НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ. СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ ЛЕКЦИЯ 2 План лекции КемГУ LOGO 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТРОЕНИЯ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ 2. СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ ДНК 3. СТРОЕНИЕ, ФУНКЦИИ, РАЗНООБРАЗИЕ РНК кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO Рекомендуемая литература УРОВНИ ТОНКОЙ СТРУКТУРНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ХРОМАТИНА СПб., 2013 http://www.cytspb.rssi.ru/education/chikhirzhina_structure_chromatine_2013.pdf ЖИМУЛЕВ И.Ф. Общая и молекулярная генетика. Издатель: Сибирское университетское издательство, 2007 http://biblioclub.ru/index.php?page=book_view&book_id=57409 ГЛАВА 6.2 МАТЕРИАЛЫ САЙТА КАФЕДРЫ ГЕНЕТИКИ genetics.kemsu.ru Учебно-методические материалы/ Список дисциплин/ Молекулярная биология для магистров/ Слайд-лекция 2 кафедра генетики Your company slogan Словарь КемГУ LOGO Хроматин – это вещество хромосом – комплекс ДНК и белков Нуклеиновые кислоты – это линейные биополимеры (полинуклеотиды), построенные из мононуклеотидов, соединенных фосфодиэфирными связями ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота РНК – рибонуклеиновая кислота Нуклеозиды – содержат азотистое основание и рибозу или дезоксирибозу Нуклеотиды – это фосфаты нуклеозидов кафедра генетики Your company slogan СТРОЕНИЕ НУКЛЕИОНЫХ КИСЛОТ Лекция 2. НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ. СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ Нуклеотид КемГУ LOGO Мономеры НК Состоят из гетероциклического азотистого основания, моносахарида (пентозы) и остатка фосфорной кислоты фосфатная группа присоединена к 5’-атому углерода моносахаридного 5'-фосфоэфирной связью основание – к 1’-атому N-гликозидной связью остатка кафедра генетики Your company slogan Номенклатура нуклеотидов Азотистое Нуклеозид основание Нуклеотид КемГУ LOGO ОдноТрёхбуквенное буквенный обозначение код Аденин Аденозин Аденозинмонофосфат АМФ А Гуанин Гуанозин Гуанозинмонофосфат ГМФ G Цитозин Цитидин Цитидинмонофосфат ЦМФ С Урацил Уридин Уридинмонофосфат УМФ U Тимин Тимидин Тимидинмонофосфат ТМФ T кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO В зависимости от числа остатков фосфорной кислоты различают: нуклеозидмонофосфаты (НМФ), нуклеозиддифосфаты (НДФ), нуклеозидтрифосфаты (НТФ) кафедра генетики Your company slogan Азотистые основания КемГУ LOGO кафедра генетики Your company slogan Сахара КемГУ LOGO кафедра генетики Your company slogan ДНК Лекция 2. НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ. СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ Первичная структура ДНК КемГУ LOGO Одноцепочечная – чередование дезоксирибонуклеозидмонофосфатов (дНМФ), связанных фосфодиэфирными связями кафедра генетики Your company slogan Вторичная структура ДНК КемГУ LOGO Двухцепочечная – две комплементарные, антипараллельные цепи ДНК, связанные водородными связями кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO кафедра генетики Your company slogan Формы вторичной структуры КемГУ LOGO В зависимости от рН среды, ионной силы, концентрации воды и т.п. конфигурация двойной спирали может меняться. Существует более 10 форм ДНК, которые различаются: 1. количеством пар оснований приходящихся на один виток 2. углом наклона оснований к вертикальной оси при транскрипции основная кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO Форма SBS (side by side) лишена взаимозакрученности в двойную спираль, важна для биосинтеза ДНК при репликации кафедра генетики Your company slogan Третичная структура ДНК КемГУ LOGO ХРОМАТИН – комплекс белков и ДНК Укладка, обеспечивающая компактизацию и функционирование молекул кафедра генетики Your company slogan Третичная структура ДНК КемГУ LOGO ЭУКАРИОТЫ УРОВНИ: 1. Нуклеосомный (гистоны Н2а,Н2b, Н3, Н4) 2. Соленоидный (гистон Н1) 3. Петлевой (негистоновые белки) 4. Метафазная хромосома кафедра генетики