Первое потомство, полученное с использованием

реклама
Íîâîñòè êëåòî÷íûõ òåõíîëîãèé
ìèêðîãëèàëüíûõ ýëåìåíòîâ. Áîëåå òîãî, ÌÌÑÊ ýêñïðåññèðóþò ìîëåêóëó SDF-1, êîòîðàÿ ñëóæèò ôàêòîðîì õåìîòàêñèñà
äëÿ êëåòîê ìèåëîèäíîãî ðÿäà. Âîçìîæíî, èìåííî ýêñïðåññèÿ
ýòèõ ôàêòîðîâ in situ ïðèâîäèò ê ïîñò-îïåðàöèîííîìó âîñïàëåíèþ è ðàçðóøåíèþ òðàíñïëàíòàòîâ.
Õîòÿ ãèñòîëîãè÷åñêèå è èììóíîãèñòîõèìè÷åñêèå äàííûå
(êëåòêè âûÿâëÿëèñü àíòèòåëàìè ê GFP) ñâèäåòåëüñòâîâàëè î
ïîëíîì îòòîðæåíèè òðàíñïëàíòàòà, â íåðâíîé òêàíè áûëè
îáíàðóæåíû BrdU è BBZ (äðóãèå 2 ìåòêè ÌÌÑÊ), ÷òî ïîçâîëÿëî ïðåäïîëîæèòü âûæèâàíèå ÷àñòè ÌÌÑÊ è èõ ñîçðåâàíèå.
Îêàçàëîñü, ÷òî ïðè òðàíñïëàíòàöèè ÌÌÑÊ â ñôîðìèðîâàâøèéñÿ ìîçã ïðîèñõîäèò ïåðåíîñ èõ ìàðêåðîâ â êëåòêè
õîçÿèíà.  êà÷åñòâå êîíòðîëÿ áûëè èñïîëüçîâàíû íåæèçíåñïîñîáíûå ÌÌÑÊ, ïðîøåäøèå íåñêîëüêî öèêëîâ áûñòðîé
çàìîðîçêè-ðàçìîðîçêè, ëèáî ïîäâåðãíóòûå ìèêðîâîëíîâîìó
îáëó÷åíèþ, à çàòåì òðàíñïëàíòèðîâàííûå â ãèïïîêàìï è
ñòðèàòóì èíòàêòíûõ êðûñ. È, äåéñòâèòåëüíî, â òå÷åíèå 12
íåäåëü ïîñëå òðàíñïëàíòàöèè ìå÷åííûå BrDU è BBZ êëåòêè
øèðîêî ðàñïðîñòðàíèëèñü ïî îáîèì ðåãèîíàì òðàíñïëàíòàöèè. Èõ ôåíîòèïè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè ïîëíîñòüþ ñîîòâåòñòâîâàëè õàðàêòåðèñòèêàì êëåòîê, îáíàðóæåííûõ ïîñëå
òðàíñïëàíòàöèé æèçíåñïîñîáíûõ ÌÌÑÊ – ýòî áûëè íåéðîíû
ðåöèïèåíòà. Òàêèì îáðàçîì, ïðîèñõîäèë ïåðåíîñ ìàðêåðîâ
èç òðàíñïëàíòèðîâàííûõ ÌÌÑÊ â êëåòêè-ïðåäøåñòâåííèêè
íåéðîíîâ õîçÿèíà, êîòîðûå â äàëüíåéøåì äèôôåðåíöèðîâàëèñü. È õîòÿ ñòðèàòóì, â îòëè÷èå îò ãèïïîêàìïà, íå ÿâëÿËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ:
1. Bang O.Y., Lee J.S., Lee P.H., Lee G. Autologous mesenchymal stem cell
transplantation in stroke patients. Ann. Neurol. 2005; 57(6): 874-82.
2. Woodbury D., Schwarz E.J., Prockop D.J., Black I.B. Adult rat and human
bone marrow stromal cells differentiate into neurons. J Neurosci Res. 2000
;61(4): 364-70.
3. Sanchez-Ramos J., Song S., Cardozo-Pelaez F. et al. Adult bone marrow stromal
cells differentiate into neural cells in vitro. Exp. Neurol. 2000; 164(2): 247-56.
