В ходе выполнения проекта по Соглашению с Минобрнауки России о... доставлении субсидии

В ходе выполнения проекта по Соглашению с Минобрнауки России о предоставлении субсидии
от «28» ноября 2014 г. № 14.587.21.0004 с Минобрнауки России в рамках федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на
2014 - 2020 годы» в период с 28.11.14 по 31.12.2014 выполнялись следующие
работы на тему «Белковый инжиниринг для Оптогенетики и Нейромедицины»:
1. Выполнен аналитический обзор современной научно-технической, нормативной, методической литературы, затрагивающей научно техническую проблему, исследуемую в рамках научных исследований,
2. Выполнены патентные исследования в соответствии с ГОСТ Р 15.011-96
3. Создана методология высокопроизводительной функциональной экспрессии управляемых светом белков для оптогенетического контроля из семейства родопсиновых белков.
4. Получена структура натриевого насоса KR2 в «красном» состоянии (в состоянии, когда
максимум поглощения белка находится на 523 нм).
5. Подготовлена публикация по результатам исследований, находится на рассмотрении
6. Разработан отчет о научных исследованиях.
К работе по проекту привлекался иностранный партнёр - Институт Комплексных Систем 6. Исследовательского Центра г. Юлих, Германия, выполнявшего следующие работы:
7. Создан и описан инженерный план установки для исследований фотоцикла белков с
помощью флэшфотолиза с опцией для проведения спектроскопических исследований с
микрокристаллами белков.
8. Проведены эксперименты по клонированию, экспрессии, а в случае достаточного
уровня экспрессии, по очистке, функциональной характеризации и кристаллизации 3 новых натриевых насосов (UniProt ID: F6K461, I0IBH0, I0IGJ9) отличающихся от натриевого
насоса KR2 фотоциклами, отсутствием мест связывания каротиноидов (дополнительных
антенн улавливания фотонов).
9. Разработан аннотационный отчет.
При этом были получены следующие результаты:
Создана и описана методология высокопроизводительной функциональной экспрессии
управляемых светом белков для оптогенетического контроля из семейства родопсиновых белков.
Получена структура натриевого насоса KR2 в «красном» состоянии (в состоянии, когда
максимум поглощения белка находится на 523 нм) с разрешением 2.2 ангстрем.
Иностранный партнёр, Институт Комплексных Систем – 6 Исследовательского Центра г.
Юлих, Германия был привлечён для осуществления комплементарных исследований в рамках
настоящего проекта. Иностранная исследовательская группа обладает уникальной экспертизой
в области флэшфотолиза фотоактивных белков, их экспрессии, очистки и кристаллизации.
Создан и описан инженерный план установки для исследований фотоцикла белков с помощью флэшфотолиза с опцией для проведения спектроскопических исследований с микрокристаллами белков. Инженерный проект установки для исследований фотоцикла белков с помощью флэшфотолиза имеет следующие основные характеристики:
1. предусматривает перестраиваемый источник излучения с широким спектральным диапазоном (от мягкого ультрафиолета до ближнего инфракрасного излучения).
2. Основным назначением проектируемой установки является исследование кинетики изменения оптических спектров поглощения фотоактивируемых белков.
3. Проект предусматривает, что временное разрешение фиксирования кинетиче1
ских параметров должно достигать 10 нм.
4. Проектируемая установка обладает динамическим диапазоном измерений в
масштабах от наносекунд до секунд. Данные снимаются в логарифмической шкале. Предусмотрен автоматический режим сбора данных.
Произведены эксперименты по клонированию, экспрессии, а в случае достаточного
уровня экспрессии, по очистке, функциональной характеризации и кристаллизации 3 новых натриевых насосов (UniProt ID: F6K461, I0IBH0, I0IGJ9) отличающихся от натриевого насоса KR2
фотоциклами, отсутствием мест связывания каротиноидов (дополнительных антенн улавливания фотонов).
Полученные результаты соответствуют техническим требованиям к выполняемому проекту и обладают несомненной научной новизной.
Комиссия Минобрнауки России признала обязательства по Соглашению на отчётном этапе
исполненными надлежащим образом.
2