Your company slogan Негистоновые белки КемГУ LOGO кафедра генетики Your company slogan Третичная структура ДНК μ – микрометр (10-6) кольцевая ДНК КемГУ LOGO ПРОКАРИОТЫ 2 3 УРОВНИ 1. Изгиб ДНК (гистонподобные белки HU, H-NS) 2. Супервитки ( белок SMС) 3. Суперспирализация (топоизомеразы) кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO ДНК как базовая структурная единица наследственности, является основополагающим ключевым звеном генома, первичным носителем наследственной информации кафедра генетики Your company slogan Функции ДНК КемГУ LOGO Сохранение наследственной информации Передача наследственной информации потомкам Реализация генетической информации кафедра генетики Your company slogan РНК Лекция 2. НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ. СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ Особенности строения РНК КемГУ LOGO 1.Одноцепочечная молекулы 2. Сахар – рибоза 3. Нуклеотиды – А, Г, Ц, У 4. Молекулы линейные кафедра генетики Your company slogan Нуклеотиды, сахара В урациле отсутствует метильная группа, которая есть в тимине КемГУ LOGO Замена атома водорода на гидроксильную группу кафедра генетики Your company slogan Минорные нуклеотиды КемГУ LOGO Известно более 60 минорных оснований. Особенно они разнообразны в молекуле тРНК кафедра генетики Your company slogan Вторичная структура РНК КемГУ LOGO структура, образуемая спаренными основаниями на однонитевой молекуле РНК для образования вторичной структуры необходимо наличие палиндромных последовательностей, специальных обращенных повторов -АГАЦТГАГТЦТ-ТЦТГАЦТЦАГА- Спираль, петля Петля: шпилька, псевдоузел кафедра генетики Your company slogan Вторичная структура РНК КемГУ LOGO Биологическая роль вторичной структуры: 1. структурная (рРНК, тРНК) 2. регуляторная (sРНК, рибозимы) 3. поддержание стабильности РНК кафедра генетики Your company slogan Третичная структура РНК КемГУ LOGO Обеспечивается белками и отдаленными комплементарными взаимодействиями нуклеотидов. При этом возникают большие внутриклеточные частицы – рибосомы, информосомы третичная структура кафедра генетики Your company slogan LOGO Тип Размер в нуклеотидах Доля в общей структуре РНК Функция м РНК матричная 100-100 000 5% Перенос информации о структуре пептида т PHK транспортная 70-95 15% Транспорт аминокислот к месту трансляции р РНК рибосомальная 100-500 000 80% Формирование рибосом, участие в синтезе белка 2% Регуляция процессинга, экспрессии генов, транспорта мРНК и др. малые РНК 20-300 Your company slogan КемГУ LOGO Вторичная и третичная структуры рРНК Пространственная укладка третичной структуры 40Sсубъединицы Молекула рРНК имеет вторичную структуру в виде спиральных участков, соединенных изогнутой одиночной цепью Третичная структура рРНК имеет форму палочки или клубка и составляет скелет рибосомы: снаружи на нее нанизываются рибосомные белки кафедра генетики Your company slogan Функции рРНК КемГУ LOGO 1. Участие в образовании рибосом 2. Регуляция трансляции через взаимодействие с тРНК, мРНК, факторами трансляции и ферментными системами кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO Вторичная и третичная структура тРНК вторичная структура клеверный лист третичная структура бумеранг кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO Акцепторный участок – последовательность CCA на 3'-конце одинакова для всех тРНК. К концевому аденозину (А) присоединяется аминокислота. Антикодоновая петля – несет триплет нуклеотидов комплементарный кодону в мРНК Петля дигидроуридина – обеспечивает связь с аминоацил-тРНКсинтетазой Петля псевдоуридина – содержит последовательность 5 '-TΨЦГ-3', этой петлей тРНК взаимодействует с рибосомой кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO Характерная особенность т РНК – наличие минорных нуклеотидов: тимина (T), псевдоуридина (Ψ), дигидроуридина (ДГУ) необходимы для узнавания ферментами и для защиты от действия рибонуклеаз поэтому тРНК долгоживущие, в отличие от мРНК кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO Функции т РНК 1. активирование и перенос аминокислот к месту трансляции белка 2. адапторная функция – позволяет перевести «язык» генетического кода (последовательность нуклеотидов) в «язык» структуры белковой молекулы (аминокислотная последовательность) кафедра генетики Your company slogan мРНК прокариот и эукариот КемГУ LOGO OFR (open reading frame) – открытые рамки считывания генов UTR (untranslated region ) – нетранслируемый регион AUG – инициаторный кодон трансляции UAA, UAG, UGA – стоп-кодоны трансляции кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO мРНК эукариот первичная структура cap (шапочка) – модифицированный гуанозиновый нуклеотид, который добавляется на 5'- конец mРНК. Необходим для узнавания мРНК при инициации трансляции, а также для защиты от 5'-нуклеаз 5’UTR, 3’UTR – нетранслируемые области расположенные до старткодона и после стоп-кодона, которые не кодируют белок. Регулируют стабильность мРНК, локализацию мРНК и эффективность трансляции. CDS – кодирующие участки, начинаются со старт-кодона и заканчиваются одним из трёх стоп-кодонов Poly-А – длинная (до 300 нуклеотидов) последовательность адениновых оснований, на 3'-«хвосте» мРНК, защищает молекулу от деградации. кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO кафедра генетики Your company slogan Вторичная структура мРНК КемГУ LOGO Формируются за счет внутримолекулярных взаимодействия комплементарных нуклеотидов Линейная молекула «складывается», водородные связи возникают между разными участками одной молекулы. Назначение: замедление деградации mРНК, регуляция трансляции. Псевдоузлы служат для программированного изменения рамки считывания генов. стебель-петля псевдоузел кафедра генетики Your company slogan Третичная структура мРНК КемГУ LOGO Представляет собой нить, намотанную на информоферы, белковые глобулы, состоящие из информатинов кафедра генетики Your company slogan Функции мРНК КемГУ LOGO перенос информации из ядра клетки в цитоплазму для синтеза белков мРНК является комплементарной копией генов, кодирующих белки кафедра генетики Your company slogan Малые РНК. Типы, функции КемГУ LOGO snoРНК (small nucleolar RNAs) – малые ядрышковые РНК scaРНК (small Cajal-body specific RNAs) – малые РНК из телец Кахаля snРНК (small nuclear RNAs) – малые ядерные РНК miРНК (microRNAs) – микро-РНК siРНК (small interfering RNAs) – малые интерферирующие РНК tasiРНК transacting siRNAs) – трансдействующие siРНК; piРНК (Piwi-interacting RNAs) – РНК, ассоциированные с белками семейства Piwi rasiРНК (repeat-associated siRNAs) – малые интерферирующие РНК, ассоциированные с повторами кафедра генетики Your company slogan snoРНК КемГУ LOGO (малые ядрышковые РНК) Локализованы в ядрышке Принимают участие в процессинге (созревании) рРНК кафедра генетики Your company slogan snРНК (малые ядерные РНК) КемГУ LOGO Сплайсинг – вырезание интронов из мРНК Функции: 1. Участвуют в процессинге пре-мРНК 2. Расщепление полицистронных мРНК 3. Поддержание целостности теломер 4. Регуляция транскрипции Your company slogan КемГУ LOGO scРНК (малые цитоплазматические РНК) Работают в цитоплазме Типы: miРНК (микроРНК) – вызывают трансляционную репрессию или деградацию мРНК рiРНК (пахитенные РНК) – экспрессируются в генеративных клетках млекопитающих, образуют комплексы с белками piwi (piRC), участвуют в сайленсинге транскрипции генов в клетках зародышевого пути при сперматогенезе, принимают участие в сайленсинге РНК путем образования RISC (RNA-induced silencing complex, или siRNP). кафедра генетики Your company slogan КемГУ LOGO 1 2 3 4 1. Белок Dicer разрезает двуцепочечную РНК. 2. Образуются siРНК. 3. siРНК связываются с каталитически активными белками (нуклеазами, RISC). 4. Комплекс RISC и siRNA специфически разрушает мРНК и предотвращает трансляцию siRNA (малые интерферирующие РНК) – осуществляют деградацию мРНК (запуская РНК-интерференцию) Your company slogan Функции scРНК КемГУ LOGO кафедра генетики Your company slogan