4. Ñåðãååâ Â.Ñ. Èììóíîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà ìóëüòèïîòåíòíûõ
15
åòñÿ íåéðîãåííîé îáëàñòüþ, â ïîñëåäíåå âðåìÿ ïîÿâèëèñü
äàííûå îá îòäåëüíûõ ïðîãåíèòîðíûõ êëåòêàõ, ïðèñóòñòâóþùèõ
â í¸ì. Âîçìîæíî, èìåííî ñ ýòèì ñâÿçàíà ñõîæåñòü êàðòèí â
îáîèõ ðàéîíàõ òðàíñïëàíòàöèè.
Òàêèì îáðàçîì, ýòî èññëåäîâàíèå ïðîòèâîðå÷èò êàê äàííûì î ïëàñòè÷íîñòè ÌÌÑÊ ïðè èõ èíôóçèÿõ â èíòàêòíûé ëèáî
ïîâðåæä¸ííûé ìîçã, à òàêæå äàííûì îá èõ èììóíîïðèâèëåãèðîâàííîñòè. Âîçìîæíî, â ðàííèõ ýêñïåðèìåíòàõ èññëåäîâàòåëè îøèáî÷íî îïðåäåëÿëè âûæèâàíèå è ïëàñòè÷íîñòü
ÌÌÑÊ, îñíîâûâàÿñü íà îáíàðóæåíèè â òêàíÿõ ðåöèïèåíòà
ìàðêåðîâ BrdU è BBZ. Íà ñàìîì äåëå, ïðè òðàíñïëàíòàöèè
àëëîãåííûå ÌÌÑÊ îòòîðãàþòñÿ ïîñðåäñòâîì âîñïàëèòåëüíîé
ðåàêöèè, â êîòîðîé ó÷àñòâóþò êëåòêè ìèêðîãëèè ðåöèïèåíòà, à
ìàðêåðû îñòàþòñÿ â òêàíÿõ â ðåçóëüòàòå ïåðåíîñà. ßâëåíèå
ïåðåíîñà ìàðêåðîâ îòðèöàåò ôåíîìåí òðàíñäèôôåðåíöèðîâêè ÌÌÑÊ in vivo â óñëîâèÿõ ïîäõîäÿùåãî ìèêðîîêðóæåíèÿ. Ðåçóëüòàòû ýòîãî èññëåäîâàíèÿ ñòàâÿò ïîä ñîìíåíèå
ïåðñïåêòèâó èñïîëüçîâàíèÿ àëëîãåííûõ ÌÌÑÊ â êà÷åñòâå
èñòî÷íèêà íåéðîíîâ ïðè òðàíñïëàíòàöèÿõ íåðâíîé òêàíè, à
òàêæå àâòîðû ñòàòüè ïðèçûâàþò ê îñòîðîæíîñòè ïðè äàëüíåéøåì èñïîëüçîâàíèè BrdU è BBZ â êà÷åñòâå ìàðêåðîâ
òðàíñïëàíòèðîâàííûõ ìåçåíõèìíûõ ñòâîëîâûõ êëåòîê. Âìåñòå ñ òåì, èñïîëüçîâàíèå ýòèõ ìàðê¸ðîâ ìîæåò áûòü ïðè÷èíîé
àðòåôàêòîâ.
ìåçåíõèìíûõ ñòðîìàëüíûõ êëåòîê. Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ
èíæåíåðèÿ 2005; 2: 39-42.
5. Munoz-Elias G., Marcus A.J., Coyne T.M. et al. Adult bone marrow stromal
cells in the embryonic brain: engraftment, migration, differentiation, and longterm survival. J. Neurosci. 2004; 24(19): 4585-95.
6. Doetsch F., Caille .I, Lim D.A. et al. Subventricular zone astrocytes are neural
stem cells in the adult mammalian brain. Cell 1999; 97(6): 703-16.
7. Gage F.H., Kempermann G., Palmer T.D. et al. Multipotent progenitor cells
in the adult dentate gyrus. J. Neurobiol. 1998; 36(2): 249-66.
Ïîäãîòîâèëà À.C. Ãðèãîðÿí
Ïî ìàòåðèàëàì Stem Cells Published online July 27, 2006
Ïåðâîå ïîòîìñòâî, ïîëó÷åííîå ñ èñïîëüçîâàíèåì
«èñêóññòâåííûõ» ñïåðìàòîçîèäîâ, âûäåëåííûõ
èç ýìáðèîíàëüíûõ ñòâîëîâûõ êëåòîê
Ýêñïåðèìåíòû ïî âûäåëåíèþ è õàðàêòåðèñòèêå ïîëîâûõ êëåòîê èç ýìáðèîíàëüíûõ ñòâîëîâûõ (ÝÑÊ) ïîçâîëÿò
èññëåäîâàòü áèîëîãè÷åñêèå ïðîöåññû â ãàìåòàõ è ãàìåòîãåíåç, à òàêæå ñòàòü îäíèì èç ñïîñîáîâ ëå÷åíèÿ áåñïëîäèÿ
â áóäóùåì [1]. Äî íåäàâíåãî âðåìåíè áûëî ïîêàçàíî ôîðìèðîâàíèå èç ÝÑÊ îâîöèòîâ [2] è ñïåðìàòîçîèäîâ [3, 4].
