БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ Кафедра молекулярной биологии

БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ
Кафедра молекулярной биологии
Аннотация к дипломной работе
Жилач
Анна Леонидовна
ДИАГНОСТИКА ВИРУСА ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА С
ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТОДОВ ИММУННОФЕРМЕНТНОГО
АНАЛИЗА И ИММУННОГО БЛОТТИНГА
Научный руководитель:
кандидат биологических
наук
Кулик Е. В.
Минск, 2014
РЕФЕРАТ
Дипломная работа 44 с., 10 рис., 7 табл., 21 источника литературы, из
них 9 русскоязычных и 12 англоязычных.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ: ДИАГНОСТИКА ВИРУСА ИММУННОДЕФИЦИТА
ЧЕЛОВЕКА
С
ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ
МЕТОДОВ
ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА И ИММУННОГО БЛОТТИНГА.
Объектом исследования в данной работе является сыворотка крови
людей, входящих в группу риска заражения ВИЧ-инфекцией.
Цель работы: диагностировать наличие или отсутствие антител к ВИЧ
в сыворотке крови людей, входящих в группу риска заражения ВИЧинфекцией.
Для анализа сыворотки методом ИФА использовали коммерческий
набор «Тест-система для определения антител к ВИЧ методом
иммуноферментого
анализа
«ИФА-ВИЧ-1,2-АТ»,
разработанный
государственным учреждением «Республиканский научно-практический
центр эпидемиологии и микробиологии» Министерства здравоохранения
Республики Беларусь.
Методом иммунного блоттинга выявляют антитела к белкам оболочки
(gp120, gp41), сердцевины (p24, p17) и ферментам вируса (р66, р31).
В результате проведенного двукратного анализа сывороток методом
твердофазного ИФА с использованием вышеуказанного коммерческого
набора была установлена недостаточная чувствительность используемой
тест-системы.
Трехступенчатый анализ 30-ти проб сыворотки крови, включающий
двухстадийное исследование иммуноферментным методом и однократный
анализ методом иммунного блоттинга, позволил установить, что в 28
образцах отсутствует вирус иммунодефицита человека. Сыворотка крови
одного образца содержит такие антитела к ВИЧ-1, как белки оболочки вируса
(gp120 и gp41), а также белок сердцевины (р24) и ферменты вируса (р31), что
определяет носительство вируса. Еще один образец при проведении
иммунного блоттинга показал наличие следующих белков: белок оболочки
gp41 и белок сердцевины р24, что определяется как неопределенный
результат исследования и требует проведения дополнительного анализа.
Ключевые
слова:
вирус,
иммунодефицит,
ВИЧ,
СПИД,
иммуноферментный анализ, иммунный блоттинг, белок, вирион, капсид,
структура ВИЧ, оболочка.
РЭФЕРАТ
Дыпломная работа 44 с., 10 iлюстр., 7 табл., 21 крыніцы літаратуры, з іх
9 рускамоўных і 12 англоязычных.
АПРАДЗЯЛЕННЕ: ДИЯГНОСТЫКА ВIРУСА IМУНАДЭФIЦIТА
ЧАЛАВЕКА З ВЫКАРЫСТАННЕМ МЕТАДАУ IМУНАФЯРМЕНТНАГА
АНАЛIЗУ I IМУННАГА БЛОТТIНГА.
Аб'ектам даследавання з'яўляецца сываратка крыві людзей, якія
ўваходзяць у групу рызыкі заражэння ВІЧ-інфекцыяй.
Мэта работы: дыягнаставаць наяўнасць або адсутнасць антыцел да ВІЧ
у сываратке крыві людзей, якія ўваходзяць у групу рызыкі заражэння ВІЧінфекцыяй.
Для аналізу сывараткі метадам ІФА выкарыстоўвалі камерцыйны набор
«Тэст-сістэма для вызначэння антыцел да ВІЧ метадам iммунаферментнага
аналізу «ІФА-ВІЧ-1,2-АТ», якая была распрацавана дзяржаўнай установай
«Рэспубліканскі навукова-практычны цэнтр эпідэміялогіі і мікрабіялогіі»
Міністэрства аховы здароўя Рэспублікі Беларусь.
Метадам імуннага блоттiнга выяўляюць антыцелы да бялкоў абалонкі
(gp120, gp41), асяродку (p24, p17) і ферментаў віруса (р66, p31).
У выніку праведзенага двухразовага аналізу сываратак метадам
цвердафазнага ІФА з выкарыстаннем вышэйназванага камерцыйнага набору
была ўсталявана недастатковая адчувальнасць выкарыстанай тэст-сістэмы.
Трохступенчаты аналіз 30-ці пробаў сывараткі крыві, які ўключае
двухстадийное даследаванне імунаферментным метадам і аднакратны аналіз
метадам імуннага блоттiнга, дазволіў усталяваць, што ў 28 пробах адсутнічае
вірус імунадэфіцыту чалавека. Сываратка крыві адной пробы змяшчае такія
антыцелы да ВІЧ-1, як бялкi абалонкі віруса (gp120 i gp41), а таксама бялок
асяродку (р24) і фермент віруса (р31), што адзначае прысутнасть вiруса у
крывi. Яшчэ адна проба пры правядзенні імуннага блоттiнга паказала
наяўнасць наступных бялкоў: бялок абалонкі gp41 і бялок асяродку р24, што
вызначаецца як неадназначаны вынік даследавання і патрабуе правядзення
дадатковага аналізу.
Ключавыя словы: вірус, імунадэфіцыт, ВІЧ, СНІД, імунаферментны
аналіз, імунны блоттiнг, бялок, вiрiон, капсид, структура ВІЧ, абалонка.
SUMMARY
Thesis 44 pp., 10 fig., 7 tabl., 21 source literature, 9 of them Russian and 12
English-speaking.
The object of study in this work is the serum of people at risk of HIV
infection.
Aim: to diagnose the presence or absence of antibodies to HIV in the blood
serum of people at risk of HIV infection.
Analysis of the serum by Elisa using a commercial set of test system for
detection of antibodies to HIV by immunofermentogo Elisa-analysis of HIV-1, 2-at
"public institution" Republican Scientific and practical Center for epidemiology
and microbiology» of Ministry of health of the Republic of Belarus.
Method of immune antibodies to detect proteins blot should be performed
(gp120, gp41), core (p24, p17) and enzymes (r66, P31).
As a result of two-times serum analysis by steadily ELISA using the
commercial set is the lack of sensitivity of the test system.
A three-step analysis of the 30-minute samples of blood serum containing
dvuhstadijnoe study using immune enzymatic method and analysis method of
single immune blot should be performed, revealed that in 28 samples does not have
the human immunodeficiency virus. One serum sample contains antibodies to the
HIV-1 virus envelope proteins (gp120 and gp41), as well as the protein core (R24)
and enzymes (P31) that identifies the carrier of the virus. Another sample of
immune proteins the following showed blot should be performed: protein gp41 and
shell core protein p24 antigen, which is defined as an undefined result of research
and requires further analysis.
Keywords: virus, immune deficiency, HIV, AIDS, Elisa blot, protein,
immune, virion, capsid, the structure of the HIV envelope.