Íîâîñòè êëåòî÷íûõ òåõíîëîãèé ìèêðîãëèàëüíûõ ýëåìåíòîâ. Áîëåå òîãî, ÌÌÑÊ ýêñïðåññèðóþò ìîëåêóëó SDF-1, êîòîðàÿ ñëóæèò ôàêòîðîì õåìîòàêñèñà äëÿ êëåòîê ìèåëîèäíîãî ðÿäà. Âîçìîæíî, èìåííî ýêñïðåññèÿ ýòèõ ôàêòîðîâ in situ ïðèâîäèò ê ïîñò-îïåðàöèîííîìó âîñïàëåíèþ è ðàçðóøåíèþ òðàíñïëàíòàòîâ. Õîòÿ ãèñòîëîãè÷åñêèå è èììóíîãèñòîõèìè÷åñêèå äàííûå (êëåòêè âûÿâëÿëèñü àíòèòåëàìè ê GFP) ñâèäåòåëüñòâîâàëè î ïîëíîì îòòîðæåíèè òðàíñïëàíòàòà, â íåðâíîé òêàíè áûëè îáíàðóæåíû BrdU è BBZ (äðóãèå 2 ìåòêè ÌÌÑÊ), ÷òî ïîçâîëÿëî ïðåäïîëîæèòü âûæèâàíèå ÷àñòè ÌÌÑÊ è èõ ñîçðåâàíèå. Îêàçàëîñü, ÷òî ïðè òðàíñïëàíòàöèè ÌÌÑÊ â ñôîðìèðîâàâøèéñÿ ìîçã ïðîèñõîäèò ïåðåíîñ èõ ìàðêåðîâ â êëåòêè õîçÿèíà.  êà÷åñòâå êîíòðîëÿ áûëè èñïîëüçîâàíû íåæèçíåñïîñîáíûå ÌÌÑÊ, ïðîøåäøèå íåñêîëüêî öèêëîâ áûñòðîé çàìîðîçêè-ðàçìîðîçêè, ëèáî ïîäâåðãíóòûå ìèêðîâîëíîâîìó îáëó÷åíèþ, à çàòåì òðàíñïëàíòèðîâàííûå â ãèïïîêàìï è ñòðèàòóì èíòàêòíûõ êðûñ. È, äåéñòâèòåëüíî, â òå÷åíèå 12 íåäåëü ïîñëå òðàíñïëàíòàöèè ìå÷åííûå BrDU è BBZ êëåòêè øèðîêî ðàñïðîñòðàíèëèñü ïî îáîèì ðåãèîíàì òðàíñïëàíòàöèè. Èõ ôåíîòèïè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè ïîëíîñòüþ ñîîòâåòñòâîâàëè õàðàêòåðèñòèêàì êëåòîê, îáíàðóæåííûõ ïîñëå òðàíñïëàíòàöèé æèçíåñïîñîáíûõ ÌÌÑÊ ýòî áûëè íåéðîíû ðåöèïèåíòà. Òàêèì îáðàçîì, ïðîèñõîäèë ïåðåíîñ ìàðêåðîâ èç òðàíñïëàíòèðîâàííûõ ÌÌÑÊ â êëåòêè-ïðåäøåñòâåííèêè íåéðîíîâ õîçÿèíà, êîòîðûå â äàëüíåéøåì äèôôåðåíöèðîâàëèñü. È õîòÿ ñòðèàòóì, â îòëè÷èå îò ãèïïîêàìïà, íå ÿâëÿËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ: 1. Bang O.Y., Lee J.S., Lee P.H., Lee G. Autologous mesenchymal stem cell transplantation in stroke patients. Ann. Neurol. 2005; 57(6): 874-82. 2. Woodbury D., Schwarz E.J., Prockop D.J., Black I.B. Adult rat and human bone marrow stromal cells differentiate into neurons. J Neurosci Res. 2000 ;61(4): 364-70. 3. Sanchez-Ramos J., Song S., Cardozo-Pelaez F. et al. Adult bone marrow stromal cells differentiate into neural cells in vitro. Exp. Neurol. 2000; 164(2): 247-56. 4. Ñåðãååâ Â.Ñ. Èììóíîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà ìóëüòèïîòåíòíûõ 15 åòñÿ íåéðîãåííîé îáëàñòüþ, â ïîñëåäíåå âðåìÿ ïîÿâèëèñü äàííûå îá îòäåëüíûõ ïðîãåíèòîðíûõ êëåòêàõ, ïðèñóòñòâóþùèõ â í¸ì. Âîçìîæíî, èìåííî ñ ýòèì ñâÿçàíà ñõîæåñòü êàðòèí â îáîèõ ðàéîíàõ òðàíñïëàíòàöèè. Òàêèì îáðàçîì, ýòî èññëåäîâàíèå ïðîòèâîðå÷èò êàê äàííûì î ïëàñòè÷íîñòè ÌÌÑÊ ïðè èõ èíôóçèÿõ â èíòàêòíûé ëèáî ïîâðåæä¸ííûé ìîçã, à òàêæå äàííûì îá èõ èììóíîïðèâèëåãèðîâàííîñòè. Âîçìîæíî, â ðàííèõ ýêñïåðèìåíòàõ èññëåäîâàòåëè îøèáî÷íî îïðåäåëÿëè âûæèâàíèå è ïëàñòè÷íîñòü ÌÌÑÊ, îñíîâûâàÿñü íà îáíàðóæåíèè â òêàíÿõ ðåöèïèåíòà ìàðêåðîâ BrdU è BBZ. Íà ñàìîì äåëå, ïðè òðàíñïëàíòàöèè àëëîãåííûå ÌÌÑÊ îòòîðãàþòñÿ ïîñðåäñòâîì âîñïàëèòåëüíîé ðåàêöèè, â êîòîðîé ó÷àñòâóþò êëåòêè ìèêðîãëèè ðåöèïèåíòà, à ìàðêåðû îñòàþòñÿ â òêàíÿõ â ðåçóëüòàòå ïåðåíîñà. ßâëåíèå ïåðåíîñà ìàðêåðîâ îòðèöàåò ôåíîìåí òðàíñäèôôåðåíöèðîâêè ÌÌÑÊ in vivo â óñëîâèÿõ ïîäõîäÿùåãî ìèêðîîêðóæåíèÿ. Ðåçóëüòàòû ýòîãî èññëåäîâàíèÿ ñòàâÿò ïîä ñîìíåíèå ïåðñïåêòèâó èñïîëüçîâàíèÿ àëëîãåííûõ ÌÌÑÊ â êà÷åñòâå èñòî÷íèêà íåéðîíîâ ïðè òðàíñïëàíòàöèÿõ íåðâíîé òêàíè, à òàêæå àâòîðû ñòàòüè ïðèçûâàþò ê îñòîðîæíîñòè ïðè äàëüíåéøåì èñïîëüçîâàíèè BrdU è BBZ â êà÷åñòâå ìàðêåðîâ òðàíñïëàíòèðîâàííûõ ìåçåíõèìíûõ ñòâîëîâûõ êëåòîê. Âìåñòå ñ òåì, èñïîëüçîâàíèå ýòèõ ìàðê¸ðîâ ìîæåò áûòü ïðè÷èíîé àðòåôàêòîâ. ìåçåíõèìíûõ ñòðîìàëüíûõ êëåòîê. Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ 2005; 2: 39-42. 5. Munoz-Elias G., Marcus A.J., Coyne T.M. et al. Adult bone marrow stromal cells in the embryonic brain: engraftment, migration, differentiation, and longterm survival. J. Neurosci. 2004; 24(19): 4585-95. 6. Doetsch F., Caille .I, Lim D.A. et al. Subventricular zone astrocytes are neural stem cells in the adult mammalian brain. Cell 1999; 97(6): 703-16. 7. Gage F.H., Kempermann G., Palmer T.D. et al. Multipotent progenitor cells in the adult dentate gyrus. J. Neurobiol. 1998; 36(2): 249-66. Ïîäãîòîâèëà À.C. Ãðèãîðÿí Ïî ìàòåðèàëàì Stem Cells Published online July 27, 2006 Ïåðâîå ïîòîìñòâî, ïîëó÷åííîå ñ èñïîëüçîâàíèåì «èñêóññòâåííûõ» ñïåðìàòîçîèäîâ, âûäåëåííûõ èç ýìáðèîíàëüíûõ ñòâîëîâûõ êëåòîê Ýêñïåðèìåíòû ïî âûäåëåíèþ è õàðàêòåðèñòèêå ïîëîâûõ êëåòîê èç ýìáðèîíàëüíûõ ñòâîëîâûõ (ÝÑÊ) ïîçâîëÿò èññëåäîâàòü áèîëîãè÷åñêèå ïðîöåññû â ãàìåòàõ è ãàìåòîãåíåç, à òàêæå ñòàòü îäíèì èç ñïîñîáîâ ëå÷åíèÿ áåñïëîäèÿ â áóäóùåì [1]. Äî íåäàâíåãî âðåìåíè áûëî ïîêàçàíî ôîðìèðîâàíèå èç ÝÑÊ îâîöèòîâ [2] è ñïåðìàòîçîèäîâ [3, 4]. Îäíàêî íè îäíà ãðóïïà äî ñèõ ïîð íå ïîêàçàëà ôóíêöèîíàëüíîñòü âûäåëåííûõ ãàìåò, òî åñòü èõ ñïîñîáíîñòü äàâàòü íîðìàëüíîå ïîòîìñòâî. Ïîëó÷åííûå ïóòåì îïëîäîòâîðåíèÿ «èñêóññòâåííûìè» ãàìåòàìè áëàñòîöèñòû íå èìïëàíòèðîâàëè æèâîòíûì. Íåäàâíî ãðóïïà Karim Nayernia èç Georg-August University (Göttingen, Germany) âïåðâûå ïîêàçàëà ñïîñîáíîñòü ñïåðìàòîçîèäîâ, âûäåëåííûõ èç ÝÑÊ ìûøè, ê îïëîäîòâîðåíèþ è ðàçâèòèþ âçðîñëûõ æèâîòíûõ èç ïîëó÷åííûõ çàðîäûøåé. Ðàáîòà îïóáëèêîâàíà â æóðíàëå Developmental Cell. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè ïîëó÷åííûõ êëåòîê ó÷åíûå èñïîëüçîâàëè äâå ãåíåòè÷åñêèå êîíñòðóêöèè ñ ïðîìîòîðàìè ãåíîâ, õàðàêòåðíûõ äëÿ ïðåìåéîòè÷åñêèõ ãàïëîèäíûõ ìóæñêèõ ïîëîâûõ êëåòîê. Ïîä èõ êîíòðîëåì çàïóñêàëàñü ýêñïðåññèÿ ôëóîðåñöåíòíûõ áåëêîâ çåëåíîãî è êðàñíîãî ñîîòâåòñòâåííî. Áëàãîäàðÿ òàêèì ãåíåòè÷åñêèì ìåòêàì, èññëåäîâàòåëè ìîãëè âûäåëèòü ñïåðìàòîãîíèàëüíûå êëåòêè â êóëüòóðå ÝÑÊ. Ýòè ãåíû âíîñèëè â ÝÑÊ â êóëüòóðå è êóëüòèâèðîâàëè äî 2 ìåñÿöåâ.  ïðîöåññå êóëüòèâèðîâàíèÿ èñïîëüçîâàëñÿ êîêòåéëü ðàñòâîðèìûõ ôàêòîðîâ, êîòîðûå ñïîñîáñòâîâàëè âûæèâàíèþ è ñàìîîáíîâëåíèþ ìûøèíûõ ïîëîâûõ êëåòîê. Ïîñëå êóëüòèâèðîâàíèÿ â òàêîé ñðåäå äî 60% êëåòîê, ýêñïðåññèðóþùèõ òðàíñãåí (à çíà÷èò, êîììèòèðîâàííûõ ïî ïóòè ðàçâèòèÿ ìóæñêèõ ïîëîâûõ êëåòîê), ñîðòèðîâàëèñü è ïåðåíîñèëèñü â áàçîâóþ ñðåäó áåç ôàêòîðîâ äèôôåðåíöèðîâêè. ×åðåç äâà ìåñÿöà êëåòêè ïîäâåðãàëè Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 4 (6), 2006 16 Íîâîñòè êëåòî÷íûõ òåõíîëîãèé ïîâòîðíîé ñîðòèðîâêå íà îñíîâå ýêñïðåññèè îáîèõ òðàíñãåíîâ. Òàêèì ïóòåì èññëåäîâàòåëÿì óäàëîñü âûâåñòè 2 ñïåðìàòîãîíèàëüíûõ ëèíèè - SSC7 è SSC12. Êëåòêè áûëè ñïîñîáíû ôîðìèðîâàòü ýìáðèîèäíûå òåëüöà è ýêñïðåññèðîâàëè áåëêè, õàðàêòåðíûå äëÿ ñïåðìàòîãîíèåâ. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè ïîëó÷åííûõ êëåòî÷íûõ ëèíèé èõ ïåðåñàæèâàëè â ñåìåííèê ìûøàì (âòîðîé ñëóæèë â êà÷åñòâå êîíòðîëüíîãî), êîòîðûì ïðåäâàðèòåëüíî áûëà ïðîâåäåíà àáëÿöèÿ ïîëîâûõ êëåòîê. Ó 2 èç 10 ïðîàíàëèçèðîâàííûõ æèâîòíûõ â ïðîñâåòå ñåìåííîãî êàíàëüöà, à òàêæå â åãî ñòåíêå, áûëè îáíàðóæåíû êàðòèíû íîðìàëüíîãî ñïåðìàòîãåíåçà. Îäíàêî ïîäâèæíîñòü ïîëó÷åííûõ êëåòîê áûëà çíà÷èòåëüíî ñíèæåíà ïî ñðàâíåíèþ ñ ïîëîæèòåëüíûì êîíòðîëåì. Ïðîèñõîæäåíèå ïîñòìåéîòè÷åñêèõ êëåòîê â ïðîñâåòå êàíàëüöà ïîäòâåðæäàëîñü àêòèâíîé ôëóîðåñöåíöèåé òðàíñãåííûõ áåëêîâ. Ó ïÿòè ìûøåé áûëî çàôèêñèðîâàíî îáðàçîâàíèå òåðàòîì ïîñëå òðàíñïëàíòàöèè. Âíóòðèöèòîïëàçìàòè÷åñêàÿ èíúåêöèÿ êëåòîê ïîëó÷åííûõ ëèíèé â íåîïëîäîòâîðåííûé îâîöèò ìûøåé äèêîãî òèïà ïðèâîäèëà ê ïîñëåäóþùåìó âûáðîñó ïîëÿðíîãî òåëüöà è ôîðìèðîâàíèþ ïðîíóêëåóñîâ. Äâóõêëåòî÷íûå ýìáðèîíû, ïîëó÷åííûå òàêèì îáðàçîì, èìïëàíòèðîâàëè â ÿéöåâîä ïñåâäî-áåðåìåííîé ñàìêè. Èç 65 ïåðåíåñåííûõ ýìáðèîíîâ ðîäèëîñü 12 ìûøàò. Ïî ñðàâíåíèþ ñ ìûøàòàìè äèêîãî ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ: 1. Ëîïàòèíà Ò.B. Èñêóññòâåííûé ãàìåòîãåíåç: äèôôåðåíöèðîâêà ýìáðèîíàëüíûõ ñòâîëîâûõ êëåòîê â ãàìåòû. Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ 2006; 2: 32-4. 2. Hubner K., Fuhrmann G., Christenson L.K. et al. Derivation of oocytes from mouse embryonic stem cells. Science 2003; 300(5623): 1251-6. òèïà, ìûøàòà, ïîëó÷åííûå èñêóññòâåííûì ïóòåì, áûëè ëèáî ìåíüøå, ëèáî áîëüøå ïî ðàçìåðó è ïîãèáàëè â òå÷åíèå 5 ìåñÿöåâ. Êëåòêè, íåñóùèå òðàíñãåí, áûëè îáíàðóæåíû â ñåìåííèêàõ íåêîòîðûõ èç ïîòîìêîâ. Íåñìîòðÿ íà íèçêóþ ýôôåêòèâíîñòü ïåðåíîñà, ðîæäåíèå ñëàáûõ è äåôåêòíûõ äåòåíûøåé, îáðàçîâàíèå òåðàòîì ïîñëå òðàíñïëàíòàöèè êëåòîê, àâòîðû âïåðâûå ïðîäåìîíñòðèðîâàëè âîçìîæíîñòü ðîæäåíèÿ ïîòîìñòâà, ïîëó÷åííîãî ïîñëå îïëîäîòâîðåíèÿ in vitro «èñêóññòâåííî» ïîëó÷åííûìè ãàìåòàìè èç ÝÑÊ. Òàêèì îáðàçîì èññëåäîâàòåëè äîêàçàëè, ÷òî ìóæñêèå ãàìåòû, ïîëó÷åííûå èç ÝÑÊ, ïîëíîñòüþ ôóíêöèîíàëüíû. Ïðè óñîâåðøåíñòâîâàíèè ìåòîäèêè ïîëó÷åíèÿ ïîëîâûõ êëåòîê èç ÝÑÊ è óâåëè÷åíèè ýôôåêòèâíîñòè îïëîäîòâîðåíèÿ è ðîæäåíèÿ çäîðîâûõ äåòåíûøåé, îòêðîþòñÿ íîâûå ïåðñïåêòèâû èñïîëüçîâàíèÿ äàííîé òåõíîëîãèè â áèîëîãèè è ìåäèöèíå. Ïðåæäå âñåãî, ðàçðàáîòàííàÿ ñèñòåìà ìîæåò ñëóæèòü ïðåêðàñíîé ìîäåëüþ èçó÷åíèÿ äèôôåðåíöèðîâêè ãàìåò. Âîçìîæíîñòü âûäåëåíèÿ ãàìåò èç ÝÑÊ ìîæåò ðåøèòü ïðîáëåìó íåêîòîðûõ ôîðì áåñïëîäèÿ. Êðîìå òîãî, âûäåëåíèå ôóíêöèîíàëüíûõ ìóæñêèõ è æåíñêèõ ãàìåò èç îäíîé ëèíèè ÝÑÊ ïîçâîëèò ïîëíîñòüþ àâòîíîìíî ïîääåðæèâàòü è îáíîâëÿòü ýòó ëèíèþ ÷åðåç ñîçäàíèå íîâûõ áëàñòîöèñò. Òåì íå ìåíåå, ðàçâèòèå òàêèõ òåõíîëîãèé îäíîâðåìåííî ïîðîæäàåò è ðÿä ýòè÷åñêèõ âîïðîñîâ. 3. Toyooka Y., Tsunekawa N., Akasu R., Noce T. Embryonic stem cells can form germ cells in vitro. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2003; 100(20): 11457-62. 4. Lacham-Kaplan O., Chy H., Trounson A. Testicular cell conditioned medium supports differentiation of embryonic stem (ES) cells into ovarian structures containing oocytes. Stem Cells 2006; 24(2): 266-73. Ïîäãîòîâèëà Â.Ñ. Ìåëèõîâà Ïî ìàòåðèàëàì Dev. Cell 2006;11(1):125-32 Nanog - ôàêòîð ðåïðîãðàììèðîâàíèÿ ÿäðà âçðîñëîé ñîìàòè÷åñêîé êëåòêè Èçó÷åíèå è ðàçâèòèå òåõíîëîãèè ïåðåíîñà ÿäðà âçðîñëîé ñîìàòè÷åñêîé êëåòêè ìëåêîïèòàþùèõ â ýíóêëåèðîâàííûé îâîöèò ïîçâîëèëî çàêëþ÷èòü, ÷òî ãåíåòè÷åñêèå è ýïèãåíåòè÷åñêèå èçìåíåíèÿ, ïðèîáðåòàåìûå êëåòêîé â ïðîöåññå äèôôåðåíöèðîâêè, ìîãóò áûòü ïîëíîñòüþ «ðåïðîãðàììèðîâàíû». Ïðè ýòîì ïðîèñõîäèò àêòèâàöèÿ «ýìáðèîíàëüíûõ» ãåíîâ è èíãèáèðîâàíèå ãåíîâ, îòâå÷àþùèõ çà äèôôåðåíöèðîâêó. Îêàçàëîñü, ÷òî ðåïðîãðàììèðîâàíèå âçðîñëîãî ÿäðà ìîæåò áûòü òàêæå äîñòèãíóòî è ñëèÿíèåì ñ ýìáðèîíàëüíîé ñòâîëîâîé êëåòêîé (ÝÑÊ) [2, 3]. Òàêèì îáðàçîì, âçðîñëàÿ ñîìàòè÷åñêàÿ êëåòêà ìîæåò âåðíóòüñÿ â ýìáðèîíàëüíîå ïëþðèïîòåíòíîå ñîñòîÿíèå è äàòü íà÷àëî íîâîìó ýìáðèîíó. Îñòà¸òñÿ çàãàäêîé, êàêèå èìåííî ôàêòîðû, ñîäåðæàùèåñÿ â îâîöèòå è â ÝÑÊ, ìîãóò îáóñëîâëèâàòü ôåíîìåí ãåíåòè÷åñêîãî è ýïèãåíåòè÷åñêîãî ðåïðîãðàììèðîâàíèÿ «âçðîñëîãî» ÿäðà? Ãðóïïà Austin Smith ïîêàçàëà, ÷òî îäíèì èç òàêèõ ôàêòîðîâ ÿâëÿåòñÿ ãåí Nanog. Ðåçóëüòàòû ðàáîòû îïóáëèêîâàíû â íåäàâíåì íîìåðå æóðíàëà Nature. Ãåí Nanog áûë èçîëèðîâàí è îïèñàí Ian Chambers èç Ýäèíáóðãñêîãî óíèâåðñèòåòà [4]. Oí ïîëó÷èë òàêîå íàçâàíèå ïî èìåíè ñòðàíû âå÷íîé þíîñòè Òèð Íàí Îã èç êåëüòñêîé ìèôîëîãèè. Ïðè âçàèìîäåéñòâèè ñ äâóìÿ äðóãèìè âàæíåéøèìè ôàêòîðàìè - Oct3/4, è SOX-2, Nanog ïîääåðæèâàåò «ñòâîëîâîñòü» ÷åðåç àêòèâàöèþ ãåíîâ, ó÷àñòâóþùèõ â ïðîÊëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ ¹ 4 (6), 2006 öåññå äåëåíèÿ ÝÑÊ, è èíàêòèâàöèþ ãåíîâ, çàïóñêàþùèõ ïðîöåññû ðàçâèòèÿ è äèôôåðåíöèðîâêè [5]. Äëÿ ïðîâåðêè ãèïîòåçû çíà÷åíèÿ Nanog äëÿ ðåïðîãðàììèðîâàíèÿ ÿäðà è ïðèîáðåòåíèÿ êëåòêîé ñâîéñòâ ïëþðèïîòåíòíîñòè èññëåäîâàòåëè ñîçäàâàëè ãèáðèäû íåéðàëüíûx ñòâîëîâûõ êëåòîê (ÍÑÊ) ñ ÝÑÊ, îâåðýêñïðåññèðóþùèõ ãåí Nanog (ÝÑÊ-N), ñëèâàÿ èõ in vitro. Ïðè÷¸ì èçáûòî÷íàÿ ýêñïðåññèÿ òðàíñãåíà ñ Nanog â ÝÑÊ íå âëèÿëà íà ÷àñòîòó ñëèÿíèÿ. Òàêîé âàðèàíò ñëèÿíèÿ ïðèâîäèë ê ôîðìèðîâàíèþ ãèáðèäíûõ êîëîíèé, èìåþùèõ õàðàêòåðèñòèêè ÝÑÊ. Îêàçàëîñü, ÷òî ÷àñòîòà ôîðìèðîâàíèÿ êîëîíèé áûëà â 200 ðàç âûøå, ÷åì â îáû÷íûõ ÍÑÊ-ÝÑÊ - ãèáðèäàõ è ñðàâíèìà ñ òàêîâîé ïðè ñëèÿíèè ÝÑÊÝÑÊ. Êëåòêè òàêèõ êîëîíèé òåðÿëè ýêñïðåññèþ ãåíîâ ÍÑÊ è íå ðîñëè â «íåéðîíàëüíîé» ñåëåêòèâíîé ñðåäå. Êîëîíèè äåìîíñòðèðîâàëè ïðèçíàêè ðåïðîãðàììèðîâàíèÿ ÍÑÊ-ÿäðà è ïëþðèïîòåíòíîñòè - ýêñïðåññèþ òèïè÷íûõ äëÿ ÝÑÊ ãåíîâ, ïîòåðþ ÿäåðíîãî ìàðê¸ðà ÍÑÊ, ñïîíòàííóþ äèôôåðåíöèðîâêó ýìáðèîèäíûõ òåëåö â ñîêðàùàþùèåñÿ ìèîöèòû è ò.ä. Ñëèÿíèå ÍÑÊ (ÍÑÊ-N), èçáûòî÷íî ïðîäóöèðóþùèõ Nanog, ñ îáû÷íûìè ÝÑÊ ïðèâîäèëî ê âîçíèêíîâåíèþ ýìáðèîíàëüíûõ êîëîíèé â 8 ðàç ÷àùå, ÷åì â êîíòðîëüíûõ ñëèÿíèÿõ ÍÑÊ-ÝÑÊ. Ãèïåðýêñïðåññèÿ Nanog â òðàíñãåííûõ ÝÑÊ ïðèâîäèëà òàêæå ê çíà÷èòåëüíîìó óâåëè÷åíèþ âûõîäà êîëîíèé ïðè èõ ñëèÿíèè ñ ýìáðèîíàëüíûìè ôèáðîáëàñòàìè è òèìîöèòàìè. Òàêèì