К ИЗУЧЕНИЮ БАКТЕРИЦИДНЫХ И ДЕЗИНФЕКЦИОННЫХ

***** ИЗВЕСТИЯ *****
№ 2(26), 2012
Н И Ж Н Е В О ЛЖ С КОГ О А Г Р ОУ Н И В Е РС И Т ЕТ С КОГ О КО МП Л Е КС А
ЗООТЕХНИЯ И ВЕТЕРИНАРИЯ
УДК: 619:616.084:616.12
К ИЗУЧЕНИЮ БАКТЕРИЦИДНЫХ И ДЕЗИНФЕКЦИОННЫХ СВОЙСТВ
ПРЕПАРАТОВ НЕФТЕХИМИЧЕСКОГО СИНТЕЗА
А.Г. Юсифов, кандидат ветеринарных наук
Азербайджанский Научно-Исследовательский Ветеринарный Институт
В статье рассмотрены вопросы изыскания и испытания некоторых препаратов нефтехимического синтеза для ветеринарной дезинфекции.
Ключевые слова: нефтехимический синтез, бактерицидные свойства, дезинфекция.
Для успешной борьбы с инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных необходимо проведение комплекса ветеринарно-санитарных мероприятий, среди которых дезинфекция занимает одно из ведущих мест.
Известно, что для дезинфекции объектов животноводства предложено множество средств. Однако некоторые из применяемых на практике препаратов являются малодоступными, дорогостоящими, вредно влияют на обслуживающий персонал, вызывают коррозию металлов и т.д., поэтому изыскание новых дезинфекционных средств
считается важным направлением ветеринарной науки.
В научной литературе имеются сведения [1-11] о том, что различные препараты
нефтехимического синтеза обладают высокими бактерицидными и дезинфекционными
свойствами и рекомендуются для применения в практике в качестве дезинфекционных
средств.
Мы проводили исследования по изучению бактерицидных и дезинфекционных
свойств 46 препаратов, синтезированных в лабораториях Научно-Исследовательских
Институтов Нефтехимических Процессов, Химии Присадок и Педагогического Института Азербайджана.
В качестве тест-культуры использовали E. сoli (штамм 1243), Staph. аureus
(штамм №209-P), Bas. anthracoides (штамм 1312). Работу проводили по методам, принятым в ветеринарной санитарии.
Вначале изучали некоторые физико-химические свойства (растворимость в воде,
pH, стойкость растворов или же эмульсий при хранении и т.д.) отдельных соединений.
Для нерастворимых в воде препаратов использовали эмульгаторы контакт Петрова,
сульфонол, ОП-10 и др.
Для определения бактерицидного разведения химических веществ устанавливали ряд стерильных колб емкостью не менее 50 мл каждая. В первую колбу вносили
10 мл основного разведения 1:50, во все остальные – по 10 мл стерильной дистиллированной воды. Затем во вторую колбу вносили 25 мл основного раствора и после тщательного взбалтывания с имеющейся там водой брали из этой колбы 25 мл раствора и
переносили в следующую. Из этой колбы после взбалтывания вновь брали 25 мл раствора и переносили в следующую колбу и т.д.
1
***** ИЗВЕСТИЯ *****
№ 2(26), 2012
Н И Ж Н Е В О ЛЖ С КОГ О А Г Р ОУ Н И В Е РС И Т ЕТ С КОГ О КО МП Л Е КС А
Одновременно готовили бульонную культуру микробов. Для этого в колбу с
бусами наливали 25 мл бульона и вносили в него 0,25 мл суточной бульонной культуры микроба. Через сутки бульонную культуру фильтровали через стерильный марлево-ватный фильтр. В расставленные колбы вносили с интервалами в 30 секунд по
0,5 мл 24 часовой бульонной культуры микробов. После 10-минутного выдерживания
из колб с интервалом в 30 секунд платиновой петлей брали и переносили в пробирки
с бульоном.
