ДРОБИЛОВА ОЛЬГА МИХАЙЛОВНА ТЕРМОДИНАМИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ КООРДИНАЦИОННЫХ РАВНОВЕСИЙ β-АЛАНИНА, L- СЕРИНА, D,L-α-АЛАНИЛ-D,L-α-АЛАНИНА, ГЛИЦИЛ-ГЛИЦИНА
реклама
На правах рукописи ДРОБИЛОВА ОЛЬГА МИХАЙЛОВНА ТЕРМОДИНАМИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ КООРДИНАЦИОННЫХ РАВНОВЕСИЙ β-АЛАНИНА, LСЕРИНА, D,L-α-АЛАНИЛ-D,L-α-АЛАНИНА, ГЛИЦИЛ-ГЛИЦИНА И ГЛИЦИЛ-АСПАРАГИНА С ИОНАМИ 3d-ПЕРЕХОДНЫХ МЕТАЛЛОВ(II) В ВОДНОМ РАСТВОРЕ 02.00.04 – физическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Иваново - 2011 Работа выполнена на кафедре аналитической химии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Ивановский государственный химико-технологический университет». Научный руководитель: кандидат химических наук, профессор Кочергина Людмила Александровна Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор Козловский Евгений Викторович доктор химических наук, профессор Никольский Виктор Михайлович Ведущая организация: Российский химико-технологический университет им. Д.И.Менделеева Защита состоится «____» ___________ 2011 г. в ___ часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 212.063.06 при Ивановском государственном химико-технологическом университете по адресу: 153000, г. Иваново, пр. Ф. Энгельса, 7, ауд. Г 205. Тел. (4932) 32-54-33 факс (4932) 32-54-33 e-mail: dissovet@isuct.ru С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «ИГХТУ» по адресу: 153000, г. Иваново, пр. Ф. Энгельса, 10. Автореферат разослан «___» ____________ 2011 г. Ученый секретарь совета по защите докторских и кандидатских диссертаций _____________________________ Егорова Е.В. 2 I. Общая характеристика работы. Актуальность. Всестороннее изучение аминокарбоновых кислот и пептидов является в настоящее время весьма актуальным. Эти соединения обладают уникальными свойствами и принимают активное участие во многих процессах жизнедеятельности. Термодинамика, как раздел науки, описывающий фундаментальные свойства биолигандов и соединений на их основе, имеет непосредственное отношение к интерпретации биохимических процессов в живых системах. В настоящее время такие термодинамические параметры как ΔG, ΔH и ΔS широко применяются для описания закономерностей процессов, протекающих с участием аминокислот и пептидов. Множество биохимических процессов связано с необходимостью участия в них ионов металлов. В связи с этим, важным является изучение координационных соединений ионов металлов с аминокислотами и, вместе с тем, факторов, влияющих на процесс их образования. Также актуально получение надежных данных по термодинамике реакций комплексообразования ионов Cu2+, Ni2+, Cо2+и Zn2+ с пептидами, поскольку данное исследование поможет приблизить понимание механизма действия биологически активных веществ на основании белков и микроэлементов. Работа выполнена при поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы (госконтракт № 02.740.11.0253). Целью работы является выявление влияния природы центрального ионакомплексообразователя и биолиганда на термодинамические характеристики реакций комплексообразования -аланина, L-серина, D,L--аланил-D,L--аланина, глицил-глицина и глицил-аспарагина с ионами 3d-переходных металлов в водном растворе. Для достижения поставленной цели необходимо было решить ряд задач: - установить состав комплексов, образованных биолигандами с ионами 3d-переходных металлов; - провести термохимическое исследование протолитических и координационных равновесий изучаемых аминокислот и пептидов с ионами меди(II), никеля(II), кобальта(II), цинка(II) и кадмия(II); - на основе экспериментальных данных определить термодинамические характеристики реакций образования 26 координационных соединений; - на основе анализа термодинамических параметров выявить корреляции со структурными особенностями аминокислот и пептидов. Научная новизна. Впервые прямым калориметрическим методом получены тепловые эффекты реакций комплексообразования β-аланина с ионами меди(II), кобальта(II) и цинка(II), L-серина с ионами никеля(II), кобальта(II), цинка(II) и кадмия(II), D,L-α-аланилD,L-α-аланина с цинком(II), глицил-аспарагина с ионами никеля(II) и меди(II), а также глицил-глицина с ионами цинка(II) и кобальта(II) в различных температурных и концентрационных условиях; рассчитаны стандартные термодинамические характеристики комплексов ML+, ML2 и ML3- Рассмотрено влияние иона – комплексообразователя на термодинамические характеристики процессов комплексообразования с участием исследуемых биолигандов. Проанализированы температурно-независимые и температурно– зависимые составляющие термодинамических параметров реакций комплексообразования иона металла(II) в растворах аминокислот и пептидов. Практическое значение работы. Экспериментальный материал о координационных равновесиях в растворах исследованных лигандов, полученный в настоящей работе, может служить основой для исследования термодинамических свойств сложных белковых систем. Высокая точность данных о термодинамических характеристиках реакций комплексообразования позволяет рекомендовать их в качестве справочного материала, а также для разработки, обоснования и оптимизации технологических процессов с участием аминокислот, пептидов и их комплексов с «металлами жизни». Полученные данные о влиянии концентрации фонового электролита и температуры на координационные 3 равновесия позволяют прогнозировать свойства неисследованных соединений данного класса. Апробация работы. Отдельные разделы диссертации докладывались на VIII Международной конференции «Проблемы сольватации и комплексообразования в растворах» (г.