BD XLD Agar (Xylose-Lysine

ИНСТРУКЦИИ ПО
ПРИМЕНЕНИЮ — ГОТОВАЯ К
ИСПОЛЬЗОВАНИЮ СРЕДА В
ЧАШКАХ
PA-254055.06
Ред.: April 2013
BD XLD Agar (Xylose-Lysine-Desoxycholate Agar)
НАЗНАЧЕНИЕ
BD XLD Agar (ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар) является умеренно-селективной и
дифференциальной средой для выделения и дифференциации грамотрицательных
кишечных патогенов (Salmonella и Shigella) из клинических образцов. Она особенно
пригодна для выделения видов Shigella.
ПРИНЦИПЫ И ОПИСАНИЕ МЕТОДИКИ
Микробиологический метод.
Агар XLD Agar был разработан Тейлором для повышения эффективности изоляции и
идентификации кишечных патогенов, в особенности Shigella.1 Патогены
дифференцируются не только от непатогенных микроорганизмов, ферментирующих
лактозу, но и от многих непатогенных микроорганизмов, не ферментирующих лактозу
или сахарозу. Кроме того, специальная рецептура улучшает рост Shigella,1 который был
затруднен в других рецептурах из-за наличия токсичных ингибиторов. Результаты,
полученные в ряде клинических исследований, подтвердили относительно высокую
эффективность агара XLD Agar для первичной изоляции Shigella и Salmonella.2-6 Агар
XLD Agar является одной из сред, используемых в тестах Microbial Limit Tests,
запатентованных в США и ЕС.9, 10
Агар XLD Agar служит одновременно селективной и дифференциальной средой. Он
содержит дрожжевой экстракт, являющийся источником питательных веществ и
витаминов. В качестве селективного агента используется дезоксихолат натрия,
обеспечивающий подавление грамположительных микроорганизмов. Ксилоза
содержится в среде по той причине, что она ферментируется практически всеми
кишечными микроорганизмами, кроме шигеллы, и это свойство позволяет
дифференцировать образцы Shigella. Лизин добавлен для того, чтобы можно было
дифференцировать группу Salmonella от непатогенных микроорганизмов, поскольку без
лизина сальмонелла будет быстро ферментировать ксилозу и ее невозможно будет
отличить от непатогенных образцов. После того как сальмонелла израсходует запас
ксилозы, энзим лизиндекарбоксилаза расщепляет лизин и восстанавливает щелочной
pH, что аналогично реакции Shigella. Во избежание аналогичного восстановления со
стороны лизин-положительных кишечных палочек для создания избытка кислоты
добавлены лактоза и сахароза.1
Для улучшения дифференцирующей способности данной рецептуры была добавлена
система индикации H2S, содержащая тиосульфат натрия и цитрат железа-аммония, для
визуализации выделенного сероводорода путем формирования колоний с черными
центрами. Непатогенные микроорганизмы, выделяющие H2S, не декарбоксилируют
лизин; поэтому производимая ими кислотная реакция предотвращает почернение
колоний, которое происходит только при нейтральном или щелочном pH.1
PA-254055.06
-1-
РЕАГЕНТЫ
BD XLD Agar
Рецептура* на литр очищенной воды
Ксилоза
3,5 г
L-лизин
5,0
Лактоза
7,5
Сахароза
7,5
Натрия хлорид
5,0
Дрожжевой экстракт
3,0
Феноловый красный
0,08
Дезоксихолат натрия
2,5
Натрия тиосульфат
6,8
Железа-аммония цитрат
0,8
Агар
13,5
pH 7,4 +/-0,2
* При необходимости изменяется и/или дополняется для соответствия критериям
эффективности.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Только для профессионального применения.
Не используйте чашки при наличии признаков бактериального заражения, изменения
цвета, высыхания или других признаков разложения продукта.
Прочитайте документ ОБЩИЕ ИНСТРУКЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ, в котором приведено
описание асептических методов работы, биологических опасностей и утилизации
использованных продуктов.
ХРАНЕНИЕ И СРОК ГОДНОСТИ
После получения храните чашки в темноте при температуре от 2 до 8 °C в оригинальной
обертке до начала использования. Избегайте замораживания и перегрева. Чашки могут
быть засеяны до даты истечения срока годности (см. этикетку на упаковке) и
инкубированы в течение рекомендованного времени инкубации.
Чашки из открытых стопок по 10 чашек могут использоваться в течение одной недели при
условии хранения с соблюдением чистоты при температуре от 2 до 8 °C.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Засейте репрезентативные образцы следующими штаммами (подробные сведения см. в
документе ОБЩИЕ ИНСТРУКЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ). Инкубируйте чашки в анаэробных
условиях при температуре от 35 до 37 °C в течение 18 – 24 ч.
Штаммы
Результаты роста
Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Рост от хорошего до превосходного; красные
колонии с черными центрами
Salmonella Abony DSM 4224
Рост от хорошего до превосходного; красные
колонии с черными центрами
Shigella flexneri ATCC 12022
Рост от хорошего до превосходного; красные
колонии
Shigella sonnei ATCC 25931
Рост от хорошего до превосходного; красные
колонии
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Ингибирование от частичного до полного
Escherichia coli ATCC 25922
Ингибирование от частичного до полного; колонии
от желтого до желто-красного цвета
Proteus mirabilis ATCC 12453
Рост; розовые колонии с черными центрами, рост
бактерий подавляется
Незасеянные
Красные
PA-254055.06
-2-
МЕТОДИКА
Поставляемые материалы
BD XLD Agar (Xylose-Lysine-Desoxycholate Agar) (чашки Stacker 90 мм). Свободные от
микроорганизмов.
