L Н и -

отзыв
официального оппонента доктора медицинских наук профессора
Маянской Наили Назибовны на диссертацию Коротковой Натальи
Васильевны <<Активность катепсинов L и Н при заболеваниях вен
НИЖНих кОнечностеЙ>>о представленную на соискание учёноЙ степени
кандидата медицинских наук по специальности 03.01.04 - <<биохимия>>
Актуальность исследования
В последние десятилетия отмечается явная тенденция к росту
числа заболеваний вен нижних конечностей, которые, в силу развития
тяжёлых осложнениЙ, не только приводят к инвыIидизации пациентов, но
моryт стать и причиной летального исхода.
Щля понимания патогенеза заболеваний вен нижних конечностей
все более пристаJIьное внимание стЕLпо привлекать исследование участия
лейкоцитов и их лизосомальных ферментов, особенно лизосомаJIьных
цистеиновых
протеиназ
папаиноподобных
протеолитических
ферментов, способных покидать клетку и оказывать свое деструктивное
влияние на окружающие ткани. Немаловажная роль отводится, так
называемым ((активированным>> лейкоцитам и макрофагам, которые могут
быть основным фактором повреждения венозной стенки и клапанов,
также паравазаJIьных тканеи при первичных
а
формах хронических
заболеваний вен нижних конечностей.
В настоящее время основная задача исследователей в этой области
заключается в выявлении эндогенных субстратов катепсинов с целью
получения представлений о механизмах деградации субстратов. Поэтому
очень важным является дальнейшее изучение активности данных
ферментов при сердечно-сосудистых заболеваниях и, в частности, при
остром венозном тромбозе и варикозном расширении вен нижних
конечностей. Вся важность данных нозологических форм обусловлена их
распространенностью, социальной значимостью и неуклонным ростом
заболеваемости. Однако особенностям клеточно-молекулярных сдвигов,
изменяющимся в зависимости от тяжести клинических проявлений, от
степени выраженности воспалительного
процесса у пациентов
с
заболеваниями вен нижних коЕечностей до настоящего времени отведено
не достаточное внимание.
Сказанное и
определяет
акту€Lлъность
и
своевременность
представленной на защиту диссертационной работы. В связи с этим
сформулирована цель
которая заключ€LIIась
диссертационной работы Коротковой Н.В.,
в
исследовании активности
цистеиновых протеиназ-катепсинов
L и Н,
лизосом€tпьных
концентрации их эндогенного
ингибитора цистатина С и других факторов, регулирующих активность
данных ферментов, и очерчены 5 задач, вполне адекватных поставленной
цели работы.
наччная новизна и практическая значимость
Научная новизна исследования состоит в том, что впервые было
показано, что варикозное расширение вен и острый венозный тромбоз
сопровождаются изменением активности лизосомальных цистеиновых
протеиназ
-
катепсинов
L иНв
плазме,
полиморфноядерных и
моноядерных лейкоцитах крови. Вгtервые было показано, что острый
венозныЙ тромбоз сопровождается повышенным карбонилированием, а
варикозное расширение вен
- снижением карбонилирования
белков.
Автором работы выявлена существенная активация катепсинов
L
и
Н в различных фракциях лейкоцитов крови у пациентов с варикозным
расширением вен нижних конечностей, в то время как у пациентов с
острым венозным тромбозом активность изучаемых ферментов остав€uIась
на прежнем уровне в плазме крови, хотя активность указанных катепсинов
при этой патологии была повышена в
ПМl[Л и ММlIЛ.
Проведенный в работе корреляционный ан€шиз показаJI н€Lпичие
высокой степени связи между активностью катепсина
концентрацией С
-
Нв
МrIЛ
и
реактивного белка, активностью катепсина Н в МlIЛ и
ЛIШТм. Обнаружена
также положительная корреляционная связь средней
степени между активностью катепсина
L в ПМЯЛ и
концентрацией
си€lJIовых
кислот в сыворотке крови у пациентов с острым венозным
тромбозом.
При
исследовании процессов лизосомаJIьного цистеинового
Протеолиза в сосудистой стенке в условиях моделирования острого
венозного тромбоза оказагIось, что данная патология сопровождается
повышением активности катепсинов
LиН
на фоне динамических
изменений степени окислителъной модификации белков сосудистой
стенки. Этот факт может оказаться одним из важных звеньев в изучении
патогенеза острого венозного тромбоза, что позволит в будущем его
использование в качестве диагностического и прогностического маркёра
степени тяжести заболевания.
Считаю также интересным с научной и практическои точки зрения
дополнение в работе клинического и экспериментального подходов к
решению поставленных в работе цели и задач иссJIедования.
Оценка содержания диссертации. её завершённости,
подтверждение пyбликаций автора
Структура представленной диссертационной работы традиционна и
включает в себя введение, обзор литературы, описание матери€Lлов и
методов исследования- раздела полученных результатов исследования и
их обсуждение, заключение, список исшользованной литературы. Работа
написана на 150 страницах машинописного текста. Список литературы
содержит 299 источников, из которых 102 российских и |97 зарубежных,
включает литературные источники последних лет.
Во введении диссертант обосновывает выбор темы и
её
aKTyыIbHocTb, формулирует цель работы, для реализации которой ставит
ряд конкретных задач, а также определяет научную новизну и
практическую значимость диссертационной работы.
В обзоре литературы автор достаточно подробно освещает данные
литературы, касающиеся недостаточности информации о лизосомаJIьном
протеолизе лейкоцитов при заболеваниях вен нижних конечностей. Обзор
литературы изложен логично, демонстрирует эрудицию автора
в
изучаемых вопросах.
Материал изложен в соответствии с поставленными диссертантом
задачами исследования.
В
главе <Материалы
и методы
представлена характеристика rrациентов, включённых
также описана модель эксперимент€Lпъного
соответствии
с которой выполняласъ
исследования>>
в исследование,
а
венозного тромбоза, в
эксперимент€uIьная
часть
диссертационного исследов ания.
Для решения поставленных задач диссертантом использованы
современные биохимические методы исследов ания. Применяемые методы
в
исследования)
частности,
спектрофлюорометрический
иммуноферментный, являются современными и информативными.
Третья глава посвящена результатам собственных исследований,
которые, во-первых, проводились на биологическом
материале,
полученном у пациентов с заболеваниями вен нижних конечностей острым венозным тромбозом и варикозным расширением вен нижних
конечностей, а во-вторых, был выделен экспериментальный блок, в
котором моделировагIся острый венозный тромбоз у крыс Вистар.
Активность изучаемых ферментов определялась не только в плазме кровИ,
но и в отдельных лейкоцитарных фракциях, для чего
достаточно трудоёмкая методика по р€lзделению
использов€uIась
лейкоцитов на фракции
на градиенте плотности, что является несомненным достоинством данной
работы. В
экспериментальном блоке материаJI для исследованИЯ
активности ферментов был дополнен гомогенатами сосудистых стенок
для оценки вклада участия процессов окислительной модификации белков
сосудистой стенки в патогенез заболеваний вен нижних конечностей.
.Щиссертационная работа выполнена на современном научном уроВНе.
Полученный материал подвергнут традиционной статистической
обработке. Клинический и экспериментаJIьный материал представлены
достаточном
подтверждаются
объеме.
большим
заключения
фактическим
и
выводы
В
обоснованны,
материаJIом, адекватными
методами исследования, примененными
в
корреляционным анализом шолученных
результатов.
диссертационного исследования широко
обсуждены
тщательным
работе,
Материалы
на научных
собраниях различного уровня.
Соответствие
работы
требованиям. предъявляемым
к
диссертациям.
В
целом
представленнаjI
работа
производит благоприятное
впечатление, логично построена, хорошо и чётко изложена, содержит
достаточный объём фактического материаJIа с объективным анаJIИЗоМ
результатов собственных исследований. Выводы
отражают
основные
работы, вытекают из результатов проведённой работы,
подтверждены статистической обработкой результатов. По результатам
положения
исследований опубликовано
\7 печатных работ, получен 1 патент
изобретение. Содержание автореферата и
на
опубликованных работ
полностьЮ отражают основные положения диссертационной работы.
Содержание автореферата соответствует требованиям, преДЪяВЛЯеМЫМ К
его форме и объёму.
Однако,
как и в любой большой работе, при анаIIизе данной
диссертации у меня, как у оппонента, возникли вопросы и замечания.
1.
Чем
выбор для исследования именно этих
объясняется
лизосомаJIьных ферментов, хотя хорошо известны регуляторные своиства
данных катепсинов, способность к ограниченному протеолизу,
изменяющему активность других гидролаз, Но не их участие в
деструктивных процессах?
2. к сожаJIению, в работе не приведен список
использованных
сокращений, хотя не все из них являются обrцепринятыми.
заключение
представленная к защите диссертационная работа Коротковой Н.в.
<<Активность катепсиноВ
L и Н при
заболеваниях
вен
конечностей>> является законченной научно-кваJIификационной
выполненной под научным руководством
нижних
работой,
кандидата медицинских наук,
доцента Фоминой Марии Алексеевны. Результаты исследований,
проведенных автором, содержат решение акту€Lльной
определение роли изменений активности катепсинов
науrной задачи:
L и Н в плЕlзме и в
различных лейкоцитарных фракциях крови при патологиrIх вен нижних
конечностеи, что дополняет понимание патогенеза с точки зрения
лизосом€Llrьного
протеолиза лейкоцитов и участия сосудистой стенки в
данном процессе.
По своей
практической
акту€tJIьности,
методическому уровню, научной новизне и
значимости
представленнаjI
диссертационная
работа
полностью соответствует критериям, установленным п. 9 Постановления
РФ (О порядке присуждения учёных степеней> N 842 от
24.09.20lЗ г., предъявляемым к диссертационным работам на соискание
Правителъства
учёной степени кандидата медицинских наук, а её автор достойна
присуждения искомой степени кандидата медицинских наук по
специ€шьности
0З.0
1
.04
-
<<биохимия>>.
Официальный оппонент:
Профессор кафедры биохимии ГБОУ ВПО
<Казанский ГМУ) МЗ РФ,
Н.Н. Маянская
д.м.н, профессор
(К
ГМУ) Минздрава России
Алрес: ГБОУ ВПО
420012 Казань,
д. 49 Тел.: (84З)2З6-06-52
Подписъ д.м.н.,
Ученый се
д.м.н.
e-mail:
Н.Н. заверяю.
нский ГМУ) МЗ РФ,
<24>_октября_2015 г.