Суздаль. 2007); XXIII Международной Чугаевской конференции по координационной химии (г.Одесса. 2007); IX Всероссийской научно-практической конференции студентов и аспирантов «Химия и химическая технология в XXI веке» (г.Томск. 2008), III и IV Региональных конференциях молодых ученых «Теоретическая и экспериментальная химия жидкофазных систем» (Крестовские чтения) (г. Иваново. 2008, 2009), XVII Международной конференции по химической термодинамике в России (г. Казань 2009), XXIV Международной Чугаевской конференции «Физико-химические методы в химии координационных соединений» (Санкт-Петербург 2009), , а также на ежегодных научных конференциях Ивановского химико-технологического университета 2006 - 2008 года. Публикации. По результатам работы опубликовано 7 статей в ведущих академических журналах из перечня ВАК и тезисы 16 сообщений на международных и российских конференциях. Объем работы. Диссертационная работа изложена на 172 страницах машинописного текста, содержит 43 рисунка, 36 таблиц, состоит из следующих разделов: введения, главы, посвященной обзору литературы, трех глав, включающих экспериментальный материал и его обсуждение, итоговые выводы; списка цитируемой литературы, содержащего 111 наименований работ отечественных и зарубежных авторов и приложения. II. Основное содержание работы. Во Введении обоснованы актуальность темы и выбор объектов исследования, сформулированы цели работы, научная новизна и практическая значимость. Литературный обзор посвящен вопросам, связанным со структурой и физикохимическими свойствами аминокислот и низкомолекулярных пептидов и их растворов. На основании критического анализа литературных данных по термодинамическим характеристикам координационных равновесий в растворах аминокислот и пептидов с ионами 3d-переходных металлов(II) выбраны наиболее вероятные значения термодинамических констант устойчивости исследуемых комплексов. Отмечена противоречивость в величинах тепловых эффектов реакций комплексообразования в исследуемых системах; отсутствие результатов термохимических исследований реакций комплексообразования с участием глицил-глицина, глицил-аспарагина и D,L-α-аланил-D,Lα-аланина. В Экспериментальной части приведены характеристики реактивов и описание калориметрической установки. Для проведения калориметрических измерений использовали калориметр с изотермической оболочкой и автоматической записью кривой «температуравремя»; калибровку калориметра проводили электрическим током. Датчиком температуры служил термистор КМТ-14. Температура изотермической оболочки поддерживалась с точностью ±0,005 К. Рабочий объем калориметрической ячейки составлял 50,10 мл. Калориметр позволяет измерять малые по величине тепловые эффекты (2 – 40 кДж) с достаточной точностью (0,2 – 0,5%). Проверка работы калориметрической системы по теплотам растворения хлористого калия в воде и теплотам нейтрализации сильной кислоты сильным основанием показала хорошее согласование экспериментально измеренных величин с наиболее надежными литературными данными, что свидетельствует об отсутствии заметных систематических ошибок в работе калориметра. Раздел Обсуждение результатов разделен на несколько глав. 4 Термодинамика реакций комплексообразования β-аланина с ионами меди(II), кобальта(II) и цинка(II) в водном растворе. Комплексообразование β-аланина с ионами меди(II), кобальта(II) и цинка(II) сопровождается следующими реакциями: Ме2+ + Ala- = МеAla+ (1) Ме2+ + Н2О = МеОН+ + Н+ (4) 2+ Ме + 2Ala = МеAla2 (2) Н2О = ОН- + Н+ (5) Н+ + Ala- = НAla± (3) Оптимизация условий калориметрического определения тепловых эффектов образования комплексов позволила выделить такие области рН и такие соотношения [металл]:[лиганд], при которых выходы изучаемых соединений были бы максимальными, а доли других процессов – минимальными. На рис. 1. приведены диаграммы равновесий в системе аминокислота – ион кобальта(II) при соотношениях [металл]:[лиганд], равных 1:2 (а) и 1:17 (б). Возможность присутствия гидроксокомплекса значительно усложняет проведение эксперимента (рис. 1а). Для того, чтобы исключить «побочные» процессы комплексообразования с конкурирующим лигандом (ОН- - ионами) при определении тепловых эффектов процессов образования комплексных частиц ML+ и ML2 калориметрические измерения целесообразно проводить при нескольких соотношениях [металл]:[лиганд] и при рН не менее 10,0. 1. Сравн, Сравн, моль / л моль/л - +- ± Ala HAla HAla 0,010 0,08 + H2Ala - 0,008 Ala 0,06 0,006 Co 2+ CoOH + 0,04 0,004 + H2Ala CoAla+ 0,02 CoAla2 0,002 Co 0,000 2 3 4 5 6 7 8 9 2+ CoAla2 + CoOH + CoAla 0,00 pH 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 рН а) б) Рис.1. Диаграмма равновесий в системе кобальт (II) – β-аланин при отношении компонентов Со2+ : Ala- , равном а) 1:2 ; б) 1:17 Величина соотношения [металл]:[лиганд] варьировалась для системы аминокислота – ион меди(II) от 1:1 до 1:5, для кобальта(II) опыты проводили при соотношении [металл]:[лиганд] = 1:15; 1:17; 1:20 (рис. 1б), а для цинка(II) соотношение [металл]:[лиганд] составляло 1:6 и 1:10. Точная навеска раствора нитрата металла(II) помещалась в стеклянную ампулу; концентрация Ме2+ после разбивания ампулы составляла 0,005 моль/л, а приготовленный раствор β-аланина – в калориметрический стаканчик. Были также определены теплоты разведения раствора Ме(NO3)2 в растворах фонового электролита (KNO3). Опыты проводились при 288,15, 298,15 и 308,15 К и значениях ионной силы от 0,25 до 1,00 на