α-L-Фукосидаза(АФУ) Процедура анализа Ферментативный колориметрический метод; один реагент Назначение Диагностический реагент α-L-Фукосидаза(АФУ) используется для количественного определения в лабораторных условиях АФУ в сыворотке крови человека с использованием фотометрических систем. Обозначение AF4541 AFU Reagent AF6541 AFU Reagent AF7541 AFU Reagent AF9541 AFU Reagent Содержание 3×400mL 2×80mL 2×60mL 2×80mL Клиническое значение АФУ является лизосомальным ферментом, участвующим в деградации различных групп естсественных фукоглюкоконюгатов. Активность сыворотки АФУ считается полезным знаком гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК). Увеличение АФУ в сыворотке крови является первым признаки ГЦК. Хотя измерения сыворотки фетопротеина (АФП) является обычной практикой для раннего выявления ГЦК, один АФП анализ страдает от его низкой специфичности и чувствительности, связанными с тем, что не все ГЦК выделяют АФП. Целых 40% пациентов с ранними ГЦК и 15-20% пациентов с прогрессивным ГЦК, их уровни АФП могут быть нормальными. Недавние исследования показали, что измерения и АФП и АФУ могут значительно повысить специфичность и чувствительность обнаружения для ГЦК. По имеющимся данным АФУ может быть более чувствительным показателем особенно для обнаружения мелкоклеточных ГЦК. Принцип Анализ АФУ основан на ферментативном расщеплении синтетических субстратов 2-хлор-4-нитрофенил-α-L-фукопиранозид к α-L-фукозиду и 2-хлор-4-нитрофенолу, которые можно измерить с помощью измерения поглощения при 405 нм кинетическим методом. Одна единица АФУ определяется как количество АФУ, которое расщепляет один мкмоль 2-хлор-4-нитрофенил-α-L-фукозида за мин при 37 ℃. Компоненты комплекта Состав Концентрация растворов Буфер 100 мМ 2-хлор-4-нитрофенил-α-L1ммол/Л фукопиранозид Хранение и стабильность Невскрытые комплекты(флаконы): до истечения срока годности при 2-8 ℃.. Стабильность вскрытых реагентов при условии нахождения на «борту» автоматического биохимического анализатора 1 недель. Подготовка препарата Сыворотка Стабильность: 1 неделя при 4℃ Действительно с 2010.05.01 версия: 01 Бланк Образец Реагент 225μl 225μl Дистиллированная вода 25μl Образец 25μl Смесь инкубируется в течение 3 минут при 37 ℃.Прочит а т ьк оэ ффицие нтпог л още ниявт е ч е ние3 минут и вычислить среднюю скорость изменения коэффициента поглащения ΔA/ мин. Основная длина волны 405нм Суб длина волны 505нм Метод показатель Фактор(Ф*) 1250 Расчеты АФУ(U/L) = ΔA/мин × Ф*. Tv × 1000 Фактор = ε× Sv × L ε: коэффициент экстинкции ммол Tv: Общий объем реакционной смеси (мл) Sv: Объем образца (мЛ) L: оптический путь (1,0 см) Референтный интервал 0-40 Ед / Л Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория устанавливала свой образцовый интервал . Контроль качества Для ежедневного контроля качества рекомендуются Лидмэн АФУ контроль. Контроль интервалов и ограничений должен быть адаптирован к индивидуальным требованиям каждой лаборатории. Полученные значения должны находиться в определенных пределах. Каждая лаборатория должна выработать меры по устранению, которые должны быть приняты, в случае если значения выходят за пределы. Калибровка Бланк калибровки рекомендуется: - Меняется номер Лота реагентов. - Контрольные значения изменились или находятся вне диапазона и новая пробирка контроля не устраняет проблему. Метрологические характеристики Линейность Метод линейный до 300 Ед / Л. Образцы выше этой концентрации необходимо разбавить 1 +1(один к одному) с 0,9% раствором хлорида натрия , результат умножается на 2. Аналитическая чувствительность (нижний предел обнаружения) Предел обнаружения: 1Ед/Л. (АНАЛИЗАТОРЫ ХИТАЧИ) CE-JS-003-AFU-01 стр 1 из 2 α-L-Фукосидаза(АФУ) Ферментативный колориметрический метод; один реагент Точность (при 37℃ ) Внутрисерийная n= 20 Уровень 1 Уровень 2 Значение (U/L) 38.71 46.60 SD (U/L) 0.74 0.70 CV (%) 1.91 1.49 Межсерийная n= 20 Уровень 1 Уровень 2 Значение (U/L) 38.56 45.34 SD (U/L) 0.96 1.04 CV (%) 2.48 2.29 Взаимное влияние Влиянием следующих веществ можно пренебречь, если концентрации следующих веществ находится на уровне или ниже данных значений. Вещества Прямой билирубин Общий билирубин Гемоглобин Интралипид BC Концентрации 8 мг/дл 8 мг/дл 100 мг/дл 0.40 % 50 мг/дл Автоматизация Специальные приспособления для автоматических анализаторов могут быть сделаны по запросу Данные по безопасности материалов профессиональных пользователей по запросу. для Ссылки 1. Зиелке K. и др. Фукозиды: Диагноз с помощью анализа сыворотки α-L-фукозидазы. Дж.. Лаб. Клин. Мед. 79: 164 (1972.) 2. Джардина М.Г. и др. Сыворотка α-L-фукозидаза. A useful marker in the diagnosis of hepatocellular carcinoma, 70:1044 (1992). Полезный знак в диагностике гепатоцеллюлярной карциномы, 70:1044 (1992). 3. Айдэ Д. и др. Значение активности сыворотки α-L-фукозидаза в диагностике колоректального рака. Онкология, 59:310 (2000). IVD Группа компаний «LEADMAN» Адрес: Южная дорога Хонда, 5, Зона технико-экономического развития, Пекин, Китай, 100176 Тел. 0086-10-67855500 Факс:0086-10-84923540 Меры предосторожности и предупреждения Общие меры предосторожности Использовать только для диагностики in vitro. Диагноз должен быть поставлен только после принятия во внимание клинических симптомов и результатов других испытаний . Выполнение обычных мер предосторожности, необходимых для обработки всех лабораторных реагентов. Удаление всех отходов должно осуществляться в соответствии с местными правилами. Меры предосторожности для измерения Образцы должны рассматриваться как потенциально инфекционные (ВИЧ, вирус гепатита В, вирус гепатита С, и т.д.) и необходимо обращаться с ними с соответствующей осторожностью. Реагенты с другими серийными номерами не должны быть заменены или смешаны. Для диагностических целей, результаты всегда должны быть оценены в сочетании с историей болезни пациента, клиническими обследованиями и другими выводами. Действительно с 2010.05.01 версия: 01 CE-JS-003-AFU-01 стр 2 из 2