Непредоставляемые материалы
Дополнительная питательная среда, реагенты и лабораторное оборудование по мере
необходимости.
Типы образцов
Это селективная дифференциальная среда для изоляции Salmonella и Shigella в образцах
кала или ректальных мазках пациентов с подозрением на бактериальную кишечную
инфекцию или в неклинических материалах (см. также раздел ЭФФЕКТИВНОСТЬ И
ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ).
Методика тестирования
Выполните посев образца как можно скорее после поступления в лабораторию. Чашка
для посева используется, главным образом, для отделения чистых культур от образцов,
содержащих смешанную флору. В качестве альтернативы, если материал засевается
непосредственно с тампона, проверните тампон над небольшим участком поверхности
возле края, а затем сделайте штрихи с этого засеянного участка.
Следует выполнить засев менее селективной среды, такой как агар BD MacConkey II
Agar, чтобы увеличить вероятность обнаружения при низкой популяции
грамотрицательных микроорганизмов и обеспечить индикацию других микроорганизмов,
присутствующих в образце.
Инкубируйте чашки в защищенных от света условиях при температуре 35 ±2 °C в
течение 18 – 24 ч. Для полного проявления окрашивания колоний на агаре XLD Agar
может потребоваться инкубация в течение 48 ч.
Агар XLD Agar может использоваться как среда для пересева из среды Selenite F Broth.
Результаты
Типичная морфология колоний выглядит следующим образом:
Микроорганизмы
BD XLD Agar (Xylose-Lysine-Desoxycholate Agar)
E. coli
Крупные, плоские, желтые; некоторые штаммы
могут быть ингибированы
Enterobacter/Klebsiella
Слизеподобные, желтые
Proteus
От красного до желтого; большинство штаммов
имеют черные центры
Salmonella, H2S-положительные
Красно-желтые с черными центрами
Shigella, Salmonella,
Красные
H2S-положительные
Pseudomonas
Красные
Грамположительные бактерии
От отсутствия роста до небольшого роста
ЭФФЕКТИВНОСТЬ И ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ
Агар BD XLD Agar используется для изоляции бактерий Salmonella и/или Shigella в
образцах кала или ректальных мазках человека. Он особенно рекомендуется для
изоляции образцов Shigella.7,8
Посев в одну среду крайне редко позволяет обнаружить все патогенные микроорганизмы,
содержащиеся в образце. Поэтому вместе с образцом необходимо засеять другую среду
для изоляции Salmonella и/или Shigella и, возможно, других кишечных патогенных
микроорганизмов.
Определенным штаммам Shigella может потребоваться инкубационный срок от 42 до 48 ч.
Несмотря на то, что определенные диагностические тесты можно выполнять
непосредственно в этой среде, для полной идентификации необходимо провести
биохимическое и, если показано, иммунологическое тестирование с использованием
чистых культур. См. соответствующие справочные материалы. 3,4,7
PA-254055.06
-3-
СПРАВОЧНЫЕ МАТЕРИАЛЫ
1. Taylor, W.I. 1965. Isolation of shigellae. I. Xylose lysine agars; new media for isolation of
enteric pathogens. Am. J. Clin. Pathol., 44:471-475.
2. Taylor, W.I., and B. Harris. 1965. Isolation of shigellae. II. Comparison of plating media and
enrichment broths. Am. J. Clin. Pathol. 44:476-479.
3. Taylor, W.I., and B. Harris. 1967. Isolation of shigellae III. Comparison of new and
traditional media with stool specimens. Am. J. Clin. Pathol. 48:350-355.
4. Taylor, W.I., and D. Schelhart. 1967. Isolation of shigellae. IV. Comparison of plating media
with stools. Am. J. Clin. Pathol. 48:356-362.
5. Taylor, W.I., and D. Schelhart. 1968. Isolation of shigellae. VI. Performance of media with
stool specimens. Appl. Microbiol. 16:1387-1393.
6. Pollock, H.M., and B.J. Dahlgren. 1974. Clinical evaluation of enteric media in the primary
isolation of Salmonella and Shigella. Appl. Microbiol. 27:197-201.
7. Bopp, C.A., Brenner, F.W., Fields, P.I., Wells, J.G., and N.A. Strockbine. 2003. Escherichia,
Shigella, and Salmonella. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and
R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for
Microbiology, Washington, D.C.
8. Kist, M., et al. 2000. Infektionen des Darmes. In: Mauch, H., Lüttiken, R., and S. Gatermann
(eds.): MiQ - Qualitätsstandards in der mikrobiologisch-infektiologischen Diagnostik, vol. 9.
Urban & Fischer, Munich, Germany.
9. U.S. Pharmacopeial Convention, Inc. 2009. The U.S. Pharmacopeia 32/The national formulary
27--2009. U.S. Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, Md. USA
10. Council of Europe, 2008. European Pharmacopoeia, 6.1. European Pharmacopoeia
Secretariat. Strasbourg/France
УПАКОВКА И НАЛИЧИЕ
BD XLD Agar
№ по каталогу 254055
№ по каталогу 254090
Готовая к использованию среда в чашках; 20 чашек
Готовая к использованию среда в чашках; 120 чашек
ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
Для получения дополнительной информации обратитесь к местному представителю
компании BD.
Becton Dickinson GmbH
Tullastrasse 8 – 12
D-69126 Heidelberg/Germany
Phone: +49-62 21-30 50
Fax: +49-62 21-30 52 16
Reception_Germany@europe.bd.com
http://www.bd.com
http://www.bd.com/europe/regulatory/
ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection
BD, BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company. © 2013 BD
PA-254055.06
-4-