фоне нитрата калия. Независимые тепловые эффекты при образовании в растворе координационных соединений состава 1:1 и 1:2 находились в результате решения системы двух линейных уравнений с двумя неизвестными: ∆mixH’ - ∆diIH’ = α’[МеL+]∆compH(МеL+) + α’[МеL2]∆compH(МеL2) + α’[НL±]∆disН + α’[ОН-]∆Нw + α’[МеOH+]∆H(МеOH+) (6) + + ∆mixH’’ - ∆diIH’’ = α’’[МеL ]∆compH(МеL ) + α’’[МеL2]∆compH(МеL2) + α’’[НL±]∆disН + + + α’’[ОН ]∆Нw + α’’[МеOH ]∆H(МеOH ) (7) 5 Здесь ∆mixH - тепловой эффект (кДж/моль) смешения раствора лиганда с нитратом металла(II) при соответствующем соотношении [металл]:[лиганд] и исходном значении рН; ∆dilH - тепловой эффект (кДж/моль) разведения раствора Ме(NO3)2 в растворе фонового электролита; ∆compH(МеL+), ∆compH(МеL2) - тепловые эффекты реакций образования комплексов МеL+, МеL2 соответственно; ∆disН – тепловой эффект диссоциации аминокислоты; ∆Нw - тепловой эффект образования воды из ионов; ∆H(МеOH+) - тепловой эффект образования гидроксокомплекса металла; α[МеL+], α[МеL2], α[НL±], α[МеOH+] и α[ОН-] – характеризуют полноту протекания процессов образования частиц МеL +, МеL2, НL±, МеOH+ и воды соответственно . Долю образования комплексных частиц рассчитывали следующим образом: αn= [МеLn2-n]кон / c0Ме (8) 2-n 2-n где [МеLn ]кон - равновесные концентрации частиц МеLn в конце калориметрического опыта; c0Ме - общая концентрация иона Ме2+, введенного с ампулой, с учетом разбавления до объема калориметрической жидкости. Стандартные тепловые эффекты реакций образования β-аланинатных комплексов меди(II), кобальта(II) и цинка(II) были найдены графической экстраполяцией полученных величин к нулевой ионной силе раствора по уравнению с одним индивидуальным параметром: 2 (I ) = 0 + bI (9) где H - тепловой эффект (кДж/моль) при фиксированном значении ионной силы; H0 стандартное изменение энтальпии в соответствующем процессе (кДж/моль); Z2 - разность квадратов зарядов продуктов реакции и исходных веществ; (I) - функция ионной силы, рассчитываемая теоретически; b - эмпирический коэффициент; I - значение ионной силы раствора. Значения ΔН0β1 и ΔН0β2 для реакций комплексообразования β-аминопропионой кислоты с ионами меди(II), кобальта(II) и цинка(II) приведены в табл. 1. Таблица 1. Стандартные термодинамические характеристики реакций комплексообразования ионов переходных металлов(II) с β-аланином при 298,15 К. Процесс lgβ0n - ∆compG0, кДж/моль - ∆compH0, кДж/моль ∆compS0, Дж/(мольК) Cu2++ Ala– = CuAla + 7,50 ± 0,08 42,85 ± 0,46 23,72 ± 0,11 57,9 ± 1,6 Cu2++ 2Ala– = CuAla2 13,21 ± 0,09 76,36 ± 0,51 44,28 ± 0,07 97,5 ± 1,7 Cо2++ Ala– = CоAla + 4,12 ± 0,08 23,52 ± 0,46 14,61 ± 0,11 30,2 ± 1,6 Cо2++ 2Ala– = CоAla2 7,14 ± 0,19 40,76 ± 0,51 23,72 ± 0,17 57,2 ± 1,7 Zn2++ Ala– = ZnAla + 4,63 ± 0,09 26,43 ± 0,44 10,28 ± 0,24 54,2 ± 1,9 Zn2++ 2Ala– = ZnAla2 7,96 ± 0,11 45,44 ± 0,50 16,99 ± 0,23 95,4 ± 1,9 Из табл.1 видно, что тепловые эффекты процессов образования комплексов, а, следовательно, и прочность связи лиганда с ионом металла увеличиваются для комплексов состава 1:1 и 1:2 в ряду Zn2+ < Co2+ < Ni2+ < Cu2+. Термодинамика процессов образования комплексов L-серина с ионами 3dпереходных металлов. Тепловые эффекты реакций комплексообразования в системе L-серин – ионы никеля(II) – вода определяли по двум методикам, первая из которых описана в разделе 1. 2. 6 По второй методике в ампулу загружалась точная навеска раствора KSer. Масса навески раствора KSer варьировалась от 0,1 до 0,7 гр. Ампулу разбивали в 0,0025 моль/л раствор нитрата никеля(II) объемом 50,10 мл. В калориметрической ячейке после разрушения ампулы концентрация иона Ser- составляла (1,59 – 5,63) ∙ 10-3 моль/л. Также были измерены теплоты разведения раствора серината калия в растворах фонового электролита. На основании экспериментальных данных рассчитывали теплоты реакций комплексообразования, удовлетворяющие минимуму функции: n ( F= эксп расч ) 2 min (10) где Δ Н эксп – экспериментально измеренные тепловые эффекты; Δ Н расч – рассчитанные тепловые эффекты; n – число опытов; ω – весовой множитель. Расчет энтальпий образования комплексов никеля(II) c L-серином по второй методике выполняли по программе HEAT. Стандартные тепловые эффекты комплексов L-серина с ионами переходных металлов были найдены графической экстраполяцией полученных величин к нулевой ионной силе раствора по уравнению (9). Значения ΔН0β1, ΔН0β2 и ΔН0β3 для системы L-серин – ион Ni2+ при температуре 298,15 К, найденные по двум независимым методикам, в пределах погрешности совпадают друг с другом. Это увеличивает надежность полученных в настоящей работе данных. Стандартные термодинамические характеристики реакций комплексообразования ионов переходных металлов с α-амино-β-оксипропионовой кислотой в настоящей работе найдены впервые и приведены в табл. 2. Таблица 2. Стандартные термодинамические характеристики реакций комплексообразования иона металла(II) с L-серином при 298,15 К. i =1 Процесс lgβ0n - ∆compG0, кДж/моль - ∆compH0, кДж/моль ∆compS0, Дж/(мольК) Ni2++ Ser– = NiSer + 6,01 ± 0,29 34,31 ± 0,29 14,79 ± 0,28 65,5 ± 1,6 Ni2++ 2Ser– = NiSer2 10,78 ± 0,59 61,54 ± 0,50 31,37 ± 0,13 101,2 ± 1,8 Ni2++ 3Ser– = NiSer3- 13,99 ± 0,75 79,86 ± 0,75 44,29 ± 0,36 119,3 ± 1,8 Со2++ Ser– = СоSer + 4,88 ± 0,27 27,86 ± 0,31 6,37 ± 0,25 72,1 ± 1,7 Со2++ 2Ser– = СоSer2 8,51 ± 0,56 48,58 ± 0,52 13,96 ± 0,13 116,1 ± 1,8 Со2++ 3Ser– = СоSer3- 11,12 ± 0,75 63,48 ± 0,74 22,01 ± 0,36 139,1 ± 1,8 Сd2++ Ser– = СdSer + 4,48 ± 0,23 25,57 ± 0,29 6,03 ± 0,28 65,6 ± 1,6 Сd2++ 2Ser– = СdSer2 7,95 ± 0,55 45,38 ± 0,50 13,22 ± 0,13 107,9 ± 1,8 Сd2++ 3Ser– = СdSer3- 10,14 ± 0,75 57,88 ± 0,75 24,41 ± 0,37 112,3 ± 1,8 Zn2++ Ser– = ZnSer + 5,38 ± 0,28 30,71 ± 0,32 6,12 ± 0,28 82,5 ± 1,6 Zn2++ 2Ser– = ZnSer2 9,36 ± 0,51 53,43 ± 0,52 14,97 ± 0,23 129,0 ± 1,9 Комплексные соединения L-серина с ионами цинка(II) и кобальта(II) более устойчивы, чем аналогичные комплексы с β-аланином, что является косвенным доказательством участия спиртовой группы серина в координации. Энтропийный фактор устойчивости комплексов L-серина с ионами цинка(II) и кобальта(II) намного выше, чем для комплексов β-аланином с данными металлами. 