Биологические свойства микрофлоры, выделенной из молока

БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
животных повышается с переходом их на растительную форму питания и составляет в крови
60-суточных поросят II-й группы 5,32±0,16 –
5,67±0,12%, III группы – 4,21±0,13 – 4,40±0,11%,
в последующие возрастные периоды жизни в
крови поросят число эозинофилов колеблется
незначительно во всех группах.
Юные нейтрофилы составляют 1,11±0,06 –
1,17% у 40-суточных поросят, их число находится в таких же пределах и в других возрастных
группах животных. Количество палочкоядерных
нейтрофилов изменяется с возрастом поросят.
Так, у 5-суточных поросят их число составляет
3,23±0,26–3,56±0,31%, у 10-суточных – 6,15±0,41
– 6,94±0,36% и увеличивается к 90-суточному
возрасту животных до 8,96±0,31–9,12±1,12%, в
таком же количестве содержится в крови свиней
более старших возрастов.
Основная масса лейкоцитов представлена
лимфоцитами, принимающими ответственность
на себя за образование иммунных тел в ответ на
поступление инородных тел белковой природы,
несущих генетическую информацию. В крови
5-суточных поросят их содержится 75,12±3,21
– 75,54±3,32%, 10-суточных – 61,742,36 –
64,16±2,17%. Нам представляется, что такое
высокое содержание лимфоцитов связано с
возрастными особенностями развивающегося
организма, образом питания и условиями содержания. Когда поросята питаются молозивом,
в крови число лимфоцитов выше на 16,63%, чем
у поросят, питающихся молоком. У 90-суточ-
ных поросят, содержащихся в условиях племзавода, в крови число лимфоцитов составляет
44,99–45,80±2,82%, а в производственной зоне
– 49,60±3,16–50,10%, т.е. выше на 9,38–10,24%
относительно животных, находящихся в более
комфортных условиях, что, на наш взгляд,
связано с влиянием изменяющихся факторов
микроклимата в животноводческих помещениях.
В заключение по результатам наших исследований необходимо отметить следующее: система
крови животных в раннем постнатальном онтогенезе чётко реагирует на условия микроклимата
в животноводческих помещениях, т. е. местах их
содержания, и сопровождается количественным
ростом или сокращением форменных элементов
крови, что и отражают этапы становления клеточной формы защитных сил молодого организма.
Литература
1. Шмидт Р. Физиология человека / под ред. Р. Шмидта,
Г. Тевса; пер с англ. М.: Мир, 1986. Т. 3. 412 с.
2. Кузнецов А.И., Москвина Л.И. Сравнительная характеристика морфологического состава и биохимических особенностей крови у физиологически зрелых и незрелых поросят в
подсосный период // Физиологические особенности свиней
и проблемы их выращивания в условиях промышленной
технологии. Казань, 1986. С. 66.
3. Петрянкин Ф.П., Кириллов Н.К. Резистентность и пути её
повышения. Чебоксары, 2004. 169 с.
4. Парахневич А.В. Изучение фагоцитарной активности
лейкоцитов крови у чистопородных и помесных свиней //
Известия Самарской государственной сельскохозяйственной
академии. Самара, 2007. В. 1. С. 40–43.
5. Кузнецов А.Ф., Шуканов А.А., Баланин В.М. Практикум
по зоогигиене. М., 1999. 204 с.
6. Лысов В.Ф., Максимов В.И. Основы физиология и этологии
животных. М.: Колос, 2004. 255 с.
7. Воронин Е.С. Практикум по клинической диагностике
болезней животных. М.: КолосС‚ 2003. 269 с.
Биологические свойства микрофлоры,
выделенной из молока коров с клинической
и субклинической формами мастита
С.С. Бала, к.б.н., Оренбургский ГАУ
Проблема мастита коров в настоящее время
настолько актуальна, что во многих странах с
развитым животноводством имеются национальные программы по борьбе с заболеванием.
В связи с этим особую важность приобретает
разработка мер по ранней диагностике и прогнозированию возможности развития мастита,
особенно у высокопродуктивных и племенных
животных. Главную роль в возникновении мастита играет микробный фактор. Наибольшую
опасность при этом представляют стрептококки
и стафилококки [1, 2, 3, 4].