Îäíàêî íè îäíà ãðóïïà äî ñèõ ïîð íå ïîêàçàëà ôóíêöèîíàëüíîñòü âûäåëåííûõ ãàìåò, òî åñòü èõ ñïîñîáíîñòü äàâàòü íîðìàëüíîå ïîòîìñòâî. Ïîëó÷åííûå ïóòåì îïëîäîòâîðåíèÿ
«èñêóññòâåííûìè» ãàìåòàìè áëàñòîöèñòû íå èìïëàíòèðîâàëè æèâîòíûì.
Íåäàâíî ãðóïïà Karim Nayernia èç Georg-August University
(Göttingen, Germany) âïåðâûå ïîêàçàëà ñïîñîáíîñòü ñïåðìàòîçîèäîâ, âûäåëåííûõ èç ÝÑÊ ìûøè, ê îïëîäîòâîðåíèþ è
ðàçâèòèþ âçðîñëûõ æèâîòíûõ èç ïîëó÷åííûõ çàðîäûøåé.
Ðàáîòà îïóáëèêîâàíà â æóðíàëå Developmental Cell.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè ïîëó÷åííûõ
êëåòîê ó÷åíûå èñïîëüçîâàëè äâå ãåíåòè÷åñêèå êîíñòðóêöèè
ñ ïðîìîòîðàìè ãåíîâ, õàðàêòåðíûõ äëÿ ïðåìåéîòè÷åñêèõ ãàïëîèäíûõ ìóæñêèõ ïîëîâûõ êëåòîê. Ïîä èõ êîíòðîëåì çàïóñêàëàñü ýêñïðåññèÿ ôëóîðåñöåíòíûõ áåëêî⠖ çåëåíîãî è
êðàñíîãî ñîîòâåòñòâåííî. Áëàãîäàðÿ òàêèì ãåíåòè÷åñêèì
ìåòêàì, èññëåäîâàòåëè ìîãëè âûäåëèòü ñïåðìàòîãîíèàëüíûå
êëåòêè â êóëüòóðå ÝÑÊ. Ýòè ãåíû âíîñèëè â ÝÑÊ â êóëüòóðå è
êóëüòèâèðîâàëè äî 2 ìåñÿöåâ. Â ïðîöåññå êóëüòèâèðîâàíèÿ
èñïîëüçîâàëñÿ êîêòåéëü ðàñòâîðèìûõ ôàêòîðîâ, êîòîðûå
ñïîñîáñòâîâàëè âûæèâàíèþ è ñàìîîáíîâëåíèþ ìûøèíûõ
ïîëîâûõ êëåòîê. Ïîñëå êóëüòèâèðîâàíèÿ â òàêîé ñðåäå äî
60% êëåòîê, ýêñïðåññèðóþùèõ òðàíñãåí (à çíà÷èò, êîììèòèðîâàííûõ ïî ïóòè ðàçâèòèÿ ìóæñêèõ ïîëîâûõ êëåòîê), ñîðòèðîâàëèñü è ïåðåíîñèëèñü â áàçîâóþ ñðåäó áåç ôàêòîðîâ
äèôôåðåíöèðîâêè. ×åðåç äâà ìåñÿöà êëåòêè ïîäâåðãàëè
Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 4 (6), 2006
16
Íîâîñòè êëåòî÷íûõ òåõíîëîãèé
ïîâòîðíîé ñîðòèðîâêå íà îñíîâå ýêñïðåññèè îáîèõ òðàíñãåíîâ. Òàêèì ïóòåì èññëåäîâàòåëÿì óäàëîñü âûâåñòè 2 ñïåðìàòîãîíèàëüíûõ ëèíèè - SSC7 è SSC12.