7 Данный факт можно объяснить тем, что после связывания аминокислоты по основным донорным группам при наличии у иона металла свободных для координации орбиталей атом кислорода спиртовой группы может вытеснять молекулу растворителя и образовывать донорно-акцепторную связь с ионом металла. Это, по-видимому, приводит к возникновению еще одного хелатного кольца. Термохимическое исследование координационных равновесий в растворах D,L-α-аланил-D,L-α-аланина с ионами цинка(II). Исключительно важную роль дипептиды играют в биохимических процессах, являясь строительным материалом белков и других биологически важных субстратов. В сочетании с ионами металлов они обеспечивают протекание большого числа биохимических реакций. Стандартные тепловые эффекты реакций образования комплексов цинка(II) с D,L-α-аланилD,L-α-аланином были найдены графической экстраполяцией полученных величин к нулевой ионной силе раствора по уравнению (9) и приведены в табл.3. Таблица 3. Стандартные термодинамические характеристики реакций комплексообразования иона цинка(II) с D,L-α-аланил-D,L-α-аланином при 298,15 К. 3. Процесс lgβ0n - ∆compG0, кДж/моль - ∆compH0, кДж/моль ∆compS0, Дж/(мольК) Zn2++ Рер– = ZnРер + 3,52 ± 0,08 20,09 ± 0,46 11,11 ± 0,40 30,1 ± 1,6 Zn2++ 2Рер– = ZnРер2 6,60 ± 0,09 37,68 ± 0,51 20,41 ± 0,37 57,9 ± 1,7 Термодинамика реакций комплексообразования глицил-глицина с ионами цинка(II) и кобальта(II). Анализ литературных данных в системе глицил-глицин – ион цинка(II) показал, что растворе образуются комплексные частицы состава ZnРер+, ZnРер2 и ZnРер3-, а в системе глицил-глицин - ион кобальта(II) преобладают моно- и бискоординированные комплексы. В связи с этим при измерении суммарных тепловых эффектов процесса комплексообразования для глицил-глицина и иона кобальта были использованы только два исходных значения рН и в системе расчетных уравнений вида (6) исчезает третье слагаемое. В целом методика измерений ΔН0β1, ΔН0β2 и ΔН0β3 была аналогична, используемой при изучении координационных равновесий с участием D,L-α-аланил-D,L-α-аланина. Стандартные термодинамические характеристики глицил-глицинатных комплексов цинка(II) и кобальта(II) приведены в табл.4. Таблица 4. Стандартные термодинамические характеристики реакций комплексообразования иона цинка(II) и кобальта(II) с глицил-глицином. 4. Процесс lg 0 n - ∆compG0, кДж/моль - ∆compH0, кДж/моль ∆compS0, Дж/(мольК) Zn2++ Рер– = ZnРер + 4,18 ± 0,19 23,86 ± 0,29 10,23 ± 0,18 45,7 ± 1,6 Zn2++ 2Рер– = ZnРер2 7,42 ± 0,39 42,36 ± 0,50 21,37 ± 0,33 70,4 ± 1,8 Zn2++ 3Рер– = ZnРер3- 8,78 ± 0,55 50,12 ± 0,75 28,34 ± 0,46 73,1 ± 1,9 Со2++ Рер– = СоРер + 3,54 ± 0,19 20,21 ± 0,46 12,97 ± 0,18 23,5 ± 1,6 Со2++ 2Рер– = СоРер2 6,26 ± 0,39 35,73 ± 0,51 23,19 ± 0,37 42,1 ± 1,7 8 Ранее были определены стандартные термодинамические характеристики реакций образования глицинатных комплексов цинка(II). Сравнение показало, что ион цинка(II) образует с аминокислотой более прочные комплексные соединения, чем с дипептидом. Это приводит к уменьшению экзотермичности реакций комплексообразования при переходе от аминокислоты к пептиду; так, величины теплот реакций образования комплексов иона цинка(II) с глицином составили: ∆compH0(ZnGly+) = - 15,41 кДж/моль, ∆compH0(ZnGly2) = 26,64 кДж/моль и ∆compH0(ZnGly3-) = - 41,69 кДж/моль, а соответствующие характеристики для дипептида значительно меньше: ∆compH0 (ZnGlyGly+) = - 10,23 кДж/моль, ∆compH0(ZnGlyGly2) = - 21,37 кДж/моль и ∆compH0(ZnGlyGly3-) = - 28,34 кДж/моль, соответственно. Изменения энтропии в процессах образования координационных соединений с участием пептида меньше, чем у аминокислоты. Это, по-видимому связано с разным количество молекул воды, высвобождающихся из сольватных оболочек ионов в результате реакции комплексообразования. Аминокислоты и пептиды являются бидентантными лигандами, но координирование их ионами металлов происходит по-разному. Если аминокислоты координируются с ионом металла с помощью амино- и карбоксильной группы, то пептид может образовывать с металлом связи не только с помощью аминогруппы, но и с участием пептидного азота. Термодинамика реакций комплексообразования глицил-аспарагина с ионами никеля(II) и меди(II) в водном растворе. Система глицил-аспарагин – медь(II) является одним из наиболее сложных и интересных объектов исследования в биохимии, поскольку нет единого мнения о формах существования комплексных частиц в исследуемой системе. Для выбора наиболее вероятного равновесного состава системы необходимо было провести детальный расчет протолитических и координационных равновесий в системе ионы меди(II) - глициласпарагин - вода при различных значениях рН. В системах, содержащих ион меди(II) в качестве иона – комплексообразователя, наряду с образованием монокоординированного комплекса (12) становится возможной реакция его разложения, сопровождающаяся диссоциацией протона амидной группы, участвующей в