Выживание возбудителей в организме хозяина
возможно при соответствующей их адаптации к
механизмам антимикробной защиты. В настоя-
щее время широко изучается группа биологических свойств микроорганизмов, направленных
на деградацию механизмов естественной резистентности хозяина (лизоцима, лактоферрина
и др.) и факторов персистенции, создающих
предпосылки для развития инфекционного процесса [5, 6, 7].
Исходя из того, что в научных источниках
имеется незначительное количество информации
о биологических свойствах возбудителей различных форм мастита, нами поставлена цель изучить
спектр микрофлоры и биологические свойства
возбудителей с их последующей коррекцией
для разработки новых способов диагностики и
лечения мастита у коров.
Нами изучено 340 штаммов микроорганизмов,
выделенных из молока 70 коров с субклиниче-
287
БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
ской формой мастита, 50 коров с клинической и
100 здоровых животных. Мастит диагностировали
на основании результатов клинических, лабораторных (реакций с 5%-ным раствором димастина
и пробой отстаивания) и бактериологических
исследований. Забор исследуемого материала
(молока) проводился у коров одного возраста и
периода лактации. По результатам обследования
были отобраны три группы животных: 1 группа
– с клинической формой мастита, 2 группа – с
субклинической формой и 3 группа – здоровые
животные. Выделенные от них штаммы и послужили материалом для дальнейшего исследования.
Для бактериологического анализа молоко
высевали на среду Эндо, кровяной, желточносолевой и сахарный агары. При определения
количества микроорганизмов в 1 мл молока
у здоровых животных обнаружено отсутствие
роста на среде Эндо, тогда как у больных этот
показатель составил 302 колониеобразующие
единицы (КОЕ). Сплошной рост отмечался при
посеве всех проб молока от больных животных
на кровяной агар, среднее количество микроорганизмов, выделенных из молока здоровых
коров составило 1605 КОЕ. В пяти пробах
молока, полученных от больных животных,
регистрировался сплошной рост бактерий при
посеве на желточно-солевой агар, в остальных –
в среднем выделялось 4460 КОЕ, что в 7,4 раза
превышало микробную обсеменённость молока
здоровых коров (602 КОЕ). В пробах молока от
22 здоровых животных роста микроорганизмов
не отмечено (42,3%).
Микроорганизмы, выделенные из молока
здоровых животных, представлены, в основном, следующими видами: КОС – S.epidermidis,
S.auricularis, S.hominis, S.haemolyticus (28,8%
случаев); Streptococcus (19,2%); а также ассоциациями E.coli и S.epidermidis в 5,8% и E.coli – в
3,9% случаев.
При бактериологическом исследовании проб
молока от больных животных микроорганизмы
выделяли в 100% случаев. Проведённые исследования показали, что при клинической форме
мастита стафилококки (S.aureus, S.epidermidis,
S.haemolyticus, S.auricularis) были выделены в
75,1%, энтеробактерии (E.coli) – в 8,2%, стрептококки – в 16,7% случаев. При субклинической
форме заболевания существенных изменений
частоты выделения бактерий не обнаружено:
стафилококки (S.aureus, S.epidermidis, S.hominis,
S.warneri) зарегистрированы у 76,7%, стрептококки – у 23,3% обследованных животных.
Установлено, что лидирующим видом являлся
S.aureus, который наиболее часто выделяли в
монокультуре (в 52,8 и 50,0% случаев соответственно). Меньшая доля приходилась на
S.epidermidis (13,9% при клинической и 20,0%
субклинической форме заболевания), а стрепто-
кокки составляли соответственно 16,7 и 23,3%.
Среди выделенных стрептококков преобладал
Str. agalactiae – 80,1%; другие стрептококки были
представлены следующими видами: Str. pyogenes
(7,7%), Str. lactis (5,0%), Str. uberus (4,4%) и Str.
faecium (2,8%).
Высокая этиологическая значимость стафилококков и стрептококков определила необходимость изучения их биологических, в том
числе персистентных свойств: гемолитической,
антилизоцимной, антиинтерфероновой, антилактоферриновой активностей [6, 7].
Согласно полученным результатам, наиболее
часто, в 100% и в 86,0±0,45% – 94,3±0,45%
случаев (р<0,05), гемолизин обнаруживался у
стафилококков и стрептококков, выделенных
из молока коров с клинической и субклинической формами мастита. У микроорганизмов,
выделенных из молока здоровых животных,
способность продуцировать гемолизин отмечена только в 40,0±0,97% случаев у стафилококков и в 33,3±2,98% – у стрептококков.
