Food Diagnostic Engineering Методы контроля антибиотиков. Применение индикаторных методов анализа для оценки показателей безопасности Докладчик – Демидов Дмитрий Эдуардович Генеральный директор ООО «АТЛ» www.atl-ltd.ru (495) 981-60-69 2015 Причины попадания антибиотиков в сырьё Несоблюдение правил содержания животных, находящихся на лечении; Корма, контаминированные антибиотиками; Физиологические особенности животного (более позднее выведение антибиотика из организма); Ненадлежащий контроль молока Основные причины для тестирования: • Риски для здоровья потребителей (в особенности - детей) • Технологические риски – несквашивание и финансовые потери • Необходимость соблюдения требований законодательства Методика: Удобство применения: «Смешайте, погрузите и подождите» Жидкостная хроматография Широко используется почти во всех областях экспресс-диагностики Преимущества: • Экономия времени • Экономия средств • Исключение ошибок Dr Alan Weiss (IVDT, Nov 1999, p. 48) Тест-полоска Авидин Микролунка Конъюгат Ат-метка Антибиотик Реакция Антиген-антитело Авидин иммобилизирован на контрольной линии, антибиотик – на тестовой Иммунокомплекс не связан с аналитом Протокол: 1 2 Инкубируйте микролунки Погрузите тестполоски • Первый в мире комбинированный тест-набор 4х, полностью соответствует новейшим требованиям законодательства РФ и ТС (левомицетин на уровне 0,0003 мг/кг (л) • Защищен международным патентом • • • • ß-лактамы + Стрептомицин + Левомицетин + Тетрациклин Высокочувствительный надежный тест. Проверен временем. При участии ГНУ ВНИМИ Россельхозакадемии «4SENSOR» внесен в ГОСТ Р 53774-2010 и Межгосударственный стандарт ГОСТ 32219-2013 Тест-набор «4SENSOR» успешно прошел все необходимые испытания в ГНУ ВНИИМС Россельхозакадемии (г. Углич) Визуальная интерпретация результатов Сравнение интенсивности окраски тестовой линии с контрольной: - Тестовая линия темнее контрольной – Антибиотика НЕТ; - Тестовая линия светлее контрольной, или невидима – Антибиотик ЕСТЬ - Тестовая и контрольная линия одинаковые – антибиотик на границе предела обнаружения – необходимо дополнительное тестирование. Обновленная версия теста 4SENSOR с программным обеспечением V.10 Cтандартные растворы для точных результатов анализа (положительный и отрицательный контроль); Обеспечение точных результатов при тестировании восстановленного, ультрапастеризованного (пастеризованного), замороженного молока; Подтверждение надежности метода испытаниями ILVO на коровьем, козьем и овечьем молоке. Влияние различных факторов на точность измерения антибиотиков тестом 4SENSOR № Влияющий фактор НАИМЕНОВАНИЕ АНТИБИОТИКА Β-лактамы Тетрациклин Стрептомицин Хлорамфеникол Не влияет Не влияет Не влияет Незначительное Не влияет увеличение чувствит-ности Незначительное Не влияет снижение чувствит-ности Не влияет ЛО на границе предельного значения (0,3 ppb) Не влияет Не влияет Незначительное снижение чувствительности Незначительное Не влияет снижение чувствит-ности Увеличение Увеличение чувствит-ности чувствит-ности Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет Замораживание проб до -20°C (15 дней) Присутствие моющих средств Не влияет NaOH в концентрации 0,06% (20 л на 1 т молока) Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет Восстановленное сухое молоко Не влияет Не влияет Не влияет Не влияет 10 Ультрапастеризованное(цельные/обезжиренные) Существует риск получения ложноотрицательных результатов, рекомендуется перед анализом разбавлять пробы до 20% сырым коровьим молоком. 11 Пастеризация молока (60°C в течение 30 мин) Не влияет 4 Задержка времени интерпретации результата на 58 мин Увеличение продолжительности инкубирования на 1 мин (при t=40оС) Уменьшение продолжительности инкубирования на 1 мин (при t=40оС) Снижение температуры инкубации (≤38°C) 5 Повышение температуры инкубации ( ≥42°C) 6 Недостаточная гомогенизация молока 1 2 3 7 8 9 Не влияет Не влияет Не влияет Разнообразие продукции – тесты для выявления: • Антибиотиков: Бета-лактамы, Тетрациклины, Сульфаниламиды, Фторхинолоны, Макролиды, Аминогликозиды… • Микотоксинов: Афлатоксин М1 (Разработан проект ГОСТ) • Фальсификатов: Меламин (Документация в работе) HEATSENSOR®: • Совместимость со всеми тестами UNISENSOR • Программирование температурного режима для различных тестов • Автоматический таймер с индикацией и звуковым сигналом HEATSENSOR® DUO: Автоматическое перемещение тест-полосок после первой инкубации Одношаговая процедура Современные разработки для объективной интерпретации результатов Удобный интерфейс (сканер + принтер + клавиатура); Автономная работа с разными программами для проведения измерений; Встроенное программное обеспечение калибровки ридера; Сканируемая индивидуальная калибровка к разным методам; Простое управление измерением Выводы: Существует несомненная потребность в использовании антибиотиков в животноводстве, но это использование необходимо тщательным образом контролировать. Отсутствие контроля влечет риски для здоровья. Отсутствие контроля влечет технологические риски. Законодательство требует контролировать остаточные количества антибиотиков. Тестирование необходимо на ранних стадиях, чтобы гарантировать качественный контроль. Спасибо за внимание! Ленинградская область и СевероЗападный округ ООО «Энилаб» www.anylab.ru +7(812) 603-29-37 Тел./Факс: +7 (812) 931-86-35 Email: info@anylab.ru Эксклюзивный представитель в РФ – ООО «АТЛ» www.atl-ltd.ru +7(495) 981-60-69 Тел./Факс: +7 (495) 653-82-69 Email: info@atl-ltd.ru Моб. тел.: +7 (967) 144-26-52