образовании координационного узла. В исследуемой системе возможно также существование бискоординированного комплекса меди(II) с глицил-аспарагином, содержащего одну депротонированную пептидную группу. Таким образом, при взаимодействии растворов, содержащих ион меди(II) и дипептид, в калориметре возможно протекание следующих процессов: Cu2+ + Pep- = CuPep+ (12) Н+ + Pep- = НPep± (16) 2+ 2+ + + Cu + 2Pep = CuPep2 (13) Cu + Н2О = CuОН + Н (17) Cu2+ + Pep- - Н+ = CuН-1Pep+ (14) Н2О = ОН- + Н+ (18) 2+ + Cu + 2Pep - Н = CuН-1Pep 2 (15) Проведенные расчеты позволили выполнить детальное термохимическое исследование реакций комплексообразования меди(II) с глицил-аспарагином в водном растворе при различных значениях рН. Расчёт равновесного ионного состава растворов проводили с использованием программы RRSU с учётом протекания процессов (12) – (18), поскольку нельзя не учитывать работы, где с большой долей вероятности предполагается возможность диссоциации пептидного водорода в моно- и дикоординированных комплексов меди(II) с глицил-аспарагином. На рис. 3 приведены диаграммы равновесий в системе медь-пептид в водном растворе при различных соотношениях [металл]:[лиганд]. Они были использованы для выбора оптимальных условий термохимических опытов. По результатам расчета равновесного состава было установлено, что нормальный комплекс состава 1:2 не образуется вовсе; поэтому процесс (13) не учитывался в дальнейших расчетах. 5. 9 а) б) Рис.3. Диаграмма равновесий в системе медь - глицил-аспарагин в водном растворе при 298,15 К и значении ионной силы 0,25 М при соотношении [металл]:[лиганд, равном а) 1:2 и б) 1:5. Наиболее удовлетворяющей задачам эксперимента является диаграмма при соотношении [металл]:[лиганд], равном 1:5; она представлена на рис.3б. При меньшем избытке биолиганда (рис. 3а), существенно снижался выход комплексов CuPep+, CuH-1Pep и CuH-1Pep-2 и становилась значительной равновесная концентрация гидрокомплекса CuOH+; соотношение больше, чем 1:5 нецелесообразно. При определении теплот смешения раствор дипептида готовили по точной навеске глицил-аспарагина; калиброванной пипеткой прибавляли рассчитанное количество раствора щелочи для создания заданных значений рН, равных 7,5; 8,0 и 8,5, а также необходимое количество фонового электролита для поддержания соответствующего значения ионной силы раствора. Точная навеска раствора Cu(NO3)2 помещалась в стеклянную ампулу, а приготовленный раствор пептида – в калориметрический стаканчик. При определении тепловых эффектов разведения раствора нитрата меди(II) калориметрической жидкостью был раствор нитрата калия с соответствующим значением ионной силы. Стандартные тепловые эффекты реакций образования комплексов никеля(II) и меди(II) с глициласпарагином были найдены графической экстраполяцией полученных величин нулевой ионной силе раствора и приведены в настоящей работе впервые (табл.5). Таблица 5. Стандартные термодинамические характеристики реакций комплексообразования иона никеля(II) и меди(II) с глицил-аспарагином. - ∆compG0, кДж/моль - ∆compH0, кДж/моль ∆compS0, Дж/(мольК) Ni2++ Рер– = NiРер + 4,47 ± 0,29 25,52 ± 0,39 17,18 ± 0,28 28,0 ± 1,4 Ni2++ 2Рер– = NiРер2 8,05 ± 0,39 45,95 ± 0,55 34,97 ± 0,52 36,8 ± 1,9 Cu2++ Pep– ↔ CuPep + 6,53 ± 0,29 37,29 ± 0,29 26,00 ± 0,28 37,8 ± 1,6 Cu2++ Pep– - Н+ ↔ CuН-1Pep 2,30 ± 0,19 13,13 ± 0,50 6,08 ± 0,13 23,6 ± 1,8 Cu2++ 2Pep– - Н+ ↔ CuН-1Pep-2 5,35 ± 0,75 30,54 ± 0,75 25,03 ± 0,36 18,5 ± 1,8 Процесс lgβ0n Данные, полученные в настоящей работе, позволяют сделать вывод о том, что в системе ион меди(II) – глицин-аспарагин – вода в интервале pH 4 - 10 и при соотношениях [металл]:[лиганд], не превышающих 1:10, образуются, в основном, три вида комплексных частиц CuPep+, CuH-1Pep и CuH-1Pep-2. 6. Корреляция между термодинамическими характеристиками процессов комплексообразования и структурными особенностями аминокислот и дипептидов. Уравнение реакций комплексообразования в водном растворе обычно представляют схемой: М(Н2О)m + L(Н2О)l = ML(Н2О)p + (m+l-p) Н2О (19) В результате такой реакции происходит «размораживание» воды около исходных ионов и «замораживание» их около образовавшегося комплекса. Характерной особенностью этой схемы является появление в растворе (m+l-p) молей «размороженной» воды из гидратных оболочек ионов в результате реакции. Изменение термодинамических функций в процессе, например, изменение теплоемкости ΔrСр можно представить как ΔrСр= ΔrСр(асс) + (m+l-p) ΔrСрi (20) где ΔrСр(асс) –изменение теплоемкости вследствие уменьшения числа частиц за счет собственно комплексообразования; ΔrСрi- изменение теплоемкости воды, вызванное «размораживанием» воды и связанными с этим эффектами. Наиболее близким термодинамическим аналогом этих величин будет, очевидно, изменение теплоемкости при плавлении льда. Доказано, что Δ rСр(асс)=0, тогда ΔrСрi= 37,7k(m+l-p). (21) Поскольку в реакциях комплексообразования, протекающих с разрушением гидратных оболочек реагирующих частиц, m+l-p>0, можно ожидать, что изменение теплоемкости в реакции (19) будет положительным, следовательно, реакция с ростом температуры будет становиться более эндотермичной или менее экзотермичной. Действительно, как показано в настоящей работе (табл. 6), все исследованные реакции комплексообразования и с аминокислотами, и с пептидами с ростом температуры становятся менее экзотермичными. Таблица 6. Стандартные тепловые эффекты реакций комплексообразования иона цинка(II) и кобальта(II) с глицил-глицином. Процесс – Zn + Рер = ZnРер 2+ + Zn2++ 2Рер– = ZnРер2 