Через 30 минут, сохраняя тот же интервал, вновь брали пробы и делали вторичный посев на бульон. После этого колбы с бульоном ставили в термостат с температурой 37 0С. Первый раз посевы просматривали через 10 часов и окончательно через –
7 дней.
Если в первом ориентировочном опыте роста микробов не устанавливали, то,
увеличив количество разведений, опыт повторяли, причем те разведения (особенно
первые), которые уже испытанные, не включали в опыт. Но если средство не оказывало
губительного действия на культуры и в первых разведениях, тогда концентрацию основного разведения увеличивали до 1:20 или 1:10 и опыт повторяли.
Испытание препаратов проводили при экспозициях 10, 30, 60 минут, 3 часа и
24 часа.
Силу (критерия) бактерицидного действия новых соединений сравнивали с фенолом. Зная бактерицидное разведение фенола в отношении микробов кишечной палочки равное 1:137,2 при 30-ти минутной экспозиции установили, во сколько раз сильнее или же слабее бактерицидности изучаемого препарата.
В первых опытах бактерицидное действие препаратов проверяли в отношении
микробов кишечной палочки и установили наличие бактерицидности 26-ти соединений. Результаты некоторых бактериологических исследований приводятся в таблице.
Как видно из таблицы, бактерицидное разведение 2,2-дитиофосфинциклогексана и ОП-10 (1:1) при всех экспозициях равно 1:50, т.е. данное соединение обладает слабым антимикробным действием.
Таблица 1 – Бактерицидное действие некоторых препаратов нефтехимического синтеза
в отношении микробов кишечной палочки
№
Бактерицидное разведение в экспозициях
Наименование препараn/
10
30
60
3
24
та
n
минут
минут
минут
часа
часа
1. 2,2 дитиофосфинцикло1:50
1:50
1:50
1:50
1:50
гексан и ОП-10 (1:1)
2. Эфиран 14-46
1:50
1:70
1:70
1:70
1:98
3. Сульфат β–
диметилами-но-n1:70
1:137,2
1:137,2
1:192,8
1:737,9
метоксипропиофенон
4. Бромэтилат β–
диметила-мино1:98
1:137,2
1:268,8
1:737,9
1:737,9
пропиофенон
5. Солянокислая соль β1:192,8
1:268,8
1:527,1
1:737,9
1:737,9
2
***** ИЗВЕСТИЯ *****
№ 2(26), 2012
Н И Ж Н Е В О ЛЖ С КОГ О А Г Р ОУ Н И В Е РС И Т ЕТ С КОГ О КО МП Л Е КС А
6.
7.
диметил амино-2-окси5-хлор-пропиофенона
Эфиран 12-96 и контакт
Петрова (2:1)
Контакт Петрова
(контроль)
1:2834,7
1:3698,0
1:5566,0
1:5566,0
1:5566,0
1:527,1
1:527,1
1:527,1
1:527,1
1:527,1
Эфиран 14-46 в разведении 1:50 губительно действует на микробы кишечной
палочки за 10 минут, в разведении 1:70 – за 30 минут, а в разведении 1:98 – за 24 часа.
От воздействия сульфата β–диметиламино-п-метоксипропиофенона кишечная
палочка погибает в разведении 1:70 в течение 10 минут; 1:137,2 – 30 минут; 1:192,8 –
3 часа; а в разведении 1:737,9 – 24 часа.
Водный раствор бромэтилат β–диметиламинопропиофенона в разведении
1:98 обладает бактерицидным свойством при 10-ти минутной экспозиции, а препарат в
разведении 1:737,9 инактивирует микробы при 3-х часовой экспозиции.
Сравнительно высоким антимикробным соединением оказалась соляно-кислая
соль β–диметил амино-2-окси-5-хлор-пропиофенон, которая губительно действует в
разведении 1:192,8 уже за 10 минут, 1:268,8 – 30 минут, 1:527,1 – за 1 час и 1:737,9 – за
3 часа.
