Тутельян В.А. - Общество Биотехнологов России им. Ю.А

реклама
ГОСУДАРСТВЕННАЯ ДУМА ФЕДЕРАЛЬНОГО СОБРАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ШЕСТОГО СОЗЫВА
Комитет по науке и наукоемким технологиям
Комитет по охране здоровья
Парламентские слушания
«Законодательное регулирование оборота генетически
модифицированных продуктов в Российской Федерации»
Научные гарантии безопасности
биотехнологической продукции,
в частности ‒ ГМО
Тутельян В.А.
ФГБУ «НИИ питания» РАМН
Москва, 7 июня 2012
1931-1940 – Н.И.Вавилов и др.
интенсивное развитие
советской генетики
1948
1948 г.
– Т.Д. Лысенко и др.
генетика – «лженаука»
1964-1994 – интенсивное развитие
промышленной
биотехнологии
Государственная Дума
первого созыва
Продукты
биотехнологической
промышленности
Кормовой белок,
Аминокислоты и
другие ингредиенты,
Витамины
(субстанции),
1994
Потребность России
1965-1992 г.г.
2012 г.
100%
0%
100%
0%
100%
0%
Подходы к оценке безопасности ГМО*: мировой опыт
* World Health Organization (WHO)
Food and Agricultural Organization (FAO)
International Food Biotechnology Council (IFBC)
International Life Science Institute (ILSI)
Organization for Economic Cooperation and Development (OECD)
В основе концепции оценки безопасности ГМО
растительного происхождения лежит принцип
композиционной эквивалентности (substantial equivalence):
«…если ГМ продукт по химическому составу полностью
соответствует традиционному аналогу, то данный ГМ
продукт считается полностью безвредным и в
дальнейших исследованиях не нуждается;
если имеют место различия с традиционным аналогом
(присутствие новых компонентов и/или отсутствие
каких-либо компонентов), дальнейшие исследования
должны быть сосредоточены на выявленных
различиях;
если ГМ продукт полностью не соответствует
традиционному аналогу оценка безопасности должна
быть расширена…»
Подходы к оценке безопасности ГМО:
США, ЕС, Россия
Анамнестический
анализ
безопасности
(организм-донор,
организм-хозяин)
Генетическая
конструкция
- структура
- локализация
- экспрессия
- стабильность
Композиционная
эквивалентность
- макронутриенты;
- микронутриенты;
- антиалиментарные
факторы;
- токсины и аллергены
Белок
- токсичность
- аллергенность
Безопасность ГМО
Дополнительно
(ЕС, принцип предосторожности):
- исследования нативного продукта
(токсичность, аллергенность)
- технологические свойства ГМО
- агрономические свойства ГМО
- постмаркетинговый мониторинг
Дополнительно
(Россия, медико-биологические
исследования на моделях in vivo):
- токсикологические исследования
- генотоксикологические исследования
- аллергологические исследования
- иммунологические исследования
- изучение репродуктивной функции
Оценка безопасности
и регистрация в РФ
Опыт применения
в других странах мира
Регистрация и оценка
безопасности в других
странах мира
Опыт применения
в стране происхождения
Регистрация и оценка
безопасности в стране
происхождения
Доказательство безопасности
производителем
Безопасность исходных
организмов
Законодательное регулирование
Федеральный закон от
30.03.1999 г. № 52-ФЗ
«О санитарноэпидемиологическом
благополучии
населения»
Федеральный Закон
от 07.02.1992 № 2300-I
«О защите прав
потребителей»
Федеральный закон от
05.07.1996 г. № 86-ФЗ
«О государственном
регулировании в
области генноинженерной
деятельности»
Федеральный закон от
02.01.2000 г. № 29-ФЗ
«О качестве и
безопасности
пищевых продуктов»
Постановление Правительства Российской Федерации
от 21.12.2000 г. № 988
«О государственной регистрации новых пищевых
продуктов, материалов и изделий»
Единые санитарно-эпидемиологические требования к товарам, подлежащим
санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю)
Утверждены решением Комиссии Таможенного Союза от 28.05.2010 г. №299
СанПиН 2.3.2.1078-01
«Продовольственное сырье и пищевые продукты.