Zn2++ 3Рер– = ZnРер3- Со2++ Рер– = СоРер + Со2++ 2Рер– = СоРер2 Т, К - ∆compH0, кДж/моль 288,15 298,15 308,15 288,15 298,15 308,15 288,15 298,15 308,15 288,15 298,15 308,15 288,15 298,15 308,15 11,02 ± 0,18 10,23 ± 0,18 9,47 ± 0,18 22,35 ± 0,33 21,37 ± 0,33 20,34 ± 0,33 29,45 ± 0,46 28,34 ± 0,46 27,22 ± 0,46 13,67 ± 0,18 12,97 ± 0,18 12,23 ± 0,18 24,03 ± 0,33 23,19 ± 0,33 22,37 ± 0,33 ∆compСр0, Дж/(мольК) 77 ± 3 101 ± 4 111 ± 6 72 ± 3 82 ± 4 Устойчивость комплексов никеля, кобальта, кадмия и цинка с изученными аминокислотами и дипептидами в значительной мере обусловлена высокой экзотермичностью их образования. Экзотермичный тепловой эффект реакции указывает на то, что образование связей между центральным ионом и лигандом является энтальпийно 11 выгодным процессом, величина ΔrН которого компенсирует затраты тепла, необходимые на частичную десольватацию центрального атома и лиганда. Координация аминогрупп обеспечивает отрицательный вклад в энтальпию комплексообразования. Экзотермичность тепловых эффектов в процессах комплексообразования увеличивается с ростом ионной силы. В противоположность этому, с ростом температуры тепловые эффекты реакций комплексообразования уменьшаются по абсолютной величине. Изменение энтропии имеет положительное значение, уменьшающееся с ростом ионной силы, что может быть объяснено уменьшением гидратации частиц, участвующих в процессе образования комплексов, вследствие усиления ассоциации молекул растворителя и конкуренции со стороны фонового электролита. Можно ожидать более выраженной зависимости ΔS от ионной силы при фоновых электролитах с более высокими числами гидратации. Комплексообразующую способность переходных металлов с биолигандами часто характеризуют с помощью ряда Ирвинга – Уильямса: Mn2+ < Fe2+ < Co2+ < Ni2+ < Cu2+ > Zn2+. Однако, положение цинка в данном ряду не постоянно. Тепловые эффекты процессов образования комплексов, а, следовательно, и прочность связи β-аланина с ионом металла увеличиваются для комплексов состава 1:1 и 1:2 в ряду Zn2+ < Co2+ < Ni2+ < Cu2+, для Lсерина - в ряду Co2+ < Cd < Zn2+ < Ni2+. Аналогичная зависимость наблюдается и в устойчивости этих комплексов. Необходимо отметить, что последовательность Ирвинга – Уильямса справедлива и для данных лигандов. Характер изменения энтальпии реакций комплексообразования коррелирует со структурными параметрами. По-видимому, по мере формирования 3d-оболочек координационные связи M-N, а также M-O упрочняются и достигают максимума при завершении координационной структуры. Для комплексов Zn, Co, Ni, Cu и Cd средние расстояния M-O и, в особенности, M-N достигают максимума у меди, что вызывает у комплексов исследуемых лигандов максимальный тепловой эффект в рассматриваемом ряду. Для анализа данных по термодинамике реакций комплексообразования биолигандов с 3d-переходными металлами оказывается полезным подход, основанный на представлениях Герни. Проведенный анализ позволил отметить некоторые закономерности в изменении температурно-зависимых и температурно-независимых составляющих термодинамических параметров процессов комплексообразования иона цинка(II) в ряду исследованных аминокислот (табл.7). Таблица 7. Температурно-зависимые (з) и независимые (нз) составляющие термодинамических характеристик процессов образования комплексов ионов цинка(II) с глицином, βаланином, D,L-триптофаном и L-серином при температуре 298,15К. - compG0з - compG0нз = - compH0нз compH0з compS0з Процесс кДж/моль Дж/моль·К Zn2++ Ala– ↔ ZnAla + 19,28 17,11 6,85 87,6 Zn2++ 2Ala– ↔ ZnAla2 35,72 29,63 12,69 162,4 Zn2++ Trp– ↔ ZnTrp + 23,465 18,18 8,33 106,6 Zn2++ 2Trp– ↔ ZnTrp2 41,19 36,72 14,63 187,2 Zn2++ Ser– ↔ ZnSer + 25,51 15,16 9,06 116,0 – 37,21 28,14 13,21 169,1 Zn + 2Ser ↔ ZnSer2 2+ Проведенный анализ позволил отметить некоторые закономерности в изменении температурно-зависимых и температурно-независимых составляющих термодинами-ческих параметров процессов комплексообразования иона цинка(II) в ряду исследованных 12 аминокислот (табл.7.). Во-первых, для всех реакций образования однокоординированных комплексов алифатических аминокислот наблюдается увеличение величины ΔrHнз приблизительно на 2 кДж/моль в ряду L-серин, β-аланин и D,L-триптофан, (для L-серина 15,16 кДж/моль, β-аланина 17,11 кДж/моль и D,L-триптофана 19,32 кДж/моль. Во-вторых, температурно-зависимые вклады энтальпии и энтропии последовательно увеличиваются по мере увеличения числа лигандов, причем с присоединением второго лиганда rH0з увеличивается примерно вдвое. Например, для β-аланина вклады rH0з для процессов Zn2++ Ala– = ZnAla + и Zn2++ 2Ala– = ZnAla2 соответствуют следующим значениям 6,85 кДж/моль и 12,69 кДж/моль. В-третьих, для реакций образования комплексов состава 1:1 температурнозависимые вклады в изменение энтальпии последовательно увеличиваются в ряду β-аланин, D,L-триптофан, L-серин. Температурно-независимые слагаемые ΔrHнз для реакций комплексообразования Lсерина с ионами переходных металлов (табл. 8.) имеют отрицательные значения; их величины для комплексов одинакового состава (ML+, ML2 и ML3-) становятся более отрицательными в ряду Cd2+, Co2+, Zn2+ и Ni2+. Следует отметить, что вклады ΔrHнз для системы β-аланин – металл – вода достаточно близки для моно- и дикоординированных комплексов кобальта(II) и кадмия(II) (и даже для цинка(II)); однако существенно увеличиваются по абсолютной величине для никеля(II) (почти вдвое по сравнению с цинком). Таблица 8. Температурнозависимые (з) и независимые (нз) составляющие термодинамических характеристик