• ВЕСТНИК КАЛМЫЦКОГО УНИВЕРСИТЕТА • УДК 616.3 ББК 57.021 С.Е. Бадмаева, А.Б. Зараева ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТЕКТОРНЫХ ПРОТИВОЯЗВЕННЫХ СВОЙСТВ ХАР-БУЛУКСКОЙ МИНЕРАЛЬНОЙ ВОДЫ НА МОДЕЛИ АЦЕТАТНОГО УЛЬЦЕРОГЕНЕЗА У КРЫС Аннотация. Природные бальнеологические факторы широко используются для эффективного лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта, в том числе и язвенной болезни желудка. На территории Калмыкии имеются значительные запасы минеральных вод, которые слабо освоены в лечебном плане. На ацетатной модели язвообразования по методу Окабе были изучены противоязвенные свойства минеральной воды «Хар-Булук» Целинного района республики. Показано, что минеральная вода предотвращает значительное развитие прободных ацетатных язв на данной модели язвообразования. Ключевые слова: ацетатное язвообразование, пептическая язва, минеральная вода, противоязвенные свойства. S.E. Badmaeva, A.B. Zaraeva EXPERIMENTAL STUDY OF PROTECTIVE ANTIULCER PROPERTIES OF HAR-BULUK MINERAL WATER ON THE ACETATE MODEL ULCEROGENESIS OF RATS Natural balneologic factors are widely used for the effective treatment of diseases of the gastrointestinal tract, including stomach ulcers. The territory of Kalmykia has signi ficant reserves of mineral waters, which are poorly mastered in the medical plan. Okabe ʼs acetate model of ulceration were used for research of antiulcerogenic properties Har-Buluk ʼs mineral water of Kalmykia. It is shown that the mineral water prevents signi ficant development of acetate perforated ulcers on this model of ulcer formation. Keywords: acetate ulceration, peptic ulcer, mineral water, antiulcerogenic properties. Язвенная болезнь – хроническое циклически протекающее заболевание с разнообразной клинической картиной, основным проявлением которого является образование дефекта (язвы) в стенке желудка или двенадцатиперстной кишки в период обострения. Аппликации ледяной уксусной кислоты на серозную оболочку желудка по методу Окабе в отличие от других методов вызова повреждений слизистой оболочки желудка сопровождается формированием ацетатной язвы с глубоким гнойно-некротическим кратером в центре, часто с прободением [3]. Такая экспериментальная язва у животных заживает долго в течении нескольких недель, иногда с рецидивами, и напоминает течение язвенной болезни у человека. В иностранной литературе она характеризуется как пептическая язва [6]. Республика Калмыкия имеет значительные запасы лечебных минеральных вод, различных по физико-химическому составу и бальнеологическим свойствам, которые 30 2014 г. №2(22) практически не изучены в лечебном плане [5]. Минеральный источник “Хар-Булук” Целинного района республики давно известен своими лечебными свойствами, однако с биологической точки зрения практически не изучен. По своему физико-химическому составу минеральная вода данного источника – высокоминерализованная вода сульфатно-хлоридного магниево-натриевого состава – может эффективно использоваться для лечения различных патологий ЖКТ, в том числе язвенной болезни [1]. Поэтому на ацетатной модели язвообразования у животных, которая моделирует язвенный процесс у человека, были изучены противоязвенные свойства данной минеральной воды. Цель работы: исследовать влияние минеральной воды месторождения Хар-Булук на развитие пептических язв желудка по методу Окабе. Материалы и методы. В экспериментах были использованы самцы белых беспородных крыс массой от 200 до 285 грамм. За 18 часов до вызова язв животные лишались пищи. Все эксперименты с животными выполняли в соответствии с этическими принципами и нормативными документами, рекомендованными Европейским научным фондом (ESF) и декларации о гуманном отношении к животным. Аппликация ледяной уксусной кислоты на серозную оболочку желудка по методу Окабе в отличие от других методов вызова повреждений слизистой оболочки желудка сопровождается формированием ацетатной язвы с глубоким гнойно-некротическим кратером в центре, часто с прободением. Подобные язвы в литературе описываются как пептические. Такая экспериментальная язва у животных заживает долго, в течение нескольких недель, иногда с рецидивами, и напоминает клинику язвенной болезни у человека [6]. Животных, содержавшихся в стандартных условиях вивария, предварительно разделяли на 2 группы: «контроль» и «опыт». Ацетатную язву вызывали по стандартной методике Окабе. У наркотизированных эфиром крыс вскрывали брюшную полость, обнажали желудок и на серозную поверхность тела желудка в пилорическом отделе на 20 секунд помещали пинцетом ватный тампон диаметром 1,5 мм, смоченный в ледяной уксусной кислоте. После этого поверхность желудка в области аппликации протирали сухим ватным тампоном, брюшную полость зашивали. После операции животных помещали в клетку при обычном содержании (без каких-либо ограничений в пище и воде) [6]. В течение 3 суток после операции контрольным животным дважды в день (09:00 и 16:00 ч) вводили с помощью зонда 0,9% физиологический раствор в объеме 2 мл на 200 г, опытная группа животных в те же сроки и эквивалентном объеме получала минеральную воду месторождения Хар-Булук в нативном виде. На 4-й день после аппликации ледяной уксусной кислоты крыс экзитировали и оценивали размеры пептических язв желудка в мм2 при помощи микроскопа с окуляр-микрометром. Поскольку наши данные оказались нормально распределены, то сравнение выборок проводилось с помощью модифицированного t-критерия Стьюдента (LSD-теста) пакета прикладных программ STATISTICA 6.0 для независимых выборок. Рассчитывали среднее значение (М), ошибку среднего (m). Различия считали