Êëåòêè áûëè ñïîñîáíû ôîðìèðîâàòü ýìáðèîèäíûå òåëüöà
è ýêñïðåññèðîâàëè áåëêè, õàðàêòåðíûå äëÿ ñïåðìàòîãîíèåâ.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè ïîëó÷åííûõ êëåòî÷íûõ ëèíèé èõ ïåðåñàæèâàëè â ñåìåííèê ìûøàì (âòîðîé
ñëóæèë â êà÷åñòâå êîíòðîëüíîãî), êîòîðûì ïðåäâàðèòåëüíî
áûëà ïðîâåäåíà àáëÿöèÿ ïîëîâûõ êëåòîê. Ó 2 èç 10 ïðîàíàëèçèðîâàííûõ æèâîòíûõ â ïðîñâåòå ñåìåííîãî êàíàëüöà, à
òàêæå â åãî ñòåíêå, áûëè îáíàðóæåíû êàðòèíû íîðìàëüíîãî
ñïåðìàòîãåíåçà. Îäíàêî ïîäâèæíîñòü ïîëó÷åííûõ êëåòîê
áûëà çíà÷èòåëüíî ñíèæåíà ïî ñðàâíåíèþ ñ ïîëîæèòåëüíûì
êîíòðîëåì. Ïðîèñõîæäåíèå ïîñòìåéîòè÷åñêèõ êëåòîê â ïðîñâåòå êàíàëüöà ïîäòâåðæäàëîñü àêòèâíîé ôëóîðåñöåíöèåé
òðàíñãåííûõ áåëêîâ. Ó ïÿòè ìûøåé áûëî çàôèêñèðîâàíî îáðàçîâàíèå òåðàòîì ïîñëå òðàíñïëàíòàöèè.
Âíóòðèöèòîïëàçìàòè÷åñêàÿ èíúåêöèÿ êëåòîê ïîëó÷åííûõ ëèíèé â íåîïëîäîòâîðåííûé îâîöèò ìûøåé äèêîãî òèïà
ïðèâîäèëà ê ïîñëåäóþùåìó âûáðîñó ïîëÿðíîãî òåëüöà è
ôîðìèðîâàíèþ ïðîíóêëåóñîâ. Äâóõêëåòî÷íûå ýìáðèîíû,
ïîëó÷åííûå òàêèì îáðàçîì, èìïëàíòèðîâàëè â ÿéöåâîä
ïñåâäî-áåðåìåííîé ñàìêè. Èç 65 ïåðåíåñåííûõ ýìáðèîíîâ ðîäèëîñü 12 ìûøàò. Ïî ñðàâíåíèþ ñ ìûøàòàìè äèêîãî
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ:
1. Ëîïàòèíà Ò.B. Èñêóññòâåííûé ãàìåòîãåíåç: äèôôåðåíöèðîâêà
ýìáðèîíàëüíûõ ñòâîëîâûõ êëåòîê â ãàìåòû. Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è
òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ 2006; 2: 32-4.
2. Hubner K., Fuhrmann G., Christenson L.K. et al. Derivation of oocytes from
mouse embryonic stem cells. Science 2003; 300(5623): 1251-6.
òèïà, ìûøàòà, ïîëó÷åííûå èñêóññòâåííûì ïóòåì, áûëè ëèáî
ìåíüøå, ëèáî áîëüøå ïî ðàçìåðó è ïîãèáàëè â òå÷åíèå 5
ìåñÿöåâ. Êëåòêè, íåñóùèå òðàíñãåí, áûëè îáíàðóæåíû â ñåìåííèêàõ íåêîòîðûõ èç ïîòîìêîâ.
