, что существует несколько молекулярных
форм
бета-лактоглобулина, то есть этот белок полиморфный. Под
полиморфизмом понимают наличие в популяции одновременно нескольких
аллельных
состояний
гена
конкретного
локуса,
формирование разных фенотипов данного признака.
определяющего
65
В исследованных
нами образцах молока -Lg
был в диморфном
состоянии. На электрофореграмме этого белка было зафиксировано три его
варианта. Два из них гомогенные, которые друг от друга отличались по
электрофоретической подвижности, следовательно, на электрофореграмме
фиксировались в разных уровнях, более подвижный АА и менее подвижный
ВВ вариант. Третий вариант является
гетерогенным, этот вариант
на
электрофореграмме был зафиксирован в виде двух полос (рис.7).
-Lg
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Рис. 7 Электорфореграмма сывороточных белков молока коров
( Варианты -Lg на электофореграмме 2-АА; 1,3,4,7,9 АВ; 5,6 ВВ)
Продуцентом высоко заряженного АА варианта бета-лактоглобулина
является 19% исследованных животных. Гетерогенный АВ вариант был
обнаружен в 33% изученных пробах. Около 48% популяции продуцируют
гомогенный ВВ вариант бета – лактоглобулина (рис.8).
66
AA
19%
BB
48%
AB
33%
AA
AB
BB
Рис. 8 Частота встречаемость вариантов -Lg
В популяции наиболее часто встречаются особи продуценты В
варианта. Частота встречаемости данного варианта белка в популяции
составляет 0,64, альтернативного А варианта - 0,36 (рис.9) .
À
36%
Â
64%
А
В
Рис. 9 .Частота встречаемости аллелей по локусу -Lg
Нами был проведен анализ частоты встречаемости полиморфных
вариантов бета-лактоглобулина в зависимости от линейной принадлежности
животных (рис.10). У потомков линии Уес Идеала 933122 гетерозиготы
составляют 59%,
гомозиготы
по аллелю А - 33%, и меньше всего
67
гомозиготов по В аллелю - их всего 8%. Частота встречаемости аллеля А
составила 0,62 и 0,38 В варианта.
8%
33%
59%
AA
AB
BB
Рис.10. Частота встречаемости генотипов по локусу -Lg
у линии Уес Идеала 933122
Среди потомков линии Силинг Трайджун Рокита 252803 численное
преимущество на стороне продуцентов гомозиготного ВВ варианта беталактоглобулина, они составляют
85% от общего поголовья
коров,
принадлежащих к этой линии. На доли гетерозиготных особей приходится
15%, а гомозиготов по аллелью АА у животных, принадлежащих линии
Силинг Трайджун Рокита 252803, не обнаружено. Частота встречаемости
аллеля А бета-лактоглобулина изученной нами популяции линии Силинг
Трайджун Рокита 252803 составила 0,081 и В 0,919.
68
0%
15%
85%
AA
AB
ВВ
Рис.11. Частота встречаемости генотипов по локусу -Lg
у линии Силинг Трайджун Рокита 252803
Большинство потомков
Рефлекшен Соверинга 198998 являются
продуцентами диморфной формы, то есть АВ варианта бета-лактоглобулина
таких животных было 39 голов. Продуценты мономорфного АА варианта
составляют 12% от общего поголовья потомков Рефлекшен Соверинга, а
альтернативного ВВ варианта 37%. Вариант В в популяции коров линии
Рефлекшен
Соверинга
встречается
альтернативный А вариант.
почти
в
два
раза
чаше,
чем
69
12%
37%
51%
AA
AB
ВВ
Рис.12. Частота встречаемости генотипов по локусу -Lg
у линии Рефлекшен Соверинга 198998
Нами были изучены популяционно-генетические параметры локуса
бета-лактоглобулина
для выяснения состояния генетического равновесия
(табл. 16). Результаты анализов показывают, что как в целом по популяции,
так и в каждой линии ( видно из таблицы)
теоретически ожидаемое и
фактическое поголовье не совпадают, кроме носителей АВ генотипа у линии
Рефлекшен Соверинга 198998, по этому
теоретические
генотипу эмпирические и
данные совпадают. Несмотря на расхождения
между
эмпирическими и теоретическими данными, как в целом по популяции, так и
у всех, линии значения хи-квадрат меньше табличного (хи-квадрат
70
табличный при =1 равен 10,8) ,
а это значит, что в исследованной
популяции сохраняется генетическое равновесие.
Таблица 16
Анализ популяционно-генетических параметров локуса -Lg
у разных линий
Генотипы
Линии
АА
АВ
ВВ
21
36
5
24
29
9
Силинг Трайджун
-
36
7
Рокита 252803
1
36
6
Рефлекшен Соверинга
9
39
29
198998
10
36
32
46
80
117
32
100
112
Уес Идеала 933122
По популяции
2
3,82
1,16
1,88
10,34
* курсивом выделен эмпирические данные;
жирным - теоретически ожидаемые.
2.3.1.Взаимосвязь между молочной продуктивностью
и полиморфными системами молока
Как
показывают
результаты
анализа
продуктивности с генотипом по локусу
взаимосвязи
молочной
-Сn по удою незначительно
преимущество имеют носители гетерозиготного АВ генотипа (табл.17).
Высоким содержанием жира и белка отличаются коровы с гомозиготным АА
генотипом. Больше всего молочный жир за лактации получен от коров с
гомозиготным ВВ генотипом.
71
Таблица 17
Молочная продуктивность коров в зависимости от их генотипа по
локусу -Сn
Генотип
Показатели
АА
АВ
ВВ
Удой за лактацию, кг
706080
7310320
7285+256
Содержание жира, %
4,320,02
4,210,03
4,30+0,14
Содержание белка, %
3,05+0,03
2,990,03
2,89+0,03
13,840,08
12,210,11
12,60,78
Молочный жир, кг
3055,8
3077,2
3146,8
Молочный белок, кг
2154,6
2186,2
2103,8
Количество сом. клеток, тыс.\мл
29020,1
307 33,8
323 22,4
Содержание сухого вещества, %
Больше всего количество соматических клеток обнаружен в молоке
коров с гомозиготным -Сn ВВ. В молоке коров с генотипом -СnАА
содержалось на 10,2% чем в молоке коров с ВВ
и на – 5%, чем в молоке
гетерозиготных коров с АВ генотипом.
Анализ
сопряженности
генотипа
каппа-казеина
с
показателями
молочной продуктивности и состава молока показали существование
достоверной взаимосвязи генотипа по этому локусу и содержание белка в
молоке (табл.18). Содержание белка в молоке коров с ВВ генотипом
составило 3, 15% что больше на 0,42%, чем в молоке коров с альтернативным
АА генотипом (P<0,001). За лактации больше всего молочного белка
продуцировали коровы с гетерозиготным -СnАВ генотипом, от них за
лактации получен на 18 кг ( P<0,05) больше молочного белка, чем от с
гомозиготным -Сn АА и на 9 кг чем от ВВ генотипа.
72
Таблица 18
Сопряженность молочной продуктивности коров с генотипом
локусу -Сn
Генотип
Показатели
АА
АВ
ВВ
Удой за лактацию, кг
7380140
7340360
7235+156
Содержание жира, %
4,310,03
4,290,08
4,30+0,10
Содержание белка, %
2,73+0,03
2,990,02
3,15+0,02***
Содержание сухого вещества, %
12,640,08
12,810,11
13,60,78
Молочный жир, кг
3186,2
3159,8
3146,8
Молочный белок, кг
2015,2
2197,6*
2103,8
Количество сом. клеток, тыс.\мл
30228,3
370 43,6
321 32,4
Сообщения о взаимосвязи между генотипом по локусу беталактоглобулина и молочной продуктивности часто взаимоисключающие. По
сообщению [Bovenhuis H. et al.; Neelin J.M.] носители генотипа -Lg АА
имеют преимущество по
удою и выходу молочного белка над своими
сверстницами по альтернативным -Lg ВB генотипам, но носители
гомозиготного В варианта превосходили сверстниц по молочному жиру. Как
сообщает T. Ikonen [130]
у айрширской породы носители АА генотипа
имеют превосходство по удою и по выходу молочного белка, тогда как
животные с гомозиготным ВВ генотипом отличались высоким содержанием
жира в молоке. Результаты исследования Г.Н Глотовой [13] показали, что
более высокими удоями отличаются носители гомозиготного ВВ варианта
бета-лактоглобулина. По сообщению автора гетерозиготные животные с
генотипом АВ в течение трех лактаций имели преимущество по содержанию
жира в молоке.
A. Rando et al. сообщают, о том, что молоко с В вариантом
73
-лактоглобулина
более
устойчиво
к
нагреванию,
чем
вариант
А,
следовательно молоко животных с АА генотипом имеет более высокую
термостабильность.
По сообщению J.Мasha [145]
из молока коров с
генотипом ВВ можно приготовить значительно больше сыра, чем из молока
животных с АА генотипом.
Нами был проведен анализ взаимосвязи
генотипов по локусу бета-лактоглобулина с молочной продуктивностью
животных за законченную лактацию (табл. 19).