При изучении АЛА у стафилококков выявлено, что признак встречался в 100% случаев
среди микроорганизмов, выделенных от 2-й
группы животных со средним показателем –
3,1±0,11% мкг/мл. Штаммы стафилококков от
животных 1-й и 3-й групп обладали данным
признаком лишь в 80,0±0,8 и 60,0±0,97% случаев
со средним показателем 1,62±0,02 и 1,16±0,04
мкг/мл соответственно. У стрептококков антилизоцимная активность регистрировалась в 100%
случаев только у микроорганизмов, выделенных
от животных второй группы (среднее значение
– 2,6±0,07% мкг/мл). Штаммы первой и третьей
групп данный признак проявляли реже (86,7±0,67
и 77,7±1,0% случаев, соответственно); средние
показатели характеризовались более низкими
значениями (1,22±0,04 и 1,0±0,03 мкг/мл).
Антиинтерфероновой активностью обладали
в 100% случаев только штаммы, выделенные от
животных 2-й группы (со средним показателем
у стафилококков – 2,6±0,09 усл. ед. и у стрептококков – 2,9±0,1 усл.ед.). Среди штаммов
стафилококков, выделенных от животных 1-й и
3-й групп, признак обнаруживался в 75,0±0,87
и 66,7±0,94% случаев соответственно, причём
у стафилококков, выделенных от животных 1-й
группы, среднее значение данного показателя было
выше, чем у стафилококков, выделенных от животных третьей группы (1,38±0,04 и 1,1±0,03 усл.ед,
соответственно). Результаты исследования АИА
стрептококков, выделенных от животных первой
и третьей групп, показали, что данное свойство регистрировалось в 75,0±0,8 и 60,0±0,97%
случаев, средняя величина признака равнялась
соответственно 1,7±0,06 и 1,0±0,04 усл.ед.
При определении антилактоферриновой активности нами получены следующие результаты:
288
БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
у всех штаммов микроорганизмов, выделенных из
молока как здоровых, так и больных животных,
признак обнаруживался в 100% случаев, но с
разным уровнем выраженности. Анализ уровня
выраженности данного признака показал, что у
стафилококков и стрептококков, выделенных
из молока животных 1-й группы, АЛфА имела
самые высокие показатели – 2,96±0,08 и 3,0±0,09
мкг/мл соответственно. Изученные культуры
стафилококков и стрептококков от 2-й группы
животных обладали уровнем АЛфА 2,63±0,09
и 2,68±0,08 мкг/мл. Самые низкие показатели
данного признака зафиксированы у штаммов
стафилококков и стрептококков, выделенных из
молока здоровых животных, величина признака
соответственно составила 1,59±0,05 и 1,64±0,05
мкг/мл.
Таким образом, анализ полученных данных
показал зависимость формы течения мастита от
спектра исходных биологических характеристик
возбудителя. Для микрофлоры молока коров с
клинической формой мастита характерно выделение штаммов с гемолитической активностью
и более высоким уровнем антилактоферрино-
вой активности. При субклинической форме
заболевания микрофлора была, как правило,
представлена микроорганизмами, обладающими
факторами персистенции в 100% случаев и с
более высокими средними значениями антилизоцимной и антиинтерфероновой активностей. Из молока здоровых коров выделялись
микроорганизмы, достаточно редко обладающие
факторами персистенции с низким уровнем
экспресии.
Литература
289
1. Багманов М.А., Никульшина Ю.Б. Этиологические факторы
мастита у коров // Вестник РАСХН. 2003. № 2. С. 75–76.
2. Брылин А.П. Комплексная программа по борьбе с маститами
у коров // Практик. 2002. № 1. С. 28–31.
3. Васильев В.Г., Васильева Т.Н., Васильев В.В. Шприц для
лечения коров с маститом // Ветеринария. 2005. № 4.
С. 34–36.
4. Татарчук О.П. Новые подходы к лечению коров при мастите
// Ветеринария. 2004. № 11. С. 8–9.
5. Бухарин О.В., Карташова О.Л., Киргизова С.Б. И др. Антилактоферриновая активность микроорганизмов // Журнал
микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2005.
№ 6. С. 7–10.
6. Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. М.:
Медицина; Екатеринбург: УрО РАН, 1999. 366 с.
7. Валышева И.В., Валышев А.В., Бухарин О.В. и др. Новый
метод определения антилактоферриновой активности микроорганизмов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и
иммунобиологии. 2003. № 4. С. 64–67.