Íåñìîòðÿ íà íèçêóþ ýôôåêòèâíîñòü ïåðåíîñà, ðîæäåíèå ñëàáûõ è äåôåêòíûõ äåòåíûøåé, îáðàçîâàíèå òåðàòîì
ïîñëå òðàíñïëàíòàöèè êëåòîê, àâòîðû âïåðâûå ïðîäåìîíñòðèðîâàëè âîçìîæíîñòü ðîæäåíèÿ ïîòîìñòâà, ïîëó÷åííîãî
ïîñëå îïëîäîòâîðåíèÿ in vitro «èñêóññòâåííî» ïîëó÷åííûìè
ãàìåòàìè èç ÝÑÊ. Òàêèì îáðàçîì èññëåäîâàòåëè äîêàçàëè,
÷òî ìóæñêèå ãàìåòû, ïîëó÷åííûå èç ÝÑÊ, ïîëíîñòüþ ôóíêöèîíàëüíû. Ïðè óñîâåðøåíñòâîâàíèè ìåòîäèêè ïîëó÷åíèÿ
ïîëîâûõ êëåòîê èç ÝÑÊ è óâåëè÷åíèè ýôôåêòèâíîñòè îïëîäîòâîðåíèÿ è ðîæäåíèÿ çäîðîâûõ äåòåíûøåé, îòêðîþòñÿ
íîâûå ïåðñïåêòèâû èñïîëüçîâàíèÿ äàííîé òåõíîëîãèè â
áèîëîãèè è ìåäèöèíå. Ïðåæäå âñåãî, ðàçðàáîòàííàÿ ñèñòåìà ìîæåò ñëóæèòü ïðåêðàñíîé ìîäåëüþ èçó÷åíèÿ äèôôåðåíöèðîâêè ãàìåò. Âîçìîæíîñòü âûäåëåíèÿ ãàìåò èç ÝÑÊ
ìîæåò ðåøèòü ïðîáëåìó íåêîòîðûõ ôîðì áåñïëîäèÿ. Êðîìå
òîãî, âûäåëåíèå ôóíêöèîíàëüíûõ ìóæñêèõ è æåíñêèõ ãàìåò
èç îäíîé ëèíèè ÝÑÊ ïîçâîëèò ïîëíîñòüþ àâòîíîìíî ïîääåðæèâàòü è îáíîâëÿòü ýòó ëèíèþ ÷åðåç ñîçäàíèå íîâûõ áëàñòîöèñò. Òåì íå ìåíåå, ðàçâèòèå òàêèõ òåõíîëîãèé îäíîâðåìåííî
ïîðîæäàåò è ðÿä ýòè÷åñêèõ âîïðîñîâ.
3. Toyooka Y., Tsunekawa N., Akasu R., Noce T. Embryonic stem cells
can form germ cells in vitro. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2003; 100(20):
11457-62.
4. Lacham-Kaplan O., Chy H., Trounson A. Testicular cell conditioned medium
supports differentiation of embryonic stem (ES) cells into ovarian structures
containing oocytes. Stem Cells 2006; 24(2): 266-73.
Ïîäãîòîâèëà Â.Ñ. Ìåëèõîâà
Ïî ìàòåðèàëàì Dev. Cell 2006;11(1):125-32
Nanog - ôàêòîð ðåïðîãðàììèðîâàíèÿ ÿäðà âçðîñëîé
ñîìàòè÷åñêîé êëåòêè
Èçó÷åíèå è ðàçâèòèå òåõíîëîãèè ïåðåíîñà ÿäðà âçðîñëîé
ñîìàòè÷åñêîé êëåòêè ìëåêîïèòàþùèõ â ýíóêëåèðîâàííûé
îâîöèò ïîçâîëèëî çàêëþ÷èòü, ÷òî ãåíåòè÷åñêèå è ýïèãåíåòè÷åñêèå èçìåíåíèÿ, ïðèîáðåòàåìûå êëåòêîé â ïðîöåññå
äèôôåðåíöèðîâêè, ìîãóò áûòü ïîëíîñòüþ «ðåïðîãðàììèðîâàíû». Ïðè ýòîì ïðîèñõîäèò àêòèâàöèÿ «ýìáðèîíàëüíûõ»
ãåíîâ è èíãèáèðîâàíèå ãåíîâ, îòâå÷àþùèõ çà äèôôåðåíöèðîâêó. Îêàçàëîñü, ÷òî ðåïðîãðàììèðîâàíèå âçðîñëîãî ÿäðà
ìîæåò áûòü òàêæå äîñòèãíóòî è ñëèÿíèåì ñ ýìáðèîíàëüíîé
ñòâîëîâîé êëåòêîé (ÝÑÊ) [2, 3]. Òàêèì îáðàçîì, âçðîñëàÿ ñîìàòè÷åñêàÿ êëåòêà ìîæåò âåðíóòüñÿ â ýìáðèîíàëüíîå ïëþðèïîòåíòíîå ñîñòîÿíèå è äàòü íà÷àëî íîâîìó ýìáðèîíó.
Îñòà¸òñÿ çàãàäêîé, êàêèå èìåííî ôàêòîðû, ñîäåðæàùèåñÿ
â îâîöèòå è â ÝÑÊ, ìîãóò îáóñëîâëèâàòü ôåíîìåí ãåíåòè÷åñêîãî è ýïèãåíåòè÷åñêîãî ðåïðîãðàììèðîâàíèÿ «âçðîñëîãî»
ÿäðà? Ãðóïïà Austin Smith ïîêàçàëà, ÷òî îäíèì èç òàêèõ ôàêòîðîâ ÿâëÿåòñÿ ãåí Nanog. Ðåçóëüòàòû ðàáîòû îïóáëèêîâàíû
â íåäàâíåì íîìåðå æóðíàëà Nature.