Таблица 19
Взаимосвязь генотипов по локусу бета-лактоглобулина с молочной
продуктивностью животных за законченную лактацию
Генотипы по локусу -Lg
Показатели
АА
АВ
ВВ
46
80
117
7073143
7203128
6780167
Жира, %
4,000,03
4,250,02
4,300,05
Белка, %
3,080,05
3,030,04
3,050,04
Молочный жир, кг
28312,60
30616,78
29114,80
Молочный белок, кг
2183,52
2184,80
2082,95
Кислотность ( рН)
6,740,03
6,710,02
6,690,03
Количество
животных, гол.
Удой за лактацию, кг
Содержание:
Как видно из таблицы в исследованной нами популяции по удою за
законченную лактацию, преимущество имеют носители диморфного АВ
варианта бета-лактоглобулина, по жирномолочности преимущество на
стороне
продуцентов гомозиготного ВВ варианта. От гомозиготных АА и
гетерозиготных АВ за лактацию получено одинаковое количество молочного
белка по 218 кг. Гомозиготные животные с ВВ вариантом уступают
74
вышеуказанным генотипам по количеству продуцированного белка за
лактацию на 10кг.
Одним
из
основных
показателей
характеризующих
физико-
химическое и технологическое свойство молока является рН. Нами была
изучена
кислотность
молока
в
зависимости
от
варианта
бета-
лактоглобулина.
Как видно из таблицы
наивысшая
коров обладателей гомозиготного
кислотность установлена в молоке
АА варианта бета-лактоглобулина.
Кислотность молока у гетерозиготных по -Lg АВ особей меньше, чем у
гомозиготных аналогов с АА генотипом и больше чем с альтернативным ВВ
генотипом.
2.3.2. Взаимосвязь между содержанием соматических клеток
в молоке c вариантами бета-лактоглобулина у коров
Мы провели сравнительный анализ по содержанию соматических
клеток
в зависимости от генотипа коров в локусе бета-лактоглобулина.
Результаты исследований показывают, что количество соматических клеток
в 1 мл молока в зависимости от генотипа
бета-лактоглобулина сильно
варьируется (табл. 20). В первый месяц лактации содержание соматических
клеток в молоке коров с генотипом АА составило 283 тыс., что больше на
46%, чем в среднем в сборном молоке. В этот период лактации наименьшее
количество соматических клеток в 1 мл молока было обнаружено в группе
коров с ВВ генотипом. В молоке коров с гомозиготным ВВ генотипом
количество соматических клеток было на 47% меньше, чем в среднем по
стаду и на 181,17 тыс. (в 2,76 раза), чем в
группе животных с
альтернативным АА генотипом. Содержание соматических клеток в молоке
гетерозиготных коров в начале лактации составило 196 тыс. В молоке
животных с гетерозиготным АВ генотипом содержится больше соматических
клеток на 94 тыс., чем у аналогов с гомозиготным ВВ генотипом, но на 86
тыс. меньше, чем с АА генотипом. У всех исследованных животных
75
наблюдается
тенденция
геометрического
увеличения
количества
соматических клеток в течение лактации.
Таблица 20
Содержание соматических клеток в молоке коров
в зависимости от генотипа -Lg
Месяцы
лактации
1 мес.
3 мес.
6 мес.
Конец
лактации
Среднее
за лактацию
АА
ВВ
АВ
283,75+7,40
102,58+8,51
196,78+6,87
325+25,63
195,25+12,5
294,35+16,8
356,47+37,8
185,89+7,95
254+7,98
439,56+43,20
416,93+31,10
410,87+72,63
349,28+28,97
220,17+8,45
258,32+17,65
Наименьше количество соматических клеток в молоке коров было
обнаружено в первый месяц лактации. Следует отметить, что разница между
группами по содержанию соматических клеток в зависимости от генотипа
бета-лактоглобулина в течении всей лактации сохранялось, хотя в конце
лактации она была не так ярко выражена, как в ее начале. В среднем по стаду
содержание соматических клеток в 1 мл молока за лактацию составило 250
тыс. Меньше всего соматических клеток в 1 мл молока содержится у коров с
гомозиготным ВВ генотипом. По сравнению с количеством соматических
клеток в сборном молоке, полученном от стада в течение лактации, этот
показатель в данной группе был на 12% меньше. Молоко, полученное от
гетерозиготных коров, по содержанию соматических клеток незначительно
76
отличается от среднего показателя стада. В 1 мл молока, полученного от
группы коров с гетерозиготным АВ генотипом, содержится на 8 тыс. больше
соматических клеток, чем в среднем по стаду. От коров с гомозиготным АА
генотипом, по сравнению с аналогами, получается молоко с высоким
количеством соматических клеток.
Для исследования достоверности влияния генотипа животных по локусу
бета-лактоглобулина на содержание соматических клеток в молоке мы
провели сравнительный дисперсионный анализ, где изучили силы влияния
генотипа животных по локусу бета-лактоглобулина на такие показатели
молочной продуктивности как удой, содержание жира, белка в молоке и на
количество соматических клеток. Анализ данных таблицы 21 показывает,
что наибольшее влияние генотипа животных по -Lg наблюдается на
количестве соматических клеток и содержании белка в молоке коров. Сила
влияния
генотипа
по
локусу
бета-лактоглобулина
на
количество
соматических клеток в молоке составляет 17,7%.
Таблица 21
Дисперсионный анализ влияния фактора генотипа по -Lg
на продуктивные показатели
Показатели
Удой
Сила влияние, %
3,61
Содержание:
Жира
8,35
Белка
16,6
Количество соматических клеток
17,7
Таким образом, результаты наших исследований показывают, что
имеется взаимосвязь между содержанием соматических клеток в 1 мл молока
и генотипом животного по локусу - Lg.
77
ОБСУЖДЕНИЕ
По сообщению Н.И. Стрекозова, Х.А. Амерханова, Н.Г. Первова и др.
[76] эффективность селекции зависит от
доли влияния генетических и
паратипических факторов на изменчивость того или иного признака. Удой
молочного скота в большей степени зависит от паратипических факторов и
только на 25 % обусловлен генетическими факторами, а состав молока в
большей степени сопряжен с генетическими факторами.
Аналогичные
данные получены в наших исследованиях.
Полученные нами результаты согласуются с данными Л.П. Москаленко
[56]. Наши исследования показали, что сила влияние быков-производителей
на молочную продуктивность колеблется от 22 до 38% , а линий от 19 до
28%.
Наивысшую
сопряженность
с
генетическими
факторами
из
селекционных показателей имеет содержание жира в молоке.
По сообщению Д.В. Карликова и др. [37], имеется тесная взаимосвязь
между
содержанием
соматических
клеток
и
уровнем
молочной
продуктивности. Как утверждает Д.В. Карликов, фенотипическая корреляция
между содержанием соматических клеток и удоем варьируется от -0,23 до 0,5. Об отрицательном коэффициенте корреляции между содержанием
соматических клеток и удоем сообщают также работы О.К. Василевой [11].
Результаты наших исследований показали, что имеется взаимосвязь между
количеством
соматических
клеток
в
молоке
и
уровнем
молочной
продуктивности. Меньше всего соматических клеток в 1 мл молока
обнаружили у коров со среднесуточным удоем более 20кг. При снижении
среднесуточного удоя с 25кг до 10кг содержание соматических клеток в
молоке увеличивалось почти в три раза.
Исследования отечественных ученных и их зарубежных коллег
показывают, что одним из факторов влияющих на содержание соматических
клеток является сезон года, но полученные результаты в зависимости от
географии проведения, от исследуемых пород, неоднозначные, а парой даже
78
противоречивые.
Например,
по
сообщению
Е.Н.
Климовой
[41],
максимальное содержание соматических клеток в молоке коров чернопестрой породы хозяйств Московской области наблюдалось в январе и
апреле.
Исследования А.Г. Колчева [43] показывают, что повышенное
количество соматических клеток в молоке коров наблюдается в переходные
периоды, то есть в весенний и осенний период. Противоречивость влияния
сезона года на содержание соматических клеток в молоке коров наблюдается
даже у одного и того же исследователя в зависимости от места проведения
исследований. Например,
О.К. Васильева [11] наблюдала наибольшее
количество соматических клеток в молоке у коров ПЗ «Детскосельский» в
весенний период, а наименьшее - в зимний. А в ПЗ «Петровский» высокое
содержание соматических клеток в молоке наблюдается летом, низкое – в
осенний и зимний периоды.
Результаты наших исследований, показали, что сезон года является
одним из паратипических факторов, влияющих на содержание соматических
клеток в молоке коров. В исследованной нами популяции, минимальное
количество соматических клеток в молоке коров было обнаружено в летнеосенний период, и оно варьировалось
от 98 тыс.
до 210 тыс., а пик
содержания соматических клеток в молоке приходился на весенний период и
составлял более 400 тыс/см3. Полученные нами данные соответствуют
аналогичным исследованиям, проведенным Е.Н. Климовой [41] для данного
региона и породы. Но при этом противоречат результатам исследований А.С.
Короткова
[45],
по
сообщению
которого
максимальное
количество
соматических клеток в молоке коров наблюдается в летние месяцы.