Гигиенические требования безопасности и пищевой
ценности пищевых продуктов»
ГОСТ Р 52173-2003
ГОСТ Р 52174-2003
ГОСТ Р 53214-2008
(ИСО 24276:2006)
ГОСТ Р53244-2008
(ИСО 21570:2005)
МУК 4.2.2304-07
Методы идентификации
и количественного
определения ГМО
растительного
происхождения
МУ 2.3.2.2306-07
Медико-биологическая оценка
безопасности ГМО растительного
происхождения
Постановление Главного государственного
санитарного врача №14 от 08.11.2000 г.
МУК 2.3.2. 1917-04
Порядок и организация контроля за
пищевой продукцией, полученной из/или
с использованием сырья растительного
происхождения, имеющего ГМ аналоги
Медико-биологическая оценка безопасности ГМО
проводится в аккредитованных учреждениях:
• Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека
ФБУН «ФНЦ гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора,
ФБУН «ЦНИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора,
ФБУН «ГНЦ прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора
• Российской академии наук
Центр «Биоинженерия» РАН
• Российской академии медицинских наук
ФГБУ «НИИ питания» РАМН,
ФГБУ «НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН,
ФГБУ «НИИ фармакологии им. В.В. Закусова» РАМН,
ФГБУ «НИИ биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича» РАМН
• Минздравсоцразвития России
ГОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова,
ФГБУ «НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи»
• Российской академии сельскохозяйственных наук
ГНУ ВНИИЗерна РАСХН
• Минобрнауки России
ФГБОУ ВПО «МГУ пищевых производств»
Медико-биологическая оценка безопасности ГМО: МУ 2.3.2.2306-07
Экспертный анализ
и оценка данных,
характеризующих
заявленный ГМО
Медикогенетическая
оценка
Экспертный анализ
методов обнаружения,
идентификации и
количественного
определения ГМО в
пищевых продуктах
Медикобиологические
исследования
Оценка
функциональнотехнологических
свойств
Результаты комплексных исследований ГМО, свидетельствующие, в т.ч. об
отсутствии какого-либо токсического, генотоксического,
сенсибилизирующего, иммуномодулирующего и аллергенного действия, а
также о композиционной эквивалентности ГМО его традиционному аналогу
Государственная регистрация ГМО
Медико-биологическая оценка безопасности ГМО:
медико-биологические исследования
Генотоксикологические
исследования
(выявление повреждений
ДНК методом ДНК-комет и
выявление мутагенной
активности методом учета
хромосомных аберраций)
Иммунологические
исследования
(изучение
иммуномодулирующих и
сенсибилизирующих
свойств по 4-м тестам)
Аллергологические
исследования
(оценка тяжести реакции
системной анафилаксии,
возникающий при
внутрибрюшинной
сенсибилизации крыс
овальбумином куриного
яйца)
Токсикологические исследования
(гематологические, биохимические,
морфологические и другие исследования,
всего более 80 показателей)
Оценка репродуктивной токсичности
исследуемого ГМО в эксперименте на
поколениях
(изучение влияния на генеративную функцию,
пренатального и постнатального развития
потомства, всего более 45 показателей)
Дополнительные исследования:
сравнение протеомных карт исследуемого
ГМО и его традиционного аналога
Экспертное заключение о
безопасности ГМО на основании
анализа всех полученных данных
Медико-биологическая оценка безопасности ГМО:
системные биомаркеры
Система антиоксидантной защиты
•  Активность ферментов антиоксидантной защиты
(глутатионредуктазы; глутатионпероксидазы;
супероксиддисмутазы; каталазы)
•  Активность процессов перекисного окисления
липидов (содержание малонового диальдегида)
Система регуляции апоптоза
• 
• 
Стабильность мембран лизосом
(общая и неседиментируемая активность
ферментов лизосом: β-галактозидазы;
β-глюкуронидаза; арилсульфатазы А и В)
Биохимические
методы
Активность процессов апоптоза
(методы учета апоптозных клеток)
Система ферментов метаболизма ксенобиотиков
•  Активность ферментов 1-й и 2-й фазы метаболизма
ксенобиотиков (7-этоксирезоруфин-О-деэтилазы;
7-пентоксирезоруфин-О-деэтилазы; UDP-глюкуронозилтрансферазы;
глутатионтрансферазы; общее содержание цитохрома Р-450)
Генотоксикологические исследования:
эксперимент in vivo
Изучение состояния
наследственного материала на
разных уровнях организации
(молекулы ДНК – хромосомы)
Регистрация повреждений ДНК
методом ДНК-комет
Параметры, характеризующие
целостность ДНК:
•  общее содержание ДНК в комете;
•  длина кометы и др.
