CD8 CD8 А Б - Medline.ru

Рис.
23.
Т-клеточная
принадлежность
основной
массы
патологических лимфоцитов. На гистограммах CD3/CD19 представлены
события, гейтированные как лимфоциты. Выраженное преобладание Тлимфоцитов при подозрении на лейкемизацию эритродермической
формы лимфомы кожи (гистограмма А); выраженное преобладание Тлимфоцитов
и
отсутствие
В-лимфоцитов
у
пациента
с
гепатоспленомегалией и абсолютным лимфоцитозом (до 225х109/л)
(гистограмма Б).
Вне зависимости от уровня лейкоцитоза относительное содержание
лимфоцитов у всех пациентов с Т-клеточной пролиферацией было более
70%, из них CD3-позитивные клетки составляли от 74 до 94%
(86,9±9,1%). У двух пациентов, длительно страдавших лимфомой кожи и
обследованных в связи с подозрением на лейкемизацию, суммарный
иммунофенотип основной массы пула циркулирующих лимфоцитов
оказался
практически
идентичным
и
полностью
соответствовал
клиническому диагнозу: все патологические клетки были позитивны по
CD4, а у пациентки с эритродермической формой ЛК также монотонно
экспрессировали CD2 и CD5 (рис.24).
У одного пациента (Г.) по результатам ИФТ циркулирующих
лимфоцитов периферической крови выявлен клон клеток с суммарным
фенотипом CD2+CD3+CD4+CD7+CD45+, заместивший не только Влимфоциты,
но
и
клетки,
несущие
маркеры
других
линий
дифференцировки; не выявлена экспрессия CD10, CD34, HLA-DR. Такая
фенотипическая картина в сочетании с информацией об анемии и
тромбоцитопении
позволила установить
диагноз хронического Т-
линейного зрелоклеточного лейкоза (adult T-cell leukemia).
CD8
А
CD8
Б
Рис. 24. Иммунофенотипический профиль лимфоцитов при ХЛПЗ
Т-клеточного происхождения. На гистограммах представлены события,
гейтированные как лимфоциты: А – тотальная экспансия CD4позитивными клетками (сплошная стрелка); Б - минимальная сохранность
CD8-позитивных
лимфоцитов
(пунктирная
стрелка)
при
резко
выраженном преобладании CD4+ (лейкемизация эритродермической
формы ЛК); коэкспрессия CD2 (В) и CD5 (Г) подтверждает Т-клеточную
принадлежность опухолевых клеток.
Представляют особый интерес результаты обследования мужчины
50 лет (К.), поступившего в клинику в связи с выраженным лейкоцитозом
(225х109/л), гепатомегалией (+16 см), спленомегалией, увеличением
подмышечных и паховых лимфатических узлов (+4 см). Морфологически
лимфоциты периферической крови небольшого и среднего размера с
относительно крупным круглоовальным ядром, в основном неправильной
формы
с
высоким
ядерно-цитоплазматическим
отношением.
При
исследовании костного мозга выявлена высокая клеточность при сужении
гранулопоэза, эритропоэз практически не представлен, основная масса
клеток
–
измененные
лимфоциты,
морфологически
идентичные
лимфоцитам периферической крови. При гистологическом исследовании
лимфатического узла выявлено полное замещение собственно ткани
лимфатического узла монотонным пролифератом из мелких угловатых
клеток с ядрами неправильной формы (рис.25).
Рис.25. Гистология лимфатического узла. Ткань почти полностью,
за
исключением
единичных
лимфоидных
фолликулов,
замещена
монотонным пролифератом из мелких угловатых клеток с ядрами
неправильной формы. Окраска гематоксилин-эозин.
По данным последующего иммуногистохимического исследования
ткани лимфатического узла выявлена выраженная мембранная экспрессия
CD3, умеренная мембранная экспрессия CD5 и цитоплазматическая
экспрессия cyclin D1. Отсутствовала экспрессия CD20, CD45RO, CD79a и
CD23.
Пролиферативная
активность,
оцененная
по
внутриядерного Ki-67, была низкая (рис.26).