Анализ литературных данных показывает, что одним из основных
генетических факторов, влияющих на содержание соматических клеток в
молоке коров, является способность быков-производителей наследовать
устойчивость дочерей к маститу. Исследования О.А. Калмыковой [34]
показали, что быки-производители по устойчивости дочерей к маститу
79
существенно отличаются. По данным автора восприимчивость к маститу в
зависимости от быка варьировалась от 7,14 до 90%.
О высоком уровне влияния быков-производителей на содержание
соматических клеток в молоке дочерей сообщают также Г.В. Родионов и др.,
[66]. Результаты исследования данного автора показали, что быки по
маститоустойчивости
дочерей сильно отличались. По сообщению А.Е.
Болгова [7] в популяции в зависимости от генеалогической принадлежности
частота заболевания маститом варьирует от 8,3 до 31,3%. Результаты
исследований
А.З. Канеева [35], проведенных на черно-пестрой породе,
также подтверждают существенное влияние быков-производителей на
содержание соматических клеток в молоке их дочерей. Разница
между
быками по содержанию соматических клеток в молоке дочерей составляет
более 3,1 тыс.
Полученные нами данные о влиянии быков-производителей на
содержание соматических клеток в молоке дочерей согласуются с данными
других авторов. Между крайними вариантами в исследованной нами
популяции быков-производителей по содержанию соматических клеток в
молоке
дочерей разница
составляет
260 тыс./мл.
Однофакторный
дисперсионный анализ влияния быков-производителей на содержание
соматических клеток в молоке дочерей показал, что доля влияния этого
фактора находится на высоком уровне и в среднем составляет около 16%.
Под полиморфизмом понимают наличие в популяции одновременно
нескольких аллельных состояний гена конкретного локуса, определяющего
формирование разных фенотипов данного признака.
Некоторые молочные белки, такие как s1,  и -Cn и -Lg являются
биохимически полиморфными, то есть они в природе существует в
нескольких состояниях. Полиморфизм этих белков обусловлен различием их
аминокислотного состава. Эти различия в большинстве случаях приводят к
изменению физико-химического состава белков, что в свою очередь
приводит к изменению состава, свойства и др. показателей молока.
80
Частота встречаемости вариантов полиморфных белков зависит от ряда
факторов, таких как породная и линейная принадлежность животных, от
интенсивности селекции и др. Мы в своих исследованиях изучали частоты
встречаемости аллелей и генотипов полиморфных систем белков молока.
По литературным данным в настоящее время известно двенадцать
вариантов бета-лактоглобулина, которые обозначаются от A до J.
В системе -Lg наиболее распространены аллели -LgA и -LgB. При
этом у животных большинства пород аллель -LgB превышает по
концентрации -LgA.
По сообщению Иолчиева Б.С. [31], у черно-пестрой породы наиболее
часто встречаются продуценты В варианта -Lg.
популяции
В исследованной им
частота встречаемости АА варианта бета-лактоглобулина
составила 0,19, гетерогенного АВ варианта - 0,33, а наиболее часто
встречающегося ВВ варианта - 0,48. В популяции 64% исследованных
животных были продуцентами В варианта бета-лактоглобулина и 36% - А
варианта. Полученные нами данные соответствует данным Ракутина Е.С.
[65], Иолчиева Б.С. [33] и др.
О взаимосвязи между генотипом по локусу бета-лактоглобулина и
составом
молока,
количественными
продуктивность
исследователи.
его
технологическими
показателями,
коров
Но
сообщают
следует
свойствами,
а
характеризующими
отечественные
отметить,
что
эти
и
также
молочную
зарубежные
сообщения
часто
противоречивые даже в пределах одной породы.
В наших исследованиях высоким
удоем отличались
носители
гетерозиготного АВ генотипа по локусу бета-лактоглобулина, от этих
животных за лактацию было получено
на 130кг молока больше, чем от
животных с АА генотипом и на 423кг больше чем от особей с генотипом ВВ.
Высоким содержанием жира в молоке отличались животные с гомозиготным
ВВ генотипом.
81
ВЫВОДЫ
1. Установлено, что одним из главных генетических факторов,
влияющих на молочную продуктивность коров, являются отцы и их
линейная принадлежность. Влияние быков-производителей на удой,
содержание жира и белка составляет 22%, 38% и 31% соответственно.
Степень влияния линейной принадлежности животных выражена в
меньшей степени по удою, и составляет 19%, а по содержанию жира
в молоке -20%.
2. Показана связь между содержанием соматических клеток в молоке и
уровнем удоя. Наименьшее число соматических клеток обнаружено в
молоке
коров
со
среднесуточным
удоем
20-25
кг.
Число
соматических клеток в молоке коров с вышеуказанным уровнем
составляет 151 тыс./мл, что меньше на 290 тыс./мл, чем в молоке
коров, у которых среднесуточный удой составляет 10-15кг молока.
3. Установлено что, одним из основных фенотипических факторов,
влияющих на содержание соматических клеток в молоке коров,
является сезон года. Наибольшее число соматических клеток в
молоке наблюдалось в апреле (переходный период) и составляло 429
тыс. в 1 мл молока. Минимальное количество соматических клеток в
молоке коров было установлено в летне-осенний период и
варьировало от 98 тыс. до 210 тыс. в 1 мл молока.
4. Предрасположенность
генеалогической
к
маститу
принадлежностью.
у
коров
обусловлена
Содержание
их
соматических
клеток в молоке коров в зависимости от линейной принадлежности
варьирует от 230,6 тыс./мл (Рефлекшен Соверинг 198998) до 340,5
тыс./мл (Уес Идеал 933122). Однофакторный дисперсионный анализ
показывает, что влияние отца, как фактора, на содержание
соматических клеток в молоке дочерей за лактации составляет 14,3%.
82
5. Содержание белка в молоке коров сопряжено с генотипом по локусу
-Cn. В молоке коров с гомозиготным генотипом -Cn ВВ
содержится на 0,42% больше белка, чем в молоке коров с
альтернативным АА генотипом. Имеется взаимосвязь с генотипом по
локусу β-Lg и содержанием соматических клеток в 1 мл молока. В
молоке коров с гомозиготным ВВ генотипом содержится на 47 %
меньше соматических клеток, чем в среднем по стаду и на 181,17 тыс.
меньше, чем у коров с гомозиготным АА генотипом.
6. Установлена связь генотипа по локусу β-Lg с содержанием
соматических клеток в 1 мл молока. В молоке коров с гомозиготным
ВВ генотипом на 47 % меньше содержится соматических клеток, чем
в среднем по стаду и на 181,17 тыс. меньше, чем у коров с
гомозиготным АА генотипом.
Сведения о практическом использовании научных результатов
В племенных организациях при оценке быков-производителей нужно
учитывать содержание соматических клеток в молоке дочерей. Это позволит
направленно вести селекцию для получения маститоустойчивых животных.
Оценку генотипа животных по полиморфным системам белков молока
использовать в качестве генетических маркеров молочной продуктивности и
качества молока коров. Материалы исследований используются при чтении
лекций и проведении практических занятий по курсу «Разведение
сельскохозяйственных животных» и «Генетика».
Предложения производству
Молочным хозяйствам необходимо проводить контроль содержания
соматических клеток в молоке коров. Полученные материалы рекомендуем
использовать на племенных предприятиях при составлении плана племенных
работ.
83
Список литературы
1. Алексеева, Н.Ю. Состав и свойства молока как сырья для молочной
промышленности / Н.Ю. Алексеева, В.П. Аристова, А.П. Патратий. –
М. : Агропромиздат, 1986. – С. 57-73.
2. Андреев,
Д.П.
Влияние
генетических
факторов
на
состав
и
технологические свойства молока коров типа «Смоленский» бурого
швицкого скота : дис. … канд. с.-х. наук / Д.П. Андреев. – Смоленск ,
2007.
3. Афанасьев,
М.П.
технологические
Генетическая
свойства
структура,
молока
белковый
холмогорской,
состав
и
венгерской,
голштино-фризской пород скота и их помесей : автореф. дис. … канд.
биол.
наук
/
М.П.
Афанасьев.
-
Казан.гос.акад.вет.медицины
им.Н.Э.Баумана, Казань, 1996. - 24 с.
4. Бадагуева
Ю.Н.,
Сулимова
Г.Е.
Удина
И.Г.
Исследование
полиморфизма гена каппа-казеина у крупного рогатого скота и
родственных видов // Молекулярно-генетические маркеры животных /
Тез. докл. II Международной конф. -Киев. -1996. -С. 5.
5. Бакулов, И.А. Словарь ветеринарных терминов / И.А. Бакулов, М.Г.
Таршис. – М. : Эдельвейс, 1995. – 125 с.
6. Белкин, Б.Л. Иммунобиологические показатели сыворотки крови и
молока коров при заболевании маститом / Б.Л. Белкин, В.М. Юрков,
Т.В. Попкова, А.М. Гуськов // Доклады Российской академии с.-х. наук.
– 2002. - № 1. – С. 38-40.
7. Болгов, А.Е. Признаки здоровья в селекции молочного скота//
Достижения
в
генетике,
селекции
и
воспроизводстве
сельскохозяйственных животных/ Материалы межд-й научной конф.
Част I Санкт-Петербург, 9-11 июня, 2009 г. С.163-168.