значимыми при P<0,05. Результаты исследования. Известно, что ульцерогенез желудочно-кишечного тракта возникает в результате нарушений периферических механизмов – локального кровотока в области аппликации кислоты, выхода гистамина из тучных клеток, выброса ионов водорода, что сопровождается повышением концентрации кислоты и высоким ацидозом содержимого желудка [4]. Повреждения слизистой оболочки желудка при ацетатной модели язвообразования и по морфологическим, и по временным характеристикам близки к таковым при язвенной болезни у человека. Язва состоит 31 • ВЕСТНИК КАЛМЫЦКОГО УНИВЕРСИТЕТА • из хорошо ограниченного кратера с потерей вещества на различную глубину. Для нее характерны наличие некроза и незрелой гранулированной ткани, облитерация подслизистых и мышечных структур. Своего максимального развития пептическая язва достигает на 4-й день после аппликации уксусной кислоты, далее идет ее активное заживление, и уже на 8-й день после ацетатной агрессии она полностью заживает. Поэтому, введение животным нативного раствора исследуемой минеральной воды в первые три дня после вызова пептических язв позволило оценить ее способность предотвращать их значительное развитие [2]. На слизистой оболочке желудка у всех животных после ацетатной агрессии обнаруживались обширные повреждения с хорошо выраженной некротизированной тканью в центре кратера. Сама слизистая вокруг язвы имела воспаленный вид со значительными геморрагиями. Средняя площадь пептических язв у животных контрольной группы составила 71,95±1,25 мм2. У животных опытной группы, которые получали в течение 3-х дней два раза в сутки per os минеральную воду месторождения Хар-Булук, средняя площадь повреждений оказалась меньше по сравнению с контролем и составила 60,5±0,2 мм2 (рисунок 1). Рис. 1. Влияние хар-булукской минеральной воды на формирование ацетатных язв у крыс Таким образом, минеральная вода исследуемого месторождения на данной модели язвообразования предотвращает значительное развитие повреждений желудка – площадь язв у животных опытной группы по сравнению с контролем была достоверно меньше. В следующей серии опытов изучали влияние хар-булукской минеральной воды на скорость заживления ацетатных язв. В этом случае крысам в течение 7-ми дней после вызова язв по методике Окабе вводили per os с эквивалентной частотой и аналогичном объеме нативную минеральную воду, тогда как животные контрольной группы получали 0,9% физиологический раствор. Животных усыпляли эфиром на 8 сутки после операции. К 8-му дню после воздействия ульцерогенного фактора у животных контрольной группы на поверхности слизистой желудка сохранялись отчетливо выраженные язвы с некротической тканью, однако на слизистой уже отмечались признаки регенерации. У животных опытной группы все язвы были с выраженным процессом рубцевания, не обнаруживалось некротической зоны, края язвы были стянуты. Особо следует отметить, что у некоторых 32 2014 г. №2(22) животных опытной группы практически полностью зажили места повреждения слизистой оболочки желудка, отсутствовал спаечный процесс, нормализовался рельеф слизистой, что не наблюдалось у животных контрольной группы. Средняя площадь повреждений в контрольной группе составила 41,7±2,3 мм2. У животных опытной группы средняя площадь повреждений оказалась значительно меньше по сравнению с контролем и составила в среднем 13,6±3,2 мм2 (рисунок 2). Рис. 2. Влияние хар-булукской минеральной воды на скорость заживления ацетатных язв у крыс Таким образом, было выявлено, что 7 дневное поение животных опытной группы минеральной водой месторождения «Хар-Булук» в значительной степени ускоряет процессы заживления пептических язв на данной модели язвообразования. Величина терапевтического противоязвенного эффекта составила около 65%. Полученные в сумме данные позволяют предположить, что изучаемая минеральная вода обладает как протекторными противоязвенными свойствами, предотвращая значительное развитие ацетатных язв, так и лечебными свойствами, что в совокупности отражается на скорости заживления язв, которая у животных опытной группы была значительно выше по сравнению с контролем. Список литературы 1. Абушинова Н.Н. Медико-биологическое обоснование эффективности курортных факторов грязевого месторождения «Озеро Большое Яшалтинское» Республики Калмыкия. – Элиста: ЗАОр «НПП «Джангар», 2007. – 192 с. 2. Абушинова Н.Н., Бадмаева С.Е., Эльбикова А.А., Бадмаева К.Е. Влияние минеральных вод ремонтненского и хар-булукского месторождений на структурно-функциональное состояние слизистой оболочки желудка при экспериментальном ульцерогенезе у крыс. // Естественные науки. – 2014. – № 2. – С. 45-49. 3. Абушинова Н.Н., Бадмаева С.Е., Эльбикова А.А., Бадмаева К.Е. Терапевтическое действие харбулукской и ремонтненской минеральных вод на состояния язвенного дефекта при моделировании «ацетатных язв» у белых крыс. // Естественные науки. – 2014. – № 3. – С. 36-40. 4. Бадмаева С.Е. Бальнеотерапевтические свойства минеральной воды месторождения «Хар-Булук». // Вестник Калмыцкого Университета. – 2013. – № 1. – С. 34-38. 33 • ВЕСТНИК КАЛМЫЦКОГО УНИВЕРСИТЕТА • 5. Abushinova N.N., Badmaeva S.E., Elbikova A.A., Badmaeva K.E. In fluence of mineral water of Remontnensky and Har-Buluk deposits on structural and functional state of gastric mucosa in experimental ulcer genesis of rats. // Biology and Medicine. – 2014. – V. 6. – N. 2. – P. 1-5. 6. Okabe S., Roth J. L. A., Pfeiffer C. J. A method for experimental, penentration gastric and duodenal ulcer in rat. Observation on normal healing. // Amer. J. of Digestive disease. – 1971. – V. 16. – N. 3. – P. 277-284. 34