Наиболее высокой бактерицидностью обладает эфиран 12-96 с контактом Петрова в соотношении 2:1, который вызывает гибель микробов кишечной палочки в разведении 1:2834,7 за 10 минут, 1:3698,0 за 30 минут, 1:5566,0 за 1 час.
В следующих опытах бактерицидное действие эфирана 12-96 изучено в отношении золотистого стафилококка. Установлено, что данный эфиран с контактом Петрова
(2:1) действует губительно на стафилококк в разведении 1:2834,7 в течение 10 минут,
1:3698,8 за 30 минут, а в разведении 1:5566,0 – за 3 часа.
Указанный эфиран обладает слабым спорицидным свойством. Так, спорицидное
разведение его в смеси с контактом Петрова (2:1) по отношению к спорам антракоида
при 10 и 30-ти минутных экспозициях равно 1:50, при 1- и 3-часовых – 1:70, а при
24-часовой – 1:98.
В дальнейшем нами разработаны методы влажной дезинфекции с помощью
эфирана 12-96. С этой целью эффективность препарата изучена на деревянных поверхностях в отношении микробов кишечной палочки и золотистого стафилококка.
Опыты показали, что 4 %-ная водная эмульсия (18-20 ºС) эфирана 12-96 в смеси
с контактом Петрова (2:1) обеззараживает поверхности, инфицированные кишечной
палочкой за 3 часа, из расчета раствора 1 л/м ² площади. 1 %-ная водная эмульсия (1820 ºС) данного эфирана дезинфицирует поверхности от золотистого стафилококка при
тех же режимах. Следовательно, указанный препарат лучше действует на стафилококк,
чем на кишечную палочку, которая по устойчивости, как известно, уступает золотистому стафилококку. Это, по-видимому, связано с избирательным бактерицидным действием эфирана 12-96 в отношении стафилококка.
Эффективность эфирана 12-96 для дезинфекции животноводческих помещений
против микробов кишечной палочки и золотистого стафилококка подтверждена в производственном опыте в Кусарском подсобно-экспериментальном хозяйстве АзНИВИ.
Дезинфицирующее действие препарата в смеси с контактом Петрова (2:1) проверено на деревянных поверхностях против микробов кишечной палочки в виде 4 %3
***** ИЗВЕСТИЯ *****
№ 2(26), 2012
Н И Ж Н Е В О ЛЖ С КОГ О А Г Р ОУ Н И В Е РС И Т ЕТ С КОГ О КО МП Л Е КС А
ной водной эмульсии, а против золотистого стафилококка в виде 1 %-ной эмульсии при
температуре 18-20 ºС и окружающей среды 5-7 ºС.
Вначале в отдельности изготовили смывы односуточных культур кишечной палочки и золотистого стафилококка с агара физраствором; смывы содержали в 1 мл
2 млрд микробных тел. В одной ступке стерильного навоза тщательно смешивали со
смывом культуры кишечной палочки, а в другой ступке стерильного навоза смешивали
со смывом культуры золотистого стафилококка. Затем 10 досок заражали кишечной
палочкой, а 10 досок – золотистым стафилококком, из расчета по 20 млн микробных
тел на 1 см² площади. Далее четыре пары досок положили на пол (две в месте предполагаемого расположения передних, две – у задних конечностей животного), четыре пары досок прикрепили на боковых стенах на высоте 1 м, две пары положили на кормушке. После 18-20 часов высыхания из досок брали соскобы для контроля заражения. После чего наносили дезинфицирующую эмульсию из расчета 1 л/м² площади с помощью
гидропульта. Контрольные 2 доски обрабатывали водой при тех же режимах.
Через 3 часа с поверхности досок брали соскобы, переносили в центрифужные
пробирки со стерильной дистиллированной водой, отмывали двукратно путем центрифугирования в течение 20 минут при 3000 об/мин. Осадок разбавляли в 1 мл стерильного физраствора и делали посевы на МПА, МПБ и агар Эндо.
Посевы соскобов с дезинфекционных поверхностей не давали роста микробов
кишечной палочки и золотистого стафилококка, тогда как при высеве проб с контрольных досок, обработанных водой на питательных средах во всех случаях наблюдали
рост вышеуказанных бактерий.
Таким образом, установлено, что 4 %-ная водная эмульсия эфирана 12-96 с контактом Петрова (2:1) при температуре эмульсии 18-20 ºС окружающей среды 5-7 ºС,
при экспозиции 3 часа, полностью обеззараживает деревянные поверхности, инфицированные микробами кишечной палочки.
Также выявлено, что 1 %-ная водная эмульсия указанного эфирана в смеси с
контактом Петрова (2:1) полностью обеззараживает деревянные доски от золотистого
стафилококка при тех же режимах.
Библиографический список
1. Мамедов, Ш. О бактерицидности некоторых эфиранов [Текст ] / Ш. Мамедов,
Б.Т. Магеррамов, Н.С. Алескеров // Азербайджанский химический журнал. – 1961. – № 1. –
С. 50-54.
2. Мустафаева, Э.А. Антибактериальная характеристика некоторых эфиранов [Текст] /
Э.А. Мустафаева // Труды Азерб. научн. исс. ин-та вирусол., микробиол. и гигиены. –1964. –
Т.26. – С. 41-43.
3. Прунтова, О.В. Инактивизация Pasteurella multocida
димером этиленимина
[Текст] /О.В. Прунтова, В.С. Русалеев, В.М. Гневашев // Ветеринарная. – 2003. – № 7. – С. 22-24.
4. Сафаров, Ю.Б. Дезинфекция при колибактериозе мелкого рогатого скота [Текст] /
Ю.Б. Сафаров, М.А. Тагизаде // Ветеринария. – 1971. – № 4. – С. 9-15.
5.Сулейманова, Ш.А. Синтез и применение некоторых эфирановых препаратов в шелководстве и птицеводстве [Текст] : автореф. дис. канд. биол. наук / Ш.А. Сулейманова. – Баку,
1966. –20 с.
6. Халилова, Р.Б. Разработка режима дезинфекции бактериозах и желтухе тутового
щелкопряда [Текст] : автореф. дис. канд. вет. наук / Р.Б. Халилова. – Кировабад, 1968. – 19 с.
7. Ширинов, Н.М. Препараты нефтяного происхождения в ветеринарии [Текст] /
Н.М. Ширинов. – Москва, 1970. – С. 62-86.
4
***** ИЗВЕСТИЯ *****
№ 2(26), 2012
Н И Ж Н Е В О ЛЖ С КОГ О А Г Р ОУ Н И В Е РС И Т ЕТ С КОГ О КО МП Л Е КС А
8. Ягубов, Ш.А. Бактерицидное действие препарата «В» и эфирана-3 на возбудителя колибактериоза телят-серотипов 015 и 078. [Текст] /Ягубов Ш.А// По синтезу и применению биологически-активных веществ в сельском хозяйстве и медицине: тезисы докладов научной конференции. – Баку, 1968. – С. 20-21.
9. Bailey, J.H., Cavallito Ch.Y. The effect of aliphatic acids on the activity of certain antibacterial agents. // “J. Bacterial”. - 1950. -vol 60. - № 3. - Р.71-78. [pdf]
10. Bernhein, F. The effect of formaldehyde and acetaldehyde on the swelling of cells of
Pseudomonas aerugionsa on salt solutions and their interactions with amines and carboxylic acids. //
Proc. Soc. Exp. Biol. And Med. – 142. - № 2. – 1973. - P. 675-679. [pdf]
11. Gialdroni, Grassi G., Grassi C. L”attivita antibacterica del metil-fenil-dodaciltrimetilammonia metossisolfato. // Giorn. Ital. tuberc. – 1955. – 9. –№ 3. – P.180-182. [pdf]
E-mail: Aznivi05@rambler.ru
5