ЛБ БУЛЬОН (ЛЕННОКС) КАТ № 1231 Для выделения и подсчета

КАТ № 1231
ЛБ БУЛЬОН (ЛЕННОКС)
Для выделения и подсчета патогенных
стафилококков из клинических образцов и других
материалов
СОСТАВ В ГРАММАХ НА ЛИТР (Г/Л)
Триптон
Хлорид натрия
pH 7.0 ± 0.2 при 25°C
10.00
5.00
Дрожжевой экстракт
5.00
ПРИГОТОВЛЕНИЕ
Растворить 20 г среды в одном литре дистиллированной воды. Хорошо перемешать
и растворить нагреванием при частом перемешивании. Кипятить в течение одной минуты
до полного растворения. Разлить в соответствующие контейнеры и стерилизовать в
автоклаве при 121 °C в течение 15 минут. Готовая среда должна храниться при
температуре 2-8 °C. Цвет готовой среды прозрачно-янтарного цвета.
Обезвоженная среда должна быть однородной, сыпучей и бежевого цвета. В случае
каких-либо физических изменений следует отказаться использования от среды.
ПРИМЕНЕНИЕ
ЛБ БУЛЬОН (Леннокс) является питательной средой, разработанной Ленноксом,
для роста и поддержания чистых культур рекомбинантных штаммов E.coli.
Это питательная среда содержит все необходимое для питания штаммов E.coli.
Триптон содержит азот, витамины, минералы и аминокислоты, необходимые для роста.
Дрожжевой экстракт является источником витаминов, в частности, B-группы. Хлорид
натрия имеет важное значение для транспорта электролитов и осмотического равновесия.
В ЛБ бульоне (Леннокс) содержание хлорида натрия в десять раз превышает
уровень содержания в бульоне Луриа (Бульон Миллера модифицированный) (Кат. 1266) и
половину уровня бульона Луриа (ЛБ Бульон Миллера) (Кат. 1551). Это дает возможность
выбора оптимальной средней концентрации соли для конкретного штамма.
Бактерии, содержащие плазмиды, как правило, лучше всего растут в бульоне,
который содержит от 5 до 10 г соли. Для быстрого роста, среда может быть дополнена
0,1% глюкозой или 0,4% глицерином. Различные кофакторы могут быть также добавлены
в бульон при работе с определенными типами бактериофагов. Например, бактериофаг
лямбда требует избытка магния в бульоне для правильного инфицирования бактерий.
Культивирование в ЛБ бульоне позволяет клеткам со вставкой плазмиды начать
экспрессию генов в трансформированной плазмиде, включая ген устойчивости к
антибиотику. Если трансформированный штамм E.coli высеять непосредственно на
селективную среду (ЛБ агар, содержащий антибиотик), меньше трансформированных
колоний появится на мл чашки. Рост трансформированных клеток в LB бульоне увеличит
количество трансформированных клеток на мл.
Чтобы выбрать бактерии с плазмидой, необходимо субкультивирование инокулята
из ЛБ бульона в ЛБ агар с добавлением антибиотика.
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ТЕСТ
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых
культурах после инкубации при температуре 35 ± 2° C и наблюдались через 18-24 часа.
Рост
Микроорганизмы
Escherichia coii ATCC 23724
Escherichia coii ATCC 53868
Escherichia coii ATCC 33694
Escherichia coii ATCC 33849
Хороший
Хороший
Хороший
Хороший
БИБЛИОГРАФИЯ
Atlas, R.M., L.C. Parks (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc.
Londonl Lennox. (1955). Virology 1:190.
Sambrook, Fritsch and Maniatis. (1989). Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd ed.
Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.
ХРАНЕНИЕ
После вскрытия хранить порошкообразную среду закрытой, чтобы избежать
гидратации