ГЛЮКОЗА гексокиназный метод Назначение. Для количественного определения in vitro концентрации глюкозы в сыворотке, плазме, моче или спинно-мозговой жидкости. Кат. No. GL 3816 R1 Буфер/Коэнзим 4 х 51 мл R2 Дилюент 3 х 20 мл Энзим реактив 3 х 1 мл Данный набор рассчитан на проведение до 1170 тестов на биохимическом анализаторе Сапфир400. Принцип метода. Основан на полной утилизации глюкозы при помощи двух последовательных ферментативных реакции с участием гексокиназы и глюкозо-6фосфат дегидрогеназы. гескокиназа Глюкоза + АТФ --------> Глюкоза-6-фосфат + АДФ Глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа Глюкоза-6-фосфат + НАД+ ----------------------------> глюконат-6-фосфат + НАДН + H+ Сбор и подготовка проб. Сыворотка, литий гепаринизированна плазма, моча или спинно-мозговая жидкость. Если сыворотка или плазма не могут быть проанализированы в течение 1 часа после сбора, необходимо отделить сыворотку или плазму от клеток крови. Для подавления гликолиза рекомендуется добавить в образцы ингибитор (NaF или KF). В таком виде образцы стабильны в течение 24 часов при температуре хранения +15 +25 град.С, и в течение 7 суток при температуре хранения +4 град.С. Образцы мочи стабильны в течение 24 часов при их хранении в затемненном флаконе. Состав реактивов. R1 Буфер/Коэнзим Пипес 100 ммоль/л; рН 7,6 АТФ 4 ммоль/л НАД+ 3 ммоль/л Ионы магния 15 ммоль/л Азид натрия R2 Энзим реактив Гексокиназа ≥25 Ед/мл Глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа ≥75 Ед/мл Азид натрия Меры предосторожности Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетируйте ртом. Соблюдайте обычные при лабораторных процедурах меры предосторожности. GL 3816 Стабильность и приготовление реактива и стандарта. R1 Буфер/Коэнзим Реактив готов для использования, стабилен до окончания срока годности при температуре хранения +2..+8°C. Рабочий реагент R1 стабилен на борту анализатора при температуре примерно +10°C приблизительно в течение 4 недель. R2 Энзим реактив Содержимое флакона стабильно до окончания срока годности при температуре хранения +2..+8°C. Рабочий реагент. Для приготовления рабочего реагента R2 перенесите содержимое флакона Энзим реактива во флакон Дилюента R2. Несколько раз ополосните флакон с энзим реактивом содержимым флакона дилюента R2, каждый раз переливая во флакон дилюента R2. Рабочий реагент R2 стабилен в течение 3 месяцев при температуре хранения +2 - +8оС, либо в течение 2 недель при температуре хранения +15 25оС в защищенном от света месте. Рабочий реагент R2 стабилен на борту анализатора при температуре примерно +10°C приблизительно в течение 4 недель. Калибровка и контроль качества. Выполнение калибровки можно провести либо с использованием калибровочной мультисыворотки RANDOX уровень 2 (CAL 2350) или уровень 3 (CAL 2351), либо с использованием мультикалибратора RANDOX (MC 1382). Используйте значения для метода Hexokinase. Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558), либо RANDOX мультиконтроль уровень 1 (MC 1379), уровень 2 (MC 1380), уровень 3 (MC 1381). Для контроля мочи рекомендуется использовать либо RANDOX контрольную мочу уровень 2 (AU 2352) и уровень 3 (AU 2353), либо RANDOX контрольную мочу на воспроизводимость уровень 2 (UC 1502) и уровень 3 (UC 1503). Для контроля спинно-мозговой жидкости рекомендуется использовать RANDOX контроль спинно-мозговой жидкости уровень 2 (CF 1500) и уровень 3 (CF 1501). Значения нормы в пробах. В сыворотке и плазме 3,9 – 5,8 ммоль/л В моче 0 – 1,1 ммоль/л В спинно-мозговой жидкости 2,8 – 4,2 ммоль/л Линейность. Метод линеен до концентрации глюкозы в пробе 26 ммоль/л. ГЛЮКОЗА GL 3816 гексокиназный метод Программирование на биохимическом анализаторе Сапфир-400 с русскоязычной программой Программирование на биохимическом анализаторе Сапфир-400 с англоязычной программой Название Item Name Глюк. (пример) GLUC (пример) ИНФОРМАЦИЯ О ДАННЫХ Единицы ммоль/л Точность 1 DATA INFORMATION Units mmol/l Decimals 1 Параметры анализа Тип END Осн.ДВ 340 Всп.ДВ 380 ANALYSIS TYPE Main W.Length Sub W.Length Коррекция Наклон СДВИГ Y= 1 X+ 0 CORR SLOPE INTER Y= 1 X+ 0 CALIBRATION TYPE Linear STANDARD #1 14.7 (пример) Калибровка Тип Линейный 1 Стандарт #1 14.7 (пример) NORMAL RANGE Значения норм Сыворотка Моча Плазма СМЖ Диализ Другое END 340 380 Мужчина Нижн Верхн 3.9 5.8 0 1.1 3.9 5.8 2.8 4.2 Женщина Нижн Верхн 3.9 5.8 0 1.1 3.9 5.8 2.8 4.2 Serum Urine Plasma CSF Dialysis Other ASPIRATION KIND ○ Single Методика анализа Тип ○ 1-реаг ● 2-реаг ОБЪЕМ 3 Образец 160 Реагент 1 40 Реагент 2 μl SAMPLE REAGENT 1 VOL REAGENT 2 VOL R1 Blank ОБРАБОТКА ДАННЫХ Считывание Старт Стоп 52 54 Основн. 29 31 Дополн. HIGH 5.8 1.1 5.8 4.2 FEMALE LOW HIGH 3.9 5.8 0 1.1 3.9 5.8 3.8 4.2 ● Double VOLUME 3 160 40 μl ● Water-Blank ○ R1-Blank 1 DATA PROCESS READ START 52 MAIN 29 SUB Предел абсорбции Нижн. 0 Верхн. 2.5 ПРЕДЕЛ КОН.Т. 2.5 ЛИНЕЙНОСТЬ (%) 15 END 54 31 ABSORBANCE LIMIT LOW. 0 HIGH 2.5 ENDPOINT LIMIT 2.5 LINEAR CHECK (%) 15 Авторазвеление образца Развести ● 99:Разв.1 ○ 100:Разв.2 Повтор с авторазведением ● вкл ○ выкл MALE LOW 3.9 0 3.9 2.8 Dilution Diluent Авторазведение по заданному пределу абсорбции Нижн. ○ вкл ● выкл Верхн ○ вкл ● выкл Предел линейности методики ○ вкл ● выкл Нижн Сыворотка Моча Плазма СМЖ Диализ Другое ● вкл ○ выкл Верхн 26 26 26 26 ● 99:Dil1 Auto Rerun SW ● On ○ Off ○ 100:Dil.2 Auto Rerun Condition (Absorbance) Absorbance Range Lower ○ On ● Off Higher ○ On ● Off Auto Rerun Range (Result) ○ On ● Off ● On ○ Off LOW HIGH 26 Serum 26 Urine 26 Plasma 26 CSF Dialysis Other