Учет хромосомных аберраций в
метафазных клетках
пролиферирующих тканей
Видимые структурные
нарушения хромосом:
•  одиночные и парные фрагменты;
•  хроматидные и хромосомные
обмены;
•  ахроматические пробелы (гепы);
•  разрывы по центромере;
•  клетки с множественными
повреждениями;
•  клетки с полной деструкцией
хромосом
Данный подход позволяет
зарегистрировать повреждения
структуры ДНК, в дальнейшем
подвергающиеся репарации, а
также зафиксированные в геноме в
виде хромосомных аберраций
Сравнение протеомных карт ГМ кукурузы,
и ее традиционного аналога
169
360
2D электрофореграмма протеома
традиционного аналога ГМ кукурузы
2D электрофореграмма протеома
ГМ кукурузы
2D электрофореграмма протеома
ГМ кукурузы
С достоверностью
выше 95% оба белка
идентифицированы
как предшественник
α-амилазы
(Thermococcus sp.
GU5L5)
0.5
1000
1500
Пятно №169
Top Score: 92 for gi|
21326995
2000
2500
3000
3228.322
3244.316
3525.279
2500
3076.275
2313.057
2000
2806.002
2822.020
2353.124
2369.130
2404.973
2420.953
2424.003
2439.002
2211.104
1500
2108.969
2114.027
2124.954
2129.999
1798.897
1837.960
1843.934
1000
3525.596
2822.200
2353.296
2369.273
2405.145
2421.147
2438.142
2235.246
2251.214
1960.087
1970.084
1976.046
1798.964
1814.962
1817.005
1839.082
1843.981
1580.844
1596.821
1339.655
1362.761
1149.690
917.499
2.5
1969.994
2.0
1191.623
0.5
1815.928
1820.925
1859.932
1865.952
1881.931
1951.966
2012.015
1149.676
1067.674
933.499
2.0
1339.642
1355.636
1362.763
911.430
917.508
921.499
Intens . [a .u.]
1191.627
3.0
1600.828
1112.525
1171.658
1213.632
1229.590
1.0
1067.657
360
879.496
895.484
933.494
939.514
1.0
1089.644
1096.535
1105.600
169
829.426
842.509
901.487
949.480
955.488
Intens . [a.u.]
Анализ различий протеома
традиционной и ГМ кукурузы
x10 4
Масс-спектр
пептидов белка из
пятна №169
1.5
x10 4
0.0
3000
3500
3500
m /z
Масс-спектр
пептидов белка из
пятна №360
1.5
0.0
m /z
Идентификация белков через базу данных
Mascot (Peptide Mass Fingerprinting)
Пятно №360
Top Score: 81 for
gi|21326995
Изучение безопасности ГМ кукурузы в эксперименте
на 3-х поколениях крыс:
набор исследований
Изучение репродуктивной функции
•  генеративная функция
•  пренатальное развитие потомства
•  постнатальное развитие потомства
Токсикологические исследования
•  интегральные показатели
•  гематологические исследования
•  биохимические исследования
•  морфологические исследования
•  системные биомаркеры
Дополнительные исследования
•  аллергологический статус крыс
•  физиология пищеварения крыс
•  скорость созревания сенсорно-двигательных рефлексов
Состав экспериментальных групп и количество животных
Группа
F0
F1
Всего
Контроль Взрослые крысы
50♀+50♂
300
50♀+50♂
354
40♀+45♂
328
40♀+45♂
265
40♀+45♂
267
40♀+45♂
185
244
40♀+45♂
246
40♀+45♂
281
40♀+45♂
286
40♀+45♂
278
544
185
600
170
609
170
551
170
545
Опыт
1-я реф.
2-я реф.
3-я реф.