Ãåí Nanog áûë èçîëèðîâàí è îïèñàí Ian Chambers èç
Ýäèíáóðãñêîãî óíèâåðñèòåòà [4]. Oí ïîëó÷èë òàêîå íàçâàíèå
ïî èìåíè ñòðàíû âå÷íîé þíîñòè Òèð Íàí Îã èç êåëüòñêîé
ìèôîëîãèè. Ïðè âçàèìîäåéñòâèè ñ äâóìÿ äðóãèìè âàæíåéøèìè ôàêòîðàìè - Oct3/4, è SOX-2, Nanog ïîääåðæèâàåò
«ñòâîëîâîñòü» ÷åðåç àêòèâàöèþ ãåíîâ, ó÷àñòâóþùèõ â ïðîÊëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 4 (6), 2006
öåññå äåëåíèÿ ÝÑÊ, è èíàêòèâàöèþ ãåíîâ, çàïóñêàþùèõ
ïðîöåññû ðàçâèòèÿ è äèôôåðåíöèðîâêè [5].
Äëÿ ïðîâåðêè ãèïîòåçû çíà÷åíèÿ Nanog äëÿ ðåïðîãðàììèðîâàíèÿ ÿäðà è ïðèîáðåòåíèÿ êëåòêîé ñâîéñòâ ïëþðèïîòåíòíîñòè èññëåäîâàòåëè ñîçäàâàëè ãèáðèäû íåéðàëüíûx ñòâîëîâûõ êëåòîê (ÍÑÊ) ñ ÝÑÊ, îâåðýêñïðåññèðóþùèõ ãåí Nanog
(ÝÑÊ-N), ñëèâàÿ èõ in vitro. Ïðè÷¸ì èçáûòî÷íàÿ ýêñïðåññèÿ
òðàíñãåíà ñ Nanog â ÝÑÊ íå âëèÿëà íà ÷àñòîòó ñëèÿíèÿ. Òàêîé
âàðèàíò ñëèÿíèÿ ïðèâîäèë ê ôîðìèðîâàíèþ ãèáðèäíûõ êîëîíèé, èìåþùèõ õàðàêòåðèñòèêè ÝÑÊ. Îêàçàëîñü, ÷òî ÷àñòîòà
ôîðìèðîâàíèÿ êîëîíèé áûëà â 200 ðàç âûøå, ÷åì â îáû÷íûõ
ÍÑÊ-ÝÑÊ - ãèáðèäàõ è ñðàâíèìà ñ òàêîâîé ïðè ñëèÿíèè ÝÑÊÝÑÊ. Êëåòêè òàêèõ êîëîíèé òåðÿëè ýêñïðåññèþ ãåíîâ ÍÑÊ è íå
ðîñëè â «íåéðîíàëüíîé» ñåëåêòèâíîé ñðåäå. Êîëîíèè äåìîíñòðèðîâàëè ïðèçíàêè ðåïðîãðàììèðîâàíèÿ ÍÑÊ-ÿäðà è ïëþðèïîòåíòíîñòè - ýêñïðåññèþ òèïè÷íûõ äëÿ ÝÑÊ ãåíîâ, ïîòåðþ
ÿäåðíîãî ìàðê¸ðà ÍÑÊ, ñïîíòàííóþ äèôôåðåíöèðîâêó ýìáðèîèäíûõ òåëåö â ñîêðàùàþùèåñÿ ìèîöèòû è ò.ä. Ñëèÿíèå ÍÑÊ
(ÍÑÊ-N), èçáûòî÷íî ïðîäóöèðóþùèõ Nanog, ñ îáû÷íûìè ÝÑÊ
ïðèâîäèëî ê âîçíèêíîâåíèþ ýìáðèîíàëüíûõ êîëîíèé â 8 ðàç
÷àùå, ÷åì â êîíòðîëüíûõ ñëèÿíèÿõ ÍÑÊ-ÝÑÊ.
Ãèïåðýêñïðåññèÿ Nanog â òðàíñãåííûõ ÝÑÊ ïðèâîäèëà òàêæå ê çíà÷èòåëüíîìó óâåëè÷åíèþ âûõîäà êîëîíèé ïðè èõ ñëèÿíèè ñ ýìáðèîíàëüíûìè ôèáðîáëàñòàìè è òèìîöèòàìè. Òàêèì
Скачать