процессов образования комплексов 3d-переходных металлов с L-серином. - compG0з - compG0нз = - compH0нз compH0з compS0з Процесс кДж/моль Дж/моль·К 2+ – + Co + Ser = CoSer 23,22 14,59 8,25 105,5 2+ – Co + 2Ser = CoSer2 40,27 28,22 14,31 183,1 2+ – Со + 3Ser = СоSer3 52,69 40,66 18,72 239,5 2+ – + Ni + Ser = NiSer 21,77 22,50 7,73 98,9 2+ – Ni + 2Ser = NiSer2 36,99 44,61 13,14 168,1 2+ – Ni + 3Ser = NiSer3 48,34 61,39 17,17 219,7 2+ – + Cd + Ser = CdSer 21,78 13,74 7,74 99,0 Cd2++ 2Ser– = CdSer2 38,46 26,83 13,66 174,8 Cd2++ 3Ser– = CdSer346,79 40,96 16,62 212,7 Zn2++ Ser– = ZnSer + 25,51 15,16 9,06 116,0 Zn2++ 2Ser– = ZnSer2 37,21 28,14 13,21 169,1 Анализ термодинамических характеристик реакций комплексообразования в исследуемой системе (по схеме Герни) показал, что температурно-зависимые слагаемые ΔrHз во всех случаях положительны и имеют близкие значения для комплексов кобальта, цинка, никеля, меди с аминокислотами, т.е. мало чувствительны к электронному строению центрального иона. Температурно-независимые слагаемые ΔrHнз имеют отрицательные значения; их величины для аналогичных комплексов от кобальта к меди становятся более отрицательными. Таким образом, полученные данные свидетельствуют от том, что независимые от температуры слагаемые ΔrHнз мало чувствительны к координации лигандов через донорные атомы кислорода ацетатных групп, а определяются главным образом, природой центрального иона и числом координированных атомов иминного азота. Положительное значение ΔrSз для всех комплексов аминокислот с 3d-переходными металлами свидетельствует об уменьшении силы электростатического взаимодействия 13 полярных молекул растворителя с комплексным ионом и высвобождении некоторого числа молекул воды из гидратных оболочек исходных реагентов. Основные итоги и выводы. 1. Математическое моделирование равновесий в растворах ионов 3d-переходных металлов с β-аланином, L-серином и D,L-триптофаном показало, что преобладающими комплексными частицами в растворах аминокислот являются МеАм+, МеАм2-. На основании критического анализа литературных данных по протолитическим и координационным равновесиям в растворах глицил-глицина и глицил-аспарагина с ионами меди(II), цинка(II), никеля(II) и кобальта(II) показано, что в присутствии этих лигандов равновесный состав системы значительно более сложный. В частности, при введении в раствор пептида иона меди(II) наряду с нормальным монокоординированным комплексом образуются и частицы состава CuH-1Pep и CuH-1Pep-2. 2. Прямым калориметрическим методом определены энтальпии реакций образования координационных соединений ионов переходных металлов с β-аланином, D,Lтриптофаном, L-серином, D,L-α-аланил-D,L-α-аланином, глицил-глицином и глициласпарагином при различных температурах в широком интервале концентраций фонового электролита. Впервые оценены теплоты реакций образования комплексов глициласпарагина с ионами меди(II), содержащих депротонированную пептидную группу. Рассчитаны стандартные термодинамические характеристики реакций образования 28 комплексных соединений с билигандами. Для 24 систем полная термодинамическая характеристика при стандартных условиях и для практически важных солевых растворах приводится впервые. 3. Полученные термодинамические характеристики реакций комплексообразования были проанализированы на основании теории Герни. Комплексообразующая способность переходных металлов с β-аланином и L-серином охарактеризована с помощью ряда Ирвинга – Уильямса. 4. Полученные в настоящей работе термодинамические характеристики процессов комплексообразования в системах ионы 3d-переходных металлов - β-аланин, L-серин, D,L-αаланил-D,L-α-аланин, глицил-глицин и глицил-аспарагин в солевых растворах, при различных температурах и в стандартном состоянии существенно пополнят банк термохимических данных для алифатических аминокислот и дипептидов. 5. Рассчитаны стандартные энтальпии образования 26 комплексных соединений с биолигандами в водном растворе – ключевые величины в термохимии координационных соединений с биологически активными лигандами. 6. Исследовано влияние природы иона металла на формирование координационного узла с пептидами: глицил-глицином и глицил-аспарагином. Показано, что ион меди(II) обладает наибольшим лабилизирующим действием на протон амидной группы пептида. Основное содержание диссертационной работы изложено в следующих работах: 1. Кочергина Л.А. Термодинамические характеристики реакций комплексообразования иона меди(II) с β–аланином в водном растворе / Л.А. Кочергина, О.М. Дробилова // Журн. физ. химии. 2008. Т. 82. № 9. с. 1729 - 1733. 2. Кочергина Л.А. Термодинамические характеристики реакций комплексообразования в системе ион Ni2+ - β-аланин в водном растворе / Л.А. Кочергина, О.В. Платонычева, О.М. Дробилова, В.В. Черников // Журн. неорг. химии. 2009. Т. 54. № 2. с. 377 - 384. 3. Кочергина Л.А. Термодинамическое исследование координационных равновесий в системе ион цинка(II) – β-аланин – вода / Л.А. Кочергина, О.М. Дробилова, С.С. Дробилов // Коорд. химии. 2009. Т. 35. № 5. с. 394 - 400. 14 4. Кочергина Л.А. Термохимия реакций комплексообразования ионов 3d-переходных металлов с L-серином в водном растворе / Л.А. Кочергина, О.М. Дробилова // Журн. физ. химии. 2009. Т. 83. № 8. с. 2030 - 2038. 5. Кочергина Л.А. Термодинамические характеристики процессов комплексообразования в системе ион цинка(II) с глицил-глицином в водном растворе / Л.А. Кочергина, О.М. Дробилова // Журн. неорг. химии. 2010. Т. 55. № 5. с. 819 - 825. 6. Кочергина Л.А. Термодинамические характеристики реакций комплексообразования в системе ион цинка(II)-L-серин-вода / Л.А. Кочергина, О.М. Дробилова, С.Е. Сивкина // Журн. общей химии. 2010. Т. 80. № 8. с. 1370 - 1377. 7. Кочергина Л.А. Термодинамические характеристики процессов комплексообразования в системе ион кобальта(II) – глицил-глицин в водном растворе / Л.А. Кочергина, О.М. Дробилова // Изв. вузов. Химия и хим. технология. 2011. Т. 54. № 6. с. 26 – 30. 8. Мышкина О.М. Термодинамические характеристики реакций комплексообразования ионов меди(II) с β-аланином в водном растворе / О.М. Мышкина, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов V Региональной конференции «Фундаментальные науки – специалисту нового века». Иваново. 2006. с. 31. 9. Мышкина О.М. Термохимическое исследование комплексообразования иона никеля(II) с D,L-α-аланил-D,L-α-аланином в водном растворе / О.М. Мышкина, А.В. Емельянов, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов V Региональной конференции «Фундаментальные науки – специалисту нового века». Иваново. 2006. с. 52. 10. Дробилов С.С. Термохимическое исследование реакций комплексообразования иона кобальта(II) с β–аланином в водном растворе / С.С. Дробилов, О.М. Дробилова, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов VI Региональной конференции «Фундаментальные науки – специалисту нового века». Иваново. 2007. с. 192. 11. Дробилова О.М. Термодинамика реакций комплексообразования иона меди(II) c βаланином в водном растворе / О.М. Дробилова, С.С. Дробилов, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов VIII Международной конференции “Проблемы сольватации и комплексообразования в растворах”. Суздаль. 2007. с. 565. 12. Дробилова О.М. Термодинамические характеристики реакций комплексообразования иона цинка(II) c β-аланином в водном растворе / О.М. Дробилова, С.С. Дробилов, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов VIII Международной конференции “Проблемы сольватации и комплексообразования в растворах”. Суздаль. 2007. С. 567. 13. Дробилова О.М. Термодинамика реакций комплексообразования иона цинка(II) с D,L-триптофаном в водном растворе / О.М. Дробилова, С.С. Дробилов, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов XXIII Международной Чугаевской конференции по координационной химии. Одесса. 2007. с. 405. 14. Дробилова О.М. Исследование влияния температуры на термодинамические характеристики реакций комплексообразования цинка(II) с β-аланином в водном растворе / О.М. Дробилова, С.С. Дробилов, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов XXIII Международной Чугаевской конференции по координационной химии. Одесса. 2007. с. 404. 15. Дробилов С.С. Термодинамическое изучение реакций комплексообразования βаланина с ионами переходных металлов / С.С. Дробилов, О.М. Дробилова, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов VII Региональной конференции «Фундаментальные науки – специалисту нового века». Иваново. 2008. с. 16. 16. Сивкина С.Е. Термодинамика реакций комплексообразования D,L-α-аланил-D,L-αаланина с ионом цинка(II) в водном растворе / С.Е. Сивкина, О.М. Дробилова, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов VII Региональной конференции «Фундаментальные науки – специалисту нового века». Иваново. 2008. с. 64. 15 17. Дробилова О.М. Термодинамика реакций комплексообразования глицил-глицина с ионами цинка(II) в водном растворе / О.М. Дробилова, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов IX Всероссийской научно-практической конференции студентов и аспирантов ”Химия и химическая технология в XXI веке“. Томск. 2008. с. 149. 18. Дробилова О.М. Термохимия реакций комплексообразования β-аланина с ионами 3d-переходных металлов в водном растворе / О.М. Дробилова, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов IX Всероссийской научно-практической конференции студентов и аспирантов ”Химия и химическая технология в XXI веке“. Томск. 2008. с. 148. 19. Дробилова О.М. Термодинамика реакций комплексообразования ионов никеля(II) с глицил-аспарагином в водном растворе / О.М. Дробилова // Тезисы докладов III Региональной конференции молодых ученых «Теоретическая и экспериментальная химия жидкофазных систем» (Крестовские чтения). Иваново. 2008. С.92. 20. Дробилова О.М. Термодинамические характеристики реакций комплексообразования L-серина с ионами кобальта(II) / О.М. Дробилова // Тезисы докладов III Региональной конференции молодых ученых «Теоретическая и экспериментальная химия жидкофазных систем» (Крестовские чтения). Иваново. 2008. с. 92 - 93. 21. Дробилова О.М. Термодинамические характеристики реакций комплексообразования ионов меди(II) и никеля(II) c глицил-аспарагином в водном растворе / О.М. Дробилова, Л.А. Кочергина // Тезисы докладов IV Региональной конференции молодых ученых «Теоретическая и экспериментальная химия жидкофазных систем» (Крестовские чтения). Иваново. 2009. с. 21. 22. Drobilova O.M. Particularities of thermochemical investigation equilibria with participation of glycyl-glicine and ions of 3d-transitional metals in aqueous solution (abstract) / O.M. Drobilova, L.A. Kochergina // XVII International Conference on Chemical Thermodynamics in Russia. Kazan. 2009. Abstracts. Vol. 2. P. 125. 23. Drobilova O.M. Thermodynamic characteristics of complexformation reactions of the zinc(II) ion with amino acids and peptides in aqueous solution (abstract) / O.M. Drobilova, L.A. Kochergina // XVII International Conference on Chemical Thermodynamics in Russia. Kazan. 2009. Abstracts. Vol. 2. P. 126. 16