Потомство
Взрослые крысы
Потомство
Взрослые крысы
Потомство
Взрослые крысы
Потомство
Взрослые крысы
Потомство
Σ = 880 взрослых крыс и 2849 крысят
Второе поколение (F1)
6-й день
F1 опыт
Всего в опытной группе
родилось 354 крысенка F1
Средняя величина помета
11,80±0,27
Выживаемость 0-5 дни 99%
Выживаемость 6-25 дни 95%
Всего в контрольной группе
родилось 300 крысят F1
Средняя величина помета
11,54±0,60
Выживаемость 0-5 дни 98%
Выживаемость 6-25 дни 96%
F1 контроль
Третье поколение (F2)
6-й день
F2 опыт
Всего в опытной группе
родилось 246 крысят F2
Средняя величина помета
10,70±0,50
Выживаемость 0-5 дни 99%
Выживаемость 6-25 дни 98%
Всего в контрольной группе
родилось 244 крысенка F2
Средняя величина помета
9,68±0,77
Выживаемость 0-5 дни 98%
Выживаемость 6-25 дни 98%
F2 контроль
Поэтапное фотодокументирование развития потомства
2-й
день
15-й
день
20-й
день
7-й
день
5-й
день
10-й
день
12-й
день
30-й
день
60-й
день
Динамика массы тела и роста крысят поколения F1
Масса тела, г
Рост, см
Физическое развитие
потомства F1-F2 –
сроки отлипания ушных
раковин, появления
волосяного покрова,
прорезывания резцов и др.,
а также динамика массы
тела и роста крысят
соответствовали
возрастной норме
Динамика массы тела и роста крысят поколения F2
Масса тела, г
Рост, см
Рост, см
Исследование скелета плодов по методу A.B. Dawson
Измерение длины нижней челюсти
Измерение длины плечевой,
лучевой и локтевой костей
Измерение длины малоберцовой,
большеберцовой и бедренной костей
Исследование внутренних органов плодов по методу J.G. Wilson
Нижняя челюсть,
язык, ротовая и
носовая полости
Гортань, пищевод,
позвоночник, спинной
мозг и слюнные железы
Глазные яблоки
и обонятельные
луковицы
Пищевод, трахея,
спинной мозг
Кора больших
полушарий, боковые,
третий и четвертый
желудочки, мозжечок,
продолговатый мозг
Сердце, легкие,
бронхи, спинной мозг
Органы таза: почки,
мочевой пузырь,
прямая кишка,
внутренние половые
органы.
Печень, диафрагма
Почки, печень,
кишечник, желудок
Вывод:
Результаты оценки безопасности ГМ кукурузы в
эксперименте на 3-х поколениях крыс
свидетельствуют об отсутствии какого-либо
негативного действия.
При сравнении с аналогичными показателями у
крыс контрольной группы различий не выявлено.
Значения всех изученных показателей находились
в п р е д е л а х ф и з и ол о г и ч е с к и х к ол е б а н и й ,
характерных для крыс.
ГМО, прошедшие государственную регистрацию в
Российской Федерации
Область применения
Пища
Корма
1
Соя, линия 40-3-2, устойчивая к глифосату
с 1999 г.
с 2003 г.
2
Соя, линия А2704-12, устойчивая к глюфосинату аммония
с 2002 г.
с 2007 г.
3
Соя, линия А5547-127, устойчивая к глюфосинату аммония
с 2002 г.
с 2007 г.
4
Соя, линия MON 89788, устойчивая к глифосату
с 2010 г.
с 2010 г.
5
Кукуруза, линия MON810, устойчивая к кукурузному (стеблевому)
мотыльку Ostrinia nubilalis
с 2000 г.
с 2003 г.
6
Кукуруза, линия GA21, устойчивая к глифосату
с 2000 г.
с 2003 г.
7
Кукуруза, линия NK603, устойчивая к глифосату
с 2002 г.
с 2003 г.
8
Кукуруза, линия Т25, устойчивая к глюфосинату аммония
с 2001 г.
с 2006 г.
9
Кукуруза, линия MON863, устойчивая к жуку Diabrotica spp.
с 2003 г.
с 2003 г.
10
Кукуруза, линия Bt-11, устойчивая к глюфосинату аммония и
кукурузному (стеблевому) мотыльку Ostrinia nubilalis
с 2003 г.
с 2006 г.
11
Кукуруза, линия MON88017, устойчивая к глифосату и жуку Diabrotica
spp.
с 2007 г.
с 2008 г.