А
Б
В
экспрессии
Рис.26. Иммуногистохимия лимфатического узла. Выраженная
мембранная экспрессия CD3 (А) и умеренная мембранная экспрессия
CD5(Б). Экспрессия Ki-67 (В) выявлена в единичных клетках (стрелки).
При
иммуноцитохимическом
исследовании
препаратов
периферической крови и костного мозга было подтверждено абсолютное
преобладание Т-лимфоцитов зрелого фенотипа CD3+, CD4+, CD8+ и
практически полное отсутствие В-лимфоцитов (CD20+, CD22+) (рис. 27).
А
Б
В
Рис.27. Иммуноцитохимия лимфоцитов периферической крови.
Выраженная экспрессия CD3 (А), CD4 (Б) и CD8 (В).
Для
лимфоцитов
определения
методом
суммарного
проточной
фенотипа
цитометрии
патологических
было
проведено
исследование периферической крови, костного мозга и ликвора до и
после химиотерапии. До начала ХТ в ПК и костном мозге выявлена
популяция двойных позитивных Т-клеток (CD3+CD4+CD8+) (рис.28), что в
совокупности с морфологическими и клиническими данными позволило
верифицировать редкий вариант Т-пролимфоцитарного лейкоза (табл.38).
CD4
CD8
CD3
CD4
CD3
SSC
FSC
CD8
CD8
Рис.28. Проточная цитометрия клеток периферической крови больного К.
до проведения ПХТ. На одномерных и двумерных гистограммах
представлены события, гейтированные как лимфоциты. Суммарный
фенотип доминирующей популяции расценен как CD3+CD4+CD8+.
Таблица 38
Иммунофенотип патологических клеток больного К. до ПХТ
Фенотипические маркеры
CD8+CD4+CD3+
-
CD8 CD3
+
+
CD8 CD4
CD3-CD19+
CD16+CD45+
Содержание положительных клеток, %
83,4
6,9
7,2
Не определяется
1,8
После проведения первого курса ПХТ (CHOP) значимые изменения
содержания трансформированных лимфоидных клеток в периферической
крови и костном мозге выявлены не были (рис.29), (табл.39).
А
CD4
Б
CD4
CD8
Рис.29. Представлены данные проточной цитометрии клеток ПК (А) и
костного
мозга
доминирование
(Б)
после
первого
патологического
курса
клона
ПХТ.
клеток
с
Сохраняется
фенотипом
CD3+CD4+CD8+.
Таблица 39
Иммунофенотип клеток ПК и костного мозга больного К. после
первого курса ПХТ
Фенотипические
маркеры
Относительное содержание лимфоцитов, %
периферическая кровь
костный мозг
CD8+CD4+CD3+
90,31
84,91
CD8+CD4-CD3+
не определяются
1,87
CD8-CD4+CD3+
8,06
8,80
CD3-CD19+
CD16+CD45+
не выявлены
В результате дальнейшего проведения ПХТ была достигнута
клинико-гематологическая ремиссия, однако, через 4,5 месяца больной
поступил в клинику повторно с картиной менингоэнцефалита. При
исследовании спинномозговой жидкости выявлен лимфоцитоз до 473/3 с
доминирующим фенотипом клеток CD3+CD4+CD5+CD8+, сохранявшимся
в ликворе, несмотря на проведение интенсивной ХТ (рис. 30).
CD3
CD4
FSC
CD4
CD8
Рис. 30. Представлена серия данных, полученных при проточной
цитометрии клеток ликвора больного К. при клинической картине
менингоэнцефалита. Несмотря на наличие популяций CD4+CD8- и CD4CD8+, возможно, осуществляющих ответ на герпес-вирусную инфекцию,
сохраняется опухолевая популяция двойных позитивных клеток с
фенотипом CD3+CD4+CD8+ (стрелки).
В последующем была получена кратковременная положительная
динамика неврологической симптоматики, но проявления основного
заболевания в виде умеренной лимфоаденопатии и значительного
абсолютного лимфоцитоза ПК (185х109/л) сохранялись. Устойчивость
опухолевого клона к проводимой ПХТ привела больного к гибели от
основного заболевания через два года от начала заболевания (момента
установления диагноза).