84
8. Борисова, Г.В. Технический уровень производства в молочной
промышленности за рубежом / Г.В. Борисова, Н.П. Бандуркина, О.Н.
Миронова,
П.Г.
Плескова
//
Обзорн.
информ.
ЦНИИТЭИмясомолпром. Сер. Цельномолочная промышленность. –
М., 1981. – 29 с.
9. Бредихин, С.А. Технология и техника переработки молока / С.А.
Бредихин, Ю.В. Космодемьянский, В.Н. Юрин. – М. : КолосС, 2003. –
381 с.
10. Буткус, К.С. Сыропригодность молока при различном содержании в
нем соматических клеток : автореф. дис… д-ра с.-х. наук / К.С. Буткус.
– М. : ТСХА, 1986. – С.18-21.
11. Васильева, О.К. Влияние отцов и матерей на количество соматических
клеток в молоке их дочерей / О.К. Васильева // Материалы межд-й
научной конф. С-П., 26-28 июн. 2007 г. – С-П. – 2007.- С.165-168.
12. Гладырь, Е.А. ДНК-диагностика вариантов генов каппа-казеина и беталактоглобулина у крупного рогатого скота : автореф. дис. ... канд.
биол. наук / Е.А. Гладырь. - Всерос. гос. НИИ животноводства,
Дубровицы, 2001. - 19 с.
13. Глотова, Г.Н. Молочная продуктивность и качество молока коров
холмогорской породы разных генотипов по kanna-казеину и betaлактоглобулину : дис. … канд. с.-х. наук / Г.Н. Глотова. – Рязань, 2007.
14. Глухих, В. Влияние породных особенностей коров на технологические
свойства молока и молочных продуктов / В. Глухих, Ю. Рябов, И.
Перминов // Урал.нивы. – 1995. - № 1-3. - С. 20-24.
15. Грибановская, Е.В. Молочная продуктивность, химический состав и
технологические
свойства
молока
черно-пестрых коров разных
генотипов : автореф. дис. ... канд. с.-х. наук / Е.В. Грибановская. Всерос.НИИ коневодства, Рязань-Дивово, 1998. - 23 с.
16. Гринь, М.П.
генеалогической
Основные принципы и результаты формирования
структуры
выводимой
черно-пестрой
породы
85
крупного рогатого скота / М.П. Гринь, А.М. Якусевич, Н.В. Климец //
Зоотехн.наука Беларуси. – 2000. - Т. 35. - С. 3-11.
17. Гроклод Ф. Полиморфизм белков молока некоторые биохимические и
генетические аспекты //
Материалы
XXVI
Международной
конференции по группам крови и биохимическому полиморфизму
животных. -Л., 1979. -Т.1. -С. 55-94.
18. Гуськова, Л.Д. Методы определения staph. aureus / Л.Д. Гуськова //
Молочная промышленность. – 2002. - № 7. – С. 5-9.
19. Данилов, Н. Влияние генотипа коров на сыропригодность молока / Н.
Данилов, А. Шендаков, В. Крюк // Молочное и мясное скотоводство. –
2003. - № 8. – С. 16-18.
20. Двинский, Б.М. Производство и потребление молочной продукции в
ЕЭС / Б.М. Двинский, Ю.С. Шильников // Молочная промышленность.
– 1987. - № 7. – С. 37-39.
21. Дмитриев, Н.Г. Производство молока : справочник / Н.Г. Дмитриев. –
М. : Агропромиздат, 1985.
22. Емельянов, А.С. Выведение линий и семейств коров, иммунных против
лейкоза и маститов / А.С. Емельянов // В кн. «Проблемы иммунитета
сельскохозяйственных животных». – М., 1966. – С. 439-4.. .
23. Епимахов, А.И. Влияние генетических и паратипических признаков на
заболеваемость животных маститом и туберкулезом / А.И. Епимахов,
О.В. Горелик, А.С. Титов, А.С. Титов, Л.А. Титова // Пробл.
интенсификации животноводства в зоне Южного Урала. – Троицк,
1990. – С. 49-57.
24. Жебровский Л.С.,
Митютько В.Е. Использование полиморфных
белковых систем. -М.: Колос, 1979. -182 с.
25. Зеккони, А. Инфицирование молочной железы коров стафилококком /
А. Зеккони, Л. Кальвинхо, Л. Фокс, по материалам Бюллетеня ММФ
408, 2006 г., перевод А.В.Бережной // Молочная промышленность. –
2007. - №2. – С. 20-25.
86
26. Зыскунова Р.Н. Значение разных видов отбора при совершенствовании
высокопродуктивного молочного скота. -Автореф. дис... канд. биол.
наук. Дубровицы, 1990. -24 с.
27. Ивашура, А.И. Оценка качества молока по количеству соматических
клеток / А.И. Ивашура, Т.А. Павлюченко, Л.Ф. Тарасевич // Зоотехния.
– 1988. - № 8. – С. 55-57.
28. Ивашура, А. О наследственной устойчивости коров к заболеванию
маститом / А. Ивашура, В. Шмайлов // Молочное и мясное
скотоводство. – 1989. - № 2. – С. 22-24.
29. Ивашура, А.И. Гигиена производства молока / А.И. Ивашура. – М. :
Росагропромиздат, 1989. – С. 192-194, 208 -212, 217-233.
30. Инихов, Г.С. Биохимия молока и молочных продуктов / Г.С. Инихов. –
М. : Пищевая промышленность, 1970. – 316 с.
31. Иолчиев Б.С., Сулима Н.Н., Закопайло В.А. Взаимосвязь между
генотипом по локусу -Lg и содержанием соматических клеток в
молоке коров //Материалы международной научно-практической
конференции
ВГНИИЖа
«Прошлое,
настоящее
и
будущее
зоотехнической науки». Дубровицы 2004 г. С.117-119.
32. Иолчиев, Б.С. Популяционно-генетический анализ белков молока у
различных видов
сельскохозяйственных животных / Б.С. Иолчиев,
Н.И. Стрекозов, Н.С. Марзанов, Н.А. Зиновьева. –Дубровицы. -2001 .
– 29 с.
33. Иолчиев, Б.С. Оценка генетического потенциала у различных видов
и
гибридов
сельскохозяйственных
животных
на
основе
биотехнологических методов // диссертация на соискание ученой
степени доктора биологических наук –Дубровицы -2006 г. 232 с.
34. Калмыкова, О.А. Наследственная обусловленность резистентности
коров к маститу / О.А. Калмыкова // Зоотехния. – 2000. - № 4. – С. 1112.
87
35. Канеев, А. Оздоровление дойного стада от мастита / А. Канеев, Г.
Карликова // Молочное и мясное скотоводство. – 1997. - № 2. – С. 3133.
36. Канеев, А.З. Оценка молочной продуктивности коров с учётом
количества соматических клеток в молоке : дис. … канд. с.-х. наук /
А.З. Канеев. – пос.Быково, Моск.обл., 2002.
37. Карликов, Д.В. Об оценке быков-производителей разных пород по
количеству соматических клеток в молоке дочерей / Д.В. Карликов,
Г.Г. Карликова // Материалы научно-практ. конф. РАМЖ «Повышение
конкурентоспособности
животноводства
и
задачи
кадрового
обеспечения», п.Быково, Московской обл. – 2000. – С. 34-36.
38. Карликов Д.В., Зыскунова Р.Н. Полиморфизм белков молока чернопестрого скота при голштинизации // Труды научной конференции
молодых ученых ТСХА 9-12 июня 1987. -С. 1064-1079.
39. Карманова, Е.П. Прогноз и эффективность селекции по устойчивости
коров к маститу / Е.П. Карманова, Л.Н. Муравья // Селекция с.-х.
животных на устойчивость к болезням, повышение резистентности и
продуктив.долголетия. – 1992. - Вып.9. - С. 113-115.
40. Карташова, В.М. Маститы коров / В.М. Карташова, А.И. Ивашура. – М.
: Агропромиздат, 1988. – С. 74-82.
41. Климова, Е.Н. Состав и технологические свойства молока коров чернопестрой породы в Московской области : автореф. дис. ... канд. с.-х.
наук / Е.Н. Климова. - пос. Дубровицы, Моск. обл., 2000. - 22 с.
42. Ковтунова, Л.Е. Молочная промышленность Нидерландов, Швеции и
Финляндии / Л.Е. Ковтунова, З.В. Волокитина, И.Г. Бушуева // Обзорн.
информ. ЦНИИТЭИмясомолпром. – М., 1986. – 44 с.
43. Колчев,
А.Г. Взаимосвязь между уровнем соматических клеток в
молоке и продуктивностью коров / А.Г. Колчев //
Прогрессивные
технологии производства продуктов животноводства в Сибири. –
88
Новосибирск:
Сиб.
науч.-исслед.
и
проект.-технол.
ин-т
животноводства, 2007. - С. 44-48.
44. Кондратьева, Т.Н. Влияние генетических и средовых факторов на
продуктивные и экстерьерные признаки айрширского скота : дис. …
канд. с.-х. наук / Т.Н. Кондратьева. – Великий Новгород, 2002.
45. Коротков, А.С. Влияние паратипических и генетических факторов на
число соматических клеток в молоке здоровых коров / А.С. Коротков,
Л.П. Табакова // Научное наследие П.Н. Кулешова и современное
развитие зоотехнической науки и практики животноводства.
– М. :
Рос. гос. аграр. ун-т - Моск. с.-х. акад., 2006. - С. 102-107.
46. Кривенцов Ю.М., Щербакова Г.В. Молочная продуктивность, физикохимический состав и технологическое свойства молока черно-пестрого
скота различных генотипов // Вестник с.- х. науки. -1991. -N -С. 100104.
47. Крыканова, Л.Н. Тенденции в производстве молока / Л.Н. Крыканова //
Молочная промышленность. – 1986. - № 12. – С. 37-39.
48. Легомин, Г.П. Австралийские стандарты на качество молока при
заготовке / Г.П. Легомин // Молочная промышленность. – 1987. - № 8. –
С. 44-46.
49. Лещук, Г.П., Совершенствование черно-пестрого скота в условиях
Зауралья : автореф. дис. на соиск. учен. степ. д-ра с.-х. наук автореф. /
Г.П. Лещук. - Оренбург, 2007. - 38 с.
50. Лях, В.Я. Качество молока / В.Я. Лях, В.Д. Харитонов, Т.Н. Садовая,
Н.Р. Шоков, Е.В. Шепелева // Справочник для работников лабораторий
зоотехников
молочно-товарных
ферм
и
работников
молокоперерабатывающих предприятий. – Санкт-Петербург : Гиорд,
2008. – С. 28-32, 133-135.
51. Манелля, А.И. Производство и потребление молока и молочных
продуктов в Российской Федерации / А.И. Манелля, В.А. Трегубов //
89
Экономика с-х и перерабатывающих предприятий. – 2003. - № 2. – С.
49-53.
52. Маркова, Н.С. Производство и переработка молока во Франции / Н.С.
Маркова // Молочная промышленность. – 1985. - № 10. – С. 44-47.
53. Марзанов, Н.С. Генетические особенности гибридов зебу х крупный
рогатый скот по полиморфным системам белков крови и молока
/Н.С.Марзанов,
К.С.Родригез,
Б.С.Иолчиев,
М.Х.Тохов,
Ю.Н.Саморуков, Н.М.Скок, Л.К.Марзанова, Х.А.Амерхан// Доклады
РАСХН. – 2010. - № 4. - С. 38-43.
54. Мастит и качество молока / Обзор статьи из научного журнала по
молоку Новой Зеландии // Молочное и мясное скотоводство. – 2001. №7. – С. 43-44.
55. Методические рекомендации по контролю числа соматических клеток
в молоке при селекции на устойчивость к маститу и качеству молока/
ВНИИ разведения и генетики с.-х. животных. – Ленинград. - 1990. №32. С.25-26.
56. Москаленко, Л.П. Продуктивное долголетие ярославских
голштинизированных коров в зависимости от методов выведения
/Л.П.Москаленко, Е.А.Зверева// Вестник АПК Верхневолжья. – 2009. № 3. - С. 17-19.
57. Мугниев, Э.П. Молочная продуктивность коров черно-пестрой породы
и 5/8 – кровных помесей по голштинской породе / Э.П. Мугниев, Ф.Р.
Бакай, А.С. Семенов // Материалы междунар. учеб.-метод. и науч.практич. конф., посвящ. 85-летию академии. – М.: МГАВМиБ., 2004. –
С. 20–22.
58. Мухаметгалиев, Н.Н. Использование генетической и паратипической
изменчивости белкового состава молока коров для улучшения
технологических свойств сырья и повышения качеств молочных
продуктов : дис. … доктор биолог. наук / Н.Н. Мухаметгалиев. –
Казань, 2006.
90
59. Остроухова, В.И. Естественная резистентность и устойчивость к
маститу коров черно-пестрой породы /Автореф. дис. канд. с.-х. наук//
- М. - 1993. – С. 17-18.
60. Панкова, Г.Е. Первичная обработка молока и требования к его качеству
/ Г.Е. Панкова // Молочная промышленность. – 1986. - № 8. С. 38-40.
61. Пешук, Л.В. Влияние генотипа и других факторов на заболеваемость
коров маститом / Молоч.и мясн.скотоводство. – 1999. - № 5. - С. 17
62. Погоняло
Д.И.
Наследственный
сельскохозяйственных животных
полиморфизм
белков
молока
и его практическое значение в
селекции: Автореф. дис... канд.наук. Минск, 1975. –С.17
63. Попов, Л.К.. Генотипические аспекты мастита у коров и его
фитотерапия : Автореф. дис. д-ра вет. наук / Всерос. н.-и. вет. ин-т
патологии, фармакологии и терапии // - Воронеж. - 1998. – С. 43-44.
64. Порозова,
Л.Ф.
Основные
тенденции
развития
молочной
промышленности США и стран Западной Европы / Л.Ф. Порозова, Г.В.
Борисова, А.М. Епихина, О.Н. Миронова // Обзорн. информ.
ЦНИИТЭИмясомолпром. Сер. Цельномолочная промышленность. –
М., 1983. – 34 с.
65. Ракутина, Е.С.
Полиморфизм белков молока и его связь с
хозяйственно-полезными
Вологодской области.
признаками
черно-пестрого
скота
В кн: Всесоюзная школа молодых ученых и
специалистов по промышленной технологии молока. -М.1980. с. 53-54.
66. Родионов, Г.В. О генетической устойчивости коров к маститу/
Г.В.Родионов, В.А.Солдатов, О.А.Калмыкова// Молочное и мясное
скотоводство. – 2002. -№ 6. – С. 25-26.
67. Росохович, Л.
Связь экстерьера коров с их продуктивностью и
содержанием соматических клеток в молоке (Черно-пестрая порода) /
Л. Росохович, М. Дудек // Зоотехн.наука Беларуси. - 2000. - Т. 35. - С.
16-25.
91
68. Рубцов, В.И.
Предрасполагающие и непосредственные причины,
вызывающие заболевание молочной железы у коров (Возникновение
мастита при доении коров аппаратами марки ДА-2 и "Майга") / В.И.
Рубцов // Докл.ТСХА Моск.с.-х.акад. им.К.А. Тимирязева, 2001. - Вып.
273, ч. 2. - С. 26-29.
69. Рузанова, Н.Г. Хозяйственные и биологические качества швицкостромских коров-первотелок разной кровности по бурой швицкой
породе американской селекции / Автореф.дис...канд.с.-х.наук// Моск.с.х. академия им.К.А.Тимирязева. - М. - 1995. – С.15-16.
70. Савельев, А.А. Факторы, влияющие на качество и безопасность сыров /
А.А. Савельев, М.Ю. Сорокин, Л.К. Шнейдер, А.Т. Крышин, С.А.
Савельев, В.П. Дмитриева // Сыроделие и маслоделие. – 2003. - № 1. –
С.11.
71. Савельева,
Е.Ю.
Влияние
голштинизации
черно-пестрой
и
холмогорской пород на хозяйственно полезные качества коров / Е.Ю.
Савельева // Зоотехния. – 2002. – № 12. - С. 4-6.
72. Сажин,
С.И.
Продуктивность,
физико-химический
состав
и
технологические свойства молока коров разных генотипов / С.И.
Сажин, П.С. Катмаков // Докл.РАСХН, 1998. - № 1. - С. 39-41.
73. Сайфутдинов, К.Ф. Наследственная изменчивость относительного
содержания молочных белков и ее влияние на технологические
свойства молока коров : автореф. дис. ... канд.
биол. наук / К.Ф.
Сайфутдинов. - Казан. гос. акад. вет. медицины им. Н.Э.Баумана,
Казань, 1998. - 24 с.
74. Ставикова, М. Методические рекомендации по контролю числа
соматических клеток в молоке при селекции на устойчивость к маститу
и качеству молока / М. Ставикова, Л. Ллойда // ВНИИ разведения и
генетики с.-х. животных. – 1990. - 32 с.
92
75. Стреокозов,
Н.И.
Белковый
состав
молока
и
биохимический
полиморфизм его фракций / Н.И. Стрекозов, Н.В. Сивкин, Б.С.
Иолчиев // Вестник РАСХН. – 1997. - № 1. – С. 52-53.
76. Стрекозов, Н.И. Молоко и говядина: новые технологии необходимы
/Стрекозов Н.И. , Легошин Г.П.,//Животноводство России. 2002 г №9.
С.6-8.
77. Сулимова Г.Е. Молекулярно- генетически анализ генома животных и
человека с использованием ДНК- маркеров / Автореф. дис. док. био.
наук. Москва, 1998.- 50 с.
78. Сулимова Г.Е., Соколова С.С., Семикозова О.П., и др. Анализ
полиморфизма
ДНК кластерных генов у к.р.с.: гены казеинов и
главного комплекса гистосовместимости (BOLA) // Цитология и
генетика .- 1992. -Т. 26. -№ 5. -С. 18-26.
79. Сычева, О.В. Научно-практическое обоснование основных факторов,
формирующих качество молока – сырья в современном производстве:
автореф.
дис.
на
соискание
ученой
степени
доктора
сельскохозяйственных наук. Ставрополь – 2008. – С.47.
80. Сычева, О.В. Перспективы и проблемы контроля качества молока по
новому ГОСТу Р 13264-2001 / О.В. Сычева. – Северо-Кавказский гос.
технич. университет: Вестник СевКавГТУ, серия «Продовольствие». –
2003. - № 1 (6) . – С. 1-7.
81. Тарасевич Л.Ф., Повлюченко Т.А. Генетический полиморфизм белков
молока стад черно-пестрой породы племзавода "Лесное" и молочная
продуктивность / Материалы XVI международной конференции по
группами крови и биохимическому полиморфизму животных. -Л.,
1979. -Т. 2. -С. 121-127.
82. Тареев, А.Г.
Совершенствование биотехнологических признаков
молочного скота учхоза "Степное" / А.Г. Тареев, А.П. Лешин, В.А.
Шингалов,
А.Ф.
Фогель
//
Актуал.пробл.биотехнологии
вет.медицины. - Саратов, 1993. - Ч.1. - С. 80-89.
и
93
83. Тепел, А. Химия и физика молока / А.Тепел. – М. : Пищевая
промышленность, 1979. - С. 10-41.
84. Томме А.А. Генетические полиморфизм
- Lg и казеинов и
возможности его использования в селекции пород крупного рогатого
скота в Эстонской ССР: Автореф. дис... канд.наук. -Тарту, 1972.-27 с.
85. Трухачев
В.И.,
Технологические
аспекты
оптимизации
и
совершенствования производства молока, говядины и продукции
овцеводства в условиях Юга России // Сетовой научно-методический
электронный
Агрожурнал
Московского
государственного
агроинженерного универистета №3, 2005 г.
86. Усенбеков, Е.С. Генотипирование крупного рогатого скота по локусам
каппа-казеина, бета-лактоглобулина и мутации Blad (Оценка быков
черно-пестрой и голштинской пород.) : автореф. дис. ... канд. биол.
наук / Е.С. Усенбеков. - Всерос.НИИ генетики и разведения с.-х.
животных, Спб., Пушкин, 1995. - 16 с.
87. Хаертдинов, Р. Содержание белковых фракций и влияние их уровня на
технологические свойства молока / Р. Хаертдинов, М. Афанасьев, Э.
Губайдуллин // Молочное и мясное скотоводство. - 1997. - № 5. - С. 1620.
88. Хаертдинов, Р.А. Селекция на повышение белковости и улучшение
технологических свойств молока / Р.А. Хаертдинов, А.М. Гатауллин. –
Казань : Матбугат йорты, 2000. – С. 10-84.
89. Шендаков, А.И. Генетические аспекты модернизации молочного
скотоводства / А.И. Шендаков, Т.А. Шендакова// Вестник Орловского
государственного университета. – 2009. - №2(17). – С.30-35.
90. Шидловская, В.П. О содержании небелковых азотистых веществ и
определении содержания белка в молоке и молочных продуктах
методом Кьельдаля / В.П. Шидловская // Молочная промышленность. –
1987. - № 2. – С. 19-22.
94
91. Шидловская, В.П. Органолептические свойства молока и молочных
продуктов : справочник / В.П. Шидловская. – М. : Колос, 2000. – С. 1819, 37-38.
92. Шилер, Г.Г. Справочник технолога молочного производства / Г.Г.
Шиллер. – Санкт-Петербург : Гиорд, 2003. – С. 110-113.
93. Шимкус, А. Количество соматических клеток в молоке коров разных
черно-пестрых пород и их взаимосвязь с продуктивностью / А.
Шимкус, В.К. Юозайтене, А. Шимкене, А.К. Юозайтис, С.А. Грикшас
// Сборник научных трудов. Сельское хозяйство – проблемы и
перспективы. Гродненский гос. агр-ный ун-т. – 2006. – Т. 2. – С. 311317.
94. Alais, C. Milk proteins: biochemical and biological aspects / C. Alais, B.
Blanc // World Review of Nutrition and Dietetics. Ed. Separatum, Basel,
Switzerland. – 1975. - V. 20. – P. 66.
95. Alanpri, Buttazoni S.G. Scandium the effects of milk components and
cheese - productions ability // J. Dairy Sc.-1990. - V.73.3. -1990. -P. 241.
96. Alexander, L.J.
Isolation and characterization of the bovine betalactoglobulin gene / L.J. Alexander, C.W. Beattie, G. Hayes, M.J. Pearse,
A.F. Stewart, A.G. MacKinlay // Genbank submission number X14710. –
1992.
97. Aschaffenburg, R. Occurrence of different beta-lactoglobulins in cow's
milk / R. Aschaffenburg, J. Drewry // Nature. – 1955. – V.176. – P. 218219.
98. Aschaffenburg,
R. Genetics of the β-lactoglobulins of cow's milk / R.
Aschaffenburg, J. Drewry // Nature. – 1957. – V. 180. – P. 376-378.
99. Baranyi, M. Genetic polymorphism of milk proteins in Hungarian Spotted
and Hungarian Grey cattle: a possible new genetic variant of β-lactoglobulin
/ M. Baranyi, Z.S. Bösze, J. Buchberger, I. Krause // Journal of Dairy
Science. – 1993. – V. 76. – P. 630-636.
95
100.
Barbano, D.M. Seasonal variation in milk solids components
invarious regions on the US / D.M. Barbano, M.E. Dellavalle // Journal of
Dairy Science. – 1985. – V. 68. – P. 71-72.
101.
Bell, K. β-lactoglobulins / K. Bell, H.A. McKenzie // Nature. – 1964.
– V. 204. – P. 1275-1279.
102.
Bell, K. Isolation and properties of β-lactoglobulin Droughtmaster /
K. Bell, H.A. McKenzie, W.H. Murphy // Australian Journal of Sciences. 1966. – V. 29 ( 3) . – P. 87.
103.
Bell, K. β-lactoglobulin Droughtmaster: a unique protein variant / K.
Bell, H.A. McKenzie, W.H. Murphy, D.C. Shaw D.C. // Biochimica et
Biophysica Acta. - 1970. – V. 214. – P. 427-436.
104.
Bell, K. Bovine β-lactoglobulin E, F and G of Bali ( Banteng)
Cattle, Bos ( Bibos) javanicus / K. Bell, H.A. McKenzie, D.C. Shaw //
Australian Journal Biological Sciences. – 1981. – V.34. – P. 133-147.
105.
Bhattacharya, S.D. Inherited β-lactalbumin and β-lactoglobulin
polymorphism in Indian zebu cattle. Comparison of zebu and buffalo lactalbumins / S.D. Bhattacharya, A.K. Roychoudhury, N.K. Sinha, A. Sen //
Nature. – 1963. – V. 197. – P. 797-799.
106. Birens, M., J.Kosmane // La Technique laitiere. – 1984. – N. 3. – P. 22, 2527.
107. Bocca, A. Monitoraggio di alcuni parametric chimici a fisici di latti di
diverse regioni Italiane / A. Bocca, M. Delise, F. Fabietti, A. Gaudiano //
Sci. e teenth. Latt.-casearia. – 1985. – V. 36. – N. 2. – P. 160-170.
108. Boettcher, P.J. Development of an udder health index for selection based
on somatic cell score, udder conformation, and milking speed / P.J.
Boettcher, J.C.M. Dekkers, B.W. Kolstad // J.Dairy Sc. – 1998. - Vol. 81.
– N. 4. - P. 1157-1168.
109. Brade,
W.
Zuchtung gegen
Mastitisanfalligkeit /
Tierarztl.Umsch. – 1998. - Jg. 53 . – N. 9. - S. 539-546.
W.
Brade
//
96
110. Brade, W. Eutergesundheit, somatischer Zellgehalt und Milchqualitat / W.
Brade // Tierarztl.Umsch. – 2001. - Jg. 56. - N. 9. - S. 470-476.
111. Bramley, J. The control of coliform mastitis / J. Bramley // Proceedings. –
1986. – P. 4-17.
112. Braunitzer, G. Automatische sequenz analyse eines proteins ( βlactoglobulin AB) / G. Braunitzer, R. Chen, B. Schrank, A. Stangl //
Hoppe-Seyler's Zeitung für Phisiologie und Chemie. – 1972. – V.353. – P.
832-834.
113. Cassel, B.G. Using somatic cell score evaluations for management
decisions / B.G. Cassel // J.Dairy Sc. – 1994. - Vol.77. – N. 7. - P. 21302136.
114. Cersovsky, H. // Information fur die Milchindustrie der DDR. – 1987. –
N.28.
115. Chin,
D.
Application of mass spectrometry for the identification of
genetic variants of milk proteins / D. Chin, K.F. Ng-Kwai-Hang // Milk
Protein Polymorphism, IDF, International Dairy Federation, Brussels,
Belgium, Special Issue. – 1997. - no. 9702. – P. 334-339.
116. Conti, A. Bovine β-lactoglobulin H: isolation by preparative isoelectric
focusing in immobilized pH gradients and preliminary characterization / A.
Conti, L. Napolitano, A.M. Cantisani, R. Davoli, S. Dall'Olio // Journal of
Biochemical and Biophysical Methods . – 1988. – V. 16. – P. 205-214.
117. Davoli, R. A new β-lactoglobulin variant in bovine milk / R. Davoli, S.
Dall'Olio, D. Bigi // Scienza e Tecnica Lattiero-Casearia. – 1988. – V. 39.
– P. 439-442.
118. Eigel, W.N. Nomenclature of proteins of cow's milk: fifth revision / W.N.
Eigel, J.E. Butler, C.A. Ernstrom, H.M. Farrell Jr, V.R. Harwalkar, R.
Jenness, R.McL. Whitney // Journal of Dairy Science. - 1984. – V. 67. – P.
1599-1631.
97
119. Emanuelson, U. Usefulness of somatic cell counts in breeding for mastitis
resistance / U. Emanuelson // Kieler milchw. Forsch.-Ber. – 1985. - Т. 37.
– N. 4. – P. 497-500.
120. Erhardt, G. Genetic polymorphism of milk proteins in Polish Red Cattle: a
new genetic variant of β-lactoglobulin / G. Erhardt, J. Juszczak, L.
Panicke, H. Krick-Saleck // Journal of Animal Breeding and Genetics. –
1998. – V.115. – P. 63-71.
121. Ford, C.A. β-lactoglobulin expression in bovine mammary tissue / C.A.
Ford, M.B. Connett, R.J. Wilkins // Proceedings of the New Zealand
Society of Animal Production. – 1993. – V. 53. – P. 167-169.
122. Godovac-Zimmermann, J. Isolation and rapid sequence characterization of
two novel bovine β-lactoglobulins I and J / J. Godovac-Zimmermann, I.
Krause, M. Baranyi, S. Fischer-Frühholz,
J. Juszczak, G. Erhardt, J.
Buchberger, H. Klostermeyer // Journal of Protein Chemistry. – 1996. – V.
15. – P. 743-750.
123. Grignola, F. Relationships between evaluations of Canadian and USA
Holstein bulls for longevity and somatic cell score / F. Grignola, L.R.
Schaeffer // Livestock Product.Sc. – 2000. - Vol. 65. – N. 1/2. - P. 161165.
124. Grosclaude, F. Polymorphisme des lactoprotéines de Bovinés Népalais. I.
Mise en évidence, chez le yak, et caractérisation biochimique de deux
nouveaux variants: β-Lactoglobuline Dyak et caséine s1-E /
F.
Grosclaude, M.F. Mahé, J.C. Mercier, J. Bonnemaire, J.H. Teissier //
Annales de Génétique et de Sélection Animale. – 1976. – V. 8. – P. 461479.
125. Hayes, H.C. Mapping of the β-lactoglobulin gene and immunoglobulin M
heavy chain-like sequence to the homologous cattle, sheep and goat
chromosomes / H.C. Hayes, E.J. Petit // Mammalian Genome. – 1993. – V.
4. – P. 207-210.
98
126. Heeschen, W. Cell count and milk quality / W. Heeschen // Intern. dairy
federation. Annu. sessions in the Hague. – 1986. - S. l.
127. Heuven, H.C.M. Inheritance of somatic cell count and its genetic
relationship with milk yield in different parities / H.C.M. Heuven, H.
Bovenhuis, R.D. Politiek // Livestock Product. Sc. – 1988. - Т. 18. – N. 2.
– P. 115-127.
128. Hill, J.P. The polymorphism of the milk protein β-lactoglobulin. A review
/ J.P. Hill, W.C. Thresher, M.J. Boland, L.K. Creamer, S.G. Anema, G.
Manderson, D.E. Otter, G.R. Paterson, R. Lowe, R.G. Burr, R.L. Motion,
A. Winkelman, B. Wickham // Milk Composition, Production and
Biotechnology, Eds. Welch R.A.S. et al., CAB International, Wallingford,
UK. – 1997. – P. 173-213.
129. Hoogendoorn, M.P. Separation and gene frequencies of blood serum
transferrin, casein and beta-lactoglobulin loci of dairy cattle and their
effects on certain production traits / M.P. Hoogendoorn,
J.E. Moxley,
R.O. Hawes, H.F. MacRae // Canadian Journal of Animal Science. – 1969.
– V. 49. – P. 331-341.
130.
Ikonen T., Ruottinen O., Erhardt G., Ojala M. Allele frequencies of
the major milk proteins in the Finnish Ayrshire and detection of a new
kappa-casein variant // Anim. Genet. -1996. -№ 27.-P.179-181.
131. Jackson, A.C. Milk quality achemen / A.C. Jackson // J. Soc. Dairy
Technol. – 1982. – V. 35. – N. 2. – P. 64-71.
132. Jones, G.M. Guidelines for using the DHI somatic cell count program /
G.M. Jones, E. Hartling // Hoard’s Dairyman. – 1985. – T. 130. – N15. – p
842.
133. Kandzi, A. Die Effizeinz der seleution aufgrund der Einsatzleistungen von
Erstkalbskuhen. Mitt. 1. Genetische Parameter fur verschiedene Kriterien
der Einsatzleistung / A. Kandzi, P. Glodek // Zuchtungskunde. – 1990. - Т.
62. – N. 1. - S. 15-28.
99
134. Kaminski, S. Polimorfizm genow bialek mleka u bydla / S. Kaminski //
Rozpzawy I monogr Uniw. warminsko-mazurski w Olsztynie. Olsztyn. –
2001. – P. 6, 49-58.
135. Klei, L. Effects of milk somatic cell count on cottage cheese yield and
quality / L. Klei, J. Yun, A. Sapru, J. Lynch, D. Barbano, P. Sears, D.
Galton // J.Dairy Sc.. – 1998. - Vol. 81. – N. 5. - P. 1205-1213.
136. Klimscha, V. Schweizer Milchwirtschaft / V. Klimscha // Osterreichische
Milchwirtschaft. – 1985. – V. 40. – N. 21. - S. 505-509.
137. Kotowski, K. Ocena jakosci higienicznej mleka surowego w latach 19981999 / K. Kotowski, W. Smardz // Med.weter. – 2001. - R. 57. – N. 3. - S.
190-192.
138. Krause,
I.
Analysis of milk protein genetic variants and their
technological relevance / I. Krause, J. Buchberger, A. Lodes, H.
Klostermeyer // Proceedings "La certificazione dei prodotti alimentari: il
caso del latte", Soc. Editrice "Il mulino", Bologna, Italy. – 1995. – P. 277288.
139. Langstaff, G.W. Central testing in England and Wales and its impact on
milk quality / G.W. Langstaff // J. Soc. Dairy Technol. – 1985. – V. 38. –
N. 1. – P. 10-13.
140. Litwenzuk A. Polymorphism of milk proteins in black and Whit cows
Crosses with different share of Holstein-Friesian cattle blood // Anim. Sci.
Rep. and Repst. -1991. -N 7. -P.37-41.
141. Lum, S.L.
Polymorphisms of bovine β-lactoglobulin promoter and
differences in the binding affinity of activator protein-2 transcription factor
/ S.L. Lum, P. Dovc, J.E. Medrano // Journal of Dairy Science. – 1997. –
V. 80. – P. 1389-1397.
142. Lundén, A. Marked effect of β-lactoglobulin polymorphism on the ratio
of casein to total protein in milk / A. Lundén, M. Nilsson, L. Janson //
Journal of Dairy Science. – 1997. – V. 80. – P. 2996-3005.
100
143. Madsen, P. Genetic resistance to bovine mastitis / P. Madsen // Improving
genetic disease in barm animals. A seminar in the Community Programme
for the Coordination of Agricultural Research held in Brussels, Belgium.
November, 8-9, 1988. Sponsored by the Commission of the European
Communities, Directorate – General for Agriculture, Co-ordination of
Agricultural Research (edited
by
Zjipp, A.J. van der; Sibesmd, W.)
Dordrecht, Netherlands; Kluwer Academic Publishers. – 1989. – P. 169177 ( Current Topics in Veterinary Medicine and Animal Science, 52) .
144. Mariani, P. Distribuzione delle varianti genetiche delle caseine e della
beta-lattoglobulina nelle vacche di razza Reggiana / P. Mariani, V. Russo
// Rivista di Zootecnia. – 1971. – V. 44. – P. 310-321.
145.
Macha J. Genetika analza kappa-kazeinu v mlece skotu // Zivoc
vyroba. -1992. -37. -N 8. -C. 645-651.
146. Mellenberger, R. Dept. of Animal Sciences / R. Mellenberger// Michigan
State University. – 2001.
147. Menta, G. La selezione per la dimunuzione delle cellule somatiche in
Europa / G. Menta // Pezzata Rossa. – 1998. - An. 9. – N. 3. - P. 19-21.
148. Meyer, F. Untersuchungen uber Zusammenhange zwischen Milchleistung,
Eutergesundheit, Milchprotein- und Blutproteinpolymorphismen bei
Rindern / F. Meyer, G. Erhardt, K. Failing, B. Senft // Zuchtungskunde. –
1990. - Т. 62. – N. 1. - S. 3-14.
149. Meyer,
H. Zum Polymorphismus der β-laktoglobuline in deutschen
rinderrassen / H. Meyer // Zuchthygiene. – 1966. – V. 1( 2) . – P. 49-56.
150. Miller, R.H. Traits for sire selection related to udder health and
management / R.H. Miller // J. Dairy Sc. – 1984. - Т. 67. – N. 2. - P. 495471.
151. Miller, R.H. Relationship between milk somatic cell count and milk yield /
R.H. Miller, M.J. Paape // 24th Annual Meeting National Mastitis council.
Las Vegas, Nevada. – February 15-17, 1985. – P. 60-68.
101
152. Miller, R.H. Relationship between milk somatic cell count and milk yield /
R.H. Miller, M.J. Paape // Proceedings. Arlington, Va. – 1987. - P. 60-72.
153. Monardes, H.G. Heritabilities of measures of somatic cell count per
lactation / H.G. Monardes, B.W. Kennedy, J.E. Moxley // J. Dairy Sc. –
1983. - Т. 66. - N 8. - P. 1707-1713 .
154. Ng-Kwai-Hang,
K.F.
Genetic
polymorphism
of
milk
proteins:
relationships with production traits, milk composition and technological
properties / K.F. Ng-Kwai-Hang // Canadian Journal of Animal Science. –
1998. – V. 78 ( Suppl.1) . – P. 131-147.
155. Nicolet, C. La qualite du lait: tojours plus / C. Nicolet, S. Quennec, R.
Nicolet, L. Poirot // Rev. ENIL. – 1988. – N. 123. – P. 24-42.
156. Payment system for ex farm milk in the Netherlands // IDF. – 1986. –
Com. A. – gr. A-8. – Doc. 92. – P. 1-9.
168.Poli M.A.,
Antonini A.G.
Genetic strcture of milk proteins
in
Argentinean Holstein and Argentinean cruel cattle //Heredities.- 1991. -N 2. P. 177-182.
157. Politis, I. Effects of somatic cell count and milk composition on cheese
composition and cheese making efficiency / I. Politis, K.F. Ng-KwaiHang // J. Dairy Sc. – 1988. - Т. 71. – N. 7. - P. 1711-1719.
158. Politis, I. Association between somatic cell count of milk and cheeseyielding capacity / I. Politis, K.F. Ng-Kwai-Hang // J. Dairy Sc. – 1988. Т. 71. – N. 7. - P. 1720-1727.
159. Powell, R.L. Relationship between United States and Canadian genetic
evaluations of longevity and somatic cell score / R.L. Powell, P.M.
VanRaden, G.R. Wiggans // J.Dairy Sc. – 1997. - Vol.80. – N. 8. - P.
1807-1812.
160. Préaux, G. The aminoacid sequence of goat β-lactoglobulin / G. Préaux,
G. Braunitzer, B. Schrank, A. Stangl //
Hoppe-Seyler's Zeitung für
Phisiologie und Chemie. – 1979. – V. 360. – P. 1595.
102
161. Producer’s prices, July 1984 // Milk producer. – 1984. – V. 31. – N. 8. – P.
27.
162. Puhan, Z. Genetic variants of milk proteins and cheese yield / Z. Puhan,
E. Jakob // IDF, International Dairy Federation, Brussels, Belgium, Special
Issue. – 1994. - no. 9402. – P. 111-122.
163. Rkneau, J.K. Using dhi somatic cell counts / J.K. Rkneau // Proceedings. –
1986. – P. 73-85.
164.
Robitaille G. Influence of k-casein and
lactoglobulin genetic
variants on the heat stability of milk // J. Dairy Res. -1995. -V.62.-#4.P.593-600.
165. Ronda, R. Influencia del semental sobre la prevalencia de mastitis en vacas
Holstein Friesian / R. Ronda, E. Martinez, O. Perez-Beato, A. Granado //
Rev. Salud anim. – 1985. - Т. 7. – N. 3. - P. 339-346.
166.
Ron M., Yoffe O., Ezra E., Weller J. Determination of effects of milk
protein genotype on production traits of Israeli Holsteins // J. Dairy Sci. 1994. -V.77.-P.1106-1113.
167. Russo, V. Polimorfismo genetico delle caseine e della β-lattoglobulina
nella razza bovina Modenese / V. Russo, P. Mariani //
Rivista di
Zootecnia. – 1972. – V. 45. – P. 43-51.
168. Russo, V. Polimorfismo delle proteine del latte e relazioni tra varianti
genetiche e caratteristiche di interesse zootecnico, tecnologico e caseario /
V. Russo, P. Mariani // Rivista di Zootecnia e Veterinaria. - 1978. – V. 6 (
5, 6) . – P. 289-304, 365-379.
169. Saperstein, G.
Taking the team approach to solving staphylococcal
mastitis infection / G. Saperstein, L.S. Hinckley, J.E. Post // Veter. Med. (
Edwardsville) . – 1988. - Т. 83. - N. 9. – P. 939-947.
170. Sender, G. Selection of cattle against mastitis - economic value of somatic
cell count / G. Sender, M. Lukaszewicz, L. Rosochowicz, Z. Dorynek //
Anim.Sc.Papers Rep. – Warszawa. – 1996. - Vol. 14. – N. 3. - P. 173-176.
103
171. Sender, G. Wykorzystanie liczby komorek somatycznych w selekcji bydla
mlecznego / G. Sender // Przegl.hodowl. – 1998. - R. 66. – N. 6. - S. 8-10.
172.
Schaar J.Studies on k -casein and
β-lactoglobulin genetic
polymorphism and on milk plasma: Thesis // Swedish University of
Agricultural Sciences .-Uppsala.1986.-71p
173. Sommerfeldt, J.T. Biweekly variability of herd milk components / J.T.
Sommerfeldt // Journal of Dairy Science. – 1985. – V. 68. – N. 1. - P. 72.
174. Staal, P.F.J. Legislation / atatutory regulations applicable to pasteurized
fluid milk in a seleeted number of countries. – Monograph on pasteurized
milk / P.F.J. Staal // Bull. IDF. – 1986. – N. 200. – P. XIV, 71-79.
175. Strzalkowska,
N.
Effects
of
k-casein
and
β-lactoglobulin
loci
polymorphism, cows’age, stage of lactation and somatic cell count on daily
milk yield and milk composition in Polish Black-and-White cattle / N.
Strzalkowska, J. Krzyzewski, L. Zwierzchowski, Z. Ryniewicz // Animal
Science Papers and Reports. – 2002. – V. 20. – P. 1, 21-35.
176. Sutherland, B. Guality Assurance in the New Zeeland export dairy
Industry / B. Sutherland // Bull. IDF. – 1986. – N. 1999.
177.
Tejedor T.,
Alfarriba J.,
Zarazaga J. Estimacion del efecto
de
arrastre en loci de proteinas lacteas estudio en genado Holstein-Friesian
explotado en Espana //"Arch zootecn",1987. -N 135. -P. 121-136.
178. Trappmann, W. Zuchterische Moglichkeiten zur Verbesserung der
Eutergesundheit und Milchqualitat / W. Trappmann // Vortrage. Munster,
Hiltrup. – 1987. - S. 151-157.
179. Trappmann, W. Untersuchungen zur Veranderung des monatlichen
Zellgehaltes der Milch / W. Trappmann // Zuchtungskunde. – 1994. - Bd.
66. – N. 1. - S. 49-53.
180. Vrech, E. Relationships of k-casein, β-lactoglobulin and β-lactoalbumin
polymorphisms with estimated breeding values for milk traits in Italian
Friesian and Italian Simmental bulls / E. Vrech, M. Falaki, A. Prandi, C.
Corradini, A. Pitotti, A. Formigoni, S. Massart, D. Portetelle, A. Burny, N.
104
Gengler, R. Renaville // Zootecnica e Nutrizione Animale. – 1997. – V. 23.
– P. 117-125.
181. Wagner, V.A.
DNA variants within the 5'-flanking region of milk
protein-encoding genes. II. The β-lactoglobulin-encoding gene / V.A.
Wagner, T.A. Schild, H. Geldermann // Theoretical and Applied Genetics.
– 1994. – V.89. – P. 121-126.
182. Walawski, K. Zwiazek miedzy polimorfizmem beta-lactoglobuliny ( BLG)
i
zroznicowaniem
wskaznikow
diagnostyczych
charakteryzujacych
podkliniczne stany mastitis u krow rasy czarno-bialej ( Association
between beta-lactoglobulin ( BLG) polimorfism and diagnostic indicators
of subclinical mastitis in Black-and-White cows) . In Polish with English
summary / K. Walawski, U. Czarnik, T. Zabolewicz // Roczniki Naukowe
Zootechniki. – 1997. – V. 24 ( 4) . – P. 9-22.
183. Walawski, K. Beta-lactoglobulin and kappa-casein polimorfism in relation
to production traits and technological properties of milk in the herd of
Polish Black-and-White cows / K. Walawski, G. Sowinski, U. Czarnik, T.
Zabolewicz // Genetica Polonica. – 1994. – V. 35. - P. 93-108.
184. Weiß, G. Ein neues β-Lactoglobulin des Rindes / G. Weiß // Annual
Scientific Report, 1979. Inst. für Milchw., Süddentsche Versuchs und
Forschung für Milchw., Weihenstephan Technische Univ., Munchen,
Germany. – 1980. – V. 84. – P. 144.
185. Wyatt, S.T. Understanding and using somatic cell counts / S.T. Wyatt //
Proceedings. – 1985. – P. 39-45.