12
Кукуруза, линия MIR604, устойчивая к жуку Diabrotica spp.
с 2007 г.
с 2008 г.
13
Кукуруза, линия 3272, синтезирующая фермент α-амилазу
с 2010 г.
с 2010 г.
14
Кукуруза, линия MIR162, устойчивая к чешуекрылым насекомым
с 2011 г.
с 2012 г.
15
Рис, линия LL62, устойчивая к глюфосинату аммония
с 2003 г.
-
16
Сахарная свекла, линия Н7-1, устойчивая к глифосату
с 2006 г.
-
17
Сахарная свекла, линия GTSB77, устойчивая к глифосату
2001-2006 г.
-
18
Картофель, сорт «Елизавета 2904/1 kgs», устойчивый к кол. жуку
с 2005 г.
-
19
Картофель, сорт «Луговской 1210 amk», устойчивый к кол. жуку
с 2006 г.
-
20
Картофель, сорт Рассет бурбанк Ньюлив, устойчивый к кол. жуку
2000-2008 г.
-
21
Картофель, сорт Супериор Ньюлив, устойчивый к кол. жуку
2000-2008 г.
-
В соответствии с действующей в России системой за период с 1999 по
2012 г.г. 21 линия ГМО прошли полный цикл медико-биологических
исследований (в экспериментах было использовано более 13 000
лабораторных животных, проведено более 140 000 анализов).
Таким образом, к 2012 году накоплена научная база по безопасности
ГМО, включающая анализ результатов научных исследований,
проведенных в рамках процедуры регистрации ГМО в России, а также
данные отечественной и мировой научной литературы, посвященной
проблеме безопасности биотехнологической продукции.
Результаты исследований
доложены на ученых и
экспертных советах,
профильных конгрессах и
конференциях,
опубликованы в открытой
научной печати
(более 100 публикаций).
444 с
.
Млн.
га
Динамика роста площадей
посевов ГМ культур 1996-2011
WWW.ISAAA.ORG
180
160
140
120
100
81,0
80
60
40
20
0
27,8
39,9 44,2
52,6
58,7
148,0
134,0
125,0
114,3
102,0
90,0
160,0
67,7
1,711,0
1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011
Посевные площади
сельскохозяйственных культур
в Российской Федерации
Млн.
из них ГМО – 0 га
га
ГМ культуры
140
160 млн. га, 11%
120
124,8
121,9
117,7
102,5
100
84,6 84,8 84,6 79,6
80
77,3 75,8 75,3 74,8 77,0 77,8
75,1 76,7
60
Традиционные
сельскохозяйственные культуры
~1340 млн. га, 89%
40
20
0
1970 1980 1990 1995 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011
СССР
www.gks.ru
Использование ГМО: результаты и факты
17 лет
культивирования биотехнологических культур (1996-2012)
29 стран, выращивающих биотехнологические культуры
4,6 млрд. литров
почвы
‒ экономия дизельного топлива
за счет
сокращения числа механических обработок
12,2 млн. тонн ‒ сокращение выбросов парниковых газов из-за
экономии расхода топлива
438 700 тонн ‒ сокращение объемов вносимых пестицидов
более 1 триллиона тонн
‒ предполагаемое количество
потребленных продуктов, содержащих ГМ
ингредиенты
%
14
12
Пищевая продукция, произведенная
из/или содержащая ГМО
растительного происхождения,
на рынке Российской Федерации
11,9
В ходе выборочного контроля
за пищевой продукцией,
имеющей ГМ аналоги,
проведено более 200 000
анализов на наличие ГМО
растительного происхождения.
12,0
10
7,6
8
6
4
2,7
1,13
2
0
2003
2004
2005
2006
2007
0,62
2008
0,23
2009
0,16
2010
0,1
2011
Такая тенденция свидетельствует об отказе производителей от использования
биотехнологического сырья, и замене полноценного растительного белка (сои)
при производстве мясных и колбасных изделий на плохо усваиваемые
соединительнотканные белки или крахмалсодержащие компоненты,
что снижает пищевую ценность продуктов примерно на 20%.
Отказ от использования биотехнологического сырья снижает
потребление полноценного белка, в результате чего сильнее
нарушается баланс белков / жиров / углеводов
в рационе населения Российской Федерации.
ГМО